結 核 菌 物 質 代 謝 に 関 す る 研 究
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(2) 1230. 岡. 好. 万. 応 用 え の 可 能 性 を 暗 示 して い る.又Wilson,. の作 製 は磨 砕 フ ラス コに秤 量 菌 を 集 め氷 冷 し. Kalish,. な が ら 手 振 り法 に よ り作 製 し た.. Fish(1952)13)はH37Ra株. とBCG. は 酸 化 還 元色 素 に よる脱 水 素 反応 で毒 力株 と 同 一 の 態 度 を とつ た.こ. の こ と は,こ. れ ら弱. 基 質:各. 種 糖,糖. 毒株 の起 元 が 毒力 株 に 由 来 してい るた めで は. 水 に て0.1mol濃. な い か と推 察 して い る.. は7.0にNaOH液. 以 上 の 如 く脱 水 素 反 応 を 通 覧 す る に,各. 種. 基 質 との関 係 を 検討 した 基礎 的実 験 は 極 め て 少 な く,更. に結 核 菌 の みな らず抗 酸 性 菌 の 物. 0.0002mol濃. 試 験 はThunberg管. を,又. 度 のMbを. 主 室 に0.02mol燐 質. 0.5ml,. Mb.. 副 室 に 生 菌 浮 游 液. 0.5mlを. 体 と し た も の で あ り毒 力 株 を 用 い て の 系 統 的. 冷 し な が ら真 空 ポ ン プ に て5分. 実 験 は 稀 で あ る.こ. (水 銀 柱2〜3mm.. に危 険 性 が. 著 者 は 人 型H37Rv. BCGの. H37Ra,牛. 各 株 を 使 用 し,各. Thunberg氏(1934)14)法. 型263,. 種 基 質 に つ い て. に よ り脱 水 素 反 応 を 実. 施 し 成 績 を 比 較 検 討 した.. 型263の. BCG両. か し牛 型263に. 対 しBCG. し た.. 0.5mlを. 添 加 し た.. 3 A)糖. 類,糖. 型H37Rv.. H37Ra及. び牛. る こ と はProskauer,. Beck,. に 糖,糖. glycerolの. 試 前 は 小 川15)氏 中 性 培 地 に 継. るが,其. 代 培 養 せ る も の で あ る.. 発 育 せ し め た 比 較 的 幼 若 菌(2週 菌)を. 体 培 地16)に 菌)と. 供 試 し た.. 生 菌 浮 游 液 の 作 製:発. 育 菌 を 遠 心 管 に 集 め,. 衝 液. pH7.0(0.85%Naclを p, mに て20分. 著 者 は5炭. 糖 と し てarabinose,. 6炭 糖 と し てglucose,. galactose. fructoseを, trehalose.. maltose.. 添. と し て はsorbitol.. 遠 心 沈 澱 し,そ. の. dulsitolを. 繰 返 し充 分. 後 の 沈 澱部 を 濾 紙上 に集 めて脱 水. い で化 学 天 秤 に て秤 量 し前 記緩 衝 液 に 20mgの. と して 利用 され るが 其 の他 の. も の に つ い て は 確 定 的 な も の は な い.. 含 む.)を. 上 清 を 捨 て 更 に 同 様 の 装 作 を4回 洗 滌 し,最. 酸緩. 生 菌 浮 游 液 と した .浮. 游液. アル コ ール は. 代 用 に は な り 得 な い と述 べ て い. rhamnose,. 硝 子 棒 で 充 分 撹 拌 し な が ら0.02mol.燐. 加 し4000r,. 老令. Long(1919)17)等. の 後 多 く の 研 究 者 の 実 験 の 結 果,. glucoesはC源. 記 各 株 をsauton液. 炭 素 源(以. して重 要 な 役割 を演 じてい. が 詳 細 に 報 告 し.更. れ た も の で,供. て1ml:. 成 績. ア ル コ ール 類 を 基質 とした 場. と 略 す)と. 各 株 で 何 れ も伝 研 よ り分 与 さ. し,次. 実 験. 合.. 下C源 実 験材 料 並び に実 験 方 法. 培 養 法:上. の所. 要 時間 の逆 数 を もつ て実 験 成 績 に 示 す ことに. BCGの. 菌(6週. の 時 よ りMbが. 結 核 菌 の 発 育 に 於 てglycerolが. 供 試 細 菌:人. の恒 温. 間 保 温 してか ら生 菌浮 游 液を 主 室. 株 を 比 較. い.. 型263.. 間 吸 引排 気. い で37℃. 脱 色 す る ま で に 要 す る 時 間 を 測 定 し,そ. を 与 え た こ と は 必 ず し も適 当 と は 思 つ て い な. 2. 0.25ml 容 れ,氷. 両 株 に 対 す るそ れ ぞれ. の 弱 毒 株 で あ るH37Ra, す る た め で あ る.し. 酸. 対 照 は 基 質 添 加 の 代 り に0.85%Nacl液. 以 上 の各 株 を撰 ん だ理 由 は 毒 力 株 で あ る H37Rv,牛. 漕 に て2分. Hg),次. に 速 か に 完 全 に 流 し込 み,そ. 高 い た め で は な い か と 思 わ れ る.. 液 のpH. 使 用 し た.. 緩 衝 液. 0.5ml,基. 培 養 に 長 期 間 を 要 す る こ と と,更. 蒸溜. に て 補 正 し た.. 酸 化 還 元 色 素:. そ の 殆 ん どは 鳥 型 菌,非. の こ とは 毒 力 株 が 一 般 に. 機 酸,ア. 度 に 溶 解 せ し め,溶. 質 代 謝 に 関 す る 報 告 と範 囲 を 拡 大 し て 見 て も, 病 原 性抗 酸 性 菌 を 主. ア ル コ ー ル,有. ミノ 酸 で 何 れ も 市 販 の 最 純 品 を 撰 び,再. 2糖 類 と し てsucrose.. lactoseを,糖. アル コー ル. inositol. adonitol. mannitol.. 基 質 と し て 使 用 した.. 2週 菌 のH37RvとH37Raと 応 の 比 較 は 表1に. 示 し た.. の脱 水 素 反 H37Rvに. 何 れ の 基 質 を 使 用 し て もMb還 に 低 く,特. xylose. mannese.. 於 ては. 元 速 度 は 一様. に 優 れ た と認 め ら る べ き 基 質 は 見.
(3) 結 核 菌 物 質 代 謝 に 関 す る 研 究 表1. Mb脱. 色 時 間. の 比 較(糖,糖. 1231. ア ル コ ー ル). 当 らない.換 言 す れ ば各 基 質添 加 時 に 於 け る. Raで. 還 元 速度 と対 照 の それ とは 大同 小 違 で あ る.. 果 が 認 め ら れ た(図2).. 又 対 照 の 還元 速 度 をH37Raの. 対照 と比 較. す る と遙 かに 速度 は 低 下 してい る.(図1). 図1. 無 基質(対 照)に 於 け るMb還. 注: H37Rv,牛263の‑6週. Rvと. 異 り, glucose添 加 時 は 対 照 に 比 し て 倍. toseの 順 でglycerol.. 糖 に 幾 分効. 6炭 糖 及 びtrehaloseのMb 還 元 速 度 に及 ぼ す 影 響. 菌は脱 色が見ら中し ない.. 基 質 添 加 時 に 於 け る 成 績 はH37. 近 く速 度 が 高 め ら れ,次. 図2. 最 良 と し6炭. 元速 度. 還 元 速 度 は 脱 色 時 間 の 逆 数 で 示 した. 以 下2〜6ま で 同 様 で あ る.. H37Raの. はglucoseを. い でmannose,. 5炭 糖 . 2糖 類.糖. galac アル. コ ー ル の 場 合 は 対 照 と比 し 大 差 を 見 な か つ た. 以 上 の こ と よ り2週 菌 のH37Rvで 質 添 加 の 効 果 は 認 め 難 い が,同. は 基. 一 条 件 のH37. 次 い で6週 察 に 於 て,基. 菌 のH37Rvは140分. 間 の観. 質 添 加,対. 照 の 何 れ の 場合 に も. 脱 色 は 起 ら な か つ た.こ. の こ とは 脱水 素 酵 素. 能 の 不 活 化 と 認 む べ き で あ ろ う.然 条 件 のH37Raで. は,活. るに 同 一. 性 度 は2週. 菌に比. して全 般 に 低 下 は 来 して い る が充 分 認 め られ glycerol.. xylose.. trehaloseは2週. 菌 の 還 元. 速 度 と の 間 に 余 り差 が 見 られ な い(表1). 牛 型263とBCGの2週. 菌 は と も に,基. 質.
(4) 1232. 岡. 好. 万. 添 加 時 の 還 元 速 度 が 対 照 よ り も一 般 に 高 い.. で はarabinoseの. 又 両 株 の 対 照 の 比 較 は,. い た6炭. H37RvとH37Ra. 263で. は6炭. arabinose.. 牛 型263の6週. 型. 菌 で はH37Rvの. 除. それ と. 同 様 全 く活 性 が 認 め ら れ な い.然. 糖 も利用 効 果 は 認 め ら れ る が trehaloseの. 図3. び3).牛. 効 果 は 低 く, fructoseを. trehaloseに 於 て 高 い. xyloseは. 両 株 と も に 効 果 は 低 い.. の 比 較 に 於 け る と同 様 弱 毒 株 で あ るBCGが 還 元 速 度 は 高 い(表1,図1及. 糖.. 件 のBCGに. 効 果 は 更 に 高 い. BCG. 於 て は 還 元速 度 の 低 下 は 著 しい. け れ ど も, H37Raの6週 6炭 糖 及 びtrehaloseのMb. 菌 の如 く脱 色 は起. り得 る. BCGの6週. 還 元 速 度 に 及ぼ す 影 響 は,. るに 同 一 条. 菌 にxyloseを. 添加場合. 2週 菌 の そ れ と 比 較 し て 脱 色 時 間 に 著 差. を 認 め な か つ た(表1). B)有. 機 酸 類 を 基 質 と した場 合. Loeber等(1931)18)はlactateが. 結核 菌 で よ く. 利 用 され る こ と を 認 め, Edson(1943, はM.. phleiで. 同 様 にlactateがMbの. で 嫌 気 的 に脱 水 素 され てpyruvateと. 表2. Mb脱. 色 時 間 の 比 較(有. に 次 式 を 与 え て い る.. 図4. 1947)19) 存在下 な る為. 機 酸). H37RとH37RaのMb還. 元速 度 の比 較. CH3‑CHOH‑COOH+Mb→CH3‑CO‑ COON+Mb.2H 大 林 等(1947)20)はBCGで lactateが. 脱 水 素 反応 を 検 し. 最 も 還 元 さ れ 易 くsuccinate.. pyruvateも. malate. .. 基 質 と して 優 れ て い る こ と を 述. べ て い る. 著者 が 基 質 として 使 用 し た 有 機 酸 は 直 接 TCA. acetate.. cycleと. 関 係 の あ るpyruvate.. citrate.. と,そ. の 他oxalate.. 計10種. で あ る.. succinate. tartrate.. malate.. lactate . fumarate. n‑butyrateの 注. H37Rv.. 6週. 菌 はsuccinate,. 於 て 脱 色 を 認 め な い.. controlに.
(5) 結 核 菌 物 質 代 謝 に 関 す る 研 究 H37Rvの2週. 菌 にlactateを. 合 は 約12倍.. 添 加 した 場. pyruvateで9倍.. Rvと. 1233. 同 様pyruvate.. lactateの. し か し そ の 程 度 は2週. succinateで. 菌 に 比 して 著 し く低 下. 1.6倍 対 照 の 還 元 速 度 よ り も 高 め られ た.し. し て い る.同. か し其 の他 の 有機 酸 に 於 て は対 照 との間 に 余. と し た 場 合 は 対 照 を 始 め,各. り差 は 認 め ら れ な か つ た.同. 素 活 性 の低 下 は 認 め ら れ る が,興. H37Raで. は 基 質 がlactateの. pyruvateで4倍. で1.6倍. 一 条 件 に於 け る. tartrate. 還 元 速 度 は 高 め ら れ た(表2,図4). 牛263とBCCのMb還. み は2週. 即 ちH37Rv,. 元速 度 の 比較. 酵素液. 基質 添 加 時 の酵 味 あること. 菌 に 比 し活 性 度 は 著. し く高 め ら れ た(図5).. lactate. 図5. 一 条 件 に 於 け るBCGを. にpyruvateの. 場 合7倍.. succinateで2倍.. み に 起 る.. H37Raの2週. pyruvateは. む し ろlactateを. 基 質 と し た 場 合 高 くな る が,. 同 一 条 件 の 牛 型263, はpyruvateよ 向 は6週. 菌 で は. 還 元 速 度 が 同 程 度 か,. BCGに. 於 て はlactate. り も還 元 速 度 は 低 い.こ. の傾. 菌 の 比 較 に 於 て 特 に 著 明 で あ る.又. 毒 力 株(H37Rv,牛. 型263)の6週. lactate, pyruvateを 起 ら な い が,弱. 除 きMbの. 菌では 脱 色は 全 く. 毒 株(H37Ra,. BCG)に. 於. て は 殆 ん どの 各 基 質 に 対 し 活 性 の 低 下 は 起 る が 消 失 は 見 な い.興 注. 牛263.. 6週. 菌 はsuccinate,. controlに. 菌 で はpyruvate,. 味 あ る の は 弱 毒 株 の6週 lactateの 添 加 時 に 於 け る. 於 て 脱 色 を 認 め な い.. 還 元 速 度 は2週 牛 型263の2週. butyrate.. succinate.. 1.8倍,. のBCGに 3.1倍,. 特 にH37Raに. 菌 で はlactateで10.5倍,. pyruvateで11.6倍,. malate.. 於 て はlactate. succinate.. 2.7倍,. tartrateで1.4倍. 2.7倍,. 1.6倍,同. n 一条 件. 2.6倍,. Pyruvate,. citrate.. 1.5倍,. そ れ ぞ れ の対 照 よ り も 還 元. 於 て こ の 傾 向 が 強 い.又2. 週 菌 の 毒 力 株 はsuccinateに. 菌 で はpyruvate.. C)ア. ミノ酸類 を基 質 と した場 合. Wieland(1924)21)の. lactate. る が,そ. い た つ た.赤. の他 の 基質 添 加 の場 合 並 び に対 照 に. 於 て は 活 性 は 認 め ら れ な か つ た.同. acetate. lactateに. はoxalate.. 一 条 件 tartrate特. 対 す る 活 性 の 低 下 は 起 る が,. citrate.. n‑butyrate特. 対 す る 活 性 度 は2週. る と こ ろ が な い.即. にpyruvate.. ちH37Raの6週. 菌 に. し て 低 下 し て い る に か か わ ら ずpyruvate.. pyruvate.. の 還 元 速 度 に 変 化 は な く見 掛 上 で は lactateの. 還 元 速 度 は2週. 菌 よ り高. め ら れ て い る(図4). 牛 型263の6週. 堀23)は 又 酸 化 的 ア ミ ノ 基 脱 は 加. 水 分 解 的 ア ミ ノ 基 脱 よ り も遙 か に 容 易 に 起 る こ とを 述 べ て い る. Krebs(1933)24)は. 細菌に よ. る 酸 化 的 ア ミノ 基 脱 は ア ミ ノ酸 々 化 酵 素 に よ. 水 分 解 さ れ て ケ ト酸 に な る こ とを 確 認 し 次 式 を 与 え て い る. R‑CH.NH2‑COOH. 色 は 前 記H37. ‑H2. →R‑C=HN‑. COOH+H2O→R‑CO‑COOH+NH3 この反 応 を 見 る とア ミノ酸 脱 水 素 酵 素 の一 つ と も 見 る こ とが 出 来 る .即 berg法. 菌 のMb脱. 考 え が 支持 され る に. り一 旦 脱 水 素 さ れ イ ミ ノ酸 と な り 自 動 的 に 加. 菌 と殆 ん ど 変. 於 け る 対 照 の 還 元 速 度 は, 2週 菌 の そ れ に 比 較. lactate等. 体内でア. オ キ シ 酸 は 二 次 的 に 還 元 さ れ て 生 ず る と述 べ たNeubauer(1910)22)の. にsuccinateに. 脱 水 素 酵 素説 が 多 く の. 研 究 者 の 間 に 認 め られ る に 至 り,生. を 添 加 した 場 合 に 僅 か に 酵 素 活 性 が 認 め ら れ. に 於 け るH37Raで. 対 す る 還 元速 度. が 弱 毒 株 よ り もや や 低 い よ うで あ る.. ミ ノ 酸 よ り最 初 に 生 ず る も の は ケ ト酸 で あ り,. 速 度 が 高 め ら れ た(表2,図5). H37Rvの6週. 菌 と何 等 変 る と こ ろ は な い.. に よ るMbをacceptorと. 置 換 す れ ば,. ち これ をThun した 反 応 に.
(6) 1234. 岡. 好. R‑CH.NH2‑COON+H2O+Mb. に. →R‑CO‑COOH+NH3+Mb.H2. よ る と 述 べ 著 者 が. な る 式 が 与 え られ る. 代 居(1951)25)は. 万. 供 試. α‑alnine.. 結 核 菌 の 無酸 素 状 態 に於 け. る ア ミ ノ 酸 脱 水 素 反 応 の 至 適pHは. 相 当 アル. .. L‑methionine.. gineで. 色に要す. 図6. 各 株2週. 菌 でalanineを. せ る 場 合 のMb還. 基質 と. DL‑ DL‑serine. L‑arginine‑HCl. DL‑tryptophan の ア. ミ ノ 酸. .. とaspara. ミ ノ 酸). し, alanine以. 外 で は 基質 添 加 に よ る 効 果 は. 認 め 難 い.同. 一 条 件 のH37Raに. alanineを. 元 速度 の比 較. はglycine.. L‑leucine.. あ る.. 色 時 間 の 比 較(ア. ア ミノ酸 を 基質 とした場 合Mb脱. ミ ノ 酸. L‑histidine‑HCl.. ミ ノ基 脱 は 酸 化 的 並 び に 分 子 内 的 ア ミ ノ 基 脱. る 時間 は 一般 に長 い(表3).. し た ア. L‑lysine.. L‑proline.. 及 びglutamateの12種. Mb脱. る .. DL‑valine.. カ リ側 に あ り,又 結 核 菌 に よ る ア ミノ 酸 の ア. 表3. て い. 於 ては. 含 む 全 基 質に 於 て著 明 な 効 果 は 見. られ な か つ た(図6). H37Rvの6週 phan添. 菌 で はhistidine,. trypto. 加 時 に 長 時 間 の観 察 で 脱 色 が 起 つ た. が 其 の 他 の 基 質 で は 認 め ら れ な い.同 のH37Raは2週. 一条件. 菌 よ りは 活 性 は 低 下 し て. い る が 全 基 質 で 脱 色 が 見 ら れ る.し. か し基 質. 添 加 に よ る 効 果 的 脱 色 は 見 ら れ な か つ た(表 3) 次 に 牛 型263とBGGの2週. 菌,. 6週 菌 の. 比 較 に 於 て も 前 記H37RVとH37Raの. 関. 係 と 同 一 の 傾 向 が 見 ら れ た(表3,図6) H37Rvの2週 場 合 は,そ. 菌 でalanineを. の 還 元 速 度 が 対 照 よ り 約2.1倍. め られ 特 色 を 示 1.6倍,更 histidineで. 基 質 とした. し て い る がglutamateで. にtryptophan. は1.4〜1.2倍. asparagine.. 高. Mb脱. は. alanineに. glycine.. と還 元 速 度 は 低 下. .. 以 上 の 如 くア ミ ノ 酸 を 基 質 と し た 場 合 の 色 に 於 け る 特 色 は 各 株 の2週 対 す る態 度 で あ る. .即. 菌 の. ちalanine. は 毒 力 株 に よ り還 元 速 度 を 高 め る が 弱 毒 株 で は 効 果 は 殆 ん ど見 ら れ な い ..
(7) 結 核 菌 物 質 代 謝 に 関 す る 研 究 代 居(1951)25)はMbの. 還 元速 度 の最 も高 い. の はphenylalanineで はhistidineを. あ る と し,川. 畑(1934)26). 良 として い るが 各 々 実 験 条 件. を 異 に し て い る の で 完 全 な 比 較 は 出 来 な い. 4 pH.. 7.0の. 総括 及び 考 按. あ る 成 績 が 得 ら れ た. pyruvate. lactateは 使 用 した 糖,糖 アル コ ー ル ,有 機 酸,ア ミ ノ酸 中 何 れ の 株 に も 最 良 の 基 質 で あ り,こ. の こ とは 特 にH37Rv,. Ra,牛. 云 え る.. 型263で. H37Rv,. 状 態 で各 種 基 質 の単 独添 加 時 に. 於 け る結 核 生 菌浮 游 液 に よる脱 水 素 酵 素反 応 を 検 討 し,こ. な い.然. 追 究 し た.. H37Raの2週. 毒 株 の2週. に 於 け るMb還. 菌 の 無 基 質(対. る にH37Rvの6週. 菌 で はlactate,. もに 著 明 な 速 度 の 低 下 を 来 す が. 照). H37Raの6週. 力株. が 起 ら な い.次. 元 速 度 を 比 較 す る と,毒. 菌 は 共 にlactate. これ に 次 ぐ が 両 者 間 に 著 差 は 認 め ら れ. pyruvateと. 毒 力 株,弱. 菌 は2週. 菌 と比 し て 全 く低 下. に 牛 型263とBCGの2週. よ りもそれ に 対 応 す る弱 毒 株が 速 度 は常 に高. H37Rv,. い.こ. れ はBloch(1950)10)の. 時 に 還 元 速 度 は 最 も高 くlactateは. る.更. に 毒 力 株 の6週. 色 は 全 く起 ら な い が,弱 に 認 め 得 ら れ る.こ. 説 と全 く一 致 す. 菌は 無 基 質 の場 合 に脱 毒 株 の それ で は充 分. の こ とは 供 試 した 弱 毒 株. の 発 育 は 毒 力 株 よ り弛 か で 酵 素 活 性 が 長 期 に 亙 り存 続 す る た め で は な い か と思 わ れ る. H37Rvの2週. 菌 で は 使 用 し た 糖.糖. コ ー ル 中 還 元 速 度 に 於 て,無. アル. 基 質 の 対 照 との. 間 に 有 意 の 差 が 見 られ る も の は な か つ た.然 る に 同 一 条 件 のH37Raで. はglucoseを. と し6炭 糖(fructoseを. 除 く)に. 度 を 高 め る こ とが 出 来 た.こ 263.. BCGの. 最 良. 於 て 還元 速. の傾 向 は 牛 型. 両 者 の 比 較 に 於 て も 見 られ た.. 更 に 牛 型263,. BCGに. 於 て はtrehaloseが. glucoseと 同 程 度 有 効 で あ る. BCGがtrehalose を 速 か に 酸 化 す る こ と が 出 来 る こ と はFitz gerald,. Bernheim(194)727)も. 毒 力 株 の6週. 述 べ て い る.. 菌 は 何 れ の 糖,糖. ア ル コ ール. に 於 て も脱 色 は 起 ら な い が,弱 毒 株 の6週 菌 で は こ れ が 起 り得 る.し. か し2週. 菌 に比 して速. H37. を 基 質 と し た 場 合 最 も 還 元 速 度 は 高 くpyru vateが. れ よ り毒 力 株 と弱 毒 株 の 関 係 を. 1235. H37Raと. 菌は. は 逆 にpyrnvate添. これ に 次 ぐ.又BCGに. 加. やや低 く. 於 け るpyruvate,. lactateの 還 元 速 度 は 牛 型263の. それ に比 して. 著 し く低 い. 又 牛 型263の6週 にlactateは. 菌 に 於 て はpyruvate特. 還 元 速 度 が 著 し く低 下 す る. (H37Rv程. で は な い)が,BCGの6週. pyruvateは. む し ろ2週. れlactateの. 菌 よ り速 度 は 高 め ら. み 低 下 し た.. 即 ちpyruyate, H37Raの. 菌で は. lactateに 対 しH37Rvと. 示 した 関 係 と,牛. 型263とBCG. の 態 度 は 同 一 の 傾 向 の もの と 思 わ れ 毒 力 株 と 弱 毒 株 に 於 け る 有 意 の 差 と思 わ れ る. 又succinateは. 弱 毒 株 の2週. 菌 に於 て 毒 力. 株 よ りや や 還 元 速 度 が 高 い 結 果 を 示 し た. ア ミノ 酸 を 基 質 と した 場 合 のMb還. 元速度. に 於 て は 有 機 酸 で 見 られ た 如 き 有 効 な 基 質 は 見 当 ら な か つ た. glutamate,. asparagineが. 結. 核 菌 培 地 にN源. として 好 んで 使 用 され るに も. か か わ ら ず,嫌. 気 的条 件 に 於 け る還 元 速 度 は. 度 は 低 下 し て い る し 又 低 下 度 はH37Raよ. 他 の ア ミノ 酸 と比 し て 何 等 優 劣 は 決 せ ら れ な. り もBCGに. い.. 於 て 著 し い.. 嫌 気 条 件 に 於 け るMb還 Embden‑Meyerhofの. 元速度 の み か ら. 但 し 毒 力 株 の2週. 経 路 の個 々 に つ い て 論. で あ る 場 合 に は,無. ず る こ とは 出 来 な い が,糖. 類 に 於 てMb還. 元 が 活 溌 で な い こ とはEbina,. Nakamura. (1937)28)の 述 べ て い る 如 く結 核 菌 の 嫌 気 的 解 糖 の 極 め て弱 い こ とに よ る も の と思 わ れ る. 基 質 に 有 機 酸 を撰 ん だ 場 合 に は 極 め て 興 味. 菌 に 於 てalanineが. 基質. 基 質 の対 照 よ りも還 元 速. 度 は 高 め られ た が 同一 条 件 の弱 毒株 に 於 ては かか る現 象 は 見 られ な かつ た . 毒 力 株 の6週 Mb選. 菌 では 何 れ の ア ミ ノ 酸 で も. 元 は 起 ら な い が,弱. は 見 ら れ る.し. 毒株 に於 ては 還 元. か し速 度 は 著 し く低 い ..
(8) 1236. 岡. 好. 万. lactateは 5. 結. 論. 4)毒. 結 核 菌 毒 力 並 び に 弱 毒 株 で 各 種 糖,糖 コ ー ル,有. 機 酸,ア. Thunberg法. アル. ミノ酸 を 基 質 と して. に よ り脱 水 素 酵 素 反 応 を 比 較 検. vate,. 毒 株 の2週. 元 速 度 が 高 く,又6週. 質 と し て 糖,糖. 6.毒. 稿 を終 るに 臨 み終 始御 懇 篤 な る御 指 導 と御 校 閲 を 賜 つ た 恩師 村 上 教授 に 深 甚 の謝 意 を表 し,併 せ て研. 糖 で 還 元速 度. 究 に種 々便 宜 を 計つ て下 さつ た 北 村 博士 に 感 謝 す る. 始 め6炭. pathogenesis. C. Thomas,. 金 井:日. 献. of tuberculosis,. 本 細 菌 学 雑 誌,. 10,. 427,. 1955. Am.. Rev.. R. J.. and. Middlebrook,. 14) Dixon, 15). 101, 1944.. R. J.:. Tuberc.,. 385,. Rev.. Tuberc.,. 58,. 5) Anderson,. R. J.:. 6) Asselineau,. J.:. Am.. C. R. Acad.. Sei., 230,. 1620,. 782,. J. and Ledere,. E... Nature.,. 166,. 1950.. C. H.:. J.. 9) Bloch,. G.,. Exp.. Dubos,. R. J.. Med., 86,. 175, 1947.. Am.. Rev.. Tuberc.,. 67,. 629,. H.:. Am.. Rev.. Tuberc.,. 61,. 270,. Rev. Schorr,. Trans.. Nat.. of Laboratory. Tuberc.,. 3, 86,. E. and Tbc.. N. L. and Hunter,. J.,. 1943,. 20). 37, 536,. 大 林 他:医. 1919.. Richardson,. Assoc.,. 26,. G. J. E.:. 41,. 196,. 学 と 生 物 学,. Der Chemie.,. 10,. 311,. F.:. 439, 196, Zs.. Biochem.. 139, 1947.. H. and Bergel,. 22) Neubauer, O.:. H.:. 314,. 1947. .. Liebigs Annalen. 1924.. physiol.. Chem., 67,. 219,. 1910. 23). 赤 堀:ア. 24) Krebs,. ミノ 酸 及 蛋 白 質,. H. A.:. Zs.. 283.. physiol.. Chem.,. 217,. 191,. F.:. J.. 1933.. 11) Desbordes, Tuberc.,. J. and 66,. 12) Patnode,. Rev. F. J.,. Rev.. Fournier,. E.:. Am . Rev.. 382, 1952.. R. A.,. Am.. 13) Wilson, Am.. Am.. R. O.,. 19) Edson,. 1950.. C... Sub-Committe. 1931.. and Pierce,. 1953. 10) Bloch,. E.,. 21) Wieland,. 8) Middlebrook,. J., 28, 237, 1934.. 105.. H. B.: 255, 1941.. 1950. 7) Asselineau,. K. A.,. 18) Loeber,. 698, 1948. Chem. Rev., 29,. Biochem.. 核 菌 の 基 礎 と 応 用.. Method, 17) Long,. G.:. M.:. 小 川:結. 16) Jensen,. .. 60,. 1949. 4) Dubos,. 毒株 で は. 毒 株 に 関 係 な くpyruvate,. 1) Rich, A. R.: The. 3) Dubos,. 基質 とし. これ が 見 ら れ な い.. 文. 2). 菌 はalanineを. 次 第 で す.. 力,弱. Charles,. 力 株 の2週. 菌は 毒 力 株 の そ. が 高 め られ る. 3)毒. 菌 で 毒 力株 の. 基質 相 互 の 間 に著. 差 は 認 め な い が 弱 毒 株 の2週 れ に 比 し, glucoseを. 弱 毒 株 の2週. た 場 合 還 元 速 度 が 高 め ら れ る が,弱. ア ル コ ール を 求 め た. 場 合 は 毒 力 株 と弱 毒 株,又. 菌 に 比 しpyru. そ れ よ り も還 元 速 度 が や や 高 め ら れ る.. 菌. の 毒 力 株 は 無 基 質 で は 還 元 が 見 ら れ な い. 2)基. 菌 は2週. し く低 下 す る が 弱 毒 株 で は 殆 ん ど 低 下 を 見 な. 5)succinateは. 菌は 無 基 質 に於 て毒 力株. の そ れ よ り もMb還. 力 株 の6週. lactateを 基 質 と し た 場 合 還 元 速 度 が 著. い か 或 い は 低 下 が 著 明 で な い.. 討 し 次 の 結 果 を 得 た. 1)弱. 供 試 基 質 中 最 も 還 元 速 度 を 高 め た.. Wrinkly, Tubere., Kalish,. Tuberc.,. 65,. C. K. and Beasley , 69, 599, 1954.. C. and Fish, 187,. 1952.. C. H.:. 25). 代 居:福. 岡 医 誌,. 42,. 323,. 1951. .. 26). 川 畑:福. 岡 医 誌,. 27,. 833,. 1934. .. 27) Fitzgerald, Bact., 28) Ebina Med.,. 54, and 31,. R. J. 671,. and. 1947.. Nakamura: 60,. Bernheim,. 1937.. Tohoku.. J.. Exp..
(9) 結 核 菌 物 質 代 謝 に 関 す る 研 究. Studies I.. on. the. Metabolism. Dehydrogenase of. virulent. of. reactions and. Mycobacterium by. intact. avirulent. cell. 1237. tuberculosis suspensions. strains. By Yoshikazu Department. Oka. of Microbiology. Okayama University Medical School (Director: Professor Dr. Sakae Murakami). With the use of intact cell suspensions of virulent and avirulent strains of 2 and 6 weeks old cultures in the Sauton media, comparative studies on the dehydrogenating reaction of each substrate, sugars, sugar alcoholes, organic acids, were carried out by Thunberg method. The results were as follows. 1) In the case of the 2 weeks old cells of avirulent strain without addition of substrate, the rate of methylene blue reduction is faster than that in the case of the virulent strain; and the 6 weeks old cells of virulent strain without substrate do not cause decoloration of methy lene blue. 2) When sugar or sugar alcohole is used as a substrare, no significant difference in the reduction time can be seen between the virulent and avirulent strains, nor any marked difference among each of the substrates. The rate of reduction by the 2 weeks old cells of avirulent strain, however, is more accelerated than that by the virulent strain by the addition of such substrate as glucose or other hexose. 3) Regardless of the virulence of bacteria, of all the substrates used, pyruvate and lactate accelerate the reduction most markedly. 4) When pyruvate or lactate is used as a substrate, the rate of reduction by the 6 weeks old cells of virulent strain is markedly decreased compared with that by the 2 weeks old cells, but with avirulent strain the decrease in the rate of reduction is not or hardly noticeable. 5) When succinate is used as a substrate, in the case of 2 weeks old cells, the avirulent strain seems to have somewhat stronger methylene blue reducing activity than the virulent strain. 6) The rate of reduction by the 2 weeks old cells of virulent strain is accelerated when alanine is used as a substrate, but this does not occur in the avirulent strain..
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