血 小 板 機 能 に 関 す る 臨 床 的 研 究 第 二 編
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(2) 14. 林. 写 真1. 写 真2. 正 常 血 小 板 のspreading. もの か否 か,又 関 係 が あ る もの な ら,そ の うち何 を 反 映 して い るの か を検 討 した.. 第1節. 智. 正 常 血 小 板 のGiemsa染. outさ れ る とい うこ とは,血 小 板 機 能 と関係 が あ る. 第2章. 久. 実験 対 象 並 び に実 験方 法. 実 験対 象. 色. out像. した84名 を対 象 と した. 正 常 対 象 群 に は第1編. と同 様 に 岡 山大 学 医学 部 第. 二 内科 に勤 務 せ る医師,看 護 婦,技 術 員20名 を選 ん だ。 第2節. 実 験方 法. 血 小 板spreading. out. testは 図1に 示 した方 法. か ら昭 和47年12月 末 まで に 岡 山大 学. で 施 行 した.即 ち第一 編 に記 載 した方 法 で 得 た血 小. 医 学 部 第二 内科 に 入 院せ る患 者 の うち無 作意 に抽 出. 板 多 血漿 を10%ク エ ン酸 ソ ー ダ加 生 理 的 食 塩 水 で10. 昭 和44年1月.
(3) 血小板機能 に関す る臨床的研究. 図1. 血 小 板spreading. 倍 に 稀 釈 し,シ. out. 10%ク. く洗 浄 し, 40%ホ. 水 洗 し,. り). Giemsa染. 間 固 定 後,. 間 浸 し,酸. 算 定 し,. spreading. の後. outし. た. 変 法5)に よ り 測 定 し. 試 験 管 へ 血 液1mlを. 間 放 置 後,凝. 血 塊 を 取 り出 し,残. 採 取 し, りの血. 清 量(S)mlを. 測 定 し,血 餅 退 縮 能 はS/1.0×100(%). で 表 現 す る.正. 常 値 は40〜50%で. あ っ た.そ. の他 の. 血 小 板 機 能 の 測 定 法 は 第 一 編 に 記 載 し た 如 く,血 板 粘 着 能 の 測 定 はWright氏 部 改 変 し た 方 法6)で,血. の 回 転 フ ラ ス コ法 を 一. 変 法7)で 血 小 板 第3因. 加 実 験 で は,. びATP各. 小. 小 板 凝 集 能 の 測 定 はRenz 子能 の 測 定 は トロ. ン ボ プ ラ ス チ ン形 成 試 験 法 に よ り施 行 し た.. ADP及. Adenine. Adenosine.. 々 の 最 終 濃 度 が10μg/mlに. AMP, な る. よ う に 血 小 板 多 血 漿 に 添 加 し, 37℃ 30分 間 放 置 し, そ の 後spreading. out. testを. 非 粘 着 性 血 小 板 のspreading 氏 法8)の タ ー を2回. 施 行 し た. out. testに. は田中. 血小 板 粘 着 能 測 定 に使 用 す る グ ラス フ ィル 通 した血 小 板 多血 漿 を使 用 して施 行 した. もの で あ る.. 第3章 第1節. 血 小板 粘 着能. られ た.血 小 板 粘 着 能 の亢 進(40%以. farlaneの. ち 直 径10mmの. nucleotides添. testと. 色 を 施 行 し鏡 顕 す る. spreading. 血 餅 退 縮 能 はMac. enbrinkの. out. 1/10N. 化 す る.そ. 血 小 板 の 百 分 率 で 表 現 し た.. 37℃ で2時. Spreading. 小 板 の ス ラ イ ドグ ラ スへ の 落. ル マ リ ン 液 で5分. は 血 小 板200個. た.即. 図2. エ ン酸 ソ ー ダ加 生 理 的 食 塩 水 で 軽. 過 マ ン ガ ン酸 カ リ に5分. out率. (Breddin(3)よ. リ コ ン 処 理 ス ラ イ ドグ ラ ス 上 に 滴 下. し, 30分 間 放 置 し,血 着 を 待 つ.. test. 15. 実験成績. 血 小 板 粘 着 能 との 関係(図2). 横 軸 に血 小 板 粘 着 能 を,縦 軸 にspreading (以 下Sp. O率)を. out率. と り各 測 定 値 を プ ロ ッ トす る と. 図2の 如 くな る.血 小 板 粘着 能 とSp. O率 の 間 に は 推 計 学 的 に正 の 相 関(r=0.494,. P<0.01)が. 認め. 上)を 示 す 症. 例 で はSp. O率 も高 値 を示 す もの が 多 く,粘 着 能 低 下(20%末. 満)を 示 す症 例 で はSp. O率 も良 好 な も. の は一 例 も認 め られ ず,全 て 低 値 を示 した. 第2節 図3. 血 小 板 凝 集能 との関 係(図3) Spreading. out. testと. 血小板凝集能.
(4) 16. 林. 久. 横軸 に血 小 板 凝 集 能 を,縦 軸 にSp. O率 を と り各. 智 図5. Spreading‑out. testと. 血 餅 退縮 能. 測 定 値 を プ ロ ッ トす る と図3の 如 くな る.凝 集 能 と の 間 に は推 計学 的 に は相 関 関 係 を認 め得 なか っ た.. 第3節. 図4. 血 小 板 第3因 子 能 との 関 係(図4). Spreading. out. testと. 血 小 板 第3因. 子能. 図6. 非 粘 着 性 血 小 板 のSpreading‑out 図6. test. 横 軸 に血 小板 第3因 子 能 を,縦 軸 にSp. O率 を と り各測 定 値 を プ ロ ッ トす る と図4の 如 くな る.血 小 板 第3因 子 能 とSp. O率 の 間 に は推 計 学 的 に は相 関 関係 を認 め得 な か った. 第4節. 血 餅 退縮 能 との 関 係(図5). 横軸 に血 餅 退 縮 能 を,縦 軸 にSp. O率 を と り各 測 定 値 を プロ ッ トす る と図5の 如 くな る.血 餅 退 縮 能 とSp. O率 の 間 に は推 計学 的 に は相 関 関 係 を認 め得 なか った. 以 上 血 小 板機 能 とSp. O率 との 間 に は血 小 板粘 着 能 との み 正 の 相 関関 係 を認 め 得 た の で更 に 以 下 の実 験 を行 った. 第5節. 非 粘 着性 血 小 板 のSp. O率 に関 す る検討 に非 粘 着 性 血 小 板 でSp.. (図6) 非 粘 着 性 血 小 板 を 得 る 目的 で 実験 対 象 群 よ り無 作 意 に抽 出 した20名 の血 小 板 多 血漿(以 下PRP)を ラス フ ィル タ ー で2回 に てspreading‑out. 濾 過 し た.濾. グ. 過 前 後 のPRP. testを 施 行 した.濾 過 前 血 小. 板 のSp. O率 は37.5±25.4%に. 対 し,濾 過 後 血 小 板. 即 ち非 粘 着 性 血 小 板 は6.4%±9.6%で. あ り,明 らか. O率 の 抑 制 傾 向 が認 め られ,. 粘着 性 血 小 板 がspreading. outす. る可 能 性 が 示 さ. れ た. 第6節. Adenine. nucleotides添. 率 の 変 動 に 関 す る 検 討(図7, spreading. outす. 加 に よ るSp.. O. 8). る血 小 板 は粘 着 性 血 小 板 ら しい. と い う所 見 が 得 ら れ た の で,血. 小 板 粘 着 に著 明 な影.
(5) 血小板機能に関す る臨床的研究. 17. とSp. O率 を亢 進 させ る所 見 を示 した. 図7. 血 小 板Spreading‑out 於 け るAdenine. test良. 好群 に. nucleotidesの. 第4章. 添 加 実験. 血 小 板spreding. 総括 並びに考案 out. testはBreddinに. よ って. 臨 床 医 家 の 注 目 を集 め るよ うに な っ た血 小 板 の 形態 学 的 機 能 検 査 と 呼 ば れ るべ き検 査 法 で あ る.彼 9に 示 す 如 くspreading. 図9. 図8. 血 小 板Spreading. out. 於 け るAdenine. test良. Spreading. outし. outし. は図. た血小 板 を その 直. た血 小 板 の直 径 に よ る分 類. 好群 に. Nucleotidesの. 添加 実験. 径 に よ りRiesenform(直 (11〜20μ)及 spreading. 径20〜30μ),. びKleinform outし. Groβform. (10μ 以 下)の3種. 類 に,. な い も の をSpinnenformと. し,. Riesenform〜Groβformの. ing. outす. 分類. 様 に 大 き くspread. る も の は 比 較 的 幼 若 な 血 小 板 で あ り,血. 小 板 造 生 の 旺 盛 な と き に 認 め ら れ る と述 べ て い る. 臨 床 的 に は 止 血 機 能 を 反 映 す る もの で あ り,血 性 出 血 性 素 因 の ほ と ん ど はspreading 抑 制 傾 向 に あ り,な 血 餅 退 縮,ト. か に は 血 小 板 数 が 正 常 で しか も. testの. みに異 常 を認 め た こ. と す ら あ る と 報 告 し て い る4).又,保 の 判 定 に も有 用 でSp. 響 を 及 ぼ すAdenine ADP及. nucleotides即. びATPの. ちAdenosine. 添 加 に よ り, Sp. O率. に 対 し て 検 討 し た.図7に. 未 処 置 対 象 群 のSp. nosine添 %,. ATP添. O率44.9±13.4%に. 加 群20.1±9.1%, 加 群19.0±11.1%と. 抑 制 を 認 め た.一 方, 上 昇 傾 向 を 認 め た.. ADP添 Sp. O率. つ い て の 検 討 で は,図8に ±5.9%,. AMP添. Adenosine添. 加 群8.6±8.9%及. びATP添. と ん ど不 変 で あ る がADP添. O. 示 す如 く 対 し, Ade. O率. の. AMP添. 加 群12.0±10.7%と 加 群 で は32.3±19.0%. 好 で あ れ ばSp.. ち6〜7日 O率. の 保存 で は普 通 保 存 良. は 正 常 で あ る と 報 告 し て い る4).. し か し現 象 論 的 に 述 べ られ て い る だ け で,他 の 血 小 板. testがBreddinの. 者 はspreading. 指 摘 す るよ うに血 小 板 の 止. 血 機 能 を 反 映 す る も の な ら ば,種. 々 の 血 小 板 機能 の. な か で 如 何 な る 機 能 と 関 連 が あ る もの か を 検 討 す る 例 に. 示 す 如 く未 処 置 対 象 群10.8 加 群9.4±3.3%,. 報 告 し て い る.即. out. 加 群 は57.1±12.9%と 不 良 を 示 し た7症. 判 定 基 準 と し,血. 機 能 と比 較 検 討 し た 報 告 は な い.著. 加 群15.1±9.4. 明 らか にSp.. 存 血小 板 の機 能. O率50%を. 小 板 の 保 存 が 良 好 で あ る か ど うか を 決 定 し 得 る と も. が如. 何 な る 変 化 を 受 け る か を 検 討 した.先 ず 正 常 なSp. 率 を 示 し た5例. 小板. testは. ロ ン ボ エ ラ ス トグ ラ フ に 異 常 を 認 め な. い の にspreading‑out. AMP,. out. 目 的 で 実 験 を 行 な っ た.止. 血 に 関与 す る機 能 と して. 止 血 機 序 にお け る最初 の 反応 で あ る血 小 板 粘 着 能 及 び 血 小 板 凝 集 能 に つ い て 検 討 し,つ い で 止 血 栓 の 強 固. ほ. 化 に関 与 す る血 餅 退縮 能及 び 内因 性 血 液 凝 固 に作 用 す る 血 小 板 第3因. 子 能 の 以 上4者. とspreading. out.
(6) 18 testと. 林 を 比 較 検 討 し た が,血. 小 板 凝 集 能,血. 久. 小板第. 智. 形 態 学 的 変 化 と して 把 握 す るspreading. out test. 3因 子 能 及 び 血 餅 退 縮 能 と は 関 連 を 示 す 所 見 が 得 ら. は病 態 生理 学 上 一 層 興 味 を もた れ る検 査 法 と な るで. れ な か っ た.血. あ ろ う と思 わ れ る.. 小 板 凝 集 能 に 関 し て は,血. 能 測 定 に 使 用 さ れ るInducerと. 小板凝集. して 何 を 使 用 す る か. 又 そ の 濃 度 に 関 し て も問 題 が あ り,種. 第5章. 々議 論 の あ る Breddinに. 所 で あ るか ら今後 尚検 討 を要 す るが 兎 に角 著 者 の 測 定 で は 相 関 を 認 め る こ とが 出 来 な か っ た.し 小 板 粘 着 能 に 関 して は,粘 着 能 とspreading と の 間 に は正 の 相 関 関 係 を 認 め 得 た.田. 結. 論. よ り始 め られ,臨. 床 医家 の 注 目 を 浴 び. か し血. る よ う に な っ た 血 小 板spreading. out率. マ ン ガ ン 酸 カ リ に よ る 血 小 板 のspreading. 中氏法の血. out. test即. 血 小 板 機 能 と 関 連 が あ る もの か 否 か,又. ち過 outは. 関連 が あ る. 小 板 粘 着 能 測 定 に使 用す るグラスフィル ターを使 用 し. とす れ ば血 小 板 の 機 能 の 中 で如 何 な る もの を反 映 し. て 得 た 非 粘 着 性 血 小 板 は 明 ら か に 全 血 小 板 のSp.. て い る も の か ど う か を 検 討 した.. 率 よ り抑 制 さ れ て お り,粘 outす. 着 性 血 小 板 がspreading. る 可 能 性 を 示 す 所 見 を 得 た.. し た 如 く, spreading. O. out良. Breddinの. 指摘. 好 な血 小 板 が 血 小 板 造. 生 の 亢 進 時 に 高 頻 度 に 認 め ら れ る こ と,又. 血小板造. (1)血 小 板 粘 着 能 とspreading 検 討 で は 粘 着 能 とspreading 関 関 係(r=0.494,. out out率. P<0.01)を. testと. の比較. の 間 に は正 の 相. 認 め 得 た.血. 小板. 多 血 漿 を グ ラ ス フ ィル タ ー に て 濾 過 し て 得 た 非 粘 着. 生 の亢 進 時 に は幼 若 血 小 板 が 著増 して い る と考 え ら. 性 血 小 板 は 濾 過 前 血 小 板 多 血 漿 に 比 較 し てSp.. れ る の で,従. は 著 明 に 低 下 して い た.以 上 の こ と は 血 小 板 がspr. 来 血 小 板 のAgingと. 粘 着能 とは密 接 な. 関 連 が 存 在 す る こ と が 報 告 され て お り9)10),間接 的 で. eading. は あ る がBreddinの. も の と想 定 さ れ た.. 説 を 支 持 し て い る の で あ ろ う.. 血 小 板 粘 着 現 象 と 密 接 な 関 係 に あ る11)12)Adenine nucleotidesと ADPの. の 関係 を添 加 実 験 で検 討 した 結 果 は. 添 加 に よ り, Sp. O率. も そ もADP添. 変 化 を 起 す13)がspreading な い.. ATP,. spreading. は 著 明 に 亢 進 す る.そ. 加 それ 自体 で血 小 体 は あ る程 度 腫 張. AMP及 outは. outす. 抑 制 さ れ た.血. に よ って 亢 進 され,. るまで には致 ら. びAdenosineで. ATP,. AMP及. は血 小板 の. を抑 制 し, ADPは. びATPは. の 関 係 で は,. 亢 進 せ し め る傾 向 を 認 め た.こ. は 血 小 板 粘 着 能 がAdenosine 制 さ れ,. ADPに. 所 見 と一 致 し,血. Aden. 血 小 板 のspreading. AMP及. びATPで. out れ 抑. よ っ て 亢 進 さ れ る と い う これ ま で の 小 板 のspreading. out. testと. 粘. びAdenosineで. で あ る.. ア ン化. が 抑 制 さ れ る こ と をBr. eddinも. 指 摘 し て い る4).し か し何 故,血. reading. outす. る か に つ い て は,過. nuclestidesと. AMP及. 着 能 測定 とが密 接 な 関 係 に あ る こ とを裏 付 け る もの. 又 血 小 板 粘 着 を 抑 制 す る モ ノ ヨ ー ド酢 酸,シ O率. (2) Adenine osine,. る際 に は 粘 着 性 血 小 体 が 主 役 をな す. 小 板 粘 着 がADP. は 抑 制 さ れ る こ と14)と 全 く一 致 し た 成 績 を 示 し た.. カ リ等 に よ っ て もSp.. outす. O率. 小 板 がsp. (3) し か し検 討 し た 他 の 血 小 板 機 能 即 ち血 小 板 凝 集 能,血 out. 小 板 第3因. testの. 子 能 及 び 血 餅 退 縮 能 とspreading. 成 績 の 間 には推 計 学 的 に 有意 な相 関 を証. 明 す る結 果 は 得 られ な か っ た.. マ ン ガ ン酸 カ リ. の 酸 化 作 用 に よ り血 小 板 の 解 糖 系 そ の 他 の 酵 素 反 応 に 影 響 を 及 ぼ す こ と に よ る もの と 推 定 し て い る もの. 擱 筆 に臨 み御 指 導 と御 校 閲 を い た だ い た恩 師 平 木. も あ り16),又近 年 で は 血 小 板 粘 着 能 を 阻 害 す るfibrino. 潔 教 授 に 深 謝 す る と と も に 懇 切 な る 御 指 導 と御 助 言. lytic early. をい た だ い た半 沢敦 正 博 士 な らび に 喜 多 嶋康 一 講 師. outを. split productsが. 血 小 板 のspreading. 阻 害 す る こ と も報 告 さ れ,今. 後血小板機能 を. に 感 謝 の 意 を 表 す る..
(7) 血 小板機能 に関す る臨床的研 究 参 1). 神 前 五 郎,井. 2). Breddin,. K.:. Thrombozytenagglution. 3). Breddin,. K.:. Zur. ans 4). 上 勝 男:血. Verlog,. 小 板 の 微 細 構 造,日. 考. Klinik. 本 臨 床, und. der. 文. 19. 献 31:. 765〜768,. 1973.. Gefaβkrankheiten.. Blut,. Thrombozytopathien…Diskussion.. XI: Der. 144‑164,. 1965.. Thrombozyt,. J. F.. Lehm. Munchen,. Breddin,. H.:. In‑Vitro‑Methoden. zur. Beurteilung. der. Plattchenfunktion.. Blut,. XVIII,. 84‑89,. 1968. 5). 松 岡 松 三:出. 血 性 素 因 と 血 栓 症P. 6). Pfleiderer,. T.. ohung 7). der. 8). 田 中 隆 一;血. 9). Hirsh, to. 10). collagen.. 11). A.. The. A.. J.,. and. und. R.. J. F.:. H.:. Erh. 674‑685, der. 1967. Thrombo. 1967. 血 会 誌,. of. 18:. Aggregation. 95‑103,. effect. II.. Ham.,. Erhoete. 38:. The. platelet. 20: age. 270‑282, on. 1957.. platelet. adherence. platelet. cohorts. 1968.. Kinetic. studies. 138‑144,. C. F.,. hematocrit,. H.:. Haemat,. 466‑473,. 74:. Borchgrevink, between. Diathe,. に 血 小 板 粘 着 能 に つ い て,日. 47:. Med.,. Thrombozytenaggregation.. Thr.. Braunsteiner, Acta.. Mustard,. Aster,. Clin.. der. with. chromium‑labeled. in. 1969.. and. Ames,. bleeding. S.. time. B.:. and. The. role. platelet. of. red. cells. adhesiveness.. in. Brit.. hemostasis: J. Haemat.,. 7. 1961.. Gaarder, red. F.. Invest.,. and. and. relation. : 42‑50, 12). Clin.. D.. J. Iab.. Hellem,. M.. J.. Ginsburg, rats.. E.. Hyperlipemia,. Glynn,. 京.. Mechanismus. Makromolekuele,. 小 板 機 能 に 関 す る 研 究,特. J.,. 原 出 版,東. zur. geladene. Holzknecht,. essentiellen. 1969,金. R.:. durch. J.,. bei. 203,. Brossmer,. Klebrigkeit. Renzenbrink, zyten. and. A.,. cells. Jonsen,. as. a. J.,. factor. Laland,. in. the. S.,. Hellem,. adhesiveness. A.. of. and. human. Owren,. blood. A.:. Adenosine. platelets.. Nature,. diphosphate 192:. in. 531‑532,. 1961. 13). O'Brien. J. R.:. ladelphia. and. 14). 斉 藤 昌 信,畔. 15). Marcus, York.,. Dynamics. J.. 半 沢 敦 正:血. 17). Breddin.. thrombus. M.. B.. Zucker:. The. 小 板 異 常 と 出 血 性 素 因,臨 K.. Thromb.. and. Burck der. Diath.. K.. Formation. 液 と 脈 管,. physiology. Haemorrh.,. Zur. 9:. R.,. Ibrom,. H.. to. and. glass.. Aprocedure. 1960.. H.:. 床 病 理, Klinik. and. and. Dissolution. J. B. Lippincott. 1: of. 615‑624, Blood. Co.. Phi. 1970.. platelets. Grune. &. for. 526‑531,. Stratton,. New. 1971.. Thrombozyten‑fuktionsstorung der. 525‑545,. Stanlawski,. 19:. der. Ausbreitungsfahigkeit. Marx,. : 335‑338.. the 1969.. 小 板 メ タ ボ リ ズ ム,血. and. Berucksichtigung. film. the. 121,. 1965.. 16). 18). p.. 柳 武 雄:血 A.. of. Toronto,. Thrombozyten. an. unter silikonisielten. besonderer Glasflachen.. 1963. F.:. improved. The. staining. light‑microscopic. of. spread. out. thrombocyte. thrombocytes analysis.. adherent Blut,. 6.
(8) 20. 林. Clinical. 久. Studies. 智. on Platelet Part. Platelet. Functions. Ⅱ. spreading‑out. test. by Hisatomo. HAYASHI. Department of Internal Medicine, Okayama. University Medical School. (Director: Prof. Kiyoshi HIRAKI) For Breddin. the. purpose. in comparison are. as. found. considered. correlation platelets. to have that. Although. result. the. relationship. of platelet. aggregation,. the. adding test. supported. between functions,. factor-3. with. the. the finding. the spreading-out the. and clot. induced. played. test. spreading-out retraction.. aggregation,. rich. than. untreated. the. in the. AMP and ATP. obserbed platelet. plasma. proposed. index The. was. results. suppressed. platelet test. between factor-3. the. the and. platelets.. by. studied obtained. the. related. spreading-out clot. retraction.. adhesiveness.. a glass. wool. Therefore,. filter it was. phenomenon. spreading-out. spreading-out. adhesiveness. is closely. and platelet. through. spreading-out. to increase. between. that spreading-out. index. platelet. a role. a tendency. relationship. was. the spreading-out. the index. platelets. correlation i.e.,. between. by filtering. of adenosine,. of ADP. No significant. observed. spreading-out. the adhesive. adding. functions,. was obtained. a lower. corresponded. and also. atelet. the. tests. follows.. Non-adhesive. elet,. routine. with adhesiveness,. Positive. was. of elucidating. and the current. and adenine to platelet index. of the. plat. The. above. index.. nucleotides, adhesiveness.. and the. other. pl.
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