簡 易 骨 髄 組 織 培 養 法 に 関 す る 研 究
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(2) 1380. 大. 0.02%と. し,こ. 度 は0.01%と. 亀. 学. れ を培 地 に加 え る事 に よつ て培 地濃. 第1表. 健 康 人 骨髄 好 中球 中 性 紅生 体染 色. な る.. 実 験 器 具 は メ ス を除 き他 はす べ て 乾 熱 滅 菌 して用 い た. 実 験 方 法: 血 清 及 び 添 加 液 は1ccツ. ベ ル ク リ ン注 射 器 で1/3. 針 を 使 用 し 量 比 を 一 定 に し た.先. づ 骨髄 穿刺 液 中の. 組織 液 中の 組織 片 を取 り出 して リンゲ ル氏 液 で 充 分 洗 い,載. 物 硝 子 上 に 血 清1滴. 円 形 に 拡 げ る.次. を 置 き直 径1.5cmの. にそ の 中央 に骨髄 組織 片 を置 い て. そ の 上 に 予 め ビ タ ミ ンBl2(100γ/cc)溶 し た0.02%中. 性 紅 溶 液1滴. 中 性 紅 溶 液 と す る.そ. 液 と混 和. を 滴 下 し培 地 濃 度0.01%. の 後 そ の 上 を 被 覆 硝 子 で 覆 い,. 周 囲 を パ ラ フ ィ ン に て 密 封 し,艀. 卵 器(37℃)に. 覆 硝 子 の 面 を 下 に 向 け て 入 れ る.観. 第1図. 健 康 人 骨髄 好 中球 中 性 紅生 体 染色 (10例 平 均 値). 被. 察 す る時 は 再 び. 元 に 戻 し て 油 浸 対 物 レ ン ズ に よ り観 察 す る. 染 色 度 の 強 さ は 教 室 田 村19)の 方 法 に 準 じ た.即. ち. (‑):全. く染 色 顆 粒 を 認 め な い もの.. (+):少. 数 の 染 色 顆 粒 を 認 あ る も の.. (++):中. 等 数 以上 の染 色 顆 粒或 は少 数 の 融 合膨. 化 し た 顆 粒 を 認 め る も の. (+++):多. 数 の染 色 顆 粒 或 は 中等 以 上 の融 合 膨 化. で は0.42, 24時 間で は0.23を 示 し,中 性 紅溶 液添加. し た 顆 粒 を 認 め る も の. 以 上 の 基 準 の も と に 増 生 帯 中 間 部 の 白 血 球 数100 個 を 数 え,細. 胞1個. の 平 均 染 色 度 を 算 出 し た.. 観 察 は 中 性 紅 溶 液 添 加 後1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 12, 24時 間 と時 間 を 追 つ て 行 つ た.. 後4時 間が 最 高 で 以後 漸 次 裾 色 した. B.. 諸 種 血液 疾 患 々者 骨 髄. 1.. 白血 病. 1). 急 性 骨髄 性 白血 病. 重症 の3例 に つ い て夫 々平 均 染色 度 を求 め るに, 第3章 A.. 実. 験. 成. 績. 第2表,第2図. 健 康 人 骨髄. 第2表. 健 康 人10例 に つ い て 夫 々 増 生 帯 中 間 部 の 成 熟 好 中 球 の 平 均 染 色 度 を 求 め た.即 時 間 で は 最 高0.62,最 最 低0.64,3時 で は 最 高1.22,最 低0.84,. 低0.50,. 2時 間 で は 最 高0.86,. 間 で は 最 高1.05,最 低1.06,5時. 低0.52,. 低0.86,4時. 低0.70,9時. 低0.20を. は0.96,. 3時 間 で は0.90, 6時 間 で は0.82,. 間 で は0.56,. 低. 示 し た.又. 10例 平 均 値 の 平 均 染 色 度 は 第1表,第1図. 0.73,. 間で. 12時 間 で は 最 高0.56,最. 24時 間 で は 最 高0.28,最. くで 中 性 紅 溶 液 添 加 後1時. 間. 間 で は 最 高1.12,最. 6時 間 で は 最 高0.98,最. は 最 高0.68,最 0.32,. ち 中 性 紅 溶 液 添 加 後1. に示 す 如 2時 間 で は. 4時 間 で は1.12, 9時 間 で は0.62,. 5時 間 で 12時 間. の 如 く中 性 紅 溶液 添 加 後1時 間 では 急 性 骨 髄 性 白血 病 患者 骨髄 内好 中 球 中性 紅 生 体 染色.
(3) 簡 易 骨髄 組 織 培 養法 に関 す る研 究 第2図. 1381. 症 状 の 比 較 的 軽 い 亜 急 性 型 の2例. 急 性 骨髄 性 白血 病 患 者 骨 髄 内 好 中 球 中性 紅 生 体 染色. に つ い て夫 々平. 均 染 色 度 を 求 め る に,第3表,第3図 溶 液 添 加 後1時 0.85,. 間 で は0.97, 0.36,. 3時 間 が 最 高 で1.91,. 時 間 で は1.70, で は1.02,. 2時 間 で は1.43,. 1.41,以. 後 腿 色 し始 め4. 1.08, 5時 間 で は1.45,. 0.76,. 9時 間 で は0.75,. 0.50, 0.32, 24時 間 で は0.25, て 早 期 に 高 度 に 染 色 し,且 2). の 如 く中 性 紅. 0.91, 6時 間. 0.52, 12時 間 で は. 0.12で,健. 康 人 に比 し. 急 速 に 腿 色 し た.. 慢 性 偶髄 性 白 血 病. 3例 に つ い て 夫 々 平 均 染 色 度 を 求 め る に,第4表, 第4図 1.62,. 1.71,. 1.51,. 2時. 以 後 腿 色 し 始 め3時 で は1.44,. 1.77,. 時 間 で は0.99, 0.60,. 12時. 0.20,. 0.22で,健. 間 で は1.70,. 1.52, 0.91,. 間 が 最 高 で2.06,. 5時 0.95,. 間 で は0.44,. 1.81,. 間 で は1.31,. 0.33,. 9時. 2.00, 1.85,. 4時 1.22,. 間 で は0.62,. 0.45,. 24時. 第4表. 2.03,. 1.16,. の 如 く 中 性 紅 溶 液 添 加 後1時. 間 で は1.04,. 慢 性 骨 髄 性 白血 病 患 者 骨髄 内好 中 球 中 性 紅生 体染 色. 間 6. 0.58,. 間 で は0.14,. 康 人 に 比 し て 早 期 に 高 度 に 染 色 し,. 且 腿 色 も 急 速 で あ つ た.. 第3表. 亜 急 性 骨 髄 性 白血 病 患 者 骨髄 内 好 中球 中性 紅 生 体染 色. 第4図. 慢 性骨 髄 性 白血病 患 者 骨 髄 内 好 中 球 中性 紅 生 体 染 色. 第3図. 亜 急性 骨 髄 性 白 血病 患 者 骨髄 内 好 中球 中性 紅 生 体 染色. 1.19,. 0.59,. 高 で2.33, 2.27,. 1.95,. で は1.73,. 2時 2.08, 0.94, 1.75,. 時 間 で は1.18, 0.14で,健. 間 で は1.93, 1.14,以 5時 0.53, 0.98,. 1.78,. 後 腿 色 間 で は2.10, 9時. 0.20,. 0.78,. し 始 め4時 1.90,. 間 で は1.44, 24時. 3時. 0.77, 1.32,. 間 で は0.86,. 間 が最 間で は 6時. 間. 0.39,. 12. 0.74,. 康 人 に 比 し て 早 期 に 高 度 に 染 色 し た が,. 槌 色 は 緩 慢 で あ つ た..
(4) 1382. 大. 3). 亀. 単 球 性 白血 病. 学. 第6表. 再性 不 良性 貧 血 患 者 骨髄 内 好 中球. 2例 につ い て 夫,平 均 染 色度 を求 め るに,第5表, 第5図. 中 性 紅生 体染 色. の如 く中 性紅 溶 液 添 加 後1時 間 で は1.84,. 第5表. 単 球 性 白血 病 患 者 骨髄 内 好 中球 中 性紅 生 体 染 色. 第6図. 第5図. 再 性 不 良 性貧 血 患 者 骨 髄 内好 中球 中 性 紅生 体 染色. 単 球 性 白血 病 患 者 骨髄 内好 中球 中 性 紅 生体 染色. 2.00,以. 後 腿 色 し 始 め4時. 1.22, 6時 間 で は0.92,. 間 で は1.62,. 5時 間 で は. 9時 間 で は0.63,. 12時 間 で は. 0.36, 24時 間 で は0.20で,健 度 に 染 色 し.且. 康 人 に 比 し て 早 期 に高. 急 速 に 腿 色 し た.. Ⅲ . 無 顆 粒 細 胞症 1.00, 2時 間 が 最 高 で2.14, 2.25,以 始 め3時. 後 急 速 に槌 色 し. 間 で は0.79, 1.10, 6時 間 で は0.58, 0.82, 9時 間 で は 0.31, 0.50, 12時 間 で は0.24, 0.17で,健. 0.33, 24時 間 で は0.10,. 康 人 に 比 し て 早 期 に 高 度 に 染 色 し,且 早. 期 に 褪 色 し た.Ⅱ . 再 生 不 良 性 貧血 3例 に つ い て 夫 々 平 均 染 色 度 を 求 め る に,第6表, 第6図. の 如 くで そ の 中2例. は 中 性 紅 溶 液 添 加 後1時. 間 で は1.70, 1.62, 2時 間 が 最 高 で2.15, 2.43,以 色 し 始 め3時. 間 で は2.11, 2.38,. 2.09, 5時 間 で は1.30, 1.58,. 後腿. 4時 間 で は1.78,. 6時 間 で は1.10, 1.20,. 9時 間 で は0.64, 0.58, 12時 間 で は0.47, 0.26, 24時 間 で は0.12, 0.10を 示 し,他 後1時. 第7表,第7図. に 示 す如 く平 均 染 色 度 を求 め るに,. 間 で は1.50, 1.80, 4時 間 は1.04, 1.20, 5時. 間 で は1.75,. の1例. は 中 性紅 溶液 添加. 2時 間 で は1.83,. 3時 間 が 最 高 で. 第7表. 無 顆 粒 細 胞 症 患 者骨 髄 内 好 中球中 性 紅 生 体 染色.
(5) 簡易 骨髄 組 織 培養 法 に関 す る研究 第7図. 無 顆 粒細 胞 症 患 者 骨髄 内 好 中球 中 性紅生体染色. 間 で は1.68, 3時. 1.61,. 6時. 1.32,. 1.20,. 12時. 0.71,. 0.67,. 0.73を. 6時. 1.02,. 3時 間 で は0.55,. 間 が 最 高 で0.85,以. 後腿色 し. 間 で は0.63,. 6時 間 で は0.54,. 9時 間 で は. 始 め5時. 4時. 0.23, 12時 間 で は0.18, 24時 間 で は0.03で,健. 康人 に. 比 し て 低 値 を 示 し た.Ⅵ. 1.94,. 5時. 1.68,. 2時. 間 で は1.97, 9時. 1.10, の1例. 間 で は1.91,. 1.08,. 間 で は1.86,. 9時. 間 で は1.16, づれ. 1.92,. 24時. 間で は. は中 性紅 溶液 添 加. 4時. 間 で は0.69で,い. 1.85,. 間 で は1.44,. 間 が 最 高 で2.25,以. 早 期 に 高 度 に 染 色 し た が,腿. V.. 2.03,. 後 腿 色 し 始 め4. 1.50,. 示 し,他. 間 で は1.23,. 24時. 間 で は1.94, 2.13,以. 間 で は1.02,. 間 で は1.54,. 52,. 2時. 2.22,. 間 で は1.79,. 始 め3時. 2時 間 で は0.32,. 2.05,. 1.67,. 後1時. 間 で は0.25,. 1.53,. 間 が 最 高 で2.24,. 時 間 で は2.14,. 中 性 紅 溶 液 添 加 後1時. 1383. 後 腿 色 し. 5時. 間 で は1.. 12時. 間 で は. も 健 康 人 に比 し て. 色 は 緩 慢 で あ つ た.. 悪 性 貧血. 第9表,第9図. に示 す 如 く治療 前,治 療後 の平 均. 染 色度 を求 め るに,治 療 前 は 中性 紅 溶 液 添 加後1時 第9表. . 本態 性 低 色 素性 貧 血. 悪 性 貧 血 患 者 骨髄 内好 中 球 中性 紅 生 体染 色. 4例 に つ い て 夫 々 平 均 染 色 度 を 求 め る に ,第8表, 第8図. の 如 くで そ の 中3例. 第8表. は 中 性 紅 溶 液 添 加 後1時. 本 態 性 低色 素 性 貧血 患者 骨 髄 内 好 中 球 中性 紅 生 体 染色. 第9図. 悪性 貧血 患者 骨 髄 内 好 中球 中性 紅 生 体 染色. 第8図. 本 態 性低 色 素 性 貧血 患 者骨 髄 内好 中球 中性 紅 生 体 染 色. 間 で は1.85,. 2時 間 が 最 高 で2.32,以. 後 腿 色 し始 め. 3時 間 で は2.17,. 4時 間 で は2 .00, 5時 間 で は1.68 ,. 6時 間 で は1.28,. 9時 間 で は0 .88, 12時 間 で は0 .37,.
(6) 1384. 大. 24時 間 で は0.11で,健. 亀. 学. 康 人 に比 して早 期 に高 度 に染. 生 体 染 色 を 物理 化 学 的 に観 る と,細 胞内 に侵入 し. 色 し,且 腿 色 も早 か つ たが,治 療 後 は 中 性紅 溶 液 添. た色 素 粒 子 は細 胞 顆 粒 に 静電 気 的 に吸着 され て その. 加後1時. 遊 離 エ ネルギ ーを 減 少 す る.色 素 の排 泄 に よ り周囲. 間で は1.01,. 2時 間で は1.46, 3時 間 で は. 1.90, 4時 間 が 最 高 で2.02,以 後 腿 色 し始 め5時間. の 色 素濃 度 が 減 少す る と顆 粒 表面 に於 け る吸着手 衡. で は1.67, 6時 間 で は1.54, 9時 間 で は1.10, 12時 間. は破 れ て,結 合 して い た色 素 は再 び遊 離 して徐 々に. で は0.87, 24時 間 で は0.49で,健. 細 胞 外 に去 る もので あ る.. 康 人 に比 して高 度. に染 色 した が,腿 色 は 緩 慢 で あつ た.. 藤 浪31)は 高 等 動 物 の死 戦期 に超 生 染 性 が 強ま る の は,細 胞 膜 の透 過 性 に 変化 を来 し,多 量 の色 素分. 第4章. 総括 並びに 考按. 子 が原 形質 中に 移行 す るが,若. 私 は 教 室考 案 の 簡 易骨 髄 組織 培 養法 を 用い て,健 康 人 及 び 諸 種 血液 疾 患 々者骨 髄 内 好 中球 の 中 性紅 生 体 染色 に就 て,時 間 的推 移 を追 つ て観 察 した. 抑 々生 体 染 色 とは 動物 の生 体 内 に色 素 を注 入 し, そ の生 活 組 織 に 於 け る沈 着 の状 態 並 び に種 々な る運. し くは細 胞 色素排 泄. 作 用 の減 少 を来 す ので あ る と述 ベ てい る. 又 服 部28)は 塩 基 性 色 素 顆 粒 の細 胞 内 出現 は酸性 色 素 顆 粒 に 比べ 遙 に 短 時 間内 に行 わ れ,こ の事 は時 間 の経 過 す る に従 つ て,即 ち細 胞 の活 動 力 の減退 す るに従 つ て 更 に 速 か に行 われ る もので,塩 基 性色素. 命 を辿 つ た 後,色 素 が 体 外 に排 泄 され る状 況 を 追 求. が 細胞 内 に 顆 粒 とな つ て現 わ れ る の は細胞 の 能働的. す る もの で あ り,生 活細 胞 の 機 能 と しては絶 えず 物. 作 用 に よつ て細 胞 内 に摂 取 され た色 素 が顆 粒基 質に. 質 代 謝 を営 んで い るが,他 方 体 内 又 は体 外 か ら有機 的,無 機 的 物質 の 作 用 に よ り細 胞 自体 の生 活機 能 は 調 整 され,或 は障 碍 され て い る.. 沈 着 す る と云 うよ りは,む. しろ単 に細 胞内 に侵 入 し. て顆 粒 基 質 に染 着す る と云 う所 謂 死 後染 色 の状態 に 近 い 感 じが 深 い と述 べ,一 方 顆 粒基 質 は 色素 液を以. 従 来 形態 学 の 研究 の多 くは 細胞 の死 後 の形 態 学 的. て 飽和 され てい るので,新. に包 素 を摂 取 しえ ないの. 所 見か らその生 活 時 の 状態 や 細 胞 の 種類 を類 推 しよ. で あ ろ うと云 い,一 度 褪 色 した顆 粒 基 質 に色素 が結. うとす るの で あ り,こ の 場合 固 定 に よ る細 胞 の変 化. 合 され な い とすれ ば,こ の 色素 嗜好 顆 粒 は既 に色素. に よつ て本 来 の 正 しい姿 を 把 握 す る こ とは 出来 な い.. と結 合す べ き或 る力 を 失つ てい るか,又 は細 胞膜の. 細 胞 の 染 色 に 於 て も生 体 外 に取 り出 して死 亡 した. 色素 透過 性 に変 化 を来 し色 素 の侵 入 を 阻止 す るため. 細 胞 の染 色 と,所 謂 生 体染 色 に よ る生 活 細 胞 の染 色. で あ ろ うと述 べ て い る.教 室 田 村19)は 骨 髄 組織培. とは 自 ら全 く別 の様 相 と意義 を 有 す る.更 に 従来 広. 養 法 に よ る生 体 染色 の詳 細 な る研 究 を行 い,病 的骨. く行 われ て い る超 生 体 染色 も生 活 細胞 の末 期 に於 け. 髄 細 胞 は塩 基 性 色 素 に よ り早 期 に高 度 に染 色 し,且. る機 能 の一 部 を 観 察 す るに 過 ぎない.. 早 期 に褪 色 す る ことを 認 あ て い る,早 期 染色 高度染. 然 るに組 織 培 養 法 で は少 くと も培 養 の 初 期 に は細. 色 に関 して は 膜透 過 性 の亢 進 及 び 染 色顆 粒 の機能低. 胞 は盛 に発 育 増殖 を営 み,そ の生 活 現象 は恐 ら く生. 下 に よ る色 素 反 撥 力 の 減弱 に基 くもので あ ろ うと述. 体 内 に於 け る と,余 り変 りな いで あ ろ う と思 わ れ る.. ベ,早 期 褪 色 に関 して は細 胞 機能 低 下 に よ り,顆 粒. 掬 て従 来生 体染 色 の 本態 に関 して は 多 種多 様 の議. 破 壊 に基 く色 素 放 出の ため だ ろ うと述 べ てい る.又. 論 が あ るが,清 野10)11) 12) 31)等 は そ の 実験 成 績 を綜. 諸 種 色 素 を 種 々の濃 度 で 添 加 実験 を行 い,培 地 に対. 合 して次 の如 く結 論 してい る.即 ち生 体 染 色及 び超. す る至 適 濃 度 を検 索 して い るが,中 性紅 で は0.05〜. 生体 染色 及 び 超生 体 染 色 に よつ て現 わ れ る顆 粒 は一. 0.02%の. 般 に既 存 の顆 粒物 質 で,唯 一定 の場 合 に原 形 質 の 離. に 出現 す るが,細 胞 の機 能 は速 か に障 碍 され て衰え,. 相(Protoplasmatische. 云 う もの. 早 期 に脱 色 乃 至 死 後 染色 を呈 し,且 細 胞増 生 も速 か. が 与 る もので あ り,染 色 機 転 は 色 素 と顆 粒 状基 質 と. に停 止 し,又 遊 走 も停止 し所 謂超 生 体 染色 と何 ら異. の電 気 的 吸 着 で あつ て,こ れ に 色素 の 拡 散 性及 び濃. る処 が な くな る.之 に反 し0.002〜0.001%,の 如 く稀. 度,細 胞 の 内外 の水 素 イオ ン濃 度,動 物 の体 温 又 は. 薄 す ぎ る と細胞 増 生,遊 走速 度 等 の機 能 は高 度 に現. Entmischung)と. 如 く濃 厚 す ぎ る と顆 粒 染 色 は早 期 に且高度. 周 囲 の 温 度が 夫 々一 定 の 影響 を与 え る と云 い,又 生. わ れ るが,染 色 性 は甚 だ 低値 を示 す,こ の他種 々の. 体 染 色を 生 物 学 的 に観 る と,生 体 内 に侵 入 した色 素. 濃 度 に於 け る細 胞 機 能,染 色 性 等 を 比較 観察 し,可. と云 う毒 物 を一 方 は速 か に 排 泄器 等 によ つ て体 外 に. 及 的細 胞 の 旺 盛 な る時期 に それ 相 応 の染 色性 を示 し,. 駆 逐 され ると同 時 に,他 方 一 定 の 細胞 物質 に結 合 し. 梢 々長 時 間生 存 せ る まま で 観 察 し得 る濃 度 は0.01%. な 色素 は再 び徐 々に遊 離 して 体外 に排 泄 され る.. か0.05%で. あ るが,こ の両 濃 度 は 殆 ん ど同程 度の細.
(7) 簡 易骨 髄 組 織 培養 法 に関 す る研 究 胞 機 能 を現 わ し得 るので0.01%を. 以 て至 適濃 度 とし. 1385. 果 を示 した と云 え よ う.. た と述 べ てい る.私 の実 験 に 於 て も教 室 田村19)に 従 つ て 中性紅 の培 地 濃度 を0.01%と. 第5章. した.. 私 の得 た 成績 で は,先 づ健 康 人 成 熟好 中球 の平 均. 結. 論. 以上 私 は血 清 と ビ タ ミンBl2を 培 地 と す る教 室 考. 染 色度 は 中性 紅 溶 液 添加4時 間 後最 高 で1.12を 示 し,. 案 の簡 易 骨髄 組織 培 養 法 を 用 い,健 康 人 及 び 諸 種血. 従 来 の 組織 培 養 法 を 用 い て行 つ た教 室 田村19)の 成. 液 疾 患 々者 骨 髄 内 好 中 球 の 中性 紅 生 体 染 色 を 検索 し,. 績 によ れば 中性紅 溶液 添 加5時 間後 最 高0.75で あ る. 且 つ そ の結 果 を従来 の組 織 培 養 法 即 ちヘ パ リン加 血. の に比 して若 干早 く染 色 し,且 よ り高 い 平均 染 色 度. 漿及 び鶏 胎 圧 搾 液 を用 いた 場 合 と比 較検 討 し,次 の. を示 したが,以 後緩 慢 に褪 色 した.本 法 が 従 来 の組. 結 論 を得 た.. 織 培 養法 と比 較 して若 干早 く最 高 平 均 染色 度 を示 し,. 1). 健 康 人成 熟 好 中 球 の 平 均染 色 度 は 中 性 紅 溶 液. 且 それ が 高 値 で あ る こ と,緩 慢 な褪 色 を示 す こと は,. 添 加4時 間後 最高 で1.12を 示 し,以 後 緩 慢 に褪 色 し. 好 中球 機 能 低下 のみ な らず,本 法 が 従 来 の組 織 培 養. た.. 法 と異 り,ヘ パ リン加 血漿 と鶏 胎圧 搾 液 の代 りに 培 地 とし て血清 及 びバ タ ミ ンB12を. 用 い た こ とに も. 関聯 が あ る と考 え られ る.本 法 で も従 来 の 組織 培 養 法 と同 様 に 中性 紅 生 体 染 色性 は 長 時間 維 持 され る し, 顆 粒破 壊 に基 く色 素 放 出 に よ る細 胞 機 能低 下 を 認 め る点 か ら超生 体 観 察 に よ る もの よ りはよ り生 体 内 に 於 け る状態 に近 い と考 え られ る.. 2). 白血 病 で は 骨髄 内 成 熟 好 中 球 は健 康 人 に比 し. て早 期 に高 度 に染 色 し,急 性 型 は 早期 に褪 色 し,慢 性 型 は急 性型 に比 して褪 色 は緩 慢 で あ つ た. 3). 再 生 不 良 性 貧 血 で は骨 髄 内 成 熟 好 中球 は健 康. 人 に 比 して早 期 に高 度 に染 色 し,且 急 速 に褪 色 した. 4). 無 顆 粒 細胞 症 で は 骨髄 内成 熟 好 中 球 は健 康 人. に 比 して低 値 を示 した.. 次 に諸種 血 液 疾 患 々者 骨 髄 内成 熟 好 中球 の 染 色度. 5). 本 態 性低 色 素 性 貧 血 で は骨 髄 内 成 熟 好 中 球 は. を観 察 したが,そ の結 果 は 従来 の組 織培 養 法 で 得 ら. 健 康 人 に 比 して早 期 に高 度 に染 色 したが,褪 色 は緩. れ た 結 果 と略 々類 似 した.先 づ 白血 病で は全 例 共早. 慢 で あつ た.悪 性 貧 血 で は治 療 前,治 療 後 共 に高 度. 期 に高 度 に染 色 したが,特 に急 性 型 は早 期 に 腿 色 を. に染 色 したが,褪 色 は 治療 前 が 若 干早 く,治 療 後 は. 示 し,慢 性 型 に 比 し褪 色 は緩 慢 で あつ た.次 に再 生. 緩 慢 で あ つ た.. 不 良 性 貧血 で は 全例 健 康 人 に比 して早 期 に高 度 に染. 6). 以上 の 成 績 は 中性 紅 生 体 染 色 の面 か ら従 来 の. 色 し,且 早 期 に褪 色 した.無 顆 粒 細胞 症 で は健 康人. 組 織 培養 法 の結 果 に 比 し僅 か に劣 るが,墨 粒 貧 喰 能. に 比 して低 値 を示 した.本 態 性 色 素 性貧 血 は健 康人. 検 索 の 場 合 と同 じ く,そ の手 技 の 簡 便 さか らみ て臨. に 比 して早 期 に高 度 に 染色 した が褪 色 は緩 慢 で あつ. 床 応 用 に は寧 ろ本法 の方 が 優 れ て い ると云 つ て よい.. た.又 悪 性 貧 血で は治療 前,治 療 後 共 に健 康人 に比 して高 度 に 染 色 した が,褪 色 は 治療 前 は 梢 々早 く, 治療 後 は 緩 慢 で あ り,培 地 中 の ビ タ ミンB12に. よ. つ て細 胞機 能 の回 復 は見 られ なか つ た., 以上 要 す る に,本 法 で も骨髄 内 好 中 球 の 中性紅 生 体 染 色性 は長 時 間維 持 され,健 康 人及 び,諸 種 血液 疾 患 々者 に於 て従 来 の 組 織培 養 法 と略 々類 似 した結. 梱 筆す るに 当 り終 始 御懇 篤 な る 御指 導 と御 校 閲 を 賜 つ た恩 師 平 木 教授 並 び に 角 南 講 師に 深 甚 な る謝 意 を表 す, (本 論 文 の 要 旨は 昭 和31年 日本 血 液 学 会 第18回 総 会に 於 て発 表 した) (文. 献. 後. 掲).
(8) 1386. 大. Studies. on Bone-Marrow. 亀. Tissue. 学. Culture,. our Own Part2.. Vital. Staining. of Normal. and. Blood. Simple. Method. of. Device. of Neutrophils. Persons. the. Patients. in the. Bone. with. Various. Marrow. Diseases By. Manabu. Okame. Department of Internal Medicine Okayama University Medical School (Director: Prof. Kiyoshi Hiraki) With the use of the simple bone-marrow tissue culture, the method devised in our labor atory, in the medium composed of serum and vitamin B12, the author studied the neutral red vital staining of neutrophils in the bone marrow of both normal persons and patients with various blood diseases. These results were compared with those obtained by the conven tional method using the medium composed of plasma mixed with heparin and chick embryo juice; and the author arrived at the following conclusions: 1. The average stain of mature neutrophils in the case of normal persons reaches the maximum of 1.12 within 4 hours after the addition of neutral red solution, fading gradually thereafter. 2. In the case of leukemia mature neutrophils in the bone marrow are stained more deeply at an early stage as compared with those of normal persons; and in the acute leu kemia they fade at an early stage, and in the chronic leukemia they fade more slowly than those of acute leukemia. 3. In the case of hypoplastic anemia mature neutrophils in the bone marrow are stained deeper and earlier than those is normal persons, and also they fade more quickly. 4. In the case of agranulocytosis mature neutrophils are stained more lightly than those in normal persons. 5. In the case of essential hypochromic anemia mature neutrophils in the bone marrow are stained more deeply and earlier than those in normal persons, but fading more slowly. In the case of pernicious anemia these neutrophils are stained more deeply both before and after the treatment than those in normal persons, but as for the fading before and after treatment, the former is slightly faster than the latter. 6. These results indicate that, although this method is slightly inferior to the conven tional method from the standpoint of neutral red vital staining, it is rather a superior method for clinical application because of its simplicity in manipulation the same as in the study of the carbon-particle phagocytosis..
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