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電 位 測 定 に よ る 抗 菌 性 物 質 の 検 定 法

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Academic year: 2022

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(1)電 位 測 定 に よ る 抗 菌 性 物 質 の検 定 法 第. Ⅰ. 編. 嫌 気 的培 養 液 内の電位 測定 に よる抗 菌性 物 質の効 果検定 岡 山大学 医学 部細 菌学 教室(指 導. 山. 本. 目 緒. Ⅱ Ⅲ. 栄教授). 穰. 〔昭 和29年2月22日. Ⅰ. 村上. 受稿 〕. 次. 言. 4.. Aureomycin添. 加 の成 績. 実験 材 料 並 びに 実 験 方法. 5.. Terramycin添. 加 の 成績. 実 験. 6.. Sulfanilamide添. 成. 績. 1.. Penicillin添. 加 の成 績. 2.. Streptomycin添. 3.. Chloromycetin添. 加 の成 績. Ⅳ. 総 括 及 び考 按. Ⅴ. 結. 加 の成績. 参. Ⅰ 緒 液 体 培 地 に 於 け る細 菌 増 殖 時 の 酸 化 還 元 電 位 の 測 定 は, Gillepsie1)が,1920年. 最 初に 行. つ て 以 来 可 成 多 くの 報 告 が あ るが,殆. ん ど好. 加 の成 績. 論 考 文. 献. 言 低 い電 位 を 示 す もの も あ り,然 ら ざ る もの も あ る と述 べ,又,福. 見5)は,純. じ て 酸 素 を 遮 断 す る時 は,不. 窒素 気流 を 通 反応 性電 極 電位. 気 的 条 件 下 に 於 て 測 定 さ れ て 居 る.著 者 も,. は 下 降 す る と報 じ て 居 る.以 上 の 報 告 を 通 覧. 第 Ⅰ編 に 於 て 好 気 的 培 養 液 内 に 於 け る電 位 測. し て 見 る と,嫌 気 的 条 件 下 に 於 て は,発. 定 に よ り,抗 菌 性 物 質 の 効 果 検 定 を 短 時 間. 位 は 好 気 的 条 件 下 に 於 け る よ り一 般 に 低 い と. で,而. 考 え られ る,而. も容 易 に 行 う こ とが 出 来 る こ とを 報 告. した.. 育電. しな が ら,発 育 電 位 は 細 菌 の. 増 殖 に 伴 う還 元 電 圧 を 示 す も の で あ るか ら,. 細菌 の培 養条 件 を 色 々に変 え て行 つ た 報告. 細 菌 が 増 殖 す る と言 う こ とが 第 一 条 件 とな る こ とは 言 うま で も な い こ とで あ る.そ. を 見 る と, Hewitt2)は,各 種 細 菌 の発育 電 位 ‑曲 線 を 発 表 し て 居 る が ,そ の 内,溶 血 連 鎖. 者 は,第. 球 菌 に つ い て,培. 地 の 換 気 を 充 分 に 行 う時 に. 測 定 に ょ る 抗 菌 性 物 質 の 影 響 を 追 究 した 結 果. は 酸 化 還 元 電 位 に 非 常 に 影 響 を 与 え る と言 つ. 一 つ の 抗 菌 性 物 質 検 定 方 法 と し て 提 唱 した の. て 居 る.こ れ と反 対 に, Knicht3)は,嫌. で あ るが,今. 気的. Ⅰ編 に 於 て 好 気 的 条 件 の 下 で,電 位. 回 は,嫌. 気的 条件 下 に於 て は如. 培 養 液 内 に 於 て 電 位 を 測 定 した 場 合 に は,電. 何 な る 態 度 を 示 す か,又,好. 位 は よ り下 降 す る と 言 つ て 居 る.而. し よ り低 電 位 を 現 す こ とか ら す れ ば,更. Burro及. びJordan4)は,. し て,. Salmonellaの. 酸化. 還 元 電 位 を 測 定 し,偏 性 嫌 気 性 菌 の 場 合 は, 非 常 に 低 い 電 位 を 保 っ が,通. こで 著. 気的 条 件 下 に比 に,. 優 れ た 検 定 方 法 に な る の で は な か ろ うか と考 え て 本 実 験 を 行 つ た.. 性 嫌 気 性 菌 で は,. Ⅱ 実験材料並びに実験方法 供 試 菌 と し て は,教 aureus. (寺 島 株)と57.. 型)を. 室 保 存 のStaphylococcus Salmonella. typhi. (S. 使 用 した.. 実 験 材 料 の 作 り方 は 第 Ⅰ編 と同 様 で あ る..

(2) 498. 山. 抗 菌 性 物 質 ほCrystalline sium,. Dyphydro. Penicillin. 測 定 に 用 い と 同 様 で,ペ 薬 物 の 濃. 類 を 使 用. ト ン 水(pH. 7.2). 度 はM×10‑3,. M×10‑6を famineはM×10‑2,. し,. M×10‑3,. 電 比 色 計 を 用 い て5. 気 的 は7.9mgと. 共 に 始 め よ り徐 々 に 下 り,好 気 的 の 電 位‑時 間‑曲. 線 は5時. 示 し,や. 20m.v.低. Sul. 5mgの. 9.3mgで. 好 気 的 の 方 が 少 し 多 い.. も の も好 気 的 の 方 は 始 め よ り徐 々 に 下. 降 し,5時. 間 で(‑)15m.v.を. 方 は 始 め 急 速 に 下 降 し1時. た め, Hewitt2)は,ワ. ゼ リンを用 い て空 気 を. と な り,以. 遮 断 し,福 見5)は,純. 窒素 気 流 を通 して居 る. 上 下 し,. 者 は,被. 後,急. 速 に 冷 却 し,直 ち に 滅 菌 流 動 パ ラ フィ. 如 く, St. aureus. 1mg,. の4種. 気 的 及び嫌 気 的培 養 を行 つ. に 就 て,好. て 測 定 し た と こ ろ,起 310m.v.で,接. 間 で(+). 5mg,. もの は 始 め よ. 気 的 の 電 位‑時. 50m.v.,嫌. 間‑曲. Sta.. 気 的10.9mgで. 気 的 は1時. 間(‑)60m.v.よ. 100m.v.ま. で 下 り,後. 15.3mg,嫌. 前者が. 気 的 の方. な り,後. 徐 々に. 5時 間 で(‑)60m.v.を. 示 し,嫌 り2時. 間(‑). 徐 々 に 上 昇 し て,. 5時. な り や は り20m.v.好. の 場 合 よ り低 い.. 線は. 5時 間 後 の 菌 量. り急 速 に 下 降 し,好. 間(‑)80m.v.と. 気 的 の そ れ は5時. 第1図. く,. 間 で(‑)10m.v.と. 下 降 し,. 7.5mg. 始 電 位 は 大 く体(+). 種 菌 量1mgの. り徐 々 に 下 り,好 5時. 2.5mg,. は1時. 示 し,嫌. もの は 両 者 共 に起 始電 位. (+)300m.v.よ. Ⅰ図 に 示 す. 気的の. 間 で(‑)30m.v.. 5時 間 で(‑)35m.v.を. 多 い.7.5mgの. 備 実 験 と し. 示 し,嫌. ら(‑)50m.v.を. は 好 気 的12.0mg,嫌. ン を 重 層 し て 培 養 液 面 を 空 気 と遮 断 した.. 当 菌 量 の 決 定 を 行 つ た.第. 後(‑)30か. 気 的 の 電 位 が20m.v.低. 検 培 養 液 を始 め 良 く滅 菌 し た. 気的 は. は り嫌 気 的 の 方 が. の 装 置 を 用 い て 測 定 し た.嫌 気 的 状 態 に す る. が,著. 於 て も両者. く, 5時 間 後 の 菌 量 は 好 気 的, 10.8mg. 嫌 気 的,. し た.. 2.5mgに. 間 で(+)15m.v.,嫌. (‑)5m.v.を. 実 験 装 置 は 第 Ⅰ編 に 示 し て あ る も の と同 一. て,適. な つ て 居 り,. Ⅰ編. M×10‑4,. 始 め 第 Ⅰ編 の 場 合 と 同 様,予. 気的. 菌 量 は 少 し 少 な い,又,. M×10‑5,. Sulfadiazine,. し,光. 気 的 の 方 が. し た.. 30cc.を,. M×10‑4,. 用 い た.但. M×10‑5と. は8.3mg,嫌. る 培 地 及 び 薬 物 の 濃 度 は 第 プ. い.而. 示 し,嫌. 時 間 後 の 菌 量 を 測 定 し て 見 た と こ ろ,好. Sulfanilamideの. Sulfamineの7種. 30m.v.を. 20m.v.低. Hydrochloride,. Hydrochloride,. 内Sulfadiazine,. 間 で(+). sulfate,. Aureomycin. Terramyein. 穰. Potas. Streptomycin. Chloramphenicol,. 本. 5時. 気的. 間 後 の 菌 量 は,好. 気 的14.8mgで. 気的. 前 者 が や ゝ 多 い.. aureus. は好気 的培養 液 に於 け る もの は嫌 気的培養 液に於 け る もの. 5時. 閻 後 の 菌 量. 好 気的 培 地 の も の. 嫌 気 的 培 地 の も の. 1m.g…. …8.3m.g. … …7.9m.g. 2.5m.g…. …10.8〃. … …9.3. 〃. 5m.g…. …12.0〃. … …10.9. 〃. 7.5m.g…. …15.3〃. … …14.8. 〃.

(3) 電位 測定に よる抗菌性物質の検定 法 以 上 の 実 験 成 績 に よ る と,接. 499. 種菌 量 を異 に す 第3図. る何 れ の場 合 に 於 て も,嫌 気 的 培 養 の 電 位‑. Sta.. aureus. Penicillin. 時 間‑曲 線 は,好 気 的 培 養 の 夫 れ に 比 較 し て 可 成 り低 い.又,菌. 5時. の増殖 は何 れ の場 合 に 於. 量7.5mgを. …10.3. Control…. 〃. …11.6. 〃. 使 用 す る と1時 間 に し. て す で に 負 の 電 位 を 示 す 故,第 7.5mgを. …8.8m.g. 10‑5M…. て も,好 気 的 培 養 の 方 が 嫌 気 的 培 養 よ り多 い . 而 し,菌. 間 後 の菌 量. 10‑3M…. Ⅰ編 と同 様. 使 用 した .. 薬 物 の 添 加 時 期 に 就 て は 第2図. 第2図. Sta.. に 示 す 如 く,. aureus. Penicillin Penicillin. 10‑3M. Penicillin. 10‑5M. (1). 菌 と 同 時 にPenicillinを. (2). 30分. (3). 1時. (4). 2時. 後. に. て 居 り,5時 投 入. 〃. 〃. 間 後 に. ". ". 聞 後 に. 〃. 添 加 し た 時 期). な つ て 居 り,又,10‑5M濃. り急 速 に 下 降 し,1時. に し て(‑)20m.v.に. 下 り,以. 10.3mgと. な つ て 居 る.対. を 接 種 し,. Penicillinを. 照 即 ち,菌7.5mg 添 加 しな い も の は 起. な り,以. か ら(‑)90m.v.の. 間 後,2時. の 判 定 に,何. の 濃 度 別 の 電 位‑時. 間‑曲. 剤 を 菌 と 同 時,30分. 間 後 に 添 加 して 薬 剤 効 果. と同 時 に 投 入 し た 場 合,成. 績 判 定 が 最 も 明 確 に 出 来 る こ と を 知 つ た. 次 に 薬 物 を 添 加 し た 場 合 に 於 け る,増 量 と電 位‑時. 間‑曲. み た(第3図).嫌 aureus. 間‑曲. 間 に し て(+)20m.v.と. 間 半(+)80m.v.と. に 上 昇 し,5時. 添 加 した 場 合 度 で は,起. り急 速 に 下 降 し,1時 後 安定 し. り急 速 に 下 降 な り,以. 後徐々 な り,嫌. 始 電 位(+)410m.v.よ. 2時 間 ま で 急 速 に 下 降(+)50m.v.,後. ち,両. St.. 線を見 気 的 に於. 間(+)125m.v.と. 気 的 の 場 合 は,起. 殖菌. 間‑曲. 度 は,好. て は 起 始 電 位(+)400m.v.よ. 気 的 培 養 液 に 於 て,. な り,以. 度 を 添 加 した 場 合 の 好 気 的. 10‑3M濃. に 下 降 し て5時. 線 は,10‑3M濃. 始 電 位(+)320m.v.よ. る と(第4図),. 線 の 変 化 との 関 係 を 見 て. 7.5mgにPenicillinを. の 電 位‑時. St. aureus 7.5mgにStreptomycin. 10‑4M濃. し,1時. 物. 線 と菌 量 が 平 行 し. 培 養 及 び 嫌 気 的 培 養 の 電 位‑時. れ の 場 合 が 最 も よい か と言 う こ. と を 検 し た 所,菌. 間 の 菌 量11.6mg. 気 的 の 場 合 と 同 様,薬. 10‑3M,. 後,1時. 示 し,5時. 間で. と 増 殖 し て 居 り,好. て 居 る.又,. 度 を 用 い て,薬. 後(‑)60m.v.. 間 を 上 下 し,5時. (‑)70m.v.を. 10‑5M濃. 示 し菌量 は. り 急 速 に 下 り,1時. 間 で(‑)60m.v.と. 10‑3M,. 間. 後(‑)30m.v.. 間(‑)30m.v.を. 始 電 位(+)310m.v.よ. Penicillin. 度 も起 始. 電 位(+)315m.v.よ. を 上 下 し,5時. St. aureus(7.5mg),. 示 し,5時. 間 後 光 電 比 色 計 に て 菌 量 を 測 定 し た と こ ろ, 8.8mgと. 〃. (矢 印 はPenicillinを. 間 で(+)20m.v.を. 間(+)5m.v.を. り 徐々. 示 し た.即. 者 の 間 に 可 成 大 な き電 位 の 差 を 見 る の. で あ る が,菌 は7.9mgで. 量 は 好 気 的 は8.3mg,嫌. 気的. 電 位 の差 の割合 に 菌 量 に差 が少. な い.又,10‑4M濃. 度 を 用 い て行 つ た 実 験 に. 於 て も 前 者 と 略 略 同 様 の 関 係 が 見 ら れ た.以.

(4) 500. 山. 第4図. Sta.. 本. 穰. aureus. Streptomycin. は好 気的 培養液 に於 け るもの は嫌 気的培 養液 に於 け るもの. 5時. 間 後 の 菌 量 好 気的 培 養 液 の も の. 上 の 如 く薬 剤 添 加 の 場 合 も,好 気 的 培 養 に 比 較 し て嫌 気 的 培 養 の 電 位‑時 に 低 い.而 電 位‑時. 間‑曲. 線 は一 般. し な が ら,薬 物 の 濃 度 別 か ら 見 た. 嫌 気 的 培 養 液 の もの. 10‑3M…. …8.3m.g. 10‑4M…. …10.8. 〃. …. ……7.9m.g …9.3. 〃. Control…. …15.4. 〃. … …14.8. 〃. 以 上 の 予 備 実 験 か ら,本 実 験 に 於 て も第 Ⅰ 編 と同 様,菌. 量 は7.5mgを. 用 い,薬. は 菌 の 接 種 と同 時 に行 つ て 実 験 した.. 間‑曲 線 の 変 化 と,菌 量 とに 平 行 関. 係 の 存 在 す る こ とは,好. Ⅲ. 気 的 の 場 合 と同 様 で 1.. あ る こ とが 判 つ た. 第5図. Sta.. aureus. Penicillin添. 加. Penicillin添 の. 実. 験. 成. 績. 加 の 成 績(第5図). 成 績. Sal. typhi. 物 添加.

(5) 電位測定に よる抗菌性物質の検定法 St. aureusの. 場 合,全. 般 に 好気 的 培養 に於. け る よ り低 電 位 を 示 し て 居 る(前 験 を 参 照).. 10‑3M濃. (+)400m.v.よ. 述 の予 備 実. 度 に 於 て は,起. (+)70m.v.ま. で 下 り,以. 時 間 で(+)40m.v.と. な り,2時. 昇 す る も3時. 350m.v.よ. 後 徐 徐 に 上 昇 し,5時. の. 度 も起 始 電 間で. 間半 で一 時 的 に上. 間 に は(+)10m.v.と. な り,以. 間 で(+)25m.v.を. 示. 上 昇,4時 し,5時. 間(+)25m.v.と. な るが 又 下降. 間 で(+)7m.v.を. 示 し て 居 り,菌. の 増 殖 は や ゝ 阻 止 さ れ て 居 る . 10‑6M濃. 度は. り下 り,1時. 間 半 よ り徐 徐 に 上 昇, な り,菌 の 増 殖 は や ゝ 度 はSt.. 始 電 位(+)360m.v. 間 で(‑)30m.v.と. な. り,以. 間 で(‑)30m.v.を. 示. 後 安 定 し,5時. し,菌. の 増 殖 は 余 り 阻 止 さ れ て 居 な い. 度 も 大 体10‑5M濃. 60m.v.と ‑曲. な る が,対. 線 が 高 い故. ,菌. 居 る. 以 上 よ り嫌 気 的 培 養 に 於 て も, Penicillin はSt.. で(‑)15m.v.と. 後 安 定 し,4時. 間. 電 位 降 下 の 阻 止 が 見 ら れ た.. 5時 間 で(‑)30m.v.と. aureus及. な り菌 の 増 殖 は 少. 2. Streptomycin St, aureusの. 場 合 は,10‑3M濃. 度 は 起始 電位. 第6図. Sta.. aureus. びS.. typhiの. 発 育 阻止 に よ る. 下 降 し,. し阻 止 さ れ て 居 る. S. typhiの. 間. の 増 殖 は や ゝ阻 止 さ れ て. 間. 上 昇 す る も,後. 間(‑). 照 よ りや ゝ電 位‑時. り下 降 し,2時. で 一 時(‑)10m.v.に. 度 と略 略 同 様. 間 よ り徐 々 に 下 降 し,5時. 起 始 電 位(+)340m.v.よ な り,以. aureusの. よ り急 速 に 下 り,1時. で,4時. 後 徐 々に. 度 も同 様 に 起 始 電 位(+). 場 合 よ り 下 つ て 居 り,起. 濃 度 も 同 様 起 始 電 位(+)370m.v.よ 間(+)10m.v.,以. な り菌 の 増 殖 は 阻 止 さ れ. 阻 止 さ れ て 居 る.10‑5M濃. 10‑6M濃. り急 速. 間半で. 後 徐 徐 に 上 昇,5時. 5時 間 で(+)10m.v.と. し て 居 り,菌 の 増 殖 は 阻 止 さ れ て 居 る.10‑5M. に 下 降 し,2時. な り,以. て 居 る.10‑4M濃. り急 速 に 下 降,2時. (+)15m.v.と. (‑)5m.v.と. 間で. な つ て 居 る が,菌. 位(+)375m.v.よ. り急 速 に 下 降 し,1時. 間 で(+)30m.v.と. 後 徐 徐 に 下 降,5. 増 殖 は 阻 止 さ れ て 居 る.10‑4M濃. (+)360m.v.よ. 始電 位. り急 速 に 下 降 し,2時. 501. Streptomycin添. 添 加 の 成 績(第6図). 場 合,10‑3M濃. 位(+)360m.v,よ. 加. の. 度 は,起. り 急 速 に 降 下 し,1時. 成 績. Sal, typhi. 始 電 間.

(6) 502. 山. 半 で(+)15m.v.と 40m.v.と. な り,2時. 間 に 一 時(+). な る も,又,3時. り後 徐 々 に 上 昇,5時. 起 始 電 位(+)350m.v.よ. (+)40m.v.と. な る も,又. 半 に は(‑)30m.v.と. 示. 後 上 昇 し,2時. 度 も. 間半 に. 急 下 降 し,3時. あ り,菌. さ れ て 居 る.10‑5M濃. 間. の増 殖 は阻 止. 度 は,起. り 下 降 し,3時. 始 電 位(+). 間 で(一)55m.v.. 徐 々 に 上 昇 し,5時. 間(‑)30m.v.. と な り,菌. の 増 殖 は や ゝ阻 止 さ れ て 居 る. 度 は 対 照 と 同 様 に,3時. 間 半(‑)150m.v.ま 昇 し,5時. 間 か ら3時. で 下 降 し,後. 間(‑)100m.v.と. 場 合,. な り菌 の 増 殖. (+)360m.v.よ (+)50m.v.と 65m.v.と (+)20m.v.と 45m.v.を. 10‑3M濃. 度 は 起始 電 位. な 軌徐 々 に 上 昇,2時. な る も 又 上 昇,5時. 間で 間(+). 徐 徐 に 下 降 し,3時. 間 半. 間 で(+). 示 し菌 の 増 殖 は 停 止 し て 居 る. 第7図. Sta.. 間(+)50m.v.と. Ghloromycetin添. aureus. な る も以 後. 間 で(+)15m.v.を. も 起 始 電 位(+)360m.v.よ. 示 し. り1時. 速 に 下 降(‑)15m.v.,後 半(+)5m.v.以. 度. 間 まで急. 徐 々 に 上 昇,2時. 間. 後 徐 徐 に 下 降 し,5時. (‑)25m.v.と. な つ て 居 り,菌. 阻 止 さ れ て 居 る.10‑6M濃 照 と 並 び,起. 降 し,5時. 間で. の増殖 はや や. 度 はSt.. aureusと. 始 電 位(+)360m.v.. よ り急 速 に 降 下 し て,3時. 間 頃 よ り徐 徐 に 下. 間 で(‑)135m.v.と. な り,菌. の. 増 殖 は 殆 ん ど 阻 止 さ れ て 居 な い. 3.. Chloromycetin添. St. aureusの. り急 速 に 下 降 し,1時. な り,又. な り,. 徐 々に上. は 殆 ん ど 阻 止 さ れ て 居 な い. S. typhiの. 間 で(+)15m.v,と. 徐 徐 に 下 降,5時. 同 様,対. に な り,後. 10‑6M濃. り急. 菌 の 増 殖 は や ゝ阻 止 さ れ て 居 る.10‑5M濃. な り 徐 々 に 上 昇 し,5. 時 間(‑)15m.v.で. 370m.v.よ. 速 に 下 降 し,1時. り 急 速 に 下 降,1時. な り急 に 上 昇 し,2時. 度 は 起 始 電 位(+)355m.v.よ. な. 間 で(+)15m.v.を 10‑4M濃. 穰. 10‑4M濃. 間 半0m.v.と. し 菌 の 増 殖 は 阻 止 さ れ て 居 る.. 間 半 でOm.v.と. 本. 場 合,10‑3M濃. (+)360m.v.で. な り,後. 間 で(‑)5m.v.と. 徐 々 に 上 昇 し,5時. 度 は 起 始 電 位(+)350m.v.. よ り 急 速 に 下 降,1時 上 昇,2時 の. 間 半 で. な り菌 の 増 殖 は 阻 止 され. て 居 る.10‑4M濃. 加. 度 は 起 始 電 位. 急 速 に 下 降,1時. (‑)65m.v.と. り,又. 加 の 成 績(第7図). 成. 間 で(‑)50m.v.と 間 で(‑)15m.v.と. 績. Sal. typhi. な な る も.

(7) 電 位測定に よる抗 菌性物質の検定法 又 下 降 し,5時. 間 で(‑)95m.v.と. な り,菌. の 増 殖 は や ゝ阻 止 さ れ て 居 る. 10‑5M, 濃 度 は,対. 照 と 並 び,起. 後 徐 々に 下 降,1時. 10‑6M. 間 ま で 急 速 に 下 降 し,後. 降,5時. 間 で は10‑5M濃. 10‑6M濃. 度 は(‑)115m.v.と. 示 し て 居 り,菌. 徐 々に下. 度 は(‑)140m.v., な り,菌. 於 て は,起. 大 体(+)360m.v.を. の増. 始電 位 は各 濃 度共 に 度は 急. 間 半 で(+)10m.v.と. 後 徐 々 に 上 昇 し,5時. な り,. 間 で(+)30m.v.と. り菌 の 増 殖 は 停 止 し て 居 る. め 急 速 に 下 降,30分. な. 10‑1M濃. な り,. 第8図. St. aureusの. 場 合,. (+)370m.v.よ 230m.v.と 降,4時. な り,後. Aureomycin添. り 下 降 し,1時. 間 で(+). 安 定 す る も3時. な り,菌. 330m.v.よ 60m.v.と. 間 で又下. で(+)40m.v.を. 示 し,. 線 と 並 び,5時. 居 る.10‑3M濃. 度 は2時. (‑)30m.v.,後. 徐 々 に 下 降,5時. 95m.v.と. 間. 示 し菌 の 増 殖 は 阻 止 され て 間 頃 まで 急 速 に 下 降 間 で(‑). な り 菌 の 増 殖 は や ゝ阻 止 さ れ て 居. る.. 4.. Aureomycin添. 加. の 成. 加 の 成 績(第8図). 績. 度 も10‑4M濃. 度 と 同 様,1時. (+)25m.v.を. 示 し て 居 り,両. 殖 は 停 止 し て 居 る.10‑6M濃. の増 殖 は完. で 下 降(‑)5m.v.と. 後 徐 々 に 下 降 し,5時 示 し て 居 り,又,10‑5M濃. 昇 し(+)5m.v.と. 度 は2時. な り,後. 間 で. 者 共 に菌 の増. な り,3時. り又 も 徐々 各 に 上 昇 し,5時. 間 で(+). 間 半 で(+). な り 後 徐 々 に 下 降 し,5時. 示 し,5時. 度 は 起 始 電 位(+). り急 速 に 下 降 し,1時 な り,以. 度 の 電 位‑曲. 45m.v.と. 全 に 停 止 し菌 の 呼 吸 も殆 ん ど停 止 し て 居 る よ 10‑4M濃. 度 と 殆 ん ど 同 様,2. Sal. typhi. 度 は 起始電 位. 間 で は(+)140m.v.を. う に 思 は れ る.. 後10‑1M濃. aureus. 10‑3M濃. 間 で は(+)145m.v.と. 度 も10‑4M濃. 度 は始. で(‑)20m.v.と. Sta.. 間 で(‑)20m.v.を. の 増 殖 は 阻 止 さ れ て 居 る.. で(‑)35m.v.を. 示 し, 10‑3M濃. 速 に 下 降 し,1時. 10ー5M濃. なる. 時 間 ま で 急 速 に 下 降(‑)45m..を. 殖 は 殆 ん ど 阻 止 さ れ て 居 な い. S. typhiに. 間 半(‑)45m.v.と. も 後 徐 々 に 上 昇 し,5時. 始 電 位(+)350m.v.. よ り1時. 503. 間半 ま. 間 目一 時 上. 下 降3時. 間半 よ. 間 で は(+)10m.v.. と な り 菌 の 増 殖 は や は り阻 止 さ れ て 居 る. 間. S. typhiの (+)335m.v.よ. 場 合 .10‑3M濃. 度 は 起 始 電 位. り 下 降 し,2時. 間 で(+).

(8) 504. 山. 180m.v.と. な り,以. で(+)260m.v.を. 後 徐 徐 に 上 昇 し,5時 示 し,菌. 停 止 し た 電 位‑曲. 10‑4M濃. 度 は1時. 間 ま で 急 速 に 下 降(+)40m.v.を. 示 し,後. 安 定 し て,5時. 1時 間 半(+)10m.v.ま. 10‑5M濃. 間 で 間 な り 示 し,. 菌 の 増 殖 は 阻 止 さ れ て 居 る.10‑4M濃. 3時 間(+)7m.v.,後. 度は起. 間 まで 急 速 に. な り 後 徐 々 に 上 昇, 急 に 下 降,3時. 間 半. (‑)35m.v.と. な る も 以 後 安 定 し,5時. (‑)20m.v.と. な り菌 の 増 殖 は 阻 止 され て 居. る.. 10‑5M濃. 10m.v.よ. 度 は1時. 間. 間 半 ま で 下 り,(‑). り一 時 上 昇,2時. な る も 又 徐 々 に 下 降 し,5時. 加. の. 加 の 成 績(第9図). 成 績. 速 に 下 降 し,2時. 間(‑)47m.v.. 間 で(‑)75m.v.を. 後 徐 々 に 上 昇,3時. 示 し,菌 S.. typhiに. 於 て は,. 間(‑)70m.v.を. 10‑3M濃. 度 は 起始電. り急 速 に 下 降 し,1時. 半 で(+)100m.v.と. な り,2時. 下 降(+)50m.v.と. な る も,又. 5時 間 で(+)110m.v.と. (+)370m.v.よ. 間半 で 急 に. な り,菌. の増 殖 は. 度 は 起始電 位. り急 速 に 下 降,2時 な り,以. 間 で(+). 後(+)25m.v.を. 間 で(+)10m.v.と. は 阻 止 さ れ て 居 る.. 10‑6M濃. (+)360m.v.よ. 10‑5M濃. 間. 徐々 に 上 昇 し,. 完 全 に 停 止 し て 居 る.10‑1M濃. を 示 し 菌 の 増 殖 は や ゝ 阻 止 さ れ て 居 る. り急. なる. の 増 殖 は 殆 ん ど 阻 止 さ れ て 居 な い.. 位(+)370m.v.よ. て,5時. 示 し,. 間 半(‑)45m.v.と. も 又 も 徐 々 に 下 降 し,5時. 30m.v.と. 間(+)5m.v.と. 度 は 起 始 電 位(+)355m.v.よ. 度 は 起 始 電 位. Sal. typhi. 間 で は(+)35m.v.を. り1時. 間. の増 殖 は や ゝ阻 止. 場 合,10‑3M濃. aureus. 間 で は(‑)10m.v.と. 下 降 し,(‑)20m.v.と. st. aureusの. Terramycin添. 徐々 に 上 昇,2時. 始 電 位(+)330m.v.よ. 間 目 又 も 下 降 し,5時 示 し,菌. 5. Terramycin添. な り菌 の. り 急 速 に 下 降 し,1時 な り,後. な り. さ れ て 居 る.. で 急 速 に 下 降 し,以. Sta.. 又 上 昇 し,5時. 2時 間 ま で 急 速 に 下 降(‑)35m.v.と. 度は. 度 は. 第9図. よ り又 下 降,4時. 増 殖 は や は り阻 止 さ れ て 居 る.10‑6M濃. で(‑)35m.v.を 示. 間(+)20m.v.と. (+)20m.v.と. 穰. 後 徐々 に 上 昇,4時. 間(+)55m.v.を. し 菌 の 増 殖 は 阻 止 さ れ て 居 る.. (+)350m.v.よ. 間. の 増殖 は 完 全 に. 線 を 示 し て 居 る.. 後 安 定 し て,5時. 本. 上下し. な り,菌. の増 殖. 度 は 起 始 電位. り 急 速 に 下 降,2時. 間半.

(9) 電位測定 に よる抗菌性物質 の検定法 (‑)20m.v.,後(‑)20m.v.を. 上 下 し て5時. 間(‑)30m.v.を され て 居. 示 し,菌 る.. 340m.v.よ. 10‑6M濃. の 電 位‑曲. 線 を 示 し,5時. を 示 し,菌. の 増 殖 は や や阻 止 さ れ て 居 る .. の 増 殖 は や ゝ阻 止. 問 で(‑)20m. 間 半 よ り10‑5M濃. 6.. .v .. 度 と大 体 同 一. 第10図. Sulfanilamide添. Sulfadiazineを. Sulfadiazine添. 加. の 成. 場 合,. (+)365m.v.よ. 10‑2M濃. 績. 度 は起 始電 位. 示 し,後0m.v.を. 5時 間(+)5m.v.を. 上 下 し て,. 10‑3M,. 10‑4M,. 10‑5M濃. 度 に 全 全 関 聯 の な い 電 位‑曲. 10‑3M,. 間 で. 示 し 菌 の 増 殖 は や ゝ阻. 止 さ れ て 居 る. は,濃. Sal. typhi. り 急 速 に 下 降 し,1時. (+)15m.v.を. 10‑4M濃. 度 は 対 照 の 電 位‑曲. 低 い 場 合 も あ り,菌. 度. 線 を 示 し, 線 よ り. の 増 殖 は 殆 ん ど阻 止 され. て 居 な い と 考 え ら れ る. S, typhiに. 於 て も,. よ り 高 い 電 位‑曲. 線 を 示 し,菌. 阻 止 さ れ た か に 見 え る も, 10‑5M濃. 度 は,菌. ら れ る 電 位‑曲 Sulfamineを St. aureusの (+)355 m.v.よ を 示 し,後. し て 菌 の 増 殖 は や ゝ 阻 止 さ れ て 居 る. 濃 度 も 同 様(‑)25m.v.の. 止 さ れ て 居 る. 電 位‑曲. S.typhiに (+)385m.v.よ. 示 し,後. 度 は,殆. 示 し,菌 し, 10‑3M,. 場 合,. 之 に 相 応 し た 電 位‑曲. 安 定 し,5時. 間(‑)15m.v.. 間(‑)15m.v.を. 度 は 起始電 位 間(‑) 間. の 増 殖 は や ゝ阻 止 さ 10‑4M,. 10‑5M濃. 線 を 示 さ ず 対 照 め 夫 れ に 近 い. 以 上 よ りSulfadiazine及. 度 は起 始電 位. の増. ん ど 菌 の 増 殖 が 阻 止 さ れ た 電 位‑曲. に10‑2M濃. り急 に 下 り,1時. は 同 一 と な り,菌. 徐々 に 上 昇 し て,5時. 用 い た 場 合(第11図) 10‑2M濃. 度は 対照 の. り急 速 に 下 り,2時. れ て 居 る.而. 線 は 示 し て居 な い .. 10‑5M濃. 於 て も,10‑2M濃. (‑)25m.v.を. の 増 殖 が 阻 止 さ れ た と考 え. 10‑4M,. 殖 は 殆 ん ど 阻 止 さ れ な い.. の増 殖 が や ゝ 10‑4M,. 示 し 菌 の 増 殖 は や ゝ阻. 線 に 近 く,又. 度 が や ゝ対 照. 10‑3M,. 10‑3M. あ た り に 安 定 し,. 5時 間(‑)35m.v.を. 45m.v.を. 10‑2M濃. 加 の成績. 用 い た 場 合(第10図). Sta. aureus. St. aureusの. 間 で(‑)45m.v.. 度 は 起 始 電 位(+). り 急 速 に 下 降,1時. を 示 し,2時. 505. 度 で は,や. びSulfamine共 ゝ 菌 の 増 殖 を 阻 止 し,. 線 が 見 ら れ る.而. し,. よ り 薄 い 濃 度 に 於 て は 殆 ん ど菌 の 増 殖 は 阻 止 示. さ れ な い..

(10) 506. 山. 第11図. 本. Sta.. Sulfamine添. 穰. 加. の 成. 績. Sal. typhi. aureus. に 順 じて 電 位 の 下 降 を 阻 止 す る こ とを 認 め た.. Ⅳ 以 上St.. 総 括及び考按. aureus及. びS.. typhiを. 用 い て. Penicillin,. Streptomycin,. Chloromycetin,. Aureomycin,. Terramycin,. Sulfanilamideの. 発 育 阻 止 と 発 育 電 位‑時. 様 に,対. 照 培 養 に 於 て は,電. た もの は,始 め 起 始 電 位 か ら一 時 下 降 し て 来. 気 的培 養 に於. るが,多. 線 は,第1及. 示 す 如 く,好. 気 的 培 養 の 夫 れ に 比 較 し て,一. び 第4図. い.而. に. し て,各. 間‑曲. くは,1時. 間 乃 至2時. 線 の下 降 が 停 止 し,略. す が,又,稍. る と,同. 即 ち電 位 の 高 い もの 程,菌. 気 的 の 方が. 嫌 気 的 よ り も や ゝ菌 の 増 殖 が 多 い.即 気 的 培 養 に 於 て は,同. ち,上 一条. 件 で 発 足 し た 好 気 的 培 養 の も の に 比 較 して 増 位 は 低 い,こ. の事. 々同一電 位 を示 して,. 各 々に就 て菌 の増 殖程 度 を光電 比 色計 で 測定 し て 見 る と,電 位‑曲. 一 条 件 の も の に 於 て,好. 間 で電 位‑時. 々上 昇 す る場 合 も あ る.而. 々 の増 殖 した菌 量を光電 比色 計 で 測定 して見. 殖 菌 量 は 少 い に 拘 ら ず,電. 線 を 描 くに反. し,発 育 阻 止 効 力 を 示 す 濃 度 の 薬 剤 を 添 加 し. 間‑曲. 記 の 事 実 か ら,嫌. 位 は時 間 の経過. と共 に 低 下 し,一 定 の電 位‑曲. け る 電 位‑時. ら50m.v.低. Ⅰ編 に 述 べ た 好 気 的 培 養 の場 合 と同. 線 と の 関 係 を,. 間‑曲. 嫌 気 的 状 態 で 追 究 し て 見 た.嫌. 般 に20m.v.か. 即 ち,第. 線 と平 衝 関 係 を 現 し, の 増 殖 率 は 少 い.. 尚,有 効 濃 度 以 下 の もの は 対 照 と同 様 の 電 位 ‑曲 線 を 描 き ,菌 の 増 殖 も対 照 と略々 同 様 で あ る. Mule6)に. よ れ ば, St. aureusは. 酸 素 の供 給. は 酸 素 の 存 在 下 に 於 て は,電. 位 は 上昇す る こ. が 充 分 な 状 態 で はPenicillinに. と を 示 す も の で あ り,又,好. 気 的 培 養 と嫌 気. 水 素 気 流 中 に て は 殆 ん ど感 受 性 を もつ て い な. 的 培 養 と に 於 て,菌. の 代謝 過程 に相 違 の あ る. の 発 育 電 位‑時 と,各. 間‑曲. れ らの抗 菌 性物 質. 線 に 及ぼ す 影 響 を見 る. 薬 剤 の 効 力 に 相 応 し,而. も,そ. St. aureusが. 還 元 電 位 は,対. こ と を 示 し て 居 る も の と 考 え ら れ る. 嫌 気 的 培 養 に 於 け る,こ. い.又,. の濃 度. 感 じ易 い が,. 移殖 され た培 地 の酸化. 数 増 殖 期 に 低 下 し て ゆ く もの. で あ る が, Penicillinが 加 は る と こ の 低 下 が 弱 くな る と言 つ て 居 る7)即. ち, Muleの. 成績. は 著 者 の 実 験 と可 成 り大 き な 差 違 が あ る..

(11) 電位測定に よる抗菌性物質の検定法 Aureomycinで 濃 度 はSt.. は 第8図. aureus,. 降 下 を 阻 止 し,菌 る 点 か ら,菌. に 示 す 如 く, 10‑3M. S. typhi共. 濃 度 が や ゝ菌 の 増 殖 を 阻 止 し て 居 る と考 え ら. に 高 度 に電 位. の増 殖 を 完 全 に停 止 して居. は 殆 ん ど死 菌 状 態 とな つ て 居 る. と考 え ら れ る こ と,好. 気 的 培 養 に 於 け る と同. 様 で あ る.. れ る の み で,こ 様,又. は 第10及. 如 く, Sulfadiazine,. び11図. Sulfamine共. に見 る に10‑2M. 第12図. Sta.. り50m.v.か. は し, St. aureus,. そ こ で,好. 気 的 の 場 合 と 同 様,接. も 同 様,. St. aureusに. に 第13図. に. 添 加 した場 合 に於 て. 度 が 菌 の増 殖 を阻 止 して 上 よ り や は りSulfanil. れ に して も. 線 の 測 定 に よ つ て,そ. の効 力 を. 知 る こ とが 出 来 る.. 照 よ. 加 の 成 績. を,横. 軸 に 薬 物 の 濃 度 を とつ た. に 求 め,そ. 14図)St. はS.. typhiに. 対 す るこ. づPenicillinに. aureusに. typhiに. typhiに. 濃 度 はSt.. 対 す る10‑3M濃. 就 て 見 る と,(第 10‑5M濃. 度 に効 果 が 匹. 対 し よ り 有 効 で あ り,. aureusに. typhiに. 対 す る10‑4M濃. よ り 有 効 で あ り,. aureusに. 対 す る10‑3M濃. 敵 す る 効 力 を 有 す る.. に,第. は 両 菌 種 に 対 し 同 じ 効 果 を 有 す る が,. 間乃至. 10‑5M 度 に匹. Chloromycetin(第16. れ らの抗菌 性 物 質 の効 果 を比 較 して見 るため Ⅰ編 と 同 様 の 理 由 に よ り,2時. 度. Streptomycin(第15図). 敵 す る 効 力 を 有 す る.. 濃 度 はSt.. 「グ ラ フ 」 上. 強 く作 用 し,. 敵 す る と 考 え ら れ る. はS.. 軸 に電 位. れ らの 点 を 結 ん で 得 た 曲 線 に 就 て. 観 察 し た.先. 図)はS. びS.. 度 で は,対. れ ら の 値 を,縦. の 増殖 を阻 止す るに は大 量 を必. aureus及. び10‑3M濃. の 平 均 値 を 求 め,こ. 要 と す る も の と 考 え ら れ る が,何. 次 にSt,. 10‑2M及. に や ゝ菌 の 増 殖. S. typhiに. 発 育 電 位‑曲. 合 は,. 添 加 した 場. 間 の 各 濃 度 に 於 け る電 位. 濃 度 で は や や菌 の 増 殖 を 阻 止 し,. amideは,菌. 12図 に 見 る 如 く, Sulfadiazineを. 5時 間 目 ま で の3時. び10‑3M. 居 る と 考 え ら れ る.以. 減 じ て 実 験 を 行 つ て 見 た と こ ろ,第. 線を現. 対 し10‑2M及. 対 し て は,10‑2M濃. 種 菌 量 を. Sal. typhi. を 阻 止 し て 居 る と 考 え ら れ る.次 示 す 如 く, Sulfamineを. 線 を示 し. ん ど 菌 の 増 殖 は 阻 止 さ れ て 居 な い.. Sulfadiazine添. い 電 位‑曲. S. typhi共. 照 と同. て 居 り,殆. aureus. ら75m.v.高. れ よ り低 濃 度 で は,対. は 対 照 よ り 稍 稍 低 い 電 位‑曲. 5mgに. Sulfanilamideで. 507. 10‑5M 度 に匹. Aureomycin(第17図) 10‑4M.

(12) 508. 山. 第13図. Sta.. 本. Sulfamine添. . aureus .. の. 成. 績. Sal, typhi. 第15図. Penicillin. ‑Sal. 加. aureus. 第14図. ‑Sta. 穰. typhi. 第16図. Streptomycin. Chloromycetine. ‑Sta. .. aureus. ‑Sta. .. aureus. ‑Sal. .. typhi. ‑Sal. .. typhi.

(13) 電位測定 に よる抗菌性物質 の検定法 濃 度 の あ た り ま で は,. S. typhiに. 用 を 示 し て 居 る 様 で あ る. 図)はS.. typhiに. 度 以 上 の 効 力 を 示 し, 10‑6M濃. Terramycin(第18. よ り 有 効 で,. り高 濃 度 で はSt.. や ゝ強 い作. aureusに. 10‑4M濃. 更 にS.. 対 す る10‑3M濃. を5mgと. .. 高 い電 位‑曲. .. 就 て は,接. し た た め,対. ‑Sta ‑Sal. typhi. 線 を 示 し て 居 る が,両. 菌種 に対. . .. 第19図 Sulfadiazine. aureus. ‑Sta.. typhi. ‑Sal. 3). Aureomycinは. aureus .. typhi. 嫌 気 的培 養 液 内に て も. 濃 度 の 濃 い も の に 於 て は,電. し略 々 同 じ 効 果 を 示 した.. 種菌 量. 照 も上 記 の 場 合 よ り. Terramycin. aureua. 度 に 到 っ て,. 対 し よ り 有 効 に 作 用 し て 居 る.. 第18図. Aureomycin. ‑Sal. typhiに. Sulfadiazine(第19図)に. 度 よ. 第17図. ‑Sta. 509. 位 は高 度 に上 昇. し て 殺 菌 性 の あ る こ と を 示 す.. Ⅴ 1). 結. 論. 流 動 パ ラ フ ィ ン 重 層 に よ る嫌 気 的 ペ プ. トン 水 培 養 液 内 に 於 け る, typhiの. 4). 発 育 電 位‑時. 養 の 場 合 に 比 し,20乃. 間‑曲. St. aureus及 線 は,好. 至50m.v.低. びS. 気的培. い電 位 を. け る と 同 様,菌. 好 気 的 培 養 液 内 に於. の増 殖 を 阻止 す るには大 量 を. 必 要 と す る. 5). 嫌 気 的 培 養 液 内 の 電 位 測 定 に よ り, St.. aureus,. S. typhiに. 対 す る抗 菌 性 物 質 の 効 果. の 比 較 を 行 う こ と が 出 来 る.薬. 示 す. 2). Sulfanilamideは. 嫌 気 的 培 養 液 内 に 於 て も好 気 的 培 養 液. 内 の 場 合 と同 様,電 Streptomycin, Terramycin,. 位 測 定 に よ りPenicillin,. Chloromycetin, Sulfadiazine,. Aureomycin, Sulfamine等. 種 に 対 す る 態 度 は,好. 気 的 培 養 の 場 合 と同 様. で あ る. 本 論 文 の要 旨は,1953年11月. の. 抗 菌 性 物 質 の 効 果 を 検 定 す る こ とが 出 来 る.. 剤 効 果 の 両菌. 第6回. 会 中国 四 国 支 部 総 会 に 於 て,又,1954年4月 日本 細 菌 学 会 総 会 で 報 告 した.. 日本細 菌 学 第27回.

(14) 510. 山. 終 りに 臨 み,終 頂 い た,恩. 本. 始 御 懇 篤 な る御 指 導 と御 校 閲 と を. 野 両 氏 に 厚 く御. 參 1). Gillepsie,. 2). Hewitt,. L.. F.,. 3). Knicht,. B.. C.. 4). R.. W.. H., Bioch. J.. G.,. Soil.. Sci.,. Bioch.. Wm., 56,. and. 255〜263,. Jordan, 1935.. 尚,本. 研 究 は 文 部 省 科 学 研 究 費 の補 助 を受 け た.. 厚 く感 謝 す る次 第 で あ り ます.. 文. 献. 199,. 1920.. and. 24,. 512,. 1930.. 〜262,. Jour.,. 24,. 1075,. Jour.,. 9,. 考. 1930.. Burrows, Dis.,. 礼 申 上 ます.. 師 村 上 教 授 に 深 甚 の 謝 意 を 表 し,併 せ て,. 種々 御 協 力 を し て 下 さ つ た 寺 坂,平. 1496,. 穰. E.. O.,. Burrows,. Jour.. Inf. Wm.,. Jordan,. E.. O.,. Jour.. Dis.,. 58,. 259. 1936.. 5). 福 見 秀 雄,昭. 和17年,実. 6). Mule.,. hygiene,. 7). Drouhet., 168,. Inf.. Ann.. 1949.. Kepes.,. 験 医 学 雑 誌, 56,. Ann.. 298, Inst.. 26,. 1, 18.. 1946. Pasteur,. 76,.

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