び に大 腸 菌 毒 素
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(2) 4224. 本. 倉. に直 接 添加 して そ の影 響 を 観察 して相 互 に比 較検 討. 潔 き,細 菌 毒 素 の各 濃 度 の もの を夫 々血 漿 と同 量 を滴. した.以 下 本 編 に 於 て は被 覆 培養 及 び液 体 培養 に於. 下 し,対 照 に は生 理 的 食 塩 水 を 同 量滴 下 し,次 に鶏. け る赤 白血 球 増 血 に対 して 興 味 あ る結 果 を得 た ので. 胎 圧搾 液 を 同 量滴 下 す る.次 に凹 窩載 物 硝 子 の 凹 窩. 報 告 す る.. の周 囲 にパ ラ フ ィン,ワ セ リンの混 合 物 で 枠 を 作 り, 裏 返 し て 先 の 被 覆 硝 子 に 密 着 さ せ る.そ の ま ま. 第2章 第1節. 実 験 材料 並 び に 実験 方 法. 1). 37.0℃. 過 し,血 漿 の凝 固 を見 届 けて か ら裏返 して,周 囲 を. 実験 材 料. 細 菌毒 素:. 実 験 に使 用 した菌 株 は 当 大学 細. 菌 学 教 室 の保 存 株,即. ち腸 チ フ ス菌 はS57,パ. フ スA菌 はP. A.,パ. ラ チ フ スB菌 はP. B,及. 大 腸 菌 はColi. CommunisのS型. の孵 卵 器 に入 れ,一 定 時 間(10〜20分)経. ラチ び. 株 の分譲を受けた. パ ラ フ ィ ンで封 入 し,再 び孵 卵器 内 に入 れ 時 間毎 に 取 り出 して 観 察 す る. 人 骨髄 培 養 で は海 野 氏 打 抜 載物 硝 子 式 を 用 い た. 先 ず 上記 の方 法 に よ り24×32mmの. 被 覆 硝 子 に組. もの で あ る.こ れ らの各 菌株 を マ ウス に数 代 通過 さ. 織 を植 え,次 に予 め0.9mmの. せ て毒 性 を 高 め,下 表 の 力 価 にな つ た もの よ り細 菌. 穴 の片 面 に被 覆 硝 子 をバ ル サ ムで は りつ け て滅 菌 し. 毒 素 を抽 出 した.. て お き,残. 厚 み の 打 抜 硝子 の. りの片 面 の穴 の周 囲 にバ ル サ ムを 付 け,. 之 を先 の被 覆 硝 子 の 上 に密 着 せ しめ る.次 に ゆつ く. 実 験 に供 した菌 株 及 びLD50. り と全 体 を 傾 け れ ば,本 載 物 硝 子 の 厚 さ即 ち培 養室 の厚 さが小 さい の で メヂ ウ ムの 片面 が上 面 被 覆 ガ ラ ス に密 着 す る.そ の ま ま37℃. の 孵 卵器 内 に入 れ,. 培 地 の 凝 固 を待 つ て裏 返 して 安 置 す る.時 間毎 に取 り出 し圧搾 液 側 の面 か ら観 察 し,再 び 裏返 して 孵卵 器 内 に入 れ る. 動物 通過 した 各 菌 株 を シ ャー レ30〜40枚 の 普 通 寒. 液 体 培 養7)23)で は 教室 久 米 田 ・岩 崎 氏法 に則 り,. 天 培 地 に まい て20時 間培 養 し,そ の 集落 を掻 き集 め. 先 ず 健 康 家 兎 の 大 腿 骨,脛 骨 及 び 上 腕 骨 を取 り出 し,. て生 理 的食 塩 水 で よ く洗 菌 し,次 で金 剛 砂 を適 当 量. 之 を 消 毒 し骨 を 砕 い て 骨髄 を取 り出 し, Gey氏. 混 じて乳 鉢 に移 し,冷 凍 室 内 で2時 間 半 完 全 に 菌体. 1液 に 投入 して ホ モゲ ナ イザ ー に か け,低 速 で30秒. を磨 砕 し,次 で生 理 的食 塩 水 を 加 え て100mg/ccの. 乃 至1分 間 に亘 つ て ホモ ゲ ナ イズ して骨 髄 細 胞 の均. 濃 度 にな し,之 を冷 凍 高速 遠 沈 器 で10000回30分. 第. 遠. 等 な浮 遊 液 を作 る量 この 骨髄 細 胞浮 遊 液 を ス ピ ッツ. 沈 し,そ の上 清 を 低 温 殺 菌 す.之 を 該 菌 の 菌体 毒 素. グ ラス に とつ て, 3000回 転 で約10分 間遠 心 沈 澱 を行. の 原 液 と し更 に生 理 的 食 塩 水 を加 え て10mg/cc,. う.遠 沈 す る と骨髄 の 脂肪 分 は表 面 に浮 び上 り,骨. 1mg/cc,. 髄 細 胞 が 底 に沈 澱 す る.こ の上 清 と共 に脂肪 分 を す. 0.1mg/cc,. 0.01mg/ccの. 濃 度 に した も. の を 添加 物 と して 実験 に供 した.抽 出 した細 菌 毒 素. て,再 びGey氏. は冷 蔵 庫 内 に貯 え 可及 的 速 かに 実験 に使 用 した.. る.沈 澱 した 骨髄 細 胞 を葡 萄糖 を含 ま な い タイ ロー. 2). 実験動物. 家 兎 は 体 重1.5kg前. 後 の健 康. 第1液 で よ く洗 滌 して 再度 遠 沈 す. ド氏 液 中 に入 れ て,均 等 に混 和 して 骨髄 浮遊 液 を作. 雄 性 家 兎 を1週 間 以 上 一定 飼料 を与 え て 健 康状 態 を. り,之 を ワー ル ブル グ検 圧 計 用 の 特 殊 の ボ トル に. 維 持 せ る もの を用 い た.人 骨髄 培養 で は 健 康人 の胸. 1.5cc宛. 骨 穿 刺 を 行 つ て得 られ た組 織 片 を 用 い た.. の を0.5cc宛,対. 第2節. 実験 方 法. で6時. 振 盪 培 養 を行 う.. 間 滅 菌 した も. の を使 用 した.. 第3節 1). 家 兎 骨 髄 培 養 で は 凹 窩載 物 硝 子 式 を 用 い た.先 ず 被 覆 ガ ラス(22×27mm)上. 照 には生 理 的食 塩 水 を0.5cc分. 注 して,こ の ボ トル を ワー ル ブル グ検 圧 計 にか け て. 所 要 器 具 は 教 室大 藤16)等 が 使 用せ る もの を 一式 揃 え,乾 熱滅 菌器 内で120℃. 分注 す る.こ の上 に細 菌 毒 素 の 各濃 度 の も. に ヘ パ リン加 血 漿 を. 観察方法. 被 覆 培 養 で は 培 養 後3, 6, 12及 び24時 間 目に. 観 察 した.家 兎 骨髄 の 培養 で は48時 間 まで 観 察 した. a). 増 生 面 積 の計 測:. 37℃. に温 め られ た保 温. マ ン トー注 射 器 に 吸 引 し, 1/2針 々 先 よ り1滴 滴下. 箱 内 に顕 微 鏡 を 入 れ,対 物 鏡4倍,接. して,硝 子 中 央 に直 径1.5cmに. 備 して ア ツベ の描 画 器 を 用 い て増 生 の状 態 を 逐 時 的. 定 小 組 織 片(1mm3程. な る様 に 拡 げ,一. 度 の もの)を そ の 中 央 に お. 眼 鏡5倍 を装. に描 画 し,そ の面 積 を プ ラニ メー ターで 計 測 した..
(3) 腸 チ フ ス,パ ラチ フ スA, b). 細 胞 密度 の測 定:. B並. び に大 腸 菌 毒 素 の骨 髄 培 養 に 及 ぼ す 影響 につ い て. 接 眼 レンズ5倍,対. 物レ. No.. 102. No.. 103. 4225. ンズ100倍 で増 生 帯 の 周 辺 部,中 間部,中 心 部 の3 区 劃 に就 い て夫 々一 視 野 内 の 細胞 数 を 計算 し,其 の 和 を以 て 密度 指 数 と した. c). 増 生 係 数 の算 定:. 骨髄 細胞 増 生 機 能 の 状 態. を可 及 的 に 真 に近 ず け る ため に,津 島40)の 方 法 に よつ て増 生 係 数 を 規定 して算 定 し,相 互 の骨 髄 細 胞 増 生 機 能 を比 較 検 討 した. ∫t0f(t)・p(t)dt. 増 生 係 数=. /∫t0g(t)・q(t)dt. f(t):実 験 組 織 片 の比 較成 長 価 g(t):対. 照組 織 片 の 〃. 〃. p(t):実 験 組 織 の 密度 指数 q(t):対 照組 織 の. 〃. 〃. 2) 液 体 培 養 で は前 記 教 室久 米 田23)・岩 崎7)の 方 法 に従 い,赤 血 球, Hb量. の測定 を 培養 開 始 前 及 び. 開 始 後3時 間 毎 に行 つ た. a). 赤 血 球 数 の測 定:. 滅 菌 した赤 血 球 計 算 用 メ. 表2. 腸 チ フス菌 毒素 添 加,成 長 係 数 平 均. 表3. 腸 チ フ ス菌 毒 素 添加,細 胞 密 度 指 数. ラ ンジ ュー ル に 細胞 浮 遊 液 を 吸 い,ハ イ エ ム氏液 を 混 じて ビ ュル ケ ル氏 計 算 盤 で 計 算 した. b). Hb量. の 測 定:. を22ccと1/15モ. 1/15モ ル第1燐. 酸 カ リ溶 液. ル第2燐 酸 ソ ー ダ3ccを. 之 を4倍 に 稀釈 した もの を6ccに. 混 和 し,. 血液 浮 遊 液20cmm. を 充分 に混 和 溶血 せ しめた 後,不 溶 解 部 を 遠 沈 除 去 し,次 で20%フ 分 後 に5%シ. ェ リシ ア ンカ リ溶 液1滴 を加 え, 10. ア ンカ リ1滴,更. に2分 後 に ア ンモ ニ. ァ1滴 を夫 々加 え て, 10分 以 内 に分 光光 度 計 で 測 定 した. 第3章 第1節. 実 験 成 績. 細 菌毒 素 の被 覆 培 養 に及 ぼす 影 響 に つ い て.. A) 1). 家 兎 大 腿骨 々髄 培 養 に及 ぼす 影 響 腸 チ フ ス菌 毒 素 添加 の場 合. 次 に1mg/ccで. 先 ず比 較成 長 価 を算 出 して比 較す るに,表1,図 1,に 示 す 如 く10mg/ccの 表1. 高 濃度 で は抑 制 が 強 く,. 腸 チ フ ス 菌 毒 素 添 加,比 No.. 101. 成 長係 数 は表2に 示 す 如 く24時間 値 で0.4と な つ た.. 較成 長 価. は 表1,図1に. 示 す 如 く比 較成 長 価. は 中 等度 に低 く,成 長係 数 は0.7(24時. 間 値)で あ. つ た.爾 余 の濃 度 で は対 照 と大 差 を 見 な か つ た. 細 胞 密度 指 数 は各 濃 度 と も対 照 に比 し有 意 の差 は な か つ た. 増 生 係 数 は 白血 球 系 の骨 髄 細 胞 増 生機 能 の程 度 を 総 合 出 来 る わ け で あ る が 表4,図5に 10mg/ccで. は0.33,. 1mg/ccで. 示 す如 く. は0.68と な り,骨. 髄 機 能 障 碍 が 極 め て 強 い こ とを示 して い る. 2). パ ラチ フスA菌 毒素 添加 の場 合. 比 較 成 長 価 は 表5,図2に. 示 す 如 く10mg/ccの. 添 加例 で は腸 チ フ ス菌 毒 素 添加 例 と同 じ く対 照 に比.
(4) 4226. 本 表4. 表5. 腸 チ フ ス菌 毒素 添 加,増 生 係 数. パ ラ チ フ スA菌 (家 兎). 図1. 毒 素 添 加,比 No.. 倉. 潔 図2. パ ラ チ フ スA歯. 毒 素 添 加,比. 較成長価. 図3. パ ラ チ フ スB菌. 毒 素 添 加,比. 較成 長 価. 図4. 大 腸 菌毒 素添 加,比 較 成 長 価(家 兎). 図5. 腸 チ フ ス,パ. 較成長価. 105. No.. 106. No.. 107. 腸 チ フス菌 毒素 添 加,比 較成 長価 (平 均 値) ラ チ フ スA,. 腸 菌 毒 素 添 加(家. 兎 骨 髄)増. B並 び に 大 生 係数.
(5) 腸 チ フ ス,パ ラチ フ スA, し 骨 髄 増 生 は 悪 く,. 1mg/ccで. 制 が 見 ら れ た え0.1,. 0.0lmg/ccで. 差 が な か つ た.成 表6. 10mg/ec:. 0.4,. 0.9,. あ つ た.. 0.8で. は6時. 間 目 よ り抑. 0.6,爾. 長 係 数(平. パ ラ チ フ スA菌. パ ラ チ フ スB菌 (家 兎). 毒 素 添 加,比 No.. 較成 長 価. 108. 均). No.. 109. No.. 110. 余 の 濃 度 で は. 細 胞 密度 指 数 は表7に 示 す 如 く10mg/ccで 表7. 表9. 4227. 示 す 如 く24時 間 で,. 毒 素 添 加,成. 1mg/cc:. び に大腸 菌 毒 素の 骨髄 培養 に及 ぼす 影 響 につ いて. は対 照 と有 意 の. 長 係 数 は 表6に. パ ラ チ フ スA菌. B並. 毒 素 添 加,細. は対. 胞密 度 指 数. 照 の27に 対 して22で 低値 で あ る が,他 の 濃度 で は対 照 と殆 ん ど同 じで あ つ た. 増生 係 数 は表8,図5に 表8. パ ラ チ フ スA菌. 表10. パ ラ チ フ スB菌. 毒 素 添 加,成. 長 係数 平 均. 表11. パ ラ チ フ スB菌. 毒 素 添 加,細. 胞 密 度指 数. 示 す 如 く腸 チ フ ス菌 毒 素 毒 素 添 加,増. 生係数. の 場 合 と全 く同 様 の 傾 向 を 示 し, 10mg/cc,. 1mg/cc. で は 著 明 な 骨 髄 機 能 障 碍 を 認 め た.. 3). パ ラチ フ スB菌 毒素 添 加 の場 合. 比 較 成 長 価 は 表9,図3に. 示 す 如 く10mg/ccで. は 中等 度 の 増生 の 抑 制 が見 られ,. 1mg/ccで. は梢々. 軽 度 な 抑 制 が 見 られ たが,爾 余 の濃 度 で は寧 ろ梢 々 促 進 の 傾 向 を認 め たが 有 意 の差 はな い.成 長係 数 は 表10に 示 す如 く, 10mg/ccで. は0.6を 示 し,他 の濃. 度 で は0.9〜1.1の 値 を 示 した. 細胞 密 度 指 数 は 対 照 の35に 対 し10mg/ccで を示 し,爾 余 の濃 度 で は30〜39の 間 に あつ た. 増 生 係 数 は 表12,図5に. 示 す 如 く10mg/cc,. は39. 表12. パ ラ チ フ スB菌. 毒 素 添 加,増. 生係数.
(6) 4228. 本. 1.0mg/cc,. 0.1mg/ccで. を 示 し, 0.01mg/ccで. は0.75 は1.23と. 0.86, な り,高. 軽 度 の 骨髄 機 能 障 碍 を 認 め た が,腸 フ スA菌 4). 倉. 0.93の. 潔. 値. 表15. 大 腸 菌 毒 素 添加,細 胞 密 度 指 数. 濃 度 では. チ フ ス,パ. ラチ. 毒 素 の 場 合 程 の 障 碍 は 認 め な か つ た.. 大 腸 菌毒 素 添 加 の場 合. 比 較 成 長 価 は 表13,図4に 表13. 示 す 如 く12時 間 目 よ り. 大 腸 菌 毒 素 添 加,比 No.. 較 成 長 価(家. 兎). 111 細 胞 密 度 指 数 は 表15に 1mg/ccで46,. 41(対. 照:. 増 生 係 数 は 表16,図5に. 表16. No.. 示 す 如 く, 10mg/cc, 37)で. あ つ た.. 示 す 如 く全 濃 度 に 於 て. 大 腸 菌 毒 素 添加,増 生 係 数. 112. 0.92〜1.25の. 間 に あ り,骨. 髄 機 能 は 梢 々促 進 の傾 向. が 見 ら れ た. B) 1) No.. 健 康 人 骨髄 培 養 に及 ぼ す 影 響 腸 チ フ ス菌 毒 素 添加 の場 合. 比 較 成 長 価 は 表17,図6に. 113. 示 す 如 く, 10mg/cc,. 1mg/ccで. は 中 等 度 の 増 生 の 抑 制 が 見 ら れ た.. 0.1mg/ccで. は 対 照 よ り 梢 々 低 下 し, 0.01mg/cc. で は 対 照 と 同 じ で あ つ た.成 表17. 表14. 0.1mg/ccの. 場 合 は 対 照 よ り 梢 々 軽 度 の 増 生 の 抑 制 を 認 め た. は 全 く対 照 と 同 じで0.01mg/ccで. 梢 々. 増 生 の 促 進 を 認 め た が 有 意 の 差 は な か つ た.従 そ の 成 長 係 数 は10mg/ccで は0.9〜1.1の. 腸 チ フ ス 菌 毒 素 添 加,比 No.. 201. No.. 202. 大 腸 菌 毒 素 添 加,成 長 係 数(平 均). 差 が 出 来 始 め, 24時 間 で は10mg/cc,. 1mg/ccで. 長 係 数 は10mg/cc,. 間 で あ つ た.. は0.8で,他. つて. の濃 度 で. 較 成 長 価(人. 間).
(7) 腸 チ フス,パ 表18. ラチ フスA,. 腸 チ フ ス 菌 毒 素 添 加,成. B並. 長 係 数(平. び に大 腸 菌 毒 素 の骨 髄 培養 に 及 ぼす 影 響 につ い て 均). 細 胞 密 度 指 数 は 表19に 示 す 如 く10mg/cc, 0.1mg/ccで. (人 間). 表19. 1mg/cc,. は対 照 よ り梢 々低 値 を示 した で. 増生 係 数 は表20,図8に. 図6. 4229. 示 す如 く家 兎骨 髄 と同 じ. 腸 テ フス菌 毒 素 添 加,細 胞 密 度 指 数(人 間). 腸 チ フス菌 毒 素 添加,比 較 成 長価(平 均). 表20. く10mg/cc, を 示 し,強 2). 図7. 大腸 菌 毒 素 添 加,比 較 成 長 価(人 間). 腸 チ ス菌 毒素 添 加,増 生 係数(人 間). 1mg/cc,. 0.1mg/ccで. は 非 常 に低 値. い 骨 髄 機 能 障 碍 を 認 め た.. 大 腸菌 毒素 添 加 の 場 合. 比 較 成 長 価 は 表21,図7に 1mg/ccで. 示 す 如 く, 10mg/cc,. は対 照 よ り促 進 の 傾 向 を認 めた が大 差. が な い 点 は 腸 チ フ ス 菌 毒 素 の 場 合 と 大 い に 異 な る. 成 長 係 数 は10mg/cc, 時 間 値)で. 1mg/ccで1.1,. 大 差 は な か つ た.. 細 胞 密 度 指 数 は10mg/cc, 表21. 図8. 1mg/ccで. 大 腸 菌 毒 素 添 加,比 No.. 203. No.. 204. 腸 チ フ ス,大 腸 菌 毒 素添 加(人 骨 髄) 増生係数. 1mg/ccで で あ つ た.以. は0.5,. 0.6(24時. 間 値)で. 対 照 の50%. 下 の 濃 度 で は 対 照 と大 差 は な か つ た.. 1.0(24. 夫 々39(対. 較 成 長 価(人. 間).
(8) 4230. 本. 照:. 54)で. 倉. 潔. 表25. 低 値 を 示 し て い た.. 増 生 係 数 は 表24,図8に 1mg/ccで. は0.82,. 0.80,と. 腸 チ フス菌 毒 素 添加,液 体 培 養. 示 す 如 く, 10mg/cc, 梢 々軽 度 の骨 髄 機能. 障 碍 が 見 ら れ た. 表22. 大 腸 菌 毒 素 添 加,成. 表23. 長 係 数,平. 均,(人. 間). 大 腸 菌 毒 素 添加,細 胞密 度 指 数(人 間). 表24. 大腸 菌 毒 素添 加,増 生 係数(人 間) 濃度 に於 て も対 照 に比 し劣 る.そ して高 濃度 に な る 程 劣 る よ うで あ るが大 差 は ない. 血 色 素 量 の 増加 状 態 も表25,図10に も増 加 は 認 めず,而. 示 す 如 く何 れ. も対 照 よ り も梢 々 減少 して 居 た.. 全 般 的 に腸 チ フ ス菌 毒 素 は 細 胞 増生 に対 して 梢 々抑 制 的 で あつ た. 第2節. 細 菌毒 素 の 液体 培養 に及 ぼ す 影響 につ い て.. 1). パ ラチ フスA菌 毒素 添 加 の 場 合. 赤 血 球 増 加 率 は表26,図11に. 示 す 如 く何 れ の. 著 明 で な かつ た. 血 色素 量 の 増 減 は 表26,図12に. 図9. 示 す 如 く何 れの 濃度. に於 て も対 照 よ り も梢 々劣 るが,濃 度 に よ る差 異 は. 腸 チ フ ス菌 毒素 添加 の 場 合. 赤 血球 数の 増 加 率 は表25,図9に. 2). 示 す如 く何 れ の濃. 腸 チ フ ス菌 毒 素添 加 赤 血球 増 加 率 図10. 腸 チ フ ス菌 毒 素 添加Hb増. 加量.
(9) 腸 チ フス,パ ラチ フ スA, 表26. パ ラ チ フ スA菌. 毒 素 添 加,液. B並. び に大 腸 菌 毒 素 の 骨髄 培 養 に及 ぼ す 影響 に つ いて. 体培養. 4231. 度 に於 て も時 間 と共 に減 少 して 行 つ た が,何 れ も対 照 と有 意 の差 を認 めな か つ た. 3). パ ラチ フ スB菌 毒 素添 加 の 場 合. 赤 血球 増 加 率 は 表27,図13に 10mg/ccで. 示 す 如 く,高 濃 度. は対 照 と 略 々同 じ成 績 を得,他. の濃 度. で は 梢 々対 照 よ り低 値 を示 したが,何 れ に せ よ有 意 の差 は認 め な か つ た. 血 色 素 量 の増 減 は表27,図14に. 示 す如 く6時 間 よ. り血 色 素 の 減少 が梢 々著 明 に なつ て 居 る. 表27. 図11. パ ラ チ フ スA菌. 毒 素 添 加,赤 血 球 増 加 率. 図13 図12. パ ラ チ フ スA菌. パ ラチ フスB菌 毒素 添 加,液 体培 養. 毒 素 添 加,Hb増. 加量. パ ラ チ フ スB菌. 毒 素 添 加,赤. 血球 増加 率.
(10) 4232 図14. 本 パ ラ チ フ スB菌. 毒 素 添 加,. Hb増. 倉. 加量. 潔 図15. 図16. 4). 大 腸 菌 毒 素添 加,赤 血球 増加 率. 大 腸 菌 毒 素添 加Hb増. 加量. 大腸 菌 毒 素 添 加 の場 合. 赤 血 球 増 加 率 は 表28,図15に (10mg/cc)で. は6時 間,. 示 す如 く高濃 度. 9時 間 で 対 照 と略 々同 じ. 値 を 示 した が, 3時 間 で は対 照 に 比 し増 加 率 は 劣 つ て 居 た.爾 余 の 濃度 で は対 照 よ り梢 々 劣 るが,大 差 は 認 め られ なか つ た. 血 色 素 量 の増 減 は表28,図16に. 示 す 如 く対 照 に比. し,よ り減少 して 居 た が著 明 の差 はな い よ うで あ る. 以 上 液体 培 養 で は 前述 の白 血球 系 に対 す る影 響 に 表28. 量 大 腸 菌 毒 素 添 加,液. 体 培養. 比 し,細 胞 増 生 に対 す る影響 は抑 制的 で は あ るが 軽 度 で あ り,又 各 菌 種 に よ る,又 各 濃 度 によ る影響 差 は 著 明 で は なか つ た. 第3節. 腸 チ フ ス患 者 血清 の家 兎 大 腿 骨 々 髄 培 養 に及 ぼ す影 響 につ い て.. 幸 い に腸 チ フ ス患 者 血 清 を入 手 す る こ とが 出来 た の で家 兎大 腿骨 々髄 の 被 覆 培養 に本 患 者 血 清 を添 加 して骨 髄 細 胞 増 生 に対 す る影響 を観 察 した. 腸 チ フ ス患 者 は表29に 示 す よ う に竹 ○,赤 ○2人 の 患者 で病 日,血 液 像,臨 床 像 の要 点 は表29に 示 す 通 りで あ る.竹 ○ は 末 梢 血液 像 で4000と い う白血 球 減 少 を認 め,恢 復 後 は()内. に示 す よ うに7500に. な つて い た,又 赤0で は 著 明 な 白血 球 減 少 を 認 めな かつ た. 患 者 竹 ○ の 血 清 添 加 の 場合: 表30,図17に. 示 す如. く比 較 成 長 価 は 対 照 に比 し可 成 り組 織 増 生 の 抑 制 を 認 め た.細 胞 密 度 指 数(24時. 間値)は 対 照 の36に 対. し34で あつ た.以 上 よ り本 血 清 中 に は 明 らか に骨量 髄.
(11) 腸 チ フス,パ 表29. ラチ フスA,. B並. び に大 腸 菌毒 素 の骨 髄 培 養 に及 ぼす 影 響 につ い て. 腸 チ ヲ ス 患 者 臨 床 像. 図18. 腸 チ フ ス患 者(赤 ○)血 清 添加,比. 4233. 較成. 長価. 値)も 両者 同値 で あ り,骨 で 髄 細 胞増 生 機 能 の 障 碍 の ()内 表30 竹. 恢 復後. 腸 チ フ ス 患 者 血 清 添 加,比. ○,〓,. 程度 は極 めて 軽度 で あつ た. 較成 長 価. 第4章. 26才. 総 括 並 び に考 按. 腸 チ フ ス症 の特 異 な 白血 球 減 少 症 の 本 態 につ い て は,嘗 つ てNaegeli87)が Knochenmarkahemmungに 浴 び,そ の後Barta60), ()細 図17. 胞 密 度 指数(24時. 間値). 腸 チ フ ス患 者(竹 ○)血 清 添加,比 較成 長価. このNaegeli87)説. 腸 チ フス菌毒 素に よる よ る と述 べ世 の注 目を Meinertz86)及 び三 島47)は. に 同 調 した.次 でFrank66)は. 腸 チ フ ス菌 に よ つ て脾 並 び に 淋 巴装 置 に新 生 され た 組織 即 ちtyphose. neubildungが. 骨髄 に 作 用 し,骨. 髄 の 白血 球 成生 を阻 止 す るた め だ とい う新 説 を 立 て た.又 藤 森45)は 白 血球 の動 員 障 碍 及 び白 血球 の成 熟不 全 に よ る もの で あ る との べ, Galinowski69)は 白血 球 の 動 員 障碍 に よ る もの で あ る との べ て い る. 更 に下 山28) (1951)は 骨髄 内 白血 球 の 核分 裂能 が下 降す るた め で あ る との べ て い る. 以 上 は 大体 骨 髄 内 に そ の成 因 を求 め て い るが,横 田56)は 骨髄 内 に は本 質 的 な もの は認 め ら れず,腸 チ フ ス症 の 白血 球 減少 症 は末 梢 に 於 け る好 中球 の 消 耗 の 様相 に よ る と の べて い る.又Rohr94)は. 内 白血 球 の 再生 と末 梢 の 消 耗 の釣 合 の 問 題 で腸 チ フ. 細胞 増 生 機能 の障 碍 因 子 を 認 め た. 患 者赤 ○ の血 清 添 加 の場 合:. 表31,図18に. 示す. 如 く,比 較成 長 価 は 対 照 よ り梢 々低値 を示 して 居 る が 有 意 の差 は 認 め な かつ た.細 胞 密度 指数(24時 間 表31. 腸 チ フ ス 患 者 血 清 添,比. 骨髄. 較 成 長 価(赤. ○). スに 於 て は再 生 に比 し消耗 が よ り烈 しい た めで あ る と述 べ て い る. 以 上 の 如 く色 々 の説 が 見 受 け られ るが,そ の 何 れ も今 日尚 未 だ に完 全 な定 説 と して は認 め られ て い な い.そ の理 由 と して は先 ず之 等 の研 究 はそ の 方法 に. 赤. ○. ♀,. 5才. 於 て時 代 と共 に変 遷 して きて は い るが,更 に新 しい 角度 か ら新 しい方 法 を以 て 観 察 す る余 地 と必 要 が あ る か らで あ ろ.即 ちNaegeli87)の. 観 察 は 剖検 によ. つ て 得 た骨髄 所 見 で あ る.次 でArinkinの. 胸骨穿. 刺 術 発 明以 後 は胸 骨 穿刺 に よ る骨 髄 所 見 の 研 究 が 行 ()細. 胞密 度 指 数(24時. 間値). わ れて 来 たが,何 れ もマ イギ ムザ 染 色 にた よつ た 研.
(12) 4234. 本. 倉. 潔. 究方 法 で あ つ て,組 織 培養 に よ る生態 観 察 に よつ た 研 究 はNaegeli87)の. み な ら ず,他. の総 て の研 究 者. 次 に 腸 チ フ ス患 者 血 清 を 健 康家 兎骨 髄 に添 加 して, の 同 血 清 の 骨髄 造 血 機 能 に及 ぼ す 影響 につ い て 研 究 し. の間 に於 て も全 く見 当 らな い.次 には従 来 の研 究 は. たが,そ の私 の成 績 で は,本 血 清 は家 兎 の 骨髄 白血. 生 体 内 で 細 菌毒 素 の 働 い た後 の 骨髄 や 血 液 を 観察 し. 球 造 血 に対 して 障 碍 作 用 の存 在 す る こ とを確 め た.. た もの で,之 で は生 体 内 の複雑 な防 禦 機 転 が この間. この腸 チ フ ス患 者 血 清 中 に は腸 チ フ ス菌 毒 素 を も含. に関 与 してい るの で,細 菌 毒 素 の造 血 器 に対 す る直. ん で居 るで あ ろ うか ら,そ の 影 響 も考 え られ るが,. 接 の 影響 を うか が うこ とは不 可能 で あ る.こ の 点 に. 尚他 の 血 清 中 の 諸物 質 に よ る影 響 も も とよ り除 外 す. つ い て は造 血 器 を体 外 に取 り出 して,他 の器 官 との. るわ けに は い かな い.し か し何 れ に して も以 上 の実. 関係 を断 ち きつ て,之 に対 す る細 菌 毒 素 の影 響 を み. 験 を総 合 す ると,生 体 内 に 於 て本 症 の 骨髄 機 能(白. る外 はな い が,従 来 か か る試 み は 全 く行 われ て い な. 血 球造 血)を 抑 制 す る因 子 と して は腸 チ フス 菌毒 素. い.そ こで私 は骨髄 を体 外 に取 り出 して,こ れ に 腸. の 骨髄 に対 す る直 接 の 作 用 が主 要 な 役 割 を果 して い. チ フ ス菌 毒 素 を直 接 添加 して,骨 髄 対 細菌 毒 素 との. る こ とが考 え られ る.. 関 係 を検 討 し,本 症 の血 液 所 見 の 本態 の 一 端 を解 明. 次 に感 染 症 の 発 症 に つ い て の宿 主 対 菌 との組 合 せ の 関係 は特 異 な もの で,腸 チ フ ス菌 は人 以外 の如 何. しよ う と試 み た次第 で あ る. 先 ず健 康 家 兎 骨髄 被 覆 培 養 に よ る成 績 を総 括 して 見 るに,腸 チ フス菌 毒素 の10mg/ccの. 濃度 で は,. な る動 物 に も同 様 の チ フ ス症 を 惹 起 し得 ず,又 家兎 の腸 チ フ ス様 疾病 はパ ラチ フ スC菌 の み に よつ て惹. 髄 細胞 増 生機 能 に対 す る. 起 され る とい わ れて い る.勿 論 これ は血 液 像 に関 す. 障碍 作 用 が極 めて 強 い こ と を 示 して い る.又 この. る もの で は な い が,腸 チ フス 菌 毒 素 の健 康 人 骨髄 と. 0.01mg/ccの. 健 康 家 兎骨 髄 に対 す る私 の 実験 に於 て も,両 者 の間. そ の増 生 係 数 は0.33で,骨. 濃 度 で は増 生 係 数 は0.95で あ る.之. に反 して大 腸菌 毒 素 で は全 濃度 に 於 て その 増生 係 数. に 何 か相 異 はな い か と想像 して 観 察 した が,何 の 差. は1.0前 後 で,骨 髄 細 胞 増 生 機 能 に対 して有 意な 影. 異 を も見 出 し得 な か つ た.即. 響 は認 め られ な い.次 にパ ラチ フ スA菌 毒 素 は腸 チ. 出 した一 造 血 器 に 対 す る毒 素 の 影 響 に は種 族 特 異性. フス菌 毒 素 に一致 し,パ ラチ フ スB菌 毒 素 は大 腸 菌. は存 在 しな い 事 が 明 らか に なつ た.. ち之 に よ り体外 に取 り. 毒 素 に近 似 した成 績 を 得 た.以 上 よ り腸 チ フ ス菌 毒. 次 に従 来 よ り細 菌学 上 パ ラチ フスA菌 は腸 チ フス. 素 の 骨髄 白血 球 造 血 に 対 す る障 碍 作 用 は極 めて 強 い. 菌 に,パ ラチ フスB菌 は大 腸 菌 に似 た性 質 を有 す る. こ とを た しか め得 た.. といわ れ て い るが,私. 以 上 の成 績 よ り腸 チ フ ス症 の 白血 球 減 少 の 成 因 と して は,腸 チ フ ス菌 毒素 の 骨髄 に対 す る直 接 の 障碍. の 実 験 成 績(2,. 3編 の成 績. を 含 む)に 於 て も同 じよ うな 傾 向 を認 め た事 は誠 に 興 味 あ る知 見 で あ る.(表32参. 照). 作 用 が重 要 な 因子 の一 つ に なつ て い る と考 え られ る. 表32. 腸 チ フ ス,パ. 次 に 赤 血 球 系 に つ い て 述 べ る.腸. ラ チ フ スA,. チ フス症 に 於て. B,大. 腸 菌 の鑑 別 培 養 基 上 の 諸性 状. & Finch92),. Davidson64),妹. 尾33),長. 谷 川43)等 は. 貧 血 が く る こ と は 古 来 み と め ら れ,骨. 髄 内 に於 て も. 何 れ も網 内 系 に 鉄 が 抑 留 さ れ て,血. Galinowski72),寒. 田56),下. 来 た し て 貧 血 が 起 る と述 べ て い る.又Gubler76)は. 川26),村. 瀬50),横. 等 が 幼 若 赤 血 球 の 減 少 を 認 め て い る.し 成 因 に つ い て はHeilmyer77),. 山 四). か して そ の. Greenberg74),. Rath. 清 中 に鉄 欠 乏 を. 腸 管 よ りの鉄 の吸 収 が 減 退 す る た め に血 清 中 に鉄 が 欠 乏 す る た め で あ る と述 べ て い る.し. か ら ば本症 の.
(13) 腸 チ フ ス,パ. ラ チ フ スA,. B並. び に 大 腸 菌毒 素 の 骨 髄 培 養 に 及 て ます 影 響 に つ い て. 4235. 貧 血 が血 清 中 の 鉄 欠 乏 の み が主 因 で あ ろ うか?換 言. 清 を健 康家 兎 骨 髄 組 織 培 養 に 添加 して,そ の 骨髄 組. す れ ば腸 チ フ ス菌 毒 素 が骨髄 内 赤 血球 系 に対 して直. 織 増生 に及 ぼす 影 響 を 観 察 し,次 の結 論 を 得 た.. 接 如 何 な る態 度 を示 す か につ い て は詳 か に され て い. 1). 家 兎 骨髄 増 生 機 能 を 抑 制 す る作 用 は 腸 チ フス. な い.私 は こ こに注 目 して 実 験 を試 み たわ けで あ る. 菌 毒 素 がパ ラチ フ スA菌 毒 素 と共 に最 も強 く,大 腸. が,私 の 成績 に よ ると赤 血球 増加 率 及 び血 色 素増 加. 菌 毒 素 は殆 ん ど影 響 を認 めな い.又 健 康人 骨髄 に対. 量共 に腸 チ フ ス菌毒 素 を 初 め,何 れの 毒 素 に於 て も. す る腸 チ フ ス,大 腸 菌毒 素 の 影 響 も健 康家 兎 骨 髄 に. 著明 の影 響 を 受 けず,対 照 に比 し軽度 に低 下 して い. 対 す る それ に全 く同 じで あ る.以 上 よ り腸 チ フ ス症. る程 度 で あ つ た.又 毒 素 の濃 度 に よ る影響 も大 した. の 白血 球 減 少 の成 因 と して は,腸 チ フ ス菌 毒 素 の 骨. もの はな か つ た.. 髄 に対 す る直 接 の障 碍 作 用 が主 要 な因 子 の 一 つ に な つ て い る と考 え られ る.. 以 上 の成 績 は骨髄 内 の赤 血 球 に対 して も,又 血 色. 2). 素 量 に対 して も直 接 細 菌 毒素 が重 要 な影 響 を与 え る. 生 機 能 を直 接 抑 制 す る因 子の 存 在 が 認 め られ る.. もの で は な い こ とを 立 証 し得 た もの で あ る.従 つ て 本 症 の 貧血 は前 述 のHeilmeyer77),妹. 腸 チ フ ス患 者 血 清 中 に は健 康 家 兎 骨髄 組 織 増. 3). 尾33)等 の主. 健 康 家 兎 骨髄 内赤 血 球 及 び 血 色 素 量 に対 す る. 張 す るよ うに網 内 系 に於 け る鉄 の抑 留 及 び そ の他 の. 之 等 細 菌毒 素 の 直 接 作 用 は有 意 な もの で は な い.従. 二 次 的反 応 が主 役 を演 ず る もの で あ ろ う と思 わ れ る.. つ て腸 チ フ ス症 の 貧 血 は従 来 の 説 の 如 き鉄 の網 内 系. 即 ち私 の 実 験 は諸 家 の 説 を逆 説的 に裏 付 け得 た もの. 抑 留 そ の他 二 次 的反 応 が主 役 を 演 ず る もの と推 察 さ. と して 意 義 が 深 い.. れ る.. 第5章. 結. 論. 私 は 腸 チ フス,パ ラチ フスA,. B並. び に 大腸 菌. 擱 筆 す る に 当 り終 始 御 懇 篤 な御 指導 御 校 閲 を 賜 つ. 毒 素 を健 康家 兎 骨髄 組織 培 養 に添 加 し,次に 大 腸 菌,. た 恩 師 平木 教授 並び に 大 藤 助教 授 に 深 甚 な る謝意 を. 腸 チ フス菌 毒 素 を健 康人 骨 髄 組 織 培 養 に添 加 して組. 表 します.. 織 増生 に対 す る影響 を,又 同 細 菌毒 素を 健 東家 兎 骨. (本 論文 の 要 旨は 昭 和33年 日本 血 液 学 会 第20回 総. 髄 液体 培 養 に添 加 して 赤 血球 増加 率 並 び に 血 色 素増. 会 に 於 て発 表 した). 加 量 に対 す る影響 を 追 求 した.更 に腸 チ フス患 者 血. Influences A, Part.. of Toxins B and. 1. coli. Escherichia. Influences on -by. the. of Salmonella Coli. of toxins. bone-marrow. cover-slip. Typhi,. on Bone-Marrow. of S. tissue. method. Salmonella. typhi, culture. and. culture. S.. Tissue paratyphi. of rabbits in fluid. Paratyphi Culture A, and. B and. E.. human. medium. - By Kiyoshi Department. Motokura. of Internal Medicine Okayama University (Director: Prof. Kiyoshi Hiraki). Medical School. By loading toxins of S. typhi, S. paratyphi A, B, and E. coli to the bone-marrow tissue culture of normal rabbits as well as loading toxins of E. coli and S. typhi to the bone-marrow tissue culture of normal persons, the author studied the influences of these toxins on the tissue growth; and also by adding the toxins of the same bacilli to the bone-marrow.
(14) 4236. 本. tissue,culture rate with the. typhoid. normal. fever. influences 1.. the. of. of erythrocyte. toxins. leucopoetic. of E.. coli. E. coli the. bone. the. toxins. shows. of. the. 2.. It. fever. to th. bone-marrow. there. serum. on the. hardly. any. of normal S.. typhi. leukopenia has. factors. From the. and. the. the. are. results. bone-marrow. of patient. the. author. it is assumed. inhibiting. while. toxins. identical. observed. results.. the action. degree,. of the. exactly. increasing. serum. following. possess. greatest. influences. on the the. rabbits. B both. to the. persons. influences loading. obtained. A and. these. by. of normal. marrow. Moreover,. rabbits.. that. growth,. of normal. disturbing. recognized. culture. bone. the. Further,. S. paratyphi. effect.. in typhoid. been. exist. tissue. rabbit. tissue. pursued. content. tissue. and. of the. 潔. medium,. hemoglobin. of S. typhi. bone-marrow. marrow. causing. and. functions. on the. in fluid. count. of the. The. rabbits. 倉. the. toxin. of S. typhi. with. those. and. against. that. a direct. action. of. plays. an. important. role. in. of. patient. functions. fever. that. in the. directly. serum. of the. the. growth. inhibit. serum of the. the. normal. rabbit. with. typhoid. bone. marrow. tissue. 3. normal. The. direct. rabbit. bone. action. loendothelial. system. seem. a leading. to play. of these. marrow and. toxins. on the. erythrocytes. is not so significant. another. role. for. secondary the. anemia. Therefore,. reaction, in typhoid. which fever.. and the are. hemoglobin iron-retention. the commonly. content in the accepted. in the reticu theory,.
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