担体に付着した微生物の生理的挙動
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(2) 162. 担体 に付着 した微生物 の生理的挙動. I.担 体 への菌体 の付着 担体 へ の菌体 の付着 に関 す る従来 の研究 は主 として次 の二つ に大別で きる。 一 つ は菌体 と担体 との間 で作用 す る物理的 な力 に関す るもの 種 々の担体 に付着 した菌体 の乾熱殺菌. ,. ,細 胞分裂とDNA複 製. もう一つは などの研究. に際 して問題 となる担体 へ の付着程度 に関 す るものである。本章 で行 なった 研究 は後者 に属 し,主 に菌体 の担体 か らの回収方法 と付着方法 について検討 を加 え,併 せて担体 に菌体 を付着 させ る力についても若干 の考察 を行 なった。. 実験材料及び方法 供試菌. 大阪大学医学部微生物病研究所. 三輪谷俊夫教授 よ り供与 された. π),B/r,Bs-1(Jο π,cκ r,π υr)及 び大阪大学医学部近 JB(′ ο Escん erJcん Jα cο ′ んr,Je■ ,α γα,prO,Jac, 藤宗平教授 よ り供与 された E.coJJ ABl157(Ftt ι gα J,ん Js,ェ yJ,π. ノ,α rg,TI,λ. 3,sa+)を. 供試菌 とし,そ の培養 にはNu―. trient broth(ポ リペ プ トン 1%,肉 エ キ ス0.5%,食 塩0。 2%,pH7。 0)を 用 いた 。 担体. 親水性 のメンブ. ン・ フ ィル ター と して. HAと 略 す ),疎 水性 の メ ンブ ラ ン0フ 04700(以 下 FGと 略 す )を 用 いた。 (以 下. Millipore HAWP 04700. ィル ター と して Millipore FGLP. 試料 調製 Nutrient broth中 で定 常期 に な るまで増 殖 させ た 菌体 を無 菌 水 で 3回 洗浄後 ,約 10° /記 の細 胞 懸濁 液 となるよ うに希釈 した。この細 胞 懸濁 液 5祀 を,工 タノー ル で親 水処理 した FGフ ィル ター及 び HAフ ィル ター に 炉過 捕集 し,試 料 と した。 超音 波処理. 無 菌水 10mι を含 むサ ンプ ル管 に試料 を移 し,氷 冷 しなが ら超. 音波発 生装 置 (TA-4201型 ,19。. 5KHz,2A海 上電 機 )で 10秒 ,30秒 , 1分. ,. 5分 問処理 した。終 了後 ,担 体 か ら無 菌水 中 に回収 した生 菌数 を平板培 養 法 に よ り測定 した。 この際 ,超 音 波処理 で死 滅 した 菌数 も対 照 と して同様 に測 定 を行 なった。. 1価 及び 2価 カチ オ ンに よ る処理. 1価 及 び 2価 カチ オ ン と して NaCl,.
(3) ,表. 163. 羊 司 田 ネ. MgC12を 使 用 した。 試料 を 5%,10%,20%(w/w)の NaCl及 び MgC12溶 液 10溜 中 に移 し,氷 浴 中 で 1時 間放 置 した。 その 後 ,vortex mixerで 担体 か ら. 回収 した生 菌 数 を平板培養 法 によ り測定 した。 カオ トロ ビ ック 0ア ニ オ ンに よ る処理. カオ トロ ピ ッ ク 。ア ニ オ ン と して. は KSCN,KI,KN03を 用 い,各 々10記 の lM溶 液 中 に試料 を移 し,氷 浴中 で 1 時 間放 置 した。 その 後 ,vortex m破 erで 担体 から回収 した生 菌 数 を平板培養 法 によ り測定 した。. 実験結果及び考察 Eocο JJ. B,B/r,Bs・ を供 試菌 と して用 い た場 合 ,vortex m破 erに よ るHA. 及 び FGフ ィル ター か らの 菌体 の 回収 率 は非常 に低 く,10%以 下 とな る事実 を既 に見 出 している。. この原 因 と して,菌 体 の フ ィル ター 内 へ の 目詰 ま りの. 可能性 が考 え られ る。 しか し, 日詰 ま りの 起 こ り得 な い ニ ュー ク リアポ ア・ フ ィル ター を使 用 して も菌体 の 回収 率 は10%以 下 となること フ ィル ターの メ ッ シュ を下 げて も回収 率 は 変 わらない. ,HA及. び FG. こ とか ら目詰 ま りの 可. 能性 は考 え られ な い。従 って,回 収 率 を高 め るため には他 の物理的 あ るい は. ︵ Ｓ と つ ゝ むΦ＞ｏ８ ∝ 0。. 5. 1. 2. 5. Time of treatment(min). Fig。. 1。. Eff(χ t of ultrasonic treatmen t. on the recovery of cells frOm membrane filter.. 1. 2. 3. 4. 5. Timo of treatment(min). Fig.2。 Effect of ultrasonic tratment. jB/r. on the surv市 al of Eocο ′.
(4) 担体 に付着 した微生物 の生理的挙動. 」. “ を用 い る必要 があ り,超 音波処理 の効果 について まず検討 を行 な 化学的手段. った。 得 られた結果 を Fig。 1,Fig。 2に 示 した。この場合,Fig.2か ら明 らか なよ う に,超 音波処理 では細胞壁,細 胞膜破壊 による菌 の死滅 が多 く,生 菌数 とし ての回収率 は最大 2%で あった。 ただ し,供 試菌 として細 菌胞子 を用 い る場 合,超 音波処理 は Brunchら. の結果 を考慮すれば相 当有効 と思 われる。. 次 に検討 したのは 1価 及 び 2価 カチオ ンによる処理 である。一般 に栄養細 胞 の表層 はマ イナ スの荷電 を帯 びてお り,担 体 の付着 に も静電的 な力 が働 い ているとす るなら,イ オ ン強度 を変 えることによ り菌体 の回収率 を高 め るこ とが期待 される。 この場合,塩 濃度 が高 くな り過 ぎると菌体 自体 へ の影響 も 考慮 されねばならない。 そ こで 2価 カチオ ンとしてイオ ン強度 をさらに高め ,. しかも処理 中の溶菌 に対 して保護的 に働 くとされるMg2+に ついても同様 に検. ︵ ヽ も で 、 きΦ＞ｏ８ ∝. ︵ Ｓ︶０■ ゝむｏ＞ｏ８ α. 5. ° 10. M9° 2C° nCn。 (%(w/v)). Fig.3。 Eff(Et of NaCl on the recovery. of celis from membrane filter.. Fig.4。. Eff(К t. of MgC120n the rcO町. of cells from membrane filtere. 討 した。 そ の 結 果 を Fig.3,Fig.4に 示 した 。 この 結 果 か ら,単 に イオ ン強 度 を変 え るだ け で は 最 高. 2%程 度 の 回収 率 で あ り,こ の 方 法 も有効 で な い こ と. が 明 ら か と な った。 この 原 因 と して は ,両 フ ィ ル ター の 荷 電 度 が限 外 源過 膜 に比 べ て 非 常 に低 く,菌 体 の フ ィ ル ター ヘ の 付 着 に 静電 的 な力 は 余 り関 与 し て い な い こ とが 挙 げ られ る。.
(5) ,夫. 田. I“. ネ 羊 司. 一方 ,FGフ ィル ターの疎水性 のために菌体 とフ ィル ター間 に疎水結合的 な力 が働 き,そ れが菌体 の回収率 の低下 をもた らす可能性 も否定 で きない。 そ こで疎水結合 を低温下 で弱 め る作用 を示す カオ トロピ ック・ アニオ ンによ る処理 を試 みた。一般 にカオ トロピ ック・ アニ オ ンは イオ ン半径 の大 きな陰 イオ ンであ り,こ れ を水 にカロえると疎水性分子 の水溶性 が増カロし,疎 水結合 を弱 め るとされて い る。ただ し,カ オ トロピ ック・ アニ オ ンは膜脂質 の 中 で 比較的疎水結合 が弱 い表在性 の もの を溶 かす ことか ら膜傷害 を引 き起 こす可 能性 もあるが, 死滅 さす まで には至Jら ない。Fig。 5に 得 られた結果 を示 した。. ︵Ｓ τ 理 、 き９ ｏ８ ∝. Fig。. KSCN. KN03. KI. 5. Effect of chaotropic anion on the recovery of cells from membrane filter.. カオ トロピ ック・ アニ オ ンの作用力は Hofmeister系 列,す なわち SCN>. I >Cla>NOf>Br TCl ゝ AcO >F>SOf の 順 に弱 くなるが,最 も作用 力の強 い SCN で も回収率 としては 1%以 下 であった。従 って,疎 水結合的 な力のみで FGフ ィルター と菌体間 の強 い付着 は説明 で きない。 また,フ ィルター と菌体 の付着 にはファ ンデ ル・ ワー ルス カの寄与 も考 え られる。 しか し,通 常 この力 は絶対温度 に比例す るため,菌 体 自身 に影響 し ない温度域 では余 り大 きな作用 は期待 で きない と思 われる。 以上 の実験結果 は主 に E. JB/rを 供試菌 とした場合であるが,次 cο ′. J に Ecο ′. ABl157(K-12系 )を 供試菌 として同様 の目的 で検討 を行 なった。1'able. lに その. JB/rで の結果 に比 べ,菌 体 の回収率 は HA及 び FG両 結果 を示 した。Eocο ′ フ ィルター共 に32∼ 35%程 度 であ り,菌 種 による顕著 な差 が認 め られる。 こ.
(6) 166. 担体 に付着 した微生物 の生理的挙動. の結 果 は,Helmstetterら. が HAフ ィル ター に. J・. ￨:ベ. メッシュの 小 さい GSフ ィ. ル ター を用 い て 得 た結 果 とよ く一 致 して い る。 従 って,E cο ′ JB/rで 認 め ら れた両 フ ィル ターヘ の 強 い付着 は担体 の 親水性 や疎 水性 に関係 な く,主 と し て菌体 の 表層構 造 の相違 によ るもの であ り,こ れ が菌種 間 の 顕著 な回収 率 の 差 とな って表 われた もの と考 え られ る。 Table lo Recovery yield of Eocο. Jj cells. from membrane filtere. Strain Time HA filter FG filter (sec) (%) (%) 22。 7 K-12 10 17。 4 K-12. 30. 23.2. 22.2. K-12. 60. 35.4. 32。. B/r. 60. 1。. 0. 2. 1.0. I.担 体上 での菌体 の増 殖 細 菌胞 子 の 発 芽過 程 も含 め ,担 体 上 での 菌体 の増殖 は担体 の な い場 合 に比 υ べ て異 なるとの結 果 が Hattori ,Hehnstetter 9)ら によ り報 告 されて い る。 し か し,彼 らのf吏 用 した担体 は親 水性 フ イルター及 び陰 イオ ン交換 樹 脂 で あ り,最 も菌 体 の 増 殖 に 影 響 す る と予 想 され る疎 水性 の担体 につ いて は何 ら知 見 が 得 られて い な い。 そ こで,I.で 見 出 した Ecο Jj B/rの 親水性 及 び疎 水性 フ ィ ル ターヘ の強 い付着性 を利 用 し,自 動増殖 記録装 置 (OT― BS-12型 , 大岳 製 作所. 以 下 Bioscannerと 略 す )に よ る親水性 及 び疎 水性 フ ィル ター上 で の 菌. 体増殖 の 比較 ,放 射性 同位 元素 によ る増殖過 程 の解析 を行 な った。 実験材料 及び方法 試料 調製. Iと 同様 で あ る。. 包懸濁 液 B:oscannerに よ る増殖 経過 の解析 Nutrient broth 9 mι と細 月 (約 106/記. )1祀 を Bioscannerの 測定 用 セルの一 方 に入れ,こ れ を対照試料 と. した。 また,Nutrient broth 9配 と無 菌水 1記 の 入 ったセ ル に,菌 体 を付 着 させ た フ ィル ター を入 れて測定 試料 と した 。 ただ し,疎 水性 の FGフ ィル ターの場 合 ,滅 菌 した ス テ ンレス製 ク リップ をフ ィル ター には さみ ,Nutrね nt.
(7) ,表. 田. ネ 羊 司. 167. bro山 中 に沈 めるよ う に して 実 験 を行 なっ た 。 親水性 の HAフ ィル ターの場 合 ,常 に菌体 の付着 して い る方 が brOdlに 接触 す るよ うに してセ ル内 に入 れ た 。 この よ うにす ると,HAフ ィル ター は その 親水性 の ため に,brothが フ ィル ター 内 に拡 散 し,各 試料 の培養 条件 は 同 一 に な ると考 え られ る。 Bbsc―. annerの 操作条件 は37℃. ,培 養 時 間 は12∼ 14時 間 と した。. 放射性 同位 元 素 に よ る増 殖 過程 の解析. 供 試菌 と しては ア ミノプテ リ ン処. 理 によって得 た Ecο JJ B/rの 低 濃度 チ ミン要 求株 (2湾 /mι )を 用 い た。 GS培 地 (脱 イオン水 1〃 当 り,(NH4)2HP° 4 2.5g,KH2P° 41・ 5g, NaC1 5。. MgS°. 4・. 7H2° 溶 液0.5mι. Og, 20%. , グル タ ミン酸 ナ トリウ ム2。 Og, グル コー ス3g,pH. 7.0)で 前培養 後 ,3H_methyl― thymidine l mCiを 含 むGS培 地 10配 に 10%植 菌 し,37℃ で14時 間振 盪培 養 を行 な った。 得 られた 菌体 を無 菌水 で洗 浄及 び希 釈後 ,約 106/mι の細胞 懸濁 液 と し,こ れ よ りlmイ をGSフ ィル ター に,戸 過 捕集 して試料 と した。 この よ うに して調製 した14枚 のフィル ター を Nutrね nt bro― th 10記 の 入 った マ イヤ ー フ ラス コ に移 し,各 々 0分 か ら175分 まで15分 間隔. で振 盪培養 を行 なっ た。終 了後 ,菌 体 を付着 させ た フ ィル ター と,セ ル内 の 培地 全量 を炉過 捕集 した GSフ ィル ターの 両方 を共 に赤外線 ラ ンプ で乾燥 し ,. 液体 シ ンチ レー シ ョ ンカウ ンター によ りその放射 活性 を測定 した。 この結 果 よ り,GSフ ィル ター上 に保持 されて い る菌体 と培地 中 に遊 離 した菌体 の 比 率 を求 め,世 代 交代時間 を算 出 した 。 実験結果及び考察 Ecο JJ B/rの HA及 び FGフ ィル ター上 におけ る増殖経過 につ いて Blosca―. nnerで 得 られた結 果 を Fig。 6,Fig。 7に 示 した。 これ らの結 果 か らフ ィル ター ヘ の 菌体 の付着 の 有無 に関係 な く,菌 濃度 と増殖遅 れ時 間 との 間 には 直線 関 係 が成立 す るこ とが認 め られた。 また,フ ィル ター に付着 させ た菌体 は付着 させ てい な い菌体 よ りも常 に一 定 の増殖遅 れ を示 し,こ の増殖遅 れは HAフ ィル ターの場 合 で 1時 間半程度 ,FGフ ィル ターの場 合 で約 2時 間 であつた。 以 上 の結 果 は メ ッ シュが0。 45μ の HAフ ィル ター か ら0。 22μ のGSフ ィル ター に 変 えて も同様 で あ り,メ ッ シュの 影響 は見 出 せ な か った。 これは数μ (長 径 ).
(8) 」68. 担体 に付着 した微生物 の生理的挙動. ｏ おおＥヨＺ 望 ３ｏ 一. ０ ぉらＥョＺ 望うｏ 一. 5. 10. 5. Fig.6。. The relatioship between nunber of cells attachod on a 「 IA filter. and time of growth delay.. Synbols:○ ,broth;`へ ,HA filter. のE.cο ″に対 して,0。. 2μ. 10 Timo of growth delay(hr). Timo of growth delay(hr). Fig.7.. ¶隆 relatioship between ntmber Of cells attached on a F{G filter. and ti:ne of growth delay. Symbols:○ ,broth;zへ ,FG filter. 程度 の メ ッシュの差 はフ ィル ターヘ の菌体 の付着 に. 影響 しなかったため と思 われる。 Ecο ′ JB/rの Nutrient broth中 での世代交代時間 が約30分 であるこ とから ,. Fig。 6及. び Fig。 7で みられた菌体 の増殖遅 れの原因 として次 の 2つ の仮説 が考. えられ る。 (A)フ ィル ターに付着 させた菌体 の世代交代時間 が変化 した結果,増 殖遅. れが生 じる。 (B)フ ィル ターに菌体 を付着 させて もその世代交代時間は変化 しない が 分. 裂後 もフ ィル ター上 に付着 しているために増殖遅 れが生 じる。. (A),(B)の いずれの仮説 が妥当 であ るか を決 め るために,放 射性同位元素 で標識 した菌体 を用 いて検討 を行 なった。 この場合,次 の ￨)∼ v)の 仮定 を お くと仮説 (A)及 び (B)か ら予想 される結果 は以下 の よ うになる。 仮定 ￨)菌 体 の年令 が一定 である。. m)培 養中,菌 体 が分裂 によらないでフィルターか ら離 れ ることはない。 m)フ ィル ターヘ の菌体 の付着条件 は一定 である。 lv)仮 説 (B)の 場合 ,. 3回 分裂 した後 にフ ィルターか ら菌体 が 離 れ始 め.
(9) ,表. o 00 ♂. 』 first. second. divis:on. Fig。. 169. 田 ネ 羊 司. 8。. divis:On. third diVislon. CeH division model (hypothesis B).. る (Fige8)。. v)仮 説 (A)の 場 合 ,世 代 交代 時間 が30分 か ら60分 に変 わった とす る. (た. だ し,30分 か ら90分 に変 わった と して も同様 に考 え られ る)。 まず,フ ィル ター上 の 菌体 の放射 活性 が Aで あった とす る。 さらに培養 液 中 の 菌体 の 放射 活性 を CPMs,フ ィル ター上 の 菌体 の放射 活性 を CPMノ とす る。 仮 説 (A)の 場 合 世 代 交代時間 が60分 に変化 して い るため,60分 後 に 1回 目の 分裂 が起こり ,. CPMs=A× %,CPMノ =A× %,従. ってCPMs/CPM「 =1と な る。120分 後. に2回 目の分裂が起 こり,CPMs=A× %十 (A× %)%=%A,CPM/=(A×. %)× %=%A,従. って CPMs/CPM」. F=3と. な る。. 仮 説 (B)の 場 合 90分 後 に 3回 目の 分裂 が起 こって始 めて, 8個 の細 胞 か ら 2個 が培養 液 中 に遊 離 す るよ うに な り,CPMs=A×. %,CFMノ=A× %,従 ってCPMs/CPMノ. =0。 33と な る。120分 後 に 4回 目の 分裂 を し,同 様 にCPMs=A×. %+(A× %)× %=ZA,CPM「 ≪ A× %)× %=%A,従 ってCPMs/CPMガ =0。 77と な る。 以 上 の理 論値 を示 した の がFige9,実 際 の測定値 を示 した の がFig。 10で あ る。 Fig。 9,Fig。 10を 比較 す ると実験結 果 は仮 説 (A)に よって 導 かれた理 論 値 と一致 してお り,フ ィル ター に付着 した 菌体 の世 代 交代時 間 が変化 したた めに増殖遅 れ が生 じたことを示 唆 している。一 方 ,Hattoriら. が陰 イオ ン交換. Jの 増殖 につ い て検討 した結 果 では ,世 代 交代時間 樹 脂上 に付着 させ た E.cο ′. が担体 の な い場 合 に比 べ逆 に短 くなって い る。 この相違 は担体 の種 類 ,特 に 担体 の 荷電 の 有無 や培養条件 ,あ るい は 菌株 な どが異 なって いたため と思 わ れ る。 い ず れ にせ よ,今 回 の 回 分培 養 で得 られた結 果 を確 立 す るには連 続培.
(10) 』7θ. 担体 に付着 した微生物 の生理的挙動. 0. 1. 90. 120. 150. 180. Time(min). Time course of the ratio of CPMs/cPM′ introhed by both. Fig.9。. hypotheses.. Symbols:○ ,hypothesis A;● ,hypOthesis B. 、ΣＬＯ＼〓Ｌ０ ． ■■■■■ ・・. ・ て:'日. ■■■■■口 ・・. 「. ・・・・・ (E〉. 日■■口 ・・ ・ (:〉 ・ ・・・・. 「 ロ く〔〕・ ト. そ:'日 lq・ : :. : ￨ :. 100. 140. 丁 ime(min). Fig.10。. Time course of the ratio of CPMs/CPMノ Obtained by isotope experi】 nente. 2,9). 養法. で同様 の 実験 を行 な うこ と が必要 で あ ろ う。. Ⅲ .担 体上 での菌体 の乾燥 死減 一 般 に菌体 の 乾燥 につ い て検 討 す る場 合 ,エ ア ロ ゾル法 によ るの が最適 と されて い る。 しか し実際 に菌体 を乾燥処理 す る際 ,菌 体 は何 らかの担体 に付 着 して い ることが 多 く,乾 燥 に及 ぼす 担体 の 影響 を無視 す るこ とは出 来 ない。 特 に疎 水性 担体 の 影響 につ い ては何 ら報告 もな く,全 く不明 な現状 で あ る。.
(11) ノ7′. 田 ネ 羊 司 '表. また,減 圧 下 で乾燥 を行 な うと菌体凍結 の可能性 もあ り,こ の場合 には担体 に含 まれる水分 の影響 についての知見 が必要 となって くる。 ここでは以上 の 点 に注 目 し,減 圧乾燥 における親水性及 び疎水性担体 の影響 について検討 を 行 なった。 実験材料及び方法 供試菌及び試料調製. I, Iと 同様 である。. 各試料 をペ トリ皿 (直 径 7 cm)に 移 した後,RHO%を 与 えるデ シ. 減圧乾燥. ケー ター (シ リカゲ ル と五酸化 リンを含 む)及 び RH85%を 与 え るデシケー タ ー内 に入れ,一 定時間減圧乾燥 を行 なった。終 了後 ,試 料 を無菌水10記 の入 つた試験管 に移 し, 1時 間氷冷 した後,vortex m破 erに より菌体 をフ ィル タ ーか ら回収 しその生菌数 を測定 した。 実験結果及び考察 Ecο ′ J ABl157を 供試菌 と して RHO%で 得 た結果 をFig.11,RH85%で 得. た結果 をFig.12に 示 した。 また,Fige1 3に は凍結乾燥法 で同様 の実験 を行 な 10°. ＣＯ〓Ｏｄ﹂一 ＯＣ一 ＞一 ＞﹄コ∽. ＣＯ〓０“﹄一 ＯＣ一 ＞一 ＞﹄５∽. O. 1. 2. 3 丁 ime. Time of drying(hr). Figel l.Surv市 al curves of E.cο ′ JK-12. dried at RH O%. SymbOls:o,dried On a HA filter;△ dried On a FG filter. of drying(hr). Fig.12. Survival cwes of E.cο ′ J. K-12. dried at RH 85%. ,. Symbols:○ ,dried on a HA filter;z生 ,dried on a FG filter. って得 た結 果 を示 した 。減圧 乾燥 した場 合 にみ られ る傾 向 と して,HA及 び. FGフ ィル ター に付着 させ た 菌体 はRH85%下 で乾 燥 す ると一 次 反応 的 に死滅 す るの に対 し,RHO%下 では主 に死滅 は乾燥初 期 に起 こ り,以 後 ゆ るや か に.
(12) 担体 に付着 した微生物 の生理的挙動. 172. ＞Ｉ ョ∽ ８ ｔ ｃと ２ 一. Fig.13。. Effect of freeze― dlvitt on the jK-12. sur宙 val of E・ cο ′. Symbols:○ , freeze― dried on a HA filter;`△ , freeze― dried On a FG filter Timo of froo20-drying(hr). 進 行 す る点 が挙 げ られ る。 この傾 向 は HAフ ィル ター よ りも FGフ ィル ター で の 方 が顕著 で あ り,凍 結 乾燥 した際 にみ られ る両 フ ィル ターでの 挙動 (Fig。. 13)と 類似 して い る。 この原因 と して,FGフ ィル ターはHAフ ィル ター に比 べ て フ ィ ル ター 自体 に 含 ま れ る水 分 が無 視 し うる程度 で あ り,減 圧 (約 1∼. 2mmHg)に す ると菌体 のみ が急速 に乾燥 されて安定残 水度 に到達 す るため か. ,. あ るい は FGフ ィル ター では HAフ ィル ター に比 べ て フ ィル ター 中 に含 まれ る水分 が非常 に少 な く,減 圧 下 で凍結 しに くい ため とも考 え られ る。 一 方 ,エ アロゾル法 で得 た Coxら. Dの. 結 果 から推定 すると次 のようにも考 えら. れ る。即 ち,一 般 に菌体 が死滅 しやす いの は 自由水 が菌体 の膜 を通 して 出 入 りして い る状 態 で あ り,こ れは 中間 RH下 で の 乾燥 に相 当 す る。 従 って HA フ ィル ター上 で 菌体 を減圧 乾燥 す ると,フ ィル ター に 多 く含 まれ る低 い蒸気 圧 の付着 水 が乾燥 中 の 死滅 を支配 す るよ うに な るため か も しれ な い。 い ず れ にせ よ,乾 燥 に及 ぼす担 体 の 影響 は脱水速 度 の差 ,あ るいは残 存 水分量 の差 と して効 い て い るこ とは間違 い な い と思 われ る。. 要. 約. 親水性及 び疎水性 フ ィル ターに付着 させた微生物 の生理的挙動 について検. JB/rで 認 めた両 フ ィルターヘ の強 い付着 は菌体 の 討 した。 その結果,Ecο ′ 表層構造 に起因す るこ と,両 フ ィル ター上では菌体濃度 と増殖遅 れ時間 との 間 に直線関係 が成立 し,フ ィルターに付着 した菌体 は常 に一定 の増殖遅 れ を.
(13) 173. 浅 田 祥 司 生 じる こ と を見 出 した。 さらに R. H85%下 で減圧 乾燥 す ると両 フ ィル ター に. 付着 した 菌体 は一 次 反応 的 に死滅 す るの に対 し,RHO%下. では主 に乾燥初. 期 に死滅 が起 こ り,以 後 ゆ るや か に進 行 す る傾 向 を認 めた 。. 辞. 謝. 本 研究 を行 を うに際 して御指 導頂 いた 大阪 大学工学部. 芝崎. 勲教授 ,高. 野光男助 教授 ,御 協 力頂 いた 大場 敏行氏 に深 く感謝 します。. 献. 文. 1)HattorLR.,Furusawa,C。 :J.Gen.Applo Microbbl。 ,i8,271(1972)。 2)HattorL R。 ,Furusawa,C.:J.Gen.AppL Microbbl,18,285(1972)。. 3)Mhato,H。 ,Sato,T。 :J.Gen.AppL MicrobbL,22,259(1976)。 4)Fletcher,M. :J.Geno Appl Microbbl,94.406(1976). 5)Angeroti,R。 ,MaryanskL Jo H。 ,Cambell,J.E.:AppL MicrobioL,i6, 735(1968)。. 6)Hehnstetter,Co E。 ,Cooper,S。 :Jo MoL BbL,37,508(1968).. 7)浅 田. :修 士論文(1975).. 8)Brunch,M.K。 ,Smith,Fo w.:AppL MicrobbL,!6,1814(1968). 9)HeLnstetter,Co E.:Jo MoL Bbl,24,417(1967). 10)Cox,Co S. :AppL Environo Mた. robbl。. , 31,836(1976)..
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