ライソゾーム蓄積賞の酵素学的診断

68 ( 東 女 医 大 誌 第

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巻 第

5

号)

頁

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昭和

5

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年

5

月

〔臨床報告〕

ライソゾーム蓄積症の酵素学的診断

東京女子医科大学 小児科学教室(主任:福山幸夫教授〉 イズミ タツロウ ヤ マ グ チ キ ヨ コ フクャマ ユ キ 才

泉

達 郎 ・ 山 口 規 容 子 ・ 教 授 福 山 幸 夫

( 受 付 昭 和

5

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年

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月

2

7

日〉 はじめに ライソゾーム蓄積症とはライソゾーム内におけ る

mucopolysaccharides

や

sphingolipids

，

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の分解酵素の遺伝的異常に起因する 疾患である.本症は進行性の変性所見や

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様顔貌，

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などの病歴や臨床所見よ り診断を疑うことはできるが，発症年齢が遅く， 知能障害の少ない成人型や，不随意運動や失調を 主訴とする非定型例の報告も多く I) 71 診断確定 には欠損酵素の検索が重要である.現在では本症 の大部分において原因欠損酵素が明らかとなり， また，合成基質の開発や，血液や尿などの臨床材 料を用いた酵素診断法により比較的容易に本症の 診断が可能である. われわれは臨床研究及び臨床検査の一環とし て，

1

9

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2

年

6

月よりライソゾーム酵素活性測定に よるライソゾーム蓄積症のスクリーニングを始め ているが，現在までの実態とその成績を検討し， 日常診療の一助となるよう，その結果をまとめ， 報告する. 材料と方法 材料としては血液(白血球と血清〉や生検組織， 剖検組織を使用した. 1.白血球分離

10ml

ま た は

20ml

の

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に約

0.05ml

のへパリンを入れ，

5

-10ml

の静脈血を 採血した後，

Snyder

らの方法に従って白血球を分 離した8) 他病院より依頼の場合は操血後常温の まま輸送してもらい，白血球分離，酵素活性の測 定を行なっているが，輪送のため採血から分離ま で

5-6

時間の遅れがあっても，酵素活性にはな んら影響を認めなかった.分離白血球や生検・剖 検組織は測定までは

7

0

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C

で凍結保存して行なっ た.

2

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ライソゾーム酵素活性測定 大 部 分 は 合 成 基 質

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の 至 適

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で，

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，

20-60

分間の加温下で測定した(表1). 結 果

1

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年

6

月から

1

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4

年

1

月までの間にわれわれ が測定依頼を受けた検体は，表

2

に示した如く合 計

6

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例で，その大部分は白血球であった.陽性所 見 は

metachromatic leukodystrophy

と

GM

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の各

1

例で，陽性率は

3.3%

であっ た.また，

2

例とも神奈川県立こども医療センター よりの依頼例であった. 症 例

l

患者:

Y

.

T

.

C

2

歳

0

カ月，男児，神奈川県立こ ども医療センター)

1

歳頃まではほぼ正常に発達し，つかまり歩き が可能であったが，その後歩行時に内反尖足位を

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-450-69 ライソゾーム蓄積症 表 l ライソゾーム蓄積症ー欠損酵素 調u 定 基 質 欠 損 酵 素 1.Sphingolipidosis arylsulfatase A ceramidase galactocerebrosidase αgalactosidase βgalactosidase βーglucosidase β-hexosaminidase A A and B Metachromatic leukodystrophy Farber's lipogranulomatosis Krabbe's disease Fabry's dis培ase GM1-gangliosidosis Gaucher's disease Tay-Sachs disease M U， PNP Ceramide Galactosylceramide M U M U M U M U Sandhoff's disease MU sphingomyelinase Cactivator protein)AB variant Niemann-Pick disease M U Sphingomyelin 2. Mu

∞

polysaccharide stor昭 ediseases arylsulfatase B Maroteaux-Lamy syndrome A and othβ:r sulfatases Multiple sulfatase deficiency β-glucuronidase heparan N -sulfatase αーhexosaminidase α-iduronidase iduronate sulfatase 乱

m

，PNP MU. PNP βGlucuronidase deficiency Sanfilippo syndromeCsubtype A) Sanfilippo syndromeCsubtype B) Hurler. Scheie. HurlerlScheie syndromes Hunter syndrome α-glucosidase 世mannosidase 3. Disorders of glycoprotein de呪radation α-fuc口sidase Fucοsidosis Pompe disease Mannosidosis 4. Mucolipidosis M U Heparin PNP M U Disulfated disaccharide U U U M M M neuraminidase Sialidosis M U most glycosidases and I-Cell disease and Pseudo-Hurler

sulfatases low in fibroblasts. polydystrophy M U several elevated in serum MU: 4.methylumbelliferone. PNP: p-nitrophenol 表2 酵 素 測 定 依 頼 数 病 院 ・ 科 別 分 類 東京女子医大 小児科 22 神経内科 14 循環器小児科 第三病院小児科 1 神奈川県立こども医療センター 8 横浜市立大 小児科 5 横浜市立市民病院 3 福島医大 小児科 2 松戸Fリ ニ ッ ク 2 順天堂大 神経内科 北里大 小児科 J口L _言十 60_例 取るようになり，矯正靴， リハビリを行なうも

1

歳

5

カ月には歩行不能となり，発語も消失した.

1

歳

8

カ月には上下肢とも伸展し，後弓反張位を 示した.髄液蛋白質の上昇

(

7

8

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l)と末梢神 経 伝 導 速 度 の 著 明 な 低 下 よ り

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を疑い，排骨神経生検で異染性物 質の蓄積を確認し，更に，

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の欠損

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と確 定診断した. 症 例

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患者:

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歳，男児， 1.神奈川県立こど も医療センター，

2

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東京女医大小児科

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l歳頃までは正常に発育し，発語や歩行も可能 であったが，その後，水痘と流行性耳下腺炎，麻 疹に連続して擢患し，知能歩行障害等の退行を示 したため，

3

歳

5

カ月時当科に入院検査を受けた.

GOT

8

8

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.

LDH 728mU/ml

と軽度の異常所見を 認めたが，ウイルス感染症による重度脳障害と考

-451-70 え，ライソゾーム酵素の検索はなされず，経過観 察をした.10歳現在，退行変性が進行し，

CT

上で 脳萎縮を認め，補助椅子にて坐位保持が可能な程 度にまで退行した.神奈川県立こども医療セン ターよりの依頼にてライソゾーム酵素活性を測定 しβ-galactosidase 3 _ Onmoles/mg protein/hr (M

:

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SD: 60_2

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13_7)と著明な低下を認め，酵 素 活 性 の 測 定 に よ っ て は じ め てG M1・ gang-liosidosisと診断した. 考察とまとめ ライソゾーム蓄積症の大部分において欠損酵素 が同定され，酵素学的診断は可能ではあるが，現 時点におけるわれわれの研究室での一般測定は人 工 基 質 に よ る も の の み で あ り ， GM2・ gang-liosidosisのA Bvariant (表1)のように人工基 質での測定では病態を反映しないこともあり，蓄 積物質の検討もあわせて行なうべきであろう. 適切な酵素活性測定は患者の診断だけではな く，保因者の同定，更には，羊水細胞による胎児 診断も可能となり得る. 今後とも，迅速な結果報告に心掛けるだけでな く，診断精度の向上，天然基質による酵素活性の 測定，蓄積物質の検索，更には，測定酵素数の増 加を目指すとともに，病態の本質や発生原因を究 明し，予防及び治療への一助となることを期待し， 更に検討中である. 最後に，ライソゾーム蓄積症の個々の疾患に関 する臨床や病理，生化学所見に関する詳細な文献 として Stanburyらの教科書9)やその他の文献報 告が1仲間が重要と思われるので羅列した. 本研究の一部は文部省科研費，奨励研究(A) (No. 58770704 (T_1))，厚生省神経疾患研究委託費 I脳 障害を伴う先天代謝異常の病態に関する研究J(No. 82-08-10 (K Y))，厚生省神経疾患研究委託費 I出 生前要因による脳障害の成因並びに治療に関する臨 床的基礎的研究J(No. 83-05-01(Y_ F))によって行 なわれた. 酵素測定は小児科研究室杉山都子嬢の技術協力の 下で行なわれており，深謝致します. -452-文 献 1)Goldberg， M.F.， E. Cot1ier， L.G. Fichenscher， et al.: Macular chery-red spot， corneal cloud -ing， and β-galactosidase deficiency. Arch 1n -tern Med 128 387-398 (1971) 2) O'Brien， J.S.， E. Gugler， A. Giedion， et al. : Spondylepiphyseal dysplasia， corneal clouding， nonnal inte1ligenc巴andacid β-galactosidase

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5) Oonk， J.G.W.， H.J. van der Helm and J.J. Martin: Spinocerebellar degeneration: Hex-osaminidase A and B deficiency in two adult sisters. Neurology 29 380-384 (1979) 6) Young， R.， G. Kleinman， R.G. Ojemann， et

al.: Compressive myelopathy in Maroteaux-Lamy syndrome: Clinical and pathological findings. Ann Neurol 8 336-340 (1980) 7) Kobayashi， T. and K. Suzuki: Chronic GM1

gangliosidosis pr巴sentingas dystonia : 11.Bio

-chemical studies. Ann Neuro19 476-483 (1981)

8) Snyder

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R.A. and R.O. Brady: The use of white c巴l1sas a source of diagnostic material for lipid storage diseases. Clin Chim Acta 25 331-338 (1969)

9) Stanbury

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J.B.

，

J.B. Wyngaarden and D.S. Fredrickson (eds.)・ Tnemetabolic basis of inherited disease. 5th ed. McGraw-Hil1， New York (1983) 10)鈴木義之:グリコシターゼ測定.小児神経学の進 歩 6201-213 (1977) 11)桐 佑 畏 ・ 福 岡 和 子 ・ 桜 庭 均 ・ 他 : 遺 伝 性 リ ソ ゾーム病の生化学的診断 東大小児科における9 年間の診断成績一.小児科診療 45772-776 (1982) 12) Suzuki

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golipidosis. Methods Enzymol 50 456 -488 (1978)

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