Microsoft PowerPoint - 資料６－２：北海道大学.ppt

(1)

1

虚血-再灌流による脳機能障害に対する

人工酸素運搬体の有効性

（公開）北海道大学大学院医学研究科神経薬理学分野北海道大学医療大学薬学研究科薬理学講座

富樫廣子

「ナノカプセル型人工酸素運搬体製造プロジェクト」（2006 Dec. 4 東京） 2

脳虚血による脳機能障害に対して

人工酸素運搬体TRM-645は

改善作用を有するか？

¾

脳虚血モデルを用いた脳機能障害評価系の確立

¾

一過性脳虚血ラットを用いたTRM-645の効果の検討

¾

急性動脈出血モデルを用いたTRM-645の効果の検討

(2)

3

¾

脳虚血モデルを用いた脳機能障害評価系の確立

¾ 一過性脳虚血ラットを用いたTRM-645の効果の検討

¾ 急性動脈出血モデルを用いたTRM-645の効果の検討

脳虚血による脳機能障害に対して

人工酸素運搬体TRM-645は

改善作用を有するか？

4

一過性脳虚血モデルラットを用いた

虚血-再灌流による脳機能障害の評価

¾

電気生理学的検討

脳波 (EEG)

海馬シナプス伝達

¾

行動科学的検討

情動ストレス応答

¾

脳血行動態学的検討

局所脳血流 (rCBF)

脳組織酸素分圧（PｔO

2

)

¾

組織学的検討

¾

分子生物学的検討

血管新生関連分子

¾

生化学的検討

フリーラジカル産生

(3)

5

一過性不完全脳虚血(虚血-再灌流)

2-vessel occlusion (2VO) rats

両側総頚動脈の閉塞（10分間）

動物モデル（１）

Wistar系雄性ラット（10～12週齢）

6 Perforant path - Dentate gyrus (DG)

synapses pre - tetanus

post - tetanus measurement of

LTP

p.p. (8.1mm posterior, 4.4mm lateral to bregma) D.G (3.5mm posterior, 2.0mm lateral to bregma)

- _{pre - tetanus} post - tetanus • LTP • Behavior • rCBF • EEG • • Immunoblotting Immunohistochemistry

p.p. (8.1mm posterior, 4.4mm lateral to bregma) D.G (3.5mm posterior, 2.0mm lateral to bregma)

Day 0 2VO (10 min)

Day 1 Day 2 Day 4

実験方法

• rCBF • EEG • PtO2 Microdialysis •

(Free radical : ・_OH)

(4)

7 1 2 3 4 5 6 8:20 16:40 25:00 33:20 41:40 50:00 0:00 2VO (10min) 皮質脳血流に対する脳虚血-再灌流の影響測定装置：接触型レーザードップラー血流計（オメガフロー、FLO-C1） 60 1 4 (Day) 0 30 Time (min) 0 20 40 60 80 100 120 140 0 20 40 60 80 100 120 140 rCBF (% basal) 2VO * * * * 60 50 40 30 20 10 0 rCBF (ml/min/100g tissue) 8 1 2 3 4 5 6 8:20 16:40 25:00 33:20 41:40 50:00 0:00 2VO (10min) 皮質脳血流に対する脳虚血-再灌流の影響測定装置：接触型レーザードップラー血流計（オメガフロー、FLO-C1） 0 30 60 1 4

Time (min) (Day)

0 20 40 60 80 100 120 140 0 20 40 60 80 100 120 140 rCBF (% basal) 2VO * * * * 脳虚血によって皮質脳血流は低下するが再灌流後は時間とともに回復する 60 50 40 30 20 10 0 rCBF (ml/min/100g tissue)

(5)

9

before 2VO reperfusion

脳波に対する脳虚血-再灌流の影響

10

(8-13 Hz) (14-30 Hz) 0 10 20 30 % * α

before 2VO 30min Day 1 Day 4 time after reperfusion before 2VO 30min Day 1 Day 4

time after reperfusion

脳波に対する脳虚血-再灌流の影響 β 0 10 20 30 40 50 % * * *

(6)

11

δ 0 10 20 30 40 50 60 % * * θ 0 10 20 30 % (1-3 Hz) (4-7 Hz) (8-13 Hz) (14-30 Hz) 0 10 20 30 % * α

脳波に対する脳虚血-再灌流の影響 β 0 10 20 30 40 50 % * * * 12

δ 0 10 20 30 40 50 60 % * * θ 0 10 20 30 % (1-3 Hz) (4-7 Hz) (8-13 Hz) (14-30 Hz) 0 10 20 30 % * α

脳波に対する脳虚血-再灌流の影響 β 0 10 20 30 40 50 % * * * 脳虚血によって脳波は徐波化するが再灌流後は時間とともに回復する

(7)

13 Sham operation 2VO 5 msec 5 mV post-tetanus pre-tetanus ―実記録例― 海馬長期増強に対する脳虚血-再灌流の影響 14 Sham operation 2VO post-tetanus pre-tetanus ―実記録例― 海馬長期増強に対する脳虚血-再灌流の影響 5 msec 5 mV 脳虚血-再灌流によって海馬LTPは障害される

(8)

15

untreated day 1 day 4 day 7

0 100 200 300 50 150 250 350 -15 0 30 60 tetanus

Evoked potential amplitude

(%basal) 0 5 10 15 20 (x 103₎ AUC (% · m in) intact 1 4 7 Post-2VO days *

time after tetanic stimulation (min)

† A) B) 脳虚血-再灌流後の海馬LTPは遅発性に障害される海馬LTPに対する脳虚血-再灌流の影響 16 1 mm 100 μm (A) (F) (E) (D) (C) (B) sham 2VO (Day 1) 2VO (Day 4) 脳虚血-再灌流後の海馬における形態学的変化はない

(9)

17

<Protocol>

Day 0 Day 1 Day 2 Day 4

2VO (10 min)

Single administration (3-10 mg/kg、i.v.)

LTP recording Edaravone Edaravone 脳虚血-再灌流後の海馬LTP障害にフリーラジカル産生は関与するか？ N N O H₃C _Reperfusion 18 Sham operation 2VO Edaravone （10 mg/kg i.v.） 5 msec 5 mV post-tetanus pre-tetanus Edaravone Edaravoneは脳虚血は脳虚血--再再灌流灌流後の海馬後の海馬LTPLTP障害を改善する障害を改善する ― ―実記録例実記録例――

(10)

19 tetanus Sham 2VO Edaravone 3 mg/kg Edaravone 10 mg/kg

Population spike amplitude

(%) 300 200 100 0 -40 -30 -20 -10 0 10 20 30 40 50 60 Time (min) Edaravone Edaravoneは用量依存性に脳虚血は用量依存性に脳虚血--再再灌流灌流後の後の海馬海馬LTPLTP障害を改善する障害を改善する 20 15 10 5 0

Sham 2VO Day 0 Day 1 Day 4

×１０００ AUC (% ・ min ） 60min Edaravone Edaravoneはは脳虚血脳虚血--再再灌流灌流後の時間依存後の時間依存性に性に海馬海馬LTPLTP障害を障害を改善改善するする **p<0.01 *p<0.05 * * ** Edaravone (10 mg/kg)

(11)

21

Sham 2VO Edaravone

脳虚血-再灌流後の海馬における血管新生関連分子およびNO合成酵素群の発現変化－免疫組織化学的検討 VEGF bFGF eNOS iNOS nNOS 22 130 kDa (A) VEGF (B) bFGF 39 kDa 180 kDa

Sham 2VO Edaravone

160 kDa * * Rela tive pr ot ein lev e ls (%) * *

Sham 2VO Edaravone

Sham 2VO Edaravone Sham 2VO Edaravone

Sham 2VO Edaravone

* * Rela tive pr ot ein lev e ls (%) * * * * * * * 140 kDa 130 kDa

39 kDa 180 kDa180 kDa

Sham 2VO Edaravone

(C) eNOS (D) nNOS (E) iNOS

160 kDa 160 kDa 160 kDa * * * * Rela tive pr ot ein lev e ls (%) * *

Sham 2VO Edaravone

* * * * Rela tive pr ot ein lev e ls (%) * * * * * * * 140 kDa 140 kDa 脳虚血脳虚血--再再灌流灌流後の海馬後の海馬における血管新生関連分子における血管新生関連分子およびおよびNONO合成酵素群の発現変化合成酵素群の発現変化－イムノブロット法による検討－－イムノブロット法による検討－

(12)

23

130 kDa

(A) VEGF (B) bFGF

39 kDa 180 kDa

Sham 2VO Edaravone

160 kDa * * Rela tive pr ot ein lev e ls (%) * *

Sham 2VO Edaravone

* * Rela tive pr ot ein lev e ls (%) * * * * * * * 140 kDa 130 kDa

39 kDa 180 kDa180 kDa

Sham 2VO Edaravone

(C) eNOS (D) nNOS (E) iNOS

160 kDa 160 kDa 160 kDa * * * * Rela tive pr ot ein lev e ls (%) * *

Sham 2VO Edaravone

* * * * Rela tive pr ot ein lev e ls (%) * * * * * * * 140 kDa 140 kDa 脳虚血脳虚血--再再灌流灌流後の海馬後の海馬における血管新生関連分子における血管新生関連分子およびおよびNONO合成酵素群の発現変化合成酵素群の発現変化－イムノブロット法による検討－－イムノブロット法による検討－ Edaravone Edaravoneはは脳虚血脳虚血--再再灌流灌流後後にみられるにみられる海馬の血管新生分子群の発現増加を正常化する海馬の血管新生分子群の発現増加を正常化する 24 80 100 120 140 (6) (7) (6)

sham 2VO 2VO+edaravone

60 80 100 120 140

sham 2VO 2VO+ED

-30 0 60 120 180

2VO 2VO-EV

* *

% of basal 2,3-DHBA levels

sham

maximum response (%)

2VO (10 min)

time after re-perfusion (min)

Edaravone

Edaravoneはは脳虚血脳虚血--再再灌流灌流後後のの

海馬における

(13)

25 80 100 120 140 (6) (7) (6)

sham 2VO 2VO+edaravone

60 80 100 120 140

sham 2VO 2VO+ED

-30 0 60 120 180

2VO 2VO-EV

* *

% of basal 2,3-DHBA levels

sham

maximum response (%)

2VO (10 min)

time after re-perfusion (min)

脳虚血脳虚血--再再灌流灌流後の海馬後の海馬LTPLTP障害には障害にはヒドロキシラジカル産生が関与するヒドロキシラジカル産生が関与する Edaravone Edaravoneはは脳虚血脳虚血--再再灌流灌流後後のの海馬における海馬におけるヒドロキシラジカル産生ヒドロキシラジカル産生を抑制するを抑制する 26

一過性脳虚血モデルラットを用いた

虚血-再灌流による脳機能障害の評価

¾

電気生理学的検討

脳波 (EEG)

海馬シナプス伝達

¾

行動科学的検討

情動ストレス応答

¾

脳血行動態学的検討

局所脳血流 (rCBF)

脳組織酸素分圧（PｔO

2

)

¾

組織学的検討

¾

分子生物学的検討

血管新生関連分子

¾

生化学的検討

フリーラジカル産生

¾ 2VOラットにみられる虚血-再灌流後の海馬LTP障害はいかなる脳機能障害と関連するのか？

(14)

27

オープンフィールド試験解析システム

―新奇環境に対する情動応答の検討―

行動・運動自動解析システム

(LimeLight®_{, Actimetrics, USA)}

90 cm 90 cm 28 40 0 val u e of crossi ngs 軌跡頻度行動・運動自動解析システム

(LimeLight®_{, Actimetrics, USA)}

オープンフィールド試験解析システム

(15)

29 min Ambulation (crossings/5min) 脳虚血-再灌流はオープンフィールド試験における水平運動量に影響を及ぼさない Sham-D4 (n=2) 2VO-D4 (n=6) Sham-D7 (n=2) 2VO-D7 (n=8) 30 Sham 2VO 脳虚血-再灌流はオープンフィールド試験における行動パターンを変化させる

(16)

31 Sham 2VO 脳虚血-再灌流はオープンフィールド試験における行動パターンを変化させる

不安水準の変化？

32 文脈的恐怖条件付け試験（すくみ行動: freezing behavior）の測定 ―条件恐怖に対する情動応答の検討― 再曝露 5 min 24 hr 電撃ショック freezing ラットへの恐怖条件付けの方法電撃ショック(－) 群 : freezing period

motion index _sec

電撃ショック(+) 群

(17)

33 文脈的恐怖条件付け試験 ―条件設定に関する基礎的検討― 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 % Freezing 0.5 0.25 0.3 0.1 0.08 0

shock intensity (mA)

刺激強度に関する検討 0 20 40 60 80 100 0-5 5-10 10-15 15-20 20-25 25-30 min % Freezing FS (0.5 mA) FS (-) 観察時間に関する検討 0-5 5-10 10-15 min % Freezing

time after re-exposure

0 20 40 60 80 100 vehicle diazepam tandospirone 抗不安薬による検証 34 Freezing (%) min 脳虚血-再灌流は文脈的恐怖条件付け試験における不安関連行動を増加させる Sham (n=6) 2VO (n=6) FS (0.3 mA)

不安惹起状態？

(18)

35

高架式十字迷路試験

―無条件恐怖に対する情動応答の検討―

行動・運動自動解析システム

(LimeLight®_{, Actimetrics, USA)}

36 crossing time trace Enclosed arm Open arm high low control (vehicle) diazepam (0.5 mg/kg, i.p.) frequency 高架式十字迷路試験 ―条件設定に関する基礎的検討― 抗不安薬による検証

(19)

37

**

time spent in open arm (%)

total arm entry

(count) 50 20 200 0 10 20 30 40 50 * 0 10 20 30 40 * ## 20 20 (lux) 0.1 0.3 (mg/kg, i.p.) 0 20 1 ## # ** mCPP p<0.05, ** p<0.01 vs 200 lux # p<0.05, ## p<0.01 vs 0 mg/kg (saline) 高架式十字迷路試験 ―条件設定に関する基礎的検討― 照明強度に関する検討不安惹起薬による検証 38 0 10 20 30 40

time spent in open arm (%)

Control Sham 2VO

200 lux

Control Sham 2VO

*

*p<0.05 vs sham operation 20 lux 脳虚血脳虚血-_-再再灌流灌流はは高架式十字迷路高架式十字迷路試験における試験における不安関連行動を増加させる不安関連行動を増加させる

不安惹起状態

(20)

39

脳虚血-再灌流後の脳機能障害評価系

に関する検討の小括（１）

一過性脳虚血モデル2VO ラットは、脳虚血-再灌流後の脳機能障害を評価する上で有用である。海馬LTP形成および情動ストレスに対する行動応答は遅発性に障害されることから、脳虚血-再灌流後の脳機能障害の指標となりうる。 40

cerebral ischemia/reperfusion (2VO) rCBF PtO2 EEG VEGF/bFGF NOS progression of ishemia/reperfusion injury Edaravone ROS RNS ( OH) ( NO) Togashi et al: 人工血液(2004) Otani, H et al: J Pharmacol Sci (2004) Eur J Pharmacol (2005) rCBF EEG short-term memory LTP emotional disturbance cerebral dysfunction

(21)

41

¾ 脳虚血モデルを用いた脳機能障害評価系の確立

¾

一過性脳虚血ラットを用いたTRM-645の効果の検討

¾ 急性動脈出血モデルを用いたTRM-645の効果の検討

脳虚血による脳機能障害に対して

人工酸素運搬体TRM-645は

改善作用を有するか？

42 Day 0 1 2 3 Day 4 Occlusion (10 min) Footshock (FS) (0.3 mA x 5 times) Day 3 Day 4 Re-exposure to FS box 24 hr 30 min Vehicle or NRC (150 mg/2.5 ml/kg, i.v.)

ナノカプセル型人工酸素運搬体Neo Red Cellは脳虚血-再灌流後における脳機能障害を改善するか？

文脈的恐怖条件付け試験

liposome-encapsulated Hb (Neo Red Cell: NRC)

Hb

liposome

200 nm

Hb

liposome

200 nm

LTP recording

(22)

43 -15 0 15 30 45 60 0 100 200 300

Sham 2VO 2VO+NRC

Time after tetanus (min)

(A) (B) 4 ms 1 V Tetanus Vehicle NRC Evoked potentials (%)

Neo Red Cellは脳虚血-再灌流後の海馬LTP障害を改善する

44

Sham Vehicle NRC 2VO Time after 2VO (min)

100 80 60 40 20 0 Freez ing (%) 0-5 5-10 10-15 15-20 20-25 25-30 100 80 60 40 20 0 Freez ing (%) *

Neo Red Cellは脳虚血-再灌流後における不安関連行動を改善する傾向を示す

－15分間の平均による評価－

Sham 2VO 2VO+NRC

(23)

45 Day 0 1 2 3 Day 4 TRM 2.5 or 5.0 ml/kg, iv LTP recording 2VO 高架式十字迷路試験ナノカプセル型人工酸素運搬体TRM-645 は脳虚血-再灌流後における脳機能障害を改善するか？ liposome-encapsulated Hb (Neo Red Cell: NRC)

Hb

liposome

200 nm

Hb liposome 200 nm TRM-645（TRM) (6 % Hb) Single administration 10 min reperfusion Carotid arteries 46 Day 0 1 2 3 Day 4 TRM 2.5 or 5.0 ml/kg, iv LTP recording 2VO 高架式十字迷路試験ナノカプセル型人工酸素運搬体TRM-645 は脳虚血-再灌流後における脳機能障害を改善するか？ liposome-encapsulated Hb (Neo Red Cell: NRC)

Hb

liposome

200 nm

Hb liposome 200 nm TRM-645（TRM) (6 % Hb) Single administration 10 min reperfusion Carotid arteries

(24)

47 0 100 200 300 TRM (5 ml/kg) Sham Saline TRM (2.5 ml/kg) -30 0 30 60 Evoked potentials (%l) A) B) Sham Saline TRM (ml/kg) 0 5 10 15 20 * * AUC (%·min) (x 103₎ 2.5 5

脳虚血-再灌流中に投与したTRM-645は用量依存性に海馬LTP障害を改善する 48 0 10 20 30 40 50 60 Total ar m entry (counts) * Sham Saline 0 10 20 30 40

Time spent in open ar

m ( % ) * * Sham Saline 2.5 5 TRM (ml/kg) 2.5 5 TRM (ml/kg) 脳虚血-再灌流中に投与したTRM-645は情動ストレスに対する行動応答を改善する高架式十字迷路試験

(25)

49 0 50 100 150 TRM Control 0 50 100 150 TRM Control pre 0 30 60 pre 0 30 60 Occlusion Occlusion rCBF (% basal) PtO 2 (% b a sa l) A) B)

Time after reperfusion (min) Time after reperfusion (min)

* * 脳虚血脳虚血--再再灌流灌流後後の脳血流および脳組織酸素分圧の脳血流および脳組織酸素分圧に対するに対するTRMTRM--645 645 の効果の効果脳血流（皮質）組織酸素分圧（海馬） 50 0 50 100 150 TRM Control 0 50 100 150 TRM Control pre 0 30 60 pre 0 30 60 Occlusion Occlusion rCBF (% basal) PtO 2 (% basal) A) B)

Time after reperfusion (min) Time after reperfusion (min)

* * 脳虚血脳虚血--再再灌流灌流後後の脳血流および脳組織酸素分圧の脳血流および脳組織酸素分圧に対するに対するTRMTRM--645 645 の効果の効果脳血流（皮質）組織酸素分圧（海馬） TRM TRM--645645はは脳虚血脳虚血中中の脳組織酸素分圧変化を軽減するの脳組織酸素分圧変化を軽減する

(26)

51 Day 0 1 2 3 Day 4 TRM 5.0 ml/kg, iv LTP recording 2VO ナノカプセル型人工酸素運搬体TRM-645 は脳虚血-再灌流後における脳機能障害を改善するか？ liposome-encapsulated Hb (Neo Red Cell: NRC)

Hb

liposome

200 nm

Hb liposome 200 nm TRM-645（TRM) (6 % Hb) 10 min reperfusion Carotid arteries 52 Sham 2VO + TRM (5 ml/kg) 2VO 0 100 200 300 -15 0 30 60 0 4 8 12 16 20 Sham 2VO + TRM * 脳虚血-再灌流直後に投与したTRM-645は海馬LTP障害を改善する Evoked potentials (%l)

*

(27)

53

一過性脳虚血ラットを用いた実験の小括（2）

人工酸素運搬体TRM-645は脳虚血中に投与することによって、虚血-再灌流後の脳機能障害を改善する。海馬LTP 障害の改善情動ストレスに対する行動応答の改善脳組織酸素分圧低下の抑制再灌流直後に投与することによって、虚血-再灌流後の脳機能障害を改善する。海馬LTP 障害の改善 54

¾ 脳虚血モデルを用いた脳機能障害評価系の確立

¾ 一過性脳虚血ラットを用いたTRM-645の効果の検討

¾

急性動脈出血モデルを用いたTRM-645の効果の検討

脳虚血による脳機能障害に対して

人工酸素運搬体TRM-645は

改善作用を有するか？

(28)

55

急性出血による脳虚血

Acute hemorrhagic rats

大腿動脈からの脱血

動物モデル（

2

2 ）

）

Wistar系雄性ラット（10～12週齢） 56 Infusion ナノカプセル型人工酸素運搬体TRM-645 は急性動脈出血に伴う脳機能障害を改善するか？ Day 0 1 2 3 Day 4 Hemorrhage < 5 min Survival rate LTP recording Femoral artery TRM-645 or saline 5 min

Total Survival Death Survival rate(%)

Saline x 1 5 1 4 20.0 Saline x 2 12 5 7 41.7 Saline x 3 7 5 2 71.4 Control 5 5 0 100 5-25 ml/kg Saline x 0 6 0 6 0 ** **p<0.01 vs (saline x 0) Hemorrhage (25 ml/kg）

(29)

57

Total Survival Death Survival rate(%)

Saline x 1 5 1 4 20.0 Saline x 2 12 5 7 41.7 Saline x 3 7 5 2 71.4 TRM x 1 11 6 5 54.5 TRM x 1.5 9 6 3 66.7 急性動脈出血急性動脈出血後後の生存率に対するの生存率に対するTRMTRM--645 645 の効果の効果 Saline x 0 6 0 6 0 ** *p<0.05, **p<0.01 vs (saline x 0) ** ** Hemorrhage (25ml/kg） TRM TRM--645645ははSalineSalineより少ない量でより少ない量で急性出血急性出血後の生存率を上昇させる後の生存率を上昇させる 58 0 4 8 12 16 20 0 100 200 300 TRM (37.5 ml/kg) Sham Saline (75 ml/kg) Saline (50 ml/kg) -15 0 30 60 Sham Saline TRM 50 75 37.5 (ml/kg) (x 103₎ * p < 0.05 vs Sham * Evoked potenti a ls (%) AUC (% · m in)

Hemorrhage 急性動脈出血後の急性動脈出血後の海馬海馬LTPLTP障害に対する障害に対する TRM TRM--645 645 の効果の効果 TRM TRM--645645ははSalineSalineより少ない量でより少ない量で急性出血急性出血後の海馬後の海馬LTPLTP障害を改善する障害を改善する

(30)

59

TRM (37.5 ml/kg) Saline (75 ml/kg)

Control (hemorrhage only）

50 60 70 80 90 100 110

Time after hemorrhage (min)

rCBF (ml/min) PtO

2

(mmHg)

Time after hemorrhage (min)

0 30 60 Control Saline TRM AUC 60 m in of rCBF (% · m in) AUC 60 m in of PtO 2 (% · m in) 0 2000 4000 6000 0 2000 4000 6000 8000 * * * p < 0.05 vs Control 0 50 100 0 30 60 150 * 急性動脈出血による急性動脈出血による脳血流および脳組織酸素分圧に対する脳血流および脳組織酸素分圧に対する TRM TRM--645 645 の効果の効果 Control Saline TRM TRM TRM--645645は急性出血は急性出血後の後の脳組織酸素分圧を改善する 60

急性動脈出血ラットを用いた実験の小括

（3）

人工酸素運搬体TRM-645は急性動脈出血ラットにおける脳組織酸素分圧の低下を改善し、生存率を上昇させる。生存ラットにおける海馬LTP 障害を改善する。

(31)

61

progression of

ishemia/reperfusion injury

Cerebral dysfunction

cerebral ischemia/reperfusion (2VO)

LTP Emotional disturbance Day 0 Day 1 Day 2 Day 3 Day 4 TRM-645 _Edaravone Edaravone SNO-PEG-Hb SNO-PEG-Hb PEG-Hb × rCBF PtO2 62 progression of ishemia/reperfusion injury Cerebral dysfunction Acute hemorrhage LTP Survival rate Day 0 Day 1 Day 2 Day 3 Day 4 TRM-645 rCBF PtO2

(32)

63

人工血液運搬体TRM-645に関する今後の展望

脳虚血部位の酸素供給を改善することによって

¾

救命率の向上

¾

脳機能障害の軽減

を目的とした臨床応用が期待される。

虚血性脳疾患の急性期における新たな治療戦略

となる可能がある。

64 北海道大学大学院医学研究科神経薬理学侵襲制御医学循環器内科学吉岡充弘掛端仁北畠顕山口拓佐久間一郎尾谷浩 Subrina Jesmin 共同研究者

Microsoft PowerPoint - 資料６－２：北海道大学.ppt

虚血-再灌流による脳機能障害に対する

人工酸素運搬体の有効性

富樫 廣子

脳虚血による脳機能障害に対して

人工酸素運搬体TRM-645は

改善作用を有するか？

¾

脳虚血モデルを用いた脳機能障害評価系の確立

¾

一過性脳虚血ラットを用いたTRM-645の効果の検討

¾

急性動脈出血モデルを用いたTRM-645の効果の検討

¾

脳虚血モデルを用いた脳機能障害評価系の確立

¾ 一過性脳虚血ラットを用いたTRM-645の効果の検討

¾ 急性動脈出血モデルを用いたTRM-645の効果の検討

脳虚血による脳機能障害に対して

人工酸素運搬体TRM-645は

改善作用を有するか？

一過性脳虚血モデルラットを用いた

虚血-再灌流による脳機能障害の評価

電気生理学的検討

脳波 (EEG)

海馬シナプス伝達

行動科学的検討

情動ストレス応答

脳血行動態学的検討

局所脳血流 (rCBF)

脳組織酸素分圧 （PｔO

)

組織学的検討

分子生物学的検討

血管新生関連分子

生化学的検討

フリーラジカル産生

一過性不完全脳虚血(虚血-再灌流)

2-vessel occlusion (2VO) rats

両側総頚動脈の閉塞（10分間）

動物モデル（１）

動物モデル（１）

実験方法

一過性脳虚血モデルラットを用いた

虚血-再灌流による脳機能障害の評価

電気生理学的検討

脳波 (EEG)

海馬シナプス伝達

行動科学的検討

情動ストレス応答

脳血行動態学的検討

局所脳血流 (rCBF)

脳組織酸素分圧 （PｔO

)

組織学的検討

分子生物学的検討

血管新生関連分子

生化学的検討

フリーラジカル産生

不安水準の変化？

不安惹起状態？

*

不安惹起状態

脳虚血-再灌流後の脳機能障害評価系

に関する検討の小括 （１）

¾ 脳虚血モデルを用いた脳機能障害評価系の確立

¾

一過性脳虚血ラットを用いたTRM-645の効果の検討

¾ 急性動脈出血モデルを用いたTRM-645の効果の検討

脳虚血による脳機能障害に対して

人工酸素運搬体TRM-645は

改善作用を有するか？

一過性脳虚血ラットを用いた実験の小括 （2）

¾ 脳虚血モデルを用いた脳機能障害評価系の確立

¾ 一過性脳虚血ラットを用いたTRM-645の効果の検討

¾

急性動脈出血モデルを用いたTRM-645の効果の検討

脳虚血による脳機能障害に対して

人工酸素運搬体TRM-645は

改善作用を有するか？

急性出血による脳虚血

富樫廣子

脳組織酸素分圧（PｔO

脳組織酸素分圧（PｔO

に関する検討の小括（１）

一過性脳虚血ラットを用いた実験の小括（2）