考察

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よって阻害された可能性があることも示唆された。これらの結果から、BSEPの 発現は低値を示すものの、3 日目の SC-HiHs が肝細胞の構造的および機能的特 性を有していることが示唆された。

SC-HiHsによる胆汁鬱滞型DILIの評価において、DILIを引き起こすことが知

られているいくつかの化合物は、胆汁酸依存性の細胞毒性を示さなかった (Fig.

15A)。これは、SCHiHsにおけるBSEPの遺伝子発現量がHepG2細胞と同様に低

値を示し、胆汁鬱滞型DILIを正確に評価することが困難であったためと考えら れた。

Tauro-nor-THCA-24-DBD の細胞内蓄積量は 10 µM CsA によって抑制された

(Fig. 13B)。しかし、外部からの胆汁酸と10 µM CsAを添加した場合、細胞毒性

を示した (Fig. 14)。この理由として、胆汁酸の主要成分は親油性であるが、

tauro-nor-THCA-24-DBDは親水性であることを考慮すると、受動輸送によって一部の

胆汁酸がSC-HiHsへ取り込まれ細胞毒性を引き起こした可能性があると考えら

れた。また、胆汁酸－コエンザイム A (BA-CoA) リガーゼは、胆汁酸とCoA を結合させる酵素であり、10 µM CsAによって阻害されることが知られている

[36]。したがって、胆汁酸がCoAと共役できず、一部の毒性の強い胆汁酸が肝細 胞内に残存したため、胆汁鬱滞肝毒性を生じたのではないかと考えた。さらに、

胆汁酸はUGTによって抱合され、MRPを介して排出されることが知られてい る。以前、当研究室において、HiHs は、UGT 活性を有することを示している

[28]。したがって、CsAの添加によりUGTによる胆汁酸の抱合が阻害され、MRP2 から排泄できなかったため、肝細胞毒性が生じたとも考えられた。胆汁鬱滞肝 毒性の正確な予測のために、SC-HiHsにおけるCsAの肝毒性は、基底膜側の排 出トランスポーターまたは他の胆汁酸トランスポーターの関与を考慮する必 要もある^[17]。つまり、SC-HiHs は、基底膜側の排出トランスポーターである

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MRP3/4 の発現が HepG2 細胞と比較して mRNA 発現量が高く維持されている

ため、SC-HiHsにおける胆汁酸排泄に大きく寄与している可能性が示唆された。

さらに、CsA およびピオグリタゾンの細胞毒性は胆汁酸を処理していない SC-HiHsで検出され、その値は HepG2、HepaRG 細胞および HHs の値よりも高値

を示した^{[11, 17]}。この理由として、ヒトiPS細胞から肝細胞へ分化する際にバル

プロ酸 (VPA) を使用していることが考えられた^[28]。以前の報告にて、VPAは 脂肪肝を誘発し、脂質代謝に関連する遺伝子の調節を行っている^[37]。すなわち、

ヒトiPS細胞由来肝細胞の一部が、VPAによって脂肪肝に誘発され、ピオグリ タゾンが薬効を発揮したため、肝細胞毒性が生じたとも考えられた。したがっ て、現在の SC-HiHs は、胆汁鬱滞型DILI または細胞死を評価するには不完全 な細胞であると思われ、今後、SC-HiHsにおける詳細な検討が必要である。

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