IRUCAA@TDC : 顎骨浸潤能を獲得した口腔扁平上皮癌の特性を探る

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(1)Title Author(s) Journal URL. 顎骨浸潤能を獲得した口腔扁平上皮癌の特性を探る野村, 武史歯科学報, 105(1): 13-21 http://hdl.handle.net/10130/188. Right. Posted at the Institutional Resources for Unique Collection and Academic Archives at Tokyo Dental College, Available from http://ir.tdc.ac.jp/.

(2) １３. 歯学の進歩・現状. 顎骨浸潤能を獲得した口腔扁平上皮癌の特性を探る. 野村武史. はじめ. 適応説）が知られている４）。すなわち骨は増殖因子に. に. 富む肥沃な環境であり，一般的に癌細胞が定着し増. 口腔扁平上皮癌は強い局所浸潤能を有し，特に顎. 殖するために都合の良い組織と考えられている。し. 骨への浸潤は臨床的に重要な問題点となっている。. かし実際すべての癌が骨浸潤，転移するわけではな. 歯肉癌は，発生した歯肉粘膜の直下に顎骨が存在し. い。癌細胞はもともとへテロの細胞集団であるた. ているため，容易に骨表面に到達する。このため顎. め，高頻度に骨転移する癌はもともと転移能の高い. 骨浸潤の有無，あるいは顎骨浸潤の範囲について詳. 細胞集団を数多く含んでおり，その細胞集団が骨に. １，２）. 細な診断が必要となる. 。通常口腔癌の治療は手術. 療法と放射線療法が主体となるが，顎骨に浸潤した場合放射線抵抗性を示すことが多く，手術療法単独か手術を含めた併用療法を選択することが多い。顎骨の過剰な切除は咀嚼機能が失われるばかりでなく，顔貌の変形，発音障害もきたし社会復帰を妨げる大きな要因のひとつとなる。顎骨の切除範囲については今のところ画像検査で決定するしかないが，正確な予測が困難なため大きく切除せざるを得ない。柴原らは過去の顎骨切除症例を臨床・病理学的に検討した結果，敢えて辺縁切除を行わなくても，骨膜までの切除で制御できたであろう症例や，下顎管に沿って近遠心的に拡大していたため，取り残しをした症例があり，腫瘍の根治性と QOL を両立さ. 図１. せるためには新しい診断法を開発することが不可欠であると述べている３）。癌細胞の骨浸潤，骨転移が成立するメカニズムとして Paget の提唱する Seed and Soil theory（環境. キーワード：歯肉癌，顎骨浸潤，破骨細胞，サイトカイン， Bisphosphonate 東京歯科大学口腔外科学第一講座（２００４年９月２９日受付）（２００４年１１月１日受理）別刷請求先：〒２６１ ‐ ８５０２千葉市美浜区真砂１−２−２東京歯科大学口腔外科学第一講座野村武史. 癌の骨転移成立メカニズム（仮設）米田らの文献４）より改変，引用Ａ：a，b，c の癌細胞のうち，b のみ骨転移能を有している。Ｂ：a，b，c すべての癌細胞が骨内に到達することができるが，b の細胞だけが定着，生存，増殖することができる。. Takeshi NOMURA : A characteristic of the oral squamous cell carcinoma with mandible bone invasion （The First Department of Oral and Maxillofacial Surgery, Tokyo Dental College）. ― 13 ―.

(3) １４. 野村：顎骨浸潤能を獲得した口腔扁平上皮癌の特性. 図２. 歯肉癌が顎骨に浸潤する経路Ａ：歯根膜より髄腔内に浸潤する経路Ｂ：皮質骨より髄腔内に浸潤する経路Ｃ：髄腔内から下顎管に到達した後近遠心方向に拡大，浸潤する経路. 転移するという考え方がある（図１）。特に骨に高頻. 上皮癌の診断下に顎骨切除術を併用した３８症例で，. 度に転移するものとして，乳癌，前立腺癌，肺癌な. 各々病理組織学的に検鏡をおこない，顎骨に浸潤し. ５）. どが知られている。もう一つの考え方として全て. ていなかった群１５例（男性１２例，女性３例，平均年. の癌細胞は骨に到達する能力を持っており，後天的. 齢５９．０歳）と顎骨に浸潤していた群２３例（男性１０例，. に骨内の環境で定着，生存，増殖することのできる. 女性１３例，平均年齢６４．０歳）の間で比較検討をおこ. 癌細胞のみが残るというもので，恐らく歯肉癌の顎. なった。解析項目は"原発腫瘍の大きさ，#頸部リ. 骨浸潤は両方のメカニズムが関与していると思われ. ンパ節転移の有無，$分化度，%浸潤様式，&オル. る。またこれには歯根膜や下歯槽神経が進展経路と. ソパントモグラムよる骨吸収の有無，'累積５年生. して一役かっていると考えられる（図２）。. 存率の６項目とした。結果は，従来の歯肉癌の臨床. 近年，骨浸潤，骨転移における骨破壊は癌細胞に. 的指標とされている腫瘍の大きさ，頸部リンパ節転. より直接引き起こされるのではなく破骨細胞を介し. 移，分化度，浸潤様式においていずれも顎骨浸潤の. て起こる破骨細胞性骨吸収が重要な役割を演じてい. 有無とは関連を認めなかった（表１）。また顎骨浸潤. ６）. る事が明らかとなっている。一方骨・骨代謝研究. 癌の多くはレントゲン所見で骨吸収，破壊像を認め. において，骨芽細胞と破骨細胞をとりまくサイトカ. たが，４症例（１７．４％）に明確な骨吸収像がみられな. イン・ネットワークや分化の調節にかかわる転写因. かった（表２）。このことから，現在の臨床的指標の. ７）. 子の解明が基礎分野で進んでいる。また破骨細胞の活性を抑制する特異的な作用を有する Bisphosph onate 製剤（以下 BP と略す）を Paget 病や高カルシ. 表１. 顎骨浸潤と従来の臨床病理学的指標との関係. ウム血症，さらには乳癌の骨転移治療薬として臨床. 顎骨浸潤群（％）顎骨非浸潤群（％） N＝２３ N＝１５. ８，９）. 応用され，その成果が報告されている. 。. このように骨吸収性疾患をめぐる基礎研究と臨床研究とが急速な発展をみせるなか，歯肉癌における顎骨浸潤のメカニズムの解明は，今までにない大きな転機を迎えようとしている。本稿では現在まで我々がおこなってきた顎骨浸潤癌に関する研究内容とその成果について紹介する。. １．顎骨浸潤癌の臨床統計学的検討１０）対象は東京歯科大学口腔外科を受診し，歯肉扁平 ― 14 ―. 腫瘍の大きさ（＞４!） pN（＋）. NS １４（６０．９）. ９（６０．０）. NS. ７（４６．７）. ６（２６．１）. 分化度高分化度型中分化型低分化型. NS ２０（８７．０） NS ２（８．７） NS １（４．３）. １２（８０．０）３（２０．０）０（０）. 山本・小浜の分類１型２型３型４ｃ型４ｄ型. NS ０（０） NS ３（１３．０） NS １４（１６．０） NS ５（２１．７） NS １（４．３）. ４（２６．６）０（０）９（６０．０）１（６．７）１（６．７）. NS：No significantly（VS 顎骨非浸潤群，student t-test）.

(4) 歯科学報表２. Vol．１０５，No．１（２００５）. レントゲン所見と顎骨浸潤との関係. ２．破骨細胞関連サイトカインの発現に関する免疫組織化学的解析１０）. 顎骨浸潤群（％）顎骨非浸潤群（％） N＝２３ N＝１５骨吸収（＋）破壊性骨吸収圧迫性骨吸収骨吸収（−）. １５. ＊１９（８２．６）１６（８４．２）３（１５．８）. ＊４（１７．４）. ３（２０．０）０（０）３（１００）. るなら，破骨細胞の制御に関わるサイトカインの発. １２（８０．０）. 現が重要な役割を果たすことが推察される。今回. 歯肉癌の顎骨浸潤が破骨細胞を介しておこなわれ. 我々は，前述の臨床研究で用いた３８症例のパラフィ. ＊p＜０．０１（VS 顎骨非浸潤群，student t-test）. ン切片を用い，顎骨浸潤群１５例と顎骨非浸潤群２３例について免疫組織化学的染色をおこなった。今回検索したサイトカインはインターロイキン（IL） ‐１ α，IL‐１β，IL‐６，IL‐ １１，IL‐ １８，副甲状腺ホルモン関連蛋白（PTHrP），腫瘍壊死因子（TNF） ‐α， Transforming Growth Factor （TGF） ‐β の８種類であり，それぞれ一次抗体としてラビット抗ヒト IL‐ １α ポリクローナル抗体（ENDOGEN 社製），ラビット抗ヒト IL‐１β ポリクローナル抗体（ENDOG EN 社製），ゴート抗ヒト IL‐６体（Santa 図３. Cruz 社製），ゴート抗ヒト IL‐６. クローナル抗体（Santa. Kaplan-Mayer 法による５年累積生存率. ポリクローナル抗ポリ. Cruz 社製），ゴート抗ヒト. IL‐ １８ポリクローナル抗体（Santa Cruz 社製），マみでは歯肉癌の顎骨浸潤の程度を正確に把握するこ. ウス抗ヒト PTHLP モノクローナル抗体（CALBIO-. とは極めて困難であることが確認された。また顎骨. CHEM 社製），ゴート抗ヒト TNF‐α ポリクローナ. 浸潤癌の５年累積生存率は６９．６％であり，顎骨非浸. ル抗体（R&D 社製），ラビット抗ヒト TGF‐β ポリ. 潤群の８６．７％と比較して明らかな有意差は認めな. クローナル抗体（Santa. かったものの低い結果となった（図３）。したがって. 組織化学的染色は VECTASTAIN 社製 ABC kit を. Cruz 社製）を用いた。免疫. 口腔扁平上皮癌の顎骨浸潤は予後不良因子と考えら. 用い，マイクロウェーブ７分３０秒で処理した後染色. れ，顎骨浸潤を同定する新たな臨床的指標の確立が. をおこなった。染色態度の評価は，それぞれの標本. 急務であると考えられた。. に対し，無作為に１０視野を選択し，各々１００個の細表３. 顎骨浸潤に関与すると考えられたサイトカイン PTHrP （−）. 顎骨浸潤群（％）（N＝２３）. ０（０）. 顎骨非浸潤群（％）９（６０．０）（N＝１５）. TNF-α. （＋−） ∼（＋＋＋）（−）（＋−） ∼（＋＋＋）＊２１（１００）. ６（４０．０）. ０（０）６（４０．０）. IL‐６（−）顎骨浸潤群（％）３）（N＝２. ０（０）. （６４．３）顎骨非浸潤群（％）９５）（N＝１. ＊２１（１００）. ７（５３．８）. IL‐ １１. （＋−） ∼（＋＋＋）（−）（＋−） ∼（＋＋＋）＊２３（１００）. ５（３５．７）＊. １（４．５）. ＊２１（９５．５）. ９（６４．３）. ５（３５．７）. p＜０．０１（VS 顎骨非浸潤群，student t-test）. ― 15 ―.

(5) １６. 野村：顎骨浸潤能を獲得した口腔扁平上皮癌の特性. 胞において抗原陽性細胞数を計測した。そして. 側咬筋内に５０µl 注入し，３週間通常飼育をおこ. Gratas らの方法１１）に準じて（−）から（＋−） ∼（＋＋. なった。コントロール群はマウスの左側咬筋内に生. ＋）の５段階に評価した。結果として，今回解析し. 理食塩水を５０µl 注入し，３週間通常飼育をおこ. た８種類のサイトカインのうち顎骨浸潤癌で強い発. なった（図４）。試料の解析は!H‐E 染色および. 現をみとめたのは IL‐６，IL‐ １１，PTHrP および. Tartrate‐Resistant Acid Phosphatases （TRAP）染. TNF‐α であり，歯肉癌の顎骨浸潤にこれらサイト. 色による病理組織学的観察，"IL‐６，TNF‐α，. カインの発現が関与している可能性が強く示唆され. PTHrP mRNA の発現とした。TRAP 染色は１０％. た（表３）。しかしIL‐１α，IL‐１β，TGF‐β および. EDTA 水溶液で脱灰した後パラフィン包埋し，. IL‐ １８の発現については明らかな差異を認めなかっ. TRAP Kit （Hokudo社製）を用いておこなった。ま. た。この中で特に強い発現を認めた IL‐６，PTHrP. た SCC Ⅶ培養細胞，control 群，SCC Ⅶ移植群より. および TNF‐α は破骨細胞の誘導，分化に促進的に. 試料を採取し，AGPC 法で RNA を抽出した。５分. 働くサイトカインとして知られている。すなわち口. 間加熱後，RNA １µg を逆転写酵素反応液と混合. 腔扁平上皮癌の顎骨浸潤に，サイトカインの発現を. し，３７℃，６０分反応させることにより cDNA を合. 介した破骨細胞性骨吸収が重要な役割を担っている. 成した。そして IL‐６，TNF‐α，PTHrP について. と考えられた。. PCR 法で増幅させ，１．５％アガロースゲル上に電気泳動し，DNA 産物を確認した。結果は SCC Ⅶ細胞. ３．マウス顎骨浸潤癌モデルの確立１２）. 株を C３H／HeN マウス咬筋に移植して３週後に著. 顎骨浸潤のメカニズムをより詳細に解析するた. 明な腫瘍の増殖が認められた。また病理組織学的所. め，マウス顎骨浸潤癌モデルの作成を試みた。移植. 見では，すべての SCC Ⅶ移植群で顎骨内に腫瘍細. 癌細胞株として，マウス口底部扁平上皮癌由来の細. 胞が索状に浸潤し，据歯状の骨吸収像を示していた. １３，１４）. 胞株である SCC Ⅶを実験に供した. 。基本培地は. （図５）。TRAP 染色の所見では，吸収された顎骨. Dulbecco Modified Eagle Medium（DMEM）に１０％. 周囲に多数の破骨細胞の集積を認めた（図６）。さら. fetal bovine serum（FBS）を加えて用いた。これを. に SCC Ⅶ細胞株や移植癌組織において IL‐６， TNF. １００mm dish で静置し，３７℃，５％CO２の条件下で. ‐α， PTHrP の mRNA レベルでの発現が認められ，. 培養した。使用動物は体重２０g 前後の雄性 C３H／. これら３つのサイトカインの発現が本モデルの顎骨. HeN マウス（三共ラボ）６匹であり，３匹をコント. 浸潤に深く関わっているものと推察された（図７）。. ロール群，３匹を SCC Ⅶ移植群として通常飼育を. 以上より本モデルは，ヒトにおける顎骨浸潤のメカ. おこなった。実験動物の取り扱いは東京歯科大学動. ニズムを解明するために極めて有用であり，臨床的. 物実験指針に従った。SCC Ⅶ移植群は無血清培地. 特長をよく反映しているものと考えられた。. ７. で２×１０／ml に調整した SCC Ⅶ細胞をマウスの左. 図４. マウス顎骨浸潤モデルの作成 ― 16 ―.

(6) 歯科学報. 図５. 図６. Vol．１０５，No．１（２００５）. １７. H-E 染色による形態学的観察 T：歯牙，B：骨，TM：癌細胞. 顎骨浸潤モデルにおける破骨細胞の発現（TRAP 染色，弱拡大） T：歯牙，B：骨，TM：癌細胞. ４．BP の顎骨浸潤抑制効果とサイトカインの発現について１２）骨吸収抑制剤である BP は現在第１世代から第３世代まで開発されており，その効力，作用機序は種類により多少異なるが，細胞レベルでのターゲットは主として破骨細胞である８）。今回我々は，マウス顎骨浸潤モデルを用いて第２世代 BP である Pamid ronate の投与実験をおこなった。実験方法はマウス顎骨浸潤癌モデルに対して移植直後より生理食塩水を腹部皮下注したコントロール群と Pamidronate １００µg/mouse/day を３週間腹部皮下注した BP 投図７. RT-PCR 法による破骨細胞関連サイトカインの発現解析. 与群について比較検討した。解析項目は!マイクロ. ― 17 ―.

(7) １８. 野村：顎骨浸潤能を獲得した口腔扁平上皮癌の特性. CT（極微小焦点 X 線 CT 装置，KMS‐ ７５５，樫村）に. る頭蓋骨の三次元画像では，コントロール群におい. よる三次元画像解析，!破骨細胞の占有面積率，". て下顎骨や顔面骨に対し著明な吸収を認めた。これ. IL‐６，TNF‐α，PTHrP に加え，破骨細胞分化因. に対し Pamidronate 投与群では腫瘍が増大してい. 子 receptor activator of nuclear factor‐κβ ligand. るにもかかわらず骨破壊，吸収は抑制されていた. （以下RANKL と略す），receptor activator of nuclear. （図８）。また TRAP 染色による破骨細胞の占有面. factor‐κβ （以下 RANK と略す）， Osteoprotegerin（以. 積率を比較するとコントロール群３４．２％に対し. 下 OPG と略す）の mRNA の発現について，とし. Pamidronate 投与群では８．１％と有意に低い値を示. た。マイクロ CT の撮影条件は管電圧４５．０kV，管. し，破骨細胞の発現が抑制されていた（図９）。すな. 電流１００．０µA，倍率２．０倍でおこなった。そして得. わち Pamidronate は顎骨浸潤の予防，治療に有効. られた画像から，Back Projection 法により２次元. である可能性が示唆された。また，破骨細胞関連サ. スライスデータを作成した後，三次元立体構築ソフ. イトカインにおける mRNA の発現については，IL. ト（VoxBlast, VayTek inc）を用いて立体構築をおこ. ‐６，TNF‐α，PTHrP，RANK，RANKL の発現率. なった。また TRAP 染色により暗紫色に染色され. がコントロール群で５６．３％，６８．８％，９３．８％，７５．０. た破骨細胞を Digital 処理し，Image‐Pro Plus （Me-. ％，６８．８％と高値であるのに対して，BP 投与群で. 社）を用いて顎骨表面上の４００µm. は０％，１２．５％，１８．８％，３７．５％，５６．３％と低値を. ×１００µm の範囲を任意に選択し，破骨細胞の占有. 示した（表４）。すなわち RANK‐RANKL 発現経路. 面積率を算出した。結果として，マイクロ CT によ. から破骨細胞の活性化，骨吸収にいたるプロセスの. dia Cybernetics. 図８. マイクロ CT による三次元画像 ― 18 ―.

(8) 歯科学報. Vol．１０５，No．１（２００５）. １９. ，図９. 単位面積あたりの破骨細胞占有面積率. 顎骨浸潤における破骨細胞関連サイトカインの発現. ることが明らかとなった１８）。そして RANKL の受容. IL‐６ TNF‐α PTHrP RANK RANKL OPG. 体である RANK と構造が類似していることからお. Control 群. ５６．３. ６８．８. ９３．８. ７５．０. ６８．８. ５０．０. とり受容体（decoy. BP 投与群. ０. １２．５. １８．８. ３７．５. ５６．３. ５６．３. の活性を強力に抑制する OPG も同定された１９）。. 表４. receptor）として働き， RANKL. 我々が種々の破骨細胞関連サイトカインについて免中で，これに関わるサイトカインの多くを阻害する. 疫組織化学的に解析した結果，PTHrP，IL‐６，. BP の新たな薬理作用が示唆された。また破骨細胞. TNF‐α が少なくともヒト歯肉癌の顎骨浸潤に関与. に対して抑制的に働く OPG１５）はコントロール群. している可能性を示唆した。またこれらのサイトカ. ５０．０％に対して，BP 投与群では５６．３％と影響を受. インを産生する細胞株 SCC Ⅶでも同様の顎骨浸潤. けないことが示唆された。以上より BP は破骨細胞. をきたし，さらに多数の破骨細胞を認めたことか. に関連する種々の液性因子に作用する特異的かつ有. ら，おそらく口腔扁平上皮癌自身がサイトカインを. 用な薬剤であると考えられた。. 産生することにより顎骨浸潤するのではないかと思. ま. と. われた。また本研究から，口腔扁平上皮癌の顎骨浸. め. 潤は他のサイトカインの発現が RANK‐RANKL 経. 顎骨浸潤のメカニズムの解明は，近年急速に発. 路を経て破骨細胞に働きかけるのではないかと考え. 展した骨代謝の基礎研究によるところが大きい。. られた。そして OPG も口腔癌の顎骨浸潤の抑制に. 特に癌に伴う高カルシウム血症の原因因子である. 関わっている可能性が示唆された。以上のことか. PTHrP の単離，同定が骨転移，骨浸潤研究を発展. ら，歯肉癌の顎骨浸潤の診断，治療法を確立するた. １６）. させる大きな契機となった。また岡本らは，口腔. めに，サイトカインネットワークを解明することが. 癌の顎骨浸潤に IL‐６が関与していることを in vitro. 戦略上重要であることは間違いない。将来的には，. １７）. の研究で明らかにした。最近，破骨細胞の分化と. 術前に顎骨浸潤の程度を把握するため生検材料より. 機能は，骨芽細胞あるいは骨髄間質細胞の細胞膜上. サイトカイン発現の有無を検索することが，EBM. に発現する RANKL によって厳格に調節されてい. にもとづく治療計画となりうる可能性がある。また. ― 19 ―.

(9) ２０. 野村：顎骨浸潤能を獲得した口腔扁平上皮癌の特性. OPG 製剤や抗サイトカイン抗体などの，モノク. 謝. ローナルな作用機序を有する薬剤の開発につながる可能性もある２０）。 Semba らは以前より口腔扁平上皮癌の顎骨浸潤に破骨細胞性骨吸収が関与している事を報告している２１）。顎骨浸潤の治療に，破骨細胞の働きを抑えることが有効な治療手段と成り得る可能性がある。このことから，現在臨床で用いられている BP は理に. 辞. 稿を終えるにあたり，本研究を学長奨励研究にご推挙くださいました石川達也前学長に深謝いたします。また SCC Ⅶ 細胞株を供与くださった徳島大学第２口腔外科学講座岡本正人先生に謝意を表します。また本研究に貴重なご意見，ご協力を賜った徳島大学第２口腔外科学講座原田耕志先生，HRC TEP グループの諸先生方，本学口腔外科学第一講座野間弘康名誉教授，柴原孝彦教授ならびに教室員各兄に心から感謝の意を表します。. かなったユニークな薬剤であるといえる。BP の作用機序は実に多彩で，!前駆破骨細胞への作用，" メバロチン酸の代謝抑制，#骨芽細胞への作用，$ 破骨細胞のアポトーシス促進，などを介することによって破骨細胞の発現を抑制している２２）。本研究で用いた Pamidronate は乳癌の骨転移治療薬として，BP 療法が確立している２３）。その治療効果は! 骨転移の予防，"骨破壊の進行の抑制，#骨転移部の腫瘍量の減少，$内臓転移発生率の減少，%末期癌患者の疼痛，&病的骨折の改善，'末期癌患者の生存期間の延長，(高 Ca 血症の改善２４），などである。現時点で口腔癌の臨床応用に関する報告はないが，基礎的研究は幾つか報告されている２５∼２７）。これらの研究はいずれも動物モデルを用いているが，口腔扁平上皮癌細胞株を用いた顎骨浸潤モデルは当教室で確立したものだけである。すなわち，SCCⅦを用いた顎骨浸潤モデルが臨床的特長を最もよく反映しており，今後のメカニズムや治療法の解明に有効であると考えられる。将来は副作用などあらゆる観点から考慮して，適切な BP 療法における歯肉癌治療のプロトコール作成が必要であろう。現在我々は，Pamidronate に比べさらに強力な骨浸潤抑制効果が期待される，第３世代 BP である Minodronate （YM５２９，山之内製薬）を用いた解析を進めている。我々歯科医学の分野で，顎骨に関する研究が大きな柱となっていることは間違いない。口腔癌領域における，顎骨浸潤のより詳細なメカニズムを解明することが，歯科医学の発展に大きな恩恵となり得ることを強調して本稿の結びとしたい。本稿は平成１４年度東京歯科大学学長奨励研究報告として，第２７６回東京歯科大学学会総会（２００３年１０月１８日，千葉）において発表した。また本稿の一部は平成１５年度文部省科学研究補助金（若手 B）によりおこなった。. 参. 考. 文. 献. １）Fujibayashi, T., Kanda, S., Ohashi, Y. : New proposal on T classification of gingival carcinomas of the mandible. In : Ravirdranathan N, ed. : Proceedings of the 3 rd Asian Congress on Oral and Maxillofacial Surgery, Bologna : Monduzzi Editore：４５１∼４５５，１９９６．２）Sasaki, T., Imai, Y., Fujibayashi, T. : New proposal for T classification of gingival carcinomas arising in the maxilla. Int J. Oral Maxillofac. Surg,３３：３４９∼３５２，２００４．３）柴原孝彦，野間弘康，新井一男，野村武史，横尾恵子，山本信治，橋本貞充，大鶴洋：下顎骨切除法別にみた下顎歯肉扁平上皮癌の顎骨浸潤に関する臨床・病理組織学的検討．日口腔外会誌，４８：１２９∼１３４，２００２．４）Yoneda T.: Cellular and molecular mechanisms of breast and prostate cancer metastasis. Eur. J. Cancer, ３４：２４０∼２４５，１９９８．５）Coleman RE. : Skeletal complications of malignancy. Cancer,８０：１５８８∼１５９４，１９９７．６）Aoki, J., Yamamoto, I., Hino, M., Shigeno, C., Kitamura, N., Sone, T., Shiomi, K., Konishi, J. : Osteoclast-mediated osteolysis in bone metastasis from renal cell carcinoma. Cancer,６２：９８∼１０４，１９８８．７）松本俊夫：新・骨代謝と骨粗鬆症，メディカルレビュー社，東京，２００１．８）伊東将広，江尻貞一：ビスフォスフォネートの作用メカニズムと骨転移動物モデルに対する治療効果．THE BONE，１７：１６１∼１７０，２００３．９）尾浦正二：ビスフォスフォネートによる骨転移治療． THE BONE，１７：１６１∼１７０，２００３．１０）柴原孝彦，野間弘康，野村武史，高木亮，横尾恵子，原田耕志，岡本正人，佐藤光信：歯肉癌によって引き起こされる下顎骨浸潤−特に破骨細胞誘導サイトカインの役割−．日口腔外会誌，４９：１７１∼１７８，２００３．１１）Gratas. C., Tohma. Y., Barnas. C., Taniere. P., Hainaut. P., Ohgaki. H. : Up-regulation of Fas (APO-1/CD 95) ligand and down-regulation of Fas expression in human esophageal cancer. Cancer Res,５８：２０５７∼２０６２，１９９８．１２）Nomura, T., Noma, H., Sato, M., Shibahara, T., Okamoto, M., Katakura, A., Harada, K., Takagi, R., Yamamoto, N., Numasawa, H. : Effects of bisphosphonate on mandible invasion model in mice. 5 th Asian Conference on Oral and Maxillofacial Surgery ：１１１∼ １１５，２００２．１３）O'malley, BW Jr., Cope, KA., Chen, S-H., Li, D., Schwartz, MR., Woo, SLC. : Combination gene therapy for oral cancer in a murine model. Cancer Res, ５６：１７３７ ∼１７４１，１９９６．. ― 20 ―.

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