ス トレ プ トマ イ シ ン耐 性 赤 痢 菌 の 生 理 学 的 研 究
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(2) 902. 川. 第1図. pHと. 井. 潔. 基 質 酸 化 能 a). 感 受 性 株 で は至 適pHは7.0前 は や は り何 れ のpHで. 後 で あ つ た.呼 吸 率. も耐 性 株 が 著 し く低 く,. 代 謝率 が 悪 い 事 を 示 して い る.オ malate,ア. ミノ酸 のglutamate,. 適pHは8.0前 い.そ. キ シ酸 で あ る. aepartate,で は 至. 後 で,ア ル カ リ性 側 の呼 吸 活性 が 高. して 酸 性pHで. は 寧 ろ耐 性 株 の方 の呼吸 値. が 高 く表 われ た.そ れ 以 外 に は特 別 の差 は見 出 し得 な か つ た. 第2節. Pyruvate呼. 吸 と代 謝産 物. 前 報 で耐 性 株 はglucose代 が 蓄積 し, pyruvate代. 謝 に於 い てpyrucate. 謝の活 性 が 衰 え て い る事. を 知 つ た が, pyruvate単. 独 基 質 で は そ の代 謝 が. ど うな る か を 追 究 し た.そ. A,. A´:. Pyruvate, 質(終. と す 、37.5℃,. な く,又pyruvate消 B,. B´:. Glutamate. 濃 度10‑2M)0.3cc,全 1hr.. 位. N当 りの酸 素 消 費 量 は耐 性株 の方 が 感受 性 株 よ り少. …… 耐 牲 ‑感 受性 2.0cc,基. の 結 果(表1)単. phosphate. ,菌. 液. 吸 の 場 合 と異 つ て両 株共 代 謝 産 物 と して 検 出す る事. 量3.0cc buffer(終. 費 量 も 少 な い 事 を 知 つた.. lactateの 蓄積 も見 られ たが, acetateはglucose呼. 濃 度. が 困 難で あ つ た.. M/15) b). 第1表. ビル ビン酸 呼 吸 と代 謝 産物. 菌 液2.0cc(湿. 菌 量10mg),基. 濃 度)0.3cc,全. 量3.0cc.. pH. 7.2,. 37.5℃,. こ の 性 質 はSM非. 質(10.2M終. 1hr. 含 有 普 通 寒 天 培 地 に30代 継 代. 後 も 尚 保 持 さ れ て い た. 次 に こ のpyruvateの. 代 謝 を 更 に 追 究 す る為 に 脱. 炭 酸 を 測 定 し た(表2). 10‑3M. Arseniteに. 害 さ れ た.酸 C,. C´:. auccinate,. E,. E´:. aepartate. D,´:. で あ る故, 第2表. 菌 液2.0cc(湿. 菌 量10mg),基. ビ ル. ビ ン 酸. 及. び. 質 及 び 阻 害 剤0.3cc,全. グ ル. pyruvateの. コ ー. 量3.0cc,. Arseniteは. ス. 著 しく. 酸 化 的 脱炭 酸 の 阻害 剤. 分 解 が 殆 ん ど酸 化 的脱 炭 酸. の 脱. pH. 脱 炭 酸 は. 受 性 株 共 強 く阻. 素 吸 収 も 同 濃 度 のArseniteで. 阻 害 を 受 け た.. malate,. pyruvateの. よ つ て 耐 性,感. 7.2,. 炭 酸. 37.5℃,. 1hr..
(3) ス トレプ トマ イ シ ン耐 性赤 痢 菌 の生 理 学 的 研究. に 由 る 事 が 推 測 出 来 る. pyruvateのR. 株 が1.12,感. 受 姓 が1.06と. てglucoseに. Q.も. 余 り 差 が な い .比. 耐性. 凍 結乾 燥菌 に よる呼 吸. 較 と し. つ い て も 同 じ実 験 を 試 み た が,. Arseniteで. 第4表. 903. 10‑3M. 脱 炭 酸 は 両 株 共 に 強 く阻 害 さ れ た が ,. 酸 素 吸 収 に 対 す る 阻 害 はgyruvateの っ た.こ. 場 合程 で なか. の 事 はglucose→pyruvate間. の 酸 素吸 収. が脱炭 酸 を伴 わな い もの を多 分 に合 ん で い る事 を暗 示 して い る. 次 にpyruvate呼 して,耐. 吸 に 対 しfumarateを. 性,感. 効 果 が 起 るか ど う か 調 べ た.表3の とfumarateの. 組 合 せ で は,両. く,又citrate基. 如 くpyruvate. 株共 各 基質 の呼 吸値. の 和 よ り も値 が 小 さ く 表 わ れ,. sparking効. 質 で もsuccinateを. が こ の 場 合 もcitrateの sparking効. 同時 添 加. 受 性 株 各 々 に つ い て 所 謂sparking. 果はな. 菌 液2.0cc(湿. 添 加 してみ た. 呼 吸 が 高 ま る 様 子 は な く,. 量3.0cc,. 第4節. Sparking効. pH. 質(10‑2M終 7.2,. 濃. 37.5℃,. 1hr.. 高 く表 わ れ た.. 果 は み ら れ な か つ た. 第3表. 菌 量20mg),基. 度)0.3cc,全. Pyruvate呼. 吸 に対 す る阻害 剤 の. 影響. 果 pyruvate代. 謝 の 様 相 を 究 明 す る 為 に,更. に数 種. 阻 害 剤 を 使 用 し て 呼 吸 実 験 を 試 み た(表5). 窒 化 ソ ー ダ は10‑3Mで が な か った が,感 10‑2M濃. は 耐 性 株 で は殆 ん ど影響. 受 性 株 で は 促 進 的 に 作 用 し,. 度 で 始 め て 呼 吸 阻 害 的 に 働 い た.. 2, 4‑Dinitrophenolは10‑3Mで した.. 菌 液2.0cc(湿 0.3cc,全. 菌 量10mg),基. 量3.0cc,. 第3節. pH. 質(10‑2M濃. 7.2,. 度). 37.5℃,. 1hr.. の. 原 因 の 一 つ と し て 細 菌 の 膜 透 過 性 の 問 題 が あ る. citrate,. acetateに. を 集 菌 し,二. こで 本 実 間 培 養 菌体. 回 遠 沈 洗 滌 後 凍 結 乾 燥12)に. そ れ をM/50燐. 菌 量)の. 電比. 4‑Dinitrophenolが,. 阻 害 を 表 わ した, 促 進 した.. 次 にmalonate阻 pH. 7.2で. い る.そ. 吸 が 少 な く共 膜 不 透 過. 性 に よ る も の で な い 事 が これ で は つ き り した.然. し. 依 然 と して 呼 吸 値 が 低 か つ た. ribose,. malateに. つ い て は大. は 逆 に耐 性 株 の酸 素 消費 が. malonateは. succiaate呼. 吸. こ で 先 ず 感 受 性 株 に つ い てsuccinateの. 質 で 表6の. 如 くpH. 5.2及. びpH. 7.2に. 効 果 を 測 定 して み た.そ. してpH. 7.2で. malonateの. glutamate,. 害 実 験 を 試 み た が,. に対 す る特 異 的阻 害 効果 が 表 われ難 い事 が知 られ て. 生 菌 に 於 い て のpyruvate呼. glucose,. は共 に呼 吸 を 高 濃 度 で も全 く呼 吸. は 菌 体 の 膜 透 過 困 難 の 為,. か なmalonate阻. 差 が な く, succinateで. 度で も極 めて 強 く. で は 明 ら か に 阻 害 が 表 わ れ た.次. の 結 果,. 吸 は 矢 張 り耐 株 に 於 い て ず つ と 低 く,. ckrateは. pyruvate基. EDTAは10‑3Mで. SMは200γ/ccの. 凍 結 乾 燥 菌 で は 殆 ん ど 自 己 呼 吸 に 近 い 迄 に 低 下 し た.. acetate,. は やや. 質 の場 合 呼吸. 阻 害 効 果 を 表 わ さ な か つ た.. malonateの. 濃 度 に 調 整 し,表. 4の 如 き 基 質 に つ い て 呼 吸 を 測 定 し た.そ pyruvate呼. 附 し,. 酸 緩 衝 液 に 再 浮 游 せ し め,光. 色 計 に て20mg/cc(湿. 促 進 的 に 働 く2,. つ い て は屡 々. そ の 膜 不 透 過 性 が 論 ぜ ら れ て い る.そ 験 で は こ の 膜 透 過 性 を 高 め る為 に18時. 10‑3Mでglucose基. α, α'‑Dipyridplは1/2×10‑3M濃. 菌 で は 代 謝 し得 な い 物 質 が あ るが,そ. α‑ketoglutarate,. は 阻 害 度 は 少 な く, 10‑5Mで. 促 進 的 に 働 い た.. 質 の 場 合 は そ の 呼 吸 を 強 く阻 害 す るの は 興 味 が あ る. 凍結 乾 燥 菌 体 に よ る呼 吸. 細 菌の 基 質 呼 吸 に於 け る酸 素吸 収 を 測定 す る上 に 於 い て,生. 10‑4Mで. 強 く呼 吸 を 阻 害. 基. 於 け る. の 結 果pH. 5.2. に凍 結乾 燥 菌 体 と. 同 じ実 験 を 試 み た 所,矢 害 を 認 め た の で,こ. 張 り明 ら れ は 正 に. 膜 透 過 性 が 関 係 して い る 事 が 分 り, pH. を 下 げ る 事 に よ つ てmalonateが. 細 菌 菌 体 内に 到達. し易 くな つ た もの と考 え られ た.そ 性 両 株 につ い て, pyruvate呼 阻 害 実 験 をpH. 5.6で. こ で 耐 性,感. 受. 吸 に 対 す るmalonate. 試 み た 所,表6の. 如 く.
(4) 904. 川. 第5. 菌 液2.0cc(湿. 菌 量10mg),基. 表. 井. 潔. ビル ビ ン酸 呼 吸 に対 す る数 種 阻害 剤の 影 響. 質(10‑2M終. 濃 度)0.3cc,全. 第6表. マ. ロ. 量3.0cc,阻. ン. 酸. 阻. 害. 害 剤0.3cc,. 効. pH. 7.2,. 37.5℃,. 1hr.. 果. (A). 菌 液2.0cc(湿. 菌 量10mg),基. 質 及 び 阻 害 剤0.3cc,全. 量3.0cc,. 37.5℃,. 1hr.. 量3.0cc,. 37.5℃,. 1hr.. (B). 菌 液2.0cc(湿. pH. 7.2で. 菌 量10mg),基. 質 及 び 阻 害 剤0.3cc,全. は 表 わ れ な かつ た 阻害 が はつ き りと認 め. ら れ た.. 謝 産 物 を 分 析 し た.そ. glutamate呼. 吸 に つ い て もpH. 感 受 性 株 共 明 ら か なmalonateに そ して 前 述 のpyruvate呼 害 は 図2の. 5.6で. は 耐 性,. よ る 阻 害 を 認 め た.. 吸 のmalonateに. 如 くfumarate添. よ る阻. 加 で 回 復 を 示すのが. 第5節. 主 なTCA. intermediates呼. 吸の. pyruvateを. aegartate,. intermediatesと malate,. し てsuccinate,. α‑ketoglutarate,更. 関 連 深 い も の と し てglutamate,. aepartate,. に こ れ に slanine. の 結 果(表7)succinate,. つ い て は 耐 性,感. 検 出 し, fumarate,. 耐 性 株 に の みpyruvateを alanineで. malateに. 検 出 した が, は 耐 性,感. 見 出 し得 な か つ た.そ. 受 性 株 共 つ いて は glutamate,. 受 性 株 共 にpyre. こ でpyruvic. の 阻 害 剤 と 見 徹 さ れ るAreeaiteを10‑3M濃 添 加 して,. 代 謝 産物 主 要TCA. α‑ketoglutarateに. vateは. み ら れ た.. fumarate,. を 選 び そ れ 等 を 各 々 基 質 と して 呼 吸 を 行 な わ せ,代. mate基. 90分 後 両 標 反 応 液 を 分 析 し た 所,. 質 の 場 合 を 除 い て 全 てpyruveteを. る 事 が 出 来 た. pyruvateの. glutamateはArsenite添. 検 出 が 困 難 で あ つ た.. pyruvate蓄. oxidase 度で gluta 検 出す 加で も 積 量.
(5) ス トレプ トマ イ シ ン耐 性 赤 痢 菌 の生 理 学 的研 究. 第7表. 菌 液2.0cc(湿. 第2図. TCA中. 菌 量10mg),基. 905. 間 代謝 物 の 呼 吸 と ビル ビ ン酸 蓄 積. 質 及 び 阻 害 剤0.3cc.全. マ ロン酸 阻害 に 対 す る フマ ール 酸 の効 果. 量3.0cc,. pH. 7.2,. 37.5℃,. 90min. 蓄 積 は 認 め る事 が 出 来 な か つ た. 第6節. ア ミ ノ基 転 移 反 応. 前 節 の 実 験 でpyruvate代 succinate経. 由 で あ る事,そ. 謝 が 耐 性,感 して 又TCA. 受性 株 共. intermediate. も 中 間 代 謝 物 と し てpyruvateを. 生ず る事 を知 つ た. の て,. pyruvateの. cycleに. か,或. い はTCA. 代 謝 がDCA cycleに. 由 る か,或. 由 る もの. い はそ の 両者. か の 何 れ か で あ る こ とが 推 定 さ れ るが,こ. れを 更 に. 追 究 す る 為 に ア ミ ノ 基 転 移 反 応 を 試 み た.即. ち型 の. 如 く18時 間 普 通 寒 天 培 養 の 静 止 菌 体 に 諸 種 ア ミノ 酸 とTCA pH. intermediateの. 6.0で37.5℃,. 組 合 せ でpH. 7.2或. 2.5時 間 振 盪 した 後,そ. いは の遠沈. 上 清 に つ い て ペ ー パ ー ク ロ マ トグ ラ フ イ ー を 行 な つ た.そ A: nate, ‑感. M/100. pyruvate,. A+M:. B: pyruvate, B+M: 受 性 ,… … 耐 性, pH. 量10mg),基 0.3cc,全. 質(終 量3.0cc,. A+10‑2M B+10‑2M. 5.6,菌. malo malonate,. 液2.0cc(湿. 濃 度10‑2M)0.3cc,阻. 菌 害 剤. 37.5℃. は何 れ の 場 合 も耐 性 株 の 方 に 高 く,こ. こ で も耐 性 株. 謝 活 性 が 衰 え て い る 事 が 推 定 され た.. こ こ で 耐 性,感. 受 性 株 共 α‑Ketoglutarateを. 酸化 し. 以 上 は 何 れ も静 止 菌 を 用 い 振 盪 下 で 行 な つ た も の. え て37℃. 置状 態 で 試 み た場 合 は ど うで あ るか を ち 同 じ く表 記 の 基 質 及 びAraeniteを フ ラ ン 器 に3時. 組 合 せ 基 質 で は,何. 間 静 置 し た がpyruvate. malate). 同 じ く上 記 の 脂 肪 酸 の れ のpHで. も, aspartate→. glutamate→aspartateの. ア ミ ノ基 転 移. 反 応 を 証 明 す る 事 が 出 来 な か つ た.秋 に も見 ら れ る よ う にpH. 6.2で37℃24時. 加. 田15)の 報 告 間静置. 状 態 で放 置 した もの の遠 沈上 清 につ い て もペ ーパ ー ク ロ マ ト グ ラ フ イ ー を 行 な つ た が,. て い る事 は注 目 す ベ き 事 実 で あ る と 思 わ れ る.. 確 め た.即. 各 種 脂 肪 酸(pyruvate,. fumarate,α‑ketoglutarate,. の 組 合 せ 及 びglutamateと. glutamate,. のpyruvate代. で あ るが,静. の 結 果aspartateと. auccinate,. glutamate或. い はglutamate→aspartateの. aspartate→ ア ミノ. 基 転 移 反 応 は 証 明 出 来 な か つ た.そ こで 次 にglucose とaspartateの 7.2, 37.5℃,. 組 合 わ せ で これ を 菌 液 に 加 え, 2.5時. pH. 間振 盪 後 その 遠 沈上 清 につ い て.
(6) 906. 川. ペ ー パ ー ク ロ マ トグ ラ フ イ ー を 行 な つ た 所. 井. 潔. ,図3の. 如 く感 受 性 株 で は 明 ら か にglutamateのSpotを 検 出 す る 事 が 出 来 た.こ. れ よ りglucoseは 第3図. 中 間代 謝. 産 物 と し て α‑ketoglutarateを. 経 由 して代 謝 され る. 事 が 推 定 さ れ る わ け で あ る.然. し耐 性 株 で はgluta. mateの. 検 出 が 困 難 で あ つ た.. ア ミノ 基 転 移 反 応 の ベ ー パ ー ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー. glutamic acid asparti cacid. a: d,. glutamicaid+aspartic e:. aspartic. g, h:. aspartic. 菌 液2.0cc(湿 150分. 第7節. 振 盪. acid,. acid+glucose, acid+glucose,. 菌 量10mg),基. 後 の 遠 沈 上. Pyruvate呼. 質(10‑2M終. b:. glutamicacid,. c:. f:. glucose…. … 耐. i:. glucose…. …. 吸 に対 す る金 属 イ オ. 感 受 性. 濃 度)0.3ec,. pH. 7.2,. 37.5℃,. pyruvate呼. 吸 に 対 す るMg++.. Fe++,. Mn++)が. 解糖. し て み た.. Mg++に. 及 び 終 末 呼 吸 系 等 の 酵 素 作 用 を 活性 化 す る事 は 周 知. に はFeSO4・7H2Oを,. の 事 実 で あ る が,松. を 使 用 し た.. こ れ 等 二 価 金 属 イ オ ンが. はMg. pHは. し て い る.筆. 度 で 感 受 性 株 のpyruvate呼. Faktorに. に こ のpyruvate呼. 吸 弱 化 の 原 因の. つ い て 究 明 す る 事 に し た.即 第4図. 菌 液2.0cc(湿 全 量3.0cc,. 受性株 は. 謝 に 主 要 な 差 異 が あ る事 を 知. 7.2,. 37.5℃. 質(10‑2M終. 濃度. 以 つ て 調 整 し た. Mg++は10‑3Mの. も促 進 し た.. 10‑4Mで. 株 の 呼 吸 を 促 進 した,然 で もMg++の. ビ ル ビ ン 酸 呼 吸 に 対 す るMg++の. 菌 量10mg),基 pH. ち両 株 の. Fe++. はMnC12・4H2O. 所 定 の 燐 酸 緩 衝 液(終. M/15)を. 者 も こ れ 迄 の 実 験 で 耐 性,感. Mn++,. つ い て 検討. SO4・7H2Oを, Mn++に. 細 菌 の 呼 吸 乃 至 は代 謝 に 重 要 な 働 き を 持 つ 事 を 報 告. つ た の で,次. Fe++,. の 影 響 が ど う で あ る か を 各pHに. 二 価 金 属 イ オ ン(Mg++,. 各 々 そ のpyruvate代. aicd. 清. ンの影 響. 浦4)も. aspartic. 性. 濃 度)0.3cc,. 濃. 吸 を 何 れ のpHで. はpH. 5.6で. の み,感. 受性. る に 耐 性 株 で は 何 れ のpH. 呼 吸 促 進 効 果 が み ら れ な か つ た. 影 響. Mg++水. 溶 液0.3cc,.
(7) ス トレプ トマ イ シ ン耐 性 赤 痢菌 の 生 理学 的 研究 Fe++で. は10‑3M,. 7.2とpH. 8.0に. 10‑4M , 10‑5Mの. 客 濃 度 でpH. yruvate呼 性 株 に 於 い て は 何 れ のpH. で も全 く或 い は 殆 ん ど 促 進 効 果 が な か つ た 5.6とpH. 7.2で. . Mn++ 感 受 性 株 のpyruvate呼 第5図. 菌 液2.0cc(湿 pH. 7.2,. 菌 液2.0cc(湿. Pyruvate呼. 7.2,. 吸 が,ビ. 吸 が 全 く捉 進 され な い と云 え る(図4,. 濃 度)0. .3cc,. 5, 6).. 影響. Fe++水. ビ ル ビ ン 酸 呼 吸 に 鰐 す るMn++の. 菌 量10mg),基 pH. れ 等 二価 金 属 イ オ ンに よつ て は,そ のpyruvate呼. 質(10‑2M終. 溶 液0.3cc,. 質(10‑2M終. 影 響. 濃 度)0.3cc,. Mn++水. 溶 液0.3cc,. 37.5℃. (1mg/cc)は. 吸 に 対 す る ビ タ ミン. の影響 ppruvate呼. も. 般 に耐 性 株 は こ. 37.5℃. 第6図. 全 量3.0cc,. 殆 ん ど影 響 を 受 け な か つ た.一. ビ ル ビ ン 酸 呼 吸 に 対 す るFe++の. 菌 量10mg),基. 全 量3.0cc,. 第8節. 吸 を 著明 に促進 した が,耐 性株 は 何 れ のpHで. 於 け る 感 受 性 株 のp. 吸 を 著 明 に 促 進 し た.附. はpH. 907. 感 受 性 株 に於 い て促 進 率が 高 く,耐 性. 株 で は余 り影響 が み られ な かつ た, V. B12(1γ/cc) タ ミ ン剤 に よ つ て ど の よ う. な 影 響 を 受 け る か を 耐 性,感. 受 性 株 に つ いて比 較 す. は両株 共 に全 く影 響を 与 え なか つ た.パ ン トテ ン酸 (1mg/cc)は. 感 受 性 株 の呼 吸 を108%と. 著明 に促 進. る こ と も金 属 イ オ ン の 場 合 と 同 様 極 め て 興 味 あ る 問. したが,耐 性 株 は僅 か に38%し か促 進 を受 け な かつ. 題 で あ る.こ. た.. B6,. B12,パ. の 節 で は 主 た る ビ タ ミ ン と してV.. 呼 吸 に 対 して 調 べ た.表8の 500γ/cc,. B1,. ン トテ ン 酸 の 影 響 を 静 止 菌 のpyruvate. 250γ/cc)で. 如 くV,. は 耐 性,感. B1(1mg/cc, 受 性 株 共 僅 か. に そ の 呼 吸 を 促 進 さ れ た に す ぎ な か つ た . V. B6. 前 述 の ア ミノ基 転 移 反 応 の 実 験 か ら も本 菌 の pyruvat代. 謝がTCA. cycleを 経 る可能 性 が 充分 考. え られ るの で あ る が,上 記 の 感 受性 株 のpyruvate 呼 吸 がパ ン トテ ン酸 に よつ て著 明 に促 進 され た事 実.
(8) 908. 川. 第8表. 井. ビル ビ ン酸 呼 吸 に対 す る ビ タ ミンの 影 響. 潔. glucose. M/100の. 割 に 添 加 し37.5℃,. し こ れ をPaA‑rich. cellと. し,岡. 2.5時 間 振 盪. 様 に してPaACa. 塩 の み を 除 い て 二 次 操 作 を 施 し た 菌 体 をPaA‑ deficient. cellと. す る.こ. れ 等 菌 体の 洗 滌 懸濁 液 を. 用 い て 検 圧 計 に よ りpyruvate呼. 吸 を 測 定 して 比 較. し た. 表9の. 如 く 感 受 性 株 のPaA‑rich. deficient. cellよ. cellはPaA‑. り もpyruvate呼. 高 く表 わ れ て い る が,耐. 吸 の 酸 素 消 費が. 性 株 に 於 い て は 殆 ん ど差 が. み ら れ な か つ た. 第9表 菌 液2.0cc(湿. 菌 量10mg),基. 濃 度)0.3ec,ビ 3.0cc, pH 7.2, も 考 え 合 せ て,オ. タ ミン 水 溶 液0.3cc,全 37.5℃, 1hr.. ギ ザ ロ 醋 酸 とpyruvateと. で あ る パ ン トテ ン酸 は,耐. 性 株,感. 量. が縮合. し て ク エ ン 酸 に な る 段 階 に 必 須 なCoAの. vate代. 受 性 株 のpyru. 方 法 に 做 つ てPaA‑rich. PaA‑deficient. cellを. 作 りpyruvate呼. パ ン トテ ン酸 の 影 響 を 調 べ て み た .即. 菌 液2.0cc(湿. 菌 量10mg),基. 度)0.3cc,全. 量3.0cc,. 構 成 要素. 謝 と 重 要 な 関 連 が あ り そ う で あ る .そ. Lipmann等3)の. ビ ル ビ ン酸 呼 吸 と パ ン トテ ン 酸 と の 関 連. 質(10‑2M終. こで. cellと 吸 に及 ぼ す. ち普 通 寒 天 培. 第9節. 質(10‑2M終. pH. 7.2,. 37.5℃,. 濃 1hr.. 弗 化 醋酸 ソー ダ に よ る阻害 実 験. こ れ 迄 の 事 実 を 更 に 検 討 す る 為 に,弗 ダ を 用 い て 実 験 を 行 な つ た.. 化醋 酸 ソー. monofluoroacetateの. 阻 害 機 構5)の 主 な も の と して,オ. キザ ロ醋 酸 と縮 合. 地 培 養18時 間 の 菌 体 を 型 の 如 く集 菌 洗 滌 して 得 た 静. してmonofluorocitrateと. 止 菌 浮 游 液 を2分. 為 に 醋 酸 の 酸 化 を 阻 害 す る 事 が 知 られ て い る,こ. し,一. 方 にPaACa塩1mg/cc,. 第7図. A1:. pyruvate(終. A2:. A1+monofluoroacetate(終. B1:. pyruvate(終. B2:. B1+moaofluoromcetate(終. B3:. B1+monofluoroaeetate(終. ‑感 菌 液2.0cc(湿 剤0.3cc,全. A1:. Glutamate(終. A2:. A1+monofluoroacetate(終. B1:. Glutamate(終. 濃 度M/600). B2:. B1+monofluoroacetate(終. 濃 度M/600). 濃 度M/150). B3:. B1+monofluoroacetate(終. 濃 度M/150). 濃 度M/150). 濃 度10‑2M). … … … … 耐 性株. 菌 量10mg),基 量3.0cc,. pH. 質0.3cc,阻 7.2,. 37.5℃. の. 弗 化 醋 酸 ソ ー ダ の 影 響. 濃 度10‑2M). 受性 株. な り,ク エ ン酸 と拮 抗 す る. ‑感 害. 菌 液2.0cc(湿 剤0.3cc,全. 濃 度10‑2M) 濃 度M/150). 濃 度10‑2M). 受性 株. … …… …. 菌 量10mg),基 量3.0cc,. pH. 耐 性株 質0.3cc,阻. 7.2,. 37.5℃. 害.
(9) ス トレプ トマ イ シ ン耐性 赤 痢 菌 の生 理学 的研 究. 909. 弗化 醋 酸 ソー ダ に よ る耐 性 株,感 受 性 株 のpyruvate. 分 単 純 で あ り,只aerobicな. 及 びglutamate呼. そ の も の の 分 解 が 耐 性 株 で は 起 り難 い も の と 考 え ら. 吸 に 対 す る影 響 を調 べ た 結果 は. 図7に 示す 如 くで,弗 化 醋 酸 ソー ダM/600濃 耐 性 株 のpyruvate呼 M/150で. 度で. 吸 は 僅 か な阻 害で あつ た が,. は比 較 的 強 い 阻害 を 受 け た.然. し感 受性. れ た.次. にpyruvateの. で あ る が,酸. 条 件 下 で はpyruvate. 脱 炭 酸 に つ い て 測 定 した の. 化 的 脱 炭 酸 の 阻 害 剤 と云 わ れ る. Araeriteを. 添 加 して 脱 炭 酸 阻 害 の 様 子 を 伺 つ た 所,. 株 で は殆 ん ど影 響 がみ られ な かつ た. glutamate呼. pyruvate呼. 吸 は 耐 性,感. 吸 は弗 化醋 酸 ソ ー ダM/150て. Qco2も. 僅か に 耐性 株 が 阻害. を受 け た.感 受 性 株 はM/150で. も殆 ん ど阻 害 を受. glucose呼. わす と非 常 に興 味 あ る事 実 で あ るよ うに思 わ れ る.. そ の 脱 炭 酸 は 附 性,感 が,酸. 筆者 は赤 痢 菌駒 込BIIIに TCA. cyclcの 存 在 を 仮定 して,こ の仮 定 に 検討 を 加. えつ つ, SM耐. 吸 に 対 す るAraeniteの. 性 株 と感 受 性 株 の代 謝 機 構 の差 異 を. 追究 して いつ た.. 効 果 に 於 い て,. 受 性 共 阻 害 を 強 く受 け て い る. 素 吸 収 の 阻 害 は そ れ 程 著 し く な い.こ. glucose代. 終 末 呼 吸 系 と して,. の脱 炭 酸 は殆 ん ど. 酸 化 的 脱 炭 酸 に 属 す る も の で あ る事 を 推 定 さ せ た.. けな かつ た.こ の 結果 は これ 迄 の実 験 成 績 と考 え 合. 総 括 及 び 考 案. 受 性 株 共 に そ のQo2も. 著 し く阻 害 を 受 け て,そ. 謝 に 於 い てpgruvate以. Arseniteで. 前 の 分 解 に. 阻 害 さ れ 難 い 酸 素 消 費,即. ち脱 炭 酸を. 伴 わ な い 酸 化 機 構 が 存 在 す る も の と 推 定 さ れ る. 従 つ てpyruvateの. 代 謝 は 先 ず 耐 性,感. 受 性 株共. 酸 化 的 脱 炭 酸 に 始 ま る 代 謝 経 路 を と つ て お り, R. Q.. 即 ち先ずpyruvateを. 始 め とす る主なTCA. inter. も余 り違 わ な い 所 か ら,何. れ か に嫌 気 的 分 解 が 多 く. mediates.及び そ れ に関 聯 あ る ア ミノ酸 の 呼 吸活 性 と. 含 ま れ て い る と 云 う 事 も 考 え ら れ な い.更. pHと. vateがTCA. の 関係 を 見 た の で あ る が, pyruvateに. て は,そ の 至 適pHは,感. 就い. 受 性 株 で7.0前 後 で あ る. が,耐 性 株 で は寧 ろ 酸性 側 に 傾 きpH あつた.併. れ は. cycle代. 謝 中 闘 物 を 添 加 す る と,所. も依 然. 場 合 は 耐 性,感. 痛 菌 駒 込BIIIの. として耐 性 株 が低 く,そ の 代 謝 が好 気 的 に は耐性 株 で悪 い と云 え る.細 菌 は細 胞 膜 と云 う微妙 な 機能 を. ま る よ うな 結 果 は 出 な か つ た が,こ. 持 つ た膜 で包 まれ た 複 合酵 素 系 で あ る故, pHと. は 勿 論TCA. の. 添 加 して もcitrateの. cycleの. TCA. 謂sparking効. 受 性 共 これ が 起 り 難 か つ た.. に 対 しsuccinateを. 関係 を一 率 に論 ず る事 は極 め て危 険 で あ るが,生 理. にpyru. 経 て 分 解 さ れ る 時 に,. 果 が 起 る 事 が 知 ら れ て い る が,赤. 5.6‑6.0で. し,そ の 呼吸 活 性 は何 れ のpHで. cycleを. citrate. 呼吸は高. の事 実 のみ か ら. 存 在 を 否 定 す る事 は 出 来 な い.. こ の 結 果 に つ い て は 更 に 検 討 を 要 す る も の と 考 え る.. 学的 に考 え る時,酸 性 側 に於 い て耐 性 株 のpyruaate. 凍 結 乾 燥 菌 体 に よ る呼 吸 実 験 で は矢 張 り 耐 性 株 の. 呼 吸が 高 まつ て い る の は,好 気 的glueose代. pyruvate呼. 蓄積 して 来 るpyruvateが. 謝で. 益 々培 地 を 酸性 にす る為. vate呼. 吸 は 低 い 事 が 確 実 に な り,前. に これ を 中性 に幾 らか で も近 かづ け ん とす る細 菌体. の と 考 え る 事 が 出 来 る.. succinate,. の機能 の 表 わ れ であ る と考 え る事 が 出来 る.そ の事. み られ な か つ た. ribose,. gluconateに. は他 の ア ミノ酸 のglutamate,. な い.. aspartate,及 び オ キ. シ酸 のmalateに. つ い て も云 う事 が 出来,こ れ 等 は. 一般 に酸 性pHで. は耐 性 株 の 方が 呼 吸活 性 が 高 い.. 酸性 では これ等 の 基 質 は 酸 化的 脱 炭 酸 を受 け る と考. 次 はpyruvateに は10‑2Mで. は10‑3Mで. るか らで あ る.次 にpyruvate自. よ る呼 吸活 性. の差 はそ れ程 著 し くな い の で,全 てpH いて試 み た が, pyruvate基. 7.2に 於. 質 で 耐 性 株の 酸 素 吸収. 吸 を 阻 害 す る が,. NaN314)も2,. も酸 化 的 燐 酸 化(或. し得 な か つ た.α,. 7). assimlation)の. れ によ る阻 害が 出た 事 は. 酸 化 的 燐 酸 化 反 応 がpyruvate代 と云 う事 が 出 来 る.然. は促. 4‑Dinitrophenol6). い はoxidative. 阻 害 剤 と 云 わ れ て お り,こ. (pyruvate)消. 謝 に 関 与 して い る. し両株 間 に特 別 の 差 異 は見 出. α´‑Dipyridylもpyruvate呼. lactateの 蓄積 は極 めて 少 な く, acetateも 殆 ん ど認. を 強 く阻 害 した が,両. められな か つ た. glucoseを 基 質 と した場 合 とは異. EDTAは. なつ て, pyruvate単. 云 う 高 濃 度 で もpyruvate呼. 独 基 質 の場 合 は そ の分 解 は幾. NaN3. は 相 当 阻 害 的 に 働 い た が10‑5Mで. は感 受 性 株 の 約 半 分 で あ る のみ な らず,そ の基 質 費 も低 下 して い る 事 が 伺 わ れ た.. 差が. も殆 ん ど 差 は. 対 す る 阻 害 実 験 で あ る が,. は 両 株 のpyruvate呼. 進 的 に 作 用 し た.. の代謝 を調 べ た.前 記 の よ うにpHに. malateは. 低 濃 度 で は や や 呼 吸 を 促 進 し た. 2, 4‑Dinitrophenol. え られ,そ れ は 尚培 地 を 中性 に近 か づ け る作 用 とな 体 を基 質 と して そ. 述 のpyru. 吸 不 全 が菌 体膜 によ る影 響 で はな かつ た も. 吸. 株 の 阻 害 程 度 に 差 は な か つ た.. 呼 吸 促 進 的 に 働 い た.. SMは200γ/ccと. 吸 に 全 く阻 害 を 与 え な.
(10) 910. 川. か つ た.. AureomycinやTerramycinは100γ/cc‑. 200γ/ccで. は 呼 吸 阻 害 を 表 わ す2)よ. が 知 ら れ て い る.. SMの. る も の と 云 え る.. succiuate脱. や や 特 異 的 な 面 を 示 して い 水 素 酵 素 を特 異 的 に. 験 で は,耐. 性,感. pH. 強 く阻 害 さ れ る.然. 5.6で. 受 性 株 共,そ. 7.2で. 5.6で. 用 い た阻 害 実. のpyruvate呼. て 発 見 す る こ と が 出 来 て,こ glutamateの. ア ミの 基 転 移 反 応 が 証 明 され た.即. glucoseよ. り 中 間 代 謝 物 と して. し耐 性 株 で はglutamateの. pH. よ るmalonate. 吸 が 非 常 に 弱 化 して い る 為 にglutamateの 困 難 で あ る も の と思 わ れ る.以 intermediatesを. 結 乾燥 菌 体 で はそ. 7.2でmaionateに. より. 全 て 代 謝 さ れ てpyruvateに はsuccinate経. 阻害 され て い るの で細 菌 膜 の影 響 で あ る事 が 一層 は Arda,. BIIIに. et. al.の 報 告13)に. creatinovoraneに. and. つ い て 確 め ら れ て い る. glutamateの. succinateに. い はDCA. cycleに. ろ う事 が 想 像 さ れ る.そ diatee及. cycleに. よ るか の 何れ か で あ. こ で 主 なTCA. intelme. 謝 産 物 をpyruvateに. 分 析 した 所,α‑ketoglutarate, malateに. と が 出 来 た.. Arseniteはpyruvic. cycleな TCA. fumarate, 検出するこ. oxidaseの. らpyruvateに cycleな. つい て. succinate,. つ い て も 何 れ もpyruvateを. 剤 で あ る か ら こ れ 等 の 基 質 がcycleを. た か,. よる. び そ れ に 関 連 あ る ア ミノ 酸 等 の 基 質 に つ い. て 呼 吸 を 行 な わ せ,代. DCA. 上の. 阻害. 回 転 し て,. 到 つ て 代 謝 を 阻 まれ. ら オ キ ザ ロ醋 酸 に 迄 至 り,そ. の 自 然 的 脱 炭 酸 に よ りpyruvateを. 生 じ,そ. TCA. の代 謝. 中 間 代 謝 物 と して. cycleが. 作 動 し て い る可 能 性 は 極. 性 株 で も α‑ketoglutarate基. cycleは. pyruvate以. れ 等が. 到 る事,又pyruvate. 生 じ 得 る と 云 う諸 事 実 よ り駒 込. 吸 出 来 る の で あ る か ら,同 TCA. 代 謝 され るな ら. 在 の 知 見 よ り先 ず そ れ がTCA. も の か,或. 呼 吸 もpH. 由 で あ る 事 が 推 定 さ れ る.以. は,. め て 強 い.耐. 害 を 受 け て お りglutamate代. 如 くpyruvateがvia ば,現. Hearon. 上 両 株 共 主 要TCA. 歯 で 代 謝 さ れ,且. つ き り し た.こ の 事 案 はBarron, もCoryneb.. 検 出が. 充 分 酸 化 す る 事 が 出 来,こ. α‑ketoglutarateを. 謝 がsuccinate経. 質 で呼. 時 適 応 の 原 理 よ りす れ ば,. 存 在 し て い る も の と 考 え ら れ,只 下 の 代 謝 活 性 が 弱 い 為 に,ク. ラ フ ィ ー でglutamateを. ロ マ トグ. 捉 え る 事 が 出来 な かつ た. も の と思 わ れ る. 前 報 に も 述 べ た よ う に,各 pyruvateの. み が 耐 性 株 で 特 に 低 い 値 を 示 し,他. succinate, く,培. 種 基 質 酸 化 値 の 中. fumarate,. glutamate等. 養 時 の 状 況 に よ り 却 つ て 耐 性 株 が 高 く表 わ れ. る 事 さ え あ る.然 vateの. も耐 性 株 の 方 に 代 謝 の 結 果pyru. 蓄 積 が 大 で あ る.こ. の 事 はpyruvate代. の 何 れ か の 段 階 に あ る 事 を 想 像 さ せ る.こ はpyruvate呼 Fe++,. こで筆者. 吸 に 対 す る 二 価 金 属 イ オ ン(Mg++,. Mn++)の. 影 響 を 検 討 した,こ. れ 等 二価 金 属. イ オ ン が 細 菌 の 代 謝 に 関 し重 要 な 働 き を 持 つ 事 は よ く知 ら れ て い る.松. ら れ る.然. は 以 上 の 基 質 でpyruvateの も多 い,こ. 蓄 積量 が 感 受性 株 よ り. こ で も耐 性 株 のpyruvate代. て い る 事 が 伺 わ れ る.尚. 謝 がTCA. の で あ る が,更 試 み た.即. ち,. 謝 が弱 化 し. 両 株 共 α‑ketoglutarateは. 基 質 分 解 を 受 け て 居 り(呼 pyruvate代. 性株. 吸 値 も 比 較 的 高 い),. cycleに. よ る可 能 性 が 強 い. に 検 討 す る 為 に ア ミノ 基 転 移 反 応 を pyruvate,. α‑ketoglutarateの を 組 合 せ て 振 盪,或. succinate,. 各 々 とaspartate及. fumarate, びglutamate. い は 静 置 の もの に つ い て そ の 反. 謝. 活 性 の 低 い 原 因 が 主 と してpyruvate→succinate間. に 対 し そ の 影 響 が 著 し い 事 を 報 告 し て い る.筆. 添 加 し な い 場 合,耐. の. で は 余 り差 が な. が 阻 ま れ て 蓄 積 し た 結 果 か の 何 れ か で あ ろ う と考 え もAraeniteを. ち. α‑ketoglutarateが. 性 株 の 場 合 はpyruvete呼. 透 過 性 が 異 な る 事 が 判 明 し た.凍. 5.6でmalonate阻. こ にaspartate→. 検 出 が 困 難 で あ つ た.耐. 害 は 全 く 表 わ れ ず,. 吸 がpH. 感 受 性 株 に於い. 生 じ 得 る事 が 解 つ た.然. 謝は. 由 の もの で あ る 事 が 分 つ た.. はmalonate阻. つ いて 振 盪培 養 で 行な. 事 にglutamateを. も こ れ はfumarate. 始 め て 表 わ れ た の でpHに. のsuccinate呼. 吸が. こでglueoseとaspartateに つ た 結 果 は,見. のpyruvate代. 添 加 で 回 復 を 示 し得 た の で,こ 何 れ もsuccinate経. 潔. の ア ミ ノ基 転 移 反 応 を 認 め る 事 が 出 来 な か つ た.そ うにな る こ と. 阻 害 す る と 云 わ れ て い るmalonateを. pH. 井. 結 果 で は 試 み たpH域. 浦4)は. 殊 にpyruvateの. 呼吸 者の. で は 感 受 性 株 のpyruvate. 呼 吸 は これ等 二 価金 属 イオ ンで著 明 に促 進 され るに 拘 らず,耐. 性 株 は 何 れ のpHで. け な い 事 を 知 つ た.こ. も殆 ん ど 影 響 を 受. れが 射 性 菌体 の 藻 の性 質 に関. 係 し た 金 属 イ オ ンの 不 透 過 性 等 の 為 で な い 事 は,何 れ のpHで Fe++で. も そ う で あ る 事 とfumarate呼 耐 性,感. 吸 は. 受 性 菌 共 に 促 進 を 受 け た と云 う事. 実 よ り確 認 出 来 る.即. ち両 者 の 差 が 金 属 イ オ ン と 菌. 体酵 素蛋 白 との結 合 性 或 い は洗 滌操 作 によ つ て欠乏. 応 液 の ペ ー パ ー ク ロ マ トグ ラ フ イ ー を 試 み た が,. 状 態 を 来 し て い る と 云 う 関 係 の も の で は な くて,金. aspartat・ →glutamate或. 属 イ オ ンは 良 く酵 素 蛋 白 部 分 迄 侵 入 し た が,何. い はglutamate→aspartate. 等か.
(11) ス トレプ トマ イ シ ン耐 性 赤 痢菌 の生 理 学 的 研究 の 他 のFaktorが. 充分 で ない 為 にそ の 促進 効 果 が 表. わ れな かつ た の で あ る と考 え られ る. SMは. 代謝に. 911. に 到 る 経 路 も 存 在 す る 為,そ に よ つ て 代 償 さ れ る 結 果,弗. 本 質 的 な物 質(酵 素,補 酵 素,代 謝 中間物)の 形 成. 響 が 表 わ れ 難 く,耐. をblockす. る為 に,呼. る も の と考 え られ,耐 性 菌 は必 然 的 に. 化 醋 酸 ソ ーダ の影. 性 株 はTCA回. 路 のみ で あ. 吸 阻 害 が 表 面 に 出 て 来 た も の と よ く説. そ れ等 の ものが 欠 乏 して い る と考 え られ るか らで あ. 明 出 来 る.従. る.そ れ 故更 に ビタ ミン剤 を選 ん でpyruvate呼. 記 のB反. 吸. の経 路 の活 性 化. つ て 感 受 性 株 に はTCA回. 路 以 外 に上. 応 に 類 似 した 別 の 経 路 を 予 想 す る 事 は 妥 当. に対 す るそ れ等 の効 果 を み た. V. B1は 耐性,感 受. で あ り,そ. 性株 共 同 程 度 に 幾分 促 進 を 受 け たが, V, B12は 両 者. 強 い,耐. に 殆ん ど影響 を 与え な か つ た. V. B6の 軽 度促 進 効. 路 の み に よ つ てpyruvate代. 果 は ア ミノ基 転 移反 応 の促 進 の結 果 を 表 わ す もの で. 然 も 尚pyruvate酸. あ ろ う.殊 に 顕 著 なの はパ ン トテ ン酸の 効 果 であ り,. る の で は な い か と 思 わ れ る .か. 感 受性 株 の 呼吸 は著 しい 促 進 を 受 け た.そ れ に反 し. 異 が 主 と し てpyruvate→succinate間. に あ る とす る. 耐 性株 は極 く僅 か しか 促 進 され な かつ た. Lipmann. 考 え は 充 分 妥 当 で あ る と思 わ れ る.前. 報 に於 いて述. の方法3)に 做 つ たPaA‑rich. べ た 発 育 実 験 で 耐 性 株 の 発 育 が 感 受 性 株 よ り遅 れ ,. cellの 実 験 で も,感. cellとPaA‑deficient. 受 性 株 のPaA‑rich. cellは. れ はpyruvate→auccinate間. に可 能性 が. 性 株 は こ の よ う な 経 路 が 消 失 してTCA回 謝 が 行 な わ れ て お り,. 化 の初 期 段 階 の活 性が 衰 え てい くて 耐 性 株 の 代 謝 変. そ の 代 謝 が 多 分 に 嫌 気 的 に 傾 い て い る と 云 う事 実 は. pyruvate呼 吸 が高 くな つ て い る に 拘 らず,耐 性 株. こ の 耐 性 株 に 於 け るpyruvate以. で は殆 ん ど変 りが ない位 で あ つ た.こ れ はパ ン トテ. 代 謝 変 異 を 益 々 良 く裏 づ け る もの と云 え る.. ン酸 同 化機 能 が 耐性 株 で低 下 してい る為 か と推 測 す る.パ ン トテ ン酸 がCoA構. 成 要 素 で あ る事 を思 え. ば,前 記 の 金属 イオ ン効 果 と併 せ考 え て 耐 性 株 の pyruvate呼. 然 し乍 ら 耐 性 株 の こ の よ う なpyruvate酸. 今 後 の 酵 素 化 学 的 研 究 に俟 た ね ば な らな い と考 え る .. 吸 の 初期 段 階 に重 要 な 変 化が あ る事 が 結. 想定 を益 々裏 付 け た.即 ち耐 性 株のpyruvate呼. 吸. 耐 性 株 に つ い て,そ. は弗 化醋 酸 ソ ーダ で充 分 阻 害 を 受 け,尚glutamate. SMで. 1). 々の呼 吸 は弗 化 醋 酸 ソ ー ダ の 高 濃 度 も 殆 ん ど阻害 を受 けな か つ た.こ の事 et.al. 8)9)の 説一 大 腸 菌 感 受性 株 に は,. 阻 害 され るpyruvate‑oxaloacetate. tion(B反 応)とSMで. condensa. 阻害 され な い クエ ン酸 縮 合反. 応(A反 応)の2つ が存 在 す るが,耐 性 株 に はpyrunate osaloacetate condensationが. 発 見 出 来 な い ので,. 耐 性 株 の 終 末 呼 吸 系 は 上 記 のB反 応 が 消 失 して sMで 阻 害 されな いA反 応,即 ちTCA. cycleの み 残. 存 して い る一 を 引 用 す るな らば,駒込BIII 性株 は弗 化醋 酸 ソ ー ダ に よ つ てA反 TCA回. SM感. 痢 菌 駒 込BIIIの. 人工. の 終 末 呼 吸 系 をpyruvateを. 中. 心 に 感 受 性 株 を 対 照 と して 比 較 検 討 し た.. 呼吸 も軽 度 阻 害 さ れ た が,感 受 性 株 のpyruvate,. 実 はUmbreit. 論. 筆 者 は 前 報 に 引 き 続 き,赤. 次 に弗 化 醋 酸 ソー ダの 影響 を調 べ た結果 は以 上 の. (M/150)で. 化の 初. 期 段 階 に つ い て の 生 化 学 的 機 構 の 解 明 は更 に 詳 細 な. 想像 され る.. glutamate各. 下 の終 末呼 吸系 の. 受. 応 と して の. 路 を 阻 ま れ るが, B反 感 に よ りeuccinate. pHの. 如 何 に 拘 ら ず 耐 性 株 のpyravate呼. 吸 は 感 受 性 株 よ り 低 い.そ. し て 耐 性 株 の 至 適pH. は 酸 性 側pH. 間 に あ る.感. pH. 5.6‑6.0の. 7.0‑7.5で 2)耐. 受 性株 は. あ る.. 性 株 はpyruvateを. 呼 吸 が 低 い の み な ら ず,. 基 質 と した 場 合,そ pyruvateそ. の. の もの の 代 謝. 率 も悪 い. 3). pyruvateは. 耐 性,感. に 代 謝 さ れ る 、 又TCA succinate,. fumarate,. malate,. 化 の 代 謝 産 物 と して, 4). Asparagin酸. 受 性 株 共via cyele中. α‑ketoglutarate酸. pyravate蓄 とglueoseの. 受 性 株 で はasparagin酸. succinate. 間代 謝 物 た る. 積 が み ら れ る. 組 合 わせ 基 質で 感. →glutamin酸. の ア ミ ノ. 基 転 移 反 応 が 証 明 さ れ る. 5)耐. 性 株 のpyruvate呼. も二 価 金 属 イ オ ン(Mg++, 促 進 が み ら れ な い.そ. 吸 は 如 何 な るpHで Fe++,. れ に 反 し,感. Mn++)に. よる. 受性 株 は著 明 に. 促 進 さ れ る. 6)パ. ン トテ ン酸 は 感 受 性 株 のpyruvate呼. 促 進 す る が,耐. 性 株 のpyruvate呼. 吸を. 吸 には効 果 が 少.
(12) 912. 川. 井. 潔. 中国 四 国地 方 支 部 総会 に於 い て発 表.. な い. 弗 化 醋 酸 ソ ー ダ は 耐 性 株 のpyruvate呼. 終 りに 臨 み終 始 御 懇 篤 な る御 指 導 と御 校 閲 を賜 つ. 吸 に阻 害. た 恩師 村 上 教授 に 深 甚 の 謝 意 を 表 し,併 せ て種 々. が 強 い, 7)以. 上,こ. れ 等 の 結 果 の 意 義 をTCA. の 関 係 に 於 い て 論 じ た.そ 主 と し てTCA. 御協 力 下 さ つ た教 室 員各 位 に 感謝 す る次第 で あ りま. cgcleと. す.. して 両 者 の 代 謝 上 の 差 は. cycle上pyruvate→succinate間. に. あ る も の と推 定 さ れ る.. 本 論 文 の 要 旨 は昭 和34年10月 第12回 日本 細 菌学 会. 参 1). 佐 竹:ク. ロ マ. 2) AjL.. S. J... 3) G. D.. Novelli. Chem., 4). ト グ ラ フ ィ ー,共. Bact.. 松 浦:岡. 6) W. F. Chem., 7) L. J.. Rev., F.. 17, 32, Lipmann:. 文. 献. 8) P. H. Smith,. 91.. J.. 1953. J,. 9). Biol,. 山 医 学 会 雑 誌,. and G.. 186, 487, Loomis. 173, 703, Tepley:. 66,. 1023,. Kalnitsky:. 1954.. J.. Biol.. 1950.. and. F.. Lipmann:. J.. Physiological. Studies. on. the. Streptomycin-Resistant The System. Pyruvate. 10). 標 準 生 化 学 実 験:. 35,. 1953.. 11). 標 準 生 化 学 実 験:. 36,. 1953.. 12). 標 準 生 化 学 実 験:. 344,. and. of Streptomycin-Resistant. Biochem.,. E. C.:. 1951.. 1953.. E. S. G., Ardao,. Arch.. Metabolic B.. Metabolism. P. H. and Oginsky,. 595,. 14) Slater,. 24, 383, 1949.. W. W. Umbreit:. 1949.. 61,. M.:. Biochem.,. 58, 761,. W. W., Smith, J.. 13) Barron,. Biol.. E. L. Oginsky,. Bact.,. 1949.. Arch.. Bact.,. Cmbreit, E. L.:. 182, 213, 1950.. 5) W. B. Elliot Chem.,. and. 立 社,. 考. M. 1. and. 29,. Nature,. 130, 1950.. 166, 932,. Activities. Hearon,. 1950.. of. dysentheriaeII. its. Terminal Sh.. flexneri. Respiration 2a.. By Kiyoshi. Kawai. Department of Microbiology, Okayama Univerity Medical School (Director: Prof. Dr. Sakae Murakami) Following the previous reports, the author carried out the experiment to elucidate the difference in the pyruvate oxidation and its terminal respiration system between resistant and susceptible Sh. flexneri 2a. 1) The oxidation rate of pyruvate by resistant strain is considerably less at every pH than by susceptible strain. The pH optimum for oxidation of pyruvate of resistant strain is pH 5.6-6.0, 2) The less than by 3) Both. whereas that of susceptible strain is pH 7.0-7.5. consumption rate on pyruvic acid substrate by resistant strain is significantly susceptible strain. resistant and susceptible strains oxidizes pyruvic acid via succinate..
(13) ス トレプ トマ イ シ ン耐 性 赤痢 菌の 生 理学 的 研 究. Pyruvate such. as 4). condition 5). The. divalent 6). 7) the. The. from. such. pyruvate as. is. the. tricarboxylic by. these. discussed,. succinate. acid. and. been. demonstrated. glucose. added.. susceptible. Fe++,. strain. Mn++ reasonably. and in. can. than. that. the. acid. resistant. be of. cycle. strains.. susceptible. accerelated. of. strain. more. resistant. respiration. intermediates. susceptible. under. rapidly. by. strain. pyruvie. acid. by. suscep. strain. of. between to. of. has. more. resistant. significance. activities. oxidation. of. Mg++,. accerelates by. organism. pyruvate. aspartic. of. ions. than. metabolic. both. oxidation. Panthotenate. strain. the. fumarate, ƒ¿-ketoglutarate transamination. with. metal. tible. during. malate,. Aspartic-glutamic. aerobic. in. accumulates. succinate,. 913. and. results it. resistant in. the. in is. and citric. relation. to. the. presence. considered. possible. that. susceptible. strains. exists. acid. cycle.. of an in. the. citric. significant the. metabolic. acid. cycle. difference pathway. in.
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