0.13 0,25
0,13 0.25
O.13 1 0.25 128
0.13 >256
LFcinB
O.0063 >6400 400
0.0063 6400 400
O.05 1600 400
>51 200 50
>51 1600 200
aこの株のMICは630nmでの吸光度により測定した。
3−6.抗真菌剤、ラクトフェリン、ラクトフェリシンBによる菌糸状発育の 抑制
以下の節において、アゾール感受性および耐性のC o伽。α〃∫株について、RP medium中での菌糸状発育に対する抗真菌剤、ラクトフェリン、ラクトフェリシ
ンBの発育阻止効果をCV染色法により測定した。ただし、TIMM3164株は菌
糸状に発育しなかったため630nmの吸光度による発育のモニタリングによって
MICを決定した(表5−4)。TIMM3315とTIMM3317の、フルコナジールとイドラゴナジールに対する高度の耐性がこのアッセイにより観察された。
TIMM3164は中度の耐性を示した。アゾール耐性株のTIMM3164,TIMM3315,
TIMM3317に対するラクトフェリンのMICはアゾール感受性株ATCC90028、
TIMM1768に対するそれより低かった。TIMM3315とTIMM3317に対するラク
トフェリシンBのMICもアゾール感受性株より低かった。
3−7.トリアソール抗真菌剤、ラクトフェリン関連物質の併用によるC
α伽。msTIMM3317への効果
アゾール耐性株TIMM3317の菌糸状発育のフルコナジールおよびイドラゴ ナジールによる発育阻止作用をラクトフェリンまたはラクトフェリシンBの存 在下、非存在下で観察した(図5−3)。高濃度のフルコナジールまたはイドラ ゴナジール存在下でも、この菌株は尾を引くような発育を示し、エンドポイン トは見られなかった。ラクトフェリンまたはラクトフェリシンBはフルコナジ ールあるいはイドラゴナジール存在下でのこの尾を引くような発育の度合いを 低下させた。特に、ラクトフェリシンB1Ooμg/m1はそれ自身菌糸状発育に影響 を全く与えなかったが、フルコナジールやイドラゴナジールと共存下でこれを
完全に阻害したラクトフェリン・またはラクトフェリシンBのTIMM3317発育に対する影響を顕微鏡により観察した(図5−4)。薬剤無添加で15時間培 養すると菌糸状での発育を示し、酵母状細胞は観察されなかった。1μg/m1のフ ルコナジール存在下では、少なくなった菌糸と同時に酵母状細胞が見られた。
ラクトフェリン200μ9/m1では少ない菌糸が観察された。フルコナジールとラク
トフェリンの両者で処理すると、それぞれ単独での処理時よりさらに菌糸は少
なくなっていた。ラクトフェリシンB単独ではほとんど菌糸状発育に影響しな
かったが、フルコナジールと共存すると少数の酵母状細胞が存在し、菌糸はほ
とんど認められなかった。これらの顕微鏡による観察結果はCV染色法による菌
糸の定量結果(図5−3)とよく一致していた。
o o
①
◎畠
O Q
Φ ω
。⊂
o一
さ
遷 も
〔 呵
。
1.2
0.8
,.4
0
A
1.61.2
0.8
0.4
O
0,13 0,5 2 8F1uconazole(叫9/ml)
0
1.6
0
0,13 0,5 2 8F1uconazo1e(叫9/m1)
.2
0.8
0.4
C
1.2
O.8
0.4