小括

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第四章 総括

本研究では、HepG2-hNTCP-C4 細胞とヒトiPS細胞由来肝細胞をサンドイッチ培養 することにより胆汁鬱滞肝毒性評価系を作製し、細胞毒性アッセイ系の開発を行った。

HepG2-hNTCP-C4細胞とヒト iPS細胞由来肝細胞は、NTCPまたは複数のMRPsを

介した胆汁鬱滞 DILI リスクの評価に適していることが示唆された。

HepG2-hNTCP-C4 細胞を用いた胆汁鬱滞肝毒性に対する薬剤の検出度は、HepG2 細胞よ

り可能であったため、より安全性の高い医薬品の開発に貢献できる評価系の開発 になると考えられた。また、サンドイッチ培養したヒトiPS細胞由来肝細胞にお いては、HHs と同様の毛細胆管が形成されていた。これは、薬剤による毛細胆管阻 害によって起こる胆汁鬱滞肝毒性評価にも有用である可能性が示唆された。

それぞれの特徴を有する 2 種類の細胞を用いた胆汁鬱滞肝毒性評価系は、新規 医薬品候補化合物の非臨床試験の肝毒性を見極める試験段階に役に立つと思われ る。特に、HepG2-hNTCP-C4細胞は、操作が簡便かつ安易であり、短期間で提供でき るため、in vitro胆汁鬱滞肝毒性評価系に適している。しかし、いずれも胆汁酸トランス ポーターである BSEP 発現量が低値であるため、今後は BSEP 発現量や機能を増加 させることでより高感度な胆汁鬱滞肝毒性評価系が構築されるものと思われる。

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謝辞

本研究の遂行に際し、終始御懇篤な御指導、御鞭撻を賜り、また本論文の御 校閲を頂きました名古屋市立大学大学院薬学研究科臨床薬学分野 松永 民秀 教授に深甚なる謝意を表します。

本研究の遂行に際し、格別の御配慮と御激励を賜りました名古屋市立大学大 学院薬学研究科臨床薬学分野 鈴木 匡 教授に深甚なる謝意を表します。

本論文作成にあたり、種々の有益な御助言と御校閲を賜りました名古屋市立 大学大学院薬学研究科病院薬剤学 木村 和哲 教授、名古屋市立大学大学院薬 学研究科衛生化学分野 肥田 重明教授ならびに名古屋市立大学大学院薬学研究 科薬物動態制御学 湯浅 博昭 教授に深謝いたします。

本研究の遂行に際し、親身なる御指導、有益な御助言を賜りました千葉大学 薬学部・大学院薬学研究院 生物薬剤学研究室 伊藤 晃成 教授に深く感謝致しま す。

本研究を遂行するにあたり、HepG2-hNTCP-C4細胞をご供与頂きました国立感 染症研究所ウイルス第二部 主任研究官 渡士幸一 博士に謹んで御礼申し上げま す。

本研究を遂行するにあたり、ヒトiPS 細胞をご供与頂きました国立成育医療 研究センター研究所 阿久津 英憲 博士、宮川 世志幸 博士、大喜多 肇 博

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士、清河 信敬 博士、豊田 雅士 博士ならびに梅澤 明弘 博士に謹んで御礼申 し上げます。

本研究の遂行に際し、親身なる御指導、有益な御助言を賜りました名古屋市 立大学大学院薬学研究科臨床薬学分野 岩尾 岳洋 准教授に謹んで御礼申し上 げます。

本研究の遂行に際し、親身なる御指導、有益な御助言を賜りました資生堂リサ ーチセンター安全性・解析研究センター原料・薬剤評価G 関根 秀一 博士 (前 千葉大学薬学部・大学院薬学研究院生物薬剤学研究室 講師) に深く感謝致しま す。

本研究の遂行に際し、胆汁鬱滞肝毒性評価系の作製手法について御指導くださ いましたアルバータ大学 薬学部 博士研究員 薄田健史 氏 (前 千葉大学薬学部・

大学院薬学研究院生物薬剤学研究室 博士課程)、千葉大学薬学部・大学院薬学研 究院 国際創薬学研究室 竹村 晃典 特任助教 (前 千葉大学薬学部・大学院薬学 研究院生物薬剤学研究室 博士課程)、資生堂リサーチセンター安全性・解析研究セ ンター原料・薬剤評価G額賀 巧 氏 (前 千葉大学薬学部・大学院薬学研究院生物 薬剤学研究室 修士課程) に心より感謝の意を表します。

本研究の遂行に際し、機会ある毎に貴重な御助言、御激励を賜りました琉球 大学大学院医学系研究科薬物治療学講座 中村 克徳 教授 (前 名古屋市立大学 大学院薬学研究科臨床薬学分野 准教授) に心より感謝の意を表します。

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本研究の遂行に際し、終始丁寧な御助言と御指導を賜り、また本論文の御校 閲を頂きました名古屋市立大学大学院薬学研究科臨床薬学分野 坡下 真大 講 師に厚く御礼申し上げます。

本研究の遂行に際し、有益な御助言とご協力を賜りました名古屋市立大学大 学院薬学研究科臨床薬学分野 菊池 千草 講師に厚く御礼申し上げます。

研究途上、種々の御便宜を図ってくださいました名古屋市立大学大学院薬学 研究科臨床薬学分野ならびに薬学部臨床薬学教育研究センターの卒業生、在室 生ならびに研究員に感謝致します。

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