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(C~)3附(CHz)sGNHCHÇNζ 1
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、CH2( C H 0:14 C H:3
Br‑ 0 0
WCsAsp(OBzl)2~6
COOH CHっ
1 ‑̲ ........CHiCH0:14CH3 (CH~3附(CH''‑'':0sG'11 NHCHÇN11 に
、CHiCH2)14CH3 Br 0 0
N+'CsAsp2C16
?02C同
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GH2 00H?H2/CH2(CW4C同 Nap03mlack/H plp/CH2(CW14C同 Br(CH s0:GNHCHCN::'̲' ̲ ‑. ̲ ̲.. ‑ -ι(S03-)(CH2)s<;1NHCH~N~
￨ ￨ ￨ ￨ ¥ C H 2 ( C H d 1 4 C H 3 F 1 1 CH2(CH914CH3
0 0 N a + 0 0
BrCsAsp(OBzl)2C16 (5~ ‑)CsAsp2C16
2.1 ジヘキサデシルアミン
K
2C0
3H
2N(CH
2)15CH
3 +Br(CH
2)15CH
3HN[(CH
2)15CH
3]2ヘキサデシルアミン500g(2.1mol)と臭化ヘキサデシル300g(0.98mol)を2Lの三つ口 フラスコに入れ，エタノール70伽lLと炭酸カリウム450g(3.3mol)を加えてパキュー ムスターラー付き撹祥器で激しく撹祥しながら120時間加熱還流を行った。熱時漉過
により炭酸カリウムを鴻過分離し，熱エタノールで洗浄した。浦、液を冷却して析出 した固体を濃過により分離し減圧乾燥した。乾燥した固体を融解して熱時液過した 後，減圧蒸留を行い白色国体 316g(69%)を得た。
bp: 192‑‑‑220oC /O.OlmmHg mp: 62.6‑‑‑63.80C
IR (KBr) / cm‑1: 2900 (C‑H s甘.)， 1460 (CH2 bend.asym.)， 1140 (C‑N str.).
2.2 アラニン残基を含む二本鎖ペプチ ド脂質の合成
本化合物は既知化合物であり，合成法は文献91b，97・98)記載の方法で行っ た。 2.2.1 N，N‑ジヘキサデシル‑Na‑t‑ブトキシカルボニルーL‑アラニンアミド:
BocAla2C16
CH‑:t
I ‑
ジヘキサデシルアミン(CH3)3COC
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BocAla2C16
Boc‑Ala 4.5g (26mmol)を無水塩化メチレン4臼nLに溶解し，反応容器をOOCに冷却し た。 5分後にN，N'‑ジシクロヘキシルカルボジイミド5.9g(3臼nmol)， 15分後にジヘ キサデシルアミン12.0g(26mmol)を加え，さらに無水塩化メチレン2臼nLを加えてOOC で6時間，室温で一夜撹持した。生じたジシクロヘキシル尿素(配尿素)を濃過に
より分離し，滞、液を減圧濃縮した。残濯を酢酸エチル100mLに溶解し，再び生じた DC尿素を鴻過により分離したo
i
慮、液を減圧濃縮し，酢酸エチルをさらに5加止加えて 冷蔵庫に一夜放置した。生じたE吃尿素を鴻過により分離し漉液を減圧濃縮した後，残溢を10%クエン酸水溶液(5伽lLx 3) ，飽和食塩水(50mLx 3)， 4%炭酸水素ナトリ ウム水溶液(5伽 Lx3)，飽和食塩水 (5伽 Lx3)のJII買で洗浄し，液層分離減紙
内'hatm飢 1PS)を用いて水層を分離した。溶媒を留去して得られた油状物をゲルクロ マトグラフ法[ワコーゲlレC‑300，クロロホルム]により精製を行い淡黄色油状物 12.3g (77%)を得た。
‑23‑
IR (KBr) / cm‑1: 3300 (N‑H s江)， 2920， 2850 (C‑H str.)， 1710 (ウレタンC=ostr.)， 1650 (アミドC=Ostr.).
lHN恥1R[500MHz， CDα3' TMSJ: O 0.88 (6H， t， (CH2)lSCH3)' 1.25 (55H， s， CH2CH2・ (CH2)13' CHCH3)， 1.43 (9H， s， (CH3)3N+)， 1.47‑‑‑1.59 (4H， m， CH2CH2・ (CH2)13)' 3.12‑‑‑3.48 (4H， m， C旦2CH2(CH2)13)'4.57 (1H， quin ，.tNHCH)， 5.46 (lH， d， NHCH).
2.2.2 N，N‑ジヘキサデシル̲Na‑(6‑ブロモヘキサノイル)‑L‑アラニンアミド:
BrC
s
Ala2C16pu
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|ー ...CH2(CH~14CH3 Br(CH:?)sCNHCHCN"
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U """'CHiCH:?) 14CH3
o
0BrCsAla2C16
BocAla2C162.9g (4.4mmol)を無水塩化メチレン1伽lLに溶解し，室温で撹枠しなが らトリフルオロ酢酸25gを加えた。室温で2時間反応した後，溶媒及び過剰のトリフ ルオロ酢酸を減圧留去し，塩化メチレン (50mLx 4)を加えて減圧下で溶媒を留去し た。得られた透明油状物を減圧乾燥し白色固体を得た。 Nrv1R測定及ぴR測定(KBr 法)によりB∞基が完全に除去されていることを確認した。この生成物を無水塩化メ チレン10mLに溶解し，無水トリエチルアミン3.0g(3臼nmol)を加えOOCに保ち，撹枠
しながら6‑プロモヘキサン酸クロリド1.9g(8.9mmol)の無水塩化メチレン溶液 15mL を1時間で滴下した。滴下後さらにOOCで1時間，室温で2時間撹持した。反応終了後，
反応液に塩化メチレン10伽止を加え，飽和食塩水(5伽lLx 2)， 50/0クエン酸水溶液 (5加lLx 2) ，飽和食塩水(5伽lLx 2)， 5%炭酸水素ナトリウム水溶液(5伽止x2) ，飽 和食塩水(5伽lLx2)の順で洗浄し，液層分離濃紙川市atm釦 lPS)で水層を完全に分 離した。溶媒を減圧留去し，残濯をメタノールから再結品して白色固体 2.79g(89%)
を得た。
Beils飽泊試験:陽性.
mp: 41.8‑‑‑42.50
C
(文献値97)41.5 ‑‑‑42.50C )
IR (KBr) / cm‑1: 3280 (N‑H str.)， 2920， 2850 (C‑H s甘ふ 1650(アミドC=ostr.)， 700 (C‑Br str.).
lHN乱1R[500孔 倒z，CDα3'TMSJ: O 0.88 (6H， t， (CH2)lSCH3)' 1.26 (55H， s， CH2CH2・ (CH2)13' CHCH3)， 1.39‑‑‑1.93 (lOH， m， BrCH2(CH2)3' CH2CH2(CH2)13)' 2.20 (2H， t， BrCH2(CH2)3CH2)' 3.05‑‑‑3.68 (4H， m， CH2CH2(CH2)13)' 3.40 (2H， t， BrCH2(CH2)3CH2)' 4.84 (1H， quin ，.tNHCID， 6.55 (1H， d， NHCH).
2.2.3 N，N‑ジヘキサデシル̲Na‑(6‑トリメチルアンモニオヘキサノイル)ーしアラニン アミド臭素酸塩:N+CSAla2C 16
CH3 CH<:I
I ‑
...CH2(CH~14CH3 (CHぬNL
'u /CH2(CH2)14CH3 8r(C同)5QNHCHCN，
(CH3)列+(CH~ sCNHCHCNζ1
1 ¥ C H d C H 2 ) 1 4 C H 3 ￨ ￨ l l ¥ C H d C H 2 ) 1 4 C H 3o
0 ̲. ̲. . . ‑ 8r‑ 0 0N+CsAla2C16
BrCSAla2C16 2.79g (3.82mmol)を無水ベンゼン10臼nLに溶解し，乾燥トリメチルア ミンガスを室温で12g(0.21mol)吹き込んだ後，さらに室温で一夜撹持した。溶媒を 減圧留去後，残澄をメタノールに溶解し，不溶物を鴻過により分離した。滅液を濃 縮して得られた生成物をゲルクロマトグラフ法[SephadexLH‑20，メタノール;Toyo‑
pearl H W ‑40F，メタノール]により二度精製し，白色固体 1.59g(500/0)を得た。
mp: 217t (最終融点) (文献値97)2260
C )
IR (KBr) / cm‑1: 2920，2850 (C‑H str.)， 1630 (アミドC
=u
str.).lH NMR [500MHz， CD03， TMSJ: O 0.88 (6H， t， (CH2)lSCH3)' 1.26 (55H， s， CH2CHT (CH2)13' CHCH3)， 1.38‑‑‑1.88 (lOH， m， N+CH2(CH2)3 CH2CH2(CH2)13)' 2.25
‑‑‑2.33 (2H， m， N+CH2(CH2)3CH2)' 3.07‑‑‑3.33 (4H， m， CH2CH2(CH2)13)' 3.48 (9H， s， (CH3)3N+)， 3.64 (2H， t， N+CH2(CH2)3CH2)' 4.76 (lH， quin ，.tNHCID， 7.22 (1H， d， NHCH).
‑25‑
元 素 分 析
実 測 値 :C， 68.09 ; H， 11.56 ; N， 5.31 % C44H90BrN302としての
計 算 値 :C， 68.35 ; H， 11.73 ; N， 5.44 %
2.2.4 N，N‑ジヘキサデシル̲Na‑(6‑スルホヘキサノイル)ーしアラニンアミド ナトリウム塩:(S03一)CSAla2C16
CH~ CH~
̲ . . . . 1 . .~.
.̲....cHiCH2)14CH3Na.s O~ ，_~
，‑，̲.. ， ̲.... 1 . .~.
..........CHiCH2)14CH3B r ( C H d d p N H C H C N ¥ F J~ (SU:3 ‑)(CH2)時NHCHQNえ
~II
1 1
"CH2(C同)14CH3 ' ~"~'~II " " CHiCH2)14CH3o
O Na+ 0 0Br
C s
Ala2C16 (S03‑) C，Ala2C16BrC
s
Ala2C 16は2.2.2の方法に従って合成した。 BrCs
Ala2C16l1.4g (1.67 x 10‑2mol)をエタノール5∞mLに溶解し泊浴温度800Cで亜硫酸ナトリウム42.1g(3.34 x 10‑1mol) の水溶液150札 を2時間かけて滴下した。油浴温度800Cで300時間加熱還流した。室 温まで放冷した後，不溶物を浦、過により分離した。鴻液を減圧濃縮し，クロロホル ムを加えて不溶物を鴻過により分離した。濃液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し，溶 媒を減圧留去して白色固体を得た。メタノール可溶分についてゲルクロマトグラフ 法 [SephadexLH‑20，メタノール;Toyopearl H W ‑40F，メタノール]により二度精製
し白色固体4.34g(35.3%)を得た。
mp: 137‑‑1380
C
， (文献値97) 1380C (
最終融点))IR (KBr) / cm‑1: 2920， 2850 (C‑H str.)， 1640 (アミドC=Ostr.)， 1190， 1050 (S02 str.). lHN乱1R[250乱佃z，CDα3'TMS]: O 0.88 (6H， bt， (CH2)lSCH3)' 1.26 (55H， bs， CH2CHT
(CH2)13' CHCH3)， 1.47‑‑1.76 (10H， m， CH2(CH2)3CH2' CH2CH2(CH2)13)' 2.00 (2H， bs， CH2(CH2)3CH2)' 2.87 (2H， bs， CH2(CH2)3CH2)' 3.13‑‑3.39 (4H， m， CH2CH2(CH2)13)' 4.81‑‑4.86 (lH， m， NHCH)， 7.41 (1H， bs， NHCH).
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元素分析
実 測 値 :C， 66.47 ; H， 10.89 ; N， 3.75 % CA1Ho1N"NaOcS41J..J.8 p'l 21'1"¥J5 としての
計 算 値 :C， 66.80 ; H， 11.08 ; N， 3.80 0/0
2.3 アスパラギン酸残基を含む二本鎖ペプチド脂質の合成
疎水性ピタミン B12誘導体を人工脂質に共有結合を介して導入するために，アミ ノ酸としてアスパラギン酸残基を含むカチオン性およびアニオン性ペプチド脂質の 合成を行った。
2.3.1 N，N‑ジヘキサデシル‑Na‑t‑ブトキシカルボニルーひベンジルーL‑アスバルト アミド:BocAsp(OBzl)2C16