Posted at the Institutional Resources for Unique Collection and Academic Archives at Tokyo Dental College, Available from http://ir.tdc.ac.jp/
Title
№６：ジアゼパムによる薬物性口腔乾燥症の分子機構の
解明
Author(s)
塚越, 絵里; 大久保, みぎわ; 田邉, 耕士; 笠原, 正貴
Journal
歯科学報, 115(3): 274-274
URL
http://hdl.handle.net/10130/3689
Right
目的：大唾液腺は唾液腺腫瘍や唾石症などの唾液腺 疾患が原因で，切除や摘出といった外科的手術が治 療法として選択されることがある。外科的に傷害を 受けた唾液腺は通常萎縮もしくは消失する過程をた どり，手術側の唾液分泌能は低下する。今回われわ れは，顎下腺の欠損に対してコラーゲンゲルおよび コラーゲンゲルに EGF を付与し創傷治癒時に発現 する細胞への影響を検討するために，ラット顎下腺 に円形の欠損を与え，欠損部にコラーゲンゲルもし くは EGF を含んだコラーゲンゲルを補填し，ゲル 内の修復過程における組織反応，遺伝子発現を検討 したので報告する。 方法：実験動物には２００g の SD 系雄性ラット３０匹 を用いた。麻酔下にてラット顎下腺を剖出し，直径 ３mm の欠損を生検パンチにて付与した。同部に同 径に作製したコラーゲンゲルおよび EGF を含んだ コラーゲンゲルを補填した。その後の経時的変化お よび組織反応を HE 染色，vimentin（線維 芽 細 胞 マーカー），α-SMA（筋上皮細胞マーカー），PCK （導管上皮細胞マーカー），CD４９f，c-kit（幹細胞 マーカー），AQP５（腺房細胞マーカー）を一次抗 体とし た 免 疫 組 織 化 学 染 色 に て 観 察 し た。ま た vimentin,α-SMA, keratin１３, keratin１９, CD４９f お よ び AQP５の mRNA の発現を解析した。 結果および考察：HE 染色にて創傷後５日目よりコ ラーゲンゲル内へ炎症性細胞侵入が著明に観察さ れ，類円形細胞および紡錘状細胞が認められた。７ 日目では，侵入する細胞の増加がみられた。１４日目 で明らかなゲルの縮小がみられ，２１日後には，創傷 の治癒およびコラーゲンゲルの消失が確認された。 このことからコラーゲンゲルが創面保護に有用であ る こ と が 示 唆 さ れ た。EGF を 添 加 し た 群 で は， １４日ではコラーゲンゲルがほぼ消失し，迅速な治 癒が観察された。また，免疫組織化学染色および mRNA の発現の結果において，７日目に発現した 細胞では，EGF 添加した群において，ゲル内へ侵 入 す るα-SMA，vimentin，keratin１３，kerain１９， AQP５に陽性を示す細胞すべてにおいて EGF を添 加してない群と比較して増加し，CD４９f の発現の減 少がみられたことから EGF が唾液腺の外科的創傷 時に発現する幹細胞の分化を促進させることが示唆 された。 目的：薬物性口腔乾燥症の原因となる薬物は多く知 られているが，それぞれの発症メカニズムについて は明らかにされていない。これまでに我々は，薬物 性口腔乾燥症の発現メカニズムを探索したところ， 中枢型ベンゾジアゼピン受容体と末梢型ベンゾジア ゼピン受容体（PBR）が，唾液の分泌を抑制的に調 節する因子として唾液腺に存在すること，そしてこ れら受容体に対する内因性リガンドであるジアゼパ ムバインディングインヒビター（DBI）が唾液腺に 存在することを明らかにした。中枢神経系において は，DBI は星状細胞で下垂体アデニル酸シクラー ゼ活性化ポリペプチド受容体（PAC１-R）を介し て放出され，ミトコンドリアにある PBR に作用す る こ と が 知 ら れ て い る。ま た，PBR は コ レ ス テ ロールの輸送タンパク質（StAR）とステロイドの 合成酵素（CYP１１A１）の産生に関与しており，プ レグネノロンの産生を促進することが報告されてい る。本研究の目的は，DBI の唾液腺での作用経路 と唾液分泌との関係を決定するために，DBI に関連 した遺伝子 PAC１-R，StAR，CYP１１A１の mRNA の発現を調べることである。 方法：Wistar 系雄性ラット（７週齢）を用いた。 ラッ ト に ジ ア ゼ パ ム を 投 与 し た 時 の PAC１-R， StAR，CYP１１A１の遺伝子発現と変動を調べた。 ジアゼパムの投与方法は，１回投与する単回投与群 と，１４日間にわたって投与する継続投与群とに分け た。ジアゼパムの濃度は，１回投与ではラットの唾 液分泌抑制が生じない用量（ヒト治療量の最大量： ０．４mg/kg）を使用した。ジアゼパム最終投与の２ 時間後と１６時間後にラットの大脳皮質，耳下腺，顎 下腺，舌下腺を摘出し，遺伝子の変動を見るため RT-PCR 法による定量をおこなった。 結果および考察：単回投与群では，投与の２時間後 と１６時間後ともに全ての唾液腺において遺伝子量に 変化は見られなかった。継続投与群では，最終投与 の２時 間 後 に 全 て の 唾 液 腺 に お い て PAC１-R， StAR，CYP１１A１の遺伝子量が有意に増加した。 これらの結果により，DBI の関連遺伝子の唾液腺 での存在が証明された。ジアゼパムによりプレグネ ノロンの産生が促進され，ベンゾジアゼピン受容体 の感受性および機能が修飾され，唾液分泌の抑制 （ベンゾジアゼピン誘発性の口腔乾燥の発現）が起 こることが示唆された。
