キャピラリー電気泳動法による尿中覚せい剤およびその代謝物の光学異性体スクリーニング試験法の開発

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(1)鑑識科学，9(2)，103―111(2004). 103. ―原著― キャピラリー電気泳動法による尿中覚せい剤およびその代謝物の光学異性体スクリーニング試験法の開発地中. 啓1，飯尾麗子1，田中星司1，高山成明1，早川和一2. 石川県警察本部科学捜査研究所1，金沢大学大学院自然科学研究科2 〒9208553 金沢市鞍月 111 〒9201192 金沢市角間町2. Development of Chiral Screening Test Method of Methamphetamine and Its Metabolites in Urine by Capillary Electrophoresis Satoshi Chinaka1, Reiko Iio1, Seishi Tanaka1, Nariaki Takayama1 and Kazuichi Hayakawa2 Forensic Science Laboratory, Ishikawa Prefectural Police H.Q., 11 Kuratsuki, Kanazawa 9208553, Japan1 Graduate School of Natural Science and Technology, Kanazawa University, Kakumamachi, Kanazawa 9201192, Japan2. (Received 1 October 2003; accepted 8 December 2003) A rapid and simple analysis method for the chiral determination of methamphetamine (MA) and its metabolites, amphetamine (AP) and phydroxymethamphetamine ( pOHMA), in urine by capillary electrophoresis (CE) has been developed. Urine sample was directly injected into the CE system after pretreatment of dilution and ˆltration. In the analyses of healthy people's urine samples spiked with MA, AP and pOHMA, the detection limits in urine were 0.5, 0.5 and 0.3 mg/ml, respectively. The recovery of each compound from urine was 95105. The proposed method was successfully applicable to the chiral analysis of urine samples from MA addicts.. Key words : Methamphetamine, Capillary Electrophoresis, Chiral Analysis, Direct Injection, Urine. 緒. 言. 従来，日本国内で乱用される覚せい剤は，d. る．MA 類のキラル分離の方法としては，ガスクロマトグラフィ（ GC）や高速液体クロマトグラフィ. methamphetamine ( MA ）が大部分であったが，最. （ HPLC ）が一般的であり，キラル分離カラムを用. 近では， lMA も散見されるようになり1) ，覚せい. いる分析法2,3) ，あるいは，光学活性試薬による誘. 剤の光学異性体（キラル）分析の重要性は増してい. 導体化を行った後に汎用的な分離カラムで分離を行.

(2) 地中. 104. 啓ほか. う分析法4,5) が報告されている．また，最近では，. 研究所の覚せい剤研究者より譲渡されたものを，dl. キャピラリー電気泳動法（CE）による分析法6,7)も. phydroxydesmethyl BZP (dlpOHDMBZP）は. 実用化されている．著者らは， cyclodextrin ( CD）. 大阪府警察本部科学捜査研究所より提供されたもの. CE8,9)，. を用いた．これらの試薬は超純水に溶解し標準試料. をキラルセレクターとして用いた UV 検出. あるいは，CE/質量分析法（CE/MS)10)による覚せ. とした．. い剤およびその関連化合物の光学異性体一斉分析法. 内部標準物質（ IS ）には，和光純薬工業製の 2 . を開発し，尿の液液抽出物中の覚せい剤およびその. phenylethylamine ( IS 1 ）と東京化成工業製の 1 . 代謝物分析への応用を報告した．. amino4phenylbutane (IS2 ）を用い，各6.25 mM. 警察の尿中 MA 鑑定では，原理の異なる 2 種類. を含む水溶液を調製した．. の分析法によるクロスチェックが必要とされてお. 泳動液調製用の tris ( hydroxymethyl ) aminometh-. り，一つの分析法として，GC/MS によるフルマス. ane (Tris）と NaH2PO4･2H2O は，和光純薬工業製. スペクトル測定が必須となっている．もう一つの分. の試薬特級品を用い，キラルセレクターとして添加. 析法には，シモン呈色反応による薄層クロマトグラ. する b cyclodextrin ( b CD ）および heptakis ( 2,6. フィ11) ,. FID や NPD を検出器に用いた GC ，ある. diO methyl )b cyclodextrin ( DM b CD ）は和光. いは， UV や蛍光，化学発光等を検出に用いた. 純薬工業製を用いた．その他の試薬は市販の試薬特. HPLC 等が使用されている．これらの分析法で. 級品を用いた．超純水は Millipore 製の Milli . は，いずれも前処理として抽出操作が欠かせないこ. RX12a/MilliQ SP システムにより製造した．. とから，通常，その前段階としてスクリーニング試.  泳動液の調製. 験が行われる．しかし，一般的に用いられるイムノ. 泳動液は，電気泳動時にキャピラリー両端にセッ. アッセイ法による市販のスクリーニングキットで. トする泳動用容器に充填するもの（泳動液A）とキ. は，光学活性によって検出感度が異なる12)といった. ャピラリー内に充填するもの（泳動液 B）の 2 種類. 問題点がある．. を用いた．泳動液 A は Tris リン酸緩衝液（ pH. そこで，著者らが開発した UV 検出 CE によるキ. 6.15 ）であり， Tris 3.104 g と NaH2PO4 ･ 2H2O. ラル分析法を改良し，尿を装置に直接導入できる分. 15.504 g を超純水 1000 ml に溶解し調製した．泳動. 析条件を検討し，スクリーニング試験法ならびにク. 液 B は， 12 mM b CD と 6 mM DM b CD を含む. ロスチェックの一分析法として有用な分析法を開発. Trisリン酸緩衝液（pH 6.15）であり，bCD 0.681. した．. g と DM b CD 0.399 g を泳動液 A 50 ml に溶解し. て調製した．なお，泳動液 B は，bCD 濃度が飽和. 材料および方法  試薬類 d methamphetamine ･ HCl ( d MA ）および dl . 濃度に近いため，冷蔵保存すると b CD が析出してしまうことから，常温で保存する必要がある．泳動液 A, B 共，常温で 3 ヵ月間以上安定であった．. ephedrine ･ HCl ( dlEP) , lEP は大日本製薬製を，. なお，泳動液 B は用時に孔サイズ0.45 mm のメンブ. dl p hydroxymethamphetamine ( dl pOHMA ）お. ランフィルターでろ過した．. よび d benzphetamine ･ HCl ( d BZP ）は Sigma 製.  装置および測定条件. を， dl norephedrine ･ HCl ( dl NE ）は東京化成工. 装置は Agilent Technologies 製のキャピラリー電. 業製を， dlmethylephedrine ･ HCl (dl ME）は保栄. 気泳動システムであり，ダイオードアレイ検出器を. 薬工製を用いた． l MA および d amphetamine ･. 内蔵した CE 装置本体（ G1600A ）とコントロール. 1 / 2H2SO4 ( d AP ) , l AP は厚生労働省より交付さ. 用のソフトウェア ChemStation が組み込まれたコ. れたものを， dl AP および dl dimethylampheta-. ンピュータで構成される．キャピラリーは同社製の. mine･HCl (dlDMA), dDMA, desmethylselegiline. ポリビニルアルコール（ PVA ）コーティングキャ. ( DM SG ，別名 l desmethyldeprenyl ）は科学警察. ピラリー（ 50 mm i.d. × 64.5 cm ，有効長 56 cm ）を.

(3) キャピラリー電気泳動法による尿中覚せい剤およびその代謝物の光学異性体スクリーニング試験法の開発. 105. 用いた．主な測定条件は次のとおりである．試料導. 1.5 ml 容バイアル）を 3 番に，廃液容器を 4 番にセ. 入50 mbar×12 sec（約12 nl 導入），印加電圧＋. ットした例である．. 30 kV ，キャピラリー温度 25° C ，検出波長 190.  尿試料. 350 nm（定量波長195 nm/バンド幅10 nm).. 平成14年中に石川県科学捜査研究所に鑑定嘱託さ. 1 回の分析ごとに，キャピラリー両端にセットす. れ， MA 陽性と判定された MA 乱用者尿を用い. る 2 つの泳動用容器（1.5 ml 容バイアル）内の泳動. た．尿 0.2 ml に， IS 1 と IS 2 各 6.25 mg / ml を含む. 液 A を新しいものに詰め替えた．この交換操作. 水溶液 0.8 ml を加え，孔サイズ 0.45 mm のメンブラ. は， CE システムの泳動液自動交換機能（リプレニ. ンフィルターでろ過し分析試料とした．MA 濃度が. ッシュ機能）を用いて自動的に行った．これは，泳. 100 mg / ml を超える分析試料については， IS 1 と. 動用容器内の泳動液を排出し，ストック・ボトル. IS 2 各 5 mg / ml を含む水溶液でさらに 5 倍希釈し. （ 500 ml 容）から新しい泳動液を充填する機能である．本法では，分析開始前に泳動液 A のリプレニ. た．  泳動時間の補正と定量法. ッシュを行うと共に，並行して，泳動液 B でキャ. 得られたエレクトロフェログラムについては，マ. ピラリーのフラッシュ（通液）を行った．これらの. トリックスの影響等によるピークシフトを補正する. 操作に要する時間は約 5 分であり，測定時間（25分）. ため，既報9) と同様， ChemStation 上で泳動時間の. と併せた 1 試料あたりの分析時間は約 30 分間であ. 補正処理を行った．補正処理は， 2 つの IS ピーク. る．ChemStation の設定条件を Fig. 1 に示す．この. を基準にエレクトロフェログラムを時間軸方向に移. 設定条件は，泳動用容器をトレイの 1 番および 2 番. 動・伸縮するシグナル処理機能を用いて行った．. の位置に，フラッシュ用容器（泳動液 B を入れた. 定量については， IS 1 が尿常成分（健常人で約 30 ng/ml)13) であることから，IS2 による内部標準. 法で行い，あらかじめ健常人尿に標準品を添加して作成した検量線を用いた．. 結果および考察  分析条件の検討著者らがこれまでに開発した分析法8,9) の測定条件（フューズドシリカキャピラリー素管，泳動液 pH 2.5）を用いて，尿を直接 CE 装置に導入し分析. を行ったところ，エレクトロフェログラム上に尿マトリックス由来のピーク（以下，マトリックスピーク）が多数現れ，目的化合物の検出の妨害となった．妨害ピークの除去には，泳動液の pH を上げ，マトリックスピークの泳動時間を目的化合物ピークより相対的に遅らせることが効果的であったが， pH の上昇により電気浸透流（EOF）が発生し，ピー. ク分離能の低下を招いた．そこで， EOF を抑制するために内壁がコーティングされたキャピラリーを用いることとし，キャピラリー（内径・長さ），泳動液（種類・pH・濃度），キラルセレクターとして Fig. 1 Parameters of the proposed method of the CE system.. analytical. 添加する CD（種類・濃度）について検討を行った．その結果，キャピラリーに内径 50 mm ，全長 64.5.

(4) 106. 地中. Fig. 2 Electropherograms of (a) standard mixture (0.20.3 mg/ml each), (b) control human urine spiked with 1 mg/ml dMA, 2 mg/ml dlAP and 2 mg/ml dlpOHMA, and (c) control human urine.. 啓ほか. Fig. 3 Multiple injection electropherograms of a control human urine sample using the same electrolyte..  連続分析条件の検討 CE ではキャピラリー内の泳動液は， 1 回の分析. ごとに新しいものに置換するが，キャピラリー両端 cm の PVA コーティングキャピラリーを用い，泳. にセットする泳動用容器内の泳動液は交換せずに，. 動液に 12 mM b CD と 6 mM DM b CD を含む. 通常，数回～十数回程度用いる．上記条件で同一の. Tris リン酸緩衝液（ pH 6.15 ）を用いることで，. 泳動液を繰り返し使用した場合に， MA 類および. MA 類および IS ピークと尿マトリックスピーク群. IS の泳動時間は変動しなかったが，一部のマトリ. の分離が可能であった．さらに，印加電圧，キャピ. ックスピークの泳動時間が大きく変動した． Fig. 3. ラリー温度，検出波長について最適条件の検討を行. に健常人尿を同一の泳動液を用いて繰り返し 5 回分. い，「材料と方法」項に示す条件を得た．. 析したエレクトロフェログラムを示す．一回目の分. 次に，尿試料の直接導入条件について検討した．. 析で泳動時間が約20分のマトリックスピークが，徐. 尿を希釈せずにろ過のみで，装置に導入した場合に. 々に後退し，3 回目の分析では，IS2 に重なってい. は，試料によっては，ピーク理論段数や分離度が低. る．また， 3 回目以降の測定で pOHMA に重なる. 下する現象がみられた．これは，尿中のイオン強度. 小さなピークが観察された．このように一部のマト. が高く，スタッキング（キャピラリー内濃縮）効果. リックスピークが，大きくシフトする原因として. が充分に得られなかったためと考えられた．そこ. は，これらピークを示す成分の pKa が泳動液の pH. で，試料のイオン強度を下げるため，尿を内部標準. に近く，電気泳動により生ずる泳動液の僅かな組成. を含む水溶液で希釈することとし，装置への導入量. 変化の影響を大きく受けてしまうことが考えられ. と合わせて検討した．その結果，尿を 5 倍希釈した. る．. 後，ろ過し， 50 mbar で12秒間導入することで，充. 本研究は，スクリーニング試験法ならびにクロス. 分なスタッキング効果が得られ，ピーク形状，分. チェックに用いることができる分析法の開発を目的. 離，感度共に良好であることがわかった．. としており，多検体の自動連続分析ができる必要が. 以上の条件で，標準試料，健常人尿およびそれに. ある．そこで，泳動用容器内の泳動液を分析ごとに. MA 類を添加した試料を分析した例を Fig. 2 に示. 自動交換することで，連続分析における尿マトリッ. す．. クスピークの泳動時間の変動を防いだ．.

(5) キャピラリー電気泳動法による尿中覚せい剤およびその代謝物の光学異性体スクリーニング試験法の開発. また，自動交換に適用し易くするため，2 種類の. 107.  検出感度，定量性および再現性. 泳動液を用いる泳動法を考案した．中性化合物であ. MA, AP, pOHMA の標準品を健常人尿に添加. る b CD と DM b CD は電気的移動度を持たない. し，検出感度および定量性について検討した結果を. ことから， EOF が発生しない条件下では，電気泳. Table 1 に示す．検出下限は 0.3 0.5 mg / ml ( S / N ＞. 動中もキャピラリー内に留まっている．したがっ. 3）であった．検量線が直線性（r2＞ 0.996 ）を示す. て，泳動用容器内の泳動液中に CD 類が無くても，. 範囲は，定量にピーク面積法を用いた場合は 1250. キャピラリー内の CD 類濃度は泳動操作中一定であ. mg / ml ( pOHMA は 0.6 250 mg / ml ）であるのに対. り，キラル分離も同様に達成されることが考えられ. し，ピーク高さ法を用いた場合は， 1 50 mg / ml. た．そこで，キャピラリー内は CD 類を含む泳動液. ( pOHMA は 0.6 50 mg / ml ）であった．これは，各. （泳動液 B），泳動容器内は CD 類を含まない泳動液. 成分の濃度が 50 mg / ml より高い場合，ピークが高. （泳動液 A）として（Fig. 4 参照），分析を行ったと. さ方向だけではなく，時間軸方向に広がるためであ. ころ，泳動液 B だけを用いた場合と同じエレクト. る．この現象を d MA を例にして Fig. 5 に示す．. ロフェログラムが得られた．これにより，交換する. ピーク末端の位置はいずれの濃度でも同じで，濃度. 泳動液は泳動液 A のみとなり， CD 類の消費量を. が増すにつれて，ピーク開始位置が前方にシフト. 大幅に減らすことができる上， CE 装置のリプレニ. し，さらに，ピーク自体が徐々にテーリング形状を. ッシュ流路内に高濃度の CD が入ることが無く，流. 示すことがわかる．各濃度のピークを比較すると，. 路の目詰まり等が生ずるおそれも無くなった．. ピーク末端位置はいずれも 16.35 分付近であるのに. その他，連続分析条件について種々検討し，最終. 対し，ピークトップ位置は， 1 mg / ml で 16.20 分，. 的に「材料と方法」項と Fig. 1 に示す連続分析条. 250 mg/ml で15.99分であり，0.21分の差がある．d. 件を得た．. MA と lMA の泳動時間の差は0.38分であることか. ら，高濃度のものについてピークトップ位置を基準に定性を行った場合，キラリティを誤判定するおそれがあるので注意が必要である．検量線の直線性とピークトップ位置のシフトを考慮して，定量にはピーク面積値を基準にした検量線を用い， MA 濃度が 100 mg/ml を超える場合には，分析試料をさらに内部標準各 5 mg/ml を含む水溶液で 5 倍希釈し，再度分析を行うこととした．これにより，誤判定を防ぐことができた．次に，再現性（定量精度）について検討した．健. Table 1 Detection limits and linearity of calibration curves. limita). Detection Compound ( mg/ml in urine) AP MA pOHMA Fig. 4 The developed electrophoresis method using two kinds of electrolyte.. a) b). S/N＞3. r 2＞0.996.. 0.5 0.5 0.3. Linear rangeb) ( mg/ml in urine) Peak height. Peak area. 1.050 1.050 0.650. 1.0250 1.0250 0.6250.

(6) 地中. 108. 啓ほか. Fig. 6 Electropherograms of MA addicts' urine samples.. と良好な値を示した．さらに，キャリーオーバーについて検討した． 500 mg/ml になるよう dMA を添加した尿を分析し. た直後に，未添加尿を分析したが，検出下限（ 0.5 mg/ml）以上の dMA ピークは検出されなかった． Fig. 5 dMA peaks in electropherograms of control urine samples spiked with dMA of various concentrations..  MA 乱用者尿の分析 MA 乱用者尿23試料を分析したところ，全ての試. 料から妨害なしに MA とその代謝物 AP および pOHMA をキラル分離し，検出することができ. た．その分析例を Fig. 6 に示す．なお，本法では Table 2 Recoveries of MA and its metabolites from urine samplesa). Compound. lAP dAP dMA lpOHMA dpOHMA a). b). Found (), mean±S.D. 1 mg/ml. spikedb). 105.2±9.7 104.9±9.0 95.7±8.0 102.9±4.0 103.7±4.1. 50 mg/ml. spikedb). 99.1±1.8 98.6±1.3 98.3±1.8 99.6±1.1 100.0±0.9. Five healthy persons' urine samples spiked with dlAP, dMA and dlpOHMA. Concentration as each enantiomer in urine.. 検出にダイオードアレイ検出器を用いて 190 350 nm の波長域を同時測定していることから，各ピー. クの UV スペクトル情報も得ることができ，確度の高い同定を行うことができる．今回分析を行った MA 乱用者尿のうち 10 試料について，既報10) に従い，抽出操作を行った後 CE / MS による定量を行ったところ，本法で得た定量値. と良い相関を示した． Fig. 7 に両分析法による d  MA 濃度についての相関を示す．.  DMA, selegiline, benzphetamine 代謝物の分析尿中の MA 分析においては， MA を使用したか，尿中に代謝物として MA を排泄する薬物を使用したかの識別も重要な課題である．現在，日本国. 常人 5 人から採取した尿に，MA 類を各 1 mg/ml あ. 内で問題となっている医薬品には，パーキンソン病. るいは各 50 mg / ml になるよう添加し，分析を行っ. 治療薬 selegiline ( SG ，別名 l deprenyl ）がある．. た結果を Table 2 に示す．添加量に対する定量値の. 医薬品ではないが実際に乱用されているものとして. 割合は，1 mg/ml 添加で95105（標準偏差 10未. DMA （覚せい剤原料）がある．また，欧米でやせ. 満），50 mg/ml 添加で98100（標準偏差 2未満）. 薬として使用されている d benzphetamine ( d .

(7) キャピラリー電気泳動法による尿中覚せい剤およびその代謝物の光学異性体スクリーニング試験法の開発. Fig. 7 Correlation between dMA concentrations in addicts' urine samples quantitated by the proposed method and CE/MS method.. 109. Fig. 8 Electropherograms of (a) DMSG standard (10 mg/ml), (b) dlpOHDMBZP standard (5 mg/ml), (c) an addict's urine, and (d) urine extract of an SGtreated patient.. あった．乱用者尿の分析例を Fig. 8c に示す． d MA, d  BZP）も挙げられる．これらの化合物の使用と MA. AP, d pOHMA と共に d DMA が検出されてお. 使用との識別のためには，各化合物に特有の代謝物. り，尿中濃度で d MA 濃度が 245 mg / ml, d DMA. あるいは未変化体の検出が重要である． SG につい. が4.2 mg/ml であった．三木らは，尿中の MA およ. ては， desmethyl SG ( DM SG ）あるいは SG N . び DMA 濃度に基づく，MA と DMA の混合使用と. DMA については，未変化体あるいは. DMA 単独使用との識別について報告19)しており，. DMA N oxide15,16), BZP については， p hydrox-. MA 濃度が 1 mg / ml 以上で， DMA 濃度（ mg / ml ）. ydesmethyl BZP ( pOH DM BZP )17,18) が指標とさ. が，0.002×[MA 濃度（ mg/ml)]2 未満の場合，MA. れている．これら 5 つの化合物のうち，DMA につ. と DMA の混合使用と判定している．これに従う. いては Fig. 3 に示すとおり分離・検出できるの. と Fig. 8c の例は， d DMA 単独の使用ではなく d . で，残りの 4 化合物について本法で検出できるか検. MA との混合使用と判定される．. oxide3,14),. 討を行った．. また， SG 服用患者の尿の抽出物を分析した例を. その結果，SGNoxide, DMANoxide について. Fig. 8d に示す． l MA, l AP, l pOHMA と共に. は，泳動時間45分以内にピークとして出現しなかっ. DMSG が検出できた．なお，これは，直接導入で. た．この理由は，本分析条件下で，これらの化合物. MA 類および DM SG が検出下限以下であったた. が陽イオンとしての挙動を示さないためと判断され. め，液液抽出を行った後9)，分析したものである．. る．DMSG と dlpOHDMBZP については，IS. なお， d BZP と SG の標品について，本法で分. 2 より後の 22.2 分と 24.9 分に尿マトリックスピーク. 析を行ったところ， d BZP は泳動時間 21.7 分に出. と重なることなく検出できた（ Fig. 8a, b 参照）．. 現したが，SG は45分以内に出現しなかった．. なお， dlpOH DM BZP のピーク形状が悪いが，これはわずかにキラル分離したためと考えられる．検出下限は，希釈前の尿中濃度に換算して， DM  SG が 0.8 mg / ml, dl pOH DM BZP が 0.5 mg / ml で. 結. 語. 尿試料を直接 CE 装置に導入する覚せい剤およびその代謝物のキラル分析法を開発した．尿マトリッ.

(8) 地中. 110. 啓ほか. クスの妨害なしに MA, AP, pOHMA の確実なキラリティの判定および光学異性体分離定量ができた．. Forensic Sci. Int., 101, 95106 (1999). 4). 田中. 謙，大森. 毅，井上尭子ガスクロマ. MA, AP の検出下限は 0.5 mg / ml, pOHMA は 0.3. トグラフィーによる尿中覚せい剤光学異性体の. mg/ml であり，一般的なスクリーニング試験法であ. 分離分析．科警研報告，43, 145152 (1990).. るイムノアッセイ法による市販キットと同等以上の. 5). Al-Dirbashi, O., Kuroda, N., Menichini, F.,. 感度であった．1 試料あたりの分析時間は，装置の. Noda, S., Minemoto, M. and Nakashima, K.:. コンディショニングに要する時間を含めて約30分で. Enantioselective high-performance liquid chro-. あった．本法は，迅速性・簡便性・経済性に優れた. matography. 分析法であり，尿中覚せい剤類のスクリーニング試. methamphetamine and its metabolites in human. 験法ならびにクロスチェックのための一分析法とし. urine. Analyst. 123, 23332337 (1998). 6). てルーチン分析に使用できると考える．. with. ‰uorescence. detection. of. Sato, M., Arakida, Y. and Ushio, Y.: Separation of optical isomers of methamphetamine by. 謝. 辞. capillary electrophoresis. Jpn. J. Forensic. Tox-. 本研究を進めるにあたり，dlAP, dDMA, dl DMA, DMSG をご提供いただきました科学警察研. 究所岸. icol., 14, 5258 (1996). Iwata, Y. T., Kanamori, T., Ohmae, Y.,. 7). 徹博士，井上博之博士，ならびに， SG . Tsujikawa, K., Inoue, H. and Kishi, T.: Chiral. N oxide, DMA N oxide, dl pOH DM BZP をご. analysis of amphetamine-type stimulants using. 提供いただきました大阪府警察本部科学捜査研究所. reversed-polarity capillary electrophoresis/posi-. 土橋. tive ion electrospray ionization tandem mass spec-. 均博士，片木宗弘博士に深謝いたします．. trometry. Electrophoresis, 24, 17701776 (2003).. 文 1). Nagai,. T.,. 献. Matsushima,. 8) K.,. Nagai,. T.,. Komai, K., Ohshima, T. and Ueda, K.: Simul-. Yanagisawa, Y., Fujita, A., Kurosu, A. and. taneous chiral analysis of methamphetamine and. Tokudome, S.: Interpretation and enantiomer. related compounds by capillary electrophoresis. J.. analysis of methamphetamine abusers' urine and. Chromatogr. B, 749, 111118 (2000).. illegally brewed methamphetamine crystals. J.. 9). Anal. Toxicol., 24, 140145 (2000). 2). H.,. Fujima,. H.,. Chinaka, S., Iio, R., Tanaka, S., Takayama, N., Komai, K., Ohshima, T. and Ueda, K.: Simul-. Katagi, M., Nishioka, H., Nakajima, K., Tsuchihashi,. Wada,. taneous chiral determination of methampheta-. H.,. mine and its metabolites in urine by capillary elec-. Nakamura, K. and Makino, K.: Direct high-per-. trophoresis using two internal standards. Jpn. J.. formance liquid chromatographic and high-per-. Forensic Toxicol., 21, 2937 (2003).. formance liquid chromatographic-thermospray-. 10). Iio, R., Chinaka, S., Tanaka, S., Takayama,. mass spectrometric determination of enantiomers. N. and Hayakawa, K.: Simultaneous chiral deter-. of methamphetamine and its main metabolites. mination of methamphetamine and its metabo-. amphetamine and p-hydroxymethamphetamine in. lites in urine by capillary electrophoresis-mass. human urine. J. Chromatogr. B, 676, 3543. spectrometry. Analyst, 128, 646650 (2003).. (1996). 3). Chinaka, S., Tanaka, S., Takayama, N.,. Hasegawa, M., Matsubara, K., Fukushima, S., Maseda, C., Uezono, T. and Kimura, K.: Stereoselective analyses of selegiline metabolites: possible urinary markers for selegiline therapy.. 11 ). 岸. 徹，狐塚. 寛脂肪族第二級アミンのい. わゆるシモン反応について．科警研報告， 27, 2227 (1974). 12 ). 雨宮正欣，長井辰男覚せい剤の免疫学的ス. クリーニングテストに関する一考察．法中毒，.

(9) キャピラリー電気泳動法による尿中覚せい剤およびその代謝物の光学異性体スクリーニング試験法の開発. 19, 2028 (2001). 13). rine by high-performance liquid chromatographyelectrospray ionization mass spectrometry. J.. Budavari, S., O'Neil, M. J., Smith, A., Heckelman, P. E. and Kinneary, J. F. (eds): The Merck. Index, Twelfth Edition. p. 1244, Merck, White-. Anal. Toxicol., 24, 354358 (2000). 17). Inoue, T. and Suzuki, S.: The metabolism of 1 phenyl 2 ( N methyl N benzylamino ) propane. house Station, NJ (1996). 14). 111. (benzphetamine) and 1phenyl2( Nmethyl. Katagi, M., Tatsuno, M., Tsutsumi, H., Miki, A., Kamata, T., Nishioka, H., Nakajima, K.,. Nfurfurylamino)propane (furfenorex) in man.. Nishikawa, M. and Tsuchihashi, H.: Urinary ex-. Xenobiotica, 16, 691698 (1986).. cretion of selegiline Noxide, a new indicator for. 18). Chinaka, S., Tanaka, S., Takayama, N. and. selegiline administration in man. Xenobiotica, 32,. Ueda, K.: Determination of methamphetamine in. 823831 (2002).. human urine by HPLC using post-column. 15). Simon's reaction. J. Health Sci., 46, 1620. Inoue, T. and Suzuki, S.: The metabolism of. (2000).. dimethylamphetamine in rat and man. Xenobioti-. ca, 17, 965971 (1987). 16). 19). Miki, A., Katagi, M., Tatsuno, M., Nakajima,. Katagi, M., Tatsuno, M., Miki, A., Nishikawa,. K. and Tsuchihashi, H.: Discrimination of. M. and Tsuchihashi, H.: Discrimination of. dimethylamphetamine use from methampheta-. dimethylamphetamine. methamphetamine. mine use by a rapid urinalysis procedure based on. use: simultaneous determination of dimethylam-. the GCMS determination. Jpn. J. Forensic Tox-. phetamineNoxide and other metabolites in u-. icol., 19, 4657 (2001).. and.

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