IRUCAA@TDC : エナメル質へのフッ化物取り込みと口腔内フッ化物濃度を指標とした思春期および成人のフッ化物配合歯磨剤の有効使用量

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(1)Title. エナメル質へのフッ化物取り込みと口腔内フッ化物濃度を指標とした思春期および成人のフッ化物配合歯磨剤の有効使用量. Author(s). 古賀, 寛; 山岸, 敦; 高柳, 篤史; 前田, 晃嗣; 松久保, 隆. Journal URL. 歯科学報, 108(1): 74-80 http://hdl.handle.net/10130/395. Right. Posted at the Institutional Resources for Unique Collection and Academic Archives at Tokyo Dental College, Available from http://ir.tdc.ac.jp/.

(2) ７４. 二次出版. エナメル質へのフッ化物取り込みと口腔内フッ化物濃度を指標とした思春期および成人のフッ化物配合歯磨剤の有効使用量古賀. 寛１）. 山岸. 敦２）. 前田晃嗣２）. 高柳篤史２）松久保. 隆１）. 抄録：フッ化物（F）配合歯磨剤（１０００ppmF）を齲蝕. に１回の使用が習慣化している。しかし１３歳から１８. 予防に有効利用するため，エナメル質への F 取り. 歳までの思春期における DMFT 指数は依然として. 込みと口腔内 F 濃度を指標として使用量および時. 高い状態にある１）。. 間を検討した。エナメル質への F 取り込みは３００. 日本において全身的応用としての水道水Ｆ添加は. ppmF 以上で有意に増加し，２分間の作用で飽和し. 実施されておらず，また，F 洗口も学校教育現場で. た。口腔内 F 濃度の変化から３００ppmF 以上の濃度. も人口比３．１％４）で実施されているのみであり，市場. を維持するには，１ｇ以上の使用が必要であった。. で入手できる OTC 化もなされていない。このこと. 従って，Ｆ配合歯磨剤の有効利用には１ｇ以上の使. は健康教育を通した齲蝕予防の知識があったとして. 用が推奨される。. も，Ｆ洗口へのアクセシビリテイが悪く，直接的に歯磨き以外の保健行動や予防行動に結びつきにく. 緒言. い。現時点におけるＦ応用の適用状況からＦ配合歯. 近年，ヨーロッパはもちろんのこと日本において. 磨剤を有効に活用することが思春期からの齲蝕予防. 歯科疾患実態調査（平成１１年度）では齲蝕罹患の指標. に寄与すると考えられる。しかしながら，日本にお. １）. が３を下回り WHO. いてＦ配合歯磨剤を有効に作用させる使用量に関す. の到達目標であった「１２歳児までに３．０以下にす. る報告はほとんどみあたらない。そこで本研究はＦ. ２）る」ことを達成し，齲蝕発現率の減少が進んでい. 配合歯磨剤を効果的に使用するため，エナメル質へ. る。確かに学童期での DMFT 指数の減少の限りで. のＦ取り込みと作用濃度との関係，歯磨剤使用量と. は成功しているが，それ以降の中学生および高校生. 口腔内Ｆ濃度の経時変化を調べ，最適有効使用量に. では年齢が進むにつれて DMFT 指数は漸増してい. ついて検討した。. である１２歳児の DMFT 指数. る。. 材料と方法. 現在，日本におけるフッ化物（以下Ｆと記す）配合歯磨剤の市場占有率は約９０％３）となり，家庭におけ. １．研究デザイン. るホーム（セルフ）・ケアとしてのＦ配合歯磨剤の使. 本研究は二つの実験より構成される。実験１は. 用は定着している。また，ブラッシング回数も１日. in vitro におけるウシエナメル質へのＦ取り込みと. キーワード：フッ化物配合歯磨剤，フッ化物取り込み，口腔内フッ化物濃度，最適有効フッ化物配合歯磨剤使用量１）東京歯科大学衛生学講座２）花王株式会社パーソナルヘルスケア研究所（２００７年１２月２０日受付）（２００８年１月８日受理）別刷請求先：〒２６１‐８５０２千葉市美浜区真砂１−２−２東京歯科大学衛生学講座古賀寛. 本論文は，第５４回日本口腔衛生学会総会（２００４年９月１８日，盛岡）において発表し，Bull Tokyo Dent Coll ４８⑶：１１９∼１２８，２００７．に掲載された論文を和文により二次出版したものである。. ― ７４ ―.

(3) 歯科学報. Vol．１０８，No．１（２００８）. 作用濃度および時間を調べ，さらに実験２では実際. ７）統計解析実験群間ならびに対照群との有意差検定は，. に F 配合歯磨剤を使用し，使用量と口腔内Ｆ濃度. PLSD of Fisher test および ANOVA，多重比較法. の関係を検討した。２．実験１. ７５. エナメル質へのＦ配合歯磨剤の濃度お. （Tukey Krammer test）で行い，危険率５％以下を有意とした。. よび処理時間の検討. ３．実験２. １）試料の作製. の口腔内Ｆ濃度の関係（ in vivo ）. 歯肉および歯根膜を除去したウシ前歯のエナメル質を試料とした。エナメル質表面は，全て黒マジッ. Ｆ配合歯磨剤（１０００ppmF）の使用量と. １）被験者. クで被塗し，研磨エンジン（GC マイクロモー. 被験者には，試験の内容，起こりうる障害を十分. ター，LM-1，東京）にカーボランダムポイント（ナ. 説明し，よく理解していただいた上で文書により同. チュラルポイントＡ型，ニッシン㈱，京都）を取り. 意を得た。この試験は「ヘルシンキ宣言」を遵守. 付け，黒く塗った部分がなくなるまで切削した。そ. し，「臨床研究に関する倫理指針」に従ったもので. の後，酸化アルミニウムの砥粒（４０，１２，３μm）で. ある。試験に同意していただいた被験対象者は，疾. 順次研磨し，表面を滑沢にした。一歯のエナメル質. 病による長期服薬をしていない成人８名（男女：２４. から６切片得た。その切片をアクリル棒（直径８. ∼４５歳）である。. mm，高さ１１cm）の先端に固定した後，ネイルエナ. ２）Ｆ配合歯磨剤によるブラッシング（量と時間の設定）. メルで５×５mm のウインドを形成した。. Ｆ配合歯磨剤は，NaF （特級，和光純薬）を蒸留水. ２）Ｆ作用溶液の調製および処理法Ｆ溶液は NaF（特級，和光純薬）を用い，１００，. で１０００ppmF に調製した溶液を使用した。. ３００，５００，１０００ppmF となるよう蒸留水で調製し. ブラッシング前に１０秒間１０ml の蒸留水で洗口し. た。処理時間は，３０，１２０および３００秒とした。実験. た。その後，６種類の歯磨剤の量（０．１，０．３，０．５，. は，４種類のＦ濃度と３通りの時間を組み合わせ，. ０．７，１．０，１．５ｇ）と３０，６０，１２０，１８０秒の４種類の. 各５個の試料を使用した。Ｆ処理は，試料を溶液中. 時間を組み合わせてブラッシングを行った。各実験. で緩やかに攪拌しながら行い，処理後は蒸留水で３０. では歯磨き時に標準香味１ml を加えた。. 秒間洗浄した。対照群は未処理のエナメル質を同数. ３）Ｆ配合歯磨後の口腔内Ｆ濃度の定量ブラッシング後，歯磨剤をカップに吐き出した。. 用意した。. そこから１ｇをサンプリングし，１NHCl を加え攪. ３）反応後のエナメル質の酸処理処理後のエナメル質は，０．５Ｍ過塩素酸溶液０．４. 拌した。試料溶液はフィルタ（０．４５μm）で濾過し，. ml 中に１０秒間浸漬し，脱灰後，直ちに０．５Ｍクエン. １ml に対し２ml の１Ｍクエン酸ナトリウム液およ. 酸ナトリウム溶液１．６ml を加えて中和した。. び３ml の TISAB Ⅱを混合し，複合型Ｆイオン電. ４）脱灰液のＦと Ca の定量. 極法（９６‐０６BN，オリオン社）にて定量した。. 脱灰液のＦイオン濃度測定は直接，複合型Ｆイオ. ４）統計解析. ン電極法（９６‐０６BN，オリオン社）で行った。脱灰液. Ｆ配合歯磨剤使用量とブラッシング時間，口腔内. の一部を１N-HCl／０．５％La 液で適量希釈し Ca 濃度. Ｆ濃度に関する比較は２元配置分散分析（two-way. を原子吸光法（Model ５０８型，日立）で測定した。. ANOVA）の後，多重比較（Tukey Krammer test）で. ５）歯面の面積計測. 検定し，危険率５％以下を有意とした。実験１およ. 試料をデジタルカメラで撮影し，その画像から解析ソフト（WinROOF ver5, Mitani Co.）を用い面積. び２のデータの統計解析は StatView V５．０を用いて行った。. を求めた。. 結果. ６）エナメル質のＦ濃度計算エナメル質のカルシウムの量を３７％５），比重２．９５６）. １．エナメル質表層のＦ取り込み本実験で使用したウシ対照エナメル質表層Ｆ濃度. としてエナメル質の量とＦ濃度を求めた。 ― ７５ ―.

(4) 古賀，他：フッ化物配合歯磨剤の最適有効使用量. ７６. は約５０ppm を示した。. かった。また，１００ppmF 群と３００ppmF 群と比較す. Ｆ処理を行ったものは反応時間が長くなるにつれ. ると１２０秒と３００秒間では３００ppmF 群の方が有意に. ていずれもＦ取り込みが増加する傾向を示した（表. 高い値を示した。. １．）。検定（PSTD of Fisher test）を行った結果，対. ２．１２０秒間でのＦ作用濃度別のエナメル質へのＦ. 照群と１００ppmF 群すべての作用時間群で有意差は. 取り込み. 認められず，１００ppmF 群でのＦ取り込みは極めて. 一般の人々の歯磨時間に近似している１２０秒間で. 低値あった。一方，３００ppmF 群と５００ppmF 群では. の作用濃度別に F 取り込みを多重比較で検定した. ３００ppmF群／３０秒と５００ppmF群／１２０秒および３００秒の. 結果を表３に示した。対照群は他のすべての群と有. ２群間と５００ppmF 群／３０秒と３００ppmF 群／３００秒の. 意に低値を示した。１００ppmF 群は，３００ppmF 群，. ３群間でのみ差が認められた（表２）。他方，１２０秒. ５００ppmF および１０００ppmF 群で有意に低い濃度で. と３００秒間の作用時間では両者には差は認められな. あった（ｐ＜０．０５）。一方，３００ppmF 群と５０００ppmF. 表１. 各種フッ化物イオン作用濃度によるエナメル質表層へのフッ化物取り込み（ppm）. フッ化物作用濃度（ppm）. ３０秒. 深さ（μm）. １２０秒. 深さ（μm）. ３００秒. 深さ（μm）. 対照群. ５０．５±１２．１. ５．１. ５０．５±１２．１. ５．１. ５０．５±１２．１. ５．１. １００ppm. １５２±１０．２. ５．６. １９２±３９．５. ２．４. ３４６±７８．０. ２．３. ３００ppm. ３０９±８２．０. ４．９. ７１６±１１２. ４．５. ７７６±１３４. ４．２. ５００ppm. ４３７±４３．０. ５．２. ７８０±２５８. ５．９. １０２６±２１８. ６．１. １０００ppm. ８１３±７０．７. ４．０. １２３５±５０２. ４．５. １７５２±４８７. ３．６. ｎ＝５. 表２. 作用時間とフッ化物イオン作用濃度に関するエナメル質表層へのフッ化物取り込みの統計解析（PLSD of Fishers test）. フッ化物イオン作用濃度. 作用時間. 対象. （ppm）. (秒). −. ３０. １００ppm. ３０. NS. −. １２０. NS. NS. −. ３００. NS. NS. NS. −. ３０. NS. NS. NS. NS. −. １２０. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. −. ３００. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. NS. −. ３０. NS. NS. NS. NS. NS. NS. ＊. −. １２０. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. NS. NS. ＊. −. ３００. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. NS. NS. ＊. NS. −. ３０. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. NS. NS. ＊. NS. NS. １２０. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. NS. ３００. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. ＊. ３００ppm. ５００ppm. １０００ppm. １００ppmF １２０. ３００ppmF ３００. ＊ｐ＜０．０５（PLSD of Fishers test） NS：有意差なし. ― ７６ ―. ３０. １２０. ５００ppmF ３００. ３０. １２０. ３００.

(5) 歯科学報表３. Vol．１０８，No．１（２００８）. ７７. 作用時間１２０秒におけるエナメル質表層へのフッ化物取り込みに関するフッ化物イオン作用濃度間の多重比較. フッ化物イオン作用濃度対. 対. 象. １００ppm. ３００ppm. 象. −. １００ppm. NS. −. ３００ppm. ＊. ＊. −. ５００ppm. ＊. ＊. NS. １０００ppm. ＊. ＊. ＊. ５００ppm. ＊. ０５ Tukey Kramer test，＊ｐ＜０． NS：有意差なし. 群には差はなかった。１０００ppmF 群と５００ppmF 群. ppm であるが，１．５ｇでは最大３９４．８±６７．３ppm を. との比較では１０００ppmF 群が有意に高いＦ取り込み. 示した。歯磨剤使用量が増加しても口腔内Ｆ濃度も. を示した。. 同じ倍率で増加しなかった。使用量群間での多重比. ３．F 配合液体歯磨剤使用による口腔内 F 濃度. 較では使用量０．１ｇと０．３ｇの群間，および０．７ｇと. Ｆ配合液体歯磨剤１０００ppmF の使用量と被検者８. １．０ｇの群間で口腔内Ｆ濃度の有意差が認められた. 名の口腔内Ｆ濃度を表４に示した。口腔内Ｆ濃度は. （表５）。１．０ｇと１．５ｇ群間では統計的違いはなかっ. 歯磨時間が長くなりにつれて指数関数的に減少し. た。. た。３０秒後の歯磨使用量０．１ｇでは最小５２．１±１３．０. 表４. によるブラッシング後の口腔内フッ化物濃度フッ化物配合歯磨剤（１０００ppm）ブラッシング時間（秒）. フッ化物配合歯磨剤（g）. ３０. ６０. １２０. １８０. ０．１. ５２．１±１３．０. ３９．２±１２．２. ２５．２±８．３. ２２．９±７．４. ３０．. １３５．７±３５．９. １１０．８±３５．０. ７４．２±２０．６. ５７．２±１４．８. ０．５. ２１３．８±６３．７. １４８．６±４２．１. １０１．２±１９．９. ９０．４±２５．４. ０．７. ２７０．３±８６．２. ２１３．１±５４．５. １６５．９±５０．０. １１２．３±３２．０. ０１．. ３８２．３±１２１．９. ２７２．９±５８．７. ２１０．８±６９．１. １５２．９±２５．８. １．５. ３９４．８±６７．３. ３１０．２±５７．５. ２３１．８±４８．４. １７６．７±３８．５. ｎ＝８（男女，２４∼４５歳）表５. 口腔内フッ化物濃度のフッ化物配合歯磨剤使用量間の多重比較＊有意差，ｐ＜０．０５. フッ化物配合歯磨剤（g）. １０．. ０．３. ０．５. ０．７. １．０. １０．０．３０．５０．７１．０１．５. NS ＊＊＊＊＊. NS NS ＊＊＊. NS ＊＊. NS ＊＊. NS NS NS. ＊ Tukey Kramer test，ｎ＝８１９７棄却値：−５５． NS：有意差なし. ― ７７ ―.

(6) ７８. 古賀，他：フッ化物配合歯磨剤の最適有効使用量. みの促進が示唆された。実際の歯磨時間に最も近い. 考察. １２０秒ではエナメル質へのＦ取り込み量は，１）３００. １．対照エナメル質のＦ濃度. ppmF群と５００ppmF群，２）１０００ppmF群と１５００ppmF. 対照群の表層Ｆ濃度は約５０ppm でありヒトエナ７）. メル質と比較しても１０分の１の値を示した，この. 群では，同程度であると考えられた。３．エナメル質表面でのＦ溶液による CaF２形成と. 理由として，試料であるウシエナメル質表層を研磨. Ｆの浸透. エンジンに粗研磨用のカーボランダムを使用したこ. Ｆイオンとエナメル質との反応に関する研究で. とによって深く切削したためだと考えられる。深く. は，中性領域ではＦイオン濃度３００ppm，pH５．０の. 切削した理由として，元来ウシエナメル質は，細か. 弱酸性では１００ppm で CaF２様の球状結晶がエナメ. い溝が先端部に向かって存在し，その凸の部分も鋸. ル質表面に生成することが実験的に確かめられてい. 状になっているため，ヒトエナメル質表面のように. る８∼１１）。したがって中性で１００ppmF 群は CaF２が形. 滑沢にするためには凹凸部分を削除する必要があっ. 成し難く，３００∼５００ppmF 群ではその形成の可能性. た。一方，エナメル質へのＦ取り込みは，対照群の. が高いと考えられる。また１０００ppmF 以上であれ. エナメル質 F 濃度の違いによって，本実験で使用. ば，低濃度に比べて CaF２の形成がより促進される. したＦ溶液（１００∼１０００ppm）毎では，差が認められ. と考えられる１２，１３）。. なかった。このことは，本研究条件では対照群のエ. 反応３００秒間では，作用濃度１００ppmF 群と３００. ナメル質Ｆ濃度が数十から数百 ppm の範囲で異. ppmF 群では反応３０秒間と比較して約３倍のＦ取り. なっていたとしてもエナメル質への各種Ｆ溶液の作. 込みを示しているが，１０００ppmF 群と１５００ppmF 群. 用機序は，フルオロアパタイトの生成には関連は薄. では約２倍であった。これはエナメル質表層のＦ取. く，F 取り込みと CaF２の生成と分解の複分解反応. り込みの容量が飽和するものと仮定すると，作用濃. であることを示唆しており，本研究の結論には影響. 度１０００ppmF では高い濃度勾配によりＦイオンが短. しないと考えられる。. 時間で結晶空隙に入り込んでいき，しかも低濃度群. ２．エナメル質とＦの反応促進濃度. よりも CaF２の形成が支配的であると考えられる。. エナメル質へのＦ取り込みの事実からＦ作用濃度. ４．口腔内平均Ｆ濃度のシミュレーション. が３００ppmF 以上でかつ歯磨時間が３０秒をこえると. 成人の被験者８名の口腔内Ｆ濃度の実測値をもと. エナメル質表層（数ミクロン）において反応と取り込. にして，口腔内平均Ｆ濃度の近似式を求めた。表４. 表６１０００ppm フッ化物配合歯磨剤使用量別にみたブラッシング後の口腔内平均フッ化物濃度フッ化物配合歯磨剤（g）. 近似方程式 MF（t） No.. ３０. ６０. １２０. １８０. ０．１. １. ５９．２. ５２．４. ４１．９. ３５．７. ０．３. ２. １５０. １３７. １１４. ９６．８. ５０．. ３. ２４１. ２１２. １６７. １４１. ７０．. ４. ２９４. ２７９. ２５５. ２３７. ０１．. ５. ４０９. ３６７. ３００. ２５５. １．５. ６. ４２８. ３９１. ２８５. ２８５. ブラッシング時間（秒）. MF（t）；口腔内平均フッ化物濃度（ppm），ｔ；ブラッシング時間（秒）０００６ｔ２−０．２８２８ｔ＋６７．１８ №１；MF（t）＝０． №２；MF（t）＝０．００８９ｔ２−０．５３９５ｔ＋１６５．８ №３；MF（t）＝０．００２７ｔ２−１．２３２２ｔ＋２７６．０ №４；MF（t）＝０．０００９６７ｔ２−０．８０８４ｔ＋３１０．４ №５；MF（t）＝０．００２９ｔ２−１．６４５５ｔ＋４５９．６ №６；MF（t）＝０．００２３７ｔ２−１．４４７５ｔ＋４６９．３ ― ７８ ―.

(7) 歯科学報. Vol．１０８，No．１（２００８）. ７９. のデータをもとにして近似式を求めた結果，二次関数での近似が最もよくフィッティングした。したがって歯磨剤使用量それぞれの二次回帰式を求めこれを積分した。この積分式（F（t））を任意の歯磨時間ｔで除することにより口腔内平均Ｆ濃度の式 MF（t）を導出した。 " #"! '". "! '" $ ! % !& " '! ' $ # '. この式で a，b，c は定数である。表６にはそれぞれの歯磨剤使用量とフィットした二次回帰式を記載し，３０秒から１８０秒までの口腔内平. 図１. 思春期以降のフッ化物配合歯磨剤の最適使用量（１ｇ）. 均Ｆ濃度を示した。この計算から実際の歯磨時間に最も近い１２０秒間では，１．０g と１．５g のみが３００ppmF 以上の口腔内平均Ｆ濃度を示した。. 明に増加した。口腔内平均Ｆ濃度が３００ppm 以上と. ５．幼児と学童のＦ配合歯磨剤の有効使用量. なる歯磨剤使用量は１．０ｇと１．５ｇであった。さらに. 思春期および成人のＦ配合歯磨剤の最適有効使用. 中性閾において CaF２が形成されるといわれるＦイ. 量を検索する目的で２つの実験で検討したが，幼児. オン濃度の下限は３００ppm であるとの報告から，本. についての実験はきわめて困難である。しかしなが. 実験における３００ppmF 以上でのエナメル質へのＦ. １４）ら，日本では，山口ら（１９９４）が３∼４歳児ではＦ. 取り込みは CaF２生成が強く関与していると推察さ. 配合歯磨剤は平均０．２９ｇ使用していることを報告し. れた。これら２つの知見と CaF２生成の推論から思. ている。またアメリカにおいては Den Besten. 春期から成人にかけての１０００ppm のＦ配合歯磨剤. １５）. （１９９６）は４歳児では F 配合歯磨剤は０．２５ｇが望ま. の有効使用量は１．０ｇ以上が望まれる。. しいと述べている。他方，ヨーロッパにおいては，１６） Sjogren ら（１９９５）は，１０００ppmF の歯磨剤使用量は. １∼３歳までは約０．２ｇ，６歳未満では約０．５ｇ，さらには，学童から成人にかけては約１ｇを推奨している。しかしながら，同じ濃度，量であっても，一日の歯磨の回数，歯磨剤後のうがいのやり方やうがいの回数によっても口腔内Ｆ濃度を保持する効果が異なってくる。Birkhed１７）は，幼児および学童期においては，一日２回のＦ配合歯磨剤による歯磨，２分間磨く，歯磨き後は１０∼２０秒間口をすすぎ，それ以降は行わないなどの指導により，Ｆを口腔内により長時間保持させることを推奨している。. 結論本研究はエナメル質へのＦ取り込みの in vitro での実験と思春期から成人に対する１０００ppm のＦ配合歯磨剤使用による口腔内Ｆ物濃度を検索し，両者を比較してＦ配合歯磨剤の有効使用量を検討した。その結果，歯面近傍のＦ濃度が３００∼５００ppm ではエナメル質表層（数ミクロン）でのＦ取り込み量が著 ― ７９ ―. 文. 献. １）厚生労働省健康政策局調査：歯科疾患実態調査報告（１９９９），厚生労働省医政局歯科保健課編，pp.１２４，財団法人口腔保健協会，東京，２００１．２）Aggeryd T : Goals for oral health in the year 2000 : cooperation between WHO, FDI and the national dental associations. Int Dent J, ３３：５５∼５９，１９８３．３）㈶ライオン歯科衛生研究所：一目でわかる口腔保健統計グラフ．pp.５４，富徳会，東京，２００３．４）木本一成，晴佐久悟，田浦勝彦，志村匤代，藤野悦男，山本武夫，葭原明弘，磯崎篤則，荒川浩久，小林清吾，境脩，日本における集団応用でのフッ化物洗口に関する実態調査 ―「健康日本２１」における２００５年中間評価に向けて ―，口腔衛生会誌，５５：１９９∼２０３，２００５．５）Brudevold F, Soremark R : Chemistry of mineral phase of enamel, Structual and Chemical Organization of Teeth, Miles AEW., 2nd ed. pp. 247∼277, Academic Press, New York, １９６７．６）Coklica V, and Burudevold F : Dentistry fractions in human enamel. Arch Oral Biol., １１：１２６∼１２６８，１９６６．７）古賀寛，眞木吉信，松久保隆，高江洲義矩：市販フッ化物洗口剤作用後のエナメル質および歯根面への Fluoride Uptake の in vitro における検討，口腔衛生会誌，５２：２８∼３５，２００２．８）Larsen MJ, Jensen SJ : Experiments on the initiation of calcium fluoride formation with reference to the solubility of dental enamel and brushite. Arch Oral Biol., ３９：２３ ∼２７，１９９４．.

(8) ８０. 古賀，他：フッ化物配合歯磨剤の最適有効使用量. ９）Chandler S, Chio CC, Fuerstenau DW : Transformation of calcium fluoride for caries prevention. J Dent Res, ６１：４０３∼４０７，１９８２．１０）Kanauya Y, Spooner P, Fox JL, Higuchi WI, Muhammad NA：Mechanistic studies on the bioavailability of calcium fluoride for re-mineralization of dental enamel. J Pharmacol, １６：１７１∼１７９，１９８３．１１）Maia LC, de Sonza IPR, Cury JA : Effect of a combination of fluoride dentifrice and varnish on enamel surface rehardening and fluoride uptake in vitro. Eur J Oral Sci, １１１：６８∼７２，２００３．１２）Christoffersen J, Christffersen MR, Arends J, Leonardsen ES : Formation of Phosphate containing calcium fluoride at the expense of enamel, hydroxyapatite and fluoapatite. Caries Res, ２９：２２３∼２３０，１９９５．１３）ten Cate M : Review on fluoride, with special emphasis. on calcium fluoride mechanisms in caries prevention. Eur J Oral Sci, １０５：４６１∼４６５，１９９７．１４）山口和巳，木本一成，平田幸夫，荒川浩久：フッ化物配合歯磨剤使用後の口腔内残留フッ素，Ⅲ幼稚園児の口腔内フッ素量の測定．口腔衛生会誌，４３：４０４∼４０５，１９９３．１５）Den Besten P, Ko HS : Fluoride levels in whole saliva of preschool children after brushing with 0.25g （peasized） as compared to 1.0g （full-brush） of a fluoride dentifrice. Pediatr Dent, １８：２７７∼２８０，１９９６．１６）Sjogern K, Birkhed D, Ranger B : Effect of a modified toothpaste technique on approximal caries in preschool children. Caries Res, ２９：４３５∼４４１，１９９６．１７）Birkhed D : Use of sugar free chewing gums and fluoride for caries prevention. J Dent Hlth, ５７：２８０∼２８１，２００７．. ― ８０ ―.

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