<ミニレビュー>日本における穀類形質転換に関する最近の研究

Bul1

．

RIAR

_，

　

Ishlkawa

　

Agr

．

　

Col1

．

6

：

1

−

8

（

1999

）

ミ

ニ レビュ

ー

日

本

に お

け

る

穀

類

形

質転換

に

関す

る

最近

の

研

究

島

田

多 喜 ∫

・

（

石 川 県 農 業 短 期 大学 植 物 細 胞 育 種研 究 室 ）

　

最

近の

10

年

の

_間

に 重

要

な

穀 類

の

_{形 質 転 換 植 物 体}

の

_{育 成}

に

成 功 し

た。

現 在

の とこ ろ

、

植 物

の

形 質転 換

には

組 織

培

養技

術 が 必 須で あ るn こ こで は

、

穀 類

、

特

に イ

ネ

にお

け

る

組 織 培 養 技 術

と

、

形 質 転 換 技 術

の

発 展

に

対 す

る 目

本

の

研 究 者

の

_貢献

と

、

最

近の

研

究の

進 展

につ い て

概 観

す る＝

　

日

本

では

イ ネ

が

最 も重 要

な

穀

物

で

あ り

、

その

研 究

の歴

史

は

長 く

、

蓄 積

も

大

きい。 イ

ネ

の

組 織 培 養 も

目

本

の

研 究 者 が 取 り組

み

、

カ ル ス

か

らの

再 分 化

の

_系

が

確

立 し た

。

その

後

、

プロ トプラ ス トか らの

植 物 体

の

再

牛

、

プロ _トプラ ス

トを用

い た

形 質 転 換 イ ネ

の

作 出

、

そ して アグロ バ クテ リ ウム を

使

っ た

形 質 転 換 系

の

確

立 と

着

実

な

進 展

は

、

日

本

の

研 究 者

に よる

も

の で

あ

る

．

現

在

、

種

々 の

_{環 境}

ス トレス に

耐 性

を

持

っ た イ ネ

、

病 害 虫

に

抵 抗 性

の イ

ネ

、

飛 躍 的 な収 量

増 と なる イ

ネ

、

新

た な 機 能 を

持

っ た イ ネ

等

を 目

指

して

多 く

の

研 究

グル

ー

プ が

形 質 転 換

イ ネの

育 成

と

解 析

に

取 り組

ん でい る （

表

1

）

。

ま た

、

実 用 化の た めの

試

験 と して

、

ウイル ス

抵 抗

性

、

お よ び

低

ア レ ルゲン の

形

質

転 換

イ

ネ

が

環境

に たい す る

安

全

性

の テス トを

終 了

してい る

〔

表

2

）

。

　

イ ネに比べ る と

、

他

の

穀 類

の こ の

分

野の 凵

本

に お け る

研 究

は

少

ない。 し か し

、

コ ム ギの カル ス

誘 導

、

カ ル スか らの

tt

_{分 化 系}

の

確 立

は

、

我

々が

世 界

に

先

駆 け て

成

功 し た。 さ ら に

、1995

年

には

、

パ

ー

テ ィ ク ル ガン を

用

い て

形 質 転 換

コ ム

_ギ

を

作 出 し

た

。

オ

オムギ につ _{い て}

_も

、

_日

_本

_の

_{研 究}

_者

_{の レ}ベ _{ル は}

_高

_い 、 ト ウモ ロ コ シ で は

、

アグロ バ クテ

リ

ウムを

使

っ て

形 質 転 換

に

成 功

し てい る

。

　

実 用

的

な

遺

伝 子 組 換

え

穀 物

を

育 成 す

るには

、

形 質 転 換 系

の

確

立 と共

に

、

農

業

上

有

用 な

遺伝

子

の

単 離

が

鍵

で

あ

る

。

日

本

で は

、

イ ネ ゲ ノ ムの

解 明

に

大 きな

エ

_ネ

ル

ギ

ー

が 注 が

れ

、

近

い

将 来

に は

多

くの

有

用

な

遺

伝 子

が

単 離

さ れ る

と期

待

さ れ る。 そ れ らの

遺 伝

f

’

は

、

他

の

植 物

と

多 く

の共 通

点

を

も

つ に 違い ない た め

、

他

の

穀 類

の

遺 伝 子 組 換 え

に

も

利

用で

き

る だろ

う

。

キ

ー

ワ

ー

ド

　

穀

類

、

形 質 転 換

、

遺

伝

f

組 換

え

作 物

、

凵

本

、

イ

ネ

1

．

は じ め に

　

最 近

の

10

年

の

閭

に

、

イ ネ

、

トウモ ロ コ シ

、

オ オムギ

、

コ ムギ とい

う重 要 な穀 類

の

形 質 転 換 植 物 体

の

育 成

に成

功

し た。

す

で に

、

遺 伝 子 組 換 え さ

れ た

除 草 剤 耐 性

や

害

虫 抵

抗

性

の トウ モ ロ コ シな どが 冂

本

に

輸

入 さ れ 何 ら かの形で

我

々は

食

べ てい る とい

_{う状 況}

で

あ

る

。

　

現 在の とこ ろ

、

植 物

の

形 質 転 換

には

組 織 培 養 技 術

が 必 須 で あ る

。

植 物 組

織 培 養

に

関

する

研 究

は

欧 米

で

始 ま

っ た の で

あ

る が

、

その

_{発 展}

に

日本

の

_{研 究 者}

の

寄 与 す

る ところ が

大 き

い

。

特

に イ ネの

_{組 織 培 養}

につ いて は

、

目

本

の

研 究

が

世 界 を

リ

ー

ド し て

き

た。 イ ネの カル ス

誘 導

か ら

植 物 体

の

再

生 は

、

山

円の グ ル

ー

プ

が

確

立 し1

・

2〕

_、

_{イ ネの}

_{組 織 培}

養

の基

礎

を 切

り開

いた。

ま

た

、

イ ネ葯 培 養

に よ る

半 数

体

植 物

の

作

出 は

、

Niizeki

　and 　

Oono

：1iに よっ て

世 界

で

初

め て

成 功 し

ている

。

これ は

、

中 国 で

直

ち に

実 用 技 術

と して

用

い ら れ

、

_{多 く}

の

品 種 が 育 成

さ れ

た

。

現

在

で は

、

育

種

期 間の 短 縮 技 術 と して 日

本

の イ ネ

育 種

の

現 場

で

広 く使 わ

れ てい る

。

　

単 子 葉 植 物

で

あ

る

イ ネ

か らの

プ

ロ ト ブ ラス ト

培 養

は

困

難

で

あ

っ た が

、

1985

年

に

懸 濁 培 養 細 胞

か ら

単

_離

し た イ ネ プロ トプラ スか らの

植 物 体

の

再 生

に

成 功

し

、

細

胞

融

合

や

遺 伝 子 操 作

へ の

道

を

拓

い た4 ／

・

_。

_{そ し て}

_、

遺 伝 子

を

導

入 し た イ ネ プロ トプラ ス トから の

形 質

転

換

イ ネの 作 出 も

、

日

本

の グル

ー

プ が

世 界

に

先 駆 け

て

成 功

した 5）

_。

さ ら に

、

そ れ まで

単 ∫

葉 植 物

で は

困 難

と さ れて

き

たア グロバ ク テ リ ウム に よる

遺 伝 子 導

入

を

イ

ネ

で 可

能

に し た

JT

〔

亅apan

Tobacco

　

lnc

．

_）

_の

_{研 究 グ}

_ル

ー

_プ

_の

_{貢 献}

_は

_{大 き}

_い61i

。

　

日

本

で は イ

ネ

が

最

も 重

要

な

穀 物

で

あ り

、

そ

の

研 究

の

歴

史 も古 く

、

植

物

生 理

学

、

遺

伝 学

お よ び

育 種 学

E

の

多 く

の

蓄 積

が

あ

る

。

その

_{基 礎}

の上 で イ ネバ イ オテ クノロ ジ

ー

が

発 展

してい る。

　

一

方

、

コ ムギは

欧 米

で

重

要 な

穀

類で ある が

、

コ ムギの

遺 伝 学 的

な

研 究

は

木原 均 ［

専

．

Fr

以 後

H

本

の研

究 者

の

貢 献

が

大 き

い。 コ ム ギ

組 織 培 養

の

研 究 も

、

小 規

模

な が ら

欧 米

の

研 究 者

に

伍

して

行

わ れて

き

た

。

こ こ で は

、

日

本

の研

究 者

に よ る

穀 類

、

主

に イ

ネ

の形 質 転 換 畊 究へ _の

寄

与

お よ び日

本

にお ける

最 近

の

形 質 転 換

に関 する研 究の

動 向

につ い て

簡

単 に 紹 介 す る。

2

Bulletin

　ofRIAR

．

　

lshlkawii

　

Agri

じu 且

tura

且

Co

且

lege

　

No

．

6

（

1999

）

2 ．

イ

ネ

（

Oryza

　sativa

）

1

：

1 カル ス

誘

導

と

肉：_分

f

_ヒ

　

イ

ネ

の

組 織 培 養

の

研 究

は

、

1960

年 代 始

め に 日

本

で

始

ま

’

／）た

、

、

Furuhashi

　and 　

Yatazawa

　l：

1964

_）

71 は 初 めて イ ネ 節 か らの カ ル ス

誘 導

に

成

功 した

。

しか し

、

カ ル ス の生 長 は遅 く

、

また

、

細 胞

増

殖

には イ

ー

ス ト

抽

出

物

が 必 要であっ

た

。

完 全

な

合 成

培

地に よ る カ ル ス

誘

導

とカ ル ス増γ

1

｛は

、

MS

（

Murashige

　and 　

Skoog

）

培 地

に

2，

4

−D

（

2

，

4

−dichloro

−

pheltoxyacetic

　acid ）

を加 え た 培 地

で

イ ネ

の

根 か

ら

得 ら

れ

た

そ

の

後

、

Nishi

　_et　at

，

_“

968

_：

）2 _は

、

_{そ れ ら}

の カ ル ス

を

2

_，

4

−

_D

を含 まな

い

培 地

に

樹 直し

て

植 物 体

を 門／_牛

．

_さ

_{せ る} こ とに

成 功 し

た

。

　

現

在

で は

、

再分 化 能

の

高

い カ ル ス は

完 熟 種

J

’

・

の

胚 盤 組

織

か ら

誘 導

する の が

一

般 的

で

あ

る

、

，

ま た

、

再 分 化 培

地 も

．

改 良

さ れ

、

不定 芽

あるい _は

_{不 定 胚}

の

誘 導

には

、

比

較 的 高

い

浸 透

圧

．

が

有 効

で

あ

る こと が

知

ら れてい るF

’

／

．

そ して

、

こ の

再 分 化 能

の

高

い カ ル ス

を用

い て

、

プロ ト プラ ス トの

培 養

やパ

ー

テ ィク ルガン_やアグロ バ ク テ リウムを

使

っ た

イ

9

・

の

形 質 転 換 が 安 定 し

て

行

わ れ る よ うに なっ た，、

2

）

プロ _トプラ ス トか らの

植 物 体

の

再 分 化

　

イ

ネ

フ ロ トプラ ス ト

培

．

養

の成

功

までは

、

細 胞

融

合

や

遺

伝

1

’

導

入 は

双 子 葉 植 物

に

限

ら れてい た。 イ

ネ

ブロ ト プラ ス トか ら

植 物

の

再

生 は

、

Fujimura

　et　at

．

ll985

）

1

．

が 初 めて 成

功

し た

。

再

分 化01

．

能 な 懸 濁 培

．

養 細 胞 系の 確 立 がプロ ト プラス トか らの

植 物 体 再

生 に 必

須

で あ るこ と を

示

した

。

そ の

_後

、

Torivama

　et　al

，

〔

⊥

986

）

9

’

_や

_Yamada

_et　al

_．

_（

_⊥

₉₈₆

_）

10 ） も

数 品 種

の ロ

イ

建

_稲

_{で プ}ロ トプ ラス トか らの

植 物 体

の

再

牛

、

に成

功

し たtt　

Kye7

，

uka 　et　al

．

　

q987

）

111 は ナ

ー・

ス

指 養 な

ど を

用

いて プロ トプ ラス ト

．

培

養

の

効 率 を高

め

、

安 定

し た

技 伽

と した

。

3

：

： プロ トプ ラス ト を 用い た イ

ネ

の

形 質 転 換

　

Uchjmivaet

　_at

．

q98611

　t21 は

、

_{イ ネ}

_懸

_{濁 封}

_{｝養 細 胞}

か ら

_単

、

_離

1

した プロ ト

プ

ラ ス ト1に

PEG

（

_polyethy

】enc 　

glycol

）によっ て

プ

ラ ス ミ ドを

導

入 した

。

そ

れ ら をカ ナマ イシン

_培

地で

選抜

し

、

形 質 転 換 イネ

カ ル スを

得

た。

導 入 遺 伝 子

は サ ザ ン

分 析

で

確 認 し

た。

そ

の

後

、

To1

・

iyama

　et　at

．

（

1988

：

） 51_は

_、

カナマ イシ ン

抵 抗 性

の

遺 伝 子

を

組

み 込 ん だ

細 胞

か ら

形

質

転 換

．

イ

ネ

を

再

生 さ せ る こ と に 成

功

し た。

ShiJnamotc

｝et　ai

．

（

1989

）

Ll

・

1 _は

_、

コ

．

．

レク トロ ボ レ

ー

一

ショ ン

法

に よっ て イ

ネ

プ ロ ト プラ ス トに ハ _{イ グロ マ イ}シ ン

抵 抗 性 遺 伝 子

と

GUS

　II

_β

一

_{glucuronidasel}

_{遺 伝 子}

を

導 入

し

_、

両 遇 伝 子

を

発

現

す

る

形 質 転 換

イ ネ を

得

てい る

。

イ ネで は

、

プロ トプラ ス トに

直

接 遺

伝 子

を

導

入 す るこ

と

に よっ て

形 質 転 換 体 を

得 るこ とが

安

定 した

技

術 となっ た

。

4

）

ア グロ バ ク テ リウム を用 いた イ ネの形

質

転 換

　

イ ネではプロ トプ ラス ト に

遺 伝

子 を

導

入

す

る こ とに よ る 形

質

転

換 法

が

確 立

さ れ た が

、

プロ _トプラ ス

1

培

．

養

が

困

難

な

品 種

が あ り

、

品種 間差 異

が

大

きい こと

、

再 分 化 植 物

体

に 不

稔

が

多

く正

常

な

植 物 体

が

得

ら れ に くい こ と

、

プロ ト

プ

ラス ト

培

養

が

熟 練 を

要 す る

技

術であ るこ と

等

の 欠

点

が

あ

っ た

。

そ れ

を あ

る

程 度 解 決

し たのが

、

パ

ー

テ ィクル ガ ン法 で あ る

。

我々 も 完 熟 種 子 を 使っ て バ

…

テ ィ クル ガ ンによっ て 効

率

的 に

簡

単 に 形

質

転 換 イ ネ を 得 ている1

．

。

　

単

r

葉

植物

は ア グ冂 バ ク テ リウ ムに

感

染 し

難

く

、

従

っ て アグロ バ クテ リ ウ ム

を 介

した

_{遺 伝 ∫}

_導

入は困 薄である

と

考

．

え

ら れ て

き

た が

、

イ

ネ

で ア グロ バ _{ク テ リ ウ}ム

を使

っ て

遺 伝 子 導

人は

試

み ら れ て

き

た

．

し か し

、

再

現

性

の

あ

る

安 定 し

た

形 質

．

転 換 体

は

得 られ

てい

な

かっ

た

，

JT

の グ ル

ー

プ は

、

’

‘

super

−binary”

vec

τ

or

を

も

つ ア グロ バ ク テ リウ ムを

使

っ て

非 常

に

高

い

効 率

で

形 質 転 換

に

成

．

功

し た

軌

，

　

JT

の グ ル

ー

プ がア グロ バ ク テ リ ウム

_法

に

成 功

して

、

現 在

で は イ ネの

形 質 転 換

はア グロ バ ク テ リ ウム

_法

が 主 流 と なっ て き た。

直 接 導

人

法

では

導

入

遺 伝 子

の

断 片

．

、

あ る いは

阡

配

列

した

断

1−「

「

．

_、

t

．

、

植 物

ゲノ ムへ _の

_導

_{入 形 態 が}

_{複 雑}

で

あ

る がbl

、

ア グロ バ クテ リ ウム を

介

しての

_{遺 伝 ゴ導}

入 は

、

目 的

の

_{遺 伝 ∫}

・

_{断 片}

の み を

少

ない

_数

で

組

み

込

み

易 く

、

明 確

な

形 質

．

転 換

．

体

を

得

る

効 率

．

が

宵

い

_％

ま た

、

特 別

な

装

置

が

不

．

要

で

、

双 子 葉 植 物

で

蓄 積

し て き たアグロ バ ク テ リ ウム を

介

す る

技 術

が

使 え

る とい

う

有

利

な

点

が

多

い

、

，

5

）

シ リコ ン カ

ー

バ イ ト ウィス カ

ー

（

SCW

）

によ る

形 質

　 転 換

　

SCW

は

微 細

な 針

状

の

も

の で

、

プ ラス ミ ドと

細 胞

と

共

にミッ ク ス

す

る ことに よっ て

、

細 胞

に

傷

をつ

_{け 遺 伝 ∫}

・

を

細 胞 内

に

導

入

す

る と

考

え ら れる

、

，

これ を

用

いて トウ モロ コ シ で

形 質 転 換 体 が 得 ら

れてい る

が

、

我

々 は

、

バ

…

テ イ クル ガ ン

法

で

も使

っ てい る 元

熟 胚

の

胚 盤 組 織

を

用

い て イ

ネ

の

形 質 中

尉 奐

に

成 功

し たlb’ 。

遺 伝 子 導 入

の

機 崙

が

不 要

で

、

複 雑 な 組 織 培 養 技 術

の

操 作 も必 要

な

く

、

最

も

簡 単

．

な

形 面

転 換 法

で

あ り

、

今 後 発 展 途

上

国

な どで

有 効

な

方法

と な る か

も知

れ ない

。

6

）

どの よ う な 遺

伝 了

・

を

導

入 し た 形

質

転 換 イ ネ が 作 ら れ 　てい る か

　

現 在

の ところ

、

どの よ

う

な 目 的で どの よ

う

な

遺

伝

∫

・

を

イ ネ に

導

人 し てい る か

、．

主

に 日

本 育 種 学 会

関

連

の

文 献

か ら リス トアッ

プ

し た

も

の

を

表

1

に

示 す

。

環 境

ス トレ ス

耐

性

関

連

遺

伝

∫

・

、

病 害 虫 抵 抗 性

関

連 遺 伝 子

、

品 質 改 変 関 連

遺 伝

子

、

光 合 成

関

連 遺 伝 ∫

・

が 導

入

さ れ

、

新 し

い

イ ネ

を

目

指

してい る。

一

部

は

、

す

で に

琿

．

境

へ の

_安

全

性 確 認

が

終 了

さ れてい る が 〔

表

2

〕

、

大 部

分 は

、

ま だ 研 究 中 で

あ り

、

実 用 化には さ らに

数 年 を要 す

る

段 階

で

あ

る

、

、

　 イ ネ

に

実 用 的 な形 質

．

に

関 連 す

る

遺 仏 子

．

が

導

入 さ れ たの は

199

．

　

0

_年

．

_{初 頭}

で

、

イ ネ

縞 葉 怙 病

ウイル ス の

外

皮 タン パ ク 遺

伝 子

を

導

入 し た 形

質

転

換

イ

ネ

が

育 成

さ れ た17’

。

_{これ ら} の 遺 伝 子 絹

．

換

え

イ

ネ

の

一

部は罪

境

に

対 す

る

安

全

性

が

確

認 さ れ

、一

般 圃 場

．

で

栽 培

．

され てい る

G

（

2

）

。

また

、

Bacil

−

tus

　thttringgiensis の エ ン ド トキシン合 成 遺 伝 子 を

導

入 し

島

田 ：

H

本

にお ける

穀類 形 質転 換

に

関

する

最

近の

研 究

3

て

耐 虫 性

の

作 物

が

育 成

され ているが

、

イ

ネ

に

も導

人 さ れ たISI’ 。

他

の

作 物

と 同

様

、

除 草 剤

に

枯

れ ない イ

ネ も育 成

さ れてい る が

、

単

一

の

除草 剤

では な

く複 数

の

除 草 剤

を

解 毒

す る

作 用

が

期 待

で き る

遺 伝 了

・

が

試

み ら れて いる19

 

以

後

、

食 味

の

向

上のた め イ

ネ

W

醐 ，

遺 伝 子

をア ンチセ ン ス に

導

入 し て

、

粘

りの

_多

い コメ を

目指

し た

形 質 転 換

イ ネ や鋤

_、

イ

ネ貯

蔵

タン パ ク

質

グ リ テ リン

_{遺 伝 子}

をア ンチ センス に

導

人 し て タン パ ク

含

量 を

低

め

、

醸 造

用

原 料 米

を 目

指

し た

形 質転 換 体

が

育 成

さ れ ている2

％ 主

要 なコ メアレ ル ゲン で

あ

る

16kD

ア ル ブ ミン に

対

．

するアン チセ ン ス遺

伝 子

を

導

入 し

、

低

ア レ ル ゲ ンイ

ネ

が

一

般 圃 場

で

実

用

化

の

試 験

が

行

わ れて い る

〔

表

2

）

22

・

23’ 。

最 近

で は

、

遣 伝 子

工

学 的

に グ リシン ベ タ イン を

増 加 さ

せる こ とによっ て

耐 塩 性 を増

し た イ ネの

育 成

に

成 功

して いる。 これ は

、

単

に

高 塩 分

に

耐 性

で

あ

る ば か

り

でな

く

、

乾 燥 や 低 温 あ

るい は

高 温

に

適

応 能 力

が

増 加

してお

り

、

種

々 の

環 境

ス トレ ス に

耐 性 能 力

表

1

　

口

本

で

育成

さ れ てい る

形 質転 換

イ

ネ

の

導

入

遺 伝

子とその

特

性 特 性 導入遺 で云

：

了

・

形 質 転 換 体の特 性 研 究 グル

ー

プ 　 文献 耐 塩性 温度耐性 除草 剤 耐性 ウ イルス リ_丙抵｝亢

・

1

生 抗 菌性 1 ：1肘病 性） 耐 虫性 光合成能力の

lh

亅上 品 質の改 変 　 　

betA

〔

E

．

coli 由 来 グ リ シンベ タ イン合成酵 素） コ リンオ キシダ

ー

ゼ 遺伝 了

．

1 ：土 壌 細 菌 由 来　グ リ シン ベ タ イン合 成 酵 素 ） 　 　

t

・

14D

：_：ω

．

3Fat

［

y

　acid　

desaLurase

　

_gene

、

18

：

2



か ら

18

3

へ _{変換 する酵 素}

、

FAD

　

3

，

　

FAD

　

7

〕 　 　

ATJ

（

Glycerol

−

3

−

_phosphate

　acyltransferase 　 　不 飽 和 脂 肪酸 含量 を増加 する） 　 　 　コ ムギ 由 来カタ ラ

ー

ゼ遺 伝了

・

　 　　

P450

　monooXygcnase 遺 伝 子 〔チ トクロ

ー

ム

P45

〔｝ 　 　 哺 乳 動 物で酸 化 的 解 毒 作 用 　 薬 物 代 謝

、

分 解 ） 縞

：

菓枯ウイル ス外 皮タ ン パ ク質 遺 伝子 　 　 　

Radjsin

合成酵 素遺 伝 子 （カ イワ レダ イコ ン種 子から単 離し た糸 状 菌

、

細 菌 に 対 して 強い牛 育 阻 害 活 性 を 示 す タン パ _{ク質 ｝} 　 　

Thionin

合 成 酵 素 遣 伝 子 〔エ ンバク 由 来 抗菌性 タ ンパ ク質 ） 　 　

BT

（

Baeillus

　thuringtensis エ ン ド トキ シン遺伝 子

CB

，

JAII

，

　 　

VEFI

）

〔

Viral

　

Enhanclng

　

Fa

じtor〕

ト ウモロ コ シ由来

PEPC21

Ur

θchtoa　

_panicoides

か ら 単 離 し た

PEPC21

・

イ ネ由来

RubiscoSSU

ア ン チ セ ン ス31

Waxy

アンチ センス イ ネ グ リテ リン_アンチセ ン ス 　ダ イ ズ グ リシニ ン 〔イ ネ種 子タン パク_{質 を改 変）} 　ダイス _フt

［

リチ リン （鉄 貯 蔵タ ンパ _ク質



_{イ ネの鉄 含 量 増 加）} 　

hLTF

〔ヒトラク トフェ リン　 乳 汁に存 在 する 鉄 結 含性の糖タン パ ク質 抗 菌 作用

、

免疫 賦 活 作 用｝ 野 生型の

2

倍 以 上の ベタイン生 産 　 　 野牛 型 よ り

Irl

オ塩性あ り 耐

．

塩性

，

耐 乾 燥 性

，

耐 冷性等 向上

18

　

3

含 量 を 増 加 し た イ ネ

ph

°sphaty

雛

1

嬲 瀦鰓 蟹

1

騨

齢 凵 低温耐 性イ ネ 数 種の除草 剤に耐 性 　 　 　 　 縞 葉 枯 病 抵 抗 性 い _{もち病 菌}にたい_する耐病 性 †寅定 中 イ ネ

Mlil

・

：枯細菌 病に抵 抗 性 コブ ノメイ ガに抵 抗性 　 　 　 　

VEF

を 生産 するイ ネ 　 　ア ワヨ トウなど の体 重 増 加 を 抑 制 　 　 蛹 化 遅延 お よ び 羽化 虫 数の低下 　 　 　

PEPC

活 性の増 大

　

葉 緑 体 内に

PEPC

が 局在

，

活 性 を もつ 　 　 　 ル ビ スコ量 を 減 少 し た イ ネ 　 　 　ア ミロ

ー

_{ス含 量 減 少 した イ ネ}

　　

イネ種子 中の_{貯 蔵}タンパク質 減 少

　　　

〔低タ ンパ ク質 米

、

醸 造用

1

種子の全 タンパ クの

6

％ が ダ イズグシニ _ン フ ェ リ チ リン タンパ ク質生成 米 ラ ク トフ ェ リンを 高 発 現 す るコ_メ 　 　 　 　 　（健 康 食 品） 名 古屋大 学 他 　 　

24

基礎牛物 学 研 究 所 　

25

百 川農短 大資 源 研 　

15

　 　 　 他 束：

1

ヒ」

・

〈

d

也

26

北海道グ リ

ー

ンハイオ　

27

農 水 省 他

19

植 物」

．

：学 峅 究所 　

17

富凵」県農技センタ

ー

　

28

農 水 省他

29

植 物工学研究 所 他 　

18

滋 賀 農 言式他 　 　 農水 省 他 　 　 　

JT

　 　 東北 大他

　 　

三井

東

圧 加工米 育 種 研 究 所 愛 媛 農試など

30

2

ユ

301

33322

34

電 力中央研究 所など　

35

明治 製 菓

、

AFT

　

36

1

，

イラ クサ キン ウ ワバ _{顆 粒 病ウ イ}ル ス〔

Trichoplusia

　ni 　

_glanu

且osis 　 virus ；

TnGV

）が 牛産 してい る昆 虫の核 多 核体病ウ イルス の感 染を±_曽

　

進させ

_る

因 子

（

Viral

　

Enhancing

　

Factor

：

VEF

）

。

こ の ウイル ス は

、

鱗 趨目類の幼 虫 の 中 腸 に 作 用 し 生育を阻 害 する

。

　

VEF

_{を生 産}して

　　

い る 形質 転換イ ネ はシロ イチ モ ジ ヨ ト ウ

、

アワヨ ト ウ （イ ネの_{害 虫 ）}

、

ハ ス モン ヨ トウ の体 重増 加 を抑 制し

、

また 蛹 化 遅 延 お よ び 羽 　 化虫数の低 下 を 生 じ た

。

2

．

PEP

_ρ

Cphospheenorlpyrubic

　aeid 　carboxykinase 〕

．

PEP

か ら oxyaroacetic 　acid へ の反 応 を触 媒

。

　

C4

光 合 成経 路の重 要 な 酵素で あ る。

3

，

RubiscoSSU

　antlsense に よっ て

、

ル ビス コ量 を減 少さ せて窒 素の節 約を 目指す

。

高

CO2

条 件

．

1

・

．

で は 光 合 成 能力が向

．

1

．

．

．

する と期 待さ 　 　 れ るu

4

Bulle

しm　o「

RIAR

，

　

lshikaw

“

Agriuu

且tu屆

1a

且

Conege

　

No

．

6

（

1999

）

表

2

　

組 換 え イ ネの

_{栽 培}

状 況 ：_：

_農水

_{省 先}

_端

_産

_{業技 術}

ti

_丿レビ

_課

1998

_年

7

_{月現 在}

_） 糸

LL

換 え イλ _艮亅発

M

−

1鴇種 名「　　　　　〔隔1雛「亘

1

⊥昜申「

1

肯者丿 特 徴　〔 1_{亭入 遣}

．

f

_{云 ナ}， ウイ 1

／

ス_病具財亢

「

L凵

〔／fi

・

_{i 守…季≡1ウ}イ1レス_外皮タンパ ク_買」旦

f

云

iF

つ ウ イル ス弛蝕亢

’

1

生 「イ兎_气望 1ウ イル ス外「_斐タン ズクr遺伝†つ 低ア レ ルゲン米 Lイ ネ ァン

．

／レう

．

’

ン退冒Zlゴニのアンチセンス

1

則 酉造 用

1

氏 タンパク 買 米 〔イネクリテ リ ン遺伝丁

．

の ア ン∵ セ ン ス↑

1

［1∬ ウ イ ル ス病 抵抗

’

1

生 〔イ 彳

・

縞葉桔ウイル ス処皮タンパ ク質 L 伝子

’

1 　 　 　

t

！

tiG

お よび飼半

．

1

防

．

貞温丕実験 非冂鎖；廿室

’

フ

「

験

1

鞘 隹陣湯 試験 　　舷由

1

場「 　 　 　 として1／t

「

γ女雪

ト

・

1

乎 日本II_肖：

16

−

2

農業

h

）［究セ ン タ

ー

　 　 　 農 業Li

・

．

初資源

tVi

究

Ju

ト

1

キヌヒ カリ　碧

．

業，_薫才兄」支術傭

．

究 「沂 　 　 　 　 　「

．

　

tt

_{植 物工学研 究}「

1

斤 キヌ ヒカ リ　三爿

：

牽

』

圧

f

匕学

「

斗竜

I

　 　 　 I

」

_{果壌 境 技}

1

．

1

_{ウ凸∫1タヒリ1：}

：

一

’

_{キヒ カ リ 　 1層む} 「「匚米

：

冂

’

tf

’

”

J

卜尸 所 　 　 　 　 　！

L1

奉た ば こ産業誅

．

〕 凵 本ト

1

肖：

20

．

2

裂 業イリF究セ ン タ

ー

　 　 　 農 業牛物 資 源研穿所 　 　 　 （農 業屎 別疋術

1

司究再ノ 凵

4

哨：

213

芦_果焼究セン タ

ー

　 　 　 農 業生物 沓源研 究「斤 　 　 　 ：農業 業境技 flr研 究所丿 系 統 番 号

4

　

．

明倉手牛物二し学 峅究 　 　 　 セン タ

ー

ウイルス病 抵抗

’

胖 Itイネ縞葉怯ウ イル ス〜

．

皮シ ンパ

i

’

_質

1

』

_伝

．

_臼

冨

子 な 伝 　 遺

謡

ち 抵 　 　 ス ρ 4

つ

剤 ラ

炉

L

ア

〒 雪 ラ

帆

室 ヒ

199D

ユ

99D

1992

1991

199

〔〕

1990

199

，

1

ワ

］

9q

−

亠

1992

1993

19913

1992

1992

199

、

199

　

3

1993

1994

199

，

1

1996

］

996

1998

1994

199

‘

1

1995

未汀仁

1、

．

二 未 寉認

1

踊…_認 未 確 認　　

Ag

・

1／“

．

認

1997

氷 確認

1997

　　　　

．

1

く

fl

径壽想 未碓認　　 未 確認 力

増

してい る とい

う

こ と である

一

4

・

2［

，

1

_、

_、

_ま

_た

_、

_{脂 肪 酸 組 成}

な ど を 改

変

して 温 度

適 応

性

を向

1

．

t．

さ せ る1

式

み

も

な さ れ て い る1

　

L

’

7／ t

，

さ ら に

、

病 害 虫

に たい

す

る

植 物

の

防 御 反 応

や そ れ ら に 関

与 す

る

多

様 な 遺

．

伝 子

が

イ ネ

に

導

入

さ れ

、

形

質

転 換

体

の

特 性

が

評 価

さ れ てい るL’

　

／

’

　

，

　

Lt

　

1）

・

3

雲

、

収 量 増 加

や

、

来

るべ

き

地

球

温

暖 化

に

対 処

して

光 合 成 能 力 を 改 変 す

る こ と も 行 わ れ てい る3

−．

32

・

3：  

一・

方

で は

、

ダ イズタ ンパ ク

質

を 生 産 す る イ

ネ

：

，

1

_、

_鉾

_分

_{含 量}

_の

_多

_{い イネ}：tt

／

：

、

免疫 力

を

高

め る

物

質

を

有

．

す る イ

ネ

5：_{の よ}

う

に

新

たな

品

質

・

機 能

を

付

加

した イ

彳

・

の

育 成

か

試

み ら れ てい る

。

　

以

一

ヒの よ

う

に

、

環 境

ス トレ ス

r

肘性

がrJ

く病

生

_虫

_に

_強

い イ

ネ

は

劣 悪 な環 境

で

も高

い

収 量 をあ げ

る こと がで

き

、

さ り に

栄 養 価 値 を高

め ら れ れ ば

、

将 来

の

食 桓 危 機

を

回 避

で

き

る 口_」

．

_{能 性 が 大 き く}

な る と

_考

え ら れ る_．

_{今 後}

、

次々 と

新

し

い

有 用 な遺 伝 子

が

単

．

離 解 析

さ れ

、

イ ネ に

導

入 し て 評 価 さ れ るだろ

う

＝

遺 伝 子 紐

．

換

え

技 術

に大

き

な

期

待

が か け ら れ る

所

以で ある

、

、

2 ．

コ ム

ギ

（

Tritucum

　

aestivum

）

1

）

コ ム ギ か らの カル ス

_{誘 導}

と

_{植 物}

_体

の再 生

．

　

コ ム ギ か らの カルス

誘

導

は

Trion

　_et　al

．

_〔

1968

_）

3

．

1_によて， て

初

め て

報 告

さ れ た

。

我々は

、

2

，

4

−D

を 用

い て

種 子 根

か ら 旺 盛 に 生

育 す

るカ ル ス

を 誘 導

．

し

、

そ

の カ ル スか ら 門二

_分

化 植 物 体 をも

・

が 。

し

か し

、

植 物 体

の

再 分 化

の

頃度

は

低

く

かっ た

。

そ

の

後

、

種

々 の

植 物

ホル モ ンや

培 養

条

件 を検

討

した が

、

再分 化

に

効 果

的 な

も

の は

見

つ け ら れ

な

かっ た

。

しか し

、

種

々 の 組

織

か らカ ルス

を 誘 導 し

た

結 果

、

受 粉 後

2

週 間 ぐ らい の

未 熟

胚か ら カルス

誘 導

する と

再 分 化 能 力

の

高

い カル ス が

待

ら れる こと が 明 ら か と なっ た3s

・

一

／

／1

’

。

そ れ以

後

は

、

コ ム ギの

_培

養 は 未 熟 胚 を 用い る こ とが

一

般 的 になっ た

。

L’

）

、

卜

．

に述べ る よ

う

に

、

プロ トプラ ス ト

培 養

．

も 未 熟 胚か ら

誘 導

し た カ ル スか ら

汗

「コ

臣

さ れ

、

ま た

、

形

質

転

換 体 も未 熟 胚

にバ

・

．

．

テ ィ ク ル ガ ン に よっ て

遺 仏 子

．

を

導

入 し て

作 出

され てい る

，

、

2

）コ ム

ギ

プロ トプラ ス トか らの

植 物 体

の

可

生

　 世 界 中

の

主 な研 究

グル

ー

プ が プロ ト ブラ ス ト

培 養

に

力

を

注

い だ が

、

植 物 体

の

再

生 は

非 常

1に

難

しかっ

た

，

植 物

⊥

学 研 究 所

の グ ル

ー

プ が

、

プロ ト プラ ス トか らア ル ビ ノ

植

物 体

の

再

生に成

功

し た が

、

門

現 性

の 乏 しい もの で あっ

t

：”　

”

_我

々 も

、

旺 盛に 屯

育

す る

培 養

細 胞

系

を

待

て プロ ト プラス ト

培 養

し た が

、

再 分 化に まで は 至 ら な かっ た

．

、

そ の

_{培 養細 胞 系}

1：

_：

HY

−

11i

は

、

現

在

多

くの

_研

究

室

に 分

譲

さ れ

種

々 の

_{実 験}

に

使

わ れ てい る。 その

後

、

米 国

や 中

国

の い く つかの グル

ー

プ がコ ムギ プロ _ト

_プ

_ラス トか ら

植 物 体 を 再

生 す ること に

成功

し た が

、

未 だ

に

稔 性

の

あ

る

再 分 化植 物

体 を

得

るの は

難

しい

状 況

で

あ

る

．

1

 

3

）

パ

ー

ティクル ガン に よる コ ムギ

形 質 転換

　

コ ムギは上 述 した よ

う

にプロ トプラ ス ト

培 養

．

が

難

し

く

、

ま

た ア グロ バ ク テ リ ウ ム に

感 染

し に

く

い

、

，

_従

っ て

、

コ ム ギ

形 貫 転 換

は

、

細 胞 壁

．

を

持

っ た ま まの

細 胞

に遉

伝 子

を

導

入する ことが で きるバ

ー

．

・

テ ィ クル ガン

_法

に期

待

が も た れ た

．

臥 界

のい

_く

つ _かの

研 究

グル

ー

プが

未 熟 胚

の

_{胚 盤 組 織}

にバ

・

一

テ ィ クル ガ ンで

遺 伝

一

f

を

導

入 し

、

つ い に

1992

_年

に

形 質 転 換

コ ム ギ が

作

出 さ れ だ3

　 我

々 もパ

ー

_テ ィクル ガ ンを 用い てコム ギ

花 粉 山 来 胚 状 体

に

遺 仁

、

子

．

を導

入 し

、

導

人

遺 伝

子の

発 現 を観 察

し た斗 ］

。

_{コ ムギで}

有 効

に

働 く

プ冂 モ タ

ー

の

評 価

を

行

い

、

イ ネア クチ ン

_{遺 伝 子}

の プロ モ

・

．

一

タ

ー

が

最

もコ ム ギで

強

く

働

くこと を 明 ら か に し痂

、

_未熟

胚

に

導

入 す るこ とに よっ て

形 質 転 手

典

コムギ

を得

る こ とに

成 功

し た

　

。

現 在

、

我

々は

、

脂 肪

．

酸 不 飽 和 化 酵 素 遺 伝

．

j

：

・

や ジベ レ リ ン

合 成 系

の

遺 伝

亅

’

・

を

尊

入 し たコ ム ギ を

育

成 中 である、

．

島

田 ：日

本

にお

け

る

穀 類形 質転 換

に

関す

る

．

最近

の

研 究

5

3

．

オ オ

ム

ギ （

Hordeum

　

vulgare

）

1 ）

オ オムギの プロ トプ ラス ト

培 養

と

遺 伝 了導 入

　

オ オムギの

プ

ロ _ト

_プ

_{ラス ト}

_培

_養

_は

、

_{サ ッポロ ビ}

ー

_{ル の} グ ル

ー

プ

が

集 中 的

に

研 究

し

、

成 果 をあ げ

てい る47

・

’

］8） 。 そ

し

て

、

プ

ロ

トプ

ラス トに

遺 伝

子

を

導

入 し て

形

質

転 換

オ オ ムギ をい

ち 早 く育 成 し

ている

一

tg）

_．

_{最 近}

_{で は}

_、

_熱耐性

β

ア ミ ラ

ー

ゼ

遺 伝 子

を

オ オ

ム

ギ

に

導 入

し

、

種 子 中

で

発

現 さ せ

熱 処

理

（

60

℃

）

に よ っ て

も失 活

し ない

_β

ア ミラ

ー

ゼ を 産 生 す る

形 質 転 換 体

を

得

てい る副

_。

2

）

　

パ

ー

テ ィクル ガン によ る オ オムギ

形 質 転 換

　 農 水 省 農 業

生

物 資 源 研 究 所

の グル

ー

プ

は

、

コ ムギ

と

同 じよ

う

に

未 熟 胚

ヘ パ

ー

テ ィクルガン に よっ て

遺 伝 子 を導

入 し

、

オ オムギの

形 質 転換 体

を

得

た5⊥

・

1 　_t、

そ

して

、

オ オ

ム ギマ イル ドモザ イ ク ウ イ ルス や オ オムギ

縞 萎 縮 病

ウ イル ス のコ

ー

ト

タ ン パ ク

質

遺

伝

子 を

導

入 し て

、

抵 抗 性 系 統

を

育 成 し

てい る52

・

53〕

_。

4 ．

トウ

モロ コ

シ

（

Zea

　mays

）

　

［

本

では

、

トウ モロ コ シ に関

す

る

研 究

は

少

ない_。 し か し

、

JT

の グル

ー

プ は

、

ア グ ロ バ ク テ リウ ム

法

によっ て イ ネ で

形 質 転 換

に

成 功 し

た

技 術 を ト

ウモ ロ コ シに

応

用 し て

、

アグロバ クテ リ ウムに よ る

形 質 転 換 ト

ウ モ ロ コ _シ

_作

出

に

成 功

し たfA） 。 現

在

、

凵

本

に

輸 入 さ

れて い る

遺 伝 子

・

組

換 え

トウモ ロ コ シ は プロ ト プラ ス ト を

用

いてい る のと

、

パ

ー

_ティクル ガ ン

法

に よ る

も

ので あ る が

、

今 後

はアグロ バ ク テ リウ ム

を使

っ

た も

のが 増

え

る だろ

う

。

5 ．

こ

れ

か

ら

　 1998

年

7

月現 在

の 日

本

にお ける

組

換

え

穀

類

の

_{開 発 状 況}

を

表

2

に

示

す55） 。

表

に

あ

る よ

う

に

、

安 全 性

の試 験 が な さ れてい る

穀 類

は イ

ネ

の み で

あ り

、

ま た

、

食

品

と

し ての

安

全

性の

_{試 験}

は ま だ

行

わ れてい

_な

い_。

　

実

用 的 な 品

種

は

総 合 的

な

特 性

が

優

れて い

な け

れ

ば

な ら

な

い

。

_{遺 伝 子 組}

_換

え

技

術

は

、

優

れ た

形 質 を持

つ

品 種

に

、

そ

れ

を損 な

わ

ず

に

新

た に さ ら に

優

れ た

．

形 質

をつ

_{け加 え}

る こ と がで

き

る とい

う点

で理

想

的 な

育 種

法

で

あ

る

。

し か し

、

よ

り理 想 的 な 品種 を 開 発 す

る に は

、

単

独

の

_遺

伝 子

を

導 入

するだ

け

で は不

．

．

卜分

で

あ

る

。

例 え ば

、

縞

葉 枯 病

ウ イル ス

病

に

対

して

抵 抗 性

で

あ

るだ けで はな く

、

被

害

の 大 きい

_他

の

_多

くの

病 虫 害

にたい

す

る

抵 抗 性 も

付

与

さ れ な け れ ば

利

用 価 値は小 さい であろう。 そこ で

、

実 用 的

に

価 値 を

高

め る に は

、

_多

くの

遺 伝 子

あ るい は

多 面 的 な発 現 をす

る

遺 伝

子

の

導

入 が

必 要

と なっ て くる

。

ま た

、

導

入 し た

遺 伝 子

の

発 現

や

了孫

へ の

伝 達

の

安 定 性

は

ど う

か

、

な ど

明

ら か に さ れ な け ればな ら ない

_{多 く}

の

基 礎 的 な問 題

が

残

さ れ てい る

。

　

一

方

では

農 業

ヒ

有

用 な

遺 伝 子

の

単 離

が

必 須

で

あ

る

。

日

本

で は イ

ネ

ゲノ ム

プ

ロ ジェ ク トが

進

み

、

近い

将 来

に は

多

く

の

農

業

上

有

用 な

遺

伝

∫

・

が

単

離

さ れ

、

利 用

で

き

る よ

う

に

な

る

と期 待

さ れ る

。

そ れ らの

遺

伝

子

は

、

イ ネのみ な ら

ず

、

コ ム

ギ

や

他

の

多 く

の

穀 類

の

遺 伝

子

と

多

く

の共 通

点 を 持

っ て いるに

違

い

な

いた め

、

他

の

穀 類

の

遺 伝 子 組 換

．

え

に よ る

新

．

機 能

の

付 与

に

も利 用

で

き

るだろ

う

、

，

6

．

引 用 文

献

1

）

Yamada

，

　

Y

．

，

　

K

．

　

Tanaka

　

and

　

E

．

　

Takahashi

　

1967．

　

Cal−

　　 lus

　

induction

　

in

　

nce

，

0

_りにα sativa 　

L．

　

Proc．

　

Jpn．

　

Acad

．

　 　

43

：

156

−

160

．

2

）Nishi

，

　

T

．

，

　

Y

．

　

Yamada

　and 　

E

．

　

Takahashl

　

l968．

　

Organ

　　

differentiation

　

and 　

plant

　restoratien



in

　

rice

．

　

Nature

　 　

219

：

508−509，

3

）

Niizeki

，

　

H ．

　and　

K

，

　

Oono

　

1968

．

　

Induction

　

of

　

haploid

　　

rice　

plant

　

f

沁m 　anther 　culture

，

　

Proc

．

　

Jpn

．

　

A

_¢

ad

．

44

_： 　 　

554

−

557

．

4

）

Fujimura，

　

T

．

，

　

M

．

　

Sakurai

，

　

H

．

　

Akagi

，

　

K

．

　

Negishi

　and

　　 A

，

Hirose

　

l985．

_Regeneration

　of　rice　

_pl

跚

ts

　

from

　　

protoplasts

．

　

Plant

　

Tissue

　

Culture

　

Lett

．

2

：

74

−

75

．

5

）

Toriyama

，

　

K

．

，

　

Y

．

　

Arimoto，

　

H ．

　

Uchimiya

　and 　

K

．

　

Hi

−

　　

nata 　

l988

．

　

Transgenic

　rice　

_plants

　after　

direct

　

_gene

　　

transfer

　

into

　

protoplasts

．

　

Bio

／

technology

　

6

；

1072

−

　 　

1074

．

6

）

Hiei

，

　

Y

、

，

　

S．

　

Ohta，

　

T ．

　

Komari

　

and

　

T ，

　

Kumashiro

　

l

　

994

．

　　 Efficient

　

transfbrmation

　

of

　

rice

（

Oryz

α ∫α加 α

L

．

_）

　　

medlated 　

by

　

Agr

θ

hacterium

　

and

　

sequence

　analysis 　of 　 　

the

　

boundaries

　of　

the

　

T

−

DNA

．

　

Plant

　

J．6

_：

271−

282

．

7

）

F

しlruhashi

，

　

K

．

　and　

M

．

　

Yatazawa

　

l

　

964．

　

Indefine

　

cul

−

　　

ture

　c）

f

　

ri

　ce　stem 　node 　ca 】

lus

，

　

Kagaku

　

34

：

623．

8

）

Tsukahara

，

　

M

．

　and 　

T

．

　

Hirosawa

　

1992

．

　

Characteriza

−

　　tion

　

of

　

factors

　

affecting

　

plantlet

　regeneration 　

from

　　

rice

_（

Or

_｝

，

_la

　sativa 　

L

_）

callus

．

　

Bo

し

Mag

．

　

Tokyo

　

106

： 　 　

227−233，

9

）

Toriyama

，

　

K ．

，

　

K ．

　

Hinata

　and 　

T

．

　

Sasakj

　

l986

．

　

Haplo

｛

d

　　

and 　

diploid

　

plant

　

regeneration

　

from

　

protopiasts

　of　an

−

　　

ther

　callus 　

inrice

．

　

Theor．

　

AppL

　

Gene

し

73

；

16

−

19

，

10

）

Y

  ada

，

　

Y

．

，

Z

．

　

Q

．

　

Yang

　

and

　

T

．

　

D

．

　

Tai

　

1986

．

　

Plant

　re

−

　　9eneration　froln　

protoplast

−derived

　

callus



of



rice

　　

（

Oryz

α sativa 　

L

）

．

　

Plant

　

CeH

　

Rep．

7

：

85−

88

．

11

）

Kyozuka

，

　

J

．

_，　

Y

．

　

Hayashi

　and　

K

．

　

Shimamoto

　

1987

．

　　High

　

frequency

　

plant

　regeneration 　

from

　rice 　

_proto

−

　　

plasts

　

by

　ll〔｝vel　nurse 　culture 　methods

．

　

Mol ．

　

Gen ．

　 　

Genet

　

206

：

408−413．

12

）

Uchimiya，

　

H ．

，

　

T

．

　

Fushimi

，

　

H

，

　

Hashimc

）

to

，

　

H

，

　

Harada，

　　K

．Shono，

　

Y ，

　

Sugawara

　

l

　

986．

　

Expression

　of　a　

fbr

−

　　

eign 　

gene

　

ill

　callus 　

derived

　

from

　

DNA −

treated

　

_proto

−

　　p

］asts　of　rice

_（

Ot

’

_）

’

za

　satiL

，

a　

L

．

_）

．

　

Mol

．

　

Gen ．

　

Gnet

．

　 　

204

：

207，

13

）

Shimanloto

，

　

K

．

，

R ．

　

Terada

，

　

T

．

　

Izawa

　and 　

H

．

　

Fujimoto

　　1989．

Fertile

　

transgenic

　rice　

p

］

allts

　

regenerated

　

from