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Mouse Direct PCR Kit (For Genotyping) Biotool Mouse Direct PCR Kit は準備時間を短縮し マウスのジェノタイピングに適した PCR 増幅を可能にします バッファー L とプロテアーゼ Plus はマウス組織をすばやく消化し 完全なゲノム

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Academic year: 2021

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(1)

BizScience Catalog

P2 Animal Experiment

-Mouse Direct PCR Kit (For Genotyping)

P3 Western Blot

-Protease Inhibitor Cocktail

(EDTA-Free, 100X in DMSO)

-Phosphatase Inhibitor Cocktail

(2 Tubes, 100X)

P4 Molecular Cloning

-Quick-Fusion Cloning Kit

-2x PCR Super Master Mix

P5~6 qPCR

-All-in-One cDNA Synthesis SuperMix

-SYBR Green One Step qPCR Kit

-2x SYBR Green qPCR Master Mix

P6~7 Cell Biology

-Cell Counting Kit-8 (CCK-8)

-Mycoplasma Detection Kit

QuickTest (10 min)

(2)

Mouse Direct PCR Kit (For Genotyping)

Biotool™ Mouse Direct PCR Kit は準備時間を短縮し、 マウスのジェノタイピングに適した PCR 増幅を可能にします。 バッファー L とプロテアーゼ Plus はマウス 組織をすばやく消化し、 完全なゲノム DNA を 得ることができます。 そして、 PCR 増幅のテンプレートとしてそのまま使用できます。 このキットを使用することで、 ゲノム DNA を30 分以内に抽出することができます。 加えて、2 x M-PCR OPTI™ Mix (最適化された Taq Polymerase と loading dye を含む ) はターゲット DNA の増幅効率を高めています。

Cat # Description Size

B40013 Mouse Direct PCR Kit (200) 200 rxns B40015 Mouse Direct PCR Kit (500) 500 rxns B40018 Mouse Direct PCR Kit (2000) 2000 rxns B45012 2 x M-PCR OPTI Mix (Dye Plus) 500 rxns B45013 2 x M-PCR OPTI Mix (Dye Plus) 2000 rxns

Lane 1-10 represents different PCR primers. Two of them serve as the negative controls (Lane 9 and 10) which only display bands when using the transgenic mouse sample. Therefore, Biotool™ mouse direct PCR kit ensures a higher PCR specificity, making it a reliable product for scientific research.

Application 1)

This kit is available to muscle, liver and other tissues except for tail, ear and toe.

Application 2)

Testing of tissue digestion time. P1-P3 represents different primers.

Application 3)

Testing of template volume in 20 μL PCR reaction system.

Application 4)

Testing of kit in 10 μL PCR reaction system.

Application 5)

Testing of storage condition for extracted DNA samples.

Application 6)

2 x M-PCR OPTI™ Mix had been stored for one month at indicated temperature.

Application 7)

Repeated Freeze-Thaw cycles (as indicated by #T) of 2 x M-PCR OPTI™ Mix.

Application 8)

Repeated Freeze-Thaw cycles (as indicated by #T) of Buffer L.

Applications

(3)

Protease Inhibitor Cocktail (EDTA-Free, 100X in DMSO)

内在性タンパク質は平衡状態の中で生成され、 除去されています。 細胞レベルは一般的に安定した環境条件の下では安定しています。 しかし、 細胞を生体 外で扱う際、 タンパクの生産は止まり、 分解が促進します。 このような条件下でタンパクの分解を防ぐには、 小さい分子の阻害物質を使ってプロテアーゼの作 用を阻害することができます。

一般的にプロテアーゼ阻害剤を動物のセルライセートや組織抽出物に用いてタンパク質を安定させます。 Protease Inhibitor Cocktail はリン酸化タンパク質や非 リン酸化タンパク質を分解するプロテアーゼを阻害するように働きます。

Cat # Description Size

B14001 Protease Inhibitor Cocktail 1ml B14002 Protease Inhibitor Cocktail 1ml x 10 B14003 Protease Inhibitor Cocktail 1ml x 100

Phosphatase Inhibitor Cocktail (2 Tubes, 100X)

リン酸化保護のためには多くの阻害剤を用いることで良い結果をもたらします。 この商品は 2 本のチューブ (8 種類の阻害剤) で構成されています。

タンパク質と脂質のリン酸化は細胞内のシグナリングやメタボリックの状態を保証します。過去、研究者は容易に入手できる擬態性のリン酸塩(チューブ A)を使っ て生体外で生物分子のリン酸化の損失を防いでいました。 しかし最近では、 多くの天然由来物質 (チューブ B) が脱リン酸化酵素の強力な阻害剤として見つ かり、 保護できる範囲が増えています。

Cat # Description Size

B15001 Phosphatase Inhibitor Cocktail (2 Tubes, 100X) 1ml B1ml A B15002 Phosphatase Inhibitor Cocktail (2 Tubes, 100X) 1ml B x 101ml A x 10 1) Biotool Protease Inhibitor Cocktail provides protein stabilization for

your protein of interest. Low-expression of protein in HCT-116 cells can also be detected clearly.

Customer's Review

2) Biotool protease inhibitor cocktail provides the best protection for β-catenin,while Roche tablet performs poorly.

Ingredient 100x Conc. Target

AEBSF 104 mM Serine proteases Aprotinin 80 uM Serine proteases

Bestain 5 mM Aminopeptidases

E-64 1.5 mM Cysteine proteases

Leupeptin 2 mM Serine and cysteine proteases Pepstain A 1.5 mM Aspartic proteases

Contents)

1) Biotool cocktails protect phosphorylated AKT and ERK better than their competitor.

Customer's Review

3) The 100X solution performs as well as Roche tablets in protecting total and phosphorylated p38.

2) Biotool cocktails allow for detectable phosphorylated AKT after 7 hours of immuno-precipitation.

Application)

Western Blot analysis, Co-IP, pull-down, IF, IHC, kinase assay and etc.

Protocol)

(4)

Quick-Fusion Cloning Kit

Quick-Fusion Cloning Kit は DNA フラグメントの直接クローニングをあらゆるベクターのどの部位にもすばやく行うよう設計されています。 このキットを用いることで 研究者は PCR 生産物の制限酵素消化を必要とせず、 制限酵素部位の選択が自由になります。 加えて、 直線化したベクターと PCR 生産物は 37C でたった 30 分以内で環化することができます。 従来のクローニング法に対し、 15 から 20 塩基を直線化したベクターの末端に対応した PCR プライマーの末端に追加し ます。

Cat # Description Size

B22611 Quick-Fusion Cloning Kit 40 rxns B22612 Quick-Fusion Cloning Kit 100 rxns

2x PCR Super Master Mix

2x PCR Super Master Mix はすぐに使用できるプレミックスの溶液で DNA ポリメラーゼ、 dNTPs、 MgCl2、 反応バッファーを含んでいます。 最適化された濃度 で効率の良い DNA テンプレートの増幅を PCR で可能にします。 DNA ポリメラーゼは耐熱で 3´ → 5´ エクソヌクレアーゼ活性を持ち、通常の Taq DNA ポリメラー ゼに対し 6 倍の確実性を有しています。 PCR 生産物は 3´ 末端に dA オーバーハングを含み、 T/A ベクターにライゲートできます。

Components: 100 U/ml of Taq DNA polymerase, 0.5 mM dNTP, 4 mM MgCl2, 3´ → 5´ exonuclease, tracking dye and stabilizers.

Cat # Description Size

B46015 2x PCR Super Master Mix (dye plus) 500 rxns B46018 2x PCR Super Master Mix (dye plus) 2000 rxns B46019 2x PCR Super Master Mix (dye plus) 5000 rxns B46025 2x PCR Super Master Mix (dye minus) 500 rxns B46028 2x PCR Super Master Mix (dye minus) 2000 rxns B46029 2x PCR Super Master Mix (dye minus) 5000 rxns

Robust and reliable reactions)

All of the components are optimized, with the amplification efficiency exceeding 2kb/min.

High specificity and fidelity)

The specially modified DNA polymerases ensure a PCR amplification with high specificity and fidelity.

Cost-effective)

Cost-effective compared to our competitors. • No ligase required

• No PCR fragment cleaving required

Advantages

• Fast fusion, only 30 minutes

• DNA fragment can be cloned into any vector at any site

Customer's Review

1) Quick-Fusion System worked efficiently with low Negative

Backgroud. 2) PCR verification showed all 5 colonies are positive clones of insert sequence.

Advantages

Comparison)

P1-P4 represents different PCR primers and P4 serve as a negative control.

Reviews)

Genomic DNA PCR. Lane 1-6 represents different primers.

(5)

All-in-One cDNA Synthesis SuperMix

SYBR Green One Step qPCR Kit

SYBR Green One Step qPCR Kit は別個の cDNA 変換なしで RNA レベルから直接ターゲット遺伝子発現の定量を行う便利なワンステップの逆転写とリアルタイ ム定量 PCR のシステムです。 このシステムは上質な逆転写酵素と抗体結合ホットスタート Taq DNA ポリメラーゼを併せ、逆転写とリアルタイムの定量を1ステッ プで行います。 このキットはトータル RNA 1pg 程度の小さいテンプレートやウィルス RNA そしてその他の貴重な RNA サンプルを感度よく検出することができます。 別包装の ROX を用いることで、 幅広いハイスループット機器の様々なプロトコルで使えるように設計されています。

Cat # Description Size

Reproducibility: Modified Oligo dT: Random primers ratio facilitates qPCR repeatability.

High compatibility: cDNA product is suitable for application with SYBR Green or Probe qPCR.

Advantages

Comparison of cDNA synthesis using Biotool BioScript All-in-One cDNA Synthesis SuperMix and Invitrogen SuperScript® First-Strand Synthesis System for RT-PCR

Total RNA of Hela cells (10-fold gradient) was used for cDNA synthesis. For Real-Time PCR, 1μl cDNA product was used as template using Biotool™ 2x SYBR Green qPCR Master Mix for detection of high-(ACTB), medium-(B2M), and low-expression (TBP) gene, respectively. Above data show that:

Biotool All-in-One presents reliable linear relation within broad range of RNA template concentration and permits high amplification specificity. For amplification efficiency and detection sensitivity, especially at low RNA template concentration, Biotool All-in-One has similar reverse transcription performance compared with Invitrogen SuperScript®.

All-in-One cDNA Synthesis SuperMix は逆転写酵素の高温性能と最適化された一本鎖 cDNA を合成するスーパーミックスです。 1本のチューブには予め混 合された 5 × qRT SuperMix が入っており、 RNA テンプレートの逆転写に必要なすべての成分を含んでいます。 得られる cDNA 産物はリアルタイム定量 RT-PCR (qRT-RT-PCR) の使用に適しています。

Cat # Description Size

B24403 All-in-One cDNA Synthesis SuperMix 200 rxns B24408 All-in-One cDNA Synthesis SuperMix 1000 rxns

Above; High-abundance gene, GAPDH, and a low-abundance gene, KLF4, were detected using SYBR Green One Step qPCR kits. Product from Biotool showed higher efficiency and specificity of the target genes amplification, compared to that from Life Technologies.

Right; Real-time quantification using SYBR green one step qPCR kit from Biotool and Takara. This data showed higher amplification efficiency and

Comparison

(6)

2x SYBR Green qPCR Master Mix

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)

Biotool Cell Counting Kit-8 (CCK-8) はすぐに使用できる1種類の溶液で、 様々なケミカルの細胞生存性と細胞毒性の信頼できる感度測定を簡便ですばやく 行います。 その上、 従来のアッセイに比べてとても安全、 迅速で、 非放射性で低コストな測定が可能です。

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) はレドックス指示薬で、 高い水溶性を持つテトラゾリウム塩 WST®-8 [2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium, monosodium salt] を使用し、 培地中の電子キャリア 1-Methoxy PMS の存在下で細胞の脱水素酵素の減少によって水 溶性のホルマザン色素を生成します。

脱水素酵素の活性により発生するホルマザン色素の細胞内の量は生細胞数に正比例します。 Cell Counting Kit-8 (CCK-8) の検出感度は MTT, XTT, MTS や WST-1 のようなその他のテトラゾリウム塩より高いです。

Cat # Description Size

B34302 Cell Counting Kit-8, 5ml 500 rxns B34304 Cell Counting Kit-8, 25ml 2500 rxns B34306 Cell Counting Kit-8, 100ml 10000 rxns

2x SYBR Green qPCR master mix は特別に性能を強化した Taq DNA ポリメラーゼを使用しています。 SYBR Green I の定量 PCR を行うために最適化された qPCR バッファーシステムやホットスタート活性化技法を通じて保護されます。 本製品は2x 濃度のマスターミックスで、 少ないテンプレートの定量 PCR に高感 度で特異的また信頼して直接使用できます。

Accurate Detection)

High specific and sensitive quantitation even for low copy targets or a wide range of template samples

High stability)

Hot-start enzyme activation and convenient room-temperature reaction setup makes it suitable for automation and high throughputhot-start activation detection

Robustness and Versatility)

High-efficiency, compatible with both fast and standard qPCR cycling methods

Advantages

Two premixed versions (High ROX and Low ROX) are provided for the following qPCR instruments:

High ROX (Cat #: B21402,

B21403, B21404) Applied Biosystems 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT Fast; StepOne™, StepOne Plus™. Low ROX (Cat #: B21702,

B21703, B21704) Applied Biosystems 7500, 7500 Fast, ViiA™7; Stratagene MX4000™, MX3005P™, MX3000P™, QuantiStudio™ 12K Flex.

Cat # Description Size

B21202 2x SYBR Green qPCR Master Mix 5ml (200 rxns) B21203 2x SYBR Green qPCR Master Mix 25ml (1000 rxns) B21204 2x SYBR Green qPCR Master Mix 25ml x 2 (2000 rxns) B21702 2x SYBR Green qPCR Master Mix (Low ROX) 5ml (200 rxns) B21703 2x SYBR Green qPCR Master Mix (Low ROX) 25ml (1000 rxns) B21704 2x SYBR Green qPCR Master Mix (Low ROX) 25ml x 2 (2000 rxns) B21402 2x SYBR Green qPCR Master Mix (High ROX) 5ml (200 rxns) B21403 2x SYBR Green qPCR Master Mix (High ROX) 25ml (1000 rxns) B21404 2x SYBR Green qPCR Master Mix (High ROX) 25ml x 2 (2000 rxns)

Fig. Different amount of cells were seeded into 96-well plate at different concentrations in 100 μl culture medium in triplicate. After adherence, 10 μl/well Biotool Cell Counting Kit-8 (CCK-8) or Dojindo CCK-8 was added, allowing cells to continuously culture for indicated duration in cell culture incubator. Absorbance at 450 nm was then measured in a microplate reader. This data demonstrates comparable performance of Biotool Cell Counting Kit-8 (CCK-8) and Dojindo CCK-8.

Comparison

IC50 determination using Biotool Cell Counting Kit-8 (CCK-8). 10000 K562 cells were seeded into each well of 96-well plate at /well in 100 μl culture medium. Then a series diluted cytrarabine (AraC) were added in triplicate. 72 hours later, 10 μl/well Cell Counting Kit-8 (CCK-Kit-8) were added, allowing to continuously culture for 1 hour in cell culture incubator. The absorbance at 450 nm were then measured in a microplate reader. IC50 was calculated by four parameter fit.

(7)

Mycoplasma Detection Kit - QuickTest (10 min)

すべてのステップはクリーンベンチで行うことができ、 10 分以内に結果が出ます。 細胞培養システムがマイコプラズマによってコンタミを起こす際、 代謝産物が細胞培養の上澄みに分泌されて、 マイコプラズマからの代謝酵素が培地成分を劣 化させます。 マイコプラズマからの代謝産物の特異性は非常に高いです。 真核細胞やバクテリアは代謝物質を生産しません。 試験サンプルが代謝物質を含 んでいる場合、 反応システム (サンプル、 反応ウェル、 反応バッファーを含む) は緑がかった青色に変わります。 代謝産物の濃度は比例に基づき、 色が濃 いほど、 それぞれのサンプルのマイコプラズマの量が多いことを意味します。

Cat # Description Size

B39032 Mycoplasma Detection Kit 80 tests B39035 Mycoplasma Detection Kit 400 tests B39038 Mycoplasma Detection Kit 4000 tests

Protocol

Perform all steps at room temperature: 22 - 28°C. 1. Open the test plates.

2. Add 40 uL Reaction Buffer A to the sample wells.

3. In the first well, add 10 uL of the negative control. In subsequent wells, add 10 uL of the test samples or positive controls.

Note: Negative control should be the cell culture media incubated the same as cells.

4. Shake gently, then let stand at room temperature for 5 min. 5. Add 40 uL Reaction Buffer B to the sample wells.

6. Shake gently, then let stand at room temperature for 4 min. 7. Add 5 uL Stop Solution, shake gently.

8. Monitor sample color changes within 30 min or take photographs.

a) If the color of the test well is darker than the negative control well, the sample is positive for mycoplasma.

b) If the color of the test well is the same as the negative control well, the sample is negative for mycoplasma.

(8)

Contact us at

[email protected]

Biotool Mycoplasma Removal Kit

A novel, effective, safe, and long-acting reagent to eliminate mycoplasma contaminations in cell culture within one week.

本製品は膜を壊しマイコプラズマを除去し、 増殖を阻害するのではなく、 直接毒性と死を引き起こします。 よく使われる抗生物質と異なり、 この直接死を起こ すメカニズムはマイコプラズマのような抗生物質に耐性のある病原菌に対して使用するのに適しています。 本製品はマイコプラズマの除去において高い信頼性 があります。 一度の処理で 4 ヶ月後も再コンタミがないことがテスト結果として実証されています。 本製品はすべての種類のマイコプラズマを殺すことができ、 従来使われていた抗生物質より比較的細胞毒性が低いことが特徴です。

Cat # Description Size

B39182 Mycoplasma Removal Kit 2ml B39185 Mycoplasma Removal Kit 5ml B39188 Mycoplasma Removal Kit 30ml (5ml x 6)

Advantage

Highly effective)

Targets and destroys all detectable mycoplasmas within only one week.

Safe)

No interference with mammalian cell functions, as validated in most commonly used cell lines

Low cytotoxicity

HeLa cells growth condition after 2 days-treatment.Biotool Mycoplasma Removal Kit is relatively less toxic to cells.

Customer Review

ご用命は

※仕様等は予告なく変更することがございます。 ご了承下さい。

<御問い合わせ>

株式会社 BizScience

〒 562-0035

大阪府箕面市船場東 1 丁目 15 番 20 号

TEL:072-728-9220 FAX:072-728-9222

www.bizscience.co.jp

Fig. Different amount of cells were seeded into 96-well plate at different  concentrations in 100 μl culture medium in triplicate

参照

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