Invitrogen RNA
ご注文マニュアル
1 本マニュアルにはライフテクノロジーズジャパンウェブサイトでの Invitrogen RNA のご注文方法 を記載しております。ご注文を行う際にはライフテクノロジーズユーザーアカウントが必要になりま すので事前にユーザー登録をお願い致します。ユーザー登録完了後は本マニュアルの操作に従 ってご注文いただけます。 Invitrogen RNA 製品に関して、ウェブサイトに詳細情報の記載がございますので、ご参照下さい。 RNA ご注文トップページ http://www.lifetechnologies.com/jp/ja/home/life-science/rnai/rnai-email-order-forms.html ウェブでのご注文は下記の環境条件での使用を推奨します。Windows/Macintosh とも Google Chrome で最も快適にご使用頂けます。 Windows Internet 7-8 Google Chrome Firefox Macintosh OSX Safari Google Chrome Firefox
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内容
1. ログイン及び新規ユーザー登録 ･･･････････････････････････････ P3 2. RNA ベーシックご注文方法 ･･･････････････････････････････ P11 3. BLOCK-iT™ RNAi Express ･･･････････････････････････････ P26 4. Stealth RNA 新検索サイト ･･･････････････････････････････ P29 5. BLOCK-iT™ RNAi Designer ･･･････････････････････････････ P38 6. Ordering Synthetics for in vivo RNAi ･･･････････････････････････････ P55 7. Plate Select ･･･････････････････････････････ P58 8. マイアカウント使用方法 ･･･････････････････････････････ P64 9. FAQ ･･･････････････････････････････ P72 Invitrogen RNA 製品のご注文方法に関してご不明な点等ございましたら下記までご連絡下さい。 ライフテクノロジーズジャパン㈱ オーダーサポート カスタムプライマー担当 Tel: 03-6832-6980（インビトロジェン・Primer 製品）音声ガイダンス 1 の後 2 （平日 9-19 時） Email: [email protected]
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1. ログイン及び新規ユーザー登録
ライフテクノロジーズウェブサイトにアクセスします。 http://www.lifetechnologies.com/ アクセス後、日本国内からのアクセスでは通常自動で日本が選択されます。 日本以外の国が表示されている場合は、国の変更を行います。 画面上部の”Order Support”をクリックします。 画面右の”Change location )”をクリックします。 >Japan|日本をクリックすると、日本に切り替わります。4 また画面左下には言語の切り替えボタンがあります。言語を選択し Go をクリックすると表示言 語が切り替わります。日本語への翻訳作業は随時進めておりますが、日本語を選択しても英語が 表示されるページはまだ翻訳版の作成が行われておりませんことをご了承下さい。 RNA をご注文する際には、必ず最初にログインを行います。画面右上のサインインするにカーソ ルをあわせてログインをクリックします。 登録済のユーザー名（もしくはメールアドレス）及びパスワードを入力して、サインインをクリック します。 “保存する”左の□にチェックを入れるとユーザー名（もしくはメールアドレス）/パスワード を保存することができます。 ログインが完了すると、画面上部は名前の表示に変更されます。
5 パスワードを忘れた場合は、”サインインにお困りですか？”をクリックして、ユーザ名及び表示 された表示された 2 つの単語を入力して続けるをクリックし、あらかじめ設定していた秘密の質問 の回答を入力することでパスワードを再設定することができます。ユーザー名を忘れた場合は”ユ ーザー名を忘れました”をクリックして、次の画面で登録 Email アドレス宛てにユーザー名の再送 信を依頼できます。その他ログインが行えない場合には登録情報を確認させて頂きますので P2 に記載の弊社オーダーサポート担当窓口までご連絡下さい。
6 新規登録 新規登録を行う場合は登録画面に必要な情報を入力してウェブ上から手続きを行います。*の ついた項目は入力が必須の項目になります。新規登録をウェブ上で完了しますと最初に登録受 付完了メールが届きます。その後弊社にて登録作業が完了した後、当日（平日 16 時以降のご登 録の場合翌日、土日、祝日のご登録の場合翌営業日）登録完了メールをお送り致します。その後 RNA のご注文が可能になります。 画面右上のサインインするにカーソルをあわせて、”Start here”をクリックします。 登録を行う電子メールアドレス、パスワード、秘密の質問を選択し回答を入力します。パスワー ドの強度は高めに設定して頂くことをお薦めします。
7 ライフテクノロジーズからのメール情報受取の可否に関して”はい”か”いいえ”のいずれかを選 択して頂き、ウェブサイト利用条件及び標準販売条件に同意するの左□をクリックするとチェック が入り、インビトロジェンのオンラインオーダー製品の購入をしますか？の下に選択アイコンが表 示されます。すぐにご注文予定の場合は右側のはい、登録を続けますをクリックして代理店名と 出荷先の入力画面に進んで下さい。いいえ、登録をここで終了しますをクリックしますと、メールア ドレスの登録のみで一旦登録が終了し、ご注文の入力時に改めて代理店名及び出荷先を入力す る必要がございます。 お届用出荷先情報を入力します。*が入力必須項目です。既存アカウント番号は空欄で構いま せん。
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次に代理店の選択を行います。代理店検索欄に代理店名を入力するか都道府県をプルダウン メ ニ ュ ー か ら 選 択 し て Search を ク リ ッ ク す る と 、 該 当 の 代 理 店 一 覧 が 表 示 さ れ ま す 。
ご利用になる代理店が決まりましたら代理店名の左の○欄をクリックして選択後、送信をクリッ クします。ご利用予定の代理店が見つからない場合は”ここをクリックすると”をクリックします。
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下記入力画面が表示されますので、代理店情報を入力します。
メンバー特典の選択を行います。こちらのメールはご注文とは関係の無い製品情報等のメール 送信です。ご注文に関するメールはこちらの選択に関係なく登録 Email アドレスに送付されます。
10 最後に、利用条件及び標準販売条件に同意します。左の□をクリックし、チェックを入れていた だき登録するをクリックします。 送信後すぐに、ご登録 Email アドレス宛てに下記受付完了の自動配信メールが送信されます。 代理店名と出荷先を入力して頂いた場合にはその後弊社での登録作業が完了し、弊社から再度 登録完了のメールが届いた後ご注文が可能になります。当日（平日 16 時以降のご登録の場合翌 日、土日、祝日のご登録の場合翌営業日）に完了メールが届きますが、ご注文をお急ぎの場合や、 完了メールが届かない場合は弊社で確認させて頂きますので P2 に記載の弊社オーダーサポート 担当窓口までご連絡下さい。
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2. RNA 製品ご注文方法
下記いずれかの方法で RNA 製品のご注文サイトに進みます。
1.”ライフサイエンス”にカーソルをあわせて、”RNA 干渉 Oligos”をクリック
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3.”オーダー製品”をクリックし、下記の画面が表示されるので左上の RNA 干渉 Oligos) もしくは左 下の”RNA 干渉 Oligos”をクリックする
13 次画面でカスタム RNAi オリゴ右の“ご注文” をクリックします。 RNA のご注文方法は、以下の方法があります。 ベーシックエントリー RNA の情報を一つずつウェブ上で入力します アップロードエントリー 指定のテンプレートファイルに情報を入力後、複数の RNA をまとめて アップロードを行います
BLOCK-iT™ RNAi Express デザイン済製品を検索してご注文を行います
BLOCK-iT™ RNAi Designer RNA 発現ベクターにクローニングする DNA 配列のデザイン、蛍光ラ ベル、in vivo グレードの RNA、プレートオーダーの RNA 製品のご注文が行うことができます
14 1. ベーシックエントリー
通常の siRNA の配列を入力する際には Basic entry をクリックします。Stealth RNA のご注文を入 力する場合は”Stealth ベーシックエントリー”をクリックします。次の画面で通常の siRNA と Stealth RNA を変更することも可能です。
画面の指示に従って必要な情報を入力します。RNA のタイプは siRNA を選択すると通常の無修 飾 siRNA、Stealth RNA を選択すると配列に対して Stealth RNA と同じ化学修飾が施されます。RNA 合成は 2 本鎖 RNA のみ承っておりますので、□Duplex をクリックして必ずチェックを入れて下さい。
siRNA の場合 3’ Overhang に dTdT を必要とする場合は 19 塩基の配列を入力し、3’ Overhang のプルダウンメニューから dTdT を選択して下さい。Stealth RNA の場合通常 25 塩基の配列を入力 して 3’Overhang は None を選択して下さい。Stealth RNA の化学修飾はセンス鎖のみに入りますの で、センス鎖とアンチセンス鎖を間違えると抑制効果が得られなくなりますので必ずセンス鎖の配 列を入力するように十分ご注意下さい。入力が終了したら Preview をクリックすると配列等のチェッ クが行うことができます。確定したらカートに追加するをクリックし、カートに入れます。
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ご注文を続ける場合は、更に画面上に必要な情報を入力します。カート内容を確認するには、 カートを見に行くかをクリックするか、画面右上のショッピングカートにカーソルをあわせて→カート を見るクリックします。
16 RNA名もしくは、編集をクリックすると修正が行うことができます。確認が終了後、ご注文の手続 きに進む場合 →注文確定へ進む をクリックします。 新規登録の際に、利用規約の同意後、製品を購入しますか？の選択肢で、いいえ、今はしま せん。を選択した場合は下記配送先および代理店を入力する画面に進みます。 P7-9 の記載のとおり配送先及び出荷先を入力し、利用条件に同意後 Submit をクリックします。 その後は P16-20 のステップに従ってご注文手続きを進めます。
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複数の代理店様をご登録されている場合は、各製品の代理店及び出荷先情報欄横の代理店 変更をクリックしますと、代理店様選択のプルダウンメニューが表示されます。
18 ご利用予定の代理店をプルダウンメニューから選択します。 複数の製品をご注文予定で、全て同じ代理店様経由のご注文をご希望の場合は、1 番上の製 品内のカート内全ての品目に適用 をクリックすると全て同じ代理店経由でのご注文に切り替わり ます。 変更が終了しましたら→注文確定へ進むをクリックしてご注文の手続きに進みます。
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請求先及び出荷先の担当者欄は入力が必須になります(*)。代理店担当者のお名前がわから ない場合は空欄では先に進めないのでドット(.)等の記号を追記します。入力が終わりましたら確 認を続行>をクリックします。
20 RNA 製品は弊社米国合成工場にて製造後輸入しますので出荷設定のオプションはチェックを 入れたデフォルトのままにしておきます。 次にご注文番号を入力します。日付や管理しやすい番号を任意で設定し入力して下さい。この 項目も入力が必須なので不要な場合でもドット(.)等の記号を入力します。 配送日指定など特別なご要望がある場合には特記事項の右側の▼をクリックすると、下記の記 入欄が表示されますので、注：を参照の上ご記入下さい。
21 入力が終わりましたら、画面右上もしくは下の確認を続行> をクリックして下記最終の確認画 面に進みます。 下記画面にて最終の確認が終了しましたら注文する＞をクリックします。こちらをクリックします と注文のキャンセルが行えませんので十分ご注意下さい。この段階でご注文内容等の編集が必 要な場合は<戻る、注文を編集をクリックして変更を行うことも可能です。 ご注文内容が確認できます。こちらの内容は登録メールアドレスにも自動的に送信されます。 弊社受注番号は、ご注文確認等のご連絡の際に重要になりますので弊社問い合わせ時には受 注番号をご用意してご連絡下さい。１つのご注文で複数の代理店様を選択した場合は、別々のご 注文番号を含む複数のご注文確認メールが送信されます。
22 2．アップロード注文
通常の siRNA の複数の配列を入力する際には Upload entry をクリックします。Stealth RNA のご 注文を入力する場合は”Stealth アップロードエントリー”をクリックします。次の画面で通常の siRNA と Stealth RNA を変更することも可能です。
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テンプレートファイルは通常の siRNA 用(RNAi Template)と Stealth RNA 用(Stealth Template)の 2 種類のワークシートが含まれますので、必要な情報を入力し、ファイルを保存します。ファイル保 存は Excel ブック(.xlsx)もしくは Excel97-2003 ブック(.xls)をお薦めします。テキスト形式で保存する場 合は作成したワークシートを選択して保存します。 次にファイルを選択をクリックして保存したファイルを選択し RNA タイプを選び、アップロードをク リックします。
24 ファイルをアップロードする代わりに、テンプレートファイルの情報をコピーし、下記画面上にペ ーストすることも可能です。情報をウェブ上に貼り付けて、RNA タイプを選択した後、Submit をクリ ックして次のステップに進みます。 アップロード後は下記画面に移動します。●は入力した情報に問題が無いことを示しています。 問題がある場合は●に×が入った表示になるので、RNA 名もしくは編集をクリックして個別に修正 を行います。不要な RNA は削除をクリックして削除します。確認が終わりましたらカートに追加す るをクリックして、カート画面に進みます。
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3.BLOCK-iT™ RNAi Express
Stealth RNA や Stealth Select RNA 等のデザイン済の RNA 製品を遺伝子情報から検索し、必要な 製品を直接ウェブ上でご注文が行うことができます。
http://rnaidesigner.lifetechnologies.com/rnaiexpress/rnaiExpress.jsp
上記画面では、検索オプションを通常デフォルトで表示している Search By ID/Keyword にして、左 の製品名、製品名の右側の生物種はデフォルトでは全てチェックが入っているので、必要に応じ て検索対象から外すものはチェックを外します。
Stealth RNAi™ siRNA 及び Stealth Select RNAi siRNA に関する保証既定に関してはSpecification Chart and Guarantee を参照頂下さい。
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検索オプションは Search By ID/Keyword が選択されているので通常はそのままで検索を始めま す。Pathway や Gene Family での検索はクリックして頂きご興味のある分野であれば使用すること ができます。
次に Step2 で Search by（デフォルトは Gene Symbol）をプルダウンメニューから選択し、検索キー ワードを入力して、Submit をクリックします。
検索結果が表示されますので、必要な製品にチェックを入れます。チューブ納品をご要望の場 合は Tube にチェックを入れて Add to Shopping Cart をクリックします。Plate をチェックすると Plate 上のウェルを配置する Plate Select に移動します（後述）。Stealth Select をご注文の場合は同一タ ーゲットに対して 3 種類まとめてご注文する場合は行の一番上にチェックを入れると 3 種類まとめ て選択ができ、1 本ずつご注文する場合は、個別の製品の左□をクリックしてチェックを入れます。 それぞれの製品行をクリックすると製品の詳細が確認できます。
28 次に表示される画面で、研究者名（半角英字）を入力し、Order をクリックするとカートに移行しま す。画面に下に表示される各種コントロール製品に関しては、現在日本国内ではウェブ経由での ご注文ができませんので、チェックを入れないようにして下さい。コントロール製品は代理店経由 でご注文下さい。 下記のとおりカートに追加されますので P18-21 の操作に従ってご注文の手続きを行います。
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4.Stealth RNA 新検索サイト
ライフテクノロジーズウェブサイトで新しくデザインされた Stealth RNA や Stealth Select RNA 等の デザイン済製品の検索サイトです。キーワード検索後、公共データベースの情報へのリンクや、デ ザイン領域をグラフィカルに表示する等豊富なメニューが含まれます。
尚日本国内ではアプライドバイオシステムズウェブ登録ユーザーの統合が完了しておりません ので、Stealth RNA 製品以外のアプライドバイオシステムズ製品（Scilencer siRNA 製品及び、 TaqMan Assay）の検索及びご注文を行うことはできません。
下記いずれかの方法で RNA 製品のご注文サイトに進みます。
1.”ライフサイエンス”にカーソルをあわせて、”アプリケーション”下の”RNA 干渉”をクリックします。
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画面下に下記の検索メニューが表示されます。Stealth RNAi™ siRNAi 以外はアプライドバイオシ ステムズブランド製品になりますので日本国内からのアクセスでは表示されません。
2.siRNA をクリックした後、検索メニュー上の 3 製品群から中央の Steahlth RNAi siRNA の製品リン クいずれかをクリックすると、上記検索画面が表示されます。
32 Stealth RNAi siRNA の検索
必要な生物種をクリックして青く反転します。複数の生物種を選択することも可能です。
生物種の下の欄に遺伝子名等を入力します。入力するとオートコンプリート機能によりにキーワ ードを含む遺伝子名が表示されるので、該当の遺伝子名をクリックすることもできます。または遺 伝子名をそのまま入力し、検索をクリックします。
33 Option1 の下空欄に右に表示さている対応している ID 番号を、スペース、コンマ(,)もしくは Enter で改行しながら入力するか、Option2 で記載のあるサポートできるファイル形式のファイルを準備 して、ファイルを選択をクリックし該当ファイルを選択した後検索をクリックします。 検索結果が表示されますので、各種情報メニューを参考に必要な siRNA を選択してカートに追 加をクリックします。
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View Details をクリックすると、ターゲット遺伝子の詳細情報が確認できます。青字の遺伝子 ID をクリックすると公共データベースの情報を参照できます。左下の View Full Product Details をクリ ックすると別ウィンドウで該当の siRNA に関連する全情報を表示します。
Control をクリックすると、siRNA 実験に必要なコントロール製品が表示されますが、こちらの製 品群はウェブ経由でご購入することはできません。製品名をクリックし製品ページにて製品番号を ご確認の上、代理店担当者様経由でご注文をお願致します。
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各 siRNA の右上の View siRNA on Map をクリックすると、遺伝子上の siRNA のターゲット位置を マップ形式で表示します。
赤で表示されているのが、該当の siRNA を示しています。同一遺伝子に対する他の siRNA もマ ップ内に表示されます。St が stealth RNA、S が scilencer siRNA(ambion)になります。
36 siRNA の詳細を確認後、必要な製品にチェックを入れてカートに追加をクリックしてカートに追加 します。同一ターゲットに対して表示された 3 種類をまとめてご購入する場合は、必ず検索結果左 上の 3 本セットをクリックして下さい。1 本ずつを 3 種類カートに入れますと 3 本セットの価格が適 用されませんのでご注意下さい。 画面左上に下記表示が出るので→カートを見るをクリックしてカートに進みます。カートに追加 後は P18-21 の操作に従ってご注文の手続きを行います。
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複数製品をクリック後、Compare をクリックすると、複数製品を比較検討することが可能です。ま た製品をクリック後 Email をクリックすると、製品情報をメールで送信することができます。Export を クリックすると、テキストファイルとしてエクスポートできます。
Other Species Targeted の表示がある場合はクリックすると該当の siRNA が他の生物種の遺伝子 配列と全く同一であることが記載されておりますので、こちらが実験上使用できないと判断される 場合は、該当製品を選択しないようにします。
検索結果の左側のメニューは下記のとおりです。 Change Your Search 新しい検索を行います
Narrow Your Results 生物種を絞り込むことができます Reset Filters 絞り込みをリセットします
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5.BLOCK-iT™ RNAi Designer
既製品以外の siRNA のカスタムデザインを行う場合や、siRNA,microRNA 等の発現ベクターの系 を構築する為のインサート配列をデザインする際には BLOCK-iT™ RNAi Designer ウェブサイトでの デザインが有用です。
http://rnaidesigner.lifetechnologies.com/rnaiexpress/rnaiDesign.jsp
はじめにデザインのオプションを選択します。
Stealth RNAi™ siRNA ターゲット配列から Stealth siRNA のカスタムデザインを行います siRNA ターゲット配列から siRNA のカスタムデザインを行います
miRNA RNA ターゲット配列から miRNA 発現ベクターに挿入する DNA 配列のカス タムデザインを行います
shRNA ターゲット配列から shRNA 発現ベクターに挿入する DNA 配列のデザ インを行います
siRNA to Stealth RNAi siRNA ターゲット配列と siRNA 配列(19 塩基)から Stealth RNA のデザイン(25 塩基)のカスタムデザインを行います
siRNA to shRNA siRNA 配列とループ配列及び使用ベクターを選択して、shRNA 発現 用 DNA 配列のカスタムデザインを行います
39 Stealth RNAi™ siRNA
Step1: Accession 番号もしくは塩基配列を入力します Step2: siRNA のデザイン領域を選択します
Step3: Blast 検索対象の生物種を選択します Step4: GC 含量の範囲を指定します
上記の設定が終了したら Step5 RNAi Design をクリックします。
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検索結果が表示されます。必要な配列に左端□をクリックし、チェックをいれて画面上下いずれ かの Continue をクリックします。
配列の Rank の★印をクリックすると、Design Rank のページに移動します。
http://rnaidesigner.lifetechnologies.com/rnaiexpress/help/help_for_rnai_designer.htm#probability. htm
Design Rank に関しては下記定義も参照下さい。
Design Rank
The BLOCK-iT™ RNAi Designer will generate up to 10 designs per target sequence. Each design is given one of the following five Probability rankings:
Designs with this ranking closely fit the characteristics of the most effective RNAi molecules. They have the greatest likelihood of resulting in >70% knockdown. We recommend testing 2 or 3 designs from this group.
Designs with this ranking fit most of the characteristics of effective RNAi molecules. They are very likely to result in >70% effective knockdown. We recommend testing 3 designs from this group.
Designs with this ranking fit some of the characteristics of effective RNAi molecules. They are likely to result in >70% effective knockdown. We recommend testing at least 3 designs from this group.
Designs with this ranking have fewer of the characteristics of effective RNAi molecules but they are still likely to result in >70% effective knockdown. We recommend testing at least 3 designs from this group.
Designs with this ranking have the fewest characteristics of effective RNAi molecules but many are still likely to result in >70% effective knockdown. We recommend testing at least 3 designs from this group.
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下記画面で Tube もしくは Plate を選択し、Order Online をクリックします。併せて Negative Control として適切な配列も表示されるので必要な場合は□をクリックしてチェックを入れて追加します。
Researcher name 欄に研究者名を入力（半角英字）し、スケールをプルダウンメニューから選択 し、Add to Cart をクリックします。
42 siRNA
siRNA をクリックします。
Step1: Accession number 又は塩基配列を入力します Step2:デザイン領域を選択します
Step3:Blast 対象の生物種を選択する Step4:GC 含量を指定します
Step5:モチーフパターンを選択します
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デザイン結果が表示されます。Rank を参考に必要な製品の左□をクリックし画面上下いずれか の Continue をクリックします。
下記画面で Tube もしくは Plate を選択し、Order Online をクリックします。併せて Negative Control として適切な配列も表示されるので必要な場合は□をクリックしてチェックを入れて追加します。
Researcher name 欄にお名前を入力（半角英字）し、精製度、スケール、Overhang、修飾の有無 をプルダウンメニューから選択し、Add to Cart をクリックします。
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45 miR RNAi
miR RNAi をクリックします。
Step1: Accession number 又は塩基配列を入力します Step2:デザイン領域を選択します
Step3:Blast 対象の生物種を選択する Step4:GC 含量を指定します
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ターゲット配列候補が表示されますので、必要な配列の左□をクリックしてチェックを入れて、画 面上下いずれかの Design miR RNAi をクリックします。
Invitrogen's pcDNA™6.2-GW/miR 及び nd pcDNA™6.2-GW/EmGFP-miR vectors.へのクローニ ング配列が表示されますので、確認頂き Order Online をクリックします。アニーリング方法に関し ては、プロトコルのリンクをクリックして入手できます。
Researcher Name にお名前を入力（半角英字）し、各 DNA の修飾の有無、精製度、スケールをプ ルダウンメニューから選択し、Add to Cart をクリックします。
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48 shRNA
shRNA をクリックします。
Step1: Accession number 又は塩基配列を入力します Step2:デザイン領域を選択します
Step3:Blast 対象の生物種を選択します Step4:GC 含量を指定します
Step5: ベクター及び挿入方向をプルダウンメニューから選択します
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10 種類の shRNA 配列候補が表示されますので、必要な配列の左□をクリックしてチェックを入 れて、画面上下いずれかの Design shRNA Oligos をクリックします。
ループ配列を Default Loop Sequence のプルダウンメニューから選ぶか、右欄の Custom Loop Sequence 欄に配列を記入して Design をクリックします。
クローニング配列が表示されますので、確認頂き Order Online をクリックします。アニーリング 方法に関しては、プロトコルのリンクをクリックして入手できます。
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Researcher Name にお名前を入力(半角英字)し、各 DNA の修飾の有無、スケールをプルダウン メニューから選択し、Add to Cart をクリックします。
51 siRNA to Stealth RNAi™ siRNA
siRNA to Stealth RNAi™ siRNA をクリックします。
Accession 番号又は配列を入力し、Blast 対象の生物種を選択し、下段に siRNA の配列を 19 塩 基で入力し Submit をクリックします。
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Stealth RNA の 25 塩基に置換された配列（この段階では DNA 配列）が表示されます。実験必要 な Negative Control 配列が下に表示されますので必要であれば□にチェックを入れた後、Tube か Plate のいずれかにチェックを入れて Order Online をクリックします。
Researcher Name にお名前を入力（半角英字）し、精製度、スケールをプルダウンメニューから 選択し、Add to Cart をクリックします。
Stealth RNA（25 塩基 2 本鎖 RNA）としてカートに追加されるので。P18-21 の操作に従ってご注文 の手続きを進めます。
53 siRNA to shRNA
siRNA to shRNA をクリックします。
左の Sequence に siRNA の配列を入力し、ループ配列を Default Loop Sequence のプルダウンメ ニューから選択するか、Custom Loop Sequence 欄に記入しご使用予定の vector をプルダウンメニ ューから選択し、Design shRNA Oligo をクリックします。
インサート配列が表示されますので確認し、Order Online をクリックします。
Researcher Name にお名前を入力（半角英字）し、修飾の有無、精製度、スケールを選択し、Add to Cart をクリックします。
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6. Ordering Synthetics for in vivo RNAi
in vivo グレードの siRNA をご注文する場合は BLOCK-iT™ RNAi Desighner サイト又は BLOCK-iT™ RNAi Express サイトのSynthetics for in vivo RNAiをクリックするか、下記 URL にアクセスします。
http://rnaidesigner.lifetechnologies.com/rnaiexpress/inVivoService.jsp
Custom Stealth RNAi siRNA を選択した場合は、Enter duplex name に配列名を入れて、Sense strand sequence と Antisense strand sequence に相補鎖になる 25 塩基の配列を入力します。 Custom siRNA を入力した場合は相補鎖になる 19 塩基の配列を入力します。Custom siRNA では 2 塩基オーバーハング(dTdT)が付加されます。相補鎖になっていない場合はエラーメッセージが出 て次のステップに進むことができません。
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精製度をプルダウンメニューから選択します。Desalt もしくは HPLC in vivo purity を選択した場合 に、画面右の Endo Toxin Testing の左□をクリックするとエンドトキシンテストを追加して合格した RNA を出荷します。次にその下の Researcher Name にお名前を入力（英語）し、Add to Cart をクリ ックします。
Stealth Select RNAi siRNA を選択した場合は、既成品の ID 番号を入力します。検索が必要な場 合はFind Stealth Select RNAi siRNA IDs をクリックすると前述の BLOCK it Express のサイトに移動し ますので、検索を行います。
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右欄の Control を選択すると、既製品のコントロール配列と同じ配列の製品を、精製度、スケー ルを変更してご注文頂けます。
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7. Plate Select
必要な RNA 製品を 96 ウェルフォーマットのプレート内に配置を指定してご注文を行うことができ ます。合成スケールは全て 1nmole スケールになります。BLOCK-iT™ RNAi Desighner サイト又は BLOCK-iT™ RNAi Express サイトのPlate Selectをクリックするか、下記 URL にアクセスします。
http://rnaidesigner.lifetechnologies.com/rnaiexpress/plate.jsp
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Plate Name 及び Researcher Name に英語で入力し、Plate Type は siRNA か Steahth RNAi siRNA を選択し ADD をクリックします。精製度及びスケールは変更できません。
下記 96 ウェルプレートの画面が表示されますので、右上のメニュー欄から検索メニューを選択 します。RNAi Express 又は RNAi Designer を選択すると別ウィンドウで BLOCK it RNA Express 又は BLOCK it Designer が開きますので製品の検索もしくはカスタム配列の入力を行います。
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検索又はデザインの画面上で Plate を選択し Add to Shopping Cart をクリックします。
プレートの画面に戻ると追加したものが CLIPBOARD 欄に追加されていますので、該当製品にカ ーソルをあわせたまま配置したいウェル上までドラッグしカーソルを配置したいウェル上でも再度 クリックして配置します。画面右下には Negative Control 製品が準備されているので、必要なもの があれば同様に配置します。
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配置が終わりましたら画面下の Order Plate をクリックします。
一度次のステップに進むと作成したプレート構成が保存されませんので、継続的に同じ配置の ものを利用する予定であれば、プレート下のメニューの Save Plate をクリックし、Yes をクリックして 保存します。記載のとおり保存期間は 30 日のみになります。
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更に長期間保存する場合は、プレート下の Download Plate をクリックし、YES をクリックして、テキ ストファイル(.csv)として保存します。
ダウンロードしたファイルは、新規作成の際に Import Plate を選択しファイルを指定して Upload をクリックして読み込ませることができます。
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または新規プレートを開いた後プレート右上の Add plate をクリックしてタブでプレートを追加す ることができます。
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8.マイアカウント使用方法
ご注文用アカウントでログインした状態で、過去のご注文状況や、登録情報の変更等を行うこと ができます。名前表示にカーソルをあわせると下記メニューが展開されるので必要なメニューを選 択します。 アカウント: アカウントトップページに移動します ご注文: ご注文履歴を参照できます Shopping Carts: カート情報を参照できます お気に入りリスト:お気に入りリストを参照できます カスタム製品: RNA のご注文では使用しません プロファイル: お客様情報、出荷先/請求先情報の閲覧 Sign Out:ログアウトします お客様のアカウントトップページ65 ご注文履歴 名前表示にカーソルをあわせてご注文をクリックします。 下記画面が表示されます。ご利用履歴は過去 6 カ月分のご注文履歴が表示されます。受注番号 をクリックするとご注文の詳細を確認することができます。再注文をクリックすると同じ内容で再度 ご注文を行うことができます。 デフォルトでは最近のご注文が表示されますが、他を表示したい場合は画面左のメニューをそ れぞれクリックして選択します。 最近のご注文 過去 6 カ月間のご注文履歴 ショッピングカート 設定したカートの情報 お気に入りリスト 設定したお気に入り一覧の表示 ←お客様のアカウント お客様のアカウントトップページに戻る
66 アカウント管理 氏名にカーソルをあわせて プロファイルをクリックします。 アカウントの左側のメニューをクリックして、設定を変更します。 プロフィール情報（デフォルト） 右上の“情報を編集”をクリックすると編集画面が表示され編集が 可能です パスワード変更 パスワードの変更を行うことができます 秘密の質問 秘密の質問の設定変更を行うことができます 連絡方法 受注確認メールアドレスの追加などを行うことができます 承認依頼 ご注文手続きを他のユーザーに依頼する設定を行うことができます 請求先/出荷先住所 請求先/出荷先担当者の氏名を変更できます。弊社指定の配送業 者に対して登録のお名前の方宛てに配送することを義務付けております。ご不在の場合代理店 の方でも受け取り可能な場合は、「どなたでも受け取り可能」とご入力ください。 ご連絡先住所 使用しません お支払情報 使用しません ←お客様のアカウント お客様のアカウントトップページに戻る
67 承認依頼 ご自身で作成したご注文内容を、ご自身で決済せずに他の方にご注文の承認を仰ぐ場合、承認 者設定を行います。承認を受ける立場の方は、既にユーザアカウントをお持ちであり、かつ、請求 先の代理店情報が同一である方に限られます。また、承認する方も事前に承認を受ける方（被承 認者）のアカウント（メールアドレス）を登録している必要があります。 承認者の検索 画面左の項目から承認依頼をクリックします。注文の”承認を依頼する”の右側の▼をクリックし て下記のように展開し、承認者のメールアドレスを入力し、検索を行います。 承認者が検索された場合は、下記の表示に変わりますので、変更を保存をクリックします。
68 承認する方宛てに To、申請した方に Cc で下記承認者設定に関する自動通知メールが送信され ます。 承認者が検索できなかった場合は、”新しい承認者を追加”をクリックして、承認者の登録を行 います。この登録は新規アカウントの登録ではなく、まだアカウントをお持ちでない方がここから登 録を行うことはできません。
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姓、名、メールアドレス、電話番号（任意）を入力後、承認者を追加をクリックします。
承認する方宛てに To、申請した方に Cc で下記承認者設定に関する自動通知メールが送信されま す。
70 承認する立場の方が、相手の方を被承認者として設定する 承認を受け取る立場の方は、あらかじめ承認を提出する方を被承認者として事前に登録してお くことが必要です。ご注文の承認の右側の▼をクリックして下記のように展開します。検索被承認 者欄にメールアドレスを入力し検索をクリックします。 承認を受け取る方のメールアドレスが見つかった場合は、下記の画面が表示されますので、被 承認者にご注文金額の上限を設定する場合は、利用限度額の設定欄に金額を入力します（任 意）。 また承認通知のメールを受け取りたいメールアドレスがある場合は、追加 E メールアドレ ス欄にアドレスを入力し保存をクリックして追加します。また一時的に代理の承認者を設定する場 合は、検索代理承認者欄に、メールアドレスを入力し検索をクリックします。最後に 変更を保存を クリックして情報を更新します。
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9.FAQ（よくある質問と答え）
Q1. ログインができません。 Q2. パスワードにはどんな文字が使用できますか。 Q3. ご注文番号の項目には何を入力しますか。 Q5. 登録情報を変更したい場合はどうすればいいですか。 Q6. 1本鎖RNAのご注文はできますか？ Q7. 承認設定の使い方がよくわかりません。 Q8. 製品の受け渡しについて（登録者以外の方を受取人にしたい） Q1. ログインができません。 A1. ご使用のブラウザのCookieの削除をすると解消できる場合がございます。下記参照にCookie の削除をお試し下さい。それでも解決しない場合はオーダーサポートまでご連絡ください。 ℡:03-6832-6980（ガイダンス①の後②） Email: [email protected] Cookieの削除について Internet explorer ツール-インターネットオプションを選択します。 全般タブ内の削除をクリックします。73
ファイルの削除、 Cookieの削除 及び 履歴の削除をクリックします。
Google Chrome
画面右上の アイコンをクリックします。 設定を選択します。
74 画面下の “詳細設定を表示” をクリックします。 閲覧履歴データの消去”をクリックします。 Safari (Macintosh) Safari – キャッシュを空にする を選択します。 “空にする”をクリックします。
75 Firefox
ツール – 最近の履歴を消去 をクリックします。
76 Q2. パスワードにはどんな文字が使用できますか。 A2. ログイン用のパスワードは5-15文字の半角英数字の組み合わせで設定していただく必要が ございます。 例：password1→○、password→× Q3. ご注文番号の項目には何を入力しますか。 A3. 必須項目のこの欄にはお客様の管理番号をご入力ください。特にご指定がない場合はドッ ト(.)や日付（20120401）などをご入力ください。 Q4. 登録情報を変更したい場合はどうすればいいですか。 A5. 配送先の変更をご希望の場合はWEB へログイン後、マイアカウント内アカウント管理ペー ジから請求先/出荷先住所のページより申請いただけます。ただし、この場合はご利用代理店 の変更はできません。ご利用代理店変更をご希望の場合は、お手数ですが、カスタムプライマー オーダーサポート までFAX かEmail で下記項目についてご連絡ください。 ・ログインID（ユーザーネーム） ・お名前 ・変更先所属名 ・変更先所属住所 ・変更先電話番号 ・変更先email アドレス ・変更先代理店名 FAX 送信先： 03-6832-9585 Email 送信先: [email protected] Q5. 1本鎖RNAのご注文はできますか？ A5.1本鎖RNAのご注文は承っておりません。
77 Q6. 承認設定の使い方がよくわかりません。 A6. 承認設定はご注文者（被承認者）がご注文を入力し、ご注文内容の承認を他の登録済ユー ザー（承認者）に依頼する場合に使用します。任意ですので、特に承認を必要としない場合、 設定は不要です。 承認者になる方は下記の条件に一致している必要があります。 ・オンラインオーダーのアカウントを登録済であること。 ・代理店の会社名が一致していること。 ・あらかじめ承認者になる方が、承認する方を被承認者として設定を完了しておいて頂く こと。 また、被承認者の方でも承認者の登録が必要になります。 Q7. 製品の受け渡しについて、登録者以外の方を受取人にしたい場合はどうすればいいです か。 A7. RNA 製品はご注文時に受取人に設定した方へ直接手渡しの配送となります。（基本的には ご登録者様氏名宛）。もし、ご登録者以外の方を受取人にされたい場合は、P53のマイアカウント の設定を参考に変更下さい。もし同研究室内のどなたでも受取りが可能の場合は、「どなたでも受 け取り可能」とご入力ください。
