分子生物学課題(2010.12.14→2010.12.21) 範囲:第3巻「分子生物学」100~113 頁
1. 培地上で繁殖した大腸菌のコロニーのひとつひとつは、何に由来して、どのような特徴 をもっていますか?その性質は、どのような技術(89 頁参照)に利用されていますか? 2. 遺伝子ライブラリの作り方を説明してください。
3. ベクターとは何ですか。そのような性質が必要ですか(92 頁参照)。 4. 転写される遺伝子の DNA だけを含むライブラリは何とよばれますか? 5. mRNA の特徴は何ですか?
6. mRNA の精製のためには、まず RNA を抽出して、そこから mRNA を精製します(直接 mRNA を抽出することもあります)。RNA の抽出において注意すべきこととして、細胞の 中には、RNA を分解する酵素(タンパク質)があるのでそれを不活性化する必要がありま すし、DNA と RNA を分ける必要があります。これらのためにどのような方法がとられて いますか?「mRNA 精製」のキーワード検索の結果、例えば
http://www.iam.u-tokyo.ac.jp/bnsikato/protocol/c2.html などを参考にして考えてください。
7. 6. と同様にして、total RNA のうち mRNA がどの程度を占めるか調べてみてください。 また、total RNA から mRNA を精製するには、どのような方法が使われますか?
8. cDNA の c は何を意味しますか?また、cDNA ライブラリの作成方法を説明してくださ い。
9. ホルマリンとは何ですか?ホルマリン固定標本はどのような目的で作成されますか?ま た、ホルマリン保存標本からmRNA を抽出するための工夫のひとつについて
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10536153 を参考にして答えてください。
10. 真核生物における、人工変異 DNA(遺伝子)を用いた研究の例を挙げてください(109 頁)
11. 特定の遺伝子からタンパク質ができないようにする方法を2つ挙げてください(110 頁)
12. ノックアウトマウスの作成(107~110 頁)において、ベクターが ES 細胞にとりこまれ たかどうか、ならびに、ベクターの不活化遺伝子と標的遺伝子との間で相同組換えがおこ ったどうかを両方判定する必要があります。それぞれどのように判定しますか?
http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/T/TransgenicAnimals.html などを参考にして答えてください(ヒント:neo,tk)。
13. RNA 干渉(RNAi)に関して、次の抄録を和訳してください。 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20305636