( 東 女 医 大 誌 第
5
4
巻 第1
2
号
)
頁 1314~1
3
2
3
昭和5
9
年1
2
月〔特別掲載〕
成長ホルモン分泌に対する代謝性因子の検討
東京女子医科大学 第二内科学教室(主任:鎮目和夫教授〉 イマ キ今 城
俊 浩
( 受 付 昭 和5
9
年9
月2
7
日〉Metabolic E
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on Growth Hormone Releasing Factor (GHRF)
ーMediated Growth Hormone Secretion
Toshihiro IMAKI
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(FFA) on GHRF
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GHRF-induced GH s
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GHRF-mediated GH
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GHRF-induced GH
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GH
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.
緒 言 下垂体よりの成長ホルモン(GH)
分担、は，成長 ホルモン分泌促進因子(GHRF)
および成長ホル モン分泌抑制因子(ソマトスタチン〉により調節 されている1) 一方， ブドウ糖・脂肪・アミノ酸な どの中間代謝産物もGH
分泌を修飾しており，ま た 逆 にGH
は こ れ ら の 代 謝 に 影 響 を 与 え て い る2) 血糖や遊離脂肪酸(FFA)
の上昇は， ヒトに おし、てGH
分 泌 を 抑 制 す る こ と が 知 ら れ て い る3)4) 近年成長ホノレモン分泌促進因子(GHRF)
が， ヒト醇腫虜より初めて単離され削，続いてラッ ト・ブタの視床下部より単離された7)8) 合成ヒトGHRF
およびラット・ブタ視床下部GHRF
は動 物のi
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，i
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v
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で，GH
分泌を刺激し5) 8)， またヒトでもその活性が認められている9)-12) 更 に極く最近ヒト視床下部GHRF
が単離・精製さ れたが，その構造は騨腫蕩より単離されたGHRF
と全く同一で、あることが報告されている凶.今回， 遊離脂肪酸のGH
分泌に対する影響をみるため， ヒトおよびラットで遊離脂肪酸を経静脈的に投与 し，GHRF
~こ対する GH の反応を検討した.その 結果，血中遊離脂肪酸の上昇がGHRF
によるGH
分泌を， ヒトおよびラットで抑制する結果を得た ため，その機序を解明する目的で，①ラット下垂 体単層培養系を用いてFFA
の下垂体GH
分泌に-1314
ー対する作用を検討し，更に，②特異的抗ソマトス タチン抗血清を用いて
FFA
のGH
分泌抑制作用 に対するソマトスタチンの関与をi
nv
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v
o
で検討 した 一方，ラットではこれまで，GH
分泌は主として 約3
時間毎の超日性リズムより支配されており， 摂食や血糖などの影響はほとんど受けないと考え られている14) そこでラットにおいて，高血糖のGHRF
によるGH
分泌への影響の有無を検討し た 対象および方法 1.臨床試験 糖尿病などの代謝異常および家族歴のない非肥 満健常男性6
名(
2
1
歳から2
9
歳まで，平均年齢2
4
.
5
歳〉を対象とした.検査前夜より絶食にし，当日 朝8
時3
0
分に左右の肘静脈に翼状針を刺入し，一 方を採血用，一方を静脈内投与用に用いた.3
0
分 の床上安静の後3
人には2
c
c
のへパリンを加え たイントラピッドC
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d10%
，Vitram AB
精製大豆油1
0
0
g
，精製レシチン1
2
g
，グリセリン2
5
g
を含む)2
5
0
c
c
(以下L
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d
)
を2
時間3
0
分かけて 持続点滴静注しC1.67ml
/
min)
，点滴開始3
0
分後に 生理食塩水を溶解した100μg
のGHRF
を静注し た.別の3
人には生理食塩水2
5
0
c
c
を同様に持続 点滴静注し，GHRF
を投与し，対照群とした.1
週間後同6
名について，生理食塩水とL
i
p
i
d
をか え て 投 与 し 同 検 査 を 行 な っ た .GHRF
投与時をO
分とし， -3
0
，-15
，0
，1
5
，3
0
，4
5
，6
0
，9
0
，1
2
0
分にへパリンを添加した注射筒に5
c
c
づっ採血しGH'FFA
を測定した.GHRF
は 既に報告された如く15)，固相法で合成されたもの で，米国S
a
l
k
研究所のLing
博士より提供を受け た2
.
i
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o
実験 用いたラットは体重300-400g
のウィスター系 雄ラットで，温度調節・明暗調節 (8時-20
時照 明〉下で単独ケージに飼い，食餌(オリエンタル 酵母〉および水は自由に与えた. ベントパルビタール(50mg/kgi
.
p
.
)
麻酔下に， シラスコンチューブ(DawCorning
，s
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0.5mm I
.
D
.
，Imm
O
.
D
.
)
で作製した心房カニュー レを，同ラットの右外頚静脈から右心房内に挿入 した.手術後実験日まで4日間の回復期間を置い た.採血および薬物投与はすべてこの慢性右心房 カニューレを通して行なった.実験はすべて5
0
mg/kg
体重量のベントパルビタール麻酔下で行 なった1
)
FFA-GHRF
実験 ペントパルピタール麻酔1
5
分後に，0
.
2
c
c
のへ パリンを含んだ2
c
c
のI
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d
(以下Lip
i
d
)
を2
分聞かけて静注し，静注1
分後十こ5
0
n
g
/
1
0
0
g
体 重量のGHRF
を静脈内投与した.GHRF
投与時 をO
分とし，-4
，0
，4
，6
，1
1
，1
6
，3
1
分に0
.
6
5
m
l
づっ採血した.2
.
2
c
c
の生理食塩水を同様に静注 しGHRF
を投与したラットを対照群とした.循 環血液量を維持するため，0
.
6
5
m
l
の生理食塩水浮 遊赤血球を採血後直ちに投与した.2
)
抗ソマトスタチン抗血清-FFA-GHRF
実験 ペントパルビタール麻酔5
分後に，1
c
c
の抗ソ マトスタチン抗血清(以下ASS)
を投与し1
時 間 経 過 後FFA-GHRF
実 験 と 同 様 の 実 験 を 行 なった.対照群として正常山羊血清(NGS)
を1
c
c
投与し，同実験を行なった.すなわち，NGS-
生理 食塩水，NGS
田FFA
，ASS-
生理食塩水，ASS-FFA
の4群について実験を行なった.抗ソマトスタチ ン抗血清はヒト α1グロプリンと結合した合成ソ ソマトスタチンを山羊に投与して得られたもので ある16)
3
)
ブドウ糖-GHRF
実験 ペントパルピタール麻酔1
5
分後に，20%
ブドウ 糖1
c
c
を1
分聞かけて静注し，静注終了5
分後に それぞれ2
0
，1
0
0
，2
0
0
n
g
/
1
0
0
g
体重量のGHRF
を 静注した.GHRF
静注時を0
分とし，-7
，0
，4
，6
，1
1
，1
6
，3
1
分にそれぞれ0
.
2
5
m
l
づっ採血した.1
c
c
の生涯食塩水を同様に静注しGHRF
を投与 したラットを対照群とした. m VIVO実験ではすべて検体はへパリンを入れ たチューブに入れ，2
，000rpm
で5
分間遠心し，上 清は検体測定まで2
0
0 Cで凍結保存した.用いたL
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p
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お よ びGHRF
は臨床試験と同じものであ る.3
.
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o
実験8
週齢のウィスター系雄ラットより断頭で得ら れた下垂体を用いて，既に報告されている方法 で17) 単層培養を行なった.すなわち，下重体前葉 を3-4
個に細切し，0.8% c
o
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g
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CWorth.
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)
，0.002%DNAase CSigma)
を含んだ酵素 溶液中で5
分毎にパスツールピペットでパイペッ ティングしながら細胞を遊離した.これを25mM
のN.
2
.
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(Hepes)
，43mM
重曹を含んだHepes
Dulbecco m
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E
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medium (HDMEM)
(pH 7
.
5
5
)
で3
回洗浄した. この洗浄細胞を10%
牛 胎 児 血 清 を 含 むHDMEM
vこ2-3X1
0
5個 の 濃 二4t Lipid.H叩arinor Saline Infusios， 事~1
.
o
，
-
O O " ( ) ( ) <>~ ~l~こと+十--..十→--"
こ30 E ~ 2. 度にし，カルチャープレートCFa
1
conP
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)
内 で 、15%C0
2+85%
空 気 の 条 件 下 で4
日間培養し た.培養終了後，培養液を捨て0.2%
牛血清アルブ ミンを含むHDMEM
でプレート内の細胞を3
回 洗浄し，その後それぞれ1
0
-
9，1
O
-10Mの濃度のGHRF
， 更 に1
0
0
，2
0
0
，3
0
0
μ
l
のL
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p
i
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を入れ，0.2%
牛 血 清 ア ル ブ ミ ン を 含 ん だHDMEM
を各 小穴の総量が1ml
となるように加えた.3
時間の インキュベーション終了後，小穴内の培養液を集 めその培養液中のGH
の測定を行なった.4
.
測定方法 ヒトGH
は 栄 研 の ラ ジ オ イ ム ノ ア ッ セ イ キ ッ 川 仲44n
ー ねlineInfusion。
(
)
Lipid' Heparin Infusion ~1 I
占
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o σ-.， .O...---Q ^ _.0'''- '1向
。
~lg..~ ; 十 十 十 - - .:l~~----γふ→ 30 a a 守 a E E ' ' E E 4 E E a E E a 4 3 2 1 0 A d 、官凶罵}唱 u Z。
{ 一 盤 、 回 E重
2。
-F E 帥周一色。。
'p。
。
。
。
5 . 日 30 60 90 120。
一
。
o()..(
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E 30 印 90 120。
.
(
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.
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(
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一一.210
。。。。。。;￨
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吋 互 ← ← 十J →1
:
。
、
。
一
。
。
。
。
0.0 B 30 60 90 120 -30 30 60 90 120 Minut民after hGRH・44 Iniection 日 30 6U 90 120 図 6名の健常男性におけるGHRF投与による血奨GH上昇反応へのLipid投 与 の影響 hGRH: hGHRF 1316トにより測定した.測定内誤差は
6.6%
，測定間誤 差 は8.0%
であった.ラットGH
はNIAMDD
よ り提供を受けた標準ラットGH
， 標識用ラットGH
，第1抗 体 を 使 用 し2
抗体法ラジオイムノ アッセイで測定した.測定内誤差は6.9%
，測定問 誤差は12.9%
であった.血中ブドウ糖は，g
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CBeckman I
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USA)
によりg
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法で測定した.血 中FFA
は酵素法で測定した18)19) 統計処理には，S
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'
s
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t
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s
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を用い，危険率5%
以下を有意と判定した. 結 果 1.臨床試験 図1
は6
名 の 個 々 の 結 果 を 示 す . 全 例 で ，I
n
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r
a
l
i
p
i
d
投与によりFFA
は 全 経 過 で 生 理 食 塩 水 投 与 時 よ り 高 値 を 示 し た . ま たGHRF
に対す る血禁GH
の反応は，全例で，L
i
p
i
d
投与時の方が 対照群よりも低値であった.特に1.，3
.
では，GHRF
に 対 す る 血 奨GH
の 上 昇 反 応 はL
i
p
i
d
投 与により完全に抑制された.図2
は6
名の結果の 平 均 で ， 血 中FFA
はL
i
p
i
d
投 与 開 始1
5
分後です で に 有 意 の 上 昇 を 示 し ， そ の 後 も 上 昇 し 続 け た -一一一一.Saune ひ一一olipid-Heparin l Infusion of Saline or li別d-HeparinSolution E 3 2 1 4 ¥ 官 凶 E } 4 -L 来 30 ※ Pく日05 米 Pく0.005 .. Mean:t S.U! 20 ¥ 国 '" 10 ιs z E Z ω 嶋 一 ι 30 60 90 ー120 Minutes after hGRH・44Injecti加 図2 図lで得られた変化のまとめ.(GHRF
投 与 時 即 ち0
分 で のFFA
値 : 対 照 群0
.
4
6
士0.03mEq/L
，L
i
p
i
d
投与群1.6
0
士0
.
1
4
mEq/L
，p
<
0
_
0
0
5
，3
0
分 のFFA
値 対 照 群0
.
5
7
士O.24mEq/L
，L
i
p
i
d
投 与 群2
.
2
5
士0
.
1
7
mEq/L
，p
<
0
.
0
0
5
)
.
GHRF
に対するGH
の反応 は 両 群 と も3
0
分 で 頂 値 を 示 し た が ， 対 照 群 の2
8
.
9
士7
.
1
n
g
/
m
l
に 比 べL
i
p
i
d
投 与 群 で は8
.
4
士1
.
7
n
g
/
m
l
と有意に低値を示した(
p
<
0
.
0
5
)
.
2
.
i
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o
実験1
)
FFA
・GHRF
実験 図3
に示すように，L
i
p
i
d
投与群では血中FFA
は生理食塩水投与群に比べ有意に上昇した(0
分 で のFFA
値 : 対 照 群0
.
5
8
士o
.13mEq/L
，L
i
p
i
d
投与群6
.7
4
::l::0.21mEq/L
，p
く0
.
0
0
5
，4
分でのFFA
値 対 照 群0
_5
9
::l::O
.
21mEq/L
，L
i
p
i
d
投与群5
.
1
6
::l:: 1.22mEq/L
，p
<
0
.
0
5
)
.
両群ともGHRF
に 対するGH
の反応は4
分で頂値となったが，対照 群の1
，5
2
6
::l::264ng/ml
~こ比べ，L
i
p
i
d
投与群では3
7
8
士70ng/ml
と有意に低値を示した(p<O.Ol
， 図4).2
)
抗ソマトスタチン抗血清-FFA-GHRF
実験 図5
には，NGS-
生理食塩水，NGS-FFA
， ASS-生理食塩水，ASS-FFA
の4
群の結果を示す.NGS
で 前 処 理 し た 群 で はGHRF
に対するGH
Intuslon of 副，n，
川」ーー・) or Lipid-he凹rin Solution(0---.0)同
8 キ Pぐ005*
*
P <0.005 7j l L 7
戸 民 U R J ' h句 、
d 勺 ぷ ( 一 ¥ U 凶 E)4LL型ヒ ω 柑 一 丘 4 6 11 16 Time (mi円) 図3I
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i
d
あ る い は 生 理 食 塩 水 投 与 後 の 血 奨 FFAの変化. 縦棒は平均±標準誤差を示す. 31ng/ml
，p<0.05).
しかしASS
の前投与により，L
i
p
i
d
投 与 時 に 認 め ら れ たGHRF
に 対 す るGH
反 応 の 抑 制 は 解 除 さ れ た ( 血 奨GH
の 頂 値 :ASS
一生理食塩水投与群1
，6
0
6
:
:
t
210ng/ml
，ASS-L
i
p
i
d
投 与 群1
5
3
5
:
:
t
174ng/m
l).3
)
ブドウ糖-GHRF
実 験 図6
v
こ示すように生理食塩水投与群では血中ブ ドウ糖は実験中変化していないが，20%
ブドウ糖1
c
c
投与群では血中ブドウ糖は対照群に比べ4
，6
，1
1
，1
6
分 で 有 意 の 上 昇 を 示 し た (0
分の血中ブド ウ糖値:対照群1
3
8
:
:
t
5
.
5mg/dl
，ブドウ糖投与群2
7
2
:
:
t
25.0mg/d
l.p<0.05
，4
分 の 血 中 ブ ド ウ 糖 値 : 対 照 群1
3
6
:
:
t
O
.
89mg/
d
l . ブ ド ウ 糖 投 与 群3
4
1
士28.5mg/dl
，p<0.005).
GHRF
投 与 後 の 血 奨GH
値 は 図7- 9
v
こ示す 如く，すべての群で4-6
分で頂値となった.ま たGHRF
に 対 す るGH
分 泌 は20-200ng/100g
体重量のGHRF
の 間 で 用 量 反 応 性 を 示 し た . し かし，いずれのGHRF
の投与量でも，ブドウ糖投 与 群 と 対 照 群 と の 聞 でGHRFv
こ対する血奨GH
の 反 応 性 に は 有 意 差 が 認 め ら れ な か っ た ( 血 奨GH
の 頂 値 :GHRF
2
0
n
g
/
1
0
0
g
体重量投与時，対 照 群1
，1
5
4
:
:
t
163ng/ml
， ブ ド ウ 糖 投 与 群1
，5
5
0
:
:
t
2 ml oflipid-同parln口rsaline solution 。<> ・』一一一明. ホ*P<O.OI * P <0.05 -** fト『百本* 〆 ム 工 、 、 ¥ ¥、"'''' ''Q--.一二 水準 01司言明 日 '0---ー一一一一一一---._~* ・3 -1 0 4 6 11 16 31 minutes afterhGHRF injection 図4 ラットにおける GHRF投与による血楽GH上 昇反応へのLipid投与の影響 縦棒は平均±標準誤差を示す. Llpld-hepann 。 ，5叫門eSolutlon岡
-一一.NGS-Saline 0---0 NG5-Llpld-
一
一
・
A5S-Sollne Q---{] ASS-llpld 50 ng/l00gBW r﹁ D 門 UH 同 円 UU 同 200 1000一
E ¥ m c ) 工 φ L 争...Sahne 0---0臼uc田e * P<0.05 **Pく0.005 100J
L
j
百件 ¥ 、L
L
/ι---- ¥ J
問 問 l d ﹃ 勾町仙﹄戸 三T1 3∞
¥
cnε
<lJ5200
コ ピ コ 加∞
吋 叩 円 HU NGS: normal 2000 E ¥ t1> E 主 '21000 4 6 11 Time(min.) 図5 LipidによるGHRF作用修飾への抗ソマトス タチン抗血清の影響. 縦棒は平均±標準誤差を示す. goat serumASS : antiserum to somatostatin
図6 20%フドウ糖あるいは生理食塩水投与後の血糖 値の変化. 縦摩は平均±標準誤差を示す.
3
1
o
46 1
1
1
6
Time(min)0
'
ヲ
の反応は1)の結果と同様，L
i
p
i
d
投与により抑制 された(血奨GH
の 頂 値 :NGS-
生理食塩水投与 群1
，5
8
0
:
:
t
227ng/ml NGS-
L
i
p
i
d
投与群8
0
7
:
:
t
2
4
6
1
3
1
8
-
一
一
・
Sallne 。-QGluc国e W 門 口 町 〆/ 却 町 川 一 明 n H H A V山
町
一
回
︿ d 問 訓 円 u 門 υ 円 u q L 1000 ( 言 ¥ m C ) 工 の ﹂-
一
一
・
Saline 。 ー やGluc国 @ 31 図9 20ng/100g体 重 量 のGHRFに よ る 血 奨G H上 昇反応への高血糖の影響. 縦棒は平均士標準誤差を示す. 11 16 Time(min.)o
46 O円 200nl /印刷J 20 1000 ( 一 ﹁ ヒ ¥ m c ) 工 の ﹂ 6*
P<O.005(Llh
r D ' h 司 ペ J ( 工 凶 一 方 ¥m ユ ) 百 @ 日 ω L U ω 山 主 の 1 1 16 Time(min.) 図7 200ng/100g体 重 量 のGHRFに よ る 血 奨G H 上昇反応への高血糖の影響. 縦棒は平均±標準誤差を示す. 31 争-41Sα'ne b・0臼Uc田e 2000 匂。
H問 r C耳目匹e 岡ε
¥ ¥F
6
1000 CONTROLσ9M GHRFσ8M GHRF 図10 培養ラット下垂体前葉細胞におけるGHRFに よるG H分泌作用へのLipidの影響. 黒棒はIntralipid無添加群. ControlはGHRF無添加. 縦棒は平均士標準誤差を示す.。
31 図8 100ng/100g体 重 量 のGHRFに よ る 血 奨G H 上昇反応への高血糖の影響. 縦棒は平均±標準誤差を示す. O -7 照 群2，366士499ng/ml， ブ ド ウ 糖 投 与 群2，480士 536ng/mD. 3. in vitro実験 図10に示すように， Lipid無添加群では， GHの 223ng/ml， GHRF 100ng/100g体重量投与時，対 照 群1，659:
t
212ng/ml， ブ ド ウ 糖 投 与 群1，626:
t
169ng/ml， GHRF 200ng/100g体重量投与時，対分泌は
GHRF
の添加により容量反応性に増加し た.左群に示すように，L
i
p
i
d
はGH
の基礎分泌に は影響を与えなかった.中央に示すように， 10~9M のGHRF
添加によるGH
分泌は，3
0
0
μ
l
のL
i
p
i
d
添加〔血中濃度2.
4
9mEq/L
に相当する濃度〉によ り有意に抑制された(GH:
対照群4
.
1
9
:
t
0.07μg/
d
i
s
h
，L
i
p
i
d
3
0
0
μ
1
添加群3
.
4
2
:
t
0
.
0
8
μ
g
/
d
i
s
h
，p<
o
.
0
0
5
)
.
10~8M の GHRF 添加による GH 分担、効 果は，L
i
p
i
d
を添加することにより抑制される傾 向にあったが有意差は認められなかった. 考 察 これまで血中遊離脂肪酸の上昇は， ヒトにおい て種々の刺激，例えばインスリン低血糖20)-叫，L
-DOPA
2
3)，アルギニン2
2
)
2
4
)
運動2
5
)
によりGH
分泌 を抑制することが報告されている.本研究におい て ， ヒ 卜 お よ び ラ ッ ト で 血 中FFA
の 上 昇 がGHRF
によるGH
分泌を抑制することが明らか になった.更に抗ソマトスタチン抗血清で前処置 することによりこの抑制が消失したことから，血 中FFA
の上昇は少なくとも一部分はソマトスタ チンを介してGHRF
によるGH
の分泌を抑制す ることが考えられた.またラットの下垂体前葉細 胞の単層培養系の実験結果から， FFA は~~\，、なが ら下垂体に直接作用し，GHRF
に対するGH
の反 応を抑制することも示唆された. 一方ヒトでは，低血糖はGH
分泌を刺激し，高 血 糖 はGH
分泌を抑制することが門口られてい る.更に，高血糖はGHRF
に対する血奨GH
の上 昇反応を抑制することが報告されている制.しか し，動物では血糖の GH~こ対する作用は一定して いない.ラットでは，高血糖，低血糖のいす';hもGH
の脈動的分泌に抑制的に作用することや，摂 食とGH
の脈動的分泌とは関係ないことから，血 糖値の変動は単にGH
に対しストレスとして作 用しているのみであると考えられてきた.本研究 で， GHRF~こ対する GH の分泌に高血糖が全く影 響を与えなかったことは， この考えを支持する.FFA
がソマトスタチンの分泌を刺激し，その結 果GH
分泌を抑制する機序には3
つの可能性が 考 え ら れ る . ま ず 第 一 に 視 床 下 部 の 腹 内 側 核(
V
e
n
t
r
o
m
e
d
i
a
l
N
u
c
l
e
u
s
，VMH)
と外側野(
L
a
t
e
r
1320a
l
Hypothalamic Area
，LHA)
に 存 在 す るg
l
u
c
o
s
e
n
s
i
t
i
v
e
neuron
は，多連徴小電極法を用い た細胞内電位測定により，FFA
に反応することが 報 告 さ れ て い る2
7
)
2
8
)
従ってFFA
がVMH
やLH
A ， あ る い は そ れ 以 外 の 場 所 に 存 在 す るg
l
u
c
o
s
e
n
s
i
t
i
v
e
neuron
を賦活し，それがソマトス タチンの存在する前視束前野を刺激し， ソマトス タチンを遊離させることが考えられる.実際に，VMH
と前祝束前野との聞には解剖学的に線維連 絡が確認されている2
9
)
次に視床下部のソマトス タチンニューロンが直接FFA
に反応する可能性 もあるが，これは全くの推測であり， これを裏づ ける観察は報告されていない.第三に，騨臓，腸 管に存在するソマトスタチンが血行性に直接下垂 体のGH
分泌細胞に働き，GH
分泌を抑制する可 能性が考えられる.Tannenbaum
らは，ストレプ トゾトシン糖尿病ラットではGH
の 脈 動 的 分 泌 が消失し抗ソマトスタチン抗血清の投与によりこ の分泌が回復することを報告している叫.更に，ス トレプトゾトシン糖尿病ラット33)やアロキサン糖 尿病犬34)では，末梢血中および門脈血中ソマトス タチン様免疫活性が上昇していると報告されてい る.以上より，ストレプトゾトシン糖尿病ラット で見られたGH
分泌抑制は，日平，腸管由来のソマ トスタチンによると推測されている.また血中FFA
の上昇は，醇・腸管からのソマトスタチン分 泌を刺激し，その結果，下大静脈血中のソマトス タチン濃度は，FFA
の上昇により前値の2
倍以上 に上昇すると報告されている35) これらのことか ら，血中FFA
の上昇が牌・腸管のソマトスタチン 分泌を刺激し，その結果，本研究で認められたよ うに，GHRF
に対するGH
の分泌を抑制した可能 性も考えられる.しかしながら，牌・腸管から分 泌されたソマトスタチンの半減期は短く，大部分 肝で不活化されるため，下大静脈血中のソマトス タチン濃度は門脈血中の20%
以下であり3ベ 消 化 管・勝臓由来のソマトスタチンは消化管の運動， 消化吸収などにのみ働き制2
7
1
血行性に下垂体に 作用している可能性は少ないと考えられる. 一方，ラットの下垂体前葉細胞の単層培養系で，L
i
p
i
d
はGH
の基礎分泌には影響を与えなかったが300μlのLipidの 添 加 に よ り
GHRFv
こ対する G H分泌が抑制されたことから， FFA~土下垂体に 直接作用し GHRFによる G H分泌を抑制するこ とが考えられる.しかしながら， 300μlの Lipidの 添 加 で も G H分 泌 抑 制 作 用 は た か だ か80%にと どまることや， in vivoの実験で抗ソマトスタチン 抗血清の前処理により GHRFに対する G Hの 分 泌は完全に回復したことなどから， FFAの下垂体 に対する作用は重要ではないと考えられる.更に 血 中 FFAの低下により G H分泌が増加するとい う報告もあり37) これは FFAの 下 垂 体 作 用 で は 説明できないと思われる. ところで，このような FFAと G H分泌との関 係 が 生 理 的 に ど の よ う な 意 義 を も っ て い る か は はっきりとはわかっていない.長期の絶食後には 血 中 FFAが 上 昇 す る こ と が 知 ら れ て い る38) ま た ラ ッ ト で は72時 間 の 絶 食 に よ り G Hの 脈 動 的 分泌が完全に消失し，抗ソマトスタチン抗血清の 投与により G H分 泌 が 回 復 す る こ と が 報 告 さ れ ている叫.従って，ラットでは飢餓状態で， FFA の上昇により本研究で認められた如くソマトスタ チンの分泌が克進し，その結果 G H分泌を抑制す ることも推測されるが，他の因子の関与の可能性 も考麗しなければならない. 結 語 G H分 泌 に 対 す る 血 糖 お よ び FFAの影響を検 討した. 1)ヒトおよびラットにおいて，血中 FFAの上 昇 はGHRFv
こ対する血奨 G Hの上昇反応を抑制 した. の こ の FFAの 上 昇 に よ る G H分 泌 抑 制 作 用 は， ラγ トの invivoの実験で抗ソマトスタチン 抗血清の前投与により消失したことから，少なく とも一部はソマトスタチンを介して生じるものと 考えられる. 3)ラ ッ ト 下 垂 体 前 葉 細 胞 の 単 膚 培 養 系 で ， Lipidの投与により GHRFに対する G Hの 反 応 は 抑 制 さ れ た が ， こ の 程 度 は わ ず か で あ っ た . FFAは 弱 い な が ら ， 下 垂 体 に 直 接 作 用 し て GHRFに対する G H分泌を抑制するが，その抑制 作用の大部分はソマトスタチンを介して生じるも のと思われる. 4)ラットでは，高血糖は GHRFによる G H分 泌に影響を与えなかった. 稿を終わるに当たり，御指導と御校閲を賜わった鎮 目和夫教授，そして御助言を賜った出村博教授ならび に対馬敏夫教授に深謝いたします.また， hGHを測定 していただいたラジオプッセイ科地曳和子嬢，抗ソマ トスタチン抗血清を提供していただいた E本医科大 学若林一二助教授，合成 hGHRFを提供していただい た米国 Salk研究所 N.Ling博士，そして直接御指導 下さった芝崎保博土に感謝いたします. 本論文の研究費の一部は，厚生省特定疾患・間脳下 垂体機能障害調査研究班および神経性食思不振症調 査研究班の研究費によった. なお，本論文の一部は昭和59年5月20日第57回日本 内分泌学会総会において報告した. 文 献 1)Martin，J
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