2.6.2 薬理試験の概要文
2.6.3.3 副次的薬理試験
2.6.3.3.1 NMDA受容体を介する作用
資料番号 4.2.1.2.1 報告年 1997
試験の概要 ラットの前脳及び脊髄を用いて，NMDA受容体に対するメサドンの結合作用について 評価した。
生物学的物質 ラット（Sprague-Dawley） 試験方法の
概要
ラット前脳及び脊髄から神経膜を調製した。
放射性リガンドと競合させ，NMDA受容体への結合親和性を検討した。
被験物質
前脳：dl-メサドン，d-及びl-メサドン（1, 3, 10, 100 μM） vs 5 nM [3H]MK-801 脊髄：dl-メサドン，d-及びl-メサドン（0.1, 1, 10, 100, 300 μM） vs 5 nM [3H] MK-801 前脳：dl-メサドン，d-及びl-メサドン（ - ） vs 10 nM [3H] CGS-19755
結果
dl-，d-及びl-メサドンは，前脳及び脊髄において[3H] MK-801と競合し，NMDA受容 体のグルタミン酸非競合部位に対し親和性を示した。同様に検討を行ったモルヒネ, ハイドロモルフォン及びナルトレキソンは MK-801 を置換しなかった。一方，[3H]
CGS-19755はいずれの薬剤によっても置換されず，メサドンはNMDA受容体のグル
タミン酸結合部位に対しては親和性を示さなかった。
資料番号 4.2.1.2.2 報告年 1997
試験の概要 ラットを用いて，ホルマリン誘発性の疼痛反応に対する作用を評価し，NMDA 受容 体を介した抗侵害受容作用であることを示した。
生物学的物質 ラット（Sprague-Dawley）
試験方法の 概要
d-メサドンを脊髄に投与し，右足蹠にホルマリンを投与した後の疼痛反応を計測し た。同様に，ナロキソンをd-メサドンと同時投与を行った場合についても疼痛反応を 計測した。また，髄腔内にNMDAを投与して起こる侵害反応に対するd-メサドンの 作用を検討した。
被験物質
ホルマリンテスト：32, 160, 320 μg/ラット，
ナロキソン（30 μg/ラット）の拮抗作用検討時：250 μg/ラット 髄腔内NMDA誘発侵害作用検討時：250 μg/ラット
結果
d-メサドンはホルマリン投与10～60分後に起こる2相目の疼痛反応を用量依存的に 抑制し，これはナロキソンにより拮抗されなかった。d-メサドンの 250 μg/ラット投 与は，侵害反応を示すためのNMDAのED50を3倍以上に増加させ，NMDA受容体 拮抗作用による鎮痛作用を持つことが示唆された。一方，同時に実施されたTail-flick テストでは，l-メサドンにみられる鎮痛作用を d-メサドンが示さなかった。l-メサド ンの作用はナロキソンで拮抗された。
メサドン塩酸塩 2.6.3 薬理試験概要表 Page 10
2.6.3.3.2 5-HT及びNA再取り込み阻害作用
資料番号 4.2.1.2.3
報告年 1995
試験の概要 ラットより神経膜を調製し，放射性リガンドと競合させ，オピオイド受容体への結合 阻害定数，5-HT及びNA再取り込み阻害定数を求めた。
生物学的物質 ラット（Wistar）の脳，延髄-橋を摘出し，試験に用いるシナプトソームを調製
試験方法の 概要
大脳皮質あるいは延髄-橋のホモジネートからシナプトソームを調製した。メサドン を含む各オピオイド作動薬（それぞれ 5～10 濃度）及びリガンドとして，[3H]5-HT あるいは[3H]NAをそれぞれ5分あるいは6分間作用させ，それぞれのリガンドの再 取り込み量を測定し，各オピオイドの阻害定数（Ki）を求めた。
被験物質 5-HT再取り込み阻害 NA再取り込み阻害
：d-及びl-メサドン（濃度不明）+ 10 nM [3H]5-HT / 5分間
：d-及びl-メサドン（濃度不明）+ 10 nM [3H]NA / 6分間
結果
d-及び l-メサドンは，いずれも 5-HT 再取り込み阻害作用を示し，それぞれの Ki は
992及び14.1 nMであった。更にd-及びl-メサドンは，いずれもNA再取り込み阻害
作用を示し，それぞれのKiは12700及び702 nMであった。同様に比較を行ったモ ルヒネ，オキシコドン，ブプレノルフィン，ナロキソンなどのテトラヒドロフラン環
を有しC4-C5に橋状酸素を持つオピオイドは，5-HTあるいはNA再取り込み阻害作
用を示さなかった。メサドンと同様に非フェナントレンとして評価を行ったトラマ ドールについては，(±)-，(+)-及び(-)-トラマドールのいずれも 5-HTあるいは NA 再取り込み阻害作用を示し，Kiはそれぞれ992, 528及び2350あるいは785, 2510及
び432 nMであった。
資料番号 4.2.1.2.4 報告年 1997
試験の概要 ラットより神経膜を調製し，放射性リガンドと競合させ，5-HT再取り込み阻害定数 を求めた。また，メサドン皮下投与後における5-HT再取り込みの評価を行った。
生物学的物質 ラット（Sprague-Dawley）の大脳皮質から，試験に用いるシナプトソームを調製
試験方法の 概要
大脳皮質のホモジネートからシナプトソームを調製し，メサドン及びリガンドとして
[3H]5-HT を6分間作用させ，リガンドの再取り込み量を測定し，阻害定数（Ki）を
求めた。ex vivo の試験として，急性投与試験ではメサドンの ED50量もしくは ED90
量を投与した30分後にシナプトソームを調製した。慢性投与試験ではメサドンを15 日間投与し，72 時間後にシナプトソームを調製もしくは24時間後にED90量を投与 し30分後にシナプトソームを調製した。これらを用いて，[3H]5-HT取り込みの評価 を実施した。
被験物質
in vitro 5-HT再取り込み阻害：メサドン（濃度不明）+ 5 nM [3H]5-HT / 6分間
ex vivo試験：それぞれの塩酸塩を生理食塩水に溶解し，皮下投与した。
急性投与試験：メサドン投与量（3.5, 35 mg/kg）
慢性投与試験：メサドン投与量（開始時5 mg/kg，2.5 mg/kg/日増量，最終40 mg/kg）
結果
メサドン及びトラマドールの 5-HT 再取り込み阻害作用における Ki はそれぞれ 270
及び760 nMであった。一方，モルヒネは再取り込み阻害作用を示さなかった。ホッ
トプレート法での ED50を皮下投与した時に，トラマドール処理ラットでは 5-HT の 取り込みが 63％まで阻害されたが，メサドンでは認められなかった。一方，ED90を 投与した際に，5-HT取り込み量がメサドンは52％まで阻害されたが，モルヒネでは 認められなかった。メサドン慢性投与の結果，休薬72時間後に5-HT取り込みが90％
増加したが，トラマドールには認められなかった。一方，24時間後にED90量を作用 させた場合，メサドンによる5-HT再取り込み阻害作用は認められなかった。
メサドン塩酸塩 2.6.3 薬理試験概要表 Page 11
資料番号 4.2.1.2.5
報告年 1974
試験の概要 ラットを用いてメサドンを腹腔内投与し，5-HT 及び 5-hydroxyindole acetic acid
（5-HIAA）の脳内濃度を測定した。
生物学的物質 ラット（Sprague-Dawley）
試験方法の 概要
メサドンを含む各薬物を腹腔内投与し，1時間後に脳を摘出し，5-HT及び5-HIAAの 濃度を測定した。さらに，プロベネシド及びパルギリン併用に対する 5-HIAA 及び 5-HTの変化についても評価を行った。
被験物質 メサドン塩酸塩（10 mg/kg，遊離塩基換算）は生理食塩水に溶解し腹腔内投与した。
結果
メサドン（10 mg/kg）の腹腔内投与により，脳内の5-HT，5-HIAA濃度に変化は認め られなかった。モルヒネ（10及び20 mg/kg）は，5-HT濃度に変化を及ぼさなかった
が，5-HIAA濃度は20 mg/kgの腹腔内投与により有意に増加した。同様に評価を行っ
たペチジン（50 mg/kg）及びクロルイミプラミン（15 mg/kg）では，5-HIAA濃度の 減少が認められた。さらに，プロベネシド及びパルギリン投与により脳内の5-HIAA 及び5-HTの経時的な増加がモルヒネ（20 mg/kg）では亢進されたが，メサドンには 認められなかった。
2.6.3.3.3 催吐作用及び制吐作用
資料番号 4.2.1.2.6
報告年 1986
試験の概要 イヌを用いて，各種オピオイドの覚醒下での催吐及び制吐作用を評価した。
生物学的物質 イヌ（雑種）
試験方法の 概要
アポモルフィン（静脈内投与：0.03 mg/kg）及び硫酸銅（胃内投与：16 mg/kg）によ る催吐作用を確認した。次に，オピオイドを静脈内投与した後，15 分後にアポモル フィン単独あるいは硫酸銅を併用投与し，それから15分後までの嘔吐の有無を観察 した。
被験物質 メサドン（0.2, 0.5, 1 mg/kg）は生理食塩水に溶解し静脈内投与した。
結果
メサドン（0.2, 0.5, 1 mg/kg），フェンタニル（0.005, 0.01 mg/kg）及びモルヒネ（0.3, 1, 2 mg/kg）を静脈内投与した結果，メサドン及びフェンタニルではいずれの投与量に おいても嘔吐は見られなかったが，モルヒネは0.3 mg/kg投与で6匹中6匹，1 mg/kg 投与で5匹中1匹に嘔吐が確認された。以上のことより，メサドンの催吐作用はない か，あってもモルヒネよりも弱いものと考えられた。また，薬剤誘発性の催吐は，オ ピオイドの高用量投与によって抑制された。
メサドン塩酸塩 2.6.3 薬理試験概要表 Page 12