抗 原,抗 体 お よ び 補 体 の 物 理 化 学 的 研 究
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(2) 448. 望. え て 浮 遊 液 と し,60℃. 月. 1時 間 殺 菌 後 ,家 兎 耳. 静 脈 よ り3目 間 隔 で 増 量 法 に よ り数 回 免 疫 し た. ④. 義. 夫. 去 し,こ れ を 抗 体 抽 出 液 とす る.沈 降 抗 体 価. 測定 の際には10%ア ラビヤゴム生理的食塩水 液 を 抽 出 液 の1/9量入 れ,緒. Forssman抗. 体.. を 測 定 し た.又. 海 〓 を 失 血 死 さ せ た 後,腎. を 取 り,生 理 的. 食 塩 水 に て 十 分 残 留 血 液 を 洗 源 した 後,10倍. 方 法 に よ り抗 体 価. 細 菌 お よび血 球 凝 集素 価測 定. の 際 に は 抗 体 抽 出液 を 生 理 的 食 塩 水 に て 倍 数 稀 釈 し,抗 体 液0.5ccに. 対 して 抗 原 と し て,. 量 の生 理 的 食 塩 水 を 加 え て ホ モ ヂナ イザー に. 細 菌 凝 集 反 応 の 場 合 に は, 10ccの 生 理 的 食 塩. よ り磨 砕 し,遠 心 沈 澱 に よ り粗 大 粒 子 を 除 去. 水 に 大 腸 菌 を3Ose浮. 後,こ. 下 し,血 球 凝 集 反 応 の 場 合 に は2.5%血. の 腎 臓 乳 剤 を5ccづ. つ,. 7日 間 隔 で3. 回 家 兎 耳 液 脈 よ り注 射 し,全 採 血 後56℃. 15. 遊 液 を2滴 添 加 す る.混. 分 間 非 働 化 を 行 い使 用 し た .. 器 に2時. ⑤. 後,成. 抗鶏血球凝集素 10%鶏. 血 球 生 理 的 食塩 水浮 遊 液 を 家 兎耳 静. 脈 よ り1ccよ. り5ccま. 間 隔 で 注 射 し,数 2). で 漸 次 増 量 し て3日. 回 免 疫 後 使 用 し た.. 電 流 整 流 装 置 を 使 用 し た. 50,お. よ び2.5%山. 3). よびNo.. 51を. pH. 8.0,イ. 8.5,イ. オ ン強 度0.045を. 流 は0.3mA/cmを. 用 い た.. 5分 間 乾 燥 し,. よ るBromphenol‑Blue,酢. 酸,昇. 汞 混 合 液 に て30分 固 定 染 色 し, 2%酢 余 剰 色 素 を 脱 色 乾 燥 し た.流. 酸にて. 動 パ ラ フ イ ン法. に よ り半 透 明 と し 直 接 法 に よ り光 電 比 色 計 に プ ラニ メー タ ー に よ. り測 定 し た. 4). 抗 体 抽 出 法.. 抗 体 抽 出 に際 しベ ロ ナール 緩 衝 液 を用 い た 場 合 に は 抽 出 後 の 溶 液 のpHが. ア ル カ リ性 に. 傾 き,特. に 血 球凝 集反 応 に お い て溶 血 を 起す. た め,燐. 酸 緩 衝 液 を 使 用 し た.抗. 血 清 を泳 動. 後 の 濾 紙 を 乾 燥 前 に, 1/2に 縦 断 し,そ の 一 部 を1cm巾. に 泳 動 方 向 に 直 角 に 横 断 し1ccの 生. 理 的 食 塩 水 を 入 れ た 試 験 管 に 入 れ, 温(30℃) す る.十. 1夜 氷 室 に 置 き,振 分 抽 出 し た 後,遠. え,. と し,溶 血 の程 度 に 応 じ て(〓)(〓)(+), し た.尚. 残部 の濾 紙. は 対 照 と して 染 色 定 量 した.. 1.. 実 験結 果 お よび 考按. 家 兎 血 清 分 屑 お よ び 抗 体 価 の免 疫 経 過 に お け る 変 動 に つ い て: 体 重2200gの. 卵 白Albumin. 泳 動 後 の 濾 紙 を100℃,. て 測 定 し,各 成 分 比%は. 〓 補 体2単 位,お. オ ン強. 泳 動 図 測 定 法.. Durrumに. 対 し て,海. 完 全 な 不 溶 血 を(‑)と. よ び,ペ ロ ナ ー ル ソ ー ダ‑酢 酸 ソ ー. 使 用 した.電. に24時 間 氷 室 に放 置 し た. 羊 血 球 浮 遊 液 を0.5cc加. 3. 緩 衝 液 は 燐 酸 緩 衝 液,. ダ‑酢 酸 緩 衝 液pH. の 孵卵. 績 を 判 定 し た.溶 血 素 価 測 定 の 際 に は,. 抗 体 液0.5ccに. 用 い た.. 度0.045お. 37℃. 球浮. 間 放 置 し て 溶 血 価 を 測 定 し完 全 溶 血 を(〓). 泳 動 装 置 は 小 林 式 濾 紙 電 気 泳 動 装 置 を 用 い,. 濾 紙 は 東 洋 濾 紙No.. 間 入 れ,更. 和 後,. 々. 37℃ の 孵 卵 器 に2時 間 置 き,更 に 氷 室 に24時. 濾 紙 電 気 泳動 法 .. 電 源 は,定. 遊 さ せ た も の を2滴. 2時 間 室. 盈 しつ つ 抽 出. 心 して濾 紙 屑 を除. 家兎 に明礬 吸 着 を行つ た結 晶 9mgを1回. 量 と し, 4日 毎 に. 免 疫 し次 回 注 射 の 直 前 に,耳. 静 脈 よ り 一部 採. 血 し て 血 清 を 分 離 した.こ. れ を濾紙 電 気泳 動. 法 に よ り成 分 分 屑 を,又,緒. 方氏 抗原 抗体 稀. 釈 法 に よ り抗 体 価 を 測 定 した.電 気 泳 動 図 お よ び 抗 体 価 を 図1(A)〜(F)に 示 し,且 第1図. (A) 正 常 家 兎血 清. これ ら の.
(3) 抗原,抗 体 お よび補体の物理化学的研究 (B) 抗 結 晶 卵 白Albumin家 1回. AG=抗. 原稀釈. AK=抗. 体 稀釈 (C). 兎血清. 449. (D). 4回. (E). 6回. 免 疫. 2回.
(4) 450. 望. (F). 月. 7回. 義. 夫. 第2図. 免 疫経過に よる家兎血清分屑変動図. 抗 体 価 と γ‑Globulinと 加 と 共 に23.1%よ. の 関 係 は 抗 体 価 の増. り29.2%に. 増 加 し,特. に. 免 疫初 期 にお いて 増加 が 大 き い 様 に 思 わ れ る.. 免 疫 と γ‑Globulinの 関 係 に つ い て, A. Tise lius10)は電 気 泳 動 法 に よ り血 清 がAlbumin, α‑, β‑, γ‑Globulinよ Globulinが. り な る 事 を 認 め γ‑. 免 疫学 的 に極 め て大 きな意 義を持. つ 事 を 述 べ て い る.又Van U氏. 価1:250000. は 免 疫 に よつ て 家 兎 抗 血 清 の 場 合 に は 正 常 家. 混 合 法1:250. 補 体 結 合 法1:2500. 沈 降 抗 体 量0.68mgN/cc. 結 果 を 総 括 し て,表1お. der Scheer11)等. よび 図2に. 兎 血 清 の γ‑Globulinと 同 型 の γ‑Globulinが 増 加 し,一 方 抗 肺 炎 菌 馬 血 清 の 場 合 に は 正 常. 示 す.. 馬 血 清 に 見 ら れ な いGlobulinが. 表1. 出 現 し,更. 免疫経過 に よる家兎血清分屑. に 抗 原 抗 体 反 応 に よつ て 特 異 的 に そ の 成 分 が. 及び抗体価. 吸 收 され る 事 を 電 気 泳 動 法 お よ び 超 遠 心 法 に よつ て 研 究 し て い る.更 に 緒 方 は1952年 抗 鶏 血 球 家 兎 抗 体12)を電 気 泳 動 し,免 疫 経 過 に よ つ て,抗 体 価 の 増 加 と と もに γ‑Globulinが 増 加 す る 事 を 認 め て 居 る. 筆 者 の濾 紙電 気 泳動 法 に よる上述 の結果 も これ ら の 研 究 者 の 実 験 結 果 と よ く一 致 す る. 尚 濾 紙 電 気 泳 動 法 に よ る結 果 の 再 現 性 に つ い て 小 林7)8)は 条 件 を 一 定 に す れ ば 十 分 実 用 出. 以 上 の 結 果 よ り,免. 疫 経過 中 の血 清 蛋 白分. 屑 の 変 動 は 抗 体 価 の 増 加 と 共 にAlbumin分 屑 は 減 少 の 傾 向 を 示 し,そ 清 に お け る52.9%が7回 少 し た.抗 定 で あ り,又. 体 価 と α‑Globulinの β‑Globulinと. 減. 紙,緩. 流 等 の 電 気 泳 動 条 件 お よび 染 色 条 件. を 出 来 得 る限 り一 定 に し て 定 量 を行 つ た. 2.. 各 種 家 兎抗血 清 の抗体 局在 につ いて. 関 係 は不. の 関係 も不 定. で あ つ て, α‑Globulinは9.3〜11.4%, Globulinは12.4〜14.5%の. 衝 液,電. の値 は正常 家 兎血 免 疫 後47.9%に. 来 る と述 べ て 居 り,筆 者 も蛋 白 量,濾. β‑. 範 囲 で 変 動 し た.. 1). 濾 紙 よ りの 抗 体 抽 出 收 量 に 関 す る実 験.. 抗血清を電気泳動後,果 して抗体が完全に 抽 出 さ れ る か,又 緩 衝 液 に よ る 反 応 阻 止 を 受.
(5) 抗 原,抗. け る か 否 か を 知 る為 に,緩 に抗 結 晶 卵 白Albumin家 この 濾 紙 を1ccの の試 験 管 に1枚. 体 お よび 補 体 の 物 理 化 学 的 研 究. 衝 液 に 浸 した 濾 紙. 第3図. (A). 451. 抗 卵 白Albumin家. 兎 血 清(1)白. 兎 血 清0.05ccを つ け,. 生 理 的 食 塩 水 を 入 れ た3本 ず つ 入 れ,室 温(30℃),. 50℃ の 温 浴 中 に 置 い て2時. 40℃,. 間 時 々振 盪 抽 出. し,更 に24時 間 氷 室 に 入 れ て 抽 出 し た.又 じ抗 血 清0.05ccを1ccの し(原 血 清 の20倍. 生理 的 食塩 水 に稀 釈. 稀 釈),こ. び対 照 液 に10%ア. 同. れ ら抽 出 液 お よ. ラ ビ ヤ ゴ ム生 理 的 食 塩 水 液. を1/9量加 え て 比 重 を 増 し た 後,重. 層法 に よ り. 結 合 帯 濃 度 抗 原 を 加 え て 抗 体 価 を 比 較 した. この結 果 を 表2に. 第2表. 示 す.表. 中(〓)は15分. 以. 抗体抽出予備実験. 稀 釈 抗体 価. 内 に,(〓)は30分 内,(+)は2時 あ らわ す.本. 以 内 に,(〓)は1時. 1:500. 間以. 間 以 内 に 反 応 を 示 した も の を 表 の 結 果 は 室 温(30℃),. 40℃,. (B). 抗 卵 白Albumin家. 兎 血 清(2)赤. は 何 れ も原 血 清 と変 化 な く,又 緩 衝 液 に よ る 反 応 阻 止 も な い 事 を 示 す.但. し, 50℃ に お け. る抽 出 液 の 抗 体 価 は 僅 か で は あ るが 弱 る傾 向 が あ る様 に 思 わ れ た.従. つ て以下 の抗体 抽 出. の 実 験 は 室 温 抽 出 法 を 用 い た. 2). 抗 体 抽 出 法 に よ る各 種 家 兎 抗 血 清 の抗 体 局在 に つ い て. 抗 結 晶 卵 白Albumin家. 兎 血 清3例,抗. 山. 羊 血 球 凝 集 家 兎 血 清3例,抗. 鶏血 球 凝集 家 兎. 血 清2例,家. 体2例,抗. 兎Forssman抗. 菌凝 集 家 兎血 清2例. 大腸. を 濾 紙 電 気 泳 動 し,泳 動. 方 向 に 直 角 に 切 つ た 濾 紙 よ り各 分 屑 を 生 理 的 食 塩 水 に 抽 出 し,こ れ に 抗 原 を 加 え る事 に よ つ て 抗 体 の 局 在 に つ い て 研 究 を 行 つ た. (1) 抗 結 晶 卵 白Albumin家. 稀 釈 抗体 価. 兎 血 清.. これ 等 抗 体 の 濾 紙 電 気 泳 動 図 を 図3,. (A)(B). (C)に示 し,各 分 屑 抽 出 液 の 抗 体 価 を 泳 動 図 の 下 表 に 示 す.図. 中 の 横 軸 は 泳 動 距 離(cm)を. 示 し,縦 軸 は 蛋 白結 合 色 素 の 吸 光 度 を 示 す. 各 抗 血 清 の緒 方 氏 法 に よ る稀 釈 沈 降 素 価 は,. 1:500.
(6) 452. 望. (C). 抗 卵 白Albumin家. 月. 兎 血 清(3). 義. 夫. 第4図. (A) 抗 山 羊 血 球 凝 集 家 兎 血 清(1). 稀 釈 抗 体 価1:1000 凝 集 素 価1:1000. 1%の. 結 晶 卵 白Albuminを. 500,. 1:500,お. 基 準 と し て,. よ び1:1000で. 体 は 殆 ど γ‑Globulinに. 1:. あ つ た.抗. 含 有 さ れ る が,. β‑. Globnlinに. も極 微 量 に 存 在 す る も の と思 わ れ. る.即. γ‑Globulin分. ち,. は 夫 々1:20,. 1:50お. β‑Globulin分 2.5お. 屑 の抽 出液 の抗体 価 よ び1:20で. あ り,. 屑 抽 出 液 の 抗 体 価 は1:1,. よ び1:2.5で. (B) 抗 山 羊 血 球 凝 集 家 兎 血 清(2). 1:. あ つ た.. (2) 抗 山羊血球凝集お よび溶血家兎血清. 抗 血 清3例 1. 2500お. の 血 球 凝 集 価 は 夫 々, よ び1:3200で. 血 価 は1:6400で. 1:1000,. あ り,第3例. あ つ た.こ. の溶. れ ら抗 血 清 の 電. 気 泳 動 図 お よ び 抽 出 抗 体 価 を 図4(A)(B)(C)に す.即. ち,. 夫 々1:8,. γ‑Globulin分 1:16お. の 溶 血 素 価は1:8で. 屑 抽 出液 の凝集 価 は. よ び1. 4で あ り,第3例. あ つ た.こ. れ に 比 し て,. β‑Globulin分. 屑 抽 出 液 の 抗 体 価 は 第2例. い て1:2ま. で 反 応 し た が,他. の 存 在 は 見 ら れ ず,こ. 示. にお. の例 で は抗 体. れ ら の 結 果 よ り抗 山 羊. 血 球 凝 集 お よ び 溶 血 性 抗 体 は 殆 ど,. γ‑Globu. linの み に 含 ま れ る も の と 思 わ れ る.. (3) 抗鶏血球凝集家兎血清 抗 血 清 の 血 球 凝 集 価 は1:1024お. よ び1:. 凝 集 素 価1:2500.
(7) 抗原,抗 体お よび補体の物理化学的研 究 (C) 抗山羊血球凝集及 び溶血家兎血清(3). 453. (B) 抗 鶏 血 球 凝 集 家 兎 血 清(2). 凝 集 素 価1:3200. 凝 集 素 価1:8192. 溶 血 素 価1:6400. 第6図. (A). Forssman抗. 体(1). 8192で あ り,こ れ ら の 電 気 泳 動 図 お よび 抽 出 抗 体 価 を 図5, 第5図. (A)(B)に示 す.電. 気 泳動 図 中の. (A) 抗 鶏 血 球 凝 集 家 兎 血 清(1). 溶 血 素 価(山. 凝 集 素 価1:1024. 羊 血 球)1:2000.
(8) 454. 望. (B). Forssman家. 月. 義. 兎 血 清(2). 夫. 抗 血 清 の 山 羊 血 球 に 対 す る 溶 血 価 は1: 2000,お 2000お. よ び1:8000を よ び1:2000,で. よ び 抽 出 抗 体 価 を 図6,. 示 し,凝. 集 価 は1:. あ る .電. 気 泳 動 図お. (A)(B)に 示 す.こ. れ等. (B) 抗 大 腸 菌 凝 集 家 兎 血 清(2). 溶 血 素 価(山. 羊 血 球)1:8000. 凝 集 素 価1:500 点 線 は 抽 出 抗 体 価 を 示 し て い る.こ 果 は. γ‑Globulin分. 屑 の み に 抗 体 が 含 まれ て. い る 事 を 示 す も の で あ る.即 は γ‑Globulin分 1:64を (4). ち,抽. 出抗 体 価. 屑 の み に 含 ま れ1:8お. よび. 示 し た.. 家 兎Forssman抗. 第7図. れ らの結. 体.. (A) 抗 大 腸 菌 凝 集 家 兎 血 清(1). の 結 果 よ りForssman抗 (γ1‑Globulin),に β‑Globulin分. 体 は γ‑Globulin,. 主 とし て 含 有 さ れ一部 は. 屑 に 含 有 さ れ る も の と 思 わ れ る.. 図 中 点 線 は 抽 出 抗 体 価 を 示 す が,抗. 体 の局在. は 抗 鶏 血 球 凝 集 家 兎 血 清 に 比 し て 広 く分 布 し γ‑Globulinお. よ び γ‑Globulinと. β‑Globulin. と の 中 間 の 易 動 度 を 有 す る 部 分(γ1‑Globulin 相 当 部)に. も 可 成 り存 在 す る 様 に 思 わ れ. る. (5). 抗 大 腸 菌 凝 集 家 兎 血 清. 抗 血 清 の 電 気 泳 動 図 を 図7(A),(B)に. 凝集素価1:1000. 抗 体 価 は 失 々1:1000お た.原. よ び1:500で. あ つ. 血 清 の 凝 集 価 が 低 い た め に,明. 確 な結. 果 は 得 られ な か つ た が 部. β‑Globulinに. れ る:. 示 す.. γ‑Globulinお. よび一. 抗体 が 含 まれ る もの と思 わ.
(9) 抗原,抗 体 お よび補体の物理化学的研究 第8図. (A) 抗A標. 準 人血 清. 筆 者 はLipoidに. 455. 対 す る抗 体 と 蛋 白 質 に 対 す. る 抗 体 の 局 在 の 差 異 に つ い て 興 味 を 感 じ濾 紙 泳 動 法 お よ び 塩 析 法 に よつ て 検 討 し よ う と し た. 一 方 血 清 の 塩 析 法 に 関 し て はHowe17)に つ て 塩 析 に 要 す る 芒 硝 の 濃 度 に よ bulin,. Pseudoglobulinの. の 後Keckwick18), rick21)等. よ. りEuglo. 名 称 が 与 え ら れ,そ Majoor19),. Milne20),. Kib. に よつ て血 清 の 芒 硝 塩 析 法 と電 気 泳. 動 に よ る血 清 成 分 分 屑 濃 度 と の 関 係 が 研 究 さ れ た.. 凝. 集. Majoorは. 夫 々Eu‑お. 価1:1024. 芒 硝 濃 度18.5%, よ びPseudoglobulinが. Euglobulinは. 主 と し て. globulinは べ,. 26.3%で. よ びPseudoglobulinが. 夫 々. 沈 澱 し,前. に 菅 野22)は. 芒 硝 濃 度15%に. お け. β‑Globulin=10.3%,. Globulin=81.7%で. あ り,. 度 で は. α‑Globulin=20.9%,. β‑. γ‑Globulin=20.9%,. 度 で はAlbumin=19.1%,. lin=61.7%,. α‑Globu. β‑Globulin=19.2%,. γ‑Globulin. =0%,更. に26.8%濃. 度 の 上 清 で はAlbumin. ≒100%で. あ る と 述 べ て い る.. 又 緒 方23)はKeckwickの 動 分 離 法 に よ り,馬. 価1:2048. 方 法 お よ び 電 気 泳 血 清 を 分 画 し,更. 屑 の 成 分 比 を電 気 泳 動 法 に る.こ. よ り 研 究. の 結 果 に よ る と14%濃. β‑Globulin=3.0%,. 塩 析 法 に よ るForssman抗. 体 お よび抗 鶏. 血 球 凝 集 抗 体 局 在 の 差 異 に つ い て. 1927年Selter9)はForssman抗 bulin中. に,又. globulin中. 体 はEuglo. 蛋 白 質 に 対 す る 抗 体 はPseudo. に 含 有 さ れ て い る と 述 べ て い る.. 20%濃. し て い. 度 の 分 画 で は. あ り,又pH. 18%. α‑Globulin=. 18.0%,β‑Globulin=59.2%, 21.6%で. に 各 分. γ‑Globulin=97%,. 濃 度 で はAlbumin=1.3%,. (6). γ‑. 19.6%濃. Globulin=43.0%, 26.8%濃. ち,. る 分 画 の 成 分 比 は. α‑Globulin=8.0%,. Albumin=15.2%,. 集. 以. 上 の 研 究 を 参 照 し て 人 血 清 を 芒 硝 で 分 画 し各. 準人 血清. 分 画 を 電 気 泳 動 に よ り検 討 し て い る.即. 凝. 者. 者 は α1‑+α2‑Globulin. と 一 致 す る と 述 べ て い る.更. (B) 抗B標. Pseudo. 一 致 す る と述. 芒 硝 濃 度19.6%,. は β‑+γ‑Globulin,後. 沈 澱 し,. γ‑Globulin,. α‑+β‑Globulinに. Milneは. Eu‑お. 26.8%で. γ‑Globulin= 4.9に. お い て32%と. 度 の 間 の 分 屑 はAlbumin=40.6%,. α‑Globulin=59.4%で 筆 者 は. γ‑Globulinお. 主 眼 を お き,. Forssman家. あ る. よ び. β‑Globulinに. 兎 抗 体 お よ び 抗 鶏 血. 球 凝 集 家 兎 血 清 を 芒 硝 濃 度14%,. 20%お. よ.
(10) 456. 望. 月. 義. 夫. び そ の 上 清 の 三 分 屑 に 分 画 し,各 塩 析 濃 度 芒. む が,そ. 硝 溶 液 で 沈 澱 物 を 洗 滌 し た 後,生. Globulin=24.2%,. β‑Globulin=43.3%,. Globulin=12.6%含. ま れ る 事 が 認 め ら れ た.. に 透 析 脱 塩 し た.各 し て(1%)各. 理 的 食塩 水. 分 屑 の蛋 白 濃 度 を 一定 と. 分 屑 の 溶 血 素 価 お よび 凝 集 素. 価 を 測 定 し た.又. 濾 紙 泳 動 法 に よ り各 分 屑 の. 成 分 比 を 求 め た.こ. 20%に. の 成 分 比 はAlbumin=19.9%,. お け る 上 清 は. 分 を 含 み,. み. 表3,(A)(B)に. あ つ た .更. 濃 度 に お け る沈 澱 物 は 殆 ど γ‑Globulinの. β‑Globulin=15.5%で. 20.7%,. 第3表. 塩 析 法 に よ るForssman抗. (A). Forssman抗. 1). 溶 血 反 応(山. に. は 各 分 屑 の 抗 体 価 を 測 定 し た 結. 果 が 示 さ れ る.. 体 お よ び 抗〓 血 球 凝 集 素 局 在 の 差 異 に つ い て.. 体. 羊 血 球). 原 血 清 溶 血 価1:4000(反. 2). 外 の 各 成 α‑Globulin=. 硝. お け る沈 澱 物 は 各 成 分 を 含. γ‑Globulin以. γ‑. Albumin=63.8%,. の 結 果 に よ り, 14%芒. よ りな り, 20%に. α‑. 凝 集 反 応(山. 応 限 界1:8000). 羊 血 球). 原 血 清 凝 集 素 価1:2000. (B) 抗〓血球凝集家 兎血清. 原 血 清 凝 集 素 価1:16000. 即 ちForssman抗 度 の 沈 澱,お. 体 に お い て は14%芒. よ び14〜20%濃. 硝濃. 度 に お け る沈 澱. の 抗 体 価 は 殆 ど 変 化 な く20%濃. 度 以上 の分 画. に は 殆 ど抗 体 は 存 在 し な か つ た.又. 山羊血 球. に 対 す る 凝 集 反 応 に つ い て も同 様 で あ つ た. 更 にForssman抗. 体 局 在 の 対 照 と し て,抗. 鶏.
(11) 抗 原,抗. 体 お よび 補 体 の 物 理 化 学 的 研 究. 血 球 凝 集 家 兎 血 清 を 同 様 分 画 し,各 分 屑 の 抗 体 価 を 測 定 した と こ ろ14%濃 価 は1:1280で. の分 屑 は1:10ま. 示 し,又20%濃 で 反 応 した.又. は 殆 ど γ‑Globulinに. 度以 上. Globulinに 2). 既 述 の濾 紙. bulin, (γ1‑Globulin)お 広 く存 在 す るが,抗. 体 の 分 布 は γ‑Glo. 3). 鶏 血 球 凝 集 素 は 殆 ど γ‑. 含 有 され 極微量渉. γ‑Globulinの. み に 含 ま れ る.. 抗 鶏 血 球 凝 集 家 兎 血 清 の 抗 体 は γ‑. 4). み に 含 有 さ れ る.. 家 兎Forssman抗. よび. 体 は. γ‑Globulinと. (γ1‑GloUulin),極. (7) 抗A型,お. ま れ る 様 に 思 わ れ る.. 血 球 人 血 清.. 5). 人 血 清 中 に 存 在 す る抗 体 の 局 型 を 検 討 す る 為 に 北 陸 血 清 製 造 所 製 の 抗Aお. 游. す る.. した.そ. 6). 紙 抽 出液 の凝 集価 を測 定. の 結 果 を 図8 (A) (B)に示 す.こ. の結 果 よ り血 液 型 抗 体 は 抗A,お. れら. よび 抗Bと. β‑Globulinに. Forssman抗. 体 の 局 在 を 研 究 し,抗. て 存 在 す る 事 が 認 め ら れ た.. 正常 に 比 し て 特 異 と思 わ れ る.こ の 原 因 に 関 の マ ー ゾニ ンが 添 加. 7) は. に 加 え37℃,. 2時. 間置い た場合 の人 血清 が 正常 人 血清 に 比 して. 抗A型. Pseudoglobulin分. お よ び 抗B型. γ‑Globulinに. され て あ る為 で は な い か と思 わ れ る.最 近 荒 木24)もマ ー ゾ ニ ンを1000倍. 鶏 血球 凝. 集 素 は 主 と し てEuglobulinにForssman抗. 抗Aお. して は 本 血 清 が5000倍. 存在. 塩 析 法 に よつ て 抗 鶏 血 球 凝 集 素 と. 体 はEuglobulin,. 血 球 人 血 清 の電 気 泳 動 像 が. も含. 部 は β‑Globulinに. も γ‑Globulinに 含 有 さ れ る事 を 認 め た.尚 よび 抗B型. 中 間 部. 抗 大腸 菌凝集 家 兎 血清 の抗 体 は 主 とし. て γ‑Globulinに,一. 清 を濾 紙 泳 動 し対 応 す る人 血 球 の2.5%浮 液 を抗 原 と して,濾. 一部は. 血. よび 抗B人. γ‑Globulinお. β‑Globulinの. Globulinの み に 存 在 す る事 が 認 め ら れ た. よび 抗B型. β‑. 含 ま れ る 傾 向 が あ る.. Globulinの. よ び β‑Globulinま で. 兎血 清 の 抗 体. 抗 山羊 血 球家 兎血 清 の凝集 素 お よび溶 、. 血 素は. 体 と抗 鶏 血 球 凝 集 素 と に つ い て. 比 較 す る と, Forssman抗. 抗 結 晶 卵 白Albumin家. 度にお. 電 気 泳 動 後 抽 出 法 に よ り測 定 し た 抗 体 分 布 を Forssman抗. の 結 果 を 得 た.. 1). 度分 屑 の 抗 体. あ り, 14%〜20%濃. け る分 屑 は1:160を. し,次. 457. 血 球 人血 清 の抗 体. 含 有 さ れ る.. (本 論 文 要 旨 は 昭 和30年6月,岡 通 常 例 会,お. 屑 に渉 つ. 山 医 学 会 第469回. よ び 昭 和30年11月,東. 京 に お け る第6. 回 電気 泳 動 研 究 会 総 会 に お い て 発 表 した.). 大 き い γ‑Globulinを 示 す と述 べ て い る.. 稿 を 終 るに 当 り,御 懇 篤 な る御 指 導 お よ び 御 校 閲 を 賜 わ つ た 恩 師 緒 方 益 雄 教 授 に 深 く感 謝 致 し ます.. 結. 論. 又 有 益 な 御 助 言 を 戴 き ま した 公 衆 衛 生 学敎 室緒 芳 正. 濾 紙 電 気 泳 動 法 に よ り抗 血 清 を 電 気 泳 動 し,. 名 講 師 に 感 謝 致 し ます.. 抗体 を 抽 出す る 方 法 に よ つ て そ の 局 在 を 研 究. 文. 献. 1) Haugaard, G. & Kroner, T.: J. Am. Chem.. 235. (1951). Soc.,70, 2135 (1948) 2) Durrum, E. L.. J. Am. Chem. Soc., 72,. 7). 小 林 茂 三 郎:生. 2943 (1950) 3) Cremer, H., & Tiselius,A.. 8). 小 林 茂 三 郎,森. achaften,37, 397 (1950) 5) Kunkel, H. G., & Tiselius,A .. 学,. 2,. No.. 1,. 3. 五 彦:濾. 紙 電 気 泳 動 法 の 実 際,. 南 江 堂(1955) 9). Selter.. Z.. schr.. f.. Immunitatsf.,. 53,. 113. (1927) 10). J. Gen.. Phyeiol.,35, 89 (1951) 6)Flynn, F. V., & De Mayo, P.: Lancet 261,. 化. (1954). Biochem. Z.. 320, 273 (1950) 4) Grassmann,̲??̲‑W., & Hannig, K .:Naturwissen‑. 物 物 理. 11). Tiselius,. A.,. Kabat:. Scheer,. J.,. 119. (1939). Van. der. R.. W.. G.. J.. J.. Lagsdin,. Immunol.. Exp.. Med.,. J. B. 41,. 209. &. Wyckoff, (1941). 69,.
(12) 458. 望. 12). 緒 方 正 名.生. 物 物 理 化 学 ,. 13). 太 藤 重 夫,阿. 部 長 雄. 78 14). 中 村 弘,曾. 良 忠 雄:生. Williams,. C.. 397,. A.,. 404. Kekwick, J.,. 17). 21. (1952). 生 物 物 理 化 学.. 1,. No.. 物 物 理 化 学,. 2,. No. .. 232. Howe,. P... J.. 18). Kekwick,. 19). Majoor,. 20). Milne,. 21). Kibrick,. 4,. R.. Immunol.,. K.:. Biol.. Chem.,. Biochem.. 49,. 93,. A.:. Biochem.. J.,. 32,. 552. L.. H.:. J.. Biol.. Chem,,. 169,. 583. Chem.,. 169,. (1947). (1936) J.. C.. J... 109. J. A.. Chem.,. A ., Cannan,. P. E.. R.. (1938). (1955). R.. 30,. Graber,. 夫. 3. (1955). 74, 16). 2,. 義. (1953). 68 15). 1, No.. 月. 17,. 22). 菅 野 浩:生. 23). 緒 方 正 名:生. 24). 荒 木 仁:最. Biol.. C.,. Blonstein,. 983. 595. M.:. (1947). J.. Biol.. (1948). 物 物 理 化 学,. 1,. 物 物 理 化 学, 新 医 学,. 10,. No. 2,. No.. 3, 63. No.. 2,. 10,. 148. (1953) 21. (1955) (1955). (1921). Department of Hygiene, Okayama University Medical School. (Director: Prof. Dr. M. Ogata) Studies. on. the Distribution. of Antibodies. by. Filter‑Paper. Electrophoresis. BY Yoshio Mochizuki The. procedures. determine. following. 1). Antibodies and. of. filter‑paper. distribution. The. fraction. and. the. of. results of. slightly. were. in of. anti‑goat. 3). Antibodies. of. anti‑hen's. 4). Forssman's. 5) somewhat 6). fraction.. antibody. inβ‑globulin. Antibodies in. of. β‑globulin. Antibodies. hen's. β‑globulin. Antibodies. and. extraction. from. it,. were. employed. to. obtained. anti‑crystalline. 2). slightly. electrophresis. antibodies.. egg. albumin rabbit. sera. were. found. in. γ‑globulin. fraction. red. blood. red of. fraction. anti‑"bacillus. cells. blood. rabbit. cells sera. These coli. was. facts. rabbit rabbit. sera. were. found. sera. were. found. found were. communis". in also rabbit. γ‑globulin. γ‑globulin. fraction.. in. γ‑globulin. fraction.. (γl‑globulin). demonstrated sera. in. by. were. fraction,. salting‑out. found. in. method.. γ‑globulin. and. fraction. of. anti‑A. and. anti‑B. blood. cells. human. sera. were. found. in. γ‑globulin.
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