平成28年9月8日
薬用作物産地支援 栽培技術研修 九州会場
カンゾウの栽培技術について
薬用植物資源研究センター 種子島研究部
林 茂樹
創薬支援に特化した独法組織として2005年に創設国立研究開発法人
医薬基盤・健康・栄養研究所とは
★薬用植物の栽培・育種に関する技術、化学的・生物学的
評価に関する研究開発
★国内3箇所の研究部圃場で植生に応じた4,000を超える
種・系統の薬用植物を栽培・保存しており、各研究機関に種
苗の供給や栽培技術の指導などを行っている
★保有する重要薬用植物の生育特性、栽培法、関連生薬、
漢方処法などを網羅した「薬用植物データベース」の一般公
開を行っている
薬用植物に関する国内唯一の総合研究センター
薬用植物資源研究センターとは
種子島研究部の紹介
▲インドジャボク Rauwolfia serpentina 沿革 1953年:国立衛生試験薬用植物園種子島 分場として開設 1953年:国立衛生試験所種子島薬用植物 栽培試験場に改称 1997年:国立医薬品食品衛生研究所種子島 薬用植物栽培試験場に改称 2005年:独立行政法人医薬基盤研究所薬用 植物資源研究センター種子島研究部 2015年:現在の名称へ変更 業務 I.温暖地に生育する薬用植物資源の収集と保存 ショウガ科,トウダイグサ科,柑橘類,ニッケイ属,インドジャボク属,ク チナシ属,オガルカヤ属,カンラン,サンビロード,デリス その他 II.薬用資源植物の栽培と改良に関する研究 ガジュツ,ウコン,インドジャボク,マオウ,ミシマサイコ,モモ,タチバ ナ,センナ など III.その他の業務 栽培指導,種苗提供,教育・普及活動(正しい知識の普及)本日お話する内容
1.薬用植物の国内栽培について
2.カンゾウの国内栽培化へ向け
た課題と取り組み
生薬
,
漢方薬
,
民間薬
,
ハーブとは
生薬:植物,動物,鉱物由来の天然薬剤で,乾燥あるいは簡単な処理等に
より調製し,医薬品もしくは医薬品原料に供するもの。
第十六改正日本薬局方第一追補(厚生労働省、2012年)では215品目が
収載され,品質が細かく規定されている。
漢方薬:漢方医学
*の理論にもとづいて一定の法則のもとに(多くの場合)数種類
の生薬の組み合わせて処方され,専門医の指導のもとで証に応じて使用される。
民間薬:
伝承的に効能が知られている,天然物由来の薬剤。必ずしも専門医の
診断によらず,自覚症状により,多くの場合,単味で(時に2〜3種類組み
合わせて)使用される。
ハーブ:一般には香りの強い薬草やスパイスなどをいうが,
明確には定義されていない。薬用植物の英語訳はherb
(ハーブと発音)であり,一般的にはヨーロッパ原産の
薬用植物のことを言う場合が多い。
*漢方医学の由来は中国(4~5世紀に伝わった)であるが,中国伝統医学を中医学と呼び,中医学 を基に江戸時代に日本で独自の体系として確立されたものを漢方医学と呼んで区別している。葛根湯
構成生薬と配合割合い:葛根8,麻黄4,大棗4,桂皮3,芍薬3,甘草2,生姜1構成生薬の薬効
葛根:発汗,止渇,鎮痛作用がある他,項背部の凝りをとる作用。 麻黄:発汗作用が強く,鎮咳作用がある。 大棗:強壮,緩和,鎮静作用がある。 桂皮:発汗,発散,健胃作用や,のぼせをとる作用がある。 芍薬:鎮痛,鎮痙作用がある。 甘草:緩和,止渇作用がある他,急性の痛みや痙攣を治す作用。 生姜:発散,健胃,鎮嘔吐作用がある。 大 棗 生姜 葛根 甘草 芍薬 桂皮 麻 黄漢方製剤の生産額の推移
薬事工業生産動態統計調査(厚生労働省)による0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
20
00
20
01
20
02
20
03
20
04
20
05
20
06
20
07
20
08
20
09
20
10
20
11
20
12
20
13
20
14
漢方製剤の生
産
額
(億
円
)
原料生薬の使用量と生産国
(平成24年度)
日本
12%
中国
81%
その他の国
7%
総使用量 25,785 t
原料生薬使用量等調査報告書(3)
日本漢方生薬製剤協会 平成27年4月
0
50
100
150
200
250
100
126
164
169
191
213
244
価格指数
中国産原料生薬の価格変動について
日本漢方生薬製剤協会,中国産原料生薬の価格指数調査について(2015)
数値は2006年の購入価格を100とした時の各年次の値を示し,中国から
直接輸入している使用量上位30生薬を対象としている.
・生薬需要の国内自給率は数量ベースで12%程度となっている (平成24年度)。
中国の現状
・
中国経済の発展により、物価・人件費が上昇し,中国内での生薬使用量も増加し,
生薬の値段が高騰。
・
都市部(沿岸部)と農村部(内陸部)の所得格差が大きいことから,農村部から都市部へ
の人口流出により,
農業従事者人口や農地の減少が続いている
。1980年代に始ま
った一人っ子政策の影響が, 若い農業従事者人口の減少に拍車をかけている。
・
自然環境保護,砂漠化防止対策のため,無秩序的な野生植物資源の採取を制限。
日本側からみると
・これまでのような
安い値段での安定供給
に不安。
・砂漠化防止や自然災害(洪水,干ばつ,地震等),政情不安による
突発的な供給量
の減少や停止
という不安。
・
生物多様性条約
(CBD)関連の国内法が資源国で整備されるに従い、資源国(中国
等)から利益配分をもとめられる状況への不安。
・輸送時の微生物汚染や
農薬汚染
,
トレーサビリテイの確保が難しい
等の不安。
日本の生薬の持続的供給をめぐる状況
第三国に供給を求める,国内栽培を増やすといった対応が今後に向けて必要
↓
0 500 1,000 1,500 2,000 2,500 3,000 3,500 4,000 19 85 19 86 19 87 19 88 19 89 19 90 19 91 19 92 19 93 19 94 19 95 19 96 19 97 19 98 19 99 20 00 20 01 20 02 20 03 20 04 20 05 20 06 20 07 20 08 20 09 20 10 20 11 20 12 国内における薬用植物の栽培面積( ha ) 2010: 1,809ha 1988:3,916ha日本における薬用植物栽培面積の推移
(財)日本特産農産物協会「薬用植物(生薬)関係資料」より 2006:1,138ha農業基盤
栽培技術, 種苗, 指導者は一度失われると取り戻すのに
多大な努力を要する。
+
人, 土地, 栽培技術
・種苗や優良品種
・指導者
薬用植物栽培生産の推進
人=農業従事者:
高齢化,人口減少。
土地=農地:
減少,耕作放棄地の増加。
栽培技術
作付体系:
58品目の薬用植物栽培指針
調製方法:
58品目の薬用植物栽培指針
農業機械:
殆ど活用がなされていない。
農薬使用:
一部の品目のみ認められている
農
業
基
盤
・正しい種苗:
保存程度,供給体制が十分確立されてない。
優良な品種:
数品目であるのみで,急務である。
・指導者:
不足
(1980〜90年代当時の各地域の担当者が退職)
薬用植物栽培生産に関する日本の課題
生薬・薬用植物生産の注意
薬草の栽培
収穫物の調製加工
製品
日本薬局方に定める
規格,薬事法
農薬取締法など
◆
一般の農作物と同様に農薬取締法の対象であるこ
とに注意する.
適用のある農薬しか使えない!
◆
収穫物および生産物が局方の規格や薬事法の対象
となる.
規格外のものは製品にならない.
薬の法律「日本薬局方」
生薬は,原料となる植
物,生薬の形状,品質
等の規格が法律によっ
て定められている.
◆
基原植物
◆
生薬の性状
◆
確認試験
◆
純度試験
国内
の
薬
用植物
(
健
食
) の
流
通
例
国内
の
薬
用植物
(
生
薬
) の
流
通
例
日本での使用量上位10生薬の
使用量と生産国
原料生薬使用量等調査報告書(3) 日本漢方生薬製剤協会 平成27年4月
0
500
1000
1500
2000
コウイ
ソウジュツ
ハンゲ
トウキ
タイソウ
センナジツ
ケイヒ
ブクリョウ
シャクヤク
カンゾウ
平成24年度の生薬使用量(t)
日本
中国
その他
本日お話する内容
1.薬用植物の国内栽培について
2.カンゾウの国内栽培化へ向け
た課題と取り組み
カンゾウ(甘草)について
マメ科の多年生草本
基原植物:
ウラルカンゾウ,Glycyrrhiza uralensis Fisch.
スペインカンゾウ,Glycyrrhiza glabra L.
繁殖様式:
グリチルリチン酸を産出
O glcA-glcA-O COOH H根
ストロン
利用部位
主に根を生薬と して利用栽培年数:3年~
種子
ストロン
ウラルカンゾウの植物分布
引用:GBIF 地球規模生物多様性情報機構(http://www.gbif.jp/index.html)中国(東北,華北,西北),モンゴル,ロシア,中央アジア等に自生
カンゾウの用途
●漢方薬原料
:漢方処方の70%以上に処
方される
最も汎用度が高い
生薬原料
●医薬品原料
:グリチルリチン酸
●甘味原料
:グリチルリチン酸はショ糖の
200倍の甘味
醤油,味噌,タバコ,お菓子などに食品添
加物として利用
[薬理作用]
抗炎症,肝機能強化,抗腫瘍,抗ウイルス
,抗アレルギー,抗アトピーなど
資料:財務省貿易統計
● すべて輸入に依存
● 多くが野生植物の採取による
● 輸入価格が高騰
中国からの輸入価格の変遷
カンゾウの供給
194国内栽培化が切望される
1,115 0 200 400 600 800 1,000 1,200 19 96 19 97 19 98 19 99 20 00 20 01 20 02 20 03 20 04 20 05 20 06 20 07 20 08 20 09 20 10 20 11 20 12 20 13 20 14 20 15 中国からの甘草の輸入価格(円 /kg )栽培暦 カンゾウの栽培暦(独立行政法人医薬基盤研究所薬用植物資源研究センター北海道研究部) 月 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 旬 上 中 下 上 中 下 上 中 下 上 中 下 上 中 下 上 中 下 上 中 下 上 中 下 上 中 下 上 中 下 上 中 下 上 中 下 一 △ △ △ △ △ 年 基肥 播種 播種 中耕 中耕 生 目 整地 定植 定植 除草 除草 除草 除草 (寒冷地) 育 ○ ○ ○ ○ ○ ○ 二 萌芽 (寒冷地 萌芽) 開 花 相 年 △ △ △ △ 中耕 目 追肥・中耕 (寒冷地 追肥・中耕) 除草 除草 除草 と 作 三 ○ ○ ○ ○ ○ ○ △ △ △ △ 年 萌芽 (寒冷地 萌芽) 開 花 (寒冷地 収穫・調製) 収穫・調製 業 目 △ △ △ △ 中耕 以 追肥・中耕 (寒冷地 追肥・中耕) 除草 除草 降 ☆基肥(10a): ☆追肥(10a): ☆病虫害: 作 堆肥:500〜1000kg 2年目4月中〜下旬(寒冷地 5月上〜中旬) 苦土石灰:60〜100kg 苦土石灰:60〜100kg 業 ☆播種: 窒素:6〜8kg ☆収穫・調製: 株間10〜20㎝,畝幅60㎝ 燐酸:5〜7kg の 量 400~500g(10a) 加里:8〜12kg ☆ストロンの定植: 3年目4月中〜下旬(寒冷地 5月上〜中旬) 内 株間20〜50㎝,畝幅60㎝ 苦土石灰:100kg ☆収量: 長さ 10〜20cm 窒素:10〜15kg 容 3333〜8333本(10a) 燐酸:12〜18kg 加里:15〜20kg ☆病虫害:生育期間を通じハダニやアブラムシの発生がみられる が、寒冷地では顕著な病害はない。 播種または定植後3年目以降の11月頃(寒冷地では9月下旬〜10月上 旬)、地上部を刈り取り、デガーで根とストロンを収穫。水洗後、 根とストロンに分けて速やかに乾燥させる。 ウラルカンゾウ実生3年生株のストロン、根における乾物収量はそれぞれ、300 ~500kg、300~400kg(10a)。
カンゾウの栽培暦
厚生省薬務局監修(2002):薬用植物,栽培と品質評価Part10,51‐62,薬事日報社 を一部改編苗作成
播種または
定植
追肥
圃場準備
除草
調製・洗浄
乾燥
1年目5~6月
1~3年目
3年目10月
収穫
カンゾウの栽培体系について
(北海道研究部の事例)
1.栽培の体系化
2.品質の制御
国内生産へ向けた課題
作業の機械化等
栽培環境の
最適化
優良品種の
育成
既存機械の応用
・栽培体系の確立
・栽培適地の検索
高含量系統
の選抜
成分含量向上
の条件を解明
1.栽培,収穫および加工調製作業
の機械化
国内栽培化へ向けた課題と取り組み
2.日本薬局方規格を満たす生薬の
生産体系の確立
1)環境要因とグリチルリチン酸含量の関係に
ついての検討
2)グリチルリチン酸高含量系統の育成
既存の農業機械の応用が可能か?
カンゾウの機械播種について
肥料を入れる 種子を入れる 鎮圧ローラー 30馬力トラクター 播種板が入っている 播種板 直径 3.5mm,20穴の播種板を使用作業時間:30分 / 10a
従来の手播き(6名で約40分) 各種の播種板4条式プランター(HKW-4AS,Ku社製)を利用した作業例
ペーパーポットによるストロンの育苗
ビート用のペーパーポット (1.9×13cm) 1ヶ月後ビート移植機の利用が可能となる
アスパラ選別機 ストロン切断長さ 約1m
5年生ウラルカンゾウの圃場
堀上げられた5年生カンゾウ根
:
デガーによるウラル
カンゾウの収穫例
70馬力トラクターによる作業 デガー(H社製)カンゾウの機械収穫について
● ストロンが発達した株では,連続的な収穫が不可
能.掘削機による堀上では70 時間・人/10aを要する.
課題
● 北海道農業研究センターとの共同開発で畝の両端
に溝を切ることにより
連続収穫が可能となる新規収穫
方法
を考案(特願2013‐250775号)
野菜洗浄機による洗浄作業例
洗浄効率:1kg当たり109秒・人 洗浄前ジェットウォッシャー(STX-72S,Sa社製):高圧水による洗浄
洗浄後 洗浄中 洗浄機の内部の様子 上下のノズルから高圧水が 噴射され、このノズルが洗浄 中は 左右に動くことにより、ムラなく 洗浄が可能となる。 試料を流 すスピードが可変で、それに よって時間の短縮もできる。カンゾウの洗浄および根頭部の切断の機械化
根頭部の切断について
ゴボウ用連続自動根切機(GCB-195A,O社製)を用いた根頭部の切断作業例
O社製,GCB-195A 切断前 切断後カンゾウの洗浄および根頭部の切断の機械化
1.まとめ
播種,収穫,洗浄および根頭
部の切断には既存の農業機械
の応用が可能である
課題
● 除草に多大な労力(180 時間・人/10a,年)を
要する.北海道におけるウラルカンゾウの萌芽
期は5月下旬であり他の植物と比較して遅い.
● 機械除草,マルチ,除草剤の適用拡大等
の対策が必要.
2.日本薬局方規格を満たす生薬の生
産体系の確立
1年生
2年生
3年生
4年生
5年生
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
グリチルリチン酸含有
率(%)
n=3
n=5
n=10
n=20
n=100
O glcA-glcA-O COOH HJP16規定値
WHO基準値
問題点:畑で栽培したものは規格値に満たない
グリチルリチン酸含量が低い
栽培品
※現在はJP17 測定条件が変更となり, 規格値は2.0%となった二次代謝産物
・・・
植物の成長や分化に直接的に機能していない
生育環境へ適応するための防御化合物
過酷な環境下において
多く合成される?
2-1)環境要因とグリチルリチン酸含量の関
係についての検討
北海道名寄市
年平均気温 5.3℃ 年間降水量 961 mm 平均気温 ℃ 月 比較的湿潤 な時期 非常に湿潤な時期中国内蒙古自治区
年平均気温 7.5℃ 年間降水量 371 mm 降水量 mm 月北海道名寄市と中国内蒙古自治区の気候図
気温と降水量が1:2となるように描かれている(Gaussen, 1954; Walter, 1955).
降水量が100mmを超える場合は目盛りを1/10に縮小している.
名寄市:気象庁(1979~2000年).中国内蒙古自治区
(赤峰市):中国気象局
(1971~2000年)
乾期自生地
ウラルカンゾウ自生地の気象環境
負荷 凍結ストレス負荷
貧栄養
アルカリ性
塩類集積土壌
半乾燥地
養分制限 高pH 高塩類 高温 乾燥ウラルカンゾウ自生地の環境(
中国内蒙古自治区
)
土壌凍結
グリチルリチン酸蓄積
の応答性解析
環境要因への応答性解析
土壌水分との関係について
褐色低地土
(排水良好)
2006.5.9
北海道名寄市
灰色低地土
(排水不良)
2006.5.9
北海道名寄市
深さ50㎝から 砂層が出現 地下水位が 高く湿性水分環境が異なる土壌にて直播栽培
0 50 100 150 200 250 n=74 n=116 ***土壌水分環境の違いが及ぼす影響
土壌水分環境の違いがウラルカンゾウの根重とグリチルリチン酸含量(主根)へ及ぼす影響. * *, ***はそれぞれ1%,0.1%水準で有意差があることを示す(t検定)根重(
DW
g/
pl
ant
)
褐色低地土
(排水良好)
灰色低地土
(排水不良)
主根のグリチ
ルリチ
ン
酸含量
(%
)
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 n=74 n=116 ** 90%分位点 75%分位点 25%分位点 10%分位点 平均値 中央値 凡例褐色低地土
(排水良好)
灰色低地土
(排水不良)
O glcA-glcA-O COOH H降水量との関係
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 c bc a a a ab n=6 n=20 n=10 n=20 n=40 n=40 主根のグリチ ル リ チ ン 酸含 量 (%) 1年生 10月 2006年 2年生 8月 2年生 10月 3年生 10月 2008年 4年生 10月 2009年 5年生 10月 2010年 2007年 90%分位点 75%分位点 25%分位点 10%分位点 平均値 中央値 凡例 O glcA-glcA-O COOH H454mm
670mm
780mm
5~10月の降水量 生育期間と主根のグリチルリチン酸含量の関係.異なるアルファベット間に5%水準で有意 差あり(Tukey-KramerのHSD検定).褐色低地土
(排水良好)
0℃付近
土壌凍結なし
断熱効果積雪なし
土壌凍結
北海道名寄市
気温:-28.6~5.3℃
降水量:174mm
中国内蒙古自治区
気温:-27.6~20.4℃
降水量:6mm
積雪あり
(12月~2月)
カンゾウ越冬期間中の気象環境について
強い低温
土壌凍結
-0.4
~0.2℃
積雪区
-15.5℃~20℃
-9.2℃
~8.8℃
(処理期間 12月1日~2月20日)
土壌凍結区
積雪なし
(ビニールハウス内にて)
土壌凍結との関係について
-1.7~0.1℃
積雪あり(20cm以上)
断熱効果0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
根のグ
リチル
リチン
酸含有
率(%)
12月1日
2月20日
ns
**
積雪区
土壌凍結区
1.06倍
1.30倍
**
: p<0.01, t検定, n=4
O glcA-glcA-O COOH H越冬期間中のウラルカンゾウの根におけるグ
リチルリチン酸含量の増加量
根のグリチル
リ
チ
ン
酸含量(
%
)
高塩濃度が及ぼす影響
塩処理および調査方法:
5月31日にワグネルポットへストロンを定植し,
0mM
,
200mM(1.2%)
および
400mM(2.3%)
のNaCl水溶液
500mL/ポットを7月30日から10日間隔で計6回添加した.
0 10 20 30 40 50 60 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 電気 伝導 度( EC, m S /c m ) NaCL添加開始後の日数 0mM 200mM 400mM EC (mS/cm) 試験区 max min ave n0mM 7.6 3.1 5.3 15 200mM 24.0 8.3 16.7 15 400mM 44.0 15.6 25.9 15 土壌溶液をミズトール(Daiki)により採取し,コンパクトECメータ (Horiba)により計測. 塩添加後の各試験区における土壌溶液中 の電気伝導度(EC)推移
土壌環境について
● 塩添加後の土壌溶液ECの平均値は,0mM区
が5.5mS/cm,200mM区が16.7 mS/cm,400mM
区が25.9 S/cmであった.
0mM区
200mM区
400mM区
NaCLの添加が栽培1年目ウラルカンゾウの生育へ及ぼす影響
2010年9月28日に撮影.全乾物重:24.5g
全乾物重:18.2g
全乾物重:19.0g
0mM 200mM 400mM0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
グリチルリチン酸含量(
%)
a a aグリチルリチン酸含量について
NaCLの添加が栽培1年目ウラルカンゾウの根のグリチルリチン酸含量へ及
ぼす影響
2010年9月28日に収穫.異なるアルファベット間に5%水準で有意差あり(Tukey‐KramerのHSD検定,n=5).● グリチルリチン酸含量は0mM区,200mM区および400mM区
がそれぞれ1.46%,1.47%および1.38%となり,顕著な試験区間差
が認められなかった.
● 野菜類は土壌溶液ECが
18mS/cm
を超えると生育量が最
大値の
20%以下
となるが
1a),ウラルカンゾウは
25.9mS/cm
で
あっても0mM区に対して
77%
の生育量を示すことから,耐塩
性を有することが判明した.
● また,同じ高塩環境下(Na:265mM)において,Naが高含
量型である
アッケシソウ(17.6%)
のような種と低含量型である
ヨシ(0.19%)
のような種が存在するが
1b),
ウラルカンゾウは
400mM区で0.23%
と低含量型であり,ヨシと同様にNa吸収抑
制機構を持つ可能性が示唆された.
● 一方,本試験の範囲内では,高塩環境においてもGL含
量の変化は認められなかった.
【文献】
1) a)土岐ら, 塩類集積土壌と農業, 日本土壌肥料学会編, 東京, 博友社, 2000,
pp.96‐122, b)高橋idem, pp.123‐154.
高塩濃度が及ぼす影響
●
土壌水分環境
および
土壌凍結
がグリチ
ルリチン酸含量に影響を及ぼしている可能
性が示唆された
●
乾燥
,
凍結および高塩類
は
浸透圧ストレ
ス
を受けるという点で深い関連性を持つ
2.1).まとめ
浸透圧ストレスについて
浸透圧ストレスが負荷
塩類集積土壌
半乾燥地
ウラルカンゾウ自生地の環境(
中国内蒙古自治区
)
土壌凍結
グリチルリチン酸含量が高いことと関連?
高塩類
乾燥
凍結
氷点下に曝されると細胞外凍 結により細胞内が脱水されて 強い浸透圧ストレスを受ける 吸水障害 吸水障害現在の取り組み
生態を考慮した栽培適地の検索
(農研機構 北農研との共同研究)
● 北海道内6地点,北海道外2地点で同一品種
を用いた試験栽培を実施しており,気象や土壌と
の関連性から栽培適地を検索する.また,栽培
にかかる問題点をスクリーニングする.
● メッシュデータにより栽培適地をマッピング
2.2).グリチルリチン酸高含量系統の育成
【育種目標】
国内の圃場栽培でも安定的に日本
薬局方規格を満たす品種の育成
北海道医療大学,栃本天海堂との共同研究
V
V
21 59 55 33 84 26 52 47 45 29 66 73 77 36 54 60 86 25 78 64 27 30 63 40 65 32 80 88 71 68 81100761293 91 11 83 49 28162 12 41 23 48 18 43 16 42 38 67 72 39 44 92 19 57 76 37 94 96 69 34656913 90 31 85 98 22 17 82835 97 50 89 74458 99 95 51 15 24 87 14 10353 20 46575 70 79 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 主根の グリチルリチ ン酸含有率 ( %) ural. no.第1期
播種 (2004年6月7日) 5年生株600個体を収穫 (2008年8月27日) 健全な100個体を選抜 GL高含量6個体を 第一次選抜第2期
栄養繁殖によるポット栽培 開始(2009年5月25日) GL高含量6系統 GL低含量5系統 栽培3年目株の形質調査 (2011年10月3日) GL高含量,高根重であった 2系統を第二次選抜第3期
栄養繁殖による圃場栽培 開始(2012年5月28日) GL高含量6系統 GL低含量5系統 在来3品種 栽培2年目株の形質調査 (2013年10月7日) GL含量と根重が安定的に 高水準な1系統を第三次選抜2014年6月26日に
品種登録出願
(第29311号)
林ら(2012):日本生薬学会北海道支部 第36回例会講演要旨集, p.62, 札幌 林ら:特開2011-50273,新規ウラルカン ゾウ及びその栽培用ストロンウラルカンゾウのグリチルリチン酸
高含量系統の選抜経過
林ら(2014):日本生薬学会第61回年会 講演要旨集,p.284,福岡600 個体
100 個体
生育が健全な個体を選抜
(病害虫によるダメージがない)
グリチルリチン酸測定
第1期:個体の選抜
測定部位
各部位におけるグリチルリチン酸含量(n=3)
ストロン 0-15cm 15-30cm 分枝根 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 グ リチル リチ ン酸含 有率( %)最も含量が低い部位で測定
主根
グリチルリチン酸の測定部位について
グ リ チル リチン酸 含量( % ) 根 ストロン 12cm主根
21 59 55 33 84 26 52 47 45 29 66 73 77 36 54 60 86 25 78 64 27 30 63 40 65 32 80 88 71 68 81100761293 91 11 83 49 28162 12 41 23 48 18 43 16 42 38 67 72 39 44 92 19 57 76 37 94 96 69 34656913 90 31 85 98 22 17 82835 97 50 89 74458 99 95 51 15 24 87 14 10353 20 46575 70 79
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
主根のグリチルリチン酸含有率(%)
ural. no.
WHO基準値: 7個体がクリア
JP16規定値: 25個体がクリア
Max.: 4.67%
Min.: 0.46%
平均値: 2.11±0.90%
5年生カンゾウ100系統における
主根のグリチルリチン酸含量
系統No.
主根のグリチ
ルリチ
ン
酸含量
(%
)
15
10
53
20
46
5
75
70
79
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
主根のグ
リチルリチ
ン酸含有率
(%)
根重(F
W,
g/p
la
nt)
ural. no.
高GL系統
高収量系統
WHO基準値
クリア
JP16規定値
クリア
特許出願中:特願 2009-200179(2009年8月31日)
O glcA-glcA-O COOH Hグリチルリチン酸高含有系統の第1期選抜
系統No.
主根のグリチルリチン酸含量(
%
)
Biol.Pharm.Bull.,34(8),1334-1337(2011)15 10 53 20 46 5 75 70 79 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 主根のグリチルリチン酸含有 率(% ) 根 重 (F W, g/ pl an t) ural. no.
第2期の選抜について
高含量9系統
1/2000aワグネルポットに褐色低地土を充填 し,2009年5月25日にストロンを定植.2011 年10月3日に栄養繁殖3年目株の形質調査.2011年に選抜
再現性評価
栄養繁殖
高含量6系統 低含量5系統 5 20 70 75 10 15 21 33 55 59 84 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 根のグリ チルリチン酸 含量 (%) b ab a a a b d c cd d 高GL系統 高収量 系統 低GL系統 JP16規定値栄養繁殖3年目カンゾウの各系統におけるグリチルリチン酸含量.2011年10月3
日に収穫,数値は平均値±標準偏差を示す.異なる文字間に5%水準で有意差
あり(Tukey-KramerのHSD検定,n=4~8,No.84のみn=2).
栄養系のグリチルリチン酸含量
高含量系統
低含量系統
5 20 70 75 10 15 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 根のグ リ チ ル リ チ ン 酸含量 (% ) 根重 (D W g / p la n t) グリチルリチン酸含量 根重 高GL系統 高収量 系統
JP16規定値
カンゾウ高含量系統の栄養繁殖3年目株
におけるグリチルリチン酸含量と根重
選抜
2011年10月3日に収穫した栄養繁殖3年目株の平均値で,バーは標準偏差を示す (n=4~8).3.42±0.27%
3.19±0.63%
第3期の選抜について
栄養繁殖による圃場栽培での選抜
(2012年5月~2013年10月)
No.10,No. 70および在来3品種との比較
圃場栽培2年目のウラルカンゾウ系統No.10,No.70および在来品種における乾燥根重(A)お よびグリチルリチン酸含量(B)の比較.2012年5月28日に圃場(褐色低地土)へストロン苗 を定植し,2013年10月7日に調査を実施.棒グラフと数値は各系統の平均値を,バーは標準 偏差をそれぞれ示す(n=6~10).*および***はそれぞれ5%および0.1%水準で系統間に有意 差があることを示す(t検定).HA:北農試系,HU:北大系,HS:医療大系. No.10を第三次選抜
第3期における根重とGL含量の評価
GL高含量
GL低含量
在来
5 10 15 20 70 75 21 33 55 59 84 HA HU HS 0 10 20 30 40 50 60 乾 燥 根 重 (g/p lant) ポット栽培(第2期) 圃場栽培(第3期) ポット栽培および圃場栽培におけるウラルカンゾウ各系統の乾燥根重の比較.棒グラ フは各系統の平均値を示す.ポット栽培は栄養繁殖3年目株(n=2~8,在来品種は2年 株),圃場栽培は栄養繁殖2年目株(n=1~10).HA:北農試系,HU:北大系,HS:医療 大系. 39.4 30.2 19.0 19.0 16.3 No.10の根重はGL高含量系統の中で高水準第2期および第3期における
各系統の乾燥根重について
5 10 15 20 70 75 21 33 55 59 84 HA HU HS 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 根のグ リチ ルリチ ン酸 含量( % ) ポット栽培(第2期) 圃場栽培(第3期)
在来
GL高含量
GL低含量
JP16規格
ポット栽培および圃場栽培におけるウラルカンゾウ各系統の根のグリチルリチン酸含量 比較.棒グラフは各系統の平均値を示す.ポット栽培は栄養繁殖3年目株(n=2~8,在来 品種は2年株),圃場栽培は栄養繁殖2年目株(n=1~10).HA:北農試系,HU:北大系, HS:医療大系. 3.57 3.34 2.29 2.15 1.53 No.10のGL含量は安定的に高い第2期および第3期における
各系統のグリチルリチン酸含量について
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 第3期 における根のG L 含量( % ) 第1期における根のGL含量(%) r = 0.962*** 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 第3期 における根のG L 含量( % ) 第2期における根のGL含量(%) r = 0.967*** ウラルカンゾウ栄養系のグリチルリチン酸(GL)含量に関する形質再現性について.プ ロットは各系統の第1期~第3期までの数値または平均値を示し,***は0.1%で有意な相関 があることを示す(n=11).第1期:圃場における実生栽培(5年生株),第2期:栄養系によ るポット栽培(栽培3年目株),第3期:栄養系による圃場栽培(栽培2年目株) . GL含量の形質再現性は極めて高い栄養系のグリチルリチン酸含量の
形質再現性について
0.0 10.0 20.0 30.0 40.0 50.0 60.0 70.0 80.0 No.10 No.70 北農試系 北大系 医療大系 草丈 (cm ) a ab ab b b