(2) 試薬 器具 試薬 ( 注 1) 1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル ) ベンゼン標準品 : 新日本石油株式会社より提供フェナントレン-d 1 標準品 : 和光純薬工業社製ジクロロメタン メタノール アセトン ヘキサン : 残留農薬試験用精製水 : 超純水製造システム (Milli-Q

財団法人 化学物質評価研究機構

1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼン

1,4-dimethyl-2-(1-phenylethyl)benzene 【対象物質の構造】

CH

₃

CH

₃

C

H

CH

₃ CAS 番号：6165-51-1 【物理化学的性状】

分子量 沸点（℃） 蒸気圧（hPa） 水溶解度（mg/L） log Pow

210.31 305.9(1013 hPa)

（計算値） 2.1×10

-4 _{(25℃) 0.96 (25℃) 5.39 (実測値)} 出典 SIDS Initial Assessment Report（OECD, 2003） 【毒性、用途】 毒性 ： 急性毒性 経口LD50 、 ラット 2000 mg/kg 用途 ： PCB の代替物質として使用、感圧紙用染料の溶媒、コンデンサーオイル

§

1 分析法の概要

(1) 分析法概要

水質試料については 20%アセトン水溶液とした後、固相抽出、50%メタノール水溶液で洗 浄、脱水、ジクロロメタンで溶出を行い、GC/MS によって定量する。 底質試料についてはアセトンで抽出、20%アセトン水溶液とした後、水質試料と同様に固相 抽出、50%メタノール水溶液で洗浄、脱水、ジクロロメタンで溶出を行い、GC/MS によっ て定量する。

(2) 試薬・器具

【試薬】(注 1) 1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼン標準品：新日本石油株式会社より提供 フェナントレン-d10標準品：和光純薬工業社製 ジクロロメタン、メタノール、アセトン、ヘキサン：残留農薬試験用 精製水：超純水製造システム(Milli-Q Gradient-A10) 日本ミリポア社製 固相抽出カラム：Strata SDB-L 500mg/6mL Phenomenex 社製

活性炭カートリッジ：Sep-pak Plus AC-2 Waters 社製 シリカゲルカートリッジ：Sep-pak Plus Silica Waters 社製

【器具】 マイクロシリンジ、固相抽出装置、250 mL 共栓付きメスシリンダー、10 mL 目盛り付 き試験管、50 mL 共栓付き遠沈管、窒素ガス濃縮装置、パスツールピペット、駒込ピペッ ト

(3) 分析法

【試料の採取及び保存】 環境省「化学物質環境調査における試料採取にあたっての留意事項」に従う。 【試料の前処理及び試料液の調製】（注2） 〔水質〕 試料100 mL を採取した後アセトン 25 mL を加え、混合する。 固相抽出装置に固相抽出カートリッジ（SDB）を装着し、ジクロロメタン 20 mL、アセ トン10 mL、20%アセトン水溶液 20 mL で洗浄した後 （注 3） 、10 mL/min で試料を通 水する。 通水終了後、20%アセトン水溶液 6 mL で洗浄し、50%メタノール水溶液 6 mL でカー トリッジの洗浄を行い、3000 rpm で 5 分間水分を遠心分離除去した後、活性炭カートリッ ジAC-2 を通じた窒素を 15 分通して水分を完全に除去する（注 4）。その後、ジクロロメ タン6 mL で目的物質を溶出させる。溶出液は活性炭カートリッジ AC-2 を通した窒素気 流下で1 mL 以下まで濃縮した後（注 4） 、測定用内標準液（10 µg/mL）を 5 µL（添加量 50 ng）加え、ジクロロメタンで 1 mL とする。 〔底質〕 乾泥換算で10 g となるよう湿試料を 50 mL 共栓付き遠沈管にとる。 試料にアセトン20 mL を加え、10 分間振とう、更に 10 分間の超音波処理により抽出を 行う。3000 rpm で 5 分間遠心分離を行った後、アセトン抽出液を回収する。再度アセトン

20 mL を加え、同様の操作を繰り返す。回収したアセトン抽出液 40 mL を 250 mL 共栓付 きメスシリンダーに入れ、アセトン濃度が20 %となるように 200 mL まで精製水を加えて 混合する。 固相抽出装置に固相抽出カートリッジ（SDB）(注 5)を装着し、ジクロロメタン 20 mL、 アセトン10 mL、20 %アセトン水溶液 20 mL で洗浄した後 （注 3） 、10 mL/min で試料 を通水する。 通水終了後、20 %アセトン水溶液 25 mL でメスシリンダーを洗い込みながらカートリ ッジに通水させ、さらに20 %アセトン水溶液 5 mL、50%メタノール水溶液 6 mL でカー トリッジの洗浄を行い、3000 rpm で 5 分間水分を遠心分離除去した後、活性炭カートリッ ジAC-2 を通じた窒素を 15 分通して水分を完全に除去する(注 4)。その後、ジクロロメタ ン6 mL で目的物質を溶出させる。溶出液は活性炭カートリッジ AC-2 を通した窒素気流 下で1 mL 以下まで濃縮した後(注 4) 、測定用内標準液（10 µg/mL）を 5 µL（添加量 50 ng） 加え、ジクロロメタンで1 mL とする。 なお、測定時に特に妨害が見られる場合は以下のシリカゲルクリーンアップを行う。ま た、確認操作を行う場合は、確認イオンとして165、180 のイオンを追加する。 【シリカゲルクリーンアップ】 底質前処理における SDB カートリッジからのジクロロメタン溶出液を窒素気流下で 1 mL 以下まで濃縮した後、ヘキサンを 5 mL 加え混合する。この溶液を再度、窒素気流下 で1 mL まで濃縮した後、あらかじめヘキサン 10 mL でコンディショニングを行ったシリ カゲルカートリッジに負荷・溶出する。続いてヘキサン 10 mL で溶出し、溶出液を窒素 気流下で1 mL まで濃縮した後、測定用内標準液を 5µL 加え、ジクロロメタンで 1 mL と する。 【空試験液の調製】 試料を用いずに【試料の前処理及び試料液の調製】の項に従って操作し、得られた試料 液を空試験液(操作ブランク)とする。 【標準溶液の調製】 1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼンは 100 mg を容量 100 mL 全量フラスコにそ れぞれ正確に秤り取り、アセトン少量に溶解させた後、ヘキサンを加えて全量を100 mL とし、1000 µg/mL 標準原液を調製する。 測定用内標準液(フェナントレン-d10)は 100 mg を容量 100 mL 全量フラスコに正確に秤 り取り、ヘキサンを加えて全量を100 mL とし、1000 µg/mL 標準原液を調製する。 検量線用標準液（0.2～50 ng/mL、内標準物質濃度：50 ng/mL）はジクロロメタンを用い

て希釈する。測定用内標準液（10 µg/mL）はアセトンを用いて希釈する。

【測定】

〔GC/MS 条件〕

装 置 6890 Series Plus (Agilent Technologies 製) 5973 (Agilent Technologies 社製)

カ ラ ム CP-Sil 8CB MS(Chrompack 製）

長さ30 m、内径 0.25 mm、膜厚 0.25 µm

カラム温度 70 ℃（3 min） - （25 ℃/min） - 180 ℃ - （8 ℃/min） - 220 ℃ - （40 ℃/min) - 280 ℃（5 min） 注 入 法 スプリットレス法 注 入 量 1µL 注入口温度 250 ℃ トランスファーライン温度 280 ℃ 流量制御法 定流量モード 1.2 mL/min イオン源温度 230 ℃ イオン化法 電子衝撃イオン化法（EI） イオン化電圧 70 eV

測定モード Selected Ion Monitoring（SIM）

対 象 物 質：1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼン m/z 195、210（RT 10.10） 内標準物質：フェナントレン-d10 m/z 188、189 (RT 11.44) 〔検量線〕 検量線用標準溶液1µL を GC/MS に注入し、得られた対象物質と内標準物質のピーク面 積比を縦軸に、対象物質と内標準物質の濃度比を横軸にとり検量線(最小二乗法、重み付 けなし)を作成する。 〔定量〕 試料溶液1µL を GC/MS に注入し、対象物質と内標準物質のピーク面積比を求める。ピ ーク面積比と検量線から試料溶液中の対象物質と内標準物質の濃度比を求め、〔濃度の算 出〕に示した式を用いて試料中の濃度を算出する。 〔濃度の算出〕 水質試料中の濃度 (µg/L) ＝ 内標準添加量 (ng) × 検量線から求めた濃度比 試料量 (mL)

本分析法に従った場合、以下の数値を使用する。 内標準添加量：50 ng（10 µg/mL フェナントレン-d10 ：5.0 µL 添加） 試料量：100 mL 底質試料中の濃度 (µg/kg-dry) ＝ 試料量(g-dry) 本分析法に従った場合、以下の数値を使用する。 内標準添加量：50 ng（10 µg/mL フェナントレン-d10 ：5.0 µL 添加） 試料量：10 g-dry 〔装置検出下限(IDL)〕 本分析に用いたGC/MS の IDL を以下に示す(注 6)。 対象物質 IDL _(pg) 試料量 最終液量 (mL) IDL 試料換算濃度 1,4-ｼﾞﾒﾁﾙ-2-(1-ﾌｪﾆﾙｴﾁﾙ)ﾍﾞﾝｾﾞﾝ (水質) 100 mL 1 0.00040 µg/L 1,4-ｼﾞﾒﾁﾙ-2-(1-ﾌｪﾆﾙｴﾁﾙ)ﾍﾞﾝｾﾞﾝ (底質) 0.040 10 g-dry 1 0.0040 µg/kg-dry 〔測定方法の検出下限（MDL）、定量下限（MQL）〕 本分析法における検出下限及び定量下限を以下に示す（注7）。 対象物質 試料量 最終液量 (mL) 検出下限 定量下限 1,4-ｼﾞﾒﾁﾙ-2-(1-ﾌｪﾆﾙｴﾁﾙ)ﾍﾞﾝｾﾞﾝ （水） 100 mL 1 0.0014 µg/L 0.0038 µg/L 1,4-ｼﾞﾒﾁﾙ-2-(1-ﾌｪﾆﾙｴﾁﾙ)ﾍﾞﾝｾﾞﾝ （底質） 10 g-dry 1 0.012 µg/kg-dry µg/kg-dry 0.031 （注1） ここで示す製品は実際に使用した商品を掲げたが、これらを推奨するわけではなく、こ れらと同等以上の品質、性能のものを用いても問題ない。 （注2） 器具、ピペット類は予めアセトンで洗浄して用いる。 （注3） 固相抽出カートリッジより対象物質が溶出するので、十分コンディショニングを行う。 内標準添加量 (ng) × 検量線から求めた濃度比

（注4） 活性炭を通した窒素気流を用いることにより、ブランク値が低減する。 （注5） 試料マトリックスが多く、カートリッジの破過が懸念される時には、充填量が多いカー トリッジ（例Strata SDB-L 1 g/6 mL）を使用してもよい。ただし、カートリッジの洗浄条 件、溶出条件などを確認する。 （注6） 装置検出下限（IDL）は、「化学物質環境実態調査実施の手引き」（平成 18 年 3）に従 って、表1 のとおり算出した。 表1 装置検出下限(IDL)の算出 1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼン 対象物質 水質 底質 試料量 100 mL 10 g-dry 最終液量 (mL) 1.0 1.0 注入液濃度 (ng/mL) 0.20 0.20 装置注入量 (µL) 1.0 結果1 0.215 結果2 0.216 結果3 0.223 結果4 0.235 結果5 0.233 結果6 0.218 結果7 (pg) 0.241 平均値 (pg) 0.2259 標準偏差 (pg) 0.010 IDL (pg) 0.040 IDL 試料換算値 0.00040 µg/L 0.0040 µg/kg-dry S/N (0.2 ng/mL) 8 CV (%) 4.5 ※IDL＝t(n-1, 0.05)×σn-1×2

図1 標準物質（IDL）の SIM クロマトグラム 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 40 60 80 100 120 140 160 180 時間--> アバンダンス イオン 195.00 (194.70 ～ 195.70): 7B052903.D\data.ms 10.095 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 40 60 80 100 120 140 160 180 時間--> アバンダンス イオン 210.00 (209.70 ～ 210.70): 7B052903.D\data.ms 10.101 10.90 11.00 11.10 11.20 11.30 11.40 11.50 11.60 11.70 11.80 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 9000 時間--> アバンダンス イオン 188.00 (187.70 ～ 188.70): 7B052903.D\data.ms 11.443 10.90 11.00 11.10 11.20 11.30 11.40 11.50 11.60 11.70 11.80 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 9000 時間--> アバンダンス イオン 189.00 (188.70 ～ 189.70): 7B052903.D\data.ms 11.444 1,4-Dimethyl-2-(1-phenylethyl)benzene 0.2 ng/mL (m/z 195) Phenanthrene-d10 50 ng/mL (m/z 188) 1,4-Dimethyl-2-(1-phenylethyl)benzene 0.2 ng/mL (m/z 210) Phenanthrene-d10 50 ng/mL (m/z 189)

（注7） 測定方法の検出下限（MDL）及び定量下限（MQL）は、「化学物質環境実態調査実施 の手引き」（平成17 年 3 月）に従って、表 2 のとおり算出した。試料は水質には河川水 を、底質には河川の底質（泥状、水分40.7%、強熱減量 8.7%）を使用した。 表2 測定方法の検出下限（MDL）及び定量下限（MQL）の算出 1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼン 物質名 水質 底質 試料量 100mL 10g-dry 標準添加量 (ng) 無添加 無添加 試料換算濃度 (µg/L) - -最終液量 (mL) 1.0 1.0 注入液濃度 (ng/mL) - -装置注入量 (µL) 1.0 1.0 操作ブランク平均 (µg/L 又はµg/kg) 0.00179 0.0208 結果1 0.00308 0.0303 結果2 0.00339 0.0349 結果3 0.00245 0.0342 結果4 0.00235 0.0320 結果5 0.00255 0.0281 結果6 0.00297 0.0365 結果7 (µg/L 又はµg/kg) 0.00263 0.0294 平均値 (µg/L 又はµg/kg) 0.002774 0.03220 標準偏差 (µg/L 又はµg/kg) 0.00038 0.0031 MDL (µg/L 又はµg/kg) 0.0014 0.012 MQL (µg/L 又はµg/kg) 0.0038 0.031 CV (%) 13.8 9.7 ※MDL＝t(n-1, 0.05)×σn-1×2、MQL＝σn-1×10 ※操作ブランク平均： 試料マトリクスのみがない状態で他は同様の操作を行い測定した値の平均値

水質試料100mL 濃縮 ｱｾﾄﾝ25mL添加 IS 50ng 添加 SDBカートリッジ 50%ﾒﾀﾉｰﾙ水溶液6mL ｼﾞｸﾛﾛﾒﾀﾝ6mL 窒素ｶﾞｽ吹付1mL 遠心分離 ﾌｪﾅﾝﾄﾚﾝ-d10 窒素ｶﾞｽ吹付15分 2回繰り返し 底質試料10g-dry ｱｾﾄﾝ20mL 3000rpm 5分 精製水160mL添加 20％ｱｾﾄﾝ水溶液30mL ｼﾞｸﾛﾛﾒﾀﾝ6mL 振とう・超音波各10分 SDBカートリッジ 50％ﾒﾀﾉｰﾙ水溶液6mL 濃縮 IS 50ng 添加 窒素ｶﾞｽ吹付1mL ﾌｪﾅﾝﾄﾚﾝ-d10 洗浄、脱水 溶出 GC/MS GC/MS 遠心分離 固相抽出 固相抽出 洗浄、脱水 溶出 抽出

§

2 解説

【分析法】 〔フローチャート〕 分析のフローチャートを図2 に示す。 〔水質〕 〔底質〕 図2 分析のフローチャート 〔検量線及びマススペクトル〕 検量線及びマススペクトル図等を次に示す。 図3 検量線 図3 検量線（対象物質濃度範囲 0.2～50 ng/mL、内標準物質 50 ng/mL） y = 0.6498 x - 0.0025 R2= 0.9995 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 濃度比 (対象物質/内標準物質) 面 積 比 (対 象 物 質 / 内 標 準 物 質 )

50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 m/z--> アバンダンス 8.822 ～ 8.835 min の平均: 7B011604.D\data.ms (-) 188 160 94 80 66 55 図4 1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼンの MS スペクトル 図5 フェナントレン-d10のMS スペクトル 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 35000 40000 45000 50000 55000 m/z--> Abundance Scan2225 (16.559 min): 7B031301.D 195 210 180 165 28 89 77 103 115 152 128 51 65 141 39 18

〔添加回収実験結果〕 環境試料への標準物質添加回収実験結果を表3 に示す。試料は水質には河川水を、底質 には河川の底質（泥状、水分40.7%、強熱減量 8.7%）を使用した。 表3 添加回収実験結果 1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼン 物質名 水質（河川水） 底質 試料量 100mL 10g-dry 標準添加量 (ng) 5.0 5.0 試料換算濃度 (µg/L 又はµg/kg) 0.050 0.50 最終液量 (mL) 1.0 1.0 注入液濃度 (ng/mL) 5.0 5.0 装置注入量 (µL) 1.0 1.0 操作ブランク平均 (µg/L 又はµg/kg) 0.00263 0.0215 無添加平均 (µg/L 又はµg/kg) 0.00375 0.0242 結果1 0.0478 0.461 結果2 0.0481 0.449 結果3 0.0508 0.449 結果4 0.0465 0.436 結果5 0.0482 0.436 結果6 (µg/L 又はµg/kg) 0.0488 0.440 平均値 (µg/L 又はµg/kg) 0.04837 0.4452 標準偏差 (µg/L 又はµg/kg) 0.0014 0.010 CV (%) 2.9 2.2 回収率 (%) 87.1 88.5 ※操作ブランク平均： 試料マトリクスのみがない状態で他は同様の操作を行い測定した値の平均値 ※無添加平均： MDL 算出用試料に標準を添加していない状態で含まれる濃度の平均値

【分析の検討事項】

1. 固相抽出カートリッジと溶出溶媒の検討

アセトンと精製水でコンディショニングした 5 種類のカートリッジ（Strata SDB-L： Phenomenex 社製、MEGA BE-C18：VARIAN 社製、InertSep RP-1：GL Sciences 社製、 ENVIRELUT-PAH：VARIAN 社製、Aqusis PLS-3：GL Sciences 社製）に精製水を 6 mL 入 れ、1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼン 100 ng を添加、通水させ、精製水 12 mL を流した後、遠心分離と活性炭を通した窒素で各カートリッジを乾燥させ、各溶媒6 mL で溶出した。溶出液を5 mL に濃縮後、測定用内部標準 250 ng を添加し、1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼンの回収率を求めた。 結果、いずれのカートリッジもジクロロメタン溶出で比較的高い回収率が得られたが、 70％弱にとどまった。SDB カートリッジでは他のカートリッジに比べて、メタノールで の溶出が少ないという特徴が見られた。Aqusis PLS-3 カートリッジも各溶媒で比較的高い 回収率が得られたが、コンディショニング後でも多量の目的物質と重なるピークが確認さ れたため、採用しなかった。 また、追加試験として同様の操作を行い、SDB カートリッジをアセトン/ヘキサン(1/1)6 mL で溶出させたが、ジクロロメタン溶出の方が高い回収率を示した。 これらの結果より、SDB カートリッジ、ジクロロメタン溶出で回収率を上げる検討を 行った。 図6 固相抽出カートリッジと溶出溶媒による回収率 67 53 16 66 49 29 61 54 61 66 43 32 0 10 20 30 40 50 60 70 80 ｼﾞｸﾛﾛﾒﾀﾝ ｱｾﾄﾝ ﾒﾀﾉｰﾙ 回 収 率 （ ％ ） SDB C18 RP-1 PAH ( ％ )

図7 SDB カートリッジでの溶出溶媒の比較 2. 器具への吸着の確認 SDB カートリッジで高濃度（300 ng）の添加回収試験を行い、固相抽出操作において使 用した後の器具をアセトンで洗浄し、器具への吸着の有無を確認した。低い回収率を説明 する大きな吸着は確認されなかった。 図8 固相抽出操作による器具への吸着の有無 67 ₆₄ 0 10 20 30 40 50 60 70 80 ｼﾞｸﾛﾛﾒﾀﾝ ｱｾﾄﾝ/ﾍｷｻﾝ 回 収 率 （ ％ ） SDB ( ％ ) 67.7 0.7 _0.1 0.1 0.0 0.0 0 10 20 30 40 50 60 70 80 定容後 回収率 通水ﾁｭｰﾌﾞ ﾒｽｼﾘﾝﾀﾞｰ 回 収 率 （ ％ ） 添加回収試料 操作ブランク ( ％ )

3. カートリッジ破過の確認 精製水100 mL に 1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼン 300 ng を添加し、SDB カ ートリッジを2 段付け、回収試験を行い、カートリッジの破過を確認した。破過はみられ なかった。 図9 SDB カートリッジ破過の確認 4. 通水条件（溶媒濃度）の検討 精製水にメタノールとアセトンを加え、それぞれ種々の濃度で調製した溶液に1,4-ジメ チル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼン 300 ng を添加し、コンディショニングした SDB カー トリッジに通水させ、乾燥後ジクロロメタンで溶出し、回収率の変化を調べた。 結果、20%アセトン水溶液と 60%メタノール水溶液で最も高い回収率を示した。使用す る溶剤量を考慮し、20%アセトン水溶液で通水することとした。 図10 通水させる溶媒濃度による回収率の変化 64.4 0.1 0 10 20 30 40 50 60 70 80 SDB上段 SDB下段 回 収 率 （ ％ ） ( ％ ) 0 20 40 60 80 100 0 10 20 30 40 50 60 70 精製水中の溶媒濃度(%) 回 収 率 (% ) アセトン メタノール ( ％ )

5. カートリッジのコンディショニング条件の検討 使用するSDB カートリッジのコンディショニングの条件を検討するために SDB カート リッジにジクロロメタンで6 mL ずつ溶出させ、活性炭をつけた窒素気流下で 1 mL に濃 縮後、分析を行いブランクを調べた。 結果、第2 フラクションまで 1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼンが IDL 以上検 出されたので、安全を見てコンディショニングはジクロロメタン20 mL とした。 図11 SDB カートリッジのブランクの確認 6. カートリッジの洗浄条件の検討 カートリッジの洗浄条件を確認するために、コンディショニングした SDB カートリッ ジに精製水を入れ、1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼン 10 ng を添加、通水させ、 メタノール濃度を変えた洗浄液でカートリッジを6 mL ずつ洗浄し、流出した洗浄液をヘ キサン5 mL で抽出、測定用内部標準を 50 ng 添加し、対象物質の溶出の有無を調べた。 100％メタノール液では若干のピークが認められたため、洗浄条件は安全をみて 50％メタ ノール水溶液6 mL とした。 図12 メタノール濃度の変化による対象物質溶出の有無 3.430 0.051 0.028 0.010 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 ｼﾞｸﾛﾛﾒﾀﾝ 1F 6mL ｼﾞｸﾛﾛﾒﾀﾝ 2F 6mL ｼﾞｸﾛﾛﾒﾀﾝ 3F 6mL ｼﾞｸﾛﾛﾒﾀﾝ 4F 6mL 検 出 濃 度 (n g/ m L ) IDL 0.04 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 10 0 洗浄液のメタノール濃度(%) 溶 出 率 (% ) 14DMPEB ( ％ )

7. 窒素気流によるブランク値の改善 当初、操作ブランクより対象物質のピークが認められた。窒素気流によるカートリッジ の乾燥操作において、AC-2 カートリッジを通した窒素と通していない窒素で操作ブラン クを比較ところ、AC-2 カートリッジを通した窒素でブランクの低減が見られた。 図13 AC-2 カートリッジによるブランク値の変化 8. 窒素気流下での濃縮操作による損失の確認 窒素気流下での濃縮操作によるロスを確認するために、ジクロロメタンに1,4-ジメチル -2-(1-フェニルエチル)ベンゼン 5 ng を添加し、窒素気流下で 1 mL まで濃縮、測定用内部 標準を50 ng 添加し、回収率を求めた。窒素気流下での損失は見られなかった。 表4 窒素気流下の濃縮操作における回収率 回収率 対象物質 (%) 1,4-ｼﾞﾒﾁﾙ-2-(1-ﾌｪﾆﾙｴﾁﾙ)ﾍﾞﾝｾﾞﾝ 100 9. シリカゲルクリーンアップの検討 SDB カートリッジからジクロロメタンで溶出し 1 mL まで濃縮した液をシリカゲルクリ ーンアップすることを想定し、検討を行った。 ジクロロメタン1 mL とヘキサン 4.5 mL、10 ng/mL の 1,4-ジメチル-2-(1-フェニルエチル) ベンゼン ヘキサン溶液0.5 mL を混合した。これを窒素気流下で 1 mL まで濃縮し、5%ア セトン含有ヘキサン 10 mL で洗浄しヘキサン 10 mL でコンディショニングしたシリカゲ ルカートリッジ(Waters 社製 Sep-Pak Plus Silica Cartridge)に負荷した。溶離液はヘキサンと し、負荷～初回ヘキサン3 mL の溶出液を F1、その後ヘキサン 3 mL で 3 回溶出し順に F2、 F3、F4 とした。これらをそれぞれ窒素気流下で 1 mL まで濃縮し、GC/MS で測定した。 0.15 0.75 0.0 0.5 1.0 AC-2あり AC-2なし 濃 度 (n g/ m L )

なお、濃縮操作における損失は見られなかった(回収率 100～102%)。シリカゲルカート リッジからの溶出パターンは図14 に示すとおりであり、ヘキサン 6 mL で 89～91%回収 できた。 次に、東京湾の底質を用いてクリーンアップの効果を検証した。底質の分析法に従って アセトン抽出、SDB カートリッジを用いた固相抽出を行い、得られた溶出液を窒素気流 下で1 mL まで濃縮した。これにヘキサン 5 mL を加え混合し、窒素気流下で 1 mL まで濃 縮した。この液を、5%アセトン含有ヘキサン 10 mL で洗浄しヘキサン 10 mL でコンディ ショニングしたシリカゲルカートリッジ(Waters 社製 Sep-Pak Plus Silica Cartridge)に負荷し、 ヘキサン10 mL で溶出した。得られた溶出液を窒素気流下で 1 mL まで濃縮し、、GC/MS で測定した。 その結果、溶出液はほぼ無色となったものの、本試料についてはクロマトグラムにおい て当該物質の保持時間近傍のピーク形状に差がほとんど見られず、シリカゲルではクリー ンアップ効果は得られなかった。 〔分解性スクリーニング試験結果〕 分解性スクリーニング試験結果を表に示す。 表5. 分解性スクリーニング試験結果 初期濃度 1 時間後の残存率 5 日後の残存率 pH (µg/L) (%) 暗所(%) 明所(%) 5 1 89 88 － 7 1 92 92 88 9 1 95 90 － 図14 シリカゲルカートリッジからの溶出パターン 0 20 40 60 80 100 F1 F2 F3 F4 回 収 率 % _n1 n2 n3 ( ％ )

〔クロマトグラム〕 図15 操作ブランク（水質）のクロマトグラム 図16 河川水無添加（MDL）のクロマトグラム 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 40 60 80 100 120 140 160 180 時間--> アバンダンス イオン 195.00 (194.70 ～ 195.70): 7B052817.D\data.ms 10.099 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 40 60 80 100 120 140 160 180 時間--> アバンダンス イオン 210.00 (209.70 ～ 210.70): 7B052817.D\data.ms 10.104 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 40 60 80 100 120 140 160 180 時間--> アバンダンス イオン 195.00 (194.70 ～ 195.70): 7B052811.D\data.ms 10.098 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 40 60 80 100 120 140 160 180 時間--> アバンダンス イオン 210.00 (209.70 ～ 210.70): 7B052811.D\data.ms 10.098

図17 河川水添加（5 ng）のクロマトグラム 図18 操作ブランク（底質）のクロマトグラム 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 100 200 300 400 500 600 700 800 900 時間--> アバンダンス イオン 195.00 (194.70 ～ 195.70): 7B053108.D\data.ms 10.097 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 100 200 300 400 500 600 700 800 900 時間--> アバンダンス イオン 210.00 (209.70 ～ 210.70): 7B053108.D\data.ms 10.098 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 40 60 80 100 120 140 160 180 時間--> アバンダンス イオン 195.00 (194.70 ～ 195.70): 7B052116.D\data.ms 10.096 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 40 60 80 100 120 140 160 180 時間--> アバンダンス イオン 210.00 (209.70 ～ 210.70): 7B052116.D\data.ms 10.097

図19 底質無添加（MDL,添加回収用）のクロマトグラム 図20 底質添加（添加回収 5 ng）のクロマトグラム 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 40 60 80 100 120 140 160 180 時間--> アバンダンス イオン 195.00 (194.70 ～ 195.70): 7B052112.D\data.ms 10.097 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 40 60 80 100 120 140 160 180 時間--> アバンダンス イオン 210.00 (209.70 ～ 210.70): 7B052112.D\data.ms 10.097 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 1200 1300 1400 時間--> アバンダンス イオン 195.00 (194.70 ～ 195.70): 7B052507.D\data.ms 10.098 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 1200 1300 1400 時間--> アバンダンス イオン 210.00 (209.70 ～ 210.70): 7B052507.D\data.ms 10.099

図21 底質（東京湾）のクロマトグラム クリーンアップ無 図22 底質（東京湾）のクロマトグラム クリーンアップ有 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 2200 2400 2600 2800 時間--> アバンダンス イオン 195.00 (194.70 ～ 195.70): 8D022607.D\data.ms 10.154 9.600 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 2200 2400 2600 2800 時間--> アバンダンス イオン 210.00 (209.70 ～ 210.70): 8D022607.D\data.ms 10.155 9.600 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 2200 2400 2600 2800 時間--> アバンダンス イオン 195.00 (194.70 ～ 195.70): 8D022605.D\data.ms 10.153 9.600 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 2200 2400 2600 2800 時間--> アバンダンス イオン 210.00 (209.70 ～ 210.70): 8D022605.D\data.ms 10.154

図23 底質（東京湾）のクロマトグラム クリーンアップ有・添加 10ng 【評価】 本法により、水中に0.001 µg/L 、底質中に 0.01 µg/kg-dry レベルで存在する 1,4-ジメチ ル-2-(1-フェニルエチル)ベンゼンの定量が可能である。 【担当者氏名・連絡先】 担当 財団法人化学物質評価研究機構 住所 〒345-0043 埼玉県北葛飾郡杉戸町下高野 1600 番地 TEL:0480-37-2601 FAX:0480-37-2521 担当者 柴田和江、岡田洋人、川勝健伸、田嶋晴彦 9.60 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 2200 2400 2600 2800 時間--> アバンダンス イオン 195.00 (194.70 ～ 195.70): 8D022606.D\data.ms 10.153 9.600 9.70 9.80 9.90 10.00 10.10 10.20 10.30 10.40 10.50 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 2200 2400 2600 2800 時間--> アバンダンス イオン 210.00 (209.70 ～ 210.70): 8D022606.D\data.ms 10.154

1,4-Dimethyl-2-(1-phenylethyl)benzene

This method provides procedures for the determination of 1,4-dimethyl-2-(1-phenylethyl) benzene in water and sediment by gas chromatography/mass spectrometry with selected-ion monitoring (GC/MS-SIM).

Water sample

Twenty five milliliters of acetone is added to 100 mL of water sample, and the water sample is passed through a preconditioned SDB solid phase extraction cartridge. The cartridge is washed with 6 mL of 50% methanol/water solution, and dehydrated by centrifugation at 3000 rpm for 5 min and nitrogen stream for 15 min. 1,4-dimethyl-2-(1-phenylethyl)benzene is eluted with 6 mL of dichloromethane. The eluate is concentrated to 1 mL and spiked with phenanthrene-d10 (50 ng) as the internal standard. The analyte is determined by GC/MS-SIM (m/z 195, 210). The instrument detection limit (IDL) and the method detection limit (MDL) are 0.0004 microg/L and 0.0014 microg/L, respectively. The recovery from 5 ng 1,4-dimethyl-2-(1-phenylethyl) benzene added water is 87.1% and the relative standard deviation (RSD) is 2.9%.

Sediment sample

Ten grams of sediment sample is extracted with 20 mL of acetone by shaking for 10 min, ultrasonication for 10 min and centrifugation at 3000 rpm for 5 min. The extract is collected and this extraction procedure is repeated once. Then 160 mL of pure water is added into the extract. The solution is passed through a preconditioned SDB solid phase extraction cartridge. The cartridge is washed with 30 mL of 20% acetone/water solution and then 6 mL of 50% methanol/water solution. Washed cartridge is dehydrated by centrifugation at 3000 rpm for 5 min and nitrogen stream for 15 min. 1,4-dimethyl-2-(1-phenylethyl)benzene is eluted with 6 mL of dichloromethane. The eluate is concentrated to 1 mL, spiked with Phenanthrene-d10 (50 ng) as the internal standard, and determined by GC/MS-SIM (m/z 195, 210). The instrument detection limit (IDL) and the method detection limit (MDL) are 0.0040 microg/kg-dry and 0.012 microg/kg-dry, respectively. The recovery from 5 ng 1,4-dimethyl-2-(1-phenylethyl) benzene added sediment is 88.5% and the relative standard deviation (RSD) is 2.2%.

Water sample

Sediment sample

Water sample 100 mL acetone 25 mL

SDB 50% methanol solution 6 mL Dichloromethane 6 mL

Centrifugation Nitrogen purge 15 min

Sediment sample 10 g-dry

Acetone 20 mL 3000 rpm for 5 min 160 mL

Shake (10 min)

Ultrasonication (10 min)

SDB 20% acetone solution 30 mL Dichloromethane 6 mL

50% methanol solution 6 mL dehydration

& clean up Elution

Solid phase extraction

GC/MS-SIM Concentration to 1 mL

Phenanthrene-d10 50 ng

pure water added

GC/MS-SIM Elution dehydration

& clean up Solid phase extraction

Concentration to 1 mL Phenanthrene-d10 50 ng

Repeated once

Centrifugation Extraction

水質試料100mL ｱｾﾄﾝ25mL添加 SDB 50%ﾒﾀﾉｰﾙ水溶液6mL 遠心分離 窒素ｶﾞｽ吹付15分 濃縮 IS 50ng 添加 ｼﾞｸﾛﾛﾒﾀﾝ6mL 窒素ｶﾞｽ吹付1mL ﾌｪﾅﾝﾄﾚﾝ-d10 2回繰り返し 底質試料10g-dry ｱｾﾄﾝ20mL 3000rpm 5分 振とう・超音波各10分 精製水160mL添加 20％ｱｾﾄﾝ水溶液30mL ｼﾞｸﾛﾛﾒﾀﾝ6mL SDB 50％ﾒﾀﾉｰﾙ水溶液6mL 濃縮 IS 50ng 添加 窒素ｶﾞｽ吹付1mL ﾌｪﾅﾝﾄﾚﾝ-d10 固相抽出 固相抽出 洗浄、脱水 溶出 洗浄、脱水 溶出 GC/MS GC/MS 抽出 遠心分離 物質名 分析法フローチャート 備考 〔水質〕 1,4- ジ メ チ ル -2-(1- フ ェ ニ ル エ チ ル) ベ ン ゼ ン 〔底質〕 GC/MS-SIM カラム CP-Sil 8CB MS (Chrompack 製） (30 m、0.25 mm、0.25 µm) 検出下限(MDL) 0.0014 µg/L(水質) 0.012 µg/kg(底質)