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Thiobacillus ferrooxidansによるジャロサイトお よびアンモニオジャロサイトの生成実験

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(1)

著者 小岩崎 浩一, 本坊 好正, 田崎 和江, 森 忠洋 著者別表示 Koiwasaki Koichi, Honbou Yoshimasa, Tazaki

Kazue, Mori Tadahiro

雑誌名 地球科学

巻 47

号 6

ページ 493‑505

発行年 1993‑11‑25

URL http://doi.org/10.24517/00061677

doi: 10.15080/agcjchikyukagaku.47.6_493

(2)

地 球 科 学 47 巻

6

1993 年 11月 ) 493

5D6

493

Thiohaci

US

 

ferrooxidans

よ る ジ

サ イ トお よ び         

ン モ

オ ジ

サ イ ト

生 成実験

小 岩 崎 浩 ・

本 坊 好 正

崎 和 江

 

森   忠 洋

     Experimental

 

study

 

on

 

formation

 

of

 

jarosite

 

and

ammoniojarosite

 

associated

 

with

 

Thiob

α

citlus

 

ferrooxidans

Koichi

 

Koiwasaki

 

Yoshimasa

 

Honbou

  

Kazue

 

Tazaki

and  

Tadahiro

 

Mori

Abstract   Jarosite

 

KFe3

SO4

2

OH

6 and  amrnQniojarosite  

NII4Fe3

SO4

)2(

OH

)6 were  experi

mentaly  

formed

 

in

 

g

 

K −

medium  with  

Thiob

α

cillus ノ ’

errooxidans  at 

33

under  aeidic  condi

− tion .

 

The

 

product

 shows  characteristic  

peaks

 of 

jarosite

 at 

3.

 

D8,1.99

 and  

1,83

and

 

those

of

 

amrnoniojarosite

 a し

3.09,5, 12,1.98

 and

. 83A

 

in

 use  

X

ray  

powder

 

diffraetion

 

and

 

elec − tron

 

diffraction

 

pattern .

 

TEM

 

and

 

SEM

 

obscrvations

 revealed 揃 e crystai  

growth

 

processes

of 

these

 minerals  as 

follows

 

Baci

lus

 

bactcrial

 

cells

 take  

the

 

form

 of cross

fiIlger

 

Both iron

 and  sulfur  components  

precipitated

 on  coll walL  

The

 

iron

 

component

 

takes

 

the

 

form

of 

burs ,

 whereas

hc

 sulfur  component  

fQrms

 rosary

shaped  materials

 

The

 sizes  of 

iron

materials

 

rangc

 

from

 

D,5to

 

2.

 

O

μ

rn

 

in

 

diameter

 while  

those

 of sulfur  materials  range  

from O.05to

 

D.1

μmin  

diameter、

 

Next,

 

potassiuln

 and  

hydroxyl

 

iI19K −

medium  reacted  on  

both iron

 and  sulfur  componen 七s on  

the

 cell walL  

Cubic

 or 

platy ゴ

arosite

, O.1to

 

5, 0

μ min  

dia

eter

 

is

 

formed

 within  

3

 

days .

 

Jarosite

 of 

final

 

products

 changed  

to

 reform  rosary  or 

par −

a

且el 

crystalline

 materials

 

Potassium

 

ill

 

larosite

 

is

 subsLituted  

for

 ammonia  

to

 

form

 am

moniojarosite

 

within

 

5

 

days.

 

Jarosite

 

was

 

produced

 

by

 

bacter ’ ial

 mineralization  

in

 

g

 

K −

mediu 【n  within  

3

 

days,

 

and

 

those

 

of

 

ammoniojarosite

 within  

5

 

days

 

WithQut

 

Thiobacillus

ferrooxidans

 

larosite

 and  ammoniojarosite  were  

produced

 

after

 

5

 

Qr

 

g

 

days

 respectively

, The  

results

 

suggest  

that  Thiob

αcillus  

ferrooxi

i

αns

 

¢Qntributes

 forma

ion  

of 

jarosite  

and

ammonioja

 roSite  aS CatalySt

Kebl

ω ords

  jarosite

  ammoniOjarosite

 

Thtob

αcillus  

ferrooxid

α

ns ,9K −

medium

 

XRD ,        SEM

 

TEM

  

1993

5

丿

120

受 付  

1993

9

24

 陸支

金 沢 大学 部 地 学 教 室

920 − 11

金 沢 市 角 間

1

  

Departmont

 of  

Earth

 

Sciences

 

Faculty

 of  

Science

 

Kanazawa

 

University

 

Kakuma

 

Kanazawa

 

92011

 

Japan

* *

兵 庫県 立

’ r −’ Pj

学 校

655

 P

  

Maiko

 

High

 

Schoel ,

 

Tarumi − ku

 

Kobe

 

655 ,

 

Japan

* * *

島根 大 学 農 学環 境 生

T .

究 室

690

 松 江西 川 津 町

106D

  

LaboratQry

 Qf 

Eilvironmenta

Biotechno

]ogy

 

Faculty

 of 

Agricultur ,

 

Shimane

 

Universi

y ,

 

NLshikawatsu ,

 

Matsue

  

Shi

nanc  

690 ,

 

Japan

(3)

494 小岩 崎浩 一 ・ 本坊 好

崎和

森  

1   は じ め

 

ク テ リ ア に よ る生 体 鉱 物 化

Bacterial biominera

ization

て生 成 され鉱 物 は

珪 酸 塩 鉱 物

ン酸 塩 鉱 物

硫 酸塩 鉱 物 な ど

, 250

種 以 上 も 認め ら れ て い る

Krumbein ,1986

Lowenstam

 

and

Weiver,1989

1991

に よれ ば

牛 体 鉱 物 を 作 ク テ リ多 様

存条

様 な

徴 を

1

高等 生物

棲息

極 限 的環 境 下 も繁 殖 す

, 2

ク テ リ

, 微

素 を

生 物 的地 球 化 学 的結 合る い 蓄 積 す

, 3

細 胞表 面 は

典 型 的イ オの性 質 を待 ち

可 溶 性金 属イ オを 大 量

, 4

) 各 種鉱 物 生 成い て

ア の細 胞核 形 成場 と な

  サ イ トは

鉄 鉱 床の 二次 生 成 物

る い

塩 を

む 十壌 中

般 的られ鉱 物

( Alpers

 

et

 

al . ,1992

Long

 

eC

α

1.,1992

ま た

ク リ

生 物 腐 食

ジ ャイ ト生 成 す

, 1990a ,

 

b

本 研 究で は

 

Thio − b

α

cillus

 

ferrooxidans

を 用培 養 液 中実 験 的

し た サ イ ト

Jarosite

KFe3

SO4

2

OH

G

実 験 的

生 成

を 走 査 型び 透 過 型 電 子 顕 微 鏡 を 用観 察 し

役 割 や サ イ牛 成 ムを 明 らに した

.  

研 究使 用 し

1 ’ hiobacillus

 

fenrooxid

αns

(鉄 酸 化 細 菌 ) は

,Colmer

 and  

Hinkel

1947

発 見さ れ た

独 立 栄 養 細 菌

こ の バ ク テ リ ア は

Fe2

Fe3

に酸 化 し

を 得お り

ま た

酸 化 能 力 も合 せ 持 る (今 井

,1984

箕 浦ほ か

1986

山 中

1987

こ の ク テ リ ア は

陰性

, 0.5〜5. O

μ

m

の大 き さ を も ち

好気

性 か 耐 酸 性

ま た

, pHO , 5〜5,5

生 育 し

pH

2.0〜3,5

[   実験方 A . Thiobac1

〃 us 

ferrooxid

ns 培 養

  Thiob

αciZtus  

ferrooxidans

泉津

松付

, 更新

都野

津 層海 成

土 層 か ら

験に使 用 し た

実 験に 用

9K

培 地は 下 記

と お りで あ

 

し た

500ml

, 9K

100ml

Thiobaeillus

 

fernooxid

α

ns

 

l

 

ml

1

% ) を 入 れ

33

℃ に温 しと う

し た

ま た

た め に

植菌

しな

振 と うさ せ た

生 成 物

12

た は

24

時 間毎 ら取 り出

pH

測 定

Fe

分析

, 電

子 顕

微鏡

 

Fe

の定 量 分 析 は

, 1 ,

 

10 一

蒸 留 水希 釈 した 試 料

50ml

110

溶 液 を

2 . 5mL

緩 衝 溶 液 を

2 . 5ml

, 30

分 間 放 置 した 後

吸 光 度 測 定 を 行

溶 存 鉄

試 料 を 濾 紙濾 過 した 後

, Fe

を 全

Fe2 鹵

還 元 す る

塩 化シ ルン モ 溶 液 を

1 .

 

Oml

加 え

さ ら に

1

10一

ン ト

溶液

2.5mL 緩衝 溶液

2, 5ml 加

,30 分

し た

後 ,

吸 光

う培 養

わ し や 沢 田健 蔵 商 店 製わ し や

TLR

 

No .2

う培 養 機

吸 光 度 測 定

, 島

津 製 作 所

製 光度

UV − 1200

れ 行

B , X

線 粉 末 回 折 分 析

  X

線 粉 末 回折 分 析試 料

12000rpm

5

分 間

分離

, 乳鉢

ぶ しス ラ ドガラ ス

塗 布

風 乾 後 分 析

遠 心 分 離

久 保製 作 所 製 冷 却 遠 心 分 離 機

KR −

8000

 

X

線 粉 末 回 折 分 析

学 電 機 株 ) 製

フ レ ク ス

D1

2013 X

線 回 折 装 置 を 使 用 し

加 速 電 圧

30kV ,

管 電 流

10mA

測 定 を 行

C .

走 査 型 電 子 顕 微 鏡 観 察

 

走 査 型 電 子 顕 微 鏡 試 料

12000rpm

5

分 間 遠分 離 し

, 25

, 40

, 60

, 80

, 1DO

次 5 分

間浸 し

, 水

分 をア ル

ル で

し た

試 料

両 而

試 料 台接 着

蒸 着し た

のを 観 察 し

こ の試 料 処 理 方 法よ る試 料変 形め ら れ な か

走 沓電 子 顕 微 鏡

電 子

製 JSM − 220A

加 速 電 圧

15kV

で観 察し た

D .

分 散 法 に よ る化 学 分 析

  植 菌 し試 料 う ち

溶 液

XRD

お よ び 形 態 変 化顕 著

3

7

試 料 お び 無 菌 試 料

9

試 料

風 乾 後

蒸 着 を 行

化 学 分 析 を 行

分 析は 目立 製 作 所 製

S − 2100

型 走 査 型 電 子 顕 微 鏡

け られ

堀 場 製 作 所 製

EMAX3000

分 散 型

X

線 分 析 装 置

加 速 電 圧

20kV

々 の試 料面 分 析 お び 点

分析

を 行

る試 料損 傷 は認 られ な か

な お

こ の装 置に は

ZAF

補 正 み 込 ま れて い

E .

過 型

鏡 観

 

遠 心

した

蒸 留

に 懸さ せ

そ の

一 滴

補 強 を し た イ ク ドに

過 型 電 子 顕

観 察

し た

過 型電 子 顕

電 子 製

JEM2000EX

加 速 電 圧

160kV

観 察 した

(4)

Thiobacillus

 

ferrooxid

αns よ る ジサ イ トお よア ン モ 生 成 実 験

495

皿  結 果

A , Thiobac

〃/us 

ferrooxid

ns の培 養

  実 験

9K

培 地透 明で あ

実 験 開 始 後

3

植 菌 し試 料 出発 溶 液お よび沈殿色 が著 し く

変化

反 応 生

成物

第 1 表

, 12

時 間で は

溶 液 が わ ず か灰 白色懸 濁 し

, 2 〜 3

や か な褐 色 を

び た

,2

3

殿

黄橙

そ の

沈殿物

増加

顕著

. 4

成 物

, 黄橙

か ら

変化

, 時

過 とと も 淡 黄に変 化し た

場合

明緑 灰

淡 黄 色

, 2

目以 降黄 橙 色と な

変化

られ な

2 表

び 第

1

生 成

pH ,

Fe 含有

量 を 示 して い

試 料

Fe2

 

Fe3

び 溶 存

Fe

量 と も反 応 時 間に よ る顕 著変 化 は 見 れ な

 

植 菌 し試 料で は

ど が

Fe2

培 養 液 中

Fe

量 が

2

か ら急 激減 少

反 対

液 中

Fe3

合 は

, 2

目 か ら増 加

6

日 目 か ら溶 存

Fe

の約

90

% が

Fe3

, 2 〜3

か ら沈 殿

量 が 増 加

し たい う事 実 か

, 培

Fe2

が 酸 化 さ れ

Fe3}

し な が ら

化 作 用が 進し た と

れ る

に 述

と 沈殿

こ の こ

と と

応 し

. pH

実 験 開始 〜 1

目 ,

2 〜3

や か に が る が

, 1

2

目 ,

3

日 目以

が る

. 9

で は

植菌

で は

1.85,

で は

2. 35

. 植 菌

試 料

pH

無 菌 試 料に

. B .X 線

  植菌

した試

実験 開始 直後 , 1

目 , 3

目 ,5

PH3

, 0

2

5

2 . o1

5

0123456789

匣 ]

em

10000

5000

deys

1200

OO

400

0123456789tiays

mg s10000

5000

   

0123456789d

ys

1

  9K

培 地 とτ

ferrooxidans

反 応 日数

    

す る

pll

 

Fe2

 

Fe3

お よ び

溶 存 Fe

変       化 .Control

9K 培

変 化 を        示 す

第 1

. ferrooxid

αns

9K

地 と

応 生

成物

      

変 化

農 林省 農 林 水

技 術 会 議 事 務

        (

19

O

 

r

新 版 標 準 土 色 帖』 にる )

Z

!ταを 植 菌 し た も 無 菌

0

時 間

10

 

GY8

11

緑 灰

0GY8

11

緑 灰

12

時 間

      1

10

 

Y

 

8

2

      1

. 5G

8

1 …

1

日 目

5       

 

Y

 

8

4

:淡1 黄 了

, 5Y8   

3

1

2

10

 

YR7

8

:黄 橙

10YR

8

3

4

日 目

      :

7 . 5YR7

81

            :

2 . 5Y

 

8

8

  橙 黄

      :

7 . 5YR7

81

            :

7 . 5YR7

8

黄 橙 橙

5

2 . 5Y  7

8 …

      1 7 . 5YR7

8

6

      r

2 . 5Y

 

7

8

lo     I

YR7

8

榿

7

日 目

      

1

5

 

Y

 

7

8

: 黄

10     幽

YR7

81

黄 橙

8

目       :

5

      ; 

Y

 

8

8

10YR

8i

9

5

 

Y

 

8

81

2 . 5Y8

81

  黄

お よ び

9

生 成 物

無 菌 出発 物 質

6

,9

生 成 物

X

線 粉

回 折

2

と第

3

示 す

  植 菌

し た

3

回 折

ン に は

イ ト に

特 有

,3.08A

113

, 3 . 11A

201

, 5.09A

102

で に 認 あ られ

5

生 成 物

に は

ャ ロイ ト

ア ン

ク (

5122318 , 2,909,5,81A

. 9

試 料

ア ン

反 射 強 度

3

 

106

 

A

113

,5. 12A

012

 

L98A

303

) お よ び

1 . 832A

220

ク が 顕に 認 め ら

9H

成物

におい て

サ イ トよ ン モ オ ジャ ロ サ イ ト

の方

し て い る

(5)

496 小 岩崎浩 一 ・ 本坊好

崎和

森 

2

. ferrooxid

α ns

9K

培 地時 間

      成物

pH ,

 

Fe2

 

Fe3

お よ び

溶 存 Fe

      化

Z

1oo

5 を植 顏 無 菌

pHFe2 ドe3 溶 存

Fe

PHFe2

F

θ

3

溶 存Fe o 時 間

2 . 75

494 . 581 、 89576 , 32 , 759494 . 581 、 89576 . 3 12

時 間

2 . 85

88B . 614 . 99903 .

42

. 859018 .

7141

29159

9

1

2 . 959873 ,

5z . D9925 , 73 . 009350 . 7

26

49487

1

2

日 目

2 . 559375 . 574 , 59450

2

、 659212 .

01 5

. 89397 . 8 3

目 目

2 . 60

η

02 .

13

β

7836

. 52 .

09137 .

6215

69353

2 4目 2

4D5546

5185

, 95732 , 42 . 659D95 . 6104 . 1

189 . 7 5

2 、 3D

687 , B

τ

91 .

5479 . 62 . 558935 、 9163 . 59100 . 4 6B

2 . DD

15 . 91

68 , 9

284 ,

2

. 458119 .

o8E

8200

8

7

日 目 1

、 95

Ol

2lo49

n50 . 92 . 408498 . 052 , 38550 . 3

8 1

9D103

5980

, 8

D84 , 32 ,

408

2 . 5104 . 19416 . 4 9R

1 . 8573 . 399L4Io64 , 72 . 357

29 . 181 、 7

910 , 8

Fe

  9

  一

無菌

試料

6

円 目 サ イ トの ピ

3, 09 ,3。 26, 5 , 10A

が 認 め ら れ る が

反 射 強 度 は 弱

ま た

9

生 成物回折

6

回 折

と よく似

ア ン モ オ ジ

サ イ ト

生成

め ら れ

ず ,

反 射

す ぎな い

C ,

型 電子 顕 微 鏡

  植菌

3

走 査 型 電

子顕 微

鏡 写

第 4

A

し た

始 時

の バ ク テ

, 3

に は

交 指状

変化

して い る

ま た そ の凝 集し た テ リ

周囲

物質

付着

. 部分

, 栗

物質

合 体

様子 も観察

さ れ た

の イ

物質

無菌

試 料

全 く

さ れ な か

先 端

0. 5

μ

rn

方 体物 質 (第

4

B

矢 印 )生 成

い る

こ の

物 質

,X

線 粉 末 回折の パ

や その形 態か ら

サ イ トとえ ら れ る

5

A

矢 印 )に 見る よ

,0. 1

μ m 前 後

球粒状

物 質

数 珠状

. O

μ m の長 さ

て い

も観察

さ れ た

れ は

, 硫黄

単体

られ

応後 7 〜 8

日 目生 成 物 交 指

ク テ は か なり減 少 し

物質

全 く見ら れ な

逆に

板 状 多 く生 成 して い観 察 され る

反 応 後

7

生成

物 は

,0,

〜5.0

μ m の立 方 体 や 偽 立 方 体

あ る 長 方 体板 状な ど態 を し た ジャ ロ イ ト凝 集 し

て いる様 子 が 観 察 さ れ る (第

5

B

  一

, 無

菌 試 料

, 5

5 . 0

μ m の立 方 体 サ イ トが 生 成 して い る (

6

図 矢 印 )

, 9

試 料

5

日 目 試 料同 様 約

5 . 0

μ m の立 方 体 や 偽 立

10

     

20

     

30

     

40

     

50

    

60      

02 θ

  CuK

α

  radiation

2

 

ferrooxidans

反 応と そ生 成 物

X

    

線 粉 末

ferrooxidans

       菌 し直 後

0

日 目 )

1

日 目

, 3

日 目

, 5

        目 お

9H

試 料

X

線 粉 末 回折

      を

す .

サ イ ト

ン モ

      

ャ ロサ イ ト

方 体 イ トが 晶 出 しる様 子 が 観 察 さ れ た

植 菌 し試 料

無 菌 試 料

5

9

サ イ ト生 成 量 は少 な

D .

分 散 法よ る化 学 分 析

  植 菌 し試 料

変 化 顕 著

3

凵 目

A

, 7

目 (第

7

B

び比

9

目 (第

7

C

試 料 を

分 散 分 析 し

ド法で ト

100

% に ノ

ラ イ 値 を

3

す .

, Fe

 

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