3 1 Amersham Imager 680 RGB 94 Amersham Imager 680 QC 94 LED LED OD OD Amersham Imager 680 UV 94 Amersham Imager ImageQuant LAS LED LED

3

ウェスタンブロッティング＆

画像解析

■

製品名

価 格（円） ページ

Amersham Imager 680

 

CCDカメラタイプ画像解析装置

4,739,200

∼

94

ImageQuant LAS 500

 

CCDカメラタイプ画像解析装置

2,573,000

98

Amersham Typhoon scanner

 

スキャナータイプ画像解析装置（蛍光／RI）

10,375,800

∼

99

Melanie

 

二次元電気泳動ゲル画像解析ソフトウェア

971,500

∼

102

ImageQuant TL

（

IQTL

） 

イメージ解析ソフトウェア

70,000

∼

103

Ettan IPGphor 3 IEF System

 

一次元目専用等電点電気泳動システム

1,364,000

110

SE 260 Mighty Small II Mini-Vertical Units

 

ミニゲル電気泳動装置

160,500

110

SE 600 Ruby Standard Vertical Units

 

スタンダードゲル電気泳動装置

353,300

110

miniVE Vertical Electrophoresis System

 

ミニゲル用縦型電気泳動／ブロッティング装置

185,300

111

Amersham ECL Semidry Blotters

 

セミドライブロッティング装置

248,900

∼

111

パワーサプライ 

電気泳動やブロッティングに

118,500

∼

111

■

目次

ページ

CCD

カメラタイプ画像解析装置

機種一覧

92

∼

93

CCD

カメラタイプ画像解析装置

各種

94

∼

98

スキャナータイプ画像解析装置

99

∼

101

Ettan DIGE

102

ウェスタンブロッティング検出試薬

104

∼

106

メンブレン

108

∼

109

電気泳動／ブロッティング装置

各種

110

∼

111

関連製品

102

∼

103 / 107 / 112

3

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品

ウ

ェ

ス

タ

ン

ブ

ロ

ッ

テ

ィ

ン

グ

＆

画

像

解

析

_{Amersham Imager}

680 RGB

Amersham Imager

680 QC

Amersham Imager

680 UV

Amersham Imager

680

ImageQuant LAS

500

▲ 94ページ ▲ 94ページ ▲ 94ページ ▲ 94ページ ▲ 98ページ

仕様

白色

＊1

落射

_透過光源

LED

（

OD

キャリブレーション可）

落射

LED

透過光源

（

OD

キャリブレーション可）

落射

LED

落射

LED

白色落射

LED

UV

＊1

_透過（

_{312 nm}

_）

_透過（

_{312 nm}

_）

_透過（

_{312 nm}

_）

­

_­

蛍光用

励起光源

＊1

460 nm

落射

LED

520 nm

落射

LED

630 nm

落射

LED

­

­

­

460 nm

青色落射

LED

365 nm UV

落射

LED

蛍光用

フィルター

Cy2: 525BP20

Cy3/EtBr: 605BP40

Cy5: 705BP40

Cy3/EtBr: 605BP40

Cy3/EtBr: 605BP40

­

560 LP

CCD

タイプ

スーパー

（

CCD

2048 1536

ハニカム

320

）

万画素

830

CCD

万画素

レンズ

（明るさ）

F 0.85(FUJINON)/

43 mm

F1.4/30 mm

露出モード

オート／セミオート／マニュアル／インクリメント／アドバンス

_{マニュアル／インクリメント}

オート／セミオート／

取込み

サイズ

22 16 cm

、

11 8 cm

10.5 10.5 cm

サイズ

（

W D H

）

360 485 785 mm

300 280 570 mm

重量

43.6 kg

43.2 kg

42.7 kg

40.1 kg

15 kg

画素補正

ダークフレーム補正、フラットフレーム補正、ディストーション補正

­

ダイナミック

レンジ

4.8

4.8

解析ソフト

ウェア

レーン設定、バックグラウンド削除、バンド検出、分子量測定、

バンドの標準補正（レーンごとに標準バンド設定が必要）

＊2

ImageQuant TL

_{ライセンス付属}

＊1 対応可能な色素については右ページをご覧ください。 ＊2 上記以外の解析をご希望の場合は、ImageQuant TLをご購入ください。 ※ Amersham Imager 680 / 600 UV / 680 QCは、ご購入後に上位モデルへのアップグレードが可能です。 CCD カメラタイプ 機種一覧

CCD

_{カメラタイプ画像解析装置}

_機種一覧

3

ウ

ェ

ス

タ

ン

ブ

ロ

ッ

テ

ィ

ン

グ

＆

画

像

解

析

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品 CCD カメラタイプ 機種一覧

・白色落射

LED

白色透過イルミネーターセット

Silver, CBB, X-ray, film, NBT, BCIP

・

312 nm UV

透過イルミネーターセット

EtBr

・

365 nm UV

落射

LED

EtBr

SYPRO Rose

Qdot 605/655/705/800

・

460 nm

落射

LED

Alexa Fluor 488

Cy2

SYBR Green I / II

SYBR Gold

SYPRO Ruby

SYPRO Orange

FITC

FAM

AttoPhos

Pro-Q Emerald 488

・

520 nm

落射

LED

SYPRO Red

Cy3

TAMRA

5-ROX

HEX

Alexa Fluor 532/546/555

Pro-Q Diamond

BODIPY 576/589

R-phycoerythrin

RFP

HNPP

・

630 nm

落射

LED

Alexa Fluor 633/635

Alexa Fluor 647/700

Cy5

BODIPY 650/665

DiD

TOTO 3

DDAO Phosphate

LAS-3000

（富士フイルム社販売モデル） （富士フイルム社販売モデル）

LAS-3000 mini

落射

LED

透過：白色コンバージョン

スクリーンの利用

落射

LED

透過

LED

（UVイルミネーターと交換使用）

透過（

312 nm

）

オプション

460 nm

落射

LED

＊3

520 nm

落射

LED

＊3

630 nm

落射

LED

＊3

オプション：

365 nm

落射

LED

オプション：

710 nm

落射

LED

オプション：

460 nm

落射

LED

EtBr: 605BP40

＊3

SYBR Green

用

: Y515

＊3

緑光源用

: 525DF20

＊3

赤光源用

: R670

＊3

オプション／近赤外用：

IR785

GFP

用：

510DF10

オプション／

UV

用：

L41

オプション：

EtBr: 605BP40

オプション：

SYBR Green

用

: Y515

スーパー

CCD

ハニカム

320

万画素

（

2048 1472

）

スーパー

CCD

ハニカム

320

万画素

（

2048 1472

）

F 0.85(FUJINON)/43 mm

F 0.85(FUJINON)/43 mm

オート／マニュアル／

インクリメント

オート／マニュアル／

インクリメント

14 21 cm

（オプション:広視野レンズ使用時 25 25 cm）

12 18 cm

510 480 900 mm

440 380 750 mm

60 kg

40 kg

ダークフレーム補正

フラットフレーム補正

ディストーション補正

ダークフレーム補正

フラットフレーム補正

ディストーション補正

4.8

4.8

­

­

＊3 一部機種ではオプションになります。

2015

年

9

月

30

日にて

サポート終了

サポート終了

2015

年

9

月

30

日にて

※買換えの際のご参考にしてください。

対応可能な色素一覧

3

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品

ウ

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ッ

テ

ィ

ン

グ

＆

画

像

解

析

CCD カメラタイプ 機種一覧 CCD カメラタイプ

●

LAS

および

Amersham Imager

シリーズの後継機種

（富士フイルム社との共同開発）

●

セミオート機能により目的バンド検出の露出時間最適化が容易

●

有色分子量マーカーを使ったカラー撮影が可能で、

タンパク質の分子量が一目瞭然（カラリメトリック）

●

撮影から解析までタッチパネル式で直観的に操作可能

●

解析ソフトウェアを

PC

にインストール可能（

100

ライセンス付き）

Amersham Imager 680

CCD

_{カメラタイプ画像解析装置}

セミオート機能

プレ撮影画像から目的とな

るバンドを選択し、その領

域に適した露出時間を自動

計算してから本撮影を行う

機能です。

選択したバンドが定量可能

なシグナル強度で撮影でき

るため、ウェスタンブロッ

ティングに定量性を求める

方におすすめです。撮影し

た画像の解像度は

300 dpi

なのでそのまま論文投稿で

きます。

データの一括保存

カラリメトリック

ケミルミネッセンスモード

は化学発光のサンプルとカ

ラーの分子量マーカーを同

時に画像取得可能です。

解析結果は

PDF

_{ファイルで保存可能}

NEW

付属の解析ソフトウェア

撮影後、ワンタッチで

解析ステップへ。

ソフトウェア起動の

手間削減

撮影条件詳細情報 選択バンド（下リスト水色部分） のボリューム値比較グラフ 解析画像 選択したバンドは 右上のグラフに表示 解析結果レポート 解析シグナル強度の数値ファイル レポート・プレゼン用 カラーマーカー 重ね合わせイメージ カラーマーカー イメージ グレースケール16-bit tif 生データ 上）化学発光データ 下）可視撮影マーカーデータ

はじめての方でも論文投稿

レベルの画像を取得可能

重ね合わせの手間不要

レポート作成の

手間軽減

保存し忘れ、データの

取り違いなどを防ぐ

3

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テ

ィ

ン

グ

＆

画

像

解

析

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品 CCD カメラタイプ 機種一覧 CCD カメラタイプ

ImageQuant TL SecurITy

ライセンスをご購入いただくと、

1D

ゲル解析において右記のコントロールやトレーサビリティ

が可能となります。そのほか、

ImageQuant TL

解析ソフト

ウェア機能（詳細

103

ページ参照）も利用可能になります。

イメージ解析ソフトウェア

ImageQuant TL SecurITy

∼データセキュリティ環境をお届け∼

オプション

•

ユーザー名とパスワードによるセキュリティにより、

画像へのアクセスを制限

•

実験の電子承認機能

•

画像解析ログのトレーサビリティが可能

•

実験監査レポートにより、画像解析データの追跡が

可能

デンシトメーターでの

OD

＊1

_{値・データ管理（監査証跡）が必要な方に}

Amersham Imager 680 QC

および

RGB

は、透過光源による可視撮影時の画像シグナル強度を

OD

値に換算するためのキャリ

ブレーションを実施しているため、デンシトメーターとしてご使用いただけます。オプションで

IQ/OQ

サポートもご用意しております。

また、イメージ解析ソフトウェア

ImageQuant TL

の

ImageQuant TL SecurITy

ライセンスをご購入いただくと、取得した一次元

電気泳動ゲル・メンブレン画像データへのアクセス・解析に対する監査証跡も可能となります。

透過光源（Trans）撮影して、バンドを数値化 自動的にOD値で表示

＊1 OD: Optical Density、光学濃度

＊2 構成品：本体、タッチパネル式モニター（マウス付き）。オプションでタッチパネル式モニターを外付けモニター（キーボード、マウス付き）に変更していただくこ とも可能です。ただし、タッチパネル式モニターと外付けモニターの併用はできません。

システム価格

Amersham Imager 680 RGB System

＊2 NEW

8,819,200

Amersham Imager 680 QC System

＊2 _NEW

6,379,200

Amersham Imager 680 UV System

＊2 _NEW

5,759,200

Amersham Imager 680 System

＊2 _NEW

4,739,200

ソフトウェアは こちら ▲102、103ページ Software

ナビ

トレーニング ▲135ページ 製品仕様▲92ページ 保証期間延長サービス ▲138ページ∼

3

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品

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グ

＆

画

像

解

析

CCD カメラタイプ 機種一覧 CCD カメラタイプ ＊ HRP: ホースラディッシュペルオキシダーゼ

ウェスタンブロッティング

トランスフェリンの

2

倍希釈系列を用いた化学発光検出。

2.5 pg

の検出が可能でした。

サンプル：トランスフェリン（625 pgから2.5 pgへの2倍希釈系列） メンブレン：Amersham Hybond P ブロッキング：PBS-T中3％BSA 一次抗体：ウサギ抗トランスフェリン抗体 1:1,000 二次抗体：HRP＊_{標識抗ウサギIgG抗体 1:75,000}

検出試薬：Amersham ECL Select

検出限界（LOD）：2.5 pgのトランスフェリン 8.0 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0

Log protein amount (pg)

Log integrated intensity

0.0 1.0 2.0 3.0 Transferrin 625 pg 2.5 pg

ウェスタンブロッティング

NIH / 3T3

細胞ライセートから

ERK

を検出。

 

トータル

9.8 ng

の細胞ライセートから

ERK

の検出が可能でした。

サンプル：NIH / 3T3細胞ライセート（5 µgから9.8 ngまでの2倍希釈系列） メンブレン：Amersham Hybond P

ブロッキング：PBS-T中Amersham ECL Primeブロッキング剤2％ 一次抗体：ウサギ抗ERK1 / 2 抗体 1:10,000

二次抗体：HRP＊_{標識抗ウサギIgG抗体 1:100,000}

検出試薬：Amersham ECL Select

ダイナミックレンジ：2.7オーダー 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0

Log cell lysate amount (ng)

Log integrated intensity

0.5 1.5 2.5 3.5 4.5

NIH/3T3 cell lysate

5 µg 9.8 ng ※Amersham Imager 600から680へのアップグレードも可能です。詳細は弊社バイオダイレクトラインにお問合せください。

▶

_{より高解像度での撮影}

➡

リン酸化に代表されるバンドが近接する翻訳後修飾等の解析に有効です

▶

すべての露出モード でビニングの使用が可能

➡

目的にあわせて高感度・高解像度を変更して撮影できます

＊オート/セミオート/マニュアル/インクリメント/アドバンスを含む

▶

最大露出時間：

10

時間

➡

微量サンプルの検出など長時間露出が必要な場合にも対応できます

▶

_{インクリメント回数：}

50

回

➡

撮影後、より多くの積算画像から必要な画像を選択できます

お客さまからのご要望にお応えし、

Amersham Imager 600

から改良

!

Amersham Imager 680

Amersham Imager 680

_{から可能となりました！}

Amersham Imager 600

•

マニュアルフォーカス調整機能が上下段の両撮影ポジションともに改良されました

•

パスワードログイン機能がついたのでアクセス制限が可能になりました

•

カラーマーカーとの重ね合わせ表示がインクリメントでも可能になりました  他

＊

化学発光を低ノイズ、高感度、広いダイナミックレンジで検出可能です。

●

発光検出使用例

Amersham Imager

解析例

3

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グ

＆

画

像

解

析

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品 CCD カメラタイプ 機種一覧 CCD カメラタイプ

タンパク質電気泳動画像

Cy5

でプレラベルした

Phosphorylase b

の検出。

3.3

桁のダイナミックレンジを示しました。

サンプル：LMWマーカー（200 ngから2倍希釈系列 Phosphorylase bを検出） プレラベル：Cy5 蛍光検出モード：Cy5 検出限界：98 pgのPhosphorylase b ダイナミックレンジ：3.3オーダー 8.0 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0

Log protein amount (pg)

Log integrated intensity

2.0 4.0 6.0 1.0 3.0 5.0 Phosphorylase b 200 ng 98 pg

DNA

_{電気泳動画像}

アガロースゲル電気泳動した

KiloBase DNA

マーカーの

3

倍希釈

系列を

SYBR Green

で染色して検出。

サンプル：KiloBase DNAマーカーの3倍希釈系列 ポストステイン：SYBR Green I核酸ゲル染色 蛍光検出モード：Cy2 検出限界：0.3 ngの全DNA ダイナミックレンジ：2.9オーダー 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0

Log amount of total DNA (pg)

Log integrated intensity

1.5 2.5 3.5 4.5 5.5

KiloBase DNA Marker

250 ng 0.3 ng

ウェスタンブロッティング

全タンパク質および標的タンパク質の多重検出。

9

つの異なる条件で培養した

E.coli

のライセートから

DHFR

（

Cy3

緑色）を検出。試料中の全タンパク質を

Cy5

（赤色）でプレラベル

しました。オーバーレイ画像の黄色は

DHFR

バンドです。

サンプル：大腸菌ライセート ブロッキング：PBS-T中3％BSA 一次抗体：ウサギ抗DHFR C末端抗体1:1,000 二次抗体：Cy3標識ヤギ抗ウサギIgG抗体 1:2,500 蛍光検出モード：Cy3、Cy5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Prelabeling Cy5 Total protein WB: DHFR Cy3 Overlay

Normalized ratio Cy3/Cy5

Lane number 0.80 0.70 0.60 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 0 225 97 66 50 35 25 20 14 10 kDa 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 0.0733 0.0556 0.063 0.0627 0.062 0.0605 0.0696 0.06940.07330.0701 2.5 5 10 15 20 CHO (µg)

Normalized ratio Cy3/Cy5

Lane number 0.70 0.60 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 0 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 6.11 6.83 5.45 6.16 4.23 4.48 4.45 4.64 4.35 4.53 Cy3/Cy5 overlay Cy3 ERK 1/2 β tubulin β actin GAPDH Cy5 K

Loading control Variation of normalized ratio between

2.5 to 20 µg sample load (CV %) Cy5 Total protein 7

Tubulin 18

Actin 14

GAPDH 53

＊Cy5でトータルプロテインを標識する試薬としてAmersham QuickStainがあります。 参考文献： Asa Hagner-McWhirter, et al, Cy5 total protein normalization in Western blot analysis , Analytical Biochemistry 486 (2015) 54–61

ウェスタンブロッティングの

トータルプロテインノーマライズ

ノーマライズを行う場合、従来、内部標準タンパク質（アクチン、

GAPDH

等）を用いることが一般的でしたが、近年ではトータルプ

ロテインも使用されています（トータルプロテインノーマライズ）。

この方法では下記に示すように、実験条件によるタンパク質発現

量のばらつきが内部標準タンパク質を用いた場合に比べ小さい

（

CV

：∼

10%

）ため、より定量性の高いデータを得ることができ

ます。

CHO

細胞ライセートから

ERK1 / 2

を検出し、定量した結

果の例を示しました。

左：

Cy5

で標識したトータルプロテイン＊_{でノーマライズした定量結果} 右：βチューブリンによりノーマライズした定量結果 下：

ERK1 / 2

を異なるノーマライズプロテインを用いて定量したとき の定量値のばらつき（

CV

％）

Tips

Amersham ECL Plex

（蛍光標識抗体）と組み合わせることで、広いダイナミックレンジ・高感度を実現します。蛍光

色素

Cy2

、

Cy3

、および

Cy5

のクロストークを最小限に抑え、複数のタンパク質の同時検出、類似サイズの異なるタ

ンパク質の検出などの幅広い多重検出の用途に適しています。

3

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品

ウ

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グ

＆

画

像

解

析

CCD カメラタイプ 機種一覧

セミオート機能

プレ撮影画像から目的と

なるバンドを選択し、そ

の領域に適した露出時間

を自動計算してから本撮

影を行う機能です。

カラリメトリック

ケミルミネッセンスモード

は化学発光のサンプルと

カラーの分子量マーカー

を同時に画像取得が可能

です。

CCD カメラタイプ

●

セミオート機能により目的バンド検出の露出時間最適化が容易

●

有色分子量マーカーを使ったカラー撮影が可能で、

タンパク質の分子量が一目瞭然（カラリメトリック）

●

感度設定・フォーカスあわせ不要のシンプル操作

●

コンパクトサイズで蛍光（

SYBR Green

など）や可視検出にも対応

●

ImageQuant TL

解析ソフトウェア

ライセンス付属

ImageQuant LAS 500

CCD

_{カメラタイプ画像解析装置}

蛍 光 検 出

▶

SYBR Green

、

SYPRO Ruby

、エチジウムブロマイドなど

SYBR Green エチジウムブロマイド CBB ▶

CBB

、銀染色など

可 視 検 出

撮影時間、画像の

保存枚数を削減

重ね合わせの手間不要

蛍光、可視検出にも対応可能

化学発光に加えて以下の検出が可能です。全モードでオート露出、オートフォーカスで撮影できます。

ミニゲル専用

目的のバンドを選択 1 本撮影スタート 3 選択したターゲットバンドの 検出予測時間が確認できる 2

コピー機よりも

簡単なんじゃないでしょうか！

コピー機はいろいろなボタンがあって、一つ一つの機能を使い

こなすのが大変ですが、

ImageQuant LAS 500

は操作するボタ

ンの数も少なく、とてもシンプルな作りになっています。スター

トのボタンを押すだけの簡単操作で画像が得られます。なので、

マニュアルを見ている人は誰もいません。誰でも使いこなせると

思います。また、機器の電源を入れるだけで数分後には

Ready

の状態になります。現像液の廃棄や、装置の清掃の必要もあり

ません。

X

線フィルム現像機の半分以下の労力と時間でウェス

タンブロッティングの画像が入手できていると思います。

東京医科歯科大学

難治疾患研究所

分子遺伝学分野

中西

啓

様

、高岡

美帆

様

お客さまの声

オートであたりをつけて、

さらにセミオートで目的バンドをきれいに撮影

X

線フィルムでも長時間露光しないと検出が難しいようなサンプ

ルを扱っているので、オートの露光ではバンドが薄すぎることが

あります。そのため、まずオートで一度検出し、マーカーの位

置情報から目的のバンドの位置を目視で確認し、その周辺をマ

ークします。あとは、

ImageQuant LAS 500

のセミオート機能が、

その周辺のバンドに最適な条件で撮影してくれます。セミオート

で撮った画像で十分ですし、露出時間を変えて撮り直ししたい

と思ったこともほとんどないです。

※ お客さまの使用経験に基づく記載です。 ※ ご所属などはインタビュー当時の情報です。 ソフトウェアは こちら ▲103ページ Software

ナビ

トレーニング ▲135ページ 製品仕様▲92ページ

ImageQuant LAS 500 System

2,573,000

システム価格

保証期間 延長サービス

3

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画

像

解

析

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品 CCD カメラタイプ 機種一覧 スキャナー タイプ 大脳新皮質 海馬 視床 線条体 視床下部

PMT

＊2

_{（感度）調整 セミオート機能}

プレ撮影実施後、興味のある

エリアを選択すると、そのエ

リアを検出するために最適な

PMT

値が自動算出されます。

ウェスタンブロッティング

3

_{色蛍光検出}

標的タンパク質

2

種とトータルプロテイン染色（ノーマ

ライズ用）を

1

度の操作でスキャンした画像例です。

さまざまな量の

CHO

細胞ライセートから

ERK

および

GAPDH

をターゲットとして検出しています。ノーマライ

ズ用に全タンパク質染色も行っています。

放射性サンプルの測定

フォスファイメージング（イメージングプレート）を使用して放射性シグナルの検出が可能です。

ラット脳の冠状脳切片のオートラジオグラムの例です。

ラット脳のパーキンソン病切片を

DaTscan

＊3

_（

_{123I-ioflupane}

_{）で処理しています。}

ラット脳切片を、

PBS

（

pH 7.4

）中の

1 nM

の

DaTscan

と共に

60

分間インキュベートし、

3 3

分の冷

PBS

で洗浄して、乾燥させてから

SR

イメージングプレートに

60

分間曝露して検出しました。

広いリニアダイナミックレンジ（検出例：

Cy3

_）

●

RGB

＋

NIR

（近赤外）蛍光、可視染色ゲルの検出が可能なうえ、

RI

検出フォスファスクリーン（イメージングプレート）にも対応

●

大領域のスキャンエリア（

40 46 cm

）

＊ 1

●

レーザー最大

5

本、フィルター最大

8

枚搭載

 （フィルターは自動認識）

●

ImageQuant TL

解析ソフトウェア

ライセンス付属

●

IQ/OQ

サポート（オプション）

Amersham Typhoon scanner

スキャナータイプ画像解析装置（蛍光

／

RI

_）

＊1 Phosphor Imaging（RI検出）の最大サイズは35 43 cmです。

システム本体

Cabinet

（オプション）

Eraser

（オプション）

（プレスキャン画像）

興味のあるエリアを選択 1 自動算出されたPMT値 2 スキャン開始 4 Use PMTボタンを押すと 次のスキャンのPMT値 としてセットされる 3

再現性の高い定量性のある

データ取得が簡単に

はじめての方でも

迷わず設定可能

＊2 PMT : Photomultiplier tube ＊3 DaTscan（GE Healthcare）は、パーキンソン病の診断におけるドーパミントランスポーターイ メージングに使用されるSPECT放射性医薬品です。

＊4 サンプル調製：Sergio Estrada, Preclinical PET-MRI Platform, Dept. of Medicinal Chemistry, Uppsala University. Amersham Typhoon 2.8 1.4 0.7 0.36 0.18 0.09 0.045 0.02 （ng） 2 4 6 8 1 2 3 4 5 6

log (integrated intensity)

log (pg phosphorylase B) Typhoon FLA 9500（旧モデル） 409.6 204.8 102.4 51.2 25.6 12.8 6.4 3.2 1.6 0.8 0.4 0.2 （ng） サンプル：炭酸脱水酵素 ゲル：12％アクリルアミド 励起波長/蛍光フィルタ：532 nm / BPG1 （570DF20） ダイナミックレンジ：3.3オーダー 直線性：R2 = 0.998 サンプル：LMWマーカー中の Phosphorylase b ゲル：8-18％SDS-PAGE  励起波長/蛍光フィルタ：532 nm / Cy3 （570BP20） ダイナミックレンジ：4.2オーダー 直線性：R2 = 0.9998

検出できる濃度範囲が広がり、

より正確な定量が可能に

サンプル：CHO細胞ライセート ゲル：SDS-PAGE 8-18％ メンブレン：Amersham Hybond P 0.45 一次抗体：ウサギ抗ERK マウス抗GAPDH

二次抗体：ECL Plex Cy3 ヤギ抗ウサギIgG抗体

Alexa Plus 800 ヤギ抗マウスIgG抗体 総タンパク質染色：Amersham QuickStain

イメージ： Excitation Emission filter 532 nm Cy3 570BP20 (green) 685 nm IRshort 720BP20 (red) 785 nm IRlong 825BP30 (blue)

サンプル：ラット脳切片＊4_{イメージングプレート曝露時間：60分}

3

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品

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画

像

解

析

CCD カメラタイプ 機種一覧 スキャナー タイプ

スキャナータイプ画像解析装置

機種一覧

Amersham

Typhoon scanner

5 System

Amersham

Typhoon scanner

RGB System

Amersham

Typhoon scanner

NIR Plus System

Amersham

Typhoon scanner

NIR System

Amersham

Typhoon scanner

IP System

検出 モ ー ド

Phosphor Imaging

＊1 _{○ ○ − − ○}

Digitization

(Densitometry)

○ ○ ○＊2 − −

Fluorescence

（

RGB

）＊3 _{○ ○ ○（Greenのみ） − −}

Fluorescence

（

IR1, IR2

）＊3 ○ − ○ ○ −

Chemiluminescence

(Dark scan)

○ ○ ○ ○ − 付属ステージ

IP Stage

Fluor Stage

Multi Stage

IP Stage

Fluor Stage

Multi Stage

Fluor Stage

Fluor Stage

IP Stage

光源＊4

488 nm LD

532 nm SHG

635 nm LD

685 nm LD

785 nm LD

488 nm LD

532 nm SHG

635 nm LD

532 nm SHG

685 nm LD

785 nm LD

685 nm LD

785 nm LD

635 nm LD

フィルター

IP 390BP

Cy2 525BP20

Cy3 570BP20

Cy5 670BP30

IRshort 720BP20

IRlong 825BP30

IP 390BP

Cy2 525BP20

Cy3 570BP20

Cy5 670BP30

Cy3 570BP20

IRshort 720BP20

IRlong 825BP30

IRshort 720BP20

IRlong 825BP30

IP 390BP

最大フィルター搭載数

8

枚（フィルター自動認識）

8

枚 画素サイズ

10

、

25

_{※プレスキャンは}、

50

、

100

、

200

_1,000 µ

m

から選択 _µm

10

₂₀₀

、

25

_µ

_m

、

50

_から選択、

100

、 検出系 バイアルカリ

PMT

、マルチアルカリ

PMT

マルチアルカリ

PMT

バイアルカリ

PMT

読取方式 メカニカルスキャン方式 読取階調数

65,536

階調（

16-bit

） ダイナミックレンジ

5

桁 読取サイズ 最大

40 46 cm

＊5 _最大

_{40 46 cm}

_最大

_{35 43 cm}

＊6 読取時間 約

18

分＊7 _約

₁₈

_分＊8 _約

₁₈

_分＊7

画像アウトプット グレースケール

16-bit tif

、

gel

、

16-bit img

装置本体サイズ

900 800 400 mm

（

W D H

） ※突起物を除く 装置本体重量

94 kg

93 kg

92 kg

電圧

100–240 VAC 10

％ 電力 約

0.3 kVA

周波数

50/60 Hz

動作環境温度

18

∼

28

℃ 動作環境湿度

20

∼

70%

 ※結露なきこと 付属画像解析ソフトウェア

ImageQuant TL

価格（円）

18,375,800

15,075,800

12,175,800

11,375,800

10,375,800

＊1 S感度設定あり

＊2 ただし、Amersham Typhoon Digitization plate（オプション）が必要 ＊3 PMT値設定時、マニュアル、オート、セミオート、シミュレーション機能あり

＊4 LD：Laser Diode（レーザーダイオード）、SHG：Secondary Harmonic Generation（第二高調波発生）の略。 どちらも半導体レーザーですが、単波長光を発生する仕組みが違います

＊5 ただし、イメージングプレートの最大サイズは35 43 cm

＊6 ただし、アップグレード後のPhosphor Imaging以外の検出モードでの最大サイズは40 46 cm

＊7 Phosphor Imagingモード、50 µm、20 25 cm読取時 ＊8 Fluorescence モード、Normal speed、50 µm、20 25 cm読取時

ソフトウェアは こちら ▲102、103ページ Software

ナビ

トレーニング ▲135ページ 保証期間延長サービス ▲138ページ∼

3

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解

析

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品 CCD カメラタイプ 機種一覧 スキャナー タイプ

●

2D-DIGE

_{を用いた残留宿主細胞タンパク質（}

HCP

_{）検出の例}

●

セルベースでのスクリーニングアッセイ

バイオ医薬品製造において最終生物製剤の残留宿主細胞タンパク質（

HCP

）の存在を調べるために

ELISA

や

1D-PAGE

ウェスタ

ンブロッティングによる分析が広く行われています。最近、ここで用いられる

HCP

特異的ポリクローナル抗体の

HCP

に対する

カバー率を求められるようになり、

2D-PAGE

ウェスタンブロッティングが注目されています。

2D-DIBE

（

2D differential in blot

electrophoresis

。図①）は蛍光標識した

HCP

の二次元電気泳動パターンと同じく蛍光標識二次抗体を用いたウェスタンブロッティ

ングで、最大限のカバー率を効果的に算出します。

併せて

HCP

特異的ポリクローナル抗体を用いない

HCP

の検出に

2D-DIGE

（

2D difference gel electrophoresis

）法を用いた手法を

ご提案します。

ELISA

など抗体に頼った従来の手法だと、抗体作製や評価系の立ち上げに多大な手間と時間がかかっていました。また、

抗体のターゲットタンパク質以外のタンパク質が検出できないという問題がありました。

2D-DIGE

を用いた方法では抗体が必要ない

ため、系の立ち上げが速いだけでなく今まで見落としていた

HCP

も検出が可能です（図②）。さらに、一度の作業で培養サンプルと

最終溶出物はもちろんフロースルーのタンパク質パターンも同時に検出、定量できるため、製造条件の至適化という用途でも威力を

発揮します。

プレートフォーマットで実施する細胞の免疫細胞染色にも利用できます。

N2A

細胞をレチノイン酸で処理し、神経突起伸長におけるα

-

チューブリン発現を検出している例です。

N2A

細胞を

96

ウェルタイ

タープレート上に播種し、沈降させ、これらの細胞をレチノイン酸で処理して神経突起の伸長を誘導しました。細胞の免疫染色およ

び

DRAQ5

で核染色を行い、画像を検出しました。

Separation in 1st Dimension by PI Separation in 2 nd Dimension by MW

Method

pH 3 pH 10 Cy3labelled HCP protein

Protein labeled with Cy3

WB: anti-HCP + Cy5conjugated 2nd_Ab Protein transferred to membrane Coverage analysis 図❷

培養サンプル、フロースルーおよび

最終溶出物の

2D-DIGE

図

最終溶出物の分析では、

CBB

染色では検出されない微量

HCP

の検出ができました。

Harvest FFlowthrough EEluate pH 3 pH 11 1-D SDS-PAGE IgGhc IgGlc

2D-DIBE

の概念図

蛍光標識されたサンプルスポット

はブロッティングメンブレン上でも

検出でき、波長が異なる蛍光標識

二次抗体は反応したスポットに重

ねて検出されます。

図❶ α

-

チューブリン発現レベル 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20

Control RA Low RA Middle RA High AnBbody Only Normalized with cell number Cell number

RA 濃度

n=4

Control

Low

Middle

High

免疫細胞染色 （IRlongチャネル） 細胞数定量のための 核染色 （IRshortチャネル） オーバーレイ画像 免疫細胞染色: 緑 核染色: 赤 細胞：マウスNeuro-2a（N2A）細胞株 レチノイン酸（RA） 処理量：Low、Middle、High

一次抗体：マウス抗α-チューブリン抗体（モノクローナル） 二次抗体：CHROMIS 770A標識ヤギ抗マウスIgG

細胞数インジケーターの核染色：DRAQ5

サンプルフォーマット：96ウェルマイクロタイタープレート イメージング：Amersham Typhoon scanner NIR

励起波長/蛍光フィルタ：

DRAQ5 685 nm IRshort 720BP20/ CHROMIS 770A 785 nm IRlong 825BP30

分解能：100 µm ステージ：マルチステージ+マイクロタイタープレートホルダー

ImageQuant TL

（

version 8.2

）、アレイ解析モードで

各ウェルの蛍光シグナル強度を定量しました。免疫細

胞染色のシグナルは、核染色によって得られた総細胞

数の値を用いてノーマライズし、オレンジ色の線で示し

ています。コントロールの値を

1

としたときの各

RA

処

理群のα

-

チューブリン発現レベルの相対値を示して

います。

RA

処理α

-

チューブリン発現レベルの生データ値は

減少傾向を示しますが、ノーマライズしたものでは、発

現レベルは変化しないか、またはわずかに増加してい

ることが確認できました。

3

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品

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像

解

析

CCD カメラタイプ 機種一覧 DIGE

Ettan DIGE

とは蛍光標識二次元ディファレンスゲル電

気泳動（

2D-DIGE

）を使ったタンパク質発現差異解析

システムの製品名称です。

Ettan DIGE

は、蛍光色素

CyDye

と二次元電気泳動システム、蛍光イメージャー

Typhoon

シリーズを用い、タンパク質発現差異の定量

的な解析を可能とする革新的なテクノロジーです。

2D-DIGE

は現在、バイオマーカータンパク質の探索、

病態解析、タンパク質製剤の品質管理など、幅広い用

途にご使用いただいており、

Ettan DIGE

を用いた関連

文献数は

5800

報

＊ 1

_{を超えています。}

＊1 2018年4月時点。

●

高い客観性、信頼性でタンパク質発現差

異を検出可能

●

誤認識を最小限に抑えて、時間とコスト

の節約に貢献

●

直観的に使用できるワークフローにより、

分析時間を大幅に短縮可能

●

画像表示画面や標準化のオプションなど、

高い柔軟性を持った選択が可能

●

シングルステイン、

2D-DIGE

、

HCP

分析

に対応したソフトをご用意

●

Cy2 / Cy3 / Cy5

の

3

種類の蛍光色素が使用可能

●

リジン残基へ標識（

NHS-ester

タイプ）

●

Minimal Labeling

法による標識

●

銀染色と同等の感度

このほか、

Ettan DIGE

専用サチュレーション蛍光試薬も

ご用意しております。詳しくは弊社

Web

サイトをご覧く

ださい。

図1 Fluorescence 2D difference gel electrophoresis（2D-DIGE）技術の概要

Melanie DIGE による統計 および画像解析 コントロール サンプル 標識サンプルを 混合して泳動 Typhoonシリーズでの 蛍光 スキャニング スポットの3D表示 処理 サンプル 内部標準 Cy3標識 Cy5標識

Cy2／Cy3／Cy5

同時検出&標準化 Cy2標識

Ettan DIGE

Melanie

タンパク質発現差異解析システム

二次元電気泳動ゲル画像解析ソフトウェア

＊2 PCは別売です。

※ Node-lockedライセンスのほかに、Floatingライセンスがあります。詳しくは弊社Webサイトをご覧ください。 ※ 別途サービスの出張費・作業費が必要です。ただし、Scannerと同時納品の場合は不要です。詳しくはお問合せください。

Ettan DIGE

専用ミニマル蛍光試薬

CyDye DIGE Fluors, Minimal Labeling Dyes

いっしょに 購入すると便利

ご注文情報

製品 包装 コード番号 価格（円）

CyDye DIGE Fluor, minimal labeling kit

（2 nmol 3色） 1 キット 28934530 299,000

CyDye DIGE Fluor, Cy2 minimal dye 5 nmol 25801082 167,500 CyDye DIGE Fluor, Cy3 minimal dye 5 nmol 25801083 167,500 CyDye DIGE Fluor, Cy5 minimal dye 5 nmol 25801085 167,500 CyDye DIGE Fluor, minimal labeling kit

（5 nmol 3色） 1 キット 25801065 445,200

シングルステイン

2D-DIGE

HCP

カバー率アッセイ

Melanie Classic

○

Melanie DIGE

○

○

Melanie Coverage

○

・Melanie Classic、Melanie DIGEは、2way-ANOVA（二元分散分析）までの統計解析機能が可能です。 ・Melanie DIGEは、バイオプロセス開発評価のためのスパイク標準を用いたDIGE解析に対応します。 ・Melanie Coverageは、抗HCP抗体カバー率アッセイ（Coverage Assay）に対応します。

※Melanie Coverageは、Melanie Classic、Melanie DIGEのいずれとも組み合せてご購入いただけます。

製品名 包 装 コード番号 価 格（円）

Melanie 9 Classic（Node-locked 1ライセンス）＊2 NEW 1 式 29270534 971,500 Melanie 9 DIGE（Node-locked 1ライセンス）＊2 NEW 1 式 29270536 1,943,000 Melanie 9 Coverage（Node-locked 1ライセンス）＊2 NEW 1 式 29270543 3,644,000

ナビ

トレーニング

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析

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品 CCD カメラタイプ 機種一覧 電気泳動

●

オート機能で

1D

ゲルを

1

クリックで解析

●

1D

ゲル解析のほか、コロニーカウント、ウェスタンブロッティングなど、

4

つの解析モードを搭載

●

1D

ゲル解析においてトレーサビリティなどが可能となる

ImageQuant TL SecurITy

ライセンスもご用意

操作が容易でどなたでも簡単にお使いいただくことができます。

ImageQuant TL

_（

IQTL

_）

イメージ解析ソフトウェア

一次元電気泳動ゲル解析イメージ バンドを自動検出・数値化 ウェスタンブロッティングバンド検出イメージ任意のバンドを選んで数値化 ご注文情報 製品 包装 コード番号 価格（円）

Amersham QuickStain kit 150 samples（10-15 gels） RPN4000 17,300

●

電気泳動前のタンパク質の

Cy5

蛍光色素プレラベリングに最適化されたキット

●

電気泳動後ゲル染色や脱色せずにすぐに検出可能で、廃液処理も不要

●

蛍光ウェスタンブロッティングのトータルプロテインノーマライズに使用可能

●

約

15

分のクイックプロトコール、または約

40

分の一般的な定量プロトコールから選択可能

●

幅広いサンプル濃度に対応：

1 µg/ml

∼

20 mg/ml

のタンパク質サンプルに使用可能なため、事前の濃度確認が不要

●

高感度：

銀染色とほぼ同感度で、

ng

以下の検出が可能

タンパク質蛍光標識キット

Amersham QuickStain

いっしょに 購入すると便利

●

ImageQuant TL SecurITy

∼データセキュリティ環境をお届け∼

QuickStain使用イメージ図 Buffer Cy5 Sample トータルタンパク質Cy5検出 （QuickStain使用サンプル） ターゲットを Cy3検出 （Cy3標識抗体使用） トータルタンパク質ノーマライズ ■関連製品

蛍光多重検出ウェスタンブロッティング用試薬

Amersham ECL Plex

→

106

ページ

ImageQuant TL SecurITy

ライセンスをご購入いただくと、

1D

ゲル解析において以下のコントロールやトレーサビリ

ティが可能となります。

・ユーザー名とパスワードによるセキュリティにより、画像へのアクセスを制限

・実験の電子承認機能

・画像解析ログのトレーサビリティが可能

・実験監査レポートにより、画像解析データの追跡が可能

＊1 本ライセンスは、ImageQuant TLとImageQuant TL SecurITyの両Softwareに有効です。 ＊2 LapTop PC、DeskTop PCよりご選択いただけます。

※ Node-lockedライセンスのほかに、Floatingライセンスがあります。詳しくは弊社Webサイトをご覧ください。

製品名 包 装 コード番号 価 格（円）

ImageQuant TL 8.2（Node-locked 1ライセンス）NEW 1 式 29291744 70,000 ImageQuant TL 8.2（Node-locked 5ライセンス）NEW 1 式 29291746 300,000 ImageQuant TL SecurITy 8.2（Node-locked 1ライセンス）＊1 _{NEW 1 式 29291745 150,000}

ImageQuant TL PCセット＊2 _{NEW 1 式 問合せ 問合せ}

ナビ

トレーニング

ECL Select

ECL Prime

ECL

ECL start

推奨アプリケーション _{・ターゲットタンパク質や一次抗体の}最高感度の化学発光検出 量が少ない場合に 高感度な化学発光検出 ・発光安定性が高いため多検体処理 も余裕をもって実験可能 一般的な化学発光検出 ・過剰発現タンパク質の検出 ・タグ付きタンパク質の検出 一般的な化学発光検出 ・高発現タンパク質検出 ・タグ付きタンパク質検出 感 度＊1 ECL Primeに対して 2∼8倍高感度 40ECL∼100に対して倍の感度 ピコグラムオーダーのタンパク質を検出可能 ECLと同等 一次抗体希釈率の目安 1:5,000 ∼ 1:30,000＊2 ₁ ：1,000∼1：30,000＊2 ₁ ：500∼1：5,000＊2 ₁ ：500∼1：3,000＊2 二次抗体希釈率の目安 1:100,000 ∼ 1:300,000＊2 _{1：50,000∼1：250,000}＊2 _{1：2,500∼1：15,000}＊2 _{1：5,000∼1：50,000}＊2 ブロッキング剤

2% ECL Prime Blocking Agent

（RPN418）

5% ECL Blocking Agent（RPN2125） 一般的な試薬（5% スキムミルク、

3% BSAなど）

2% ECL Prime Blocking Agent

（RPN418）

5% ECL Blocking Agent（RPN2125） 一般的な試薬（5% スキムミルク、

3% BSAなど）

5% ECL Blocking Agent

（RPN2125） 一般的な試薬（5% スキムミルク、

3% BSA など）

5% ECL Blocking Agent

（RPN2125） 一般的な試薬（5% スキムミルク、

3% BSA など） リプロービング

（Amersham Hybond を使用） 対応 対応 対応 対応

推奨メンブレン _{Amersham Protran Premium NC}Amersham Hybond PVDF, _{Amersham Protran Premium NC}Amersham Hybond PVDF, _{Amersham Protran Premium NC}Amersham Hybond PVDF, _{Amersham Protran Premium NC}Amersham Hybond PVDF,

検出方法＊3

X線フィルム

（Hyperfilm ECL） （Hyperfilm ECLX線フィルム ） （Hyperfilm ECLX線フィルム ） （Hyperfilm ECLX線フィルム）

CCDイメージャー Amersham Imager シリーズ ImageQuant LAS 500 CCDイメージャー Amersham Imager シリーズ ImageQuant LAS 500 CCDイメージャー Amersham Imager シリーズ ImageQuant LAS 500 CCDイメージャー Amersham Imager シリーズ ImageQuant LAS 500 検出結果の例 ＊1  感度、発光時間は実験条件によりかわることがあります。 ＊2  PVDFメンブレン使用時の目安 ＊3  最良の結果を得るためにはサンプルごとに条件検討を行って至適抗体濃度を決定する必要があります。

LOD = Limit of Detection  DR = Detection Range

WB ERK ½; LOD: 5 ng; DR: 2.4 5 ng 1.2 µg WB ERK ½; LOD: 20 ng; DR: 2.4 20 ng 5 µg WB ERK ½; LOD: 320 ng; DR: 2.1 160 ng 10 µg WB ERK ½; LOD: 320 ng; DR: 2.1 160 ng 10 µg WB ERK ½; LOD: 20 ng; DR: 2.4 20 ng 5 µg

104

www.gelifesciences.co.jp

3

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品

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析

CCD カメラタイプ 機種一覧 ウェスタン ブロッティング

●

ECL

シリーズ最高感度

●

バックグラウンドが低く、幅広い実験条件に対応

●

シグナルの安定性が高く、長時間にわたる多サンプル実験にも好適

ECL

_{シリーズ最高感度の検出試薬}

Amersham ECL Select

ご注文情報

製品 包装 コード番号 価格（円）

ECL Select Western Blotting Detection Reagent for 1,000 cm2 _{membrane RPN2235サンプル 50,000}

ECL Prime Blocking Reagent ＊ _{40 g RPN418 13,000}

いっしょに 購入すると便利

Fig 5. Comparative performance evaluation of Amersham ECL Select and

Amersham ECL Advance. ECL Select shows similar limit of detection (5A and B), with significantly brighter bands due to the higher signal intensity, illustrated in 5C.

Fig 6. A side-by-side comparison of signal durations for Amersham ECL Select

and Amersham ECL Advance. The high signal intensity of Amersham ECL Select allows for sustained detection of very low protein levels for up to 2 h.

Sample: HeLa cell lysate in a 2-fold dilution series starting at 5 µg total protein

Membrane: Amersham Hybond-P

Blocking: Amersham ECL Prime blocking agent (2% in PBS-T)

Primary Ab: Rabbit anti ERK ½ diluted 1:10 000 (Amersham ECL Selelect), and 1:30 000 (Amersham ECL Advance)

Secondary Ab: HRP conjugated anti-rabbit IgG diluted 1:100 000 (Amersham ECL Select), and

1:300 000 (Amersham ECL Advance)

Imaging: ImageQuant LAS 4000

Exposure time: 1 min

Sample: HeLa cell lysate in a 2-fold dilution series starting at 5 µg total protein

Membrane: Amersham Hybond-P

Blocking: Amersham ECL Prime blocking agent (2% in PBS-T)

Primary Ab: Rabbit anti ERK ½ diluted 1:10 000 (Amersham ECL Selelect), and 1:30 000 (Amersham ECL Advance)

Secondary Ab: HRP conjugated anti-rabbit IgG diluted 1:100 000 (Amersham ECL Select), and 1:300 000 (Amersham ECL Advance)

Imaging: ImageQuant LAS 4000

Exposure time: 3 min

We compared the sensitivity and signal intensity of

Amersham ECL Select to that of Amersham ECL Advance

in a Western blotting experiment to detect ERK ½. Both

reagents showed very high sensitivity and produced equal

detection limits for ERK ½ (5 ng total protein) (Fig 5A and

B). However, Amersham ECL Select produced 3-fold higher

signal intensity (Fig 5C) with a sustained low background,

resulting in brighter and clearer protein bands. We used

optimized antibody dilutions for each detection reagent and

each blot was exposed for 1 min using ImageQuant LAS 4000

imaging system.

5 µg

Amersham ECL Select

Amersham ECL Advance

5 ng

5 µg 5 ng

5 µg

Amersham ECL Select

Amersham ECL Advance

5 ng

5 µg 5 ng

Integrated signal intensity (×10

-4) 5000 4000 3000 2000 1000 0 0 0.5 1.0 1.5 2.5 3.0

Total protein amount (µg) Amersham ECL Select

Amersham ECL Advance

A)

B)

C)

Signal intensity and duration

We compared the signal intensity and duration of

Amersham ECL Select to that of Amersham ECL Advance for

Western blotting detection of ERK ½ in HeLa cell lysate. We

detected the emitted signals immediately after addition of

the respective detection reagent, and followed the signal

intensity at time points up to two hours after reagent

addition. Blots for Amersham ECL Select and Amersham

ECL Advance were imaged side by side, using same

exposure times. Amersham ECL Select gives a significantly

higher signal output, with sufficient signals remaining 2 h

after addition of the reagent, even for the lowest amount

of protein tested. This gives you a convenient time window

between the end of an experiment and the beginning of

analysis thus allowing for multiple exposures.

Amersham ECL Select Time (min)

0 30 60 120

Amersham ECL Advance ECL Select 5 µg 5 µg 5 ng 5 ng ECL Prime サンプル ： HeLa細胞のライセートを5 μgから段階的に2倍希釈したもの メンブレン ： Hybond-P

ブロッキング： ECL Prime blocking agent （2% in PBS-T） 一次抗体 ：ウサギ抗ERK抗体

（ECL Select：10,000倍希釈、ECL Prime：3,000倍希釈） 二次抗体 ： HRP標識抗ウサギIgG

（ECL Select：100,000倍希釈、ECL Prime：30,000倍希釈） 検出 ： ImageQuant LAS 4000

露出時間 ： 1分

■

ECL Select

と

ECL Prime

の検出限界の比較

＊ ECL start、ECL Prime、ECL Select、ECL Plex用です。 ※ サンプル については144ページで請求方法等ご案内しています。

■

ウェスタンブロッティング検出試薬選択ガイド

ECL

シリーズ感度比較（目安）

中程度

高感度

超高感度     

（検出限界）

ECL / ECL start

ECL Prime

ECL Select

常温保存 できるように

Hela

細胞ライセートを用いて

ERK 1/2

を検出した例です。

ECL

と同条件で、同等の感度が得られます。

実験条件

サンプル ： HeLa whole cell lysate

一次抗体 ： Anti-ERK-1/2, rabbit antibody (Sigma-Aldrich社)を5,000倍希釈で使用 二次抗体 ： Anti-Rabbit IgG, HRP-Linked Whole Ab

Donkey (GE Healthcare)を10,000倍 希 釈で使用

泳動と転写 ： Amersham WB system

検出 ： Amersham Imager 600、

Lower tray position、5min露光 定量 ： ImageQuant TL v8.1、Analysis Toolbox 1

10 100 1,000

0.1 1 10

Integrated signal Intensity (

×

10

4)

HeLa whole cell lysate (µg Protein) ECL ECL start

ECL start

ECL

10 5 2.5 1.25 0.625 0.313 0.156 （µg）

3

ウ

ェ

ス

タ

ン

ブ

ロ

ッ

テ

ィ

ン

グ

＆

画

像

解

析

CCD カメラタイプ スキャナー タイプ ウェスタン ブロッティング DIGE 電気泳動 関連製品 CCD カメラタイプ 機種一覧 ウェスタン ブロッティング

●

長時間露出・くり返し検出も可能

＊1

●

微量タンパク質のバンドもくっきり

●

バックグラウンドで見えにくかったバンドをシャープに検出

＊2 ECL Start、ECL Prime、 ECL Select、 ECL Plex用です。 ＊3 製品内訳は以下のとおりです。

※ サンプル については144ページで請求方法等ご案内しています。

＊2 ECL start、ECL Prime、ECL Select、ECL Plex用です。 ※ サンプル については144ページで請求方法等ご案内しています。 ＊1 反応操作後1時間の時点で約60％のシグナル強度を保持

CCD

カメラ検出に適したウェスタン発光検出試薬

Amersham ECL Prime

ご注文情報

製品 包装 コード番号 価格（円）

ECL Prime Western Blotting Detection Reagent for 1,000 cm2 _{membrane RPN2232}

サンプル 35,400 ECL Prime Western Blotting Detection Reagent  for 3,000 cm2 _{membrane RPN2236 76,200}

ECL Prime Blocking Reagent＊2 _{40 g RPN418 13,000}

ECL Prime Starter Kit Core＊3 _{for 1,000 cm}2 _{membrane 72AS0120 48,300}

ECL Prime Starter Kit Core DualVueセット＊3 _{for 1,000 cm}2 _{membrane 72AS0121 65,300}

製品内訳 ECL Prime（RPN2232） HRP標識二次抗体 ブロッキング剤 分子量マーカー

ECL Prime Starter Kit Core ○ ○＊4 _○＊5 _­

ECL Prime Starter Kit Core DualVueセット ○ ○＊4 _○＊5 _○＊6

＊4 HRP標識二次抗体（抗マウス・抗ラビット抗体各 100µl） ＊5 ECL Prime Blocking Reagent （RPN418）

＊6 ECL DualVue Western Blotting Markers （RPN810）

感度とダイナミックレンジの比較

ECL Plusよりも短い露出時間で微量のタンパク 質（2.4 pg）まで検出できました（上図）。

サンプル：トランスフェリンを2.5 ngから段階 的に 2倍希釈

検出  ： ImageQuant LAS 4000mini

0 2000 4000 6000 8000 10000 12000 Transferrin (ng) Integrated Intensity ( × 10 -4) 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 ECL Prime（露出75秒） 2.5 ng 2.4 pg 0 400 800 1200 1600 2000 Transferrin (ng) Integrated Intensity ( × 10 -4) 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 ECL Plus（露出3分） 2.5 ng 9.8 pg

ECL Prime ECL Plus

反応直後 60分後 90分後 2.5 ng 4.9 pg 2.5 ng 9.8 pg ダイナミックレンジ≒103 _{ダイナミックレンジ≒}102.4 抗体希釈率

ECL Prime ECL Plus

Primary Secondary 1:3000 1:30 000 1:10 000 1:50 000 156 ng 10 µg 156 ng 10 µg いっしょに 購入すると便利

●

ECL

シリーズの最新ラインナップ

●

発色法に比べて高感度（ピコグラム低量域）で迅速な検出

●

HRP

を用いたバックグラウンドの低い化学発光検出

ECL start

_{ウェスタンブロッティング検出試薬}

Amersham ECL start

ご注文情報

製品 包装 コード番号 価格（円）

ECL start Western Blotting Detection Reagent for 2,000 cm2 _{membrane RPN3243 サンプル 13,900}

ECL start Western Blotting Detection Reagent for 4,000 cm2 _{membrane RPN3244 23,900}

ECL Prime Blocking Reagent ＊2 _{40 g RPN418 13,000}

いっしょに 購入すると便利

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ECL

と同等の結果の取得が可能

化学発光シグナル持続の比較 検出試薬添加後の各経過時間におけるシグナル 比較です。ECL Primeでは、1時間経過後も安定 したシグナル検出が持続されています。 （検出タンパク質：トランスフェリン）

Time (min) Amersham ECL Prime Amersham ECL Plus

0 30 60 90 120 150 180

Sample: Two-fold dilution series of transferrin from 2.5 ng Membrane: Amersham Hybond-P

Blocking: 5% bovine serum albumin (BSA) in PBS-T Primary antibody: Rabbit anti-transferrin 1:3000

Secondary antibody: HRP-conjugated anti-rabbit IgG (1:30 000) Detection: Amersham ECL Prime/Amersham ECL Plus Imaging: ImageQuant LAS 4000 mini (3 min for all time points) Analysis: ImageQuant TL 7.0 software

2.5 ng 4.9 pg 2.5 ng 9.8 pg

経過時間(min) ECL Prime

常温保存 できるように なりました 常温保存 できるように なりました