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超 生体 染色 所見か ら見た血球 の細 胞膜透過性 に関す る研究

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Academic year: 2022

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(1)576. 314:. 578. 685:. 611‑086.. 85. 超 生体 染色 所見か ら見た血球 の細 胞膜透過性 に関す る研究 第3編 顆粒 球 系 骨 髄 細胞 の細 胞 膜 透過 性 に つい て 岡 山 大 学 医 学 部 病 理 学敎 室 (主 任:妹. 大. 口. 基. 尾 左 知 丸敎 授). 光. 〔昭 和31年9月13日. 受 稿〕. 熟 顆 粒 球 に つ い て行 つ た と全 く同 様 に 取 り扱 緒. 著 者 は 第1編1)に. 言. わ れ た.. 於 て末 梢 血 中 の成熟 顆 粒. 色 素:. 球 及 び 淋 巴球 に つ い て,各 種 色 素 の 細 胞 膜 透. ヌ ス 緑,エ. 過 性 を 観 察 し,そ の 透 過 性 が 媒 質 のpHの. る.. 変. B. C. B.,ニ. ー ル 青,中. オ ジ ン,エ. 性 赤,ヤ. リ ト ロ ヂ ン の6種. ー で あ. 化 に よつ て 可 成 の 影 響 を 受 け る こ とを 知 つ た.. 実. 即ち 塩基性 色 素 は そ の荷電 が上 昇す る酸性 域 に 於 て,又 酸 性 色 素 は 同 じ くア ル カ リ域 に 於 て そ の 透 過 性 が 著 し く減 少 す る.こ 透 過 性 のpHに. の様 な膜. よる変化 は 成熟 細 胞 の代 謝過. 0.1%. 験. 結. 果. B. C. B.に よ る 健 常 家 兎 骨 髄 内 骨 髄. 芽球,前 骨 髄 球,骨 髄 球(以 後 骨 髄 性 細 胞 と略 称 す る)の 超 生 体 染 色 率 は 図1の. 程 と密 接 な 関 係 に あ る も の と思 わ れ る.特 に. した 如 くpH. 第2編2)に. 於 て 報 告 した 諸 種 ホ ル モ ン の 作 用. 示 し た.対 照 と し て 示 し た 曲線Ⅱ は 同 標 本 に. 例 え ば 代 謝 を亢 進 させ る様 に 作 用 す る チ ラ ー. 見 ら れ る骨 髄 内 成 熟 顆 粒 球(以 後 対 照 と略 称. ヂ ン は 細 胞 の 透 過 性 を 全 面 的 に 促 進 せ し め,. す る)の そ れ で あ る.0.01%ニ. 又 これ と逆 の 作 用 を 持 つ コ ー チ ゾ ンは 全 面 的. 骨 髄 性 細 胞 超 生 染 率(図2の. に透 過 性 を 抑 制 す る.こ れ 等 の 事 実 と関 聯 し. の 場 合 と 同 様 に 対 照(曲. て代 謝 が 盛 ん で 分 裂 増 殖 期 に あ る 幼 若 細 胞 の. 4.8〜7.0で. 細 胞膜 が如 何 な る性格 を 示 すか は 興味 あ る問. 域 で は 全 く成 熟 細 胞 との 間 に 差 違 を 見 出 さ な. 題 で あ る.本 編 に 於 て は 健 常 家 兎 骨 髄 内 の 顆. い.0.1%中. 粒 球 系 細 胞 に つ い て 前1及. (図3の 曲 線 Ⅰ)は 前 二 者 とや や 趣 を 異 に し,対. び2編1)2)の. 成績. と対 比 しつ つ 観 察 した 結 果 を 報 告 す る.. 4.8〜6.2の. 曲 線Ⅰ に 示. 間 で 染 色 性 の亢 進 を. 曲線 Ⅰ)もB. C. B. 線 Ⅱ)と 較 べ てpH. 透 過 性 亢 進 を 認 め た 以 外 他 のpH. 性 赤 に よる骨髄性 細 胞 超 生染 率. 照(曲 線 Ⅱ)に 較 べ る とpH 性 亢 進 を 認 め た.0.1%ヤ. 実. 験. 試 料: 体 重 約2kgの. 方. 法. 生 染 率(図4の. 健 常 家 兎 を 用 い,頭. 部. 曲 線 Ⅰ)はpH. 骨 端 を 切 り落 し骨 鋏 で 切 開 し,骨 髄 を 取 出 す.. 対 照 曲 線 Ⅱ に 較 べ る とpH. その一片 を生理 的 食 塩水 を 載 せた オブ ェ ク ト. 性 の 抑 制 を 認 め,他. グ ラス 上 に 移 し,今1つ. さ な い.0.1%エ. 骨髄 内 細 胞 を 生 理 的 食 塩 水 に 浮 游 させ,こ. 曲 線 Ⅱ に 較 べ る とpH. 於 て成. 制 を認 め 他 のpH域. 2.2〜5.6で. 透過. では 差 異 を見 出. リ トロ ヂ ン に 於 て は 骨 髄 性. 細 胞 超 生 染 率 は 図6の. の 試 料 は 第1編1)に. 5.6〜7.0で. 曲 線 Ⅰに 示 され た 如 く. のpH域. との 間 で 反 復 し て 軽 く圧 迫 す る こ とに よ り,. を 試 料 と した.こ. 透過. 可 成 著 明 な 透 過 性 亢 進 を 示 し た.又0.1%エ オ ヂ ン に 於 て は 図5の. れ. 5.6〜7.0で. ー ヌ ス緑 に よ る 超. を 打 撲 後 速 か に 大 腿 骨 を 骨 刀 を 以 て 剔 出 し,. の オ ブ エ ク トグ ラ ス. ー ル 青に よる. 曲 線 Ⅰに 示 され,対 2.2〜5.6で. 照. 透過 性 の抑. で は 全 く差 異 を見 出 さな.

(2) 1730. 大. B.. C.. 口. 基. 光. ニ. B.. 図1. ー. ル. 青. 図2 × Ⅰ: 骨 髄 内骨 髄 芽 球,前. 骨 髄 球,骨. 髄球. × Ⅰ:骨 髄 内 骨 髄 芽 球,前. ○ Ⅱ: 骨 髄 内 顆 粒 球. 中. 骨 髄 球,骨 髄 球. ○ Ⅱ:骨 髄 内 顆 粒 球. 性. ヤ. 赤. ー. ヌ ス. 緑. 図4. 図3 × Ⅰ: 骨髄 内 骨 髄 芽 球,前. × Ⅰ: 骨 髄 内 骨 髄 芽 球,前. 骨 髄 球,骨 髄 球. 骨 髄 球,骨 髄 球. ○ Ⅱ: 骨 髄 内 顆 粒 球. ○ Ⅱ: 骨髄 内 顆 粒 球. エ リ トロ ヂ ン エ. オ. ジ. ン. 図6. 図5 × Ⅰ: 骨 髄 内 骨 髄 芽 球,前 ○ Ⅱ: 骨 髄 内 顆 粒 球. 骨 髄 球,骨 髄 球. × Ⅰ: 骨 髄 内 骨 髄 芽 球,前 ○ Ⅱ: 骨 髄 内 顆 粒 球. 骨 髄 球,骨 髄 球.

(3) 超生体染色所見か ら見た血球 の細胞膜透過性に関す る研 究. 1731. 点 は 成 熟 老 化 した 細 胞 の そ れ よ り も低 く陰 荷. い.. 電 が 強 い こ とを 述 べ て い る.之 等 の 結 果 は 著. 考. 按. 者 の 透 過 性 に 関 す る実 験 結 果 に 理 論 的 な 裏 付. 上 述 の 実 験 結 果 に 示 され た 如 く骨 髄 内 幼 若 顆 粒 球 は 成 熟 した も の に 比 し て 塩 基 性 色 素 の 透 過 性 が 亢 ま り,酸 性 色 素 の 透 過 性 が 抑 制 さ れ て い る.幼 若 細 胞 は 旺 盛 な 代 謝 を 営 む が 代 謝 の亢 進 を 起 す チ ラ ー ヂ ン の 作 用 は 塩 基 性 色. を 与 え る もの で あ ろ う.尚Borsook11)そ の他 12)13)が胎 生 組 織 と骨 髄 細 胞 に 就 て 行 つ た 実 験 に よ れ ば 幼 若 細 胞 で は ラ ベ ル され た ア ミ ノ酸 の 摂 取 が 成 熟 細 胞 に 比 し て 非 常 に 速 か で あ る. こ の 事 実 は 蛋 白合 成 に 必 要 な 物 質 の 透 過 性 が. 素 と共 に 酸 性 色 素 の 透 過 性 を も亢 進 させ る2),. 幼 若 細 胞 に 就 て亢 進 して い る事 を 示 す もの で. 分裂 増殖 期 に あ る幼 若細 胞 は 一般 に細 胞内 の. あ るが,ア. 同化 作 用 が 亢 進 し,こ れ に 比 し て 異 化 作 用 が 低 い こ とが 想 定 せ ら れ るが,就. 中そ の 同化 作. ミ ノ酸 の 場 合 は 両 性 電 解 質 で あ り. 色 素 の 場 合 とは 一 応 別 に 取 扱 わ れ ね ば な ら な い か も知 れ な い.. 結. 用 は 蛋 白 合 成 の 亢 進 とい う形 で 表 現 され る も の で,こ れ 等 の 細 胞 は 成 熟 細 胞 に 比 し て 多 量 の核 酸 を 含 み,こ. 1.. 論. 家 兎 の 骨 髄 の 幼 若 顆 粒 球 に 就 て,種. の 点 で 成 熟 細 胞 と非 常 に 異. のpH域. つ て い る.動 物 細 胞 は 一 般 に 形 態 学 的 に 認. N. R.,. め られ る膜 を 有 せ ず こ の 事 は 成 熟 顆 粒 球 に. 細 胞 膜 透 過 性 を 検 し た.. 就 て も又 幼 若 球 に 就 て も 同 様 で あ る.若 Monne3),神. 田4),妹. 尾5)の. Endoplasmic. Reticulumが. 主 張 す る如 く. 只 密 に 並 ん だ もの. が 細 胞 の 膜 で あ る と す る な ら ば,酸. 2.. し. 性 の. RNAを. 多 量 に 有 す る 幼 若 細 胞 のEndoplasmic. R.は. 成 熟 細 胞 の そ れ と荷 電 が 異 る 事 が 期 待. に 於 て 塩 基 性 色 素(B. J. G.)及. C. B.,. び 酸 性 色 素(E.及. N. B.,. びEr)の. 塩 基 性 色 素 の 透 過 性 はpH. 4.8〜7.0の. 間 で 成 熟 顆 粒 球 の そ れ よ り も 亢 進 し, pH 以 上 及 び4.8以. 々. 7.0. 下 で は 成 熟 球 との 間 に 差 異 が. 認 め ら れ な か つ た.. 3.. 酸 性 色 素 はpH. 2.2〜5.6の. に 比 し透 過 性 が 抑 制 さ れ,そ. 間 で成 熟 球. れ 以 外 のpHで. され る.即 ち 幼 若 細 胞 は 成 熟 細 胞 よ り も よ り. は 幼 若 球 と成 熟 球 の 間 に 差 異 が 認 め られ な か. 強 く(‑)に. つ た.. 荷 電 し て い る事 が 考 え ら れ る.. この様 に 考 え る と 幼 若 細 胞 で は 塩 基 性 色 素 の 透 過 性 が 強 く,酸 性 色 素 の 透 過 性 が 弱 い 事 が. 本 研 究 要 旨は 昭 和31年 日本 血 液 学 会 総 会 で 発 表 し た.. 荷 電 の 面 か ら理 解 され よ う.事 実 現 在 迄 に 報 告 され て い る諸 家 の 成 績 を 見 る に,関6)及. び. 稿 を 了 え る に 臨 み 終 始 御 懇 切 な る御 指 導 と御 校 閲 を 頂 い た 妹 尾 左 知 丸 教 授 に 深 謝 す る.尚 本 研 究 は 文. そ の協 同 研 究 者7)‑10)が固 定 細 胞 に つ い て 測 定. 部 省 科 学 研 究 費 の 補 助 を 受 け た.謹. した 結 果 に よ れ ば 未 分 化 の 胎 生 期 細 胞 の 等 電. す る.. 文. しん で 謝 意 を表. 献. 1). 著 者:本. 誌,第1編.. 8). 稲 葉 義 春:日. 解 会 誌,. 21,. 2,. 108,昭18.. 2). 著 者:本. 誌,第2編.. 9). 生 山 昌 平:日. 解 会 誌,. 21,. 2,. 106,昭18.. 3). Monne,. L.:. New. Advances. York,. in. Enzymology,. 神 田 三 郎:未. 5). 妹 尾 左 知 丸:細. 6). 関 正 次:組. 織 検 査 法 と 物 化 学,. 院,東. 1951.. 7). 三 井 義 亮:日. 1,. 1948.. 4). 京,. 8,. 発 表. 胞,58,. 解 会 誌,. 丸 善,東. 京, 44,. 1953.. 47,杏. 林 書. 10). 山 下 悟:日. 11). Borsook,. 12). Zamecnik,. 解 会 誌, H.:. 5,. 387,昭17.. Physiol.. P. C.. et. al.:. 4, Rev., J.. 215,昭19. 30, Biol.. 206, Chem.,. 1950. 175,. 299, 1948. 13) Friedberg, F. et al.. J. Biol. Chem., 173, 437, 1948.. 20,. 22,.

(4) 1732. 大. Department. 口. of Pathology,. Okayama. (Director: Permeability. Ⅲ.. Studies. Permeability. on. 基. University. Prof.. Blood. Studies. 光. Medical. School,. S. Seno) Cells. on. Bone. by. Supravital. Marrow. Stain. Cells. By Motomitsu. Oguchi. As was demonstrated in the 1st report the granulocytesin the circulatingblood of a normal adult rabbitshowed the increasedpermeabilityfor dyes in the range of pH, at which the electrical changes of dyes decreased‑alkalinemedia for basic dyes and acidicmedia for acidicdyes. In thispaper the same experimentsperformed on the bone marrow cellsof normal rabbitshave been represented. Observationson myeloblasts,promyelocytes and myelocytes using B. C. B., Nile blue, neutral red and Janus green as basicdyes and eosin,erythrosinas acid dyes revealedthat these young cellshas an increasedpermeabilityfor basic dyes and a depressedpermeabilityfor acid ones comparing to those of matured granulocytes,e.g. young cellsin wet preparationshowed an increasedstainability for basic dyes at the pH levelof 4.8 to 7.0 and a depressionof permeabilityfor acidicdyes at the pH levelof 2.2 to 5.6. Discussionswere made on the differenceof permeabilitybetween bone marrow cellsand ma. tured cellsin the relation of maturingof cellsaccompaniedby the elevation of isoelectric point. of cytoplasm..

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