血 清 蛋 白 質 との 結 合 に 関 す る 研 究
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(2) 7254. 岩. 見. 整. 親. に依 れ ば,正 常 の 動 物 で は尿 中 に 出な い か 出 て も痕. 総 蛋 白 量7.5g/dl,濾. 跡 程 度,健 康 人 で は注 射 量 の0〜0.5%が. はAlbumin. 排 泄 され. る と して い うが, Ingelfinger17)は 健 康 人 で は2時 間 後 に1〜2%が. 尿 中 に排 泄 され るが,こ の程 度 の. 量 は 無 視 して差 支 えな い と述 べて い る.又, を 注 射 す ると, 60〜80%位. B. T. P. が 胆 汁 中 に排 泄 され2%. 位 が 尿 中 に 排 泄 され るが,そ の 残 りのB. S. Pは 細 網 内皮 系 殊 にKupffer氏. 星 細 胞 で 破 壊 され る とい. う説9)18)と.末 梢 組 織 細 胞 で取 られ ると い う説19)20) とあ り現 在 迄 の所,明 確 に な つ て いな い.然. し上 述. の研 究 は全 て 臨 床 的 乃 至 実験 的結 果 の 観 察 のみ て あ つ て,さ て そ れ で は血 中 でB. S. Pが. 如 何 な る物 質. と結 合 して移 動 して い るか,血 液 の変 化 に依 つ て そ の結 合 は どん な にな るの か,又 結 合 が 変 化 すれ ば胆. 2). 3). pHの. 知 られ て居 り, Bennhold物. は 蛋 白 質 と低 分子 と の. 結 合 した もの は恰 も1つ の 分 子 で あ るか の よ うに行 動 し,細 胞 膜 を通 つて 組 織 細 胞 の 中 に入 つ た後,特 別 の 機構 に依 つ て各 々 の成 分 に分 れ るの だ ろ う と述. 濾 紙 電 気 泳 動 装 置 は,東. S. Pと 血 清 蛋 白質 の結 合. ー. 洋 濾 紙 製 皿型 定 電 圧. 定 電 流 発 生 装 置,夏. 日 製 水 平 式 濾 紙 電 気 泳 動 箱B改. 良 型 を 使 用 し,銀. 塩 化 銀 電 極,濾. 紙No.. 5026×12.5cm,電. 150V/26cm定. 紙 は東 洋 濾. 流7mA/12.5cm,電. 電 流 で,泳. 圧. 動 箱 内 の 温 度 は 室 温,氷. 冷 却 又 は 電 気 冷 蔵 庫 に 依 り ほ ぼ12℃. と な る よ う一. 5時 間30分 泳 動.. B. S. Pは,第. 一 化 学 製 粉 末 を適 当に 秤量 蒸. 溜 水 に て 稀 釈 使 用 し た. 7). 血 清 中 尿 素 窒 素 の 測 定 は, Diacetrl Monoxime. 法31)に 拠 つ た. 8). 血 清 中 乳 酸 の 測 定 は, Hydroquinone法32)に. 拠 つ た. 9). 血 液 中 尿 酸 の 定 量 は, Cyanide‑Urea法33)に. 10). 症 の 際 のB.. 洋 濾 紙 製 硝 子 電 極pHメ. 5). 拠 つ た.. で低Alb.血. 測 定 は,東. 天 秤 は 島 津 製 直 示 天 秤 を 使 用 し た.. Rosenthal27)は 胆 汁酸 塩 が 蛋 白質 に結 合 した物質 を. つ い て は, Pezold28)が ベ ロ ナー ル ソー ダー緩 衝 液. あ る.. タ ゴ式 血 清 蛋 白 屈. 4). べ,こ の 特別 の機 構 につ い て は種 々 の説 が あ るが , 遊 離 させ るの だ ろ うと い つ て い る.然 しB. S. Pに. 18%で. タ ー に 拠 つ た.. 6). 略 す)と 結 合 す る事 が よ く. α2‑Globulin. γ‑Globulin. 折 計 に 拠 つ た.. れ られ て い な い.こ れ 等 の 中,一 般 に種 々の 酸 性, 下Albと. α1‑Globulin4.6%. 血 清 総 蛋 白 量 の 測 定 は,ア. 定 した.. Albumin(以. 54%,. 8.6%β‑Globulin11.8%. 汁 中 へ の排 泄 は どん な に な るの か につ い て は全 く触. 塩 基 性 色 素 類21)22)23)24)25)26)が 血 清 蛋 白質 殊 に血 清. 紙 電 気 泳 動 法 に 依 る蛋 白 分 劃. 血 清 ナ ト リ ウ ム,カ. EPU. リ ウ ム,の. 測 定 は 日立. 2型 分 光 光 度 計 に 依 り焔 光 比 色 を 行 な つ た.. 11). 血 清 カ ル シ ウ ム の 測 定 は,柴. 田 の 方 法84)に. よ つ た.. を濾 紙 電 気 泳 動 法 に 依 つ て 調 べ た報 告 を 見 るの み で, 実 験 成 績 並 び に 考 察. 詳 細 な研 究 が 見 られ な い の で本 研 究 を行 な つ た, 尚 実 験 方 法 に 就 い て考 え て み る と,蛋 白質 と種 々 の小 分子Ionを. 結 合 に就 い て具 体 的,理 論 的 な 扱 い. B. S. Pの Alkali性. 定 量 に は 一 般 にNaOH水. 溶 液 を加 えて. と して 発 色 定 量 す る 方 法 が 行 わ れ て い る. をす る為 に は 定 量 的 に 抑 え る事 が 必 要 で, Klotz21). が,そ. は 透 析 平 衝 を 使 用 した が平 衝 に達 す るの に72時 間 も. 度 に 依 つ て 吸 光 度 が 如 何 に 変 る か に 就 い て 詳 し く検. の 時間 を要 し, Borer,. 討 を 加 え た 報 告 が 見 当 ら な い.そ. こで どの程度 の. 半 透 膜 の 問 題 で 結果 の再 現 性 を得 る事 が 困 離 で あ り,. NaOH水. 最 高 の吸 光度 を. 尾 島30)の 分 光 光 度 計 法 は,吸. 示 す か を 見 る 為 に, 0.01mg/cc及. Luck)等. の限 外 濾 過 法 は,. 光 物 質 と蛋 白質 の結. の 際B. S.. Pの. 濃 度 に 依 り又 加 え るAlkali. 溶 液 を 加 え る とB.. S. Pが. 合 に依 つ て メ タ ク ロマ シ ーを 起 す 場合 に しか適 用 出. のB.. 来 ない. Pezold28)の 使 用 した濾 紙 電 気 泳 動 法 は,. 液1cc宛. 肉 眼 的 に結 合 状 態 の 観 察 が 可 能 で あ り,過 剰 の 色 素. 580mμ. は 遊 離 して 分 離 し,抽 出 も容 易て あ り実 験 条 件 も一. こ れ に 依 れ ば, 0.01mgるcc及. 定 に し易 く,再 現 性 に も優 れ て い るの で本 研 究 は 濾. B. S. P水. 紙 電気 泳 動 法 に依 る事 と した.. 0.00 2Nの. S. P水. 1). 実 験 に使 用 した血 清 は全 て,健 康 同 一人 血清. に 各 種 濃 度 のNaOH水. を 加 え 日立FPW. 溶 液 はNaOH水. 溶. 4型 光 電 比 色 計Filter. で 吸 光 係 数 を 求 め る と 第1図. と も0.01Nの. 実験 材 料 及 び 方 法. 溶 液9cc宛. び0.001mg/cc. の 通 りで あ る,. び0.001mg/ccの 溶 液 濃 度0.6Nか. ら. 間 で 略 々 一 定 の 吸 光 係 数 を 示 す が,両. 者. 時 が 吸 光 係 数 が 極 大 と な るの で,後. 述 の 蛋 白 質 に 結 合 し たB.. S. PをNaOH水. 溶 媒 と して 抽 出 す る 際, N/100. NaOH水. 溶 液を 溶 液 を使.
(3) Bromsulphalein試. 第1図. 各 種 濃 度 のNaOH水. 溶 液 に 依 るB.. 験 に関 す る知見 補 遺. S. P.. るか を 見 8.6,. の 吸光 係. る 為 に,ベ. 8.9,ベ. 8.8,. 6.47,. 7.60,. ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー 緩 衝 液pH. ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー ・塩 酸 緩 衝 液pH. 9.2,第. pH. 1255. 一 燐 酸 カ リ ・第 二 憐 酸 ソ ー ダ ー 緩 衝 液 7.17,. 8.08,. 2.5mgつ. 8.04,. 8.84を. 8.4,硼. 酸 練 衝 液pH. 6.77,. 清0.1ccにB.. S. P. 使 用 し て,血. つ を 加 え そ の0.01ccを. 流 で 約5時. 8.4,. 間30分. 第3図. 試 料 と して定 電. 泳 動 す る と,何. B. S. P.添. れ も 第3図. の 如 く. 加 血 清 の 濾 紙 電 気泳 動図. 用 す る事 と した. 次 後 血 清 蛋 白 質 に 結 合 したB. に,果. してB.. ろ うか,又. S. Pと. S. Pを. 測定 す る前. 血 清 蛋 白 質 とは結 合す るで あ. 血 清 蛋 白 質 の ど の 部 分 に 最 も よ く結 合 す. る で あ ろ う か,更. に 測 定 に 使 用 す る光 波 長 は 何mμ. の もの を 用 い る の が 妥 当 か 等 に 就 い て 検 討 す る為 に, 2.5mg/dl. B. S. P水. 溶 液, 5mg/dl. と血 清 の 等 量 混 合 液, 清 の等 量 混 合 液,. 5mg/dl. 5mg/dl. 等 量 混 合 液, 5mg/dl. B. S. P水. B. S. P水. B. S. P水. ロ フ ァ ン で 約48時 間 透 析,最. 約7.5と. B. S. P,水 血 漿,. は. 量 混 合 液 各 々4cc を 加 え てpHを. の 如 く, 580mμ,. 溶 液 及 びB.. Alb.混. ち,対. phenol. 染 色 を 行 な つ た 後0.5%酷. blue)36)を. で 洗 い,血. 清 にB.. Alkali性. い 過 剰 のB. Alb.と. と 血 清,. 合 液 の 吸 光 曲線. 照 の 血 清 はB.. S. Pを. 酸 溶液. 添加 し た もの は血 清 及び緩衝液の. S. Pは. 白質 と結 合 しな. 陽 極 側 に 遊 離 先 行 し対 照 血 清 の. 同 位 置 にAlbを. 結 合 し たB.. S. PのSpot. α1‑, α2‑, β‑Glb,の. し て 尾 を ひ い た よ う に か す か なB. ら れ るが γ Glb.の B. S. Pと. P. B(Brom. 加 添 した もの と比 較 す る. の 為 赤 紫 色 を 呈 し て,蛋. が 認 め られ る.又. 588mμ,. S. P.. 現 わ れ て 来 る.即. と, B. S. Pを. 型 分光 光 度 計 で各 々の 吸. 光 曲線 を 求 め る と 第2図 第2図. 溶 液 と血 漿 の. 終 溶 液 の 蛋 白N値. 溶 液1cc宛. し,日 立EPU Ⅱ. 溶 液 と血. 精 製 した もの を セ. で0.45g/100ml)等. 宛 にN/100NaOH水. 溶液. 溶 液 とHowe35)の. 方 法 で 精 製 した 血 清Alb.(2回. Bjeldhal法. B. S. P水. 位 置 に連 続. S. Pの. 色が認 め. 位 置 後 は 認 め ら れ な い.更. に. 血 清 蛋 白質 の結 合 の 割 合 を定 量 的 に現 わ. す 為 に,血 0.1cc宛. 清0.9cc宛. 後 各 種 濃 度 のB.. を 加 え て 血 清 中 のB.. 1mg/ccと. S. P水. S. P濃. な る よ う な 系 列 を 作 り,各. 溶液. 度 が5〜. 々 そ の0.1cc. 宛 を資 料 と して血 清 蛋 白質 の濾 紙 電 気 泳 動 に一 般 後 使 用 さ れ て い る ベ ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー 緩 衝 液pH 150V/26cm,. 7mA/12.5cm,. μ=0.05定. 8.6,. 電 流 で5. 時 間30分 泳 動 し東 洋 濾 紙 自 動Densitometer, 590mμ. で(日. み る と 第1表 590mμ, B. S. Pが 大 はB.. 593mμ 血 清,血 S. P水. す る色 素 はDensitometerで. 漿 中 後 あ る場 合 後 はそ の 吸光 極. つ てN/100. 溶 液 の そ れ とB.. S. P‑Alb.水. 溶液. らず, Globulin,. S. PがAlb.と Fibrinogenの. 事 を 思 わ し め る.更 と の 結 合が,濾. 後 上 述 のB.. FPW4型. 光 電 比 色 計Filter. 影 響 を も受 け てい る S. Pと. 血 清 各成 分. 紙 電 気 泳動 に依 り如 何 後現 われ て来. の割 合 を求 めて. し表 中 の 残 量 後 相 当. も又,こ. NaOH水i液5ccで. た が 不 能 に 終 り,専 結 合 し て い るの み な. 定 し,そ. の 通 り で あ る.但. に そ れ ぞ れ 吸 光 極 大 を 認 め,. の 場 合 の 中 間 の 値 を 示 し た. こ の 事 はB.. 立 特 製)測. Filter. の 部 分 を切 取 抽 出 して 日立. 590mμ. を 用 い測 定 し. ら遊 離 色 素 及 びAlb.と. 結合 し. た 結 合 した 色 素 の 合 計 か ら求 め た. 以 上 の 実 験 結 果 を 綜 合 す る と, B. S. Pと Alb.の. 結 合 物 が 出 来 る 事 は 第2図. も 又 第3図. 血清. の吸 光 曲 線 か ら. の 濾 紙 電 気 泳 動 か ら も確 認 出 来 る..
(4) 7256. 岩. 第1表. 各 種 濃 度 のB.. S. Pと. 見. 血清蛋白質. 整. 親. 輸. の結 合 割 合. を 使 用 し て い る し,又. 波 長580mμ. が 使 用41)さ. す 通 り, B. S. P Alb.の 極 大 を 認 め る の で,実. Ⅰ.. B. S. Pと. S. P水. 溶液の. れ て い る が,第2図. に示. 結 合 物 で は593mμ. に 吸収. 験 は 凡 て 日立 特 製590mμ(波. 長 幅10mμ)のFilterを. 液 及 びpHの. 一般 にB.. 使 用 す る こ と と した.. 血 清Alb.と. の 結 合 に 対 す る緩 衝. 影 響 に 就 い て.. 前 述 の 実 験 に 依 つ てB. し てAlb.と. S. Pは. 血 中 に於 いて主 と. 結 合 し て い る事 が 判 つ。 た が,扨. B. S. PとAlb.結. て. 合 は 如 何 な る条 件 に 依 つ て 変 動. す るか を濾 紙 電 気 泳 動 的 に研 究 す るに 当つ て先 づ 問 Pezold28)もWuhrmann及 濾 紙 電 気 泳 動 箱, 紙,ベ. びWunderlyの Munktell. Nr. 20 30×7cmの. S. Pと. 血 清Alb.と. る事 を 認 め て い る.著. 濾. 題 と な る の は 使 用 す る緩 衝 液 の 種 類 で あ ろ う.緩 液 に は 少 な くと も1個. 8.7μ=0.06. る か ら こ のIOnが. の 結 合 物 が 出来. に あ り, Davis及. ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー 緩 衝 液pH. を 使 用 してB.. 懸 垂式. 者 の 実 験 に 於 い て は,ベ. ロナ. して い る.従. 以 上 の 陰Ionが. びBohn42)も. 既 に こ の 事 を証 明. つ て 緩 衝 液 とAlb.の. 結 合の度 合 を考. 慮 しつ つ,. 塩 酸 緩 衝 液,第. に 依 つ て 如 何 に 変 る か を 調 べ て 見 た.即. 液,硼. 素 ・硼 酸 緩 衝 液 に 於 い て も 第3図. と 全 く同 様. の 結 合 物 を 作 る 事 が 認 め られ た. 一 般 に 色 素 がAlb い て は,古. .と. くはBennhold22),最. の 優 れ た 綜 説 が あ り,1946年. 近 で はGoldstein37). と の 結 合 に 就 い てPezold28)は,. α1‑Globulin結. し て い ると 述 べ て い る. Rawson38)に び β Globulinも. 依 れ ば,. 合 α及. 大 き な 色 素 分 子 と結 合 す る事 が 報. 告 され て 居 り,Fibrinの. 膜 も 種 々 の色 素 と結 合 す. る39) 40)事 が 報 告 され て い るが,. γ‑Globulinは. に 示 す 通 りAlb.以. 外の. 蛋 白 成 分 の 部 分 に あ る色 素 は 尾 を 引 い て, Pezold28) の 述 べ て い る 如 くα1‑Globulinと. の み 結 合 して い る. と い う事 は 確 認 出 来 な か つ た. 分 離 性 能 の 優 れ て い る41)懸 垂 式 濾 紙 電. 気 泳 動 装 置 を 使 用 し て,蛋 Alkaliで. 白 と 結 合 し た色 素 を. 抽 出 して, Zess‑OptonのElko Ⅱ. 比 色 計Filter. S57で. 測 定 し て 居 り,又. 型光電 濾 紙 も異 な. る の で こ れ 等 が 原 因 で あ ろ う と 考 え ら れ る が,第1 表 で 残 量 と して 表 わ し て あ る量 即 ち, Pezoldが Globulinと. α1‑. 結 合 し て い る と い う 量 は 前述 の 通 り. Densitometer及. び光 電比 色 計 で 測 定 出 来 ぬ 位微 量. で あ る の で,以. 後 の 実 験 に 於 い て 血 清 蛋 白質 と. B. S. Pの た.又. の 部 分 を 切 取 りN/100 し,日. 立FPW. 結 合 は, Alb.に. 就 い て の み 取 扱 う事 と し. 測 定 に 使 用 す るFilterの. 波 長 は,. 割 合 に 加 え,そ. の0.01cc. 7mA/12.5cm定 結 合 し たB. NaOH水. 電 流 で5 S. PのSpot. 溶 液10ccで. 4型 光 電 比 色 計, Flier. Pezoldは. 抽出. 590mμ. 測 定 す る と次 の 通 りで あ る. 1) pH. ベ ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー 緩(17液 8.6,. 第2表 著 者 の 実 験 で は,第3図. 康同. 57%)0.1ccに. 8.9の. ベ ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー 緩 衝 液43)を. 全 く. 結 合 を 示 さ な い.. Pezoldは. S. Pを2.5mgの. ち,健. を 資 料 と して 濾 紙 電 気 泳 動 後 使 用 す る緩 衝 液 の 種 類. 時 間30分 泳 動 し, Alb.に. 外 の 分劃. 結 合 が 緩 衝 液 のpH. .59/dl(Alb.. を 変 え て, 150 V/26cm,. 以 来Klotz21),楠23),. 等 の 業 蹟 か ら も 明 ら か で あ る 一 又Alb,以. B. S. PとAlb.の. 一 人 血 清 総 蛋 白 量7 就 きB.. よ く結 合 す る と い う事 後 就. 含 まれ てい. 蛋 白 質 と 結 合 す る可 能 性 は 充 分. ール ソー ダー緩 衝 液 のみ な らず ベ ロナ ー ル ソー ダ ・ 一 燐 酸 カ リ ・第 二 燐 酸 ソ ー ダ ー 緩 衝. 衝. ベ ロナ ール ソー ダ ー緩 衝 液 使 用の 際 の 血 清Alb.に の 吸光 係 数. 結 し たB.. S. P. で.
(5) Bromaulphaaein試. 使 用 して 濾 紙 電 気 泳 動 を 行 な い, Alb.に B. S. Pの. 結 合 した. 吸 光 係 数 を 求 め て み る と,第2表. pHが8.6か. ら8.9とALkali性. 係 数 は0.0802か Alkali性. ら0.0503と. 第4表. 減 少 す る.即. 7257. 第 一 燐 酸 カ リ,第. 二 燐 酸 ソー ダ緩. 衝 液 使 用 の 際 の 血 清Alb.. の如 く. が 強 くな る と,吸. に 傾 くに つ れ てAlb,に. 験 に 関 す る知見 補 遺. B. S. P. の 吸光 係数. 光. ちpHが. 結 合 す るB. S.. P. 量 は 減 少 す る. 2). 硼 素 ・硼 酸 緩 衝 液. M/20硼. 素, M/5硼. 含 む)溶. 酸(M/20に. 液 を 使 用 してpH. 8.9の 緩 衝 液 を 作 り,之 泳 動 を 行 な いAlb.に. 6.77,. 相 当 す る食 塩 を 7.60,. るに つ れ てAlb.に. S. Pの. 8.9等 の 同 一pHで. 吸光係数. の 如 く, Alkali性. 結 合 す るB.. 傾 向 に あ る が,第2表. 8.6,. に よ つ て それ ぞれ 濾 紙 電 気 結 合 したB.. を 求 め て み る と 第3表. 8.08,. S. P量. が 強 くな は減 少 す る. と 比 較 して 見 る とpH8.6, はベ ロ ナ ール ソー ダ ー緩 衝 液 よ. り も 結 合 量 は 明 ら か に 多 くな つ て い る事 が 判 る. 第3表. 酸 緩 衝 液 使 用 の際 の 血 液. Alb.に. 結 合 し たB.. 4). 硼 素,硼. S. Pの. ベ ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー ・塩 酸 緩 衝 液. M/10ベ. 吸光. ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー,. 用 してpH. 係 数. り,そ. 8.0,. 8.4,. 8.9,. 酸 溶 液を使. 9.2の 緩 衝 液 を 作. れ ぞ れ 濾 紙 電 気 泳 動 を 行 な う と 第5表. 矢 張 りAlkali性 す るB.. 8.6,. N/10塩. の如 く. が 強 くな る に つ れ てAlb.に. S. P量. は 減 少 す る傾 向 後 あ るが,前. 種 類 の 緩 衝 液 のpH. 8.6,. 8.9と. 結合 述 の3. 比 較 して 見 る と こ. れ 等 よ り も 更 に 結 合 量 が 増 加 して い る し,又. 全系列. に 渉 つ て 結 合 量 が 増 加 して い る 傾 向 に あ る.. 従 来, Alb.と 第5表. 色 素 の結 合 に対 す る緩 衝 液 の 影響. ベ ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー,塩. 酸緩 衝 液. 使 用 の 際 の 血 清Alb.に. 結 合 した. B. S. Pの. 3). 第 一 燐 酸 カ リ ・第 二 燐 酸 ソ ー ダ ー 緩(17液. M/15第. 一 燐 酸 カ リ ・M/15第. を 使 用 してpH 液 を 作 り,之 う と 第4表 Alb.に が,第1表. 7.17,. 8.04,. 二 燐 酸 ソー ダ ー溶 液 8.4,. 8.6,. 8.9の 緩 衝. に依 つ て それ ぞれ 濾 紙 電気 泳動 を行 な. の 如 くAlkali性. 結 合 す るB. 及 び 第2表. 8.9に 於 い て,ベ. S. P量. が 強 くな るに つれ て は 減 少 す る傾 向 に あ る. と 比 較 して 見 る とpH. ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー 緩 衝 液,硼. 8.6, 素 ・. 硼 酸 緩 衝 液 を 使 用 し た 場 合 よ り も 結 合量 が 更 に 増 加 して い る 傾 向 後 あ る.. 吸光係数.
(6) 7258. 岩. を 定 量 的 に 調 べ るの にKlotz44)の. 見. 透 析 平衡法が用. 整. 親. を異 に した 場 合 に, Alb,とB.. S. Pの. 結 合 は如何. い られ て い るが,之 に依 れ ば硼 素,燐 酸 等 の緩 衝 液. に 影響 され るか を見 た ので,茲 で は濾 紙 電気 泳 動 を. はXllb.と. 行 な う場 合 の緩 衝 液 は一 般 に蛋 白質 の濾 紙電 気 泳動. 色 素 の 結 合 を障 碍 す る事 が最 も少 な く,. 之 に反 して ベ ロナ ー ル ソー ダ ー緩 衝 液 は遙 か に 強 く. に最 も屡 々使 用 され るベ ロナ ー ル ソー ダー緩 衝 液46). 結 合を 障 碍 す ると 述 べ て い る.上 述 の 濾紙 電気 泳 動. pH. 法 に 於 い て も,各 緩 衝 液 の 対 応 す るpHに. 2.5mgの. 於 ける. 8.6を. Alb..に 対 す るB. S. Pの 結 合 量 の 差 は微 小 で あ る. M/15第. が,第4図. 2/10M棚. の 如 く,即 ち同一 資 料 血 清 を 使 用 し,同. 第4図. 種 々 の 緩 衝 液 の 種 々 のpHに Alb.と. 結 合 し たB.. S. P.の. 於け る 吸光 係 数. 使 用 し て,血. 清0.1ccに. 割 合 に加 え,更 に之 に倍 量 の各 種pHの 一 燐 酸 カ リ ・M/15第. M/10グ. つ きB. S. P. 二 燐 酸 ソー ダ ー,. 酸 ・塩 化 カ リ ・2/10M苛. 性 ソ ー ダ ー,. リ コ コ ル ・食 塩 ・N/10苛 性 ソーダ ーの 各. 緩 衝 液 を加 え て 血 清 のpHを. 変 え,そ の0.01cc宛. を資 料 と して 濾 紙電 気 泳 動 を 行 な い, N/100NaOH 水溶 液10ccでAlb.と. 結 合 したB. S. Pを 抽 出 し. 吸 光係 数 を求 あて み た.更 に血 清 の緩 衝 液 に依 る稀 釈 の 影響 も見 る為 に蒸 溜水2倍 稀 釈血 清 に就 いて も 同 様 方法 で行 なつ て み た.そ れ ぞ れ の吸 光 係数 は 第 6表 及 び第7表 の 通 りで あ る.第6表 比 較 して見 る と, pH6〜8辺. 及 び 第7表 を. 迄 は 吸 光 係 数 の間 に. 可 成 の差 が認 め られ るが, pH9以. 上 に な ると殆 ん. ど差 が無 くな つ て来 る.又pHがAlkali性 一 量 のB. . S. Pを. 加 え,. 4種. 類 の 緩 衝 液 の種 々の. に つれ てAlb.とB. pH. PHで. 濾 紙 電 気 泳 動 を 行 な つ て 見 る と,ベ. ソ ー ダ ー 緩 衝 液,瑚. 素 ・棚 酸 緩 衝 液,第. ロ ナ ール. リ ・第 二 燐 酸 ソ ー ダ ー 緩 衝 液,ベ ー ・塩 酸 緩 衝 液 の 順 にAlb.とB.. 一・ 燐 酸 カ. ロナー ル ソー ダ S. Pの. 結 合量 は. 増 加 す る傾 向 が 判 る.. く同 様 の成 績 で あ るが,ベ がAlb.とB.. S. Pの. 12附 近 に な る と殆 ん ど結 合 は0に 近 づ いて ゆ く. 一 般 に 酸 性 色 素 と 血 清Alb. 陰Ionと 言 わ れ,斯 等 は,. 報 告 と全. ロナ ール ソ ー ダ ー緩 衝 液. .と の 結 合 は,色. して 存 在 す る よ う なpHで る 結 合 に 対 す るpHの. Methyl‑Orangeと. 第6表. 緩 衝 液 の 種 類 の 面 か ら見 るとKlotzの. 血 清 に 各 種pHの pHを. 影 響 に 就 い て 楠23). 吸光 係 数. ー ル ソ ー ダ ー ・塩 酸 緩 衝 液 の 場 合結 合量 が 多 い の は,. が,水 島45)等 の 述 べ て い る如 く, ClIonは に 結 合 す る事 が 少 な くそ の 為Alb.がB.. 結合す る 蛋 白質 S. Pと 結. 合 す る余 地 が ベ ロナ ー ル ソー ダ ー緩 衝 液 の場 合 よ り も多 くあ る為 と 推 察 され る. 又pHの. 面 か ら見 る と,何 れ の 緩 衝 液 の場 合に. もpHがAlkali性 て行 き, PH9附. に傾 く後 つれ て結 合 量 が 減 少 し 近 に な ると極 め て少 な くな る.斯. る傾 向 は 楠23)26)等 が 他 の酸 性 色 素 に就 い て報 告 し て い るの と全 く同様 で あ る.Ⅱ . 血 清PAの. 相 違 がAlb.. B. S.P結. 合 に及 ぼ. す 影響 に就 い て.. 前節で濾紙電気泳動の為の緩 衝液の 種類及 びpH. 結 合の 場. 経 衝液 を加 え て. 変 え た 際 のAlb.結. B. S. Pの. 素が. 結 合を示 す と. 馬 血 清Alb.の. 結 合 を障 碍 す る の に,べ ロ ナ. 前 述 の よ うに 蛋 白 質 は 緩 衝 液 の 陰Ionと. に傾 く. S. Pの 結 合 は著 明 に 減少 し,. 血 清 蛋 白 量2.5g/dl. 合 した.
(7) Bromaulphalein試. 第7表. 験 に 関 す る知見 補 遺. 7259. 蒸溜 水2倍 稀釈 血 清 に各 種pH緩. 結 合 状 態 を 示 す 曲 線 はMethyl‑Orange,. 衝 液 を 加 え てpH変. 場 合 と 同 様Alb.分. え た 際 のAlb.. に 結合 したB. S. Pの. 吸光 係 数. B. P. Bの. 子 中 のLysine及. の 強 塩 基 性 解 離 基(Lysineの. びArgiain. ε‑Amino基. Argininのguanidine Amino基)の. 解離 曲線 の中. 間 に 位 置 す る 事 が 予 想 さ れ, Alb.とB. 合 に は 色 素 のsulfon基 と し て,. Histidine,. 及 び. とAlb.の Lysine,. S. Pの. 塩 基 性 基 即 ち主. Arginin等. の 遊 離 塩. 基 性 グ ル ー プ が 与 つ て い る 事 が 推 察 され る.要 に, Alb.とB.. S. Pの. 他 のSulfophthalein系 pHのAlkali性. 結. 結 合 に 対 す るpHの. す る. 影 響 は,. 色 素 の も の と全 く同 様 で,. が 強 く な る に つ れ てpH. ら結 合 が 急 激 に 減 少 し,PA12附. 9附 近 か. 近 で 結合 は殆 ん ど. 0に 近 くな る.Ⅲ . 各 種pHの. 血 清 のAlb.とB,. S. Pの. 結合. に 対 す る は 有 機 物 添 加 の 影 響. 血 中 に 存 在 す る 有 機 物 が 増 減 し た 際, S. S. Pと Alb.と 血 清 蛋 白 量1.9g/dl 合pH9以. 下 で はPHの. 減 少 と共 に 増 大 し,. 以 上 に な る と 著 明 に 減 少 しpH. 12附. S. Pと. 人 血 清Alb.の. 者 の 実 験 結 果 も 第5図. pH. 9. 近 で 殆 ん ど0. に 近 くな る と 述 べ て い る が, Sulfophthalein系 で あ るB.. の結 合 に何 等 か の 影 響 を及 ぼ す の で はな い. の か と い う事 も充 分 考 え ら れ る.そ. 色素. 結 合 に就 いて の著. の 通 り 同 じ傾 向 の 成 績 を 示 し. に つ きB.. S. P 2.5mg宛. 加 え,更. こ で 血 清0.1cc に 倍 量 の 各 各種. PHの. 第2節. と 同 様 の緩 衝 液 を 加 え,そ. 素,乳. 酸,尿. 酸 等 の 添 加 して み た.. 1). の各 々に 尿. 尿 素 の 影 響 に就 いて. 第2節. と全 く同 様 の方 法 で 試 料 血 清 を作 り,こ の. 血 清1.0ccに. 付 き尿 素 水 溶 液(0.1cc中. に 尿 素1. て い る.. 第8表 第5図. 正 常 血 清 及 び 蒸 溜 水2倍 種pEの Alb.に. 緩 衝 液 を 加 え て, pHを 結 合 し たB.. 而 も, B. S. PとAlb.と. S. P.の. の 結 合 がpHに. 化 す る状 態 を 示 す こ の 曲 線 は,楠 とMethyl‑Orange, pAの. 稀 釈血 清に 各. B. P. B等. 変 え,. 吸光係数. 依 り変. 等 が 馬 血 清Alb.. と の 結 合 に 対す る. 影 響 を 調 ベ た そ れ と 全 く同 様 な 態 度 を と つ て. い る. 従 つ て,各. 種pHに. 於 け るAlb.とB.. S. Pの. 各種pHの 緩 衝 液 を 加 え て 血 清のpH を 変 え更 に 尿 素 を 添加 した 際 のAlb. に結 合 したB. S. Pの 吸光 係 数.
(8) 7260 第9表. 岩. 見. 第8表 の 場 合 の 尿 素量 を細 分 した 場合. 整. 親. に0.1ccの. 蒸 溜 水 を 加 え た も の を 使 用 した.. 表 世 び に 図 の 如 く, pH pH. 11と12は. 6と7,. pH. 8と9と10,. それ ぞれ の変 化 が あ るに もかか わ らず. 殆 ん ど 同 一 の 吸 光 係 数 を 示 し て 居 り,又 尿 素 量1mgの る.こ. 場 合 も2mgの. の 事 は,尿. この傾 向 は. 場 合 も略 々 同 様 で あ. 素 がAlb.とB.. S. Pの. 結 合 に強. い 影 響 力 を 持 つ て い る 事 を 示 し て い る. Brealer47) に 依 れ ば,超. 遠 心 沈 澱 の 沈 降 定 数 の 測 定 か ら血 清. Alb.の1分. 子 に 対 し,約360分. と 述 べ,又. 楠,木. 子 の尿 素 が結 合 す る. 村 幻)26)は,尿. 素 に 依 つ てAlb.の. 酸 性 色 素 結 合 能 が 低 下 す る事 を 報 告 し て い る.著 第6図. 各 種pH緩. 衝 液 を 加え て 血 清 のpHを. 変 え 更 に 尿 素 を 加 え た 際 のAlb.に 合 し たB.. の 実 験 結 果 か ら 見 て も,第6図. S. P.の. 結. 溶 液 の 添 加 に 依 りAlb.とB.. S. Pと. 下 を 来 す 事 は 明 ら か で あ る,更. 吸光 係 数. Alb.のB. で, pH. S. P結. の結 合能 が低. に 興 味 あ る事 は,. 合 量 が 階 段 的 に 減 少 して い る 事. 8と9と10,. で はpHが. pH. 11と12と. 各 一定 の緩衝 液. 変 化 して い る に も か か わ らず,略. の 結 合 を 示 す 事 で あ る.之 如 く, Alb.に. 者. に 示 す 通 り,尿 素 水. はBreslerが. 々一定. 述 べて い る. 対 す る結 合 力 は 極 め て 大 き い の で 緩. 衝 液 中 の 陰Ionが,. Alb,に. 結 合 す る余 地 が 殆 ん ど. 残 さ れ な い 為 と 考 え ら れ る.. 2). 乳 酸 の 影響 に就 て. 1) と 全 く同 様 の 操 作 で 尿 素 の 代 り に 乳 酸 を 第10表. 各 種phの. 緩 衝 液 を 加 え て 血 清 のpH. を 変 え 更 に 乳 酸 を 添 加 し た 際 のAlb. に 結 合 し たB.. 及 び2mgを. 含有)を0.1cc宛. 添 加 し,そ の各 々. に就 いて ベ ロ ナ ール ソ ー ダ ー緩 衝 液pH い,濾 紙 電 気 泳 動 を 行 な いAlb.と 吸 光 係 数 を 求 めて み る と,第8表. 8.6を 用. 結 合 したB.. S. P. 及 び 第9表 の 通 り. で あ り,之 を 図 示 す る と第6図 の 通 りで あ る.尚 対 照 と して は,血 清1.0ccに. つ き尿 素水溶液の代 り. S. Pの. 吸光 係 数.
(9) Bromaulphalein試. 第11表. 第10表 の 場合 の乳 酸 量 を細 分 した 場 合. 験 に 関 す る知見 補 遺. 7261. 間 漸増 して 見 ると第13表 の 通 りで あ る.尿 酸 の 場 合 は乳 酸 の 時 よ り も更 に 著 明 にAlb.とB.. S. Pと. の. 結 合 を 低下 させ て い る事 が 判 る. 第13表. 第12表 の場 合 の 尿 酸量 を細 分 の し た 場合. 0.5mg及. び0.25mgの. の通 りで,添. 割 合 に加 え て み る と第10表. 加 乳 酸 量 を増 す とAlb.に. B. S. P量 は 減 少す る.そ こで 更 にpH いて添 加乳 酸量 を0.25mgの. 結合す る. 7及 び8に 就. 間 漸 増 してみ る と第. 11表 の 通 りで,こ の関 係 は更 に明 らか と な る.こ の 成 績 を対 照 の もの と比 較 してみ る と,乳 酸 の 添 加 に 依 つて 結 合量 は梢 々低 下 す るが そ の程 度 は 極 あ て僅 かで あ る事 が 判 る. 3). 尿 酸 の 影 響 に 就 い て 矢 張 り1)と. 全 く同 様 の. 以 上 乳 酸,尿 者 共Alb.の い.楠. 酸 の 影 響 に 就 い て 考 え て み る と,両 色 素 結 合 能 を 低 下 さ せ る事 は 間 違 い な. 羽)等 もAlb.とMethyl‑Orangeと. の 結 合. に 及 ぼ す 酸 の 影 響 を 硫 酸 処 理 に 依 つ て 見 て い る が, 結 合能 は低下 す るが そ の程 度 は 僅 か で あ る と述 べ て. 方 法 で 尿 素 の 代 りに 尿 酸 を0.1mg乃. 至0.2mgの. 割 合 に 加 え 濾 紙 電 気 泳 動 を 行 な つ て 見 る と 第12表 の 通 りで あ り,添 第12表. 加 尿 酸 量 を0.1mgよ. 各 種pHの. り0.2mgの. 緩 衝 液 を 加 え て 血 清 のpH. い る. 要 之 に 生 体 内 に 於 い て,新. 陳代 謝 産物 と して常 に. 生 成 さ れ 又 疾 病 に 依 り増 減 の 起 る 尿 素,乳 等 に 依 り, Alb.とB.. S. Pと. 酸,尿. の結 合 が 如 何 に 影響. を 変 え 更 に 尿 酸 を 添 加 し た 際 のAlbに. さ れ る か を 見 た が,そ. 結 合 し たB.. 差 は 種 々 考 え ら れ る が 何 れ に せ よAlb.とB.. S. Pの. 吸光係数. 酸. れ ぞ れ 程 度 の 差,作. 用機序の S. P. の 結 合 を 低 下 さ せ る 方 向 に 作 用 し て い る事 は 顆 味 が あ る. IV. Alb‑とB.. S. Pと. の 結 合 に対 す る塩 類 の 影. 響 に 就 い て. 前 節 でAlb.とB.. S. Pと. の 結 合 に対 す る血 清 中. に 存 在 す る 有 機 物 等 の 影 響 に 就 い て 述 べ た が, Alb. とB.. S. Pの. 結 合 後対 して 血清 中 に 存 在 す る塩類 の. 影 響 も見 逃 す 事 が 出 来 な い.そ. こ で,血. 清に種々の. 濃 度 の 塩 類 を 添 加 し て そ の 影 響 を 確 め て み た. 血 清0.1ccにB. 清1ccに リウ ム,塩. し たB. 1). 添 加 し,更. に血. 種 濃 度 の 塩 化 ナ ト リウ,塩. 2.5mgを. 化 カ. 化 カ ル シ ウ ム 水 溶 液0.1cc宛. そ の0.01ccを 液pH. S. P. 就 き,各. 添 加 し,. 試 料 と して ベ ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー 緩 衝. 8.6で. 濾 紙 電 気 泳 動 を 行 な い, Alb.に. S. Pの. 結合. 吸 光 係 数 を 求 め て み た.. 塩 化 ナ ト リ ウ ム の 影 響 第14表 の 通 りAlb.と. 結 合 し たB.. S. Pは. 対 照 と 比 較 して,塩. 化 ナ トリウ. ム の 添 加 に 依 つ て 結 合 に 変 化 が 認 め られ な い..
(10) 7262. 岩. 第14 表. 血 清 にB.. S. P及. び 塩 化 ナ トリ ウ. ム を 加 え た 際 のAlbに B. S. Pの. 2). 見. 整. 親. 第16表. 血 清 にB.. 結 合 した. 吸光係数. B. S. Pの. 塩 化 カ リウ ム の影 響. 第15表 の通 りAlb.に. S. P及. B. S. P結. 結 合 したB. S. Pは,塩. 加. 合 力 を 変 化 さ せ る の か 或 い はB.. ち10%. る.又 塩 化 カ リウ ムの 濃度 が濃 くな る につ れ て結 合. 濃 度(1%,. 5%,. 量 も増 加 して い る.. 化 カ ル シ ウ ム 水 溶 液 各1ccを S. P吸. たB.. S. Pの. B. S. P.水 10%,)の. 溶 液5cc宛. に各種. 塩 化 ナ ト リ ウ ム,塩 加 え,更. ダ ー 水 溶 液 を 加 え 発 色 さ せ て,そ. び 塩化 カ リ ウ. ム を 加 え た 際 のAlbに. S. Pに. 作 用 して 之 を 変 化 させ る の か を 見 る 為 後 次 の 実 験 を 行 な つ た.即. 血 清 にB.. 結 合 した. 吸光係数. した 場合 対 照 と比 較 して 著 明 に結 合 量 が 増 加 して い. 第15表. び塩 化 カル シ ウ. ム を 加 え た 際 のAlbに. に苛 性 ソー. の 吸光 係 数 を求 め. て 見 た.. 結 合 し. そ の 結 果 は 第17表 の 如 く,塩 化 カ ル シ ウ ム は 明 ら. 吸光係数. か にB.. S. Pに. ト リ ウ ム,塩. 使 用 しそ の発色 を 抑 制 す るが塩 化 ナ 化 カ リ ウ ム はB.. 第17表. 10%. B. S. P水. S. P自. 体 に は作 用 し. 溶液 に各種 濃 度 の. 塩 類 溶液 を添 加 した際 の 吸光 係 数. 3). 塩 化 カ ル シ ウ ム の 影響. 第16表 の通 りAlb.に. 結 合 したB. S. Pは,塩. 化. な い.又. 現 在 迄 の 研 究48) 49)50)51)で は, Na‑Ion,及. カ ル シウ ム の 添 加 後依 つ て結 合が 明 らか に 減 少 す る.. びK‑IonはAlb.と. 然 し塩 化 カ ル シウ ム の濃 度 が 変 つ て も,之 に依 る結. つ てAlb一. 合 量 の著 明 な差 は見 られ ない.. ウ ム,塩. 以 上 の如 く, Alb..とB.. S. Pの. 結 合 に対 す る塩. 化 ナ トリウ ム,塩 化 カ リウ ム,塩 化 カル シ ウム の 影 響 は それ ぞ れ 異 り,塩 化 ナ トリウ ムは 殆 ん ど影響 を. とB.. 結 合 しな い と され て い る.従 S. Pと. の 結 合 に 対 す る塩 化 ナ ト リ. 化 カ リウ ム の 影 響 の 差 は 両 者 の 解 離 度 の 差. に 依 る 事 が 推 定 さ れ,解 ClIonのAlb.に. 離 し や す い 塩 化 カ リウム. 対 す る 影 響 が 考 え ら れ る.. 兎 も 角 体 液 内 に 存 在 す る塩 化 ナ ト リウ ム,塩. 与 え な いが 塩 化 カ リはそ の 結 合 を 増 強 させ,塩 化 カ. リ ウ ム,塩. ル シ ウ ム は結 合 を 抑 制 す るか の 如 き結 果 を 示 した.. 合 に 対 す る 影 響 を 見 た 結 果,塩. そ こで 果 して これ 等 の 塩 類 はAlb.に. な 影響 は無 い が塩 化 カ リは その 結 合 を増 強 す る如 く. 作 用 して そ の. 化 カ ル シ ウ ム のAlb.とB.. S. Fと. 化カ の結. 化 ナ トリウムは著明.
(11) Bromsulphalein試. 作 用 し,塩 化 カ ル シ ウ ム はB.. S. P自. 験 に関 す る知見 補遺. 5.. 体 に 作 用 し,. 7263. 4の 場 合尿 素,乳 酸,尿. 酸 を 添 加 す ると それ. ぞれ 添 加 しな い 場 合 よ り結 合 は 低 下 す るが,尿 素 は. そ の 発 色 を 抑 制 す る 如 く作 用 す る と 考 え ら れ る.. 緩 衝 液 の種 類 に 依 つ て一 定 の 結 合 を示 し,乳 酸 で は 結. 論. 1. 人 血 清Alb.,血 N/100苛. 漿,血. 極 め て僅 かの 結 合 の低 下 を 示 し,尿 酸 で は可 成 り大. 清 にB.. 性 ソ ー ダ ー 水 溶 液 に てpH. せ る る と, 593mμ,. 590mμ,. S. Pを. 加 え. 588mμ. に そ れ ぞ れ吸. 結 合 に 於 い て, B. S. P濃. て 逆 にAlb.と. 結 合 し たB.. 度 の減 少 に従 つ. S. Pの. の結 合 に 影 響 を 与 え な いが,塩. ル シ ウム はB. S. P自 体 に作 用 し苛 性 ソー ダ ー に依 る発 色 を 抑 制 す る よ うに作 用 す る.. 結 合 して い. るか 乃 至 は 濾 紙 に 吸 着 さ れ て い る残 余 の 微 量 の 割 合 は 略 々 一 定 で あ る.. 本 論 文 の 要 旨は 第13回 中 四 国 内科 学 会 に 於 い て発 表 した. 尚御 指 導 を 戴 い た岡 山 大 学 医学 部 第 一 内 科 教 室小. 3. 濾 紙 電 気 泳 動 後 使 用 す る緩 衝 液 の 種 類 を 変 え 血 清Alb.とB.. 血 清 に 於 い て 塩 化 ナ トリウ ムは. S. Pと. 割 合 は 漸 増 し,. 遊 離 色 素 の 割 合 は 漸 減 す る が, Glob,と. B. S. Pの. Alb.とB.. 化 カ リウ ムは結 合を増 強 す るよ うに 作 用 し,塩 化 カ. 紙 電 気 泳 動 を 利 用 した 人 血 清 蛋 白 質 と. B. S. Pの. 6. 同 一pHの. 7.5と し 発 色 さ. 収 極 大 を 認 め る. 2.濾. きな結 合 の低 下 を 示 す.. S. Pの. 結 合 に 及 ぼ す 影 響 を 見 る と,. ベ ロ ナ ー ル ソ ー ダ ー ・塩 酸,第. 坂淳 夫 教 授 に感 謝 の意 を表 し ます. 又 御 指 導 を 戴 い た国 立 岩 国 病 院 副院 長 岩 原 定 可 博. 一・ 燐 酸 カ リ ・第 二 燐. 士に 感 謝 の 意 を表 します.又 本研 究 の機 会 を 与 え ら 酸 ソ ー ダ ー,棚. 素 ・棚 酸,ベ. ロナ ール ソー ダ ー緩 衝. 液 の順 に 結 合 を 阻 害 す る傾 向 に あ る. 4. 正 常 人 血 清 及 び 蒸 溜 水 釈 稀 血 清 に 緩 衝 液 を 加. れ ま した 国 立 岩 国病 院 長 渡 辺 真澄 博 士に 感 謝 の 意 を 表 します. 本 研究 は厚 生 省 科学 研 究 費に よつ た。. え てpHを. 変 え 血 清AlbとB.. S. Pの 至9附. 結合への. 影 響 を 見 る と,何. れ もpH8乃. 近 で 結 合 は急. 激 後 減 少 し, PH. 12附 近 で 結 合 は 殆 ん ど0と. な る.. 主 1) S. M. Rosoenthal 84;. J. A. M. A.. 文 14). 15, 1925.. 2) S. M. 84:. & F. C. White:. 要. Rosenthal 1112,. 3) 斉 藤 宏,伊. & F. C. White:. 1925. 藤 智 恵 子,小. 大 学 医 学 会 雑 誌, 39:. 4) H. Popplr:. 泉 満 佐 子 ・各 古 屋 市 立 3,昭. et al.:. Ann.. 前原 茲 郎. 日 消 化 会 誌, 48;. 松 田武 夫. 日 内 会 誌39;. 230,. 1948.. Int.. Med.. 8) A. Hurst et al... 12,昭 3,昭. 16). W.. 17). F.. 18). 22:. 和25年.. 和25年,. 20). A. Rev. Tbc. 38; 229,. Felder. 10) Keeton et al.: Ann. Int. Med. 28: 521, 1948. New. Engl.. 21). 23). J. Clin. Invest. 27;. 580,. P.. Z.. Shallenberger:. A.. J,. 1947. al:. et. Circulation.. al.;. 2;. Pediatrics. Ingelfinger.. M.. A.. 9;. 286,. 1950.. 421,. 1952.. Gastroenterology. Mills. 62; &. Technic. 4th.. C.. W.. I.. H:. A. J. M. S. 213; 81, 1947.. &. A.. 11,. Dsagstedt:. 646,. Approved.. Ed. &. 27;. 600,. Klotz. Arch.. Int.. 1938.. Boerner:. Wirts.. M.. C.. 216,. Kolmer. et. Laboratory.. 1945. B.. K.. Bradford:. J.. Clin.. 1948. al.;. J.. Am.. Chem.. Soc.. 68;. 1946. Bennhold. :•gDie. Eiweisskorper. plasmas.". Dresden. 楠 智 一,尾. 島 和 男:生. 24) I. M. Klotz, 2299,. 1948. 13) T. E. Machella:. 22). J. Med.. MB; 556, 1948. 12) M. H. Hicks et al... et. Obinsky J.. 1486,. Tagnon et al... & 80,. Invest.. 1938. 11) H. J.. Schneider 214;. Med.. A. J. M. S. 214; 431, 1947.. 9) Lewinson & Siegl:. S.. L.. 19). 7). A.. M.. 1948.. 1945.. 6). L.. 15). 和27年.. J. A. M. A 137;. 5) M. Teitelbaum 653,. J. A. M. A. 献. 1946;. &. et al.. 69;. Leipzig.. J.. Blut. 1938.. 体 の 科 学, 4;. 1609,. 25) 1. M. Klotr : Chem.. des. 260,. 1953.. Am. Chem. Soc. 68; 1947.. Revs.. 41 ; 393,. 1947..
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(13) Bromsulphalein試. 3. the. Observing. change. in order. the. influence. of various. buffer. of veronal. soda,. to the. 験 に関 す る知 見補 遺. combination. used for the. hydrochloric. paper acid,. of serum. 7265. albumin. electrophoresis, primary. potassium. phosphate,. phosphate, borax, 4. Observing. boric acid and veronal soda buffer. the influence to the combination of serum. albumin. the. after. human. change. distilled. water,. became. the. almost. 5.. In. of urea, fixed. of pH zero. the. lactic. addtion. combination around. the. pH. experiment,. acid. uric. by. of combination. or the. buffer. them. normal. rapidly. bromsulphasein. dcreased. secondary. and and. around. on. was obstructed natrium. bromsulphalein dilutied the. on. serum pH. with. 8-9 and. it. 12. in. of. into. were. the. acid. kind. on the. of. of. previous. combination. cline. the. and. the combination. combination. each. buffer. addition. of. than on. the. lactic. was. without. more their. addition. acid. and. decreased. with. addition,. but. of urea. the. the. considerably. the it. addition. showed. the. scanty. de. extremely remarkable. decline. of combination. 6. in the chloride. Sodium serum acted. chloride. of same. pH,. gave. no influence. potassium. to bromsulphalein. itself. chloride and. of the combination acted acted. of albumin. to increase. to control. the. the. and bromsulphalein. combination,. coloration. by. and caustic. calcium soda..
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