796 Japanese Journal of Transfusion Medicine, Vol. 37. No. 6 Table 1 Comparison of additive solution composition, g/dl *: OPTISOL **: ADSOL ***: Nutri

Saline-Adenine-Glucose-Mannitol保

存 液 ・OPTISOL(R)に

よ る

42日, 49日 間 赤 血 球 保 存 に お け る赤 血 球 の 機 能, 形 態 学 的 変 化 お よ び

赤血球寿命 と保存液 の有用性 について

EFFECTS OF OPTISOL® PRESERVATION SOLUTION ON 42 AND 49

DAYS OF STORAGE OF RED CELLS

Hisato Nakajima, Yasutaka Hoshi, Osamu Asai, Naoko Takeuchi, Mayumi Kamiya,

Atsuko Kato, Tomoko Hasegawa, Emi Yamazaki and Hajime Nakayama*

Division of Transfusion Medicine, The First Department of Internal Medicine,

The Jikei University school

of Medicine

A new red cell preservation solution is described in which the red cells may be stored for 42 and 49

days. An in vivo and vitro study of 42 and 49 days stored red cells with saline, adenine, glucose,

mannitol (SAGM) preservation solution (OPTISOL, Terumo Corporation) was conducted using 20

healthy volunteers to document in vivo efficacy and analyze the validity of the 51Cr technique.

Standard in vitro parameters of OPTISOL red cell concentrates were well preserved with low levels of

hemolysis and high levels of red cell ATP which is compatible with their survival after 42 and 49 days

storage. Osmotic pressure at hemolysis ending point of 42 and 49 days stored red cells did not change,

while osmotic pressure at hemolysis starting point increased on 49 days. The red cell viscosity

increased and scanning electron-microscopic studies showed that the majority of them became

echinocyte and spherocyte on 49 days. In vivo autologous post-transfusion recovery was measured by

using a 51Cr-labeled

red cells. After 42 days of storage, post-transfusion 24-hour recovery averaged 82.3

f8.4% and 48-hour recovery was 79.1+9.1%, and after 49 days, 24-hour recovery was 75.9+3.6%, but

48-hour recovery, which averaged 69.9+5.20, was significantly lower.

The present study reports in vivo and in vitro evaluation of a new red cell storage medium which

allows high levels of post-transfusion recovery and permits without significant hemolysis. The results

suggested that 42 days if a more suitable shelf life than 49 days.

緒 言 近 年, 血 液 製 剤 の 需 要 の 増 加 に よ り, 現 在 我 が 国 で 行 わ れ て い る, acid-citrate. dextrose液 (ACD)やcitrate-phosphate-dextrose液(CPD) を 使 用 し た, 最 高21日 保 存 シ ス テ ム で は 期 限 切 れ と な っ て 有 効 利 用 が で き な い 例 も 少 な く な く, 新 し い 長 期 保 存 液 の 開 発 が 望 ま れ て い た. と こ ろ が 欧 米 諸 国 で は, 濃 厚 赤 血 球 専 用 の 保 存 液 を 用 い て 最 高42日 間 の 保 存 を 現 在 行 っ て い る. 赤 血 球 の 長 期 保 存 は, 1978年 にH6gmanら1)2), 1980年 に Herveら3)に よ り, saline-adenine-glucose液 (SAG)で35日 間 の 長 期 保 存 が 可 能 で あ る 事 が 報 告 さ れ, そ の 後1981年 に, Hogmanら4)に よ り SAGに 赤 血 球 膜 安 定 の 作 用 の あ るmannitolを

796 Japanese Journal of Transfusion Medicine, Vol. 37. No. 6 加 え た 保 存 液(SAGM)に よ り溶 血 を さ らに 減 少 させ る事 が可 能 で あ る と報 告 され た. さ らに1984 年 に は, 長 期 保 存 液 と して, CPDにadenineを 加 え た35日 保 存 可 能 なCPDA-1とCPDA-2が Moroffら5)に よ り報 告 され た. そ の後 米 国 に お い て, 42日 の 長 期 保 存 が 可 能 な2種 類 の 赤 血 球 保 存 液, AS-1(ADSOL(R), Fenwal Lab.)と, AS-3(Nutricel(R), Cutter Biological)6)7)が認 可 され た. 欧 州 に お い て は, Hogman処 方 の, Europian-SAGM8)が35日 保 存 用 と して 使 用 さ れ て い る が, 1988年 に は, Europian-SAGMの 成 分 は 変 えず, adenineの 量 の み を 変 更 し, 保 存 期 間 を42日 に延 長 した, America酪AGM(OPTISOL(R), Terumo Corporation)9)が 開 発 され, 米 国 で 使 用 が 認 可 さ れ た. 今 回 我 々 は, こ のOPTISOL(R)(OP)を 用 い て 健 常 男 子 成 人 の 濃 厚 赤 血 球 液 を35日, 42日, 49日 保 存 し, 保 存 中 の赤 血 球 の 種 々 の 変 化 に つ い て検 討 を 加 え, この 長 期 保 存 液 の 有 用 性 と, 臨 床 上 の 応 用 に つ い て 考 察 を加 え た の で 報 告 す る. 方 法 今 回 わ れ わ れ が 使 用 し たOPの 組 成 をTable 1 に 示 す. 成 分 はdextrose hydrous(D-glucose)

0.900g/d1, sodium chloride 0.877g/d1, mannitol

O.525g/d1とadenine 0.030g/dlで あ り, Europian-SAGMに 比 べ てadenine 濃 度 が 約2 倍8)で あ る. ま たAS-1に 比 べ て, glucoseは 約 半 分, mannitonが 約2/3の 量6)で あ る. MAP10)と 比 べ る と, mannitolはMAPの 約1/3の 量 で, adenineは 約2.3倍 量14)で あ る. 健 常 成 人 男 性 ボ ラ ン テ ィ ア20人 か ら400m1の 通 常 採 血 を 行 い, そ れ を 濃 厚 赤 血 球 液 と し, OPを も ち い て49日 ま で の 長 期 保 存 を 行 っ た. 採 血 に は, 親bagに3つ の 子bagが 付 い た 構 造 のbag8)のCPD/SAGM system(親bagに は CPDが63m1と, 第3bagに はOPカ190m1入 っ て い る.)を 用 い た. 親bagに 血 液400m1を 採 取 し, す ぐ に3,000回 転 で6分 間(半 径22cm)遠 心 し,

乏 血 小 板 血 漿 を 第1bagに, buffy coat層 を 第2

bagに 移 し, そ れ ぞ れ シ ー ル し て 切 り離 し た. こ の

時 点 で はCPDは 親bagか ら第2, 3bagに 移 り,

親bagは, hematocrit(Ht)が81.4±2.5%の 赤

血 球 液 と な っ た. OPを 第3bagか ら 親bagに 移

し て 緩 や か に よ く混 合 す る と, Htは56.7±1.2% と な っ た. シ ー ル し て 第3bagを 切 り 離 し, 親 bagを4℃ で35日 間, 42日 間 お よ び49日 間 保 存 し た. このOP使 用(濃厚 赤 血 球 の機 能 検 査 と して, 赤 血 球 中adenosine triphosphate(ATP)量, 2, 3-diphospho-glyceric acid(2, 3-DPG)濃 度 及 び 1actate値 を測 定 し, ま た 濃 厚 赤 血 球 液 のpH値 及 び上 清 中 のglucose濃 度 を 測 定 した. 噸さ ら に 上 清 中hemoglobin量 と溶 血 率, 電 子 顕 微 鏡 に よ る形 態 の観 察, 赤 血 球 膜 抵 抗, 血 液 流 動 性 試 験 及 び赤 血 球 寿 命 を 検 討 した. 採 血 分 離 直 後, 35日 後, 42日 後 及 び49日 後 にbag よ り濃 厚 赤 血 球 液 を1m1ず つ 採 取 し, た だ ち に 除 蛋 白 し, 遠 心 分 離 し た 上 清 を 用 い て, ATP量

(ATP測 定kit, BMY), 2, 3-DPG濃 度(2, 3-DPG test, BMY)お よ びlactate値 を測 定 した. 濃 厚 赤

Table 1 Comparison of additive solution composition, g/dl

血 球 液 上 清 を 用 い てglucoseを 測 定 し, ま たpH は 血 液gas測 定 器 で 測 定 し た. 保 存 赤 血 球 液 上 清 のhemoglobin(Hb)濃 度 は, 採 血 分 離 直 後, 14 日後, 28日 後, 42日 後 お よ び49日 後 にLCV法11)で 測 定 し, 溶 血 率 〔%Hemolysis=((100-Hct)× (plasma Hb))÷Hb〕 を 検 討 し た. ま た, 採 血 分 離 直 後, 24時 間 後, 48時 間 後, 7日 後, 14日 後, 35日 後, 42日 後 及 び49日 後 の 赤 血 球 膜 抵 抗 を, coil planet centrifuge(CPC)法12)で 測 定 し た. 血 液 流 動 性 の 測 定 は 回 転 粘 度 計(Wells-Brook丘eld)を 用 い た 横 瀬 ら の 方 法13)で お こ な っ た. 赤 血 球 形 態 の 変 化 を 評 価 す る た め に, 35日 後, 42日 後, お よ び49日 後 に 赤 血 球 を1%の glutaraldehyde-cacodylic acidで 固 定 し, 走 査 型 電 子 顕 微 鏡 に て 観 察 し た. 赤 血 球 は そ の 形 態 か ら,

diskocyteを4点, echinocyte Iを2点,

echinocyte IIを1点, spherocyteを0点 と 分 類

し, 300個 観 察 し, 赤 血 球100個 あ た り の 得 点 と し て400点 満 点 で 表 わ し た. 赤 血 球 寿 命 は, 51Cr標 識 法 で測 定 した. 35日 後, 42日 後 お よ び49日 後 に 保 存 赤 血 球 液20m1を, 100 μCiの51Crで 標 識 し, そ の10m1を 輸 注 した. 投 与 後15分 後 に 採 血 し この 放 射 活 性 を 前 値 と し, 投 与 24時 間 後 お よ び48時 間 後 に 再 び採 血 し, 放 射 活 性 を 測 定 し, 赤 皿 球 の 生存 率14)を求 め た. 結 果 400m1採 血 後 濃 厚 赤 血 球 液 と し, OPと 混 和 し, そ の 直 後, 保 存35日 後, 42日 後 お よ び49日 後 に Table 2に 示 す よ うな生 化 学 的 指 標 を 測 定 した. (濃厚 赤 血 球 液 のHtは, Table 2に 示 す よ う に, 直 後 で56.7±1.2%で あ っ た が, 35日 で は60.4± 2.5%, 42日 で は59.5±2.1%, 49日 で は60.8± 1.2%で あ り, 直 後 に 比 し長 期 保 存 で 軽 度 で あ る が 上 昇 し た. し か し35日 以 後 は 有 意 な 変 化 は 認 め な か っ た. 赤 血 球 中 のATP量 は 直 後 が30.6±7.9mg/d1 で あ り, 保 存 期 間 中, 直 後 の 値 に 比 べ て 有 意 に (p<0.005)減 少 し, 35日 で56.2±7.9%, 42日 で 46.1±10.2%さ ら に49日 で34.3±11.1%の11.5± 3.7mg/d1ま で 有 意 に(p<0.005)低 下 し た. 赤 血 球 中 の2, 3-DPG濃 度 は, 直 後 は2.58±0.40 μm61e/d1で あ っ た が, 35日 で は0.02±0.02 μmole/d1と 著 明 に(p<0.005)減 少 し, 以 後42日 と49日 で は35日 と ほ ぼ 同 じ 値 で あ っ た. 濃 厚 赤 血 球 液 のpHは, 直 後 は7.09±0.03で あ り, 35日 で 有 意 に(p<0.005)変 化 し て6.39±0.04 とacidosisに な っ た が, 42日 と49日 で はacidosis の 進 行 は な く35日 の 値 と ほ ぼ 同 じpH値 で あ っ た. 濃 厚 赤 血 球 液 を3,000回 転10分 間 遠 心 分 離 し, そ の上 清 でglucoseを 測 定 した. 直 後 のglucoseは 548±35mg/d1で あ った が, 保 存 期 間 中 は有 意 に (p<0.005)減 少 し, 35日 で は直 後 の 約40%に, 42 日で は 約32%に, さ らに49日 で は 約33%の167±32 mg/d1ま で に低 下 した. 赤 血 球 中 のlactateは, 直 後 は, 12±3mg/d1で あ った が, 35日 以 降 そ の値 は 約20倍 以 上 に有 意 に (p<0.005)増 加 を続 け, 35日 で は287±23mg/d1

Table 2 In vitro characteristics of RBCs stored for 35 days, 42 days and

49 days in OPTISOL, mean+SD

a: p<0.005 when compared to other days. c: p<0.025 when compared to 49 days.

b: p<0.05 when compared to 35 days, d: p<0.05 when compared to 42 days,

798 Japanese Journal of Transfusion Medicine, Vol. 37. No. 6 に, 42日 で324±25mg/d1に, 49日 で345±22mg/ d1ま で 上 昇 し た. 上 清 のHb濃 度 は, Table 3に 示 す よ う に, 直 後 は9.9±7.7mg/d1で あ っ た が, そ の 後 有 意 に(p< 0.005)上 昇 し, 14日 で は35.7±9.1mg/d1, 28日 で は88.0±24.1mg/d1で あ っ た が, 42日 で は 231.0±33.3mg/d1, 49日 で は267.8±75.3mg/d1 と直 後 の 値 よ り も 有 意 に(p<0.005)増 加 し た が, 42日 と49日 の 間 に は 有 意 差 を 認 め な か っ た. 溶 血 率 も 同 様 に 上 昇 し, 直 後 は0.02±0.01%で あ っ た が, 14日 で0.07±0.02%, 28日 で0.17±0.04%, 42日 で0.37±0.06%と 有 意 に(p<0.005)上 昇 し た が, 49日 で は0.47±0.17%と な り, 42日 と49日 で は 有 意 差 を 認 め な く な っ た. CPC法 で 測 定 し た 赤 血 球 膜 抵 抗 をFig. 1に 示 す. CPCの 測 定 は, 直 後(n=10), 24時 間 後(n= 10), 48時 間 後(n=10), 7日 後(n=10), 14日 後 (n=10), 35日 後(n=6), 42日 後(n=13)お よ び 49日 後(n=13)に 行 っ た. 溶 皿 終 了 点 を 示 す 最 大 抵 抗(HEP)は, 直 径 で74±4mOsMで あ り, 保 存 と共 に48時 間 で は55±2mOsMと 抵 抗 は 直 後 に 比 べ, 有 意 に(p<0.005)充 進 して低 い浸 透 圧 側 に 移 動 し た が, 7日 で58±5mOsM, 14日 で58±3 mOsMと ほ ぼ 同 じ値 に な った が, 35日 よ り抵 抗 は 69±3mOsMと14日 に 比 べ 有 意 に(P<0.01)減 退 し, 42日 で64±9mOsM(p<0.005), 49日 で65± 7mOsMと な り直 後 の値 と比 べ 有 意 差 は 認 め られ な くな った. 溶 血 開 始 点 を 示 す 最 小 抵 抗(HSP) は, HEPと 同様 に 直 後 の116±8mOsMに 比 べ て 抵 抗 は 有 意 に(p<0.005)充 進 し, 48時 間 で102± 2mOsMま で 変 動 した が, 以 降 抵 抗 は 有 意 に(p< 0.005)減 退 し, 35日 で139±3mOsM, 42日 で134± 7mOsM, 49日 で141±7mOsMま で 低 下 し た. HEPの 変 動 幅 に 比 べHSPの 変 動 が 大 きい た め, そ の 差 で あ る 溶 血 幅(HW)は, 直 後 の42±6 mOsMか ら有 意 に(p<0.05)大 き くな り, 14日 に は59±5mOsMと 有 意 に(p<0.005)上 昇 し, 35日 で は71±2mOsM, 42日 で は70±9mOsM, 49日 で は75±10mOsMと 有 意 に(p<0.005)変 化 した. 極 大 溶 血 点(HMP)もHEP, HSPと 同様 に 変 動 し, 直 後 の101±6mOsMか ら48時 間 で は86±3 mOsMと 抵 抗 は 有 意 に(p<0.005)充 進 し, 7日 の91±4mOsM(p<0.005)以 降 抵 抗 は 減 退 し, 35 日で108±2mOsMと 有 意(p<0.05)で あ った が, 42日 の106±5mOsMと49日 の109±4mOsMは 直 後 に 比 べ て有 意 差 は認 め られ な くな り, 一 定 の値 とな った. 回転 粘 度 計 を 用 い て保 存 直 後(n=17), 35日 後 (n=13), 42日 後(n=13)お よ び49日 後(n=6) で の血 液 流 動 性 を 求 め た. そ の 結 果 はFig. 2に 示 す よ うに, 各 ず り速 度 で の 粘 度 は, 直 後 に 比 べ て 35日, 42日 お よび49日 で は有 意 に(p<0.005)粘

Table 3 Changes of supernatant hemoglobin concentration and % hemolysis

stored in OPTISOL, mean+SD

*: p<0.005 when compared to other days.

Fig. 1 Coli Planet Centrifuge of stored RBCs in

vitro results, mOsM.

a: P<0.005 P<0.01

c: P<0.05 when compared to initial

度 は 上 昇 した が, 35日, 42日, 49日 の 間 で は有 意 差 は 認 め られ な か った. 赤 血 球 の 変 形 能 を 反 映 す るず り速 度230sec-1の 粘 度 は, 直 後 で4.86±0.60 cP, 35日 で5.72±0.57cP, 42日 で5.72±0.50cP, 49日 で6.16±0.42cPで あ り, 凝 集 な どを反 映 す る ず り速 度11.5sec-1の 粘 度 は, 直 後 で8.33±1.18 cP, 35日 で11.6±1.91cP, 42日 で11.5±1.36cP, 49日 で12.6±0.91cPで あ り, そ れ ぞ れ 直 後 に比 べ 有 意 に 粘 度 は増 加 し, 保 存 後 で は49日 で, 35日 と 42日 に 比 べ 粘 度 が 上 昇 す る傾 向(p<0.1)が 認 め られ た. Table 4に 示 す よ うに, 濃 厚 赤 血 球 液 の 上 清 の粘 度 は, 直 後 と保 存 後 を比 べ て も有 意 差 は認 め られ な か った ご OPで 保 存 した 赤 血 球 の形 態 の 変 化 を 走 査 型 電 子 顕 微 鏡 で 検 討 した. 赤 血 球100個 あ た りのscore は, Table 5に 示 す よ うに, 35日 で は207.8±29.8, 42日 で は193.1±27.7, 49日 で は170.5±33.5と35 日 と42日 で は有 意 差 を認 め な か った が, 35日 と49 日で は有 意 差(p<0.025)を 認 め, 42日 と49日 で は差 が あ る傾 向(p<0.1)を 認 め た. 無 作 為 に ボ ラ ンテ ィア を3群 に分 け, そ れ ぞ れ 35日 後(n=6), 42日 後(n=7), 49日 後(n=7) に測 定 した 赤 血 球 生 存 率 をTable 6に 示 す. 生 存 率 は24時 間 後 と48時 間 後 を 比 べ る と, 35日 で は 87.2±3.3%か ら82.5±3.4%ま で, 49日 で75.9± 3.6%か ら69.9±5.2%ま で と有 意 に(p<0.05)低 下 した が, 42日 で は24時 間 後 の82.3±8.4%と48時 間 後 の79.1±9.7%の 間 に は 有 意 差 は 認 め られ な か った. ま た, 生 存 率 を 日数 で 比 較 す る と, 24時 間 後 で は, 49日 で他 に 比 べ 有 意 に(p<0.005)低 下 した が, 48時 間 後 で は, 42日 で 有 意 に(p<0.05) 低 下 した. つ ま り, 48時 間 ま で の 赤 血 球 の 生 存 率 は, 42日 ま で は 約80%を 保 て た が, 49日 で は, 生 存 率 は24時 間 で 約75%, 48時 間 で約70%で あ った. 考 案 今 回 我 々 が 使 用 したOPは, 1981年 のHogman ら4)の処 方 のSAGMを 用 い, adenine濃 度 を 増 や した 組 成 で あ る. SAGMの 成 分 に 用 い られ て い る sodiumchlorideは, 赤 血 球 の 保 護 の た め に 保 存 液 を 等 張 液 に す る 目的 で 使 用 され, adenineは, 赤

Fig. 2 Changes of blood viscosity stored for 35

days, 42 days and 49 days in SAGM, mean+SD.

○-○Initial ●-●35 days

□-□42 days ■-■49 days

a: P<0.005 when compared to other days b: P<0.1 when compared to 42 dazys

Table 4 Changes of supernatant viscosity stored for 35 days, 42 days and

49 days in OPTISOL

NS

Table 5 Scorenized morphological changes of RBCs stored for 35 days, 42 days and 49 days in OPTISOL, score/100 RBCs, mean+SD

a: p<0.025 when compared to 49 days. b: p<0.1 when compared to 42 days.

Table 6 % Recovery of stored RBCs in vivo results, mean+SD

a: p<0.05 when compared to 48 hours. b: p<0.005 when compared to 49 days. c: p<0.05 when compared to 49 days.

800 Japanese Journal of Transfusion Medicine, Vol. 37. No. 6

血 球 内 のATP levelを 維 持 す る た め に 用 い ら れ

て い る. Glucoseは, 赤 血 球 の 代 謝 のenergyを 供

給 し, mannitolは, 赤 血 球 膜 の 安 定 化 の 作 用 が あ

る. 現 在, SAGM組 成 の 保 存 液 は,

American-SAGM(OPTISOL), Europian-SAGM,

AS-1(ADSOL)お よ びAS-2(Nutricel)が あ り, 他

にCPD組 成 のCPDA-1とCPDA-2や, 日 本 赤 十

字 社 のMAP10)15)な ど が あ る. こ れ ら の 保 存 液 の

報 告 と も 対 比 し て 文 献 的 考 察 を 加 え る.

今 回 の 採 血bagは, Hogmanら のCPD/SAGM

system8)を 用 い, Htが57%か ら60%の 濃 厚 赤 血 球 液 と な っ た. 同 様 な 採 血bagを 用 い た 方 法 は, AS+ 16)で も 行 わ れ て お り, Htは73%か ら83%の(濃 厚 赤 血 球 液 と な る. OPで 保 存 後 の 上 清 のHb濃 度 は, 42日 ま で は 除 々 に 増 加 した が, 42日 と49日 で は 有 意 差 を 認 め な くな り, そ の 溶 血 率 も同様 に42日 と49日 で は 有 意 差 を 認 め な か った. 国際 的 な溶 血 率 の 基 準 は, 1%ま で で あ り, 溶 血 率 で は, 我 々 の 検 討 で は, OPは, 49日 まで が基 準 を 満 た した. OPで42日 で 検 討 したHeatonら9)の 報 告 で は, 溶 血 率 は0.59± 0.46%で あ り, 今 回 の 検 討 と比 べ る と, 我 々 の 結 果 の ほ うが, 42日, 49日 共 に 溶 血 率 の 平 均 値 は 成 績 が 良 か った. 従 来 の 他 の保 存 液 の報 告 と比 較 す る と, 42日 で の溶 血 率 は, MAPが0.22±0.09%15) と最 も良 く, 次 い でAS-1が0.32%6), 我 々 の成 績 が ほ ぼ 同 じ 値 の0.37±0.06%で あ り, 次 い で Heatonら のOPが0.59±0.46%9), AS-3が0. 72± 0.40%7)で あ っ た. この 溶 血 率 の程 度 は, CPDA-1 とCPDA-2の 保 存35日5)に 相 当 し, SAGとCPD で は保 存21日1)に 相 当 す る値 で あ る. 49日 の 溶 血 率 は, AS-1が0.38±0.19%7)で あ り, 我 々は0.47± 0.17%と 有 意 差 は 無 く, ま たAS-3が0.70± 0.56%7)で あ った. MAPの49日 保 存 の溶 血 率 の成 績 は 報 告 され て な か った. OP保 存 後 の, ATP量, 213-DPG濃 度, pH, glucoseお よ び1actateの 変 化 は, 従 来 の報 告9)と 同様 の 傾 向 で あ り, ま た 他 の 保 存 液 と比 べ15), そ の 成 績 に大 きな 差 を 認 め な か った. 輸 血 後 の 赤 血 球 の 生 存 率 に 関 与 す るATP levelは, 49日 の 生 存 率 が75.9±3.6%と 高 い 値 を保 つ の に充 分 で あ った. hemoglobinの 酸 素 親 和 性 の 調 節 因 子 で あ る2, 3-DPG濃 度 は 日数 と共 に低 下 し, 35日 以 降 か な り低 値 と な った. Glucoseは, 赤 血 球 内 の 解 糖 系 で energy源 と し て 消 費 さ れ てlactateへ と代 謝 さ れ, lactate 濃 度 は か な り上 昇 し, そ の 結 果pHは acidosisに 向 く. 2, 3-DPGは, SAGで1週 毎 に測 定 した報 告2)3)では, 2∼3週 目で 急 に低 い値 と な る. SAGMで は2, 3-DPGの 関 与 す る酸 素 親 和 性 に つ い て考 慮 され て な い17)との指 摘 が あ る. しか し Herveら3)の2, 3-DPGの 回 復 試 験 で は, す ぐ に2, 3-DPG値 は上 昇 し, 約1時 間 で正 常 値 に復 帰 して お り, 臨 床 上 問題 は 無 い と考 え られ た. また, OP, AS-1, MAPを 比 較 した報 告15)で も, ATP値, 2, 3-DPG値, 形 態 学 的 変 化 お よ びglucose消 費 量 に は有 意 差 が 認 め られ て お らず, AS-1やMAPで も 2, 3-DPG値 はOPと 同様 に低 値 で3らっ た. CPC法 に よ る赤 血 球 膜 抵 抗 で は, 溶 血 開 始 を 示 す 最 小 抵 抗 は, 2週 間 まで は直 後 の値 とほ ぼ 同 じ で あ る が, 35日 よ り有 意 に 低 下 した. 35日 と42日 は有 意 差 は な いが, 49日 で 再 び低 下 し, 膜 抵 抗 の 減 退 が 特 に49日 で 強 く認 め られ た. 溶 血 終 了 を示 す 最 大 抵 抗 は, 有 意 差 は 認 め られ た が 大 き な変 動 で は な か った. 最 小 抵 抗 の 低 下 が 大 きい の で 結 果 と して 溶 血 幅 は 大 き くな った が 極 大 溶 血 点 は35日 以 降 は直 後 とほ ぼ 同 じ値 で あ り, 膜 の抵 抗 の減 退 が35日 以 降 認 め られ た. ま た 同 様 に赤 血 球 の 粘 度 も35日 以 降 上 昇 し, 特 に赤 血 球 の変 形 能 を 反 映 す るず り速 度 は, 49日 で さ ら に上 昇 す る傾 向 を 認 め, そ れ らを 電 子 顕 微 鏡 で観 察 した 形 態 は, 35日 と42 日は, ほ ぼ 同 じ形 態 を保 持 で きた が, 49日 で は変 形 が 強 くな った. 凝 集 を反 映 す るず り速 度 も 同様 に49日 で さ らに 上 昇 す る傾 向(p<0.1)を 認 め た. この 凝 集 を反 映 す るず り速 度 の 増 加 は, 赤 血 球 の aggregationの 増 加18)を意 味 す る が, 35日, 42日 と 比 べ49日 で は有 意 な上 昇 で は な い た め, 生 じ る微 細 凝 集 塊 の大 き さ と数 の増 加 に は 有 意 差 は 無 い と 考 え られ た. 赤 血 球 の膜 抵 抗, 粘 度 お よび 形 態 の変 化 は 並 行 して お り, これ ら は赤 血 球 中 のATP値 の 低 下 も 一 因 で あ る. Herveら3)に よ る と, 赤 血 球 の 形 態 の 変 化 も新 鮮 血 漿 を 加 え る事 に よ り2時 間 で 正 常 に

近 くな る と して お り, 輸 血 され る と, これ らの変 化 は速 や か に 改 善 さ れ る と思 わ れ た. 従 来 の保 存 液 に よ る2週 間 の 保 存 で は, 輸 血 さ れ た 赤 血 球 が 破 壊 さ れ ず に循 環 血 中 に 存 在 す れ ば, 約1∼3日 で そ の 機 能 は 回 復16)する. よ っ て保 存 赤 血 球 の有 効 期 限 は, 輸 血 後 の24時 間 後 の 生 体 内 生 存 率 が70%以 上 を 保 つ 日数17)にな っ て お り, CPDA-1とCPDA-2で は, 24時 間 生 存 率5)は, 35日 で そ れ ぞ れ78.1±8.1%と74.8±8.6%で, 35日 保 存 液 と して 使 用 され て い る. AS-1とAS-3の24時 間 生 存 率 は, 42日 で そ れ ぞ れ83%6)と85.1± 8.3%7)で あ り, ま たMAPの42日 で の24時 間 生 存 率 は81.8±4.3%, 48時 間 生 存 率 は77.5±3.8%14) で あ っ た. 今 回 のOPで は, 42日 ま で は, 24時 間 お よ び48時 間 の 赤 血 球 生 存 率 は ボ ラ ンテ ィア20人 共 70%以 上 で あ り, 24時 間 生 存 率 は42日 で82.3± 8.4%, 49日 で は75.9±3.6%で あ るが, 49日 の48 時 間 生 存 率 で69.9±5.2%と 低 下 す る. Heatonら のOPの 報 告9)では, 24時 間 の 生 存 率 の み で, 42日 で81.3±5.3%と 我 々の 値 と同 じで あ る. 49日 の生 存 率 は24時 間 でAS-1で は71.8±6.5%7)で あ り, AS-3で は71.9±8.8%7)で あ った. つ ま り42日 保 存 で は, OP, AS-1, AS-3, MAP共 に ほ ぼ 同 じ生 存 率 で あ った(し か し49日 保 存 で は, OPが 平 均 75.9%と 最 も 良 く, 次 い でAS-1が 平 均71.8%で あ り, 70%以 上 の 生 存 率 を 保 っ て い る. MAPの49日 保 存 の 生 存 率 の報 告 は 無 く, ま たAS-3で は, 24時 間 生 存 率 が69.4±7.4%7)と い う結 果 もあ り, この 値 で は49日 保 存 に は適 さ な い と もい え る.

OPは, 採 血 時 にCPD/SAGM systemを 使 用 す る事 に よ り, 血 漿 や 白 血 球 を で き るだ け除 い た(濃 厚 赤 血 球 液 に す る 事 が で き, さ ら にCPD加 濃 厚 赤 血 球 液 で の 保 存 に必 要 と され て い た 一 部 の血 漿 成 分 を 必 要 と し な い た め, そ の結 果 輸 血 副 作 用 の 減 少 も期 待 で き る. 今 回 の 結 果 か ら, OPに よ る濃 厚 赤 血 球 液 で の 保 存 は, 溶 血 率 お よ び赤 血 球 の24時 間 生 存 率 か ら 判 定 す る と, 42日 の み な らず49日 ま で充 分 に赤 血 球 を保 存 す る事 が 可 能 で あ り, 他 の保 存 液 よ り も 少 な か らず 保 存 性 が 良 い と 考 え られ た. 現 在 の CPD加(濃 厚 赤 血 球 液 の保 存 期 限 が21日 で あ るた め, CPD/SAGM systemでOPを 用 い る と, 血 漿 使 用 量 は減 少 で き, 保 存 期 間 は2倍 とな り, 特 に 術 前 に 自 己 の 血 液 を貯 血 す る 自己 血 輸 血 へ の 応 用 が 現 在 以 上 に 期 待 で き る. そ の結 果, 将 来 は 待 機 手 術 はOP使 用 に よ る 自己血 輸 血 が 中 心 とな る事 が 予 想 され る. 結 語 健 常 人20人 よ りCPD/SAGM systemで400m1 採 血 し, OPで 最 高49日 間 保 存 した 結 果 次 の 様 な 結 論 を得 た. (1) 長 期 保 存49日 目で は, 35日 と42日 に 比 べin vitro検 査 で は, ATP量, 溶 血 率, 赤 血 球 膜 抵 抗 お よ び赤 血 球 粘 度 が 低 下 した. (2) 赤 血 球 生 存 率 は, 49日 で は, 48時 間 生 存 率 が 特 に低 下 した が, 基 準 の24時 間 生 存 率 は70%以 上 を 保 て た. (3) 以 上 の結 果 よ り, OPで は42日 保 存 が 適 して い るが, 49日 保 存 も可 能 で あ る と考 え られ た. 稿を終 るに当 り, 赤血球寿命を測定 して下 さった東京慈 恵会医科大学放射線科川上憲司助教授 はじめアイ ソトープ 科 の方 々, 赤血球粘度を測定 して下 さった東京慈恵会医科 大学第3内 科横瀬琢男講師 はじめ第1研 究室の方 々お よび 保存赤血球液上清のヘモグ ロビン濃度 と電子顕微鏡に よる 形態学的観察を して下 さったテルモ株成会社 の方 々に深謝 致 します. 文 献

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