博士論文審査報告書

早稲田大学大学院 先進理工学研究科

博士論文審査報告書

論 文 題 目

ヒト中心体タンパク質

の 同定と機能解析

Identification and Functional Analysis of a Human Centrosomal Protein,

Cep169/CRBP1

申 請 者

森 勇介

化学・生命化学専攻 分子生物学研究

2016 年 2 月

1

本 報 告 書 は 、 申 請 者 （ 森 勇 介 ） が ま と め た 博 士 論 文 に 対 し て 、 審 査 員 、 寺 田 泰 比 古 （ 主 査 ）、 小 出 隆 規 （ 副 査 ）、 中 尾 洋 一 （ 副 査 ）、 井 上 貴 文 （ 副 査 ） が 行 っ た 審 査 の 報 告 で あ る 。

博 士 論 文 審 査 の 申 請 は 、 2 0 1 5 年 1 1 月 2 日 に 開 催 さ れ た 博 士 学 位 論 文 予 備 審 査 会 と 、 2 0 1 5 年 1 1 月 1 9 日 に 開 催 さ れ た 化 学 ・ 生 命 化 学 専 攻 教 室 会 議 （ 以 下 、 教 室 会 議 ） の 議 を 経 て 、 2 0 1 5 年 1 2 月 1 7 日 に 開 催 さ れ た 先 進 理 工 学 研 究 科 運 営 委 員 会 で 受 理 さ れ た 。 教 室 会 議 で は 、 申 請 者 が 提 出 し た 博 士 論 文 概 要 書 を も と に 、 指 導 教 授 の 寺 田 か ら 内 容 の 説 明 が な さ れ た 。 博 士 論 文 は 、 題 目

「 ヒ ト 中 心 体 タ ン パ ク 質 C e p 1 6 9 / C R B P 1 の 同 定 と 機 能 解 析 」 の も と 、 全 7 章 で ま と め る 方 針 が 示 さ れ た 。 ま た 、 主 要 な 業 績 は 、 査 読 付 き 学 術 論 文 ２ 報 が 既 に 発 表 さ れ 、 1 報 が 受 理 さ れ て い た 。

博 士 論 文 の 草 稿 は 、 申 請 者 か ら 、 2 0 1 6 年 1 月 1 4 日 に 審 査 員 に 提 出 さ れ 、 2 0 1 6 年 1 月 1 9 日 に 公 聴 会 が 開 催 さ れ た 。 公 聴 会 で は 、 申 請 者 に よ る 博 士 論 文 の 内 容 に 関 す る 発 表 が 約 1 時 間 行 わ れ 、 そ の 後 、 申 請 者 と 審 査 員 お よ び 一 般 聴 講 者 と の 間 で の 質 疑 応 答 が 約 1 時 間 行 わ れ た 。 審 査 過 程 で の 主 要 な 議 論 と 申 請 者 に よ る 修 正 を 以 下 に ま と め る 。

博 士 論 文 は 、 7 章 か ら 構 成 さ れ 、 第 1 章 で は 、 序 論 と し て 本 研 究 の 背 景 、 目 的 、 意 義 が 説 明 さ れ て い た 。第 2 章 で は 、 C e p 1 6 9 / C R B P 1 は 、 C D K 5 R A P 2 と 複 合 体 を 細 胞 内 で 形 成 し 、 中 心 体 と 微 小 管 伸 長 端 に 局 在 す る こ と を 明 ら か に し た 。 3 章 で は 、 C e p 1 6 9 / C R B P 1 は 、 微 小 管 の 束 化 を 誘 導 し 、 微 小 管 安 定 化 の 機 能 を 持 つ こ と を 明 ら か に し た 。 第 4 章 で は 、 C e p 1 6 9 / C R B P 1 は 、 分 裂 期 で 活 性 化 さ れ る C d k 1 に よ っ て リ ン 酸 化 さ れ 、 分 裂 期 で は 、 C d k 1 に よ る リ ン 酸 化 依 存 的 に 中 心 体 か ら の 解 離 が 制 御 さ れ て い る こ と を 明 ら か に し た 。第 5 章 で は 、 ヒ ト 小 頭 症 の 原 因 遺 伝 子 と し て 知 ら れ る C D K 5 R A P 2 は 、細 胞 周 期 の 分 裂 期 に お い て 、 紡 錘 体 軸 の 配 向 に 必 要 で あ る こ と を 示 す と 同 時 に 、 C e p 1 6 9 / C R B P 1 も 微 小 管 の 安 定 化 を 通 じ て 紡 錘 体 軸 配 向 を 調 節 し て い る こ と を 明 ら か に し た 。 さ ら に 、上 皮 細 胞 に お け る シ ス ト 形 成 等 に お い て も C e p 1 6 9 / C R B P 1 に よ る 紡 錘 体 軸 の 調 節 が 必 要 で あ る こ と を 明 ら か に し た 。 第 6 章 で は 、 総 括 が 記 述 さ れ て い た 。 第 7 章 は 実 験 項 で あ っ た 。

全 般 的 な 修 正 と し て 、 以 下 の 点 が 指 摘 さ れ た 。

1)各 章 の 実 験 結 果 に 関 す る デ ー タ と そ の 解 析 を よ り 詳 細 に 記 述 す る こ と 。 2)F i g u r e を よ り 拡 大 し て 見 や す く す る と と も に 、 F i g u r e l e g e n d s が 本 文 と

区 別 で き る よ う に 、 フ ォ ン ト を 変 更 す る か 、 そ の 大 き さ を 変 え る こ と 。 3)実 験 方 法 に 関 し て よ り 詳 細 に 記 述 す る こ と 。

4)ギ リ シ ャ 文 字 、 斜 体 、 略 語 等 の 書 式 を 参 考 文 献 も 含 め 統 一 す る こ と 。 具 体 的 な 修 正 と し て 以 下 の 点 が 指 摘 さ れ た 。

第 4 章 ・ 第 4 節 で 、 M S / M S に よ る C e p 1 6 9 / C R B P 1 の リ ン 酸 化 部 位 の 同 定 に つ い て 記 述 さ れ て い る が 、 具 体 的 に ど の よ う に リ ン 酸 化 部 位 が 特 定 さ れ た の か に つ い て 記 述 が な い た め 、 第 7 章 の 実 験 項 で 方 法 を 示 す と と も に 、 第 4 節 で リ

2

ン 酸 化 部 位 決 定 に 至 る 過 程 を 詳 細 に 記 述 す る こ と 。

参 考 文 献 は 適 切 に 引 用 さ れ て お り 、 本 論 文 に 剽 窃 、 盗 用 は 確 認 さ れ な か っ た 。 主 査 と 副 査 が 指 摘 し た 箇 所 と と も に 、 他 の 軽 微 な 箇 所 は 申 請 者 に よ っ て 修 正 さ れ 、 修 正 版 を 審 査 員 に 2 0 1 6 年 1 月 2 3 日 に 再 提 出 し た 。 審 査 員 は 、 指 摘 し た 箇 所 が 適 切 に 修 正 さ れ て い る か を 再 度 確 認 し た 。 そ の 後 、 申 請 者 に よ り 、 2 0 1 6 年 1 月 2 8 日 に 化 学 ・ 生 命 化 学 科 連 絡 事 務 室 に 提 出 さ れ た 。

C D K 5 R A P 2 の 機 能 欠 損 に よ っ て 起 き る ヒ ト 小 頭 症 は 、発 生 過 程 に お け る 大 脳 皮 質 を 構 成 す る 神 経 幹 細 胞 の 枯 渇 が 原 因 で あ る こ と が 報 告 さ れ て い る 。 本 研 究 で は 、 C D K 5 R A P 2 が 紡 錘 体 軸 の 配 向 決 定 に 重 要 で あ る こ と を 示 し 、 C D K 5 R A P 2 の 機 能 欠 損 に よ っ て 起 き る 幹 細 胞 分 化 の 異 常 が 、 紡 錘 体 軸 の 配 向 性 の 異 常 に よ っ て も た ら さ れ て い る 可 能 性 を 初 め て 示 し た 。さ ら に 、 C D K 5 R A P 2 の 複 合 体 解 析 か ら 、新 規 中 心 体 タ ン パ ク 質 で あ る C e p 1 6 9 / C R B P 1 を 同 定 し 、こ の タ ン パ ク 質 が 星 状 体 微 小 管 を 安 定 化 す る と と も に 、細 胞 皮 層 の d y n e i n 複 合 体 が 微 小 管 を 捕 捉 す る 上 で 重 要 で あ る こ と を 明 ら か に し 、 動 物 細 胞 に お い て 紡 錘 体 軸 配 向 を 決 定 す る 、 新 し い 分 子 メ カ ニ ズ ム を 提 唱 す る に 至 っ た 。 申 請 者 に よ る 博 士 論 文 は 、 幹 細 胞 分 化 の 運 命 決 定 機 構 を 紡 錘 体 軸 決 定 か ら 解 明 す る 上 で 将 来 貢 献 す る こ と が 期 待 さ れ る 。 し た が っ て 、 本 論 文 を 博 士 （ 理 学 ） の 学 位 論 文 に 値 す る と 認 め る 。

2 0 1 6 年 2 月 審 査 員

主 査 早 稲 田 大 学 理 工 学 術 院 教 授 博 士（ 医 学 ）（ 自 治 医 科 大 学 ）寺 田 泰 比 古

副 査 早 稲 田 大 学 理 工 学 術 院 教 授 博 士（ 薬 学 ）（ 京 都 大 学 ） 小 出 隆 規

副 査 早 稲 田 大 学 理 工 学 術 院 教 授 博 士（ 農 学 ）（ 東 京 大 学 ） 中 尾 洋 一

副 査 早 稲 田 大 学 理 工 学 術 院 教 授 博 士（ 医 学 ）（ 大 阪 大 学 ） 井 上 貴 文