日本国内における市販イヌ用ウェットフードのサルモネラ属菌検出調査

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(1)原著論文. 日本国内における市販イヌ用ウェットフードのサルモネラ属菌検出調査湯川尚一郎 1＊・湯浅美那 1・江塚楓奈 1・湯川元美 2・山崎勝利 3・仲克己 4 1. 倉敷芸術科学大学生命科学部動物生命科学科岡山県倉敷市〒712‐8505 2 3. 4. 湯川動物病院和歌山県海南市〒642‐0015. 倉敷芸術科学大学生命科学部生命医科学科岡山県倉敷市〒712‐8505. くらしき作陽大学食文化学部現代食文化学科岡山県倉敷市〒710‐0292 ＊責任著者湯川尚一郎 [email protected]. 要約：海外では、イヌ用ペットフードへのサルモネラ属菌混入が原因であるヒトサルモネラ症の発生事例が報告されている。このことから、本邦においてイヌ用ウェットフードへのサルモネラ属菌混入の有無を明らかにするために日本国内で販売されているイヌ用ウェットフードからサルモネラ属菌の検出の有無を調査した。イヌ用ウェットフードは国内23社の国内産20製品と中国産24製品、オーストラリア産14製品、タイ産と米国産が各4製品そしてニュージーランド産2製品を供試した。サルモネラ属菌の検出方法は「愛玩動物用飼料等の検査法（27消技第1051号）」に従った培養法により行った。その結果、サルモネラ属菌は、すべての製品から検出されなかった。このことから、日本におけるイヌ用ウェットフードのサルモネラ属菌混入に関するヒト及びイヌの健康被害のリスクは低いと考えられた。. ペット栄養学会誌，第24巻（第 1 号）：22 - 26，2021 キーワード：dog, Salmonella, wet food. と、水分含有量が10％以下のものをドライフード、概ね 15∼30％のものをセミモイストフードさらにそれ以上の. 緒言. ものをウェットフードと大別する［6］。米国では2007年サルモネラ属菌はグラム陰性通性嫌気性桿菌の腸内細. と2012年にイヌ用ドライフードへのサルモネラ属菌の混. 菌科の一属で、人獣共通感染症の原因菌である。主な感. 入によりヒトのサルモネラ感染症の集団発生が起こり、. 染経路は経口であり、臨床症状は、発熱、嘔吐、下痢、. 原因として特定された商品は大規模にリコールされた. 食欲不振、体重減少そして元気消失である［3,17］。種々. ［5,13］。ポーランドで2004年に行われたドライフードに. の動物において、サルモネラ属菌感染症は、嘔吐や下痢. 対する調査では、2,271検体製品中22検体製品からサル. を伴う胃腸炎を呈するが、サルモネラ属菌に感染しても. モネラ属菌が検出された［21］。さらに、2014年に米国で. 必ずしも発症するわけではない［3,10］。一方、ヒトのサ. 行われたドライフードとセミモイストフード480検体製. ルモネラ属菌感染症では1週間程度で回復することが多. 品中1検体製品からサルモネラ属菌が検出されている. いが、乳幼児、老人、そして免疫力低下者などの感染で. ［14］。ウェットフードに関しては、2006年に米国で24検. は重症率が高く、死に至ることもある［12］。. 体製品を用いて調査されているが、サルモネラ属菌は検. イヌ用加熱フードの種類を水分含有量により分類する. 出されなかった［18］。しかし、その中の2検体製品から. 受付：2020年 5 月18日受理：2020年 9 月 9 日ペット栄養学会誌，24（1）：22 - 26，2021. 22.

(2) イヌ用ウェットフードのサルモネラ調査表1 調査した国内産イヌ用ウェットフード一覧. 表2 調査した輸入イヌ用ウェットフード一覧. 企業番号. 生産都道府県. 包装形態. 検体数. 企業番号. 原産国. 包装形態. 検体数. 1. 宮崎県. パウチ詰. 4. 1. 中国. パウチ詰. 2. 2. 新潟県. 缶詰. 3. 2. 中国. 缶詰. 2. 3. 神奈川県. パウチ詰. 2. 3. 中国. パウチ詰. 2. 4. 岐阜県. パウチ詰. 3. 4. 中国. 缶詰. 2. 5. 香川県. パウチ詰. 2. 5. オーストラリア. アルミトレイ詰. 2. 6. 徳島県. パウチ詰. 6. 6. 米国. 缶詰. 4. 7. 中国. 缶詰. 2. 8. 中国. パウチ詰. 2. 9. タイ. パウチ詰. 4. オーストラリア. アルミトレイ詰. 5. 中国. 缶詰. 2. 大腸菌が検出されている［18］。日本においては、イヌ用フードが起因となったヒトのサルモネラ感染症は報告さ. 10. れていない。しかし、イヌ用トリーツでは、サルモネラ. 11. 中国. 缶詰. 2. オーストラリア. 缶詰. 2. 12. 中国. 缶詰. 2. 13. ニュージーランド. 缶詰. 2. 14. 中国. 缶詰. 4. 15. オーストラリア. 缶詰. 1. 用トリーツ303 検体中7検体からサルモネラ属菌が検出. 16. オーストラリア. 缶詰. 2. され［23］、サルモネラ属菌に起因したと考えられるイヌ. 17. オーストラリア. 缶詰. 2. 中国. パウチ詰. 2. 属菌混入が原因と思われるイヌの健康被害が発生した［19］。本邦で2017年に行われたイヌ用ドライフード中のサルモネラ属菌検出に関する調査でサルモネラ属菌は検出されなかった［22］。しかし、2018 年の調査ではイヌ. の健康被害も報告されている［19］。しかし、イヌ用ウェットフードを対象としたサルモネラ属菌検出に関する調査は行われていない。本調査は、産地国を問わず本邦に流通するイヌ用ウェットフード中のサルモネラ属菌の混. ノ株式会社、東京都）に入れた検体25gに緩衝ペプトン. 入の有無を明らかにすることを目的とした。. 水（OXOID、英国）225mlを加え、30分間静置した。その後、ストマッカー（エクスナイザー400、オルガノ株式会社、東京都）を用い200rpmで5分間攪拌混合した。. 材料及び方法. 滅菌した10 v/v％ Tween80溶液（Sigma-Aldrich、米国） 15mlを培養瓶に加え、37℃で18∼24時間の前増菌培養し. 1．調査対象全てのウェットフードは、大阪府と岡山県のホームセ. た。培養後、ハーナ・テトラチオン酸塩基礎培地（栄研. ンターやスーパーマケット及びペットショップの小売店. 化学、東京都）100mlとラパポート・バシリアディス培. で市販されている賞味期限内のウェットフードを無作為. 地（OXOID、英国）100mlそれぞれに前増菌培養液10ml. に採用した。大島の報告に従い、ウェットフードを容器. ずつを加え、混合後に43℃で18∼24時間の選択増菌培養. 包装別に分類した［16］。すなわち、先ずウェットフード. した。インキュベート後の2種類の選択増菌培養液1白金. を産地別と製造企業別に分類し、次に国内産品と国外産. 耳ずつをDHL寒天培地（栄研化学、東京都）、ブリリア. 品に大別し、それぞれに入手した順番に企業番号を付し、. ントグリーン寒天培地（Difco、米国）、そしてクロモア. これにより調査は国内産20製品（表1）と国外産48製品. ガーサルモネラ寒天培地（CHROMagar、フランス）に. （表2）を用いて盲目的に行った。. 画線塗抹し、倒置して37℃で18∼24時間を要して選択分離培養を行った。それぞれの培地表面でサルモネラ属菌が疑われるコロニーを3個釣菌し、それぞれを滅菌生理. 2．サルモネラ属菌の検出法愛玩動物用飼料又はその原材料を検査する方法は「愛. 食塩水0.3mlで希釈した。各希釈液の1白金耳をDHL寒天. 玩動物用飼料等の検査法（平成27年6月29日改正27消技. 培地、ブリリアントグリーン寒天培地ならびにクロモア. 第1051号）に定められている［8］。それにより、今回の. ガーサルモネラ寒天培地にそれぞれ画線塗抹し、倒置し. 検査方法は、その定法に従い実施した。滅菌済ストマッ. て37℃で18∼24時間、純粋分離培養を行った。純粋分離. カー袋（エクスナイザー400用細菌検査ポリ袋、オルガ. 培養にて何らかのコロニーが出現した場合は、API20E 23. ペット栄養学会誌，24（1）：22 - 26，2021.

(3) 湯川・湯浅・江塚・湯川・山崎・仲（SYSMEX biomerieux、フランス）を用いて菌種の同定. 材料の前処理、金属探知、容器への充填、密封、加熱殺. を行った。. 菌、冷却そして梱包の順に行われるが、加熱殺菌後の製品の冷却の際に、冷却水からの微生物汚染の可能性が指摘されている［15］。このことから、今回検出されたサル. 結果及び考察. モネラ属菌以外の２菌種は、冷却工程で汚染した可能性試供したウェットフードの缶やパウチパッケージに外. が考えられた。そのため、冷却工程に用いる冷却水は温. 観上の異常はなく、開封時の視覚的ならびに嗅覚的な異. 度条件と所要時間を厳守し、そして定期的な残留有効塩. 常も認めなかった。. 素濃度の測定を徹底することが必要と考える。. イヌ用ウェットフード全68種類の検体からサルモネラ. 今回、日本国内で流通しているイヌ用ウェットフード. 属菌は分離されなかった。しかし、国内産1検体（企業. を対象にサルモネラ属菌に特異的な培養法によりその存. 番号3）からはCitrobacter freundii（C. freundii）が分離さ. 在を調査した結果、供試したイヌ用ウェットフードから. れた。一方、国外産品においてはC. freundiiが2検体（企. サルモネラ菌属は検出されなかった。しかしながら、サ. 業番号6及び17）から、そして1検体（企業番号10）から. ルモネラ属菌以外の菌種が確認されたことから、イヌ用. はStenotrophomonas maltophilia（S. maltophilia）が分離さ. ウェットフードの製造過程は、冷却工程を含め適正製造. れた。細菌が分離されたウェットフードの原産国は1検. 手順ガイドラインや適正製造マニュアルのさらなる遵守. 体が米国、他の2検体はともに中国であった。. が求められる。. 今回サルモネラ属菌が日本国内で販売されている犬用. 開示すべき利益相反状態. ウェットフードから全く検出されなかったことは、米国での大規模なサルモネラ症の集団発生を受け、各企業が無し。. 種々のガイドラインに従い各企業が努力した結果であると考えられる［1,9］。米国飼料工業会はサルモネラ属菌の飼料中への混入を防ぐための製造ガイドラインを2010. 参考文献. 年に策定し、サルモネラ属菌の混入を防ぐために原材料［1］AFIA. 2010. Salmonella Control Guidelines, American. の加熱を十分に行うべきと記述している［1］。欧州ペッ. Feed Industry Association, Arlington, VA, U.S.. トフード工業会連合も2017年に策定したペットフードの適正製造手順に関するガイドラインに、サルモネラ属菌. ［2］Albini, S., C. Abril, M. Franchini, D. Hüssy and G.. の混入を防ぐために加熱を十分に行うべきと記述してい. Filioussis. 2009. Stenotrophomonas maltophilia Isolated. る［9］。また、日本でも農林水産省が示しているペット. From the Airways of Animals With Chronic Respiratory. フードの適正製造マニュアルにおいて、原材料の管理や. Disease. Schweiz Arch Tierheilkd. 151: 323-328. ［3］明石博臣・大橋和彦・小沼操・菊地直哉ら編．2011．. 製造過程における微生物汚染の対策として加熱の重要性. 動物の感染症．第3版．pp.248．近代出版．東京. をあげている［15］。行政及び企業が対策を講じた結果、. ［4］浅尾努・小久保彌太郎．2018．大腸菌群，糞便系. 今回の調査ではサルモネラ属菌混入が確認できなかった. 大腸菌群，大腸菌の検査法．食品衛生検査指針改定．. ものと考えられた。. 第2版．pp.174-191．公益社団法人日本食品衛生協会．. しかしながら、今回の調査では大腸菌群に属する細菌の一種であるC . freundiiとS . maltophiliaが検出された。. 東京. Vassiliadisらは、サルモネラ属菌用のラパポート・バシ. ［5］Behravesh, C. B., A. Ferraro, M. Deasy and V. Dato.. リアディス選択増菌培地やハーナ・テトラチオン酸塩基. 2010. Human Salmonella Infections Linked to Contam-. 礎培地を用いた際にサルモネラ属菌以外の増殖の可能性. inated Dry Dog and Cat Food. Pediatrics. 126: 477-483.. が指摘されている［11,20］。今回の実験では選択増菌培. ［6］Case, L. P., L. Daristotle., M. G. Hayek and M. F.. 養のためにハーナ・テトラチオン酸塩基培地とラパポー. Raasch. 2011. Canine and Feline Nutrition THIRD. ト・バシリアディス培地を用いたことが、C. freundiiとS.. EDITION. pp.163-166. Mosby-Elsevier Book, Inc.,. maltophiliaが検出された理由と考えられる。. Missouri.. C. freundiiとS. maltophiliaは両者ともに自然環境中に認. ［7］Denton, M. and K. G. Kerr. Microbiological and. められる菌種である［2,4,7］。ウェットフードの製造は原. Clinical Aspects of Infection Associated with Steno-. ペット栄養学会誌，24（1）：22 - 26，2021. 24.

(4) イヌ用ウェットフードのサルモネラ調査 trophomonas maltophilia. 1998. ClinMicrobiol Rev. 11: 57-. 京. 80.. ［16］大島誠之助．2016．ペットフードの種類その4. ［8］独立行政法人農林水産消費安全技術センター．2015．. フードの形態（製法）別の分類−（2）ウェットフード. 愛玩動物用飼料等の検査法（平成27年6月29日改正. ほか．ペット栄養学会誌，19：40-45．. 27消技第1051号）．pp.54-56．独立行政法人農林水産消. ［17］Steiner, J. M. 小動物の消化器疾患（遠藤泰之監. 費安全技術センター．埼玉. 訳）．2011． pp.173．文永堂出版．東京. ［9］FEDIAF. 2017. GUIDE TO GOOD PRACTICE FOR. ［18］Strohmeyer R. A., P. S. Morley, D. R. Hyatt and D. A.. THE MANUFACTURE OF SAFE PET FOODS.. Dargatz. 2006. Evaluation of bacterial and protozoal. Fédération Européenne de l’Industrie des Aliments pour. contamination of commercially available raw meat diets. Aminaux Familiers, Belgium. for dogs. J. Am. Vet. Med. Assoc. 228: 537-542.. ［10］Finley, R., C. Ribble, J. Aramini and M. Vandermee.. ［19］田村豊．2019．ぺットフードのサルモネラ汚染に. 2007. The risk of salmonellae shedding by dogs fed. よる犬の健康被害の発生事例．北海道獣医師会雑誌，. Salmonella-contaminated commercial raw food diets.. 63：435-436．. Can. Vet. J. 48: 69-75.. ［20］Vassiliadis, P., V. Kalapothaki, C. Mavrommati, D.. ［11］Hajna, A. A. and S. R. Damon. 1956. New Enrich-. Trichopoulos. 1984. A comparison of the original. ment and Plating Media for the Isolation of Salmonella. Rappaport medium（R medium）and the Rappaport-. and Shigella Organisms. Appl Microbiol. 4: 341-345.. Vassiliadis medium（RV medium）in the isolation of. ［12］平松啓一監修．2011．標準微生物学．第11版，. salmonellae from meat products. J Hyg（Lond） . 93: 51-. pp.179∼183，医学書院．東京. 58.. ［13］Imanishi, M., D. S. Rotstein, R. Reimschuessel and. ［21］Wojdat, E.,K.Kwiatek and R. Zasadny. 2004. Micro-. A. S. Schwensohn. 2014. Outbreak of Salmonella enterica. biological quality of petfood in Poland. Pol J Vet Sci.. serotype Infantis infection in humans linked to dry dog. 7:207-9.. food in the United States and Canada, 2012. J. Am. Vet.. ［22］湯川尚一郎・加門由理・木川祐菜・田中蓮華・横. Med. Assoc. 244: 545-553.. 田桃子・大島誠之助・古川敏紀・仲克巳．2018．日本. ［14］Nemser, S. M., T.Doran, M.Grabenstein and. における犬用ドライフードからのサルモネラ属菌検出. T.McConnell. 2014. Investigation of Listeria, Salmonella,. 状況調査．ペット栄養学会誌，21：27-31．. and Toxigenic Escherichia coli in Various Pet Foods.. ［23］Yukawa S., I. Uchida, Y. Tamura, S. Ohshima and T.. Foodborne Pathog. Dis. 11: 706-709.. Hasegawa. 2019. Characterisation of antibiotic. ［15］農林水産省消費・安全局畜水産安全管理課．2014．. resistance of Salmonella isolated from dog treats in. ペットフードの適正製造マニュアル．農林水産省．東. Japan. Epidemiol Infect. 147: e102.. 25. ペット栄養学会誌，24（1）：22 - 26，2021.

(5) 湯川・湯浅・江塚・湯川・山崎・仲. Investigation of Salmonella contamination in wet dog foods marketed in Japan S. Yukawa 1＊, M. Yuasa 1, F. Ezuka 1, M. Yukawa 2, K. Yamasaki 3, K. Naka 4 1. Department of Comparative Animal Science, College of Life Science,. 2. Yukawa Animal Clinic, Kainan, Wakayama 642-0015. 3. Department of Medical Life Science, College of Life Science,. Kurashiki University of Science and The Arts, Kurashiki, Okayama 712-8505. Kurashiki University of Science and The Arts, Kurashiki, Okayama 712-8505 4. Faculty of Food Culture, Kurashiki Sakuyo University, Kurashiki, Okayama 710-0292 Corresponding author. ＊. Salmonella are important pathogenic bacteria as cause of disease both for human and animal. If dogs fed Salmonella-contaminated food, dogs can shed Salmonella with feces. In US, surveillance of Salmonellacontaminated wet dog foods were carried out. However there are little reports on surveillance of Salmonellacontaminated wet dog foods in Japan. Therefore, we carried out investigation of Salmonella-contaminated wet dog foods in Japan. We carried out this surveillance following the procedure of procedure of FAMIC in accordance with Pet Food Safety Law. Twenty domestic samples and forty-eight imported samples were examined. The countries of origins of imported foods and samples were including China（n＝24） , Australia （n＝14） , the United States of America（n＝4）,Thailand（n＝4）and New Zealand（n＝2）.We did not detect Salmonella from any samples. However, bacteria other than Salmonella were isolated from one sample manufactured by one company in a domestic wet food, and the bacteria were identified as Citrobacter freundii. Bacteria other than Salmonella were isolated from three samples produced by three companies in the imported wet food, and when these bacteria were identified, two were C. freundii and one was Stenotrophomonas maltophilia. Since the method adopted this study was aimed to detect Salmonella, it is not clear whatsoever. But it was possible that other bacteria could be detected by using other methods. Therefore, a more in-depth investigation will be needed in Japan. And producers of wet dog foods should reduce the potential for contamination with Salmonella and other bacteria. : 22 - 26. 2021 J. Pet Anim. Nutr., Vol. 24（No. 4） Key words: dog, Salmonella, wet food. ペット栄養学会誌，24（1）：22 - 26，2021. 26.

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