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氏名（生年月日）
本 籍
学位の種類
学位授与の番号
学位授与の日付
学位授与の要件
学位論文題目
論文審査委員
（54）
イケ ヤ キ ヨ コ
池谷紀代子（昭和3
博士（医学）
乙第1301号
平成4年9月18日
学位規則第4条第2項該当（博士の学位論文提出者）
ヒトCYPIA2：塩基配列，遺伝子構造，マウスおよびラット遺伝子との比較と
肝臓でのmRNA発現の個体差について
（主査）教授 福山 幸夫
（副査）教授 相川 英三，澤口 彰子
論 文 内 容 の 要 旨
目的
芳香族炭化水素代謝に関与するチトクロームP450
遺伝子ファミリーは現在までにCYPIA1とCYPIA2
が知られている．ヒトCYPIA2遺伝子のDNA塩基配
列を決定して他動物と比較し，また肝臓における
InRNAレベルを調べることにより，この遺伝子の調
節機構や個体の易発癌性との関連を明らかにすること
を目的として実験を行った．
材料及び方法
①正常ヒト肝よりDNAを調製し，CYPIA2遺伝子
の塩基配列をdideoxy chain terminationにより決定
し，すでに報告されているマウス，ラットのCYPIA2
遺伝子の塩基配列と，コンピュータープ・グラムによ
り比較した．
②CYPIA2遺伝子の塩基配列に基づいて合成した
24塩基，51塩基のオリゴヌクレオチドのそれぞれをプ
ライマーとして，S1ヌクレアーゼ処理によるSI map－
ping法と，逆転写酵素反応によるprimer extension
法を行って，mRNAの転写開始部位を決定した．
③12例の正常ヒト肝より得られたmRNAの
northern blotを行い， X線フィルム上のバンドの濃淡
により発現量を比較した．
結果
①ヒトCYPIA2遺伝子について， intronを含む
DNA塩基配列を決定し，その遺伝子構造と，遺伝子が
約7．8kbであることを示した．マウス，ラットのDNA
塩基配列と比較したところ，exon 2－6の相同性は高
かったが5’側領域の相同性はCYPIA1遺伝子に比べ
て低かった．
②．ヒトCYPIA2遺伝子のexon 1は55bpよりなっ
ていた．
③12例の正常ヒト肝におけるCYPIA2 mRNAの
northern blotの結果をデンシトメータ山で比較した
ところ，個体差が大きく最高例と最低例で15倍の差が
あった．
考案
一般にDNA塩基配列を動物間で比較した場合，種
を越えて塩基配列が保存されている相同性の高い領域
は，その遺伝子のコードする蛋白の作用や遺伝子発現
の調節に関与している．CYPIA2遺伝子ではexon
2－6の相同性が高く，この領域のコードする蛋白は
CYPIA2酵素の作用に重要と思われた．しかしCYP
lA1遺伝子で遺伝子発現の調節機構が存在する5〆側領
域は，CYPIA2遺伝子では相同性が低く，遺伝子発現
の調節機構はこの領域には存在しないと考えた，また，
肝でのmRNAレベルの個体差は， CYPIA2遺伝子発
現における遺伝的な差異を示す．高mRNAレベルの
個体は，酵素の発現も高く，強い発癌性を持つ中間代
謝物を生成するので，遺伝的に癌を生じ易いと考えた．
結論
ヒトCYPIA2遺伝子は，約7．8kb，7個のexonより
成り，CYPIA1遺伝子と異なる調節機構の存在が考え
られた．肝におけるmRNAの発現は個体差が大きく，
遺伝的に決定された個人の易発癌性を反映している可
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能性があると思われた．
論 文 審 査 の 要 旨
チトクロームP450遺伝子のsuperfamilyは，現在14 familiesよりなるとされ，．ヒトの芳香族炭化水素代謝
に関与するP450－1遺伝子familyは， CYPIA1およびCYp1A2の2分子種が知られ，前者の発現の調節機構に
ついては多くの研究がなされてきたが，後者のそれについては不明の点が多かった．
本研究は，後者，すなわちヒトCYPIA2遺伝子に焦点をあて，その塩基配列を決定し，他動物のDNA塩基
配列との相同性：が低いことから，CYPIA1遺伝子とは異なる調節機構の存在が考えられること，肝mRNA発
現の個体差が大きいことを見出し・発癌性の遺宵鳴背景の解明町有章義なデータを示した・学術的に価値ある
研究である．
主論文公表誌
ヒトCYPIA2：塩基配列，遺伝子構造，マウスおよ
びラット遺伝子との比較と肝臓での1nRNA発現
の個体差について
東京女子医科大学雑誌 第62巻 第1号
35－46頁（平成4年1月25日発行）
副論文公表誌
1）インスリン自己注射による作為的低血糖をくり
かえした小児糖尿病の1例．東女医大誌 57（臨
増）：156－160（1987）池谷紀代子，原 仁，
石渡昌子，石場俊太郎，丸山 博，福山幸夫
2）陰圧人工呼吸器によるネマリ．ンミオパチー児の
在宅呼吸管理．脳と発達 20（5）：
423－428（1988）池谷紀代子，梶山 通，平沢恭
子，大沢真木子，宍倉啓子，鈴木陽子，福山幸
夫
3）Human CYPIA2：Sequence， gene structure，
comparisoh with the mouse and rat or
thologous gene， and differences in liver IA2
即RNA expression（ヒトCYPIA2：塩基配列，
遺伝子構造，マウス，ラット遺伝子との比較，
肝における1A2 mRNA発現の相違）． Mol En－
docrinol 3（8）：1399－1408（1989）Ikeya K，
Jaiswal AK， Owens RA， Jones JE， Nebert
DW， Kimura S
4）DystrophinのcDNAプローブを用いたDu－
chenne型進行性筋ジストロフィー症家系の遺
伝子診断一遺伝相談への応用の可能性の検討
一．膨と発達 21（4）：361－368（1989）斎藤加
代子，田中あけみ，原田隆代，池谷紀代子，福
山幸夫，．荒畑喜一，杉田秀夫，大沢真木子，宍
倉啓子，鈴木陽子
5）Differences in the expression pattern of
dystrophin on the surface mernbrane between
the skeletal and cardiac Inuscles of mdx
carrier mice（mdxキャリアマウスにおける骨
格筋と心筋細胞膜上へのジストロフィン発現パ
ターンの相違）．Histochemistry 93：
447－452（1990）Tanaka H，． Ikey3 K， Ozawa
E
6）Duchenne型筋ジストロフィー症の遺伝相談．
脳と神経 43（5）：429－441（1991）大沢真木子，．
斎藤加代子，池谷紀代子，福山幸夫
7）Duchenne型筋ジストロフィ．一（DMD）一遺伝
子異常と臨床一．小児内科・23（8）：
1191－1198（1991）斎藤加代子，山内あけみ，池
．谷紀代子，福山幸夫
8）ジストロフィンと筋ジストロフィー．小児内科
23（11）：1791－1798（1991）斎藤加代子，池谷
紀代子，山内あけみ，福山幸夫
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