FCE(%) PER

*1Valuesaremean土SD .

*2Dryweightbasis .

Table2‑9.Biologicalmeasurement,proxilnatecomposition, ofFIfbddif飴rentdiets

andapParentproteinandlipidretention

Biologicalmeasurelnent CF

HSI VSI FSI*2

3.3土0。3*1

2.0土0.3

8.2土1.2

1.1土0.6

Proximatecomposition(%) Moisture

Crudeprotein Crudelipid Crudeash

74.9土0.l

l5.3士0.2

5.4土0.3

4.2土0.2

ApParentnutrientretention(%)

PRE LR正

*1Values(mean±SD)inarowsharingsamesuperscriptsarenotsignificantlydifferent( 、ρ>0.05).

*2FSI

,Intraperitonealfねtsomaticindex=100×[wetweightoforgan(g)/wetbodyweight(g)].

一33一

Fig.2‑2.ChangesofliverandbrainAsAlevelofFIfヒddifferelltAPM supPlelnenteddiets.

BarsshowingAsAcontents(mean土SD)inliverandbrainwith differentsuperscriptsaresignificantlydiffbrent(P<0.05)。

2‑2‑3.考 察

AsAは,L一 グ ル ノ ラ ク ト ン か ら2一 ケ トーL一グ ル ノ ラ ク ト ン へ の 反 応 を 経 て 生 体 内 合 成 さ れ る が 、 ラ ッ ト,サ ル,ヒ トお よ び 魚 類 の 多 く は,こ の 反 応 を 触 媒 す るL一 グ ル ノ ラ ク ト ン オ キ シ ダ ー ゼ を 全 く 欠 く か,そ の 活 性 が 極 め て 低 い た めAsAを 要 求 す る(NRCl993;WllsonI973;Moreauand

Dabrowskil998)。 一一方,MoreauandDabrowski(1996,1998)は シ ロ チ ョ ウ ザ メ,オcψ ε〃5θr 'rα175〃701πα1π'∫と ウ ミ ヤ ツ メ,P飾o〃 那o〃 〃7αr1ηz'5の高 いL一 グ ル ノ ラ ク ロ ン オ キ シ ダ ー ゼ 活 性 を 確 認 し,AsA要 求 と 進 化 レ ベ ル と の 関 連 性 に つ い て 示 唆 し た 。

AsAは 水 溶 液 の 状 態,高 温 ・高 圧 ・高 酸 素 圧 ド や 強 力 な 光 照 射 に 不 安 定 で,AsA・Ca塩 を 用 い る と 飼 料 調 製 過 程 で 多 く が 失 活 す る 。 そ こ で,配 合 飼 料 の 調 製 に 当 た っ て は,そ の 失 活 分 を 考 慮 し て 過 剰 に 配 合 さ れ る(Hiltonetal.1977;LovellandLim1978;Solimanetal.1987)。 こ のAsAの 失 活 を 防 止 す る た め にL‑AsA‑2‑Na,L‑AsA‑2一 リ ン 酸,L‑AsA‑2一 硫 酸,AsA一 グ ル コ ー ス,APMな ど.

種 々 のAsA誘 導 体 が 合 成 さ れ て い る(ShlauandHsul999;SealeyandGatlin皿1999)。APMに り い て は チ ャ ネ ル キ ャ ッ ト フ ィ シ ュ,10伽1曜 α3ρ姻c燃'5(ElNaggarandLove111991;MustinandLove11

1992),seabass,ム α1θ5cα1αどr控r(Phromkunthongeta1.1997),ブ リ(Sakakuraetal .1998),angelnsh、

P!θ胆 ρ勿,11乙〃η3cα1ακε(BlomandDabrowski2000),イ シ ダ イ,Op18g'7α'厩g .1加dα8乙'3(YongetaL2008) な ど 多 く の 魚 種 で 有 効 性 が 確 認 さ れ て い る 。 本 研 究 に お い て もAPMをAsA源 と し て 配 合 し た と

こ ろ,肝 膵 臓 お よ び 脳 組 織 にAsAが 蓄 積 し た こ と か ら,F1もAPMを 利 用 で き る こ と が 示 唆 さ れ た 。 ち な み に,RSBお よ びBSBはAPMをAsA源 と し て 利 用 で き る こ と が 既 に 報 告 さ れ て い る(Jl eta1.2003a,b)。 一方,本 研 究 の 飼 料 区 で も 肝 膵 臓 と 脳 組 織 にAPMを 検 出 で き な か っ た こ と か ら , お そ ら く,腸 組 織 に お け る ア ル カ リ 性 フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ に よ っ てAPMの リ ン 酸 基 が 切 断 さ れ , AsAと し て 吸 収 さ れ た の で あ ろ う 。

F1にAPMo〜APM2。 。飼 料 を 飽 食 給 与 し て6週 間 飼 育 し た が,い ず れ の 区 に も 欠 乏 症 と 考 え ら れ

一34一

金:マ ダイ × ク ロ ダ イの 栄 養学 的 研 究

る 異 常 行 動 や 特 徴 的 な 形 態 の 変 化 を 観 察 で き な か っ た 。 し か し,肝 膵 臓 お よ び 脳 組 織 のAsA含 量 はAPM5。 〜APM200区 で ほ ぼ 一定 の 高 い 値 が 得 ら れ た こ と か ら,本 飼 育 条 件 下 に お け るF1のAPM 要 求 量 は50mg/kg飼 料 か そ れ 以 ド,AsAに 換 算 す る と18mg/kg飼 料 か そ れ 以 下 で あ る こ と が 示 唆 さ れ た 。FlのAsA要 求 量 を こ れ ま で 明 ら か に さ れ て い る 他 の 魚 種 と 比 較 す る と,RSB(Kosutarak l993),Atlanticsalmon,3α 〃ηo∫α1αr(LalletaL1990),cohosalmon,0〃 ごo肋アηc加3ん'3〃 ∫c乃,rainbow trout,0ηco吻,〃c加3〃7卿 ∬(Halveretal.1969)お よ びbluetilapia,0'でoc肋 〃7∫3α乙'rα'3(Stickneyetal.

1984)の50mgAsA/kg飼 料 よ り 低 く,hybridtilapia,0.〃'10∫ ∫c̀'∫×0.αz〃でεf3(ShiauandHsul999)

お よ びhybridstripedbass,ハ40κo〃8cん ア∫op5・M3αzα 〃'5(SealeyandGatlin皿1999)の18.8お よ び 22mg/kg飼 料 に 近 似 し て い た 。

BSBのAsA要 求 に つ い て の 報 告 は な い が,F1のAsA要 求 量 が 雌 親 魚RSBの 半 分 以 一ド と 低 か っ た こ と も 注 目 さ れ る 。ShiauandHsu(1999)もhybridtilapiaのAsA要 求 量 は,そ の 雄 親 魚,0.ὰ〃 で乙'3

(Stickneyeta1.1984)よ り 低 い こ と を 報 告 し た 。 本 研 究 か らF1のAsA要 求 量 がRSBよ り 低 か っ た 理 由 を 明 ら か に で き な か っ た が,今 後,Fl養 殖 を 展 開 す る に あ た っ て,好 ま し い 形 質 の 一 つ と 理 解 で き る 。

APMo区 の 見 か け のLREが,APM50〜APM200区 よ り 低 か っ た 。VSIに 区 間 差 が な か っ た の で, 筋 肉 に お け る 脂 質 含 量 の 差 異 に 基 づ く も の と 考 え る 。APMo区 の 筋 肉 組 織 に お い て,AsA欠 乏 が 直 接 あ る い は 間 接 的 に 脂 質 代 謝 に 悪 影 響 を 及 ぼ し た も の と 考 え ら れ る が,今 後 に 残 さ れ た 興 味 あ る 検 討 課 題 の 一つ で あ ろ う 。

近 大 水 研 報12号(2010)

第3章 魚粉代 替タ ンパク源の検索

魚 粉 に は ス ケ トウ ダ ラ,7加rαgrαclzα1cogm〃7〃20を原 料 とす る 北 洋 魚 粉 と,ア ジ 類,イ ワ シ 類, サ バ 類 な ど多 獲 性 沿 岸 魚 を 主原 料 とす る 沿 岸 魚 粉 が あ る 。 さ ら に,沿 岸 魚 粉 は カ タ ク チ イ ワ シ 類 お よ び ア ジ 類 を そ れ ぞ れ 主 原 料 と す る,ペ ル ー 魚 粉 お よ び チ リ魚 粉 が 世 界 的 に 流 通 して い る。 最 近 で は,北 洋 魚 粉 は も っ ぱ ら練 り製 品 に利 用 され,沿 岸 魚 粉 が 主 に 養 殖 用 配 合 飼 料 に 用 い られ て い る 。 いず れ の 魚 粉 も タ ンパ ク 質含 量 が65%前 後 と 高 く,必 須 ア ミ ノ酸 バ ラ ン ス に優 れ る こ と か ら,タ ン パ ク 質 要 求 性 の 高 い養 殖 魚 に と っ て は,格 好 の 飼 料 タ ンパ ク 質 源 で あ る(NRC1993)。

これ らの 理 由 か ら,長 年 に わ た っ て 魚 粉 が 用 い られ,養 殖 産 業 の 発 展 に 少 な か らず 貢 献 して き た 。 しか し近 年 に な っ て,多 獲 性 沿 岸 魚 の 漁 獲 量 や 資 源 量 が 減 少 して い る の に 対 し て,中 国,東 南 ア ジ ア,中 東,地 中 海 北 米,オ ー ス トラ リ ア な どで 魚 類 養 殖 が 拡 大 し,こ こ数 年 間 に お け る 魚 粉 や 魚 類 用 配 合 飼 料 の価 格 も高 騰 し て,生 産 コ ス トが 著 し く 増 加 し魚 類 養 殖 経 営 を 逼 迫 させ て い る 。

一 方,1990年 代 ま で 日本 に お い て は 多 獲 性 沿 岸 魚 を餌 に して 魚 類 養 殖 が 営 まれ て い た が,生 餌 投 与に 伴 う 自 家 汚 染,栄 養 性 疾 患,感 染 症 の 蔓 延,多 大 な 労 働 荷 重 と施 設 経 費 な どが 問 題 にな り, 配 合 飼 料 化 と と も に 経 営 の 効 率 化 ・合 理 化 も飛 躍 的 に 進 展 した 。 しか し,配 合 飼 料 に魚 粉 が 多 く

用 い られ て い る現 状 で は,高 級 魚 を 育 て る た め に魚 類 資 源 を 浪 費 して い る こ と に 繋 が り,以 前 の 生 餌 給 与 と基 本 的 に違 い は な い 。

以 ヒの 理 由 か ら,魚 類 養 殖 産 業 に お い て も,魚 粉 に代 わ る 廉 価 で 豊 富 な 代 替 タ ン パ ク 質 源 の 検 索 が 必 要 で あ る。

3‑1、 大 豆 粕 利 用 性 と フ ィ タ ー ゼ 添 加 効 果

第2章 で,F】 に 対 す る 至 適 な 飼 料 タ ン パ ク 質/脂 質 比 は40/20で あ り,F1の タ ン パ ク 質 要 求 性 はRSBよ り低 い こ と が 示 さ れ た 。 こ の よ う に,魚 粉 配 合 割 合 を 低 く で き る こ と も飼 料 の 低 廉 化 に 繋 が る が,そ の 一 部 あ る い は 全 部 を 安 価 な タ ン パ ク 質 源 に 代 替 で き れ ば,生 産 コ ス トを さ ら に 抑 え て 養 殖 経 営 を 安 定 さ せ る こ と に な る 。

魚 粉 に 代 わ る タ ン パ ク 質 源 と し て は,ミ ー ト ミ ー ル,ミ ー トボ ー ン ミ ー ル,チ キ ン ミー ル な ど の 動 物 性 タ ン パ ク 質 源,脱 脂 加 熱 大 豆 粕(SBM),コ ー ン グ ル テ ン ミ ー ル,カ ノ ラ ミ ー ル,綿 実 粕, ヒ ー ナ ッ ツ ミ ー ル な ど の 植 物 性 タ ン パ ク 質 源,バ ク テ リ ア,酵 母 な ど の 単 細 胞 タ ン パ ク 質 源 が 知 ら れ て い る 。 こ れ ら タ ン パ ク 質 源 は 供 給 量,価 格,タ ン パ ク 質 含 量,ア ミ ノ 酸 組 成,脂 肪 酸 組 成, 生 理 阻 害 物 質 や 消 化 性 な ど に 大 き な 差 異 が 認 め ら れ る 。本 節 で は 代 替 タ ン パ ク 質 源 の 中 でSBMに 注 目 し,F1に お け る そ の 利 用 性 と 配 合 許 容 量 に つ い て 検 討 し た 。 ち な み に,SBMの 代 替 タ ン パ ク 質 源 と し て の 高 い 利 用 性 に つ い て は,多 く の 魚 種 で 確 認 さ れ て い る(Hossainetal.2007;Satohetal.

2002;Takiietal.2001;JacksonandCapperl982)。

3‑1‑1.材 料 お よ び 方 法

a)試 験 飼 料

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金;マ ダ イ × クロ ダ イ の 栄 養 学 的研 究

試 験 飼 料 の 組 成 と 一般 成 分 を 飴ble3‑1に 示 し た 。タ ン パ ク 質 源 と し てFMを46%配 合 し た 対 照 のC飼 料,FMとSBMの 配 合 割 合 を30と20お よ び15と40と し たS20お よ びS40飼 料,そ して, S40飼 料 に 微 生 物 起 源 の フ ィ タ ー ゼ(BASF株 式 会 社,日 本)を2500㎜it/kg添 加 し たS40P飼 料 の

4飼 料 を 調 製 し た 。 な お,SBMは 飼 料 用 の 脱 脂 ・加 熱SBMを 用 い た 。 ま た,各 試 験 飼 料 に は 小 麦 グ ル テ ン お よ び ビ タ ミ ン 混 合 物(Halver1957)を そ れ ぞ れ10お よ び5%共 通 し て 配 合 し,タ ン パ ク 質 源 の 配 合 量 の 違 い に 基 づ く 飼 料 組 成 の 過 不 足 を,FO,α 一デ ン プ ン,セ ル ロ ー ス,ミ ネ ラ ル 混 合 物(Halverl957)な ど で 調 整 した 。 な お,試 験 飼 料 の 調 製 と 保 存 方 法 は2‑1‑la)に 記 し た 。

試 験 飼 料 の 粗 タ ン パ ク 質,粗 脂 質,粗 灰 分 お よ び エ ネ ル ギ ー 含 量 は,そ れ ぞ れ40,14,10%お よ び480kca1/100gで 近 似 し て い た が,SBM配 合 量 が 増 加 す る の に 伴 っ て,糖 質 含 量 は20〜25%

と 僅 か に 増 加 し,リ ン 含 量 は25〜20%と 減 少 し た 。

Thble3‑1.Dietfbrmulationandproximatecolnposition(%)

Brownfishmeal Soybeanmeal Wheatglutenmeal Fishoil Cellulose α一Starch Vitaminmlxture*1 Mineralmixture*1 Phytase(unit/kg)

Proximatecomposition(dryweightbasis) Crudeprotein

Crudelipid Sugar Crudeash

Phosphorous(9/kgdiet) Grossenergy(kca1/100g)

*1Halver(1957) .

b)供 試 魚 お よ び 飼 育 方 法

供 試 魚 に は1‑2‑lc)に 記 し た 体 重49.0土0.3gのF1稚 魚 を 用 い た 。 す な わ ち,300〔 容 角 型 水 槽 に 供 試 魚 を15尾 ず っ 収 容 し,所 定 の 飼 料 を1日2回(明 期106100〜18:00)に 飽 食 給 与 し て12週 間 飼 育 し た 。 飼 育 期 間 中 は 濾 過 海 水 を7〔/minで 注 水 し た 。 ま た,期 間 中 の 水 温 は23.5〜14.4℃ に 徐 々 に 低 ド し,'F均 水 温 は18.9土2.8℃ で あ っ た 。 飼 育 試 験 終r後 に 消 化 率 を 測 定 す る た め,C,S40

お よ びS40P区 か ら 必 要 尾 数 の 供 試 魚 を 屋 内350f容Guelph式 円 形 採 糞 水 槽 に 移 し,先 と 同 様 に 所 定 の 飼 料 を1日2回 飽 食 給 与 し て2週 間 飼 育 し た 。 採 糞 は 後 半 の7日 間 毎 朝08:00に 行 っ た 。 採

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近 大 水 研 報12号(2010)

糞 期 間 は ヒ ー トポ ン プ で 水 温19℃ に 加 温 し た 濾 過 海 水 を,3〔/minで 各 採 糞 水 槽 に 注 水 し た 。な お, 飼 育 試 験 お よ び 消 化 率 測 定 の い ず れ で も,各 飼 料 に っ き3反 復 区 を 設 け て 実 施 し た 。 ま た,屋 内 の 照 明 は12L:12D(明 期:06:00〜18:00)と した 。

c)分 析 方 法

飼 育 開 始 お よ び 終 『時 に は,24h絶 食 し た 後,2‑1‑1b)に 記 し た 方 法 で 魚 体 重 と 尾 叉 長 を 測 定 す る と と も に,各 飼 料 区 か ら15尾 ず つ 取 りhげ て,2‑1‑lb)お よ びc)に 記 した 方 法 で,内 臓 重 量,Ht.Hb,飼 料 ・全 魚 体 ・肝 膵 臓 お よ び 糞 の 一般 成 分 を 分 析 し た 。 飼 料 ・全 魚 体 お よ び 糞 の リ ン 含 量 分 析 はBaginskietal.(1982)の 方 法 に よ っ た 。 な お,各 栄 養 素 の 見 か け の 消 化 率 お よ び リ ン 排 泄 量 は 次 式 よ り 求 め た 。

消 化 率(%)=100‑100×

飼 料 の 酸 化 ク ロム(%)糞 中 の 栄 養 素 お よ び リ ン(%)

× 蕊 中 の 薩 化 ク

ロム(%)飼 料 中 の栄 養 素 お よ び リ ン(%)

リ ン 摂 取 旦(言)一 リ ン 耕 泄 量(ξ) リ ン 排 泄 量(

gP/kgweightgain)= 増 重 量(k§)

d)統 計 処 理

2‑2‑1d)に 記 し た 方 法 に よ っ た 。

3‑1‑2.結 果

飼 育 成 績 をTable3‑2に 示 し た 。 飼 育 期 間 に お い て 艶 死 は 認 め ら れ な か っ た 。C,S20お よ びS40 飼 料 区 の 間 を 比 較 す る と,期 間 摂 餌 量 はSBM代 替 率 の 増 加 に 伴 っ て 有 意 に 増 加 し た が,逆 に,終 r時 の 魚 体 重,SGR,FCEお よ びEFは 有 意 に 低 ド した 。 し か し,PERに 有 意 な 区 間 差 は 認 め ら れ な か っ た 。 一方,フ ィ タ ー ゼ を 添 加 し たS40P飼 料 区 の 飼 育 成 績 は,S40区 に 比 べ て 有 意 に 改 善 さ れ,C区 と の 問 に 有 意 な 差 異 は 認 め ら れ な か っ た 。

【血液 性 状,肥 満 度 お よ び 比 内 臓 重f直をTable3‑3に 示 した 。Ht,Hb,CF,HSI,VSI,SSIな ど に 区 間 差 は な か っ た が,ESIはC区 が 最 も 高 く,S40,S20そ し てS40P区 の 順 に 低 ド し た 。

全 魚 体 ・肝 膵 臓 の 一般 成 分 と 見 か け の 栄 養 素 蓄 積 率 をTable3‑4に 示 し た.終r時 に お け る 各 飼 料 区 の 全 魚 体 の 一般 成 分 は,開 始 時 に 比 べ て 水 分 が 僅 か に 低 ドし,粗 脂 質 含 量 は}二 昇 し た 。 一方, 終r時 の タ ン パ ク 質 お よ び 租 灰 分 含 量 に 区 間 差 は 認 め られ な か っ た が,リ ン 含 縫 はS40P区 が 他 の

区 よ り 有 意 に 多 か っ た 。 次 に,終r時 に お け る 肝 膵 臓 の … 般 成 分 に っ い て み る と,S20区 の 水 分 含 量 がCお よ びS4〔〕P区 よ り 有 意 に 高 か っ た こ と を 除 い て,い ず れ の 項 目 に も 区 間 差 は 認 め られ な か っ た 。

見 か け のPREお よ びLREをC,S20お よ びS40区 で 比 較 す る と,こ こ で もSBM代 替 率 の 増 加 に 伴 っ て 低 ドす る 傾 向 が み ら れ,い ず れ もS40区 で 最 も 低 か っ た が,S40P区 で は 改 簿 してPREはC 区 の レ ベ ル ま で 達 した 。 一方,見 か け の リ ン 蓄 積 率 はS40P区 が 最 も 高 く,次 い で,S40,Cお よ び

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