米 お よび米製品 タンパ ク質 の簡易定量法 について

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米 お よび米製品 タンパ ク質 の簡易定量法 について

光永俊郎 '･安藤 ひ とみH

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タンパ ク質の定iTL̲法 には Kjdd l法,t='ユレッ ト Pi knc ney31は動物組澱 や微 生物 の ビュ レ ッ ト法 紘,Lawr〉･法,色紫結合法な ど範 々の方法があるが, によるタンパ クJfの定立 には,妨苫因子 として脂質Zf

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紫野iはじめ食品の分析 には,一般 にKj I法が用 の形卵が著 しい ことを明 らかに した, この間題 を解 い られている. しか しこの方法 は煩雑 で操作 に熟練 決す るために, この反応 系に四塩化抜紫 および クロ を必要 とす るばか りでな く,測定に時間 を些す る. ロホルムを加 えて除去す る方法 を考察 し･lJ. また満 そのため この方法に代 わ る迅速 で標輝 的 な定 iru法のt

確立が頚.まれ ている.FJ‑易化 され た定見法の lつ と しての ビュレッ ト法 は, アルカ リ性硫酸銅溶液 を用 いるので, この讃典 で良tJ.タンパ クJ占 Hの抽出 と定崩 を同時 に行 うこ とが で きるため原理 的 に有利 で あ る｡ しか し食品 をアル カ リで処P.す ることによ りタ

田68)･ らは,小安,大安 お よびそれ ら製品について ビ ュレッ ト法に よるタンパ ク'Hの定血 に検討 を加 え, 妨管因子 として脂 質, デンプ ンの除去 にパーハ ロカ ー ボ ン化 合物,若 色物 質 の除 去 に フェ ン トン反応 系川 が効果的であ ることを報告 している.

そこで,米 および米製品のタンパ ク質 の簡易定

石 ‑ (

r桁性成分が折出 して ビュレッ ト反

ンパ クIE以外 のTl に ビュレッ ト法の応用 を考 え,Kjeld halタンパ ク田 応 を妨fJfす る.妨5i‑l･閑子 としては脂質 '叫 ,細 々のfI･ を軒準 に して, その改良法の検討 を行 った. その結 色物肝 ･5･6),道元

抑T

J,デンプ ン8)が挙 げ られてい る. 果 について報告す る.

これ らに対 してい くつかの改良法が挺 案 され て い

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第

23 部紀弊

玄米(うるち米, もち米),

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米,米艶,Ji Iu:

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lI 実験 材 料 お よび方 法 1 実隻奏材料 および試薬

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ん40維新 を肌人 し, ウイリー粉砕機 で粉砕 し,ZUメ ll

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ツンユ肝 で櫛別 して川いた.米倣乳 グル テ リンは沢 e o

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r l･Ohexane 井 ら] の方法 によ り朋灘 した.np

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2.kj dahcl J法

AOAC法川 を川 いて柴*の近3 f f係数 は5 5を川いた.

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を行 い,窄讃 タン 1;.

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3 ビュ レッ ト法

ビュレッ ト試葵 は&潮 水930m1に1OM水倍化 カ ^AbsoTban⊂e (550nn )

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L調製 した.

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述

ml 沈管 に郁 秤収 した. これ に ビュ レ ッ ト よび 4%硫慨別納液L

方法(^I):米 L よ び米 製^{･J‑ '''暮rl}%

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只で 分 遠心分離 した.f られた

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1111JJH 1300×gで 5分借J逆心 分戯 した.f if 料液 として Kje

J t られた Lぷほ I:

ク質,脂Jff,還元机 デ

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Jl･の550

: ninn ldahlタン′ 1.

液 . ンプ ンお よび耶色物rfを測定 した.帥tP

K)e 脂'O

nm の吸光度 を測L した.

法(日と同 じように試料 を件取 した後, iiZ

JJ一

lllには, 紘(2):L

ノj ldahlタンパ ク質14mg/. ml, fV.1nlg mg/ml, デ ンプ ン4,5mg/mlが認

/ml以 2m)のパーハ ロか‑ボ ン柄蝶 を加 えた｡次に これ

に

下 ,避 丸衣 lfO.082

J一

ビュレッ ト戯典 を50m川 IIえてプ法( とr1) q様 の拙 作 め J)れ た. またfI'･色物照 は検 tHされなか った. これ を行 い,55()

4 アルカ リ可溶成分の測定 成分 についてはデ ンプンのみが妨‑'彪糾す と考 えられ Ilmの1吸光度 を洲止 した. らの紡iR.とすでに報L.]I'･した結果8)と比較 して, [･.蕊

!王 .

る. その

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について さらに検討 した.

デ ンプ ンによる影響 ls

遊允掛,デンプンは SomogiNc on法川,脂rfは

2 Bra (Lld)n法l

として550nmの吸光度 を

洲

延す るノブ lJ F'

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法 をf いた. ビュ レッ ト法 による米牒乳 グルテ リンに対 するデ l/ ンプ ンの膨幣 を調べた. デ ンプ ン ((I‑10mgnll)

O . を含む)虻乳 グルテ リン柄織 目.∩,5 n輔/

‖ 結 果 お よび 考察 nll)を戯

i 1 ビュレッ ト試薬のみによる走査 料液 として. ビェレッ ト試薬 をJJuえて反I;,させた.

I)

米 および米卸1指粉末の終演料 につ いて,方法( で デンプ ンを含 まない試料液 を泌邸 に して吸光度 を比 55()nmの吸光度 を洲起 し,外戚料 の Kjeldahlタン 較 して,検 i lt

ig

線 よ り比か けの タンパ ク その結RLは F

'

ffを洲注 した.

X

‑iは Fig

パ クG/fとを比 較 した結 .1に示 され る ご と .'Zにホ す ご とくであ る. グ/レテ リン /O

9 . 3 . 15

8 .

2X

+

7 7

数0 であった.この相関性日系では ビュレッ ト法 を 存で300,2

くであ る.この嘲t合回鵬式

Y =

4 ,相性日系 5.Omg/ml戯料液 で は1.0mg/mlの デ ンプ ンの共 .511頂/mlで6O() ,5./0 0mg/mlで7n%の

O . 50 l n li

()

いることは

で きない. はさらにその膨幣が大 きく,I.0mg/mlのデ ンプ ン M水酸化 カ リ 共 T Iで1 %,5

TJ Lll･

この まま米 タンパ ク罰■の定E法 としてI 誤差 を生 じた.また//ルテ リン1.0mgm,/L試料敵で そ こでAk

' 別

/ 7k90mtにH mlJ のl 下 で80%,2.5mg,/ nW/mlで

: . ウム桁液 と2

杏)lJえI l アルカ リ桝液 を調恥 した. この桁液 を川 い (lmlの25%約77慨 カ リナ トリウム桁敵

Z fl 22()%の誤差 を生 じた.

米 JJlよび米男弘もんタンパ クJ IL土 J y

を ビュレッ ト法で測定 :糾千 として膿

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才:に膨耶 I]

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て玄米 よ り･･J新化成JJJを

糾. .

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ほした.玄米 2g す る際 には, デンプ ンがI す ることがlHちか になった.

にアJレカ リ桝液川Omlを加 えて, iri介振藍 tL,た後,

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5 6 法

紋 の吸光 度 とで は,(仰 式

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2とい う高 い相 関 r#1係 が 認 め られ た.

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光 永 ･安 藤 :米 タ ン/でクFFTの簡 易 定 ,‑lk

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要 米 お よ び米 敏 郎‑の タ ンパ クJ ビ ュ レ ッ ト法 を検 討 した.

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接 ビュ レ ッ トJ輿 で抑 止

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bt け る 方 法 で は,Kj hlタ ンパ ク群 と ビュ レ ッ ト吸 光J の廿日 素数 は口81で あ った.

2.米 試料 の ア ル カ リ抽 出 紋 に つ い て ビュ レ ッ ト法 の妨 '凶 + を調 べ た縦 米, デ ンプ ンが跡 胡:なgilll

IIL I.米 試料 を了

ALを示 した.‑

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Tabl 米 の似 合 に四境 化 炭 紫 は和 側 係数0 6と余 り効 ).

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4.米 ,試料 をパ ー ハ ロ カー ボ ンで前処 Pllして, ビュ レ ッ ト法 で タ ンパ クL を定 :け

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6の パ ー ハ ロカ

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以 上 米 お よび米 製 ;を淡紫 数 3

ー ボ ンで 前処 理 後 , ビュ レ ッ ト;試薬 で タンパ ク'i守の

: r.

帥 出 と反 応 を行 う と, ビ ュ レ ッ トの 吸 光 度 と Kj hlタ ンパ クJ の 問 に の 同 い相 性J係 数 を da

る と, その吸 光 度 と Lと

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系が 成 立 した. この条件 で米 お よび米 製 ムタ ンバ クJffの冊 勘 定 :法 と して ビュ レ ッ ト法 が 川

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)9 09 い られ る こ とが 明 らか に な っ た.

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各戯 料 との Kj lタ ン, 以 上 の rjか 州 側 係 数 が 認 め らiした.

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に つ い て デ ン プ ンの 防 毒宴抑 制 効 兜 を調 べ た

ー ‑ ロ カー ボ ンが効 射 的 で あ った.

3. ビュ レッ ト法 での パ ーハ ロカー ボ ンの 効 果 ク ロ ロホ ル ム な どの‑ ロ‑ イ ドロカー ボ ンやEq塩 化 淡 紫 な どの パ ー ハ ロカー ボ ンは, デ ンプ ンの/d接 化 fT物 を作 る こ とが知 られ て い る岬.

そ こ で n

を川 い て ビュ L/ツ ト法 に よ る米 お よ び米 tBuん

lタ ンパ クLFfと ビュ レ ッ ト反

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引 用 文 献

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