血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 定 量 に よ る 癌 診 斷 法 並 に そ の 本 態 的 研 究
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(2) 血清対熱非凝固物質定量に よる癌診断法並にその本態的研究(Ⅱ) の検 出,糖,蛋. 白,ペ. プ チ ッ ド,酵 素,有. 機. (ホ) 非 癌 血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 にHistidine. 酸,は て は 無 機 物 の 検 出 に 迄 も 発 達 し て い. 及 びdl‑Glutamic. る.. 第2節. 私 は 先 に 癌 患 者 血 清 中 の対 熱 非 凝 固 物 質 が 非 癌 患 者 の そ れ に 比 較 し,著. し く増 加 す る こ. 667. acidを 加 え た も の.. 血清 対 熱 非凝 固物質 の製 法. 血 清 を 試 験 管 に と り, 100℃ 湯 中 で5分 加 温,凝. 間. 固 血 清 は ガ ラ ス棒 で粉 砕 し, 4倍 容. とに着 目 し,こ れ を 応 用 し て定 量 法 に よ る癌. の 蒸 溜 水 を加 え 充 分 混 和 す. 1時 間100℃. 診 断 法 を 考 案 した が,癌 血 清 に 於 け る 該 物 質. 中 で 加 温 後,一 昼 夜 氷 室 に 放 置 し,遠 心 沈 澱. 増 加 の原 因 が,考. に よ り沈 澱 物 を 除 去 し て上 清 を分 離 す.更. 慮 され る 三 つ の 場 合.即. 血 清 ア ル ブ ミン の 崩 壞.宿. ち. 主 組 織 の 崩 壞.或. 上 清 は100℃. 湯 中 で 約1/10容. 湯. に. に 至 る迄 濃 縮. は腫 瘍 自 身 の分 泌 とゆ う点 に 就 て探 究 す る た. し,そ れ に3倍 容 の 局 方 純 ア ル コ ール を 加 え. め に,第1編. 清熱 凝 固蛋 白増 減. 一 昼夜 氷 室中 に放 置 すれ ば 白 色 沈 澱 を 形 成. び手 術 的 侵 襲 に よ る 組 織 崩. し,遠 心 沈 澱 に よ り上 清 を 除 き,沈 澱 物 は エ. に 於 い て,血. に 関 す る 問 題,及. 壞 に 関 す る 問 題 等 を 検 討 し て 来 た.更 癌,非. に 私は. 癌 の血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 の 構 成 物 質 の. 相 違,及. び癌 組 織 の対 熱 非 凝 固 物 質 で あ る所. の 中 原 氏 の 所 謂"ト を 調 べ る た め,各. キ ソ ホ ル モ ン"と. Partition. 血 清1c.c.中 に 癌 患 者 の 時 は 大 凡4mg以 非 癌 患 者 の時 は 大 凡2〜3mgで. の関 係. 々 の ア ミ ノ酸 組 成 をPaper. Chromatographyを. ー テ ル で 洗 い 乾 燥 す .標 品 は 帯 黄 色 半 透 明,. 用 い て 検 査 し,. 第3節. 上,. あ る.. トキ ソ ホ ル モ ン の 製 法(中 原). 癌 組 織(壞. 死 に 陷 つ た 所 及 び脂 肪 は 充 分 と. り除 く)を 細 く粉 碎 し, 4倍 量 の蒸 溜 水 を加. 若 干 結 果 を 得 た の で 茲 に 報 告 す る次 第 で あ. え 混 和 し, 100℃. る.. 後 一 昼 夜 氷 室 に 放 置 し,充 分 遠 心 沈 澱 す.そ の 上 清 を 約1/10容 第2章. 實. 第1節 (1). 驗. 方. 材. 法. に 至 る迄100℃. 料. 術 に よ り確 診 せ ら れ た 癌,非. 癌患. 品 は 帯 黄 褐 色,癌 組 織 の 概 ね6‑10%,こ を トキ ソ ホ ル モ ン と称 す.更. 清 を 分 離 し 抽 出 し た も の で あ る.. 溶 か し, 100℃. トキ ソ ホ ル モ ン は 同 じ く 津 田 外 科 教 室. に 於 い て 入 院 手 術 し た 胃 癌,直. 腸 癌,乳. で 検 鏡 確 診 せ ら れ た 組 織 よ り,中. 癌等. 原 氏 の製 法. に従 い 作 られ た も の で あ る . (3). 混 合 液 を 使 用 し た.. acid混. Glutamic (ニ). に な る如 く硫 酸 銅 を 加 え,氷 室 に 放 置 す.沈 澱 成 生 す れ ば 遠 心 沈 澱 で 沈 澱 物 を と りN/10 エ ー テ ル で 乾 燥 す.標. 第4節. Glycine,. Cysteine,. Glutamic. 材 料 の 加 水分 解 法. acid,. Aspartic. 試 料2mgを. 試 験 管 中 に 入 れ, 10%塩. 5c.c.加 え て 封 入 す.之 びLeucine,. acid,. Arginine混. Alanine,. Serine,. 合 液.. トキ ソ ホ ル モ ン に ヘ キ ソ ン 塩 基 ア ミ ノ. 加 え た も の.. 品 は 帯 黄 色 半 透 明,こ. Alanine,. 合 液.. 酸(Histidine. 湯 中 で 加 温 し,蒸 溜 水 に 不 溶. れ を 銅 塩 トキ ソ ホ ル モ ン と称 し て い る.. Tyrosine,. (ハ) Histidine及. に 之 を蒸溜 水に. の部 は 遠 心 沈 澱 に よ り除 き,そ の上 清 に1%. (イ) カ ゼ イ ン. Serine,. れ. 塩 酸 で 処 理 し,沈 澱 物 を 速 に 蒸 溜 水 で 洗 い,. 対 照 と し て カ ゼ イ ン 及 び 各 種 ア ミ ノ酸. (ロ) Leucine,. 湯 中で濃. 澱 に よ り上 清 を 除 き,エ ー テ ル しで 乾 燥 す.標. 者 の 手 術 前 早 朝 空 腹 時 に 採 血 し た 血 液 よ り血. (2). 間 〜2時 間 加 温. 縮 し, 2倍 容 の 局 方 純 ア ル コ ール を 混 和 して 一 昼 夜 氷 室 に 放 置 す .白 色 沈 澱 形 成 後 遠 心 沈. 血清対熱 非 凝 固 物質 は 津 田外 科 教 室 に. 入 院 し,手. 湯 中 で1時. &. Arginine. &. Lysine)を. を100℃. 酸を. 24時 間,温 浴. 中 で 加 水 分 解 し,減 圧 濃 縮 を 行 う.く. りか え. し数 回 蒸 溜 水 を 加 え,減 圧 濃 縮 し,出 来 得 る 限 り塩 酸 を 除 く.こ れ に よ り試 料 は 加 水 分 解 され て,ア る.. ミ ノ酸 に 分 解 せ ら れ た わ け で あ.
(3) 668. 奥 第5節. 島. 2次 元展開法. 団. 四. 郎. 酸 液 中 に 入 れ,硝. 子 鐘 内 に石 炭 ガ スを 充 満 せ. 濾 紙 は 東 洋 濾 紙 定 性 用No. 2を 使 用 した.. しめ て密 閉 す.原 点 よ り約30cm以. (1) 装. 透 せ る 場 合(気 温 に よ り異 る が 大 体20時. 置. 最 近 に 至 り專 用 の装 置 も作 られ 発 売 され て い る が,私. は 硝 子 鐘 及 び 除 湿 器 を 第1図. く組 み あ わ せ 用 い た.硝 酸 展 開 時 に,石 あ る が,硝 飽 和,石. 子 鐘 の み の時 は石炭. 炭 ガ ス を 充 満 す る際 困 難 で. 子 鐘 の 下 に 除 湿 器 を 用 い る と,水. 炭 ガ ス充 満,共. に 自 由 で あ る.溶 媒. に 石 炭 酸 を 用 い る時 は,光 る た め,褐. の如. 線 に よつ て変 色 す. 色 除 湿 器 を 用 い て良 好 な結 果 を得. 上 上昇滲. 後)濾. 紙 を と りは づ し,風 乾 す.こ. 第1次. の 溶 媒 石 炭 酸 で ア ミ ノ酸 は1次. 間. れによ り め分離. を うけ た こ と に な り,風 乾 に よつ て 石 炭 酸 は 除 か れ る. (3) ル チ ヂ ン,コ. リヂ ン 展 開 法 及 び 呈 色. 1次 の 分 離 を うけ た ア ミ ノ酸 は,な お 同 じ 点 に 数 種 の ア ミ ノ酸 を含 む た め,第2次 媒 ル チ ヂ ン,コ. の溶. リヂ ン で 分 離 し な け れ ば な ら. た.濾 紙 を 固 定 す る た め に,針 金 で 図 の 如 き. な い,充 分 風 乾 され た 濾 紙 の 原 点 を は さ む 他. 装 置 を 作 り,ク. リ ッ プ で 止 め た.. の 一 辺 を,同. 第1図. に 浸 た し,第2次. じ操 作 で ル チ ヂ ン,コ. リヂ ン液. の 展 開 を 行 う.こ の 際 も し. 石 炭 酸 の 風 乾 が 足 りな い 時 は,第2次 は 上 昇 滲 透 し な い.ル. チ ヂ ン,コ. の 溶媒. リヂ ン液 の. 溶 媒 の 時 は 硝 子 鐘 内 は 水 飽 和 の み で あ る.大 体40時. 間 で 原 点 よ り30cm以. 同 じ く風 乾 に よ り第2次. 上 上 昇 滲 透 し,. の 溶 媒 ル チ ヂ ン,コ. リヂ ンを 除 く.展 開 を 了 り,風 乾 され た 濾 紙 に,ブ. タ ノ ー ル100g,ニ. ン ヒ ド リ ン0.2gの. 割 に 混 じた ニ ン ヒ ドリン ブ タ ノー ル 溶 液 を用 い,濾 95℃. 紙 上 に 平 等 に 粉 霧 し,こ に 加 温 す.分. れ を5分. 間. 離 さ れ た ア ミ ノ酸 は,ア. ミ ノ酸 の ニ ン ヒ ド リ ン 反 応 に よ り呈 色 さ れ, 夫 々 特 有 の 色 調 を あ ら わ す. (4). 展開 時 の注 意. 私 は 石 炭 酸 展 開 に 於 い て, ニ ア 水10%の. (2) 石 炭 酸 展 開 法. で 展 開 し,良. 予 め40cm平. 溶 媒 を 用 い て 展 開 す る 時,ア. 方 に 切 ら れ た 濾 紙 の 一 隅 に,. 相 隣 れ る両 辺 よ り5cmの. 点 を原 点 と し て,加. 水 分 解 され た 試 料 を,直 径 約1.5cmの る ご と く点 滴 し,充 分 風 乾 す.石 %ア. ン モ ニ ア 水 を10〜20%の. 液 化 せ し め て 使 用 す る.夏. モ ニ ア 水10%添. 円に な. 炭 酸 は0.1. 割 で 辛 う じて 季 で は0.1%ア. ン. 加 で,石 炭 酸 を 液 状 に 保 つ. こ とが 出 来 るが,冬. 季 気 温 降 下 と共 に,ア. ン. モ ニ ア 水 の 混 合 量 を 増 さ な い と,石 炭 酸 は 固 形 化 す る傾 向 が あ る. 直 径 約15cmの. 溶 媒 槽 に 石 炭 酸 を 入 れ,濾. 紙 を 円 筒 状 に 巻 き,原 点 を は さ む 一 辺 を石 炭. 0.1%の. 割 で 混 和 し,石 好 な 結 果 を 得 た.こ. れ は石淡 酸 ンモ ニアを 少. 量 添 加 す る こ と に よ り, Arginine, Histidine等. ア ンモ. 炭 ガ ス気 流 中. Lysine,. の ヘ キ ソ ン 塩 基 類 の ア ミ ノ酸 分. 離 に 好 結 果 を 得,又. 石 炭 ガ ス気 流 中 で 展 開 す. る の は,. が 一 部 操 作 中 に 酸 化 され. て,黄. Tyosine等. 褐 色 の 色 素 を,移. 防 ぐ た め で あ る.そ はMethionine はCysteic. ル チ ヂ ン,コ り 相 当Rf値. の 他 展 開 時 にMetaionine. sulfoxied acidに. 動 した 跡 に 残 す の を. (sulfone)に,. Cysteine. 酸 化 さ れ て か わ り得 る. リ ヂ ン の 混 和 率 は,気. に 変 動 を 生 じ,判. 温に よ. 定 に 困難 を来. す こ とが あ り.結 局 そ の 配 合 率 は 経 験 に よ ら.
(4) 血清対熱非凝固物質定量 による癌診断法並 にその本態的研究(Ⅱ). なけ れ ば な ら な い.一. 般 に 温度 が 低 い時 は コ. tamic acid,. 8) Aspartic acid,. リヂ ンを 多 く,温 度 上 昇 と共 に ル チ ヂ ン を 増. 10) Arginine,. 量 しな け れ ば な らな い.ミ. Proline,. ノフ ァー ゲ ン製 薬. 部 よ り市 販 され て い る.冬 季 用,夏 チ ゲ ン,コ (25℃)と. 季 用,ル. リヂ ン 混 合 液 は,冬 季(5℃)夏 し て 作 ら れ た も の で,各. る混 合 率 は 大 凡 表1に. 9) Lysine,. 11) Methionine sulfone,. 14). Tyrosineよ. 669. Cysteic. acid及. 12). び 少 量 の13). り な る.. 季. 第2図. ノ1. 季 に於 け. 示 す 通 りで あ る.. 表1. (5) Rf値 濾 紙 は 均 一 な 多孔 系 で,一. 見乾 燥 して い る. よ うに 見 え て も,な お20%前. 後の 吸 着 水を. その表 面 に 固 定 し て い る.故. に 濾 紙 の 一端 を. 水 と自 由に 交 通 し な い 溶 媒 中 に 浸 せ ば,毛 細 管現 象 に よ り溶 媒 は 吸 着 水 の間 隙 を 縫 つ て滲 透 す る.此 の 場 合吸 着 水 の 一 定 部 分 に の み, 溶質 混 合 物 が 溶 解 存 在 し て お れ ば,こ. れ は滲. 透 して来 た 溶 媒 の 中 え 漸 次 抽 出 さ れ る と共 に,溶 質 存 在 部 分 を 通 過 し 終 つ て,新. しい 吸. 着 永部 分 え滲 透 し た 溶 媒 は 今 迄 とか し て来 た 溶 質 を 再 び こ の 中 え とか し込 む こ とに な る. こ の よ うな現 象 が 溶 媒 滲 透 中 無 限 に く りか え され る ので あ る か ら,溶 媒 に 幾 分 で も可 溶 性 の溶質 は 漸 次 移 動 す るわ け で あ る. Pfは 溶 質 の移 動 距 離 と,溶 媒 の 滲 透 先 端. 第2節. 癌血清対熱非凝固物質 の ア ミノ酸組成. と溶質 を始 め に つ け た 点 と の距 離 の比 で,濾 紙,溶 媒,ア. ミ ノ酸 に よ り一 定 で あ る た め,. 分 配 率 の 差 に 基 い て 混 合 物 が 分 離 せ られ る こ とに な る.. 第3章 第1節. 實 験 成 績. 非癌血清対熱非凝固物質 の ア ミノ酸組成. 非 癌5例. 質 に つ い て実 験 した が,そ. の ア ミ ノ酸 組 成 は. す べ て 同 一 で あ り,第2図. は正 常 人血 清 対. 1) Leucine, Threonine,. の ア ミ ノ酸 組 成 は,. 2) Valine,. 腸 癌1例. の3例. に就 て 検 査 し. た が,そ. の ア ミ ノ酸 組 成 は す べ て 同 じ で あ つ. た.第3図. は 胃癌 患 者 の 血清 対 熱 非 凝 固 物 質. で,そ. の ア ミ ノ酸 組 成 に は,. 1) Leucine,. 2) Valine,. 3) Alanine, 4). Threonine, 5) Glycine, 6) Serine, 7) Gluta. の血 清 よ り抽 出 した 対 熱 非 凝 固 物. 熱 非 凝 固 物 質 で,そ. 胃 癌2例,直. 3) Alanine, 4). 5) Glycine, 6) Serine, 7) Glu. mic acid, 8) Aspartic acid, 9) Lysine, 10) Arginine, 11) Methjonine snlfone, 12) Proline, 14) Cysteic acid. そ し て非 癌 血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 に 比 較 し て増 量 し て い る Roberisの. 所謂. 15). 13). Tycosine及. Underglutamic. び 少 量 の acidと. 思.
(5) 奥. 670. わ れ るSpotを. 認 め た.こ. のSpotは. 島. 四. 郎. 1) Leucine, 2) Valine,. 非 癌血. 3) Alanine, 4). Threonine, 5) Glycine, 6) Serine, 7) Gluta. 清 対 熱 非 凝 固 物 質 の 中 に は 見 出 せ な い. 第3図. 団. mic acid, 8) Aspartic acid, 9) Lysine, 12). ノ1. Proline, 10). 13). Cysteic. Arginine,と. 認 め た.又. acidの. 11). Methionine. 著 明 な 14). 思 わ れ るSpotを. 他 に,少. 量 の. sulfoneを. Underglutamic. 認 め,Tyrosineが. acidと 発 見 出来. な い. 癌 血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 と 比 較 し てArginine, Lysineが. 少 い こ と,. Underglutamic. 量 で あ る こ と,又Tyrosineが. acidが 認 め. 大. ら れ な い. 点 に 興 味 が あ る.. 第4図. ノ1. 2. 2. 第3節. トキ ソ ホル モ ン の ア ミ ノ酸 組 成. 胃癌 組 織2例,直 1例 の 計4例. 腸 癌 組 織1例,乳. 癌 組織. よ り抽 出 した トキ ソホ ル モ ン の. 加 水 分 解 産 物 を 展開 した が,す ノ酸 組 成 で あ つ た.又. べ て同 じア ミ. 胃 癌 組 織2例. よ り銅 塩. トキ ソ ホル モ ン も作 成 し て 展開 した が,そ ア ミ ノ酸 組 成 及 びSpotの. の. 量 的 関 係 に トキ ソ. ホ ル モ ン と何 等 差 違 を 認 め な か つ た. 銅 塩 トキ ソ ホル モ ン展 開 に 際 し て は,そ 作 成 時 に 硫 酸 銅 を 使 用 し て い るた め,加. の. 水分 第4節. 解 産 物 の 減 圧 濃 縮 中 に 硫 化 水 素 ガ ス を 通 し,. ア ミ ノ酸 の 同 定. 生 じた 硫 化 銅 の 沈 澱 を 除 去 し て 展 開 し な け れ. (1). ば な ら な い.. 対 照 と し て カ ゼ イ ン加 水 分 解 産 物 の ア ミ ノ. 第4図. は 胃癌 組 織 よ り作 成 し た トキ ソ ホ ル. モ ン の 加 水 分 解 産 物 で あ る.そ 成は. の ア ミ ノ酸 組. カゼ イン の ア ミ ノ酸 組 成. 酸 組 成 を 検 査 し た.第5図 Leucine, cine,. Serine,. Valine,. に 示 す ご と く,. Alanine,. Glutamic. acid,. Threonine, Apartic. Gly acid,.
(6) 血清対熱 非凝固物質定量に よる癌診断法並にその本態的研究(Ⅱ). Proline, Methionine Tyrosine,. Cysteic. 認 め た が,. sulfone, acid等. Argrinine,. Lysine,. HistidineのSpot. 私 は カ ゼ イ ン の 加 水 分 解 産 物 中 にHistidine. の 明 ら か なSpotを. HistidineはAlanineと. 重 な りや. す く,又PhenylalanineはLeucineに. 重 なつ. た た め か,そ. (3). 671. を 判 然 と 断 定 出 来 な か つ た た め, Aeginine,. Serine,. Histidincを. れ ら を 判 然 と 分 離 す る こ と は,. 第5図. acid,. Alanine,に. 加 え て 展 開 を 行 つ た 所,第7図. に 示 す 如 く,. 私 の 方 法 で は 困 難 で あ つ た.. Glutamic. Leucine,. Alanineに. 近 く. Rf=0.68…. … 石 炭 酸. Rf=0.37…. … ル チ ヂ ン,コ. の 点 にHistidineのSpotを. リヂ ン 認 め た.. 第7図. 石 炭 酸(0.1%ア. ン モ ニア 水10%添. 加). 石 炭 ガ ス気流 中 (2). ア ミ ノ酸 混 合 物 の ク ロ マ トグ ラ ム. Leucine, cine,. Aspartic. Tyrosine,. Alanine,. acid,. Serine,. Cysteine, Glutamic. acid,. 石. (Gly の. (4). トキ ソ ホ ル モ ン に ヘ キ ソ ン 塩 基 の ア ミ ノ酸 が 少 く,一 Arginine,. 第6図. →. ム. 現 し,そ れ ら 個 々 の ア. ミノ酸 を 同定 す る こ とが 出 来 た.. 酸. ヘ キ ソ ン 塩 基 ア ミ ノ酸 の ク ロ マ トグ ラ. 標 品 を 混 合 し,蒸 溜 水 に 溶 か し て 展 開 す る と, 第6図 の如 きspotを. 炭. 般 に 石 炭 酸 溶 媒 で は,そ Lysine或. び 難 い た め,ト. はHistidineの. れ ら. 展 開 が 伸. キ ソ ホ ル モ ン加 水 分 解 産 物 中. に そ れ ら ア ミ ノ酸 を 加 え て 展 開 を 行 つ た.第 8図. に 示 す 如 く,. のSpotは. Arginine,. 大 き く生 じ,そ. Lysine. Histidine. れ らの 位 置 に間違. い の 無 い こ と が 明 ら か に な つ た. (5). dl‑glutamic. Kogl及 拘 ら ず,癌. acidのSpot. び そ の協 力 者 に 多 く の 反 対 者 に も 組 織 に は 正 常 組 織 と異 つ て 非 天 然. 型 の ア ミ ノ酸(特. にd‑glutamic. し て い る と主 張 し て い る.(生. acid)が. tamic. acidが. 存在. 体 内 に はl‑glu. 存 在 し て い る).. 私 は 中 原 の トキ ソ ホ ル モ ン 及 び 癌 血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 中 に,. 石 炭. 酸 →. mic. acidと. Robertsの. 思 わ れ るSpotを. 所 謂Undergluta 認 め,上. 述 の実.
(7) 672. 奥. 島. 団. 四. 第8図. 郎. 第5節. 私 の行 つ たRf値. 及びその. ニ ン ヒ ドリ ン に よ る 呈 色. 上 述 の如 くRf値. は,濾. 酸 を 一 定 に す れ ば,大. 紙,溶. 媒,ア. ミノ. 凡 一 定 値 を と るが,然. し ヘ キ ソン塩 基 ア ミ ノ酸 の 石 炭 酸 展 開 の 如 く,ア. ミ ノ酸 の種 類 に よ り,又 操 作 の 相 違 に. よつ て 相 当Rf値. に も変 動 を 生 ず る こ と あ. り,先 人 の 発 表 した 成 績 も必 し も一 致 した も の とは い え な い.結 局 研 究 者 が 経 験 に よ り溶 媒 を 定 め,ア. ミ ノ酸 を 同 定 し てRf値. 定 しな け れ ば な らな い.表2は,私 得 た ア ミ ノ酸 のRf値. を決. が検 出 し. 及 び ニ ン ヒ ド リン に よ. り呈 色 さ れ た 色 調 を 示 す もの で あ る.. 石 験 の 如 く,そ. 炭. 酸. のSpotと. →. ま ぎ らわ しい ア ミ ノ. 酸 を 用 い て そ れ ら を 除 外 し た が, acidが. こ のSpotと. べ る た め,次 味 の 素(グ. d‑glutamic. 如何 な る関係 に あ るか調. の様 な 実 験 を試 み た . ル タ ミ ン 酸 ナ ト リ ュ ム)を30%. 醋 酸 で 再 結 晶 し,生 を200℃,. 表2. じ た 遊 離 のGlutamic. 5時 間 油 槽 で 処 置 し,更. 酸 で5〜7時. 間 還 元 し て,. 作 つ た. Histidine及. acid. に5%塩. dl‑glutamic. acidを. び 正 常 人血 清 対 熱 非 凝 固. 物 質 を 対 照 と し て,. dl‑glutamic. 開 を 行 う に,第9図. に 示 す よ う なSpotを. め た.即 mic. ちdl‑glutamic. acidと. 同 じSpotに. acidも. acidを. 混 じ展 認. 通 常 のGluta. 呈 色 され る こ とが 明. ら か に な つ た.. 第9図. 第4章 第1節 1948年Winzler. 考. 案. チ ロジ ン に 就 て &. DevorはPerchloic. acid. に 可 溶 で,燐. タ ング ス テ ン 酸 に 沈 澱 す る所 謂. Mucoproteinの. 中 のTyrosineをKlett. sonの. 比 色 計 を 用 い 定 量 し,癌. summer 血 漿 中で は非. 癌 血 漿 中 に 比 べ 著 し く増 量 し て い る こ と を 認 め て い る.私. 石. 炭. 酸. →. し,水. も又 血 清 中 の 熱 凝 固 蛋 白 を 除 去. 溶 性 で,ア. ル コ ール に 沈 澱 す る 物 質.
(8) 上 血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 定 量 に よ る癌 診 断 法 並 に そ の本 態 的 研 究(Ⅱ). (血 清 対 熱 非 凝 固 物 質)の 癌 に 比 べ,. Tyrosineが. 中に癌 の場 合 は非. 増 量 し て い る 事実 を 濾. 紙 ク ロマ トグ ラ フ ィ で 認 め た. Duboff. &. Hirshfeld. 対 熱 非 凝 固 物 質 を 展 開 し た 結 果,所 glutamic. acidと. 一 致 せ るSpotに. 見 出 し た の で あ る.そ. (1946)等. は癌 血清 中. 673. が 展 開 せ ず に,こ. 謂Under 同 じSpot. し て 或 は 他 の ア ミ ノ酸. のSpotに. には チ ロジ ナ ー ゼ 阻 止 物 質 が 増 量 し て い る こ. な い か と 考 え,. とを 認 あ,こ. れ を 診 断 法 と し て も使 用 出 来 る. 等 ヘ キ ソ ン 塩 墓 の ア ミ ノ 酸 は も と よ り,. と述 べ た.チ. ロジナ ーゼ は チ ロジ ンを酸 化 さ. Aspartic. せ る 酵 素 で あ る.即. ち癌 血清 に は チ ロジナ ー. ゼ 阻止 物 質 が 増 量 す る た め,チ. acid,. Alanine, dl‑Glutamic. 作 用量 が 減 少 す る か ら チ ロ ジ ン の 酸 化 され る. こ のSpotに. 果 に な る と考 え られ る.故. Spotは. 固物 質 に は 非 癌 に 比 べ て,チ. ロジ ンが増 量 し. て い る こ と も推 測 さ れ 得 る こ とで あ る. 組. 作 り,展. に 大 量 存 し,非. acidが. トキ ソ ホ ル モ ン. 癌 血 清対 熱 非 凝 固物 質 に は存. 血清 対 熱 非 凝 固 物 質 中 に 少 量 な り. と も存 在 す る こ と は 興 味 あ る こ と ゝ思 わ れ. を認 め な か つ た こ とは 如 何 な る関 係 に よ る も. て い るPolypeptidで. ので あ ろ うか.昭 和9年. 宮 尾 氏 は ア ミ ノ酸 が. 究 に 俟 た な け れ ば な ら な い.. 腫 瘍 発 育 に 及 す 影 響,及. び腫 瘍 組織 呼 吸 に 及. を 抑 制 す る が,腫. 腫 瘍 の 発育. 更に. 相 当 す る場 所 に は 何 等 認 む べ き. る.然. い る.そ れ に よ る とTyrosineは. Cysteine. 開 し比 較 し た が,. 織 か ら抽 出 し た トキ ソ ホ ル モ ン に はTyrosine. す 影 響 に つ い て,白 鼠 を 用 い 詳 細 に 観 察 し て. Glycine,. な か つ た.. 在 せ ず,癌. 然 るに 同 じ対 熱 非 凝 固 物 質 で あ る が,癌. acidも. Histidine. acid, Serine,. Tyrosinc,. こ のUnderglutamic. に癌 血 清対 熱 非凝. Lysinc,. Glutamic. Leucinc,. ロジナ ーゼ の. ことが 少 くな り,結 局 チ ロ ジ ンが 増 量 す る 結. Argininc,. 現 わ れ た ので わ. し そ れ が 事 実 数 種 の ア ミ ノ酸 か ら 成 つ あ る か 否 か は 今 後 の研. 第3節. アル ギ ニ ンの意義. 癌 組 織 及 び 担 癌 動 物 組 織 に,ヘ の ア ミ ノ酸 特 にArginineが. キ ソン塩 基. 増 量 す る とゆ う. 瘍 の 組 織 呼 吸 を促 進 す る と. 報 告 も 多 数 あ る.森. の 見 地 か らす る と トキ ソ ホ. ェ ロ ー に よ る 肝 癌 成 生 過 程 に 於 け る,白. 鼠の. ル モ ンに は 腫 瘍 の発 育 を 抑 制 す る 物 質 で あ る. 血 清 な ら び 各 臟 器 の 遊 離 のArginine量. が,. Tyrosineを. 実 験 開 始 よ り50日. い わ れ て い る.そ. 認 め ず,癌. 血 清 対 熱 非 凝 固物 質 の. は 最 近 ア ゾ色 素 バ タ ー イ. 前 後 で 最 高 に 達 し,段. 々. 中 に は 腫 瘍 の 組 織 呼 吸 を 促 進 す るTyrosineが. 減 少 し て 元 に 復 す こ と よ り,こ. 増 量 し て い る と推 測 さ れ 得 る こ と で あ る.. 量 の 増 加 を 前 駆 状 態 の 一 つ の手 が か り と し て. 第2節. Underglutamic. 1949年Roberts 物 か ら,ル. Tischkoffは. チ ヂ ン,コ. Underglutamic た.こ. &. acidと. 就 て. 指 摘 し て い る.私. 癌組 織 抽 出. リ ヂ ン の 展 開 に よ つ て, 命 名 せ る ものを発 見 し. れ は マ ウ ス,人,蛙. 細 菌 等 に 存 在 し,人. acidに. の 組 織 中,又. 植物. 及 び マ ウ スの血漿 中に は. 認 め ら れ て い な い.そ. し て酸 加 水 分 解 で は 発. 見 さ れ て い な い.更. に1949年Roberts. Krankel等. のUnderglutamic. め,遊. 離 の ア ミ ノ酸 と し て 検 出 す る こ と は 行. わ な か つ た か ら,森 出 来 な い が,血. 清 対 熱 非 凝 固 物 質 の 中 に は,. 癌 も非 癌 も著 明 の 差 を 認 め ず,ト ン のArginine量. 第5章. 上. して こ. 私 は 癌,非. ソ ホ ル モ ン(中. 原)の. Partion. て い るPolypeptidで. あ ろ う と推 論 し て い る.. 如 き 結 果 を 得 た.. 私 は10%塩. 間100℃. 温浴 中で 加 水. キ ソホル モ ン及 び癌 患者 血 清. (1) は,. 結. 論. 癌 血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 及 び トキ. ア ミ ノ酸 か ら構 成 さ れ. 分 解 を 行 い,ト. キ ソホ ル モ. は か え つ て 少 量 で あ つ た.. れ は 少 く と も9‑10の. 酸 で24時. の 実 験 と比 較 す る こ と は. &. acidが. 皮 癌 の 場 合 増 量 す る こ と を 認 め た.そ. の実験 で は癌 組 織及 び癌 血. 清 を 種 々 操 作 した 対 熱 非 凝 固 物 質 で あ る た. は マ ウ ス の 上 皮 及 び 上 皮 癌 の抽 出. 物 を 比 較 し,こ. のArginine. Chromatographyを. ア ミ ノ酸 組 成 をPaper 応 用 し て調 べ 次 の. 癌 血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 の ア ミ ノ酸 組 成 Leucine,. Valine,. Alanine,. Threonine,.
(9) 674. 奥. Glycine,. Serine,. Proline,. Methionine. Cysteic. acid,. Underglutamic 出 現 を 見 た.. Glutamic sulfone,. Tyrosinc,及 acidと. Aspartic. Lysine,. acid,. び 所 謂Robertsの. 成 は,癌. 少量. 非 癌 の 時 と比 較 し て. の ア ミ ノ酸 組 成 は か わ ら な. 郎. Valine,. Alanine, Serine,. Threonine,. Glycine. Glutamic. acid,. Lysine,. Arginine,. sulfone,. Cysteic. Aspartic. Methionine. びRobertsのUnderglutamic るSpotの. 非 癌 血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 の ア ミ ノ酸 組 血 清 の 時 と 比 較 し て,. わ れ るSpotが. Tyrosineが. のUnderglutamic. 思. 点 を 認 め ら れ る.. acidと. 見 出 せ な い.. 癌 組 織 の対 熱 非 凝 固 物 質 で あ る 中 原 氏. の トキ ソ ホ ル モ ン の ア ミ ノ酸 組 成 はLeucine,. 思 われ. 癌 血 清 対 熱 非 凝 固 物 質 に 比 較 し て,一. い こ と,. 及. 大 量 出 現 を 見 た.. 少. Tyrosineが. acid,. acidと. ヘ キ ソ ン塩 基 ア ミ ノ酸(特. い,又RobertsのUnderglutamic. (3). 四. Proline,. い. (2). 団. acid,. Arginine. 思 わ れ るSpotの. Tyrosinoは. 増 量 し て い る.他. acid,. 島. にArginine)が. 現 れ な い こ と,及 acidが. (本 論 文 の 要 旨 は 第10回. 般に 少 び大量. 存 す る こ と等 に 相 違. 日本 癌 学 会 総会 に 於 い て. 報 告 した.) (文 献 は 第3編. の終 りに ま とめ て報 告 す る.).
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