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植物性自然毒による食中毒対策の 基盤整備のための研究

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Academic year: 2021

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I. 総括研究報告

植物性自然毒による食中毒対策の 基盤整備のための研究

登田美桜

(2)

平成30年度厚生労働科学研究費補助金 食品の安全確保推進研究事業

植物性自然毒による食中毒対策の基盤整備のための研究 総括研究報告書

研究代表者 登田美桜 国立医薬品食品衛生研究所安全情報部 第三室長

研究分担者 近藤一成 国立医薬品食品衛生研究所生化学部 部長

研究分担者 南谷臣昭 岐阜県保健環境研究所 食品安全検査センター

専門研究員

研究概要

厚生労働省に届出された食中毒事件において、全体の発生件数及び患者数に占 める割合は数%と少ないが、重篤化しやすく死亡事例の主な原因とされるのが「自 然毒」である。本厚生労働科学研究では、自然毒のうち「植物性自然毒」による食 中毒に焦点をあて、その発生予防と、発生時の原因究明に役立つ研究成果を出すこ とを目的に、下記3つの研究課題を設定した。

・研究課題1. 植物性自然毒の多成分同時分析法の開発

・研究課題2. 食中毒の病因植物種の遺伝子解析による同定法の開発

・研究課題3. 植物性自然毒による食中毒事件に関する情報研究

研究課題 1 及び 2 は、食中毒の発生時に植物性自然毒が原因として疑われた場 合に、中毒残品に含まれる植物種/毒成分を迅速に同定するための分析法の開発に 関する研究である。研究課題3は、植物性自然毒による食中毒の発生状況や発生要 因、中毒症状の傾向を解析し、今後の食中毒の重点的な予防策の検討に資する情報 研究である。

A. 研 究 目 的

厚 生 労 働 省 に 届 出 さ れ た 食 中 毒 事 件 に お い て 、全 体 の 発 生 件 数 及 び 患 者 数 に 占 め る 割 合 が 数%と 少 な い も の 、 症 状 が 重 篤 化 し や す く 死 亡 者 が 報 告 さ れ て い る の が「 自 然 毒 」を 原 因 と す る 食 中 毒 で あ る 。本 研 究 で は 、自 然 毒

の う ち「 植 物 性 自 然 毒 」に 焦 点 を あ て 、 そ れ を 原 因 と す る 食 中 毒 事 件 の 発 生 予 防 と 原 因 究 明 に 役 立 て る こ と を 目 的 と し て 、次 の よ う な 2つ の ア プ ロ ー チ で 研 究 を 計 画 し た 。

食 中 毒 事 件 の 発 生 時 に 植 物 性 自 然 毒 が 疑 わ れ た 場 合 に は 、当 該 地 域 の 地

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3 方 衛 生 研 究 所( 以 下 、地 研 )が 中 毒 残 品 の 化 学 的 分 析 と 遺 伝 子 解 析 に よ り 原 因 と な っ た 植 物 種/毒 成 分 の 同 定 を 行 う 。し か し 現 状 で は 分 析・解 析 法 が 十 分 に 整 備 さ れ て お ら ず 、病 因 植 物 種 /毒 性 分 が 多 様 な こ と も あ り 、同 定 が 困 難 あ る い は 同 定 ま で に 長 時 間 を 要 し た と い う 状 況 が 全 国 の 地 研 か ら 報 告 さ れ て い る 。そ の よ う な こ と か ら 、食 中 毒 の 迅 速 な 原 因 究 明 に つ な げ る た め 、全 国 の 地 研 に 設 置 さ れ て い る 分 析 機 器 を 考 慮 し 、 研 究 課 題 1「 植 物 性 自 然 毒 の 多 成 分 同 時 分 析 法 の 開 発 」に お い て は 化 学 分 析 と し て 液 体 ク ロ マ ト グ ラ フ タ ン デ ム 質 量 分 析 計 (LC- MS/MS)に よ る 有 毒 成 分 の 定 量 分 析 法 を 、 研 究 課 題 2「 食 中 毒 の 病 因 植 物 種 の 遺 伝 子 解 析 に よ る 同 定 法 の 開 発 」で は 遺 伝 子 解 析 リ ア ル タ イ ム ポ リ メ ラ ー ゼ 連 鎖 反 応 (PCR) 法 や Loop- Mediated Isothermal Amplification

(LAMP)法 を 応 用 し た 植 物 種 の 同 定 法 の 開 発 研 究 を 行 う こ と に し た 。

一 方 、食 中 毒 の 予 防 策 を 講 じ る に は 、 過 去 に 発 生 し た 植 物 性 自 然 毒 に よ る 食 中 毒 事 件 を 調 査 し 、病 因 植 物 の 摂 取 に 至 っ た 経 緯 な ど の 詳 し い 情 報 を 入 手 し 傾 向 を 知 る こ と が 有 用 で あ る 。厚 生 労 働 省 の 食 中 毒 統 計 資 料 で 公 開 さ れ て い る の は 簡 単 な 概 要 デ ー タ の み で あ り 、発 生 要 因 な ど は 別 途 調 査 す る 必 要 が あ る 。食 中 毒 発 生 時 の 地 方 自 治

体 の 報 道 発 表 資 料 や 学 術 的 に 個 々 の 事 件 報 告 も 発 表 さ れ て い る が 、そ れ ら は 散 在 し て い て 整 理 さ れ て い な い の が 現 状 で あ る 。 そ の た め 、 研 究 課 題 3

「 植 物 性 自 然 毒 に よ る 食 中 毒 事 件 に 関 す る 情 報 研 究 」で は 、植 物 性 自 然 毒 を 原 因 と す る 食 中 毒 事 件 に 関 す る 既 存 情 報 を 調 査・集 約 し て 解 析 し 、重 点 的 に 予 防 す べ き こ と を 助 言 す る と と も に 、今 後 の 食 中 毒 事 件 の 調 査 方 法 及 び 情 報 の 蓄 積 、消 費 者 へ の 注 意 喚 起 の や り 方 に つ い て 検 討 す る こ と に し た 。

B. 研 究 方 法 / 結果 及 び 考 察

各 研 究 課 題 の 分 担 報 告 書 か ら 研 究 要 旨 を 以 下 に 抜 粋 す る 。詳 し い 研 究 方 法 及 び 結 果 、 並 び に 考 察 に つ い て は 、 そ れ ぞ れ の 分 担 報 告 書 を 必 ず 確 認 し て い た だ き た い 。

研 究 課 題 1 「 植 物 性 自 然 毒 の 多 成 分 同 時 分 析 法 の 開 発 」 要 旨 よ り

食 中 毒 事 件 の 発 生 時 に 、 植 物 性 自 然 毒 が 原 因 と 疑 わ れ る 場 合 は 、 地 方 衛 生 研 究 所 ( 地 研 ) が 中 毒 残 品 ( 患 者 が 喫 食 し た も の の 残 品 ) の 化 学 的 分 析 や 遺 伝 子 解 析 を 行 い 、 病 因 植 物 種 や 毒 成 分 の 同 定 を 行 っ て い る 。 中 毒 事 例 の 対 応 を 通 し て 開 発 さ れ た 種 々 の 試 験 法 は 、 こ れ ま で 地 研 の ネ ッ ト ワ ー ク に よ り 情 報 共 有 さ れ て き た 。 そ の 中 で 試 験 法 の 改 良 や 分 析 精 度 の 向 上 が 図 ら れ て き た

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が 、 植 物 種 や 調 理 形 態 が 多 様 な 植 物 性 自 然 毒 中 毒 全 般 に 対 応 す る 上 で 未 だ 課 題 が 残 さ れ て い る 。

本 研 究 で は 、 植 物 性 自 然 毒 の 中 毒 に お け る 病 因 植 物 種 を 網 羅 的 に 同 定 す る た め 、 わ が 国 に お い て 過 去 に 発 生 し た 中 毒 事 例 の 傾 向 を も と に 、 中 毒 事 例 の 発 生 頻 度 や 症 状 の 重 篤 度 な ど か ら 、 分 析 対 象 化 合 物 と す べ き 毒 成 分 を 選 定 し 、 地 研 が 広 く 利 用 で き 、 調 理 済 み 中 毒 残 品 に も 適 用 可 能 な 標 準 的 化 学 分 析 手 法 の 確 立 を 目 指 し た 。

平 成30年 度 は 、わ が 国 に お け る 中 毒 事 例 の 傾 向 及 び 市 販 の 標 準 品 の 入 手 可 能 性 を も と に 分 析 対 象 化 合 物 と し て 高 等 植 物 の44成 分 と 毒 キ ノ コ の12成 分 を 選 定 し た 。 さ ら に こ れ ら 成 分 の 定 量 分 析 法 と し て 、 逆 相 ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー(RPLC)と 親 水 性 相 互 作 用 ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー(HILIC)の2モ ー ド の コ ア シ ェ ル カ ラ ム を 用 い て4種 の 分 離 条 件 を 設 定 し 、液 体 ク ロ マ ト グ ラ フ-タ ン デ ム 質 量 分 析 計 (LC-MS/MS) に よ り 対 象 化 合 物 を 系 統 的 に 多 成 分 同 時 分 析 す る 方 法 を 開 発 し た 。 い ず れ の 条 件 も 分 析 時 間 は20分 /1検 体 で あ り 、 全 て の 対 象 化 合 物 で 定 量 限 界 が10 ng/mL 下 と な っ た 。 本 法 は 、 迅 速 か つ 正 確 な 分 析 結 果 が 求 め ら れ る 中 毒 の 原 因 究 明 の 現 場 に と っ て 有 効 で あ る と 考 え ら れ る 。

研 究 課 題 2 「 食 中 毒 の 病 因 植 物 種 の 遺 伝 子 解 析 に よ る 同 定 法 の 開 発 - 有 毒 植 物 の リ ア ル タ イ ムPCR法 を 用 い た 検 出 法 開 発 と 妥 当 性 確 認 - 」 要 旨 よ り

植 物 性 自 然 毒 に お い て は 、簡 便 な 分 析 法 で の 喫 食 前 検 査 に よ る 中 毒 防 止 、お よ び 、中 毒 発 生 時 の 原 因 特 定 が 重 要 で あ る 。 原 因 植 物 種 同 定 の た め の 、微 量 食 品 残 渣 か ら 分 析 可 能 な 鑑 別 法 が 検 査 現 場 か ら 強 く 求 め ら れ て い る 。 平 成 29 年 度 ま で に 食 中 毒 時 に お け る 原 因 植 物 の 迅 速 な 特 定 を 目 的 と し て 、ス イ セ ン 、バ イ ケ イ ソ ウ 、イ ヌ サ フ ラ ン 、チ ョ ウ セ ン ア サ ガ オ 、ト リ カ ブ ト に 対 し て 、植 物 バ ー コ ー デ ィ ン グ 領 域 rbcL、matK、psbA-trnH 内 の 特 異 的 配 列 を 用 い た 特 異 性 の 高 い リ ア ル タ イ ム PCR 法 開 発 を 行 い 、 本 検 知 法 の 妥 当 性 確 認 が 必 要 に な っ て い た 。 そ こ で 、本 研 究 で は 、次 の 2つ の 研 究 項 目 に つ い て 検 討 を 行 っ た 。

( 1 ) 有 毒 植 物 リ ア ル タ イ ム PCR 法 の 外 部 機 関 に よ る 妥 当 性 確 認 試 験

有 毒 植 物 リ ア ル タ イ ム PCR 法 の 妥 当 性 確 認 は 、外 部 機 関 と し て 東 京 都 健 康 安 全 研 究 セ ン タ ー 、 北 海 道 立 衛 生 研 究 所 、 大 阪 健 康 安 全 基 盤 研 究 所 、兵 庫 県 立 健 康 科 学 研 究 所 の 4機 関 で 、通 常 使 用 し て い る 方 法・分 析 装 置 を 用 い て 行 っ た 。そ の 結 果 、予 め 求 め た 検 出 限 界 付 近 濃 度 の 標 準 プ ラ ス ミ ド お よ び 抽 出DNA試 料 に お い て す べ て の 機 関 で 検 出 さ れ た 。 ま た 、

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5 食 中 毒 事 例 か ら 回 収 さ れ た 食 品 残 渣( 茹 で も の - バ イ ケ イ ソ ウ 、卵 と じ - ス イ セ ン )は 抽 出 操 作 か ら 行 い 、い ず れ も 全 機 関 検 出 で き 、良 好 な 結 果 が 得 ら れ た こ と か ら 、本 法 は 有 毒 植 物 同 定 に 優 れ た 方 法 と し て 活 用 可 能 と 考 え ら れ た 。

( 2 )簡 便 法 と し て の 、有 毒 植 物LAMP 法 の 開 発

LAMP法 開 発 で は 、各 有 毒 植 物 か ら ゲ ノ ム 配 列 解 析 用 にDNAを 抽 出 し て 植 物 バ ー コ ー デ ィ ン グ 領 域 周 辺 の 塩 基 配 列 解 析 を 検 討 し た 。今 後 は 、各 有 毒 植 物 特 異 的 な LAMP 法 用 の プ ラ イ マ ー を 設 計 し て い く 。

研 究 課 題 3 「 植 物 性 自 然 毒 に よ る 食 中 毒 事 件 に 関 す る 情 報 研 究 」 要 旨 よ

本 研 究 課 題 で は 有 毒 植 物 に 着 目 し 、そ の 摂 取 を 原 因 と す る 食 中 毒 の 発 生 予 防 と 原 因 究 明 に 役 立 て る た め 、国 内 で 発 生 し た 関 連 の 食 中 毒 事 件 に 関 す る 情 報 を 調 査 し た 。対 象 は 、厚 生 労 働 省 監 修( 平 10 年 以 前 は 厚 生 省 監 修 ) の 「 全 国 食 中 毒 事 件 録( 昭 和 30 年 ~ 平 成 11 年 版 )」

及 び 厚 生 労 働 省 ホ ー ム ペ ー ジ の 食 中 毒 統 計 資 料 で 公 表 さ れ た 食 中 毒 事 件 の う ち 、「 有 毒 植 物 ( 注 : 公 式 に は 高 等 植 物 で あ る が 、一 般 的 に 理 解 し や す い よ う 本 分 担 報 告 で は 有 毒 植 物 と 呼 ぶ こ と に し た )」を 原 因 と す る 事 件 と し た 。昭 和 34 年 ~63 年 、 平 成 元 年 ~30 年 の 各 30

間 、並 び に 直 近 と し て 平 成 26 年 ~30 5 年 間 に 報 告 さ れ た 食 中 毒 事 件 を ま と め 、傾 向 を 比 較 し た 。過 去 に 比 べ る と 直 近 5 年 間 で は ス イ セ ン を 原 因 と す る 食 中 毒 事 件 が 急 増 し 、イ ヌ サ フ ラ ン が 上 位 に 浮 上 し て い る 。イ ヌ サ フ ラ ン の 誤 食 に よ る 食 中 毒 は 摂 取 量 に よ っ て は 致 死 的 に な る ほ ど 重 篤 な 症 状 を 呈 し 、こ こ 数 年 は 毎 年 発 生 が 報 告 さ れ て い る こ と か ら 今 後 特 に 注 意 を 向 け る べ き で あ る 。さ ら に 、食 中 毒 事 件 の 発 生 要 因 を 原 因 植 物 ご と に ま と め る と と も に 、ス イ セ ン の 葉 、 バ イ ケ イ ソ ウ 類( バ イ ケ イ ソ ウ 又 は コ バ イ ケ イ ソ ウ )及 び ハ シ リ ド コ ロ の 摂 取 が 原 因 と な っ た 食 中 毒 事 件 に つ い て は 、報 告 さ れ た 症 状 及 び 患 者 数 に 関 す る 情 報 を 調 査 し 、植 物 ご と に 各 症 状 の 患 者 数 及 び 発 症 率 を ま と め た 。

有 毒 植 物 に よ る 食 中 毒 の 発 生 予 防 に は 消 費 者 へ の 知 識 普 及 や 注 意 喚 起 に 効 果 が あ る が 、他 の 食 品 安 全 の 課 題 と 同 じ よ う に 広 く 周 知 す る こ と が 難 し い 。本 研 究 課 題 で は 、過 去 に 発 生 し た 食 中 毒 事 件 に 関 す る 情 報 の 研 究 を 継 続 的 に 行 う と と も に 、消 費 者 へ の 情 報 提 供 の あ り 方 に つ い て も 検 討 し て い く 。

D. 結 論

植 物 性 自 然 毒 に よ る 食 中 毒 に つ い て 、 発 生 時 の 迅 速 な 原 因 究 明 に 役 立 つ 病 因 植 物 種/毒 成 分 の 同 定 法 の 開 発 研 究 ( 研 究 課 題 1、2) 及 び 発 生 の 予 防 策 の 検 討 に 資 す る 情 報 研 究( 研 究 課 題 3)を 計 画

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し 、開 始 し た 。最 終 的 に 、地 研 で 広 く 利 用 可 能 な 病 因 植 物 種/毒 成 分 を マ ル チ に 同 定 で き る 標 準 法 が 確 立 さ れ れ ば 、 散 発 的 に 発 生 す る た め 対 応 に 混 乱 を 生 じ や す い 植 物 性 自 然 毒 に よ る 食 中 毒 に 対 し て 、 地 研 の 検 査 技 術 を 一 定 の 水 準 に 保 つ こ と が で き 、 発 生 時 の 迅 速 な 原 因 究 明 に つ な が る こ と が 期 待 さ れ る 。 さ ら に 食 中 毒 事 件 の 情 報 研 究 は 、 今 後 の 予 防 策 の 検 討 に 有 用 な 科 学 的 根 拠 を 提 供 で き 、 予 防 策 の 内 容 を 焦 点 が 絞 ら れ た 効 果 的 な も の に で き る と 期 待 さ れ る 。 本 年 度 は 3 年 計 画 の 1 年 目 で あ る た め 本 研 究 報 告 は 途 中 段 階 で の 報 告 で あ る が 、 各 課 題 が 目 指 す 目 的 に 向 か っ て 着 実 に 結 果 を 出 し つ つ あ る 。 次 年 度 も 同 じ 方 向 性 で 研 究 を 継 続 す る 予 定 で あ る 。

E. 研 究 発 表 1. 論 文 発 表

1) Takabatake, R., Kagiya, Y., Minegishi, Y., Futo, S., Soga, K., Nakamura, K., Kondo, K., Mano, J., Kitta, K. Rapid screening detection of genetically modified crops by loop-mediated isothermal amplification with a lateral flow dipstick. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 66, 7839- 7845, 2018.

2) Soga, K., Nakamura, K., Kishine, M., Takashima, Y., Miyahara, T., Kimata, S., Mano, J., Takabatake, R., Ozeki, Y., Kitta, K., Kondo, K.

Studies on the detection of maize genomic DNAs in cornflakes using real-time PCR. Bulletin of

National Institute of Health Sciences, 136, 31-39, 2018

邦 文 ( リ ア ル タ イ ム PCR を 用 い た コ ー ン フ レ ー ク 中 の ト ウ モ ロ コ シ ゲ ノ ム DNA検 出 に つ い て : 曽 我 慶 介 、 中 村 公 亮 、 岸 根 雅 宏 、 高 嶋 康 晴 、 宮 原 平 、 木 俣 真 弥 、 真 野 潤 一 、 高 畠 令 王 奈 、 小 関 良 宏 、 橘 田 和 美 、 近 藤 一 成 )

3) 南 谷 臣 昭 、 登 田 美 桜 、 大 城 直 雅 : 質 量 分 析 に よ る 自 然 毒 食 中 毒 の 理 解 課 題 と 展 望 ,質 量 分 析, 67, 71-77, 2019

2. 学 会 発 表

1) Kondo, K., Kato, R., Sakata, K., Nakamura, K. Mitochondria- resident non-releasable AIF mutant may regulate gene expressions related to cell

differentiation and proliferation, 2018 ASCB EMBO Meeting, San Diego, CA, USA, 2018 12 2) Nakamura, K., Kimata, S., Soga,

K., Ohmori, K., Kishine, M., Mano, J., Takabatake, R., Kitta, K., Kondo, K. Effect of food additives in processed foods on endogenous gene detection, 132nd AOAC Annual Meeting &

Exposition, Toronto, Canada, 2018 8

3) 曽 我 慶 介 、 中 村 公 亮 、 岸 根 雅 宏 、 高 嶋 康 晴 、 宮 原 平 、 木 俣 真 弥 、 真 野 潤 一 、 高 畠 令 王 奈 、 小 関 良 宏 、 橘 田 和 美 、 近 藤 一 成 : リ ア ル タ イ ム PCR を 用 い た コ ー ン フ レ ー ク 中 の ト ウ モ ロ コ シ ゲ ノ ム DNA 検 出 法 の 検 討 、 54回 全 国 衛 生 化 学 技 術 協 議 会 年 会 、 神 奈 川 、2018 11

4) 菅 野 陽 平 、 青 塚 圭 二 、 坂 田 こ ず え 、 中 村 公 亮 、 鈴 木 智 宏 、 近 藤 一 成 :

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7 LAMP法 を 用 い た 有 毒 キ ノ コ 迅 速 判 別 法 の 構 築-ツ キ ヨ タ ケ と ク サ ウ ラ ベ ニ タ ケ の 同 時 検 出 に 関 す る 検 討 -、 日 本 食 品 化 学 学 会 第 24 回 総 会 ・ 学 術 大 会 、 東 京 、2018 5 5) 木 俣 真 弥 、 中 村 公 亮 、 石 垣 拓 実 、 曽

我 慶 介 、 岸 根 雅 宏 、 高 畠 令 王 奈 、 橘 田 和 美 、 近 藤 一 成 : ダ イ ズ に お け る ゲ ノ ム DNAの 位 置 に 依 存 し た DNA分 解 度 の 違 い 、 日 本 食 品 化 学 学 会 第 24 回 総 会 ・ 学 術 大 会 、 東 京 、2018 5

6) 坂 田 こ ず え 、 木 村 圭 介 、 後 藤 操 、 菅 野 陽 平 、 野 村 千 枝 、 加 藤 怜 子 、 近 藤 一 成 : リ ア ル タ イ ム PCRを 用 い た 有 毒 植 物 検 査 法 の 妥 当 性 確 認 、 日 本 食 品 衛 生 学 会 第 114 回 学 術 講 演 会 、 広 島 、2018 11

7) 加 藤 怜 子 、 坂 田 こ ず え 、 近 藤 一 成 : Apoptosis-inducing factor

L101/103G変 異 体 は 細 胞 増 殖 と 神 経 突 起 形 成 を 阻 害 す る 、 第 41回 日 本 分 子 生 物 学 会 年 会 、 横 浜 、2018 11

8) 南 谷 臣 昭 、 谷 口 賢 、 登 田 美 桜 : 高 等 植 物 に よ る 食 中 毒 事 例 に 対 応 す る た め の 一 斉 試 験 法 の 検 討 、 平 成 30 度 地 方 衛 生 研 究 所 全 国 協 議 会 東 海 ・ 北 陸 支 部 衛 生 化 学 部 会 、 岐 阜 、2019 1

9) 登 田 美 桜 : 自 然 毒 食 中 毒 に 関 す る 最 近 の 話 題 、 平 成 30年 度 地 方 衛 生 研 究 所 全 国 協 議 会 近 畿 支 部 自 然 毒 部 会 、 神 戸 、2018 11

3. 市 民 向 け 発 表 会

1) 登 田 美 桜 :「 有 毒 植 物 に よ る 食 中 毒 に つ い て 」、 平 成 30年 度 長 崎 県 食 品 の 安 全 ・ 安 心 リ ス ク コ ミ ュ ニ ケ ー シ ョ ン 、2018 10 月 、 長 崎 県 食 品 安 全 ・ 消 費 生 活 課

2) 登 田 美 桜 :「 有 毒 植 物 に よ る 食 中 毒 に つ い て 」、 平 成 30 年 度 長 崎 県 食 品 の 安 全 ・ 安 心 リ ス ク コ ミ ュ ニ ケ ー シ ョ ン 、2018 11 月 、 長 崎 県 食 品 安 全 ・ 消 費 生 活 課

3) 南 谷 臣 昭 、 登 田 美 桜 :「 野 草 や 山 菜 な ど の 自 然 毒 に つ い て 」、 平 成 31 3月 食 品 安 全 セ ミ ナ ー 、2019 3月 東 海 農 政 局 消 費 ・ 安 全 部 消 費 生 活 課

4. 行 政 関 係 者 向 け 説 明 会

1) 登 田 美 桜 :「 有 毒 植 物 に よ る 食 中 毒 の 最 近 の 傾 向 」、 平 成 30 年 度 食 品 安 全 に か か る 科 学 セ ミ ナ ー 、2018 10月 、 農 林 水 産 省 消 費 ・ 安 全

F. 知 的 財 産 権 の 出 願 ・ 登 録 状 況 特 に な し

参照

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