タルセバ錠 25, 100, 150 mg
（エルロチニブ塩酸塩）
第
2部 資料概要
2.6.3 薬理試験概要表
中外製薬株式会社
タルセバ錠 2.6.3 薬理試験概要表 Page1
略語一覧表
略語 英語名 和名
ATP adenosine triphosphate アデノシン三リン酸 APD50 action potential duration at 50%
repolarization 50%活動電位持続時間 APD90 action potential duration at 90%
repolarization 90%活動電位持続時間 bFGF basic fibroblast growth factor 塩基性線維芽細胞増殖因子 BrdU 5-bromodeoxyuridine 5-ブロモデオキシウリジン CHO 細胞 chinese hamster ovary 細胞 チャイニーズハムスター卵巣細胞
c-src c:cellular src: sarcoma 癌遺伝子c-src
DNA deoxyribonucleic acid デオキシリボ核酸 ED50 50% effective dose 50%有効量
EGF epidermal growth factor 上皮増殖因子 EGFR epidermal growth factor receptor 上皮増殖因子受容体 EGFR-TK epidermal growth factor
receptor-tyrosine kinase
上皮増殖因子受容体チロシンキナー ゼ
FRE cells Fischer rat embryo cells FRE 細胞
G1期 gap phase 1 –
GLP good laboratory practice –
HEC hydroxyethyl cellulose ハイドロキシエチルセルロース hERG human ether-a-go-go-related gene –
IC20 20% inhibitory concentration
concentration required for 20% inhibition
20%阻害濃度 IC50 50% inhibitory concentration
concentration required for 50% inhibition
50%阻害濃度
IGF-I insulin-like growth factor-I I 型インスリン様増殖因子 IGF-IR insulin-like growth factor-I receptor I 型インスリン様増殖因子受容体 IR insulin receptor インスリン受容体
IRS-1 insulin receptor substrate-1 インスリン受容体基質1
i.v. intravenous 静脈内
MC methylcellulose メチルセルロース
MTD maximal tolerated dose 最大耐用量
N/A – 該当せず
PCO2 – 動脈血炭酸ガス分圧
PDGF platelet derived growth factor 血小板由来増殖因子
p.o. per os 経口
PO2 – 動脈血酸素分圧
pRB retinoblastoma gene protein 網膜芽細胞腫蛋白質
RI radioisotope 放射性同位体
S 期 synthetic phase – SHC 蛋白 src homology and collagen protein –
SD Sprague-Dawley (rat) SD（系）ラット TUNEL 法 terminal deoxynucleotidyl transferase
dUTP nick end labeling
–
v-abl v: viral abl: Abelson 癌遺伝子v-abl
Vmax maximum upstroke velocity 最大立ち上がり速度
目次
頁 2.6.3 薬理試験概要表...4 2.6.3.1 薬理試験一覧表...4 2.6.3.2 効力を裏付ける試験...12 2.6.3.3 安全性薬理試験（一般薬理試験を含む）...22 2.6.3.4 薬力学的薬物相互作用試験...26 タルセバ錠 2.6.3 薬理試験概要表 Page3
2.6.3
薬理試験概要表
2.6.3.1
薬理試験一覧表
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 実施施設 Study No 書類番号 効力を裏付ける試験 全長型EGFR-TK に対する選択的阻害作用 精製全長型ヒト EGFR in vitro I 0176 4.2.1.1-1 全長型EGFR-TK に対するエルロチニブ のATP 競合的な阻害作用 精製全長型ヒト EGFR in vitro I 0176 4.2.1.1-1 細胞内領域のEGFR-TK に対する選択的 阻害作用 組み換え型ヒト EGFR 細胞内領 域TK ドメイン in vitro I 0176 4.2.1.1-1 EGF で誘導される細胞増殖に対する選択 的抑制作用 FRE（Fisher rat embryo）細胞 in vitro I 0176 4.2.1.1-1 EGFR 発現ヒト癌細胞に対する in vitro 増 殖抑制作用 DiFi 大腸癌細胞 株及びHN5頭 頸部癌細胞株 in vitro I 0176 4.2.1.1-1 タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page4
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 実施施設 Study No 書類番号 EGFR 発現ヒト癌細胞株移植ヌードマウ スにおける連日投与でのin vivo 腫瘍増殖 抑制作用 HN5頭頸部癌及 びA431外陰部 癌細胞株移植雌 性ヌードマウス 20日間連日経口投与， 0～100 mg/kg/日，又 は0～92 mg/kg/日* * 本試験のみエルロチ ニブ遊離塩基を使用。 その他の試験ではエル ロチニブ塩酸塩を使 用。 M 0223 4.2.1.1-2 ヒト癌細胞株移植ヌードマウスにおける in vivo 併用効果（1）：ゲムシタビン及び シスプラチンとの併用効果 (a) MTD での併用試験 A549非小細胞肺 癌細胞株移植雌 性ヌードマウス ●ゲムシタビンとの併 用：エルロチニブ塩酸 塩100 mg/kg/day（連 日経口投与）/ ゲムシ タビン120 mg/kg（3日 ごとに3週間，計6回腹 腔内投与）。 ●シスプラチンとの併 用：エルロチニブ塩酸 塩100 mg/kg/day（連 日経口投与）/シスプ ラチン6 mg/kg（6日ご とに2週間，計3回腹腔 内投与）。 M20 314 ( 1012627) 4.2.1.1-3 タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
5
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 実施施設 Study No 書類番号 ヒト癌細胞株移植ヌードマウスにおける in vivo 併用効果（1）：ゲムシタビン及び シスプラチンとの併用効果 (b) 1/4 MTD での併用試験 A549非小細胞肺 癌細胞株移植雌 性ヌードマウス ●ゲムシタビンとの併 用：エルロチニブ塩酸 塩25 mg/kg/day（連日 経口投与）/ ゲムシタ ビン30 mg/kg（3日ご とに3週間，計6回腹腔 内投与）。 ●シスプラチンとの併 用：エルロチニブ塩酸 塩25 mg/kg（連日経口 投与）/ シスプラチン 1.5 mg/kg（6日ごとに 2週間，計3回腹腔内投 与）。 M20 314 ( 1012627) 4.2.1.1-3 タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
6
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 実施施設 Study No 書類番号 ヒト癌細胞株移植ヌードマウスにおける in vivo 併用効果（2）：シスプラチン，ゲ ムシタビン及びパクリタキセルとの併用 効果 H460非小細胞 肺癌，GEO 結 腸癌，Calu-6非 小細胞肺癌， A431外陰部 癌，CFPac-1膵 臓癌，及びKB 類表皮癌細胞株 移植雌性ヌード マウス ●シスプラチンとの併 用試験：エルロチニブ 塩酸塩（100，150 mg/kg p.o.）/ シスプラ チン（9 mg/kg i.v.）。 ●ゲムシタビンとの併 用試験：エルロチニブ 塩酸塩（100，150 mg/kg p.o.）/ ゲムシタ ビン（100，120，400 mg/kg i.v.）。 ●パクリタキセルとの 併用試験：エルロチニ ブ塩酸塩（150 mg/kg p.o.）/ パクリタキセル （60 mg/kg i.v.）。 M20 158 4.2.1.1-4 In vitro における EGFR 自己リン酸化阻害 作用 HN5頭頸部癌細 胞株，DiFi 大腸 癌細胞株， MDA-MB-468乳 癌細胞株 in vitro I 0176 4.2.1.1-1 EGFR アダプター蛋白 SHC のリン酸化に 対する選択的阻害作用 HN5頭頸部癌細 胞株 in vitro I 0176 4.2.1.1-1 タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
7
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 実施施設 Study No 書類番号 In vivo における EGFR 自己リン酸化阻害 作用 HN5頭頸部癌細 胞株移植雌性 ヌードマウス 2.9～92 mg/kg 単回経 口投与 M 0223 4.2.1.1-2 In vitro における細胞周期停止作用 HN5頭頸部癌細 胞株及びDiFi 大腸癌細胞株 in vitro I 0176 4.2.1.1-1 In vivo における細胞周期停止作用 H460非小細胞 肺癌，A549非 小細胞肺癌， SW48結腸癌， GEO 結腸癌， 及びKB 類表皮 癌細胞株移植雌 性ヌードマウス 150 mg/kg 単回経口投 与，10 mg/kg BrdU 腹 腔内投与 M20 116 4.2.1.1-5 アポトーシス誘導作用 DiFi 大腸癌細胞 株 in vitro I 0176 4.2.1.1-1 副次的薬理試験 各種受容体に対するin vitro 結合試験 マウス，ラッ ト，ニワトリ， ブタ，ウシ，モ ルモット，及び ヒト由来細胞よ り調製 in vitro I 0031 4.2.1.2-1 タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
8
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 実施施設 Study No 書類番号 安全性薬理試験（一般薬理試験を含む） 中枢神経系に及ぼす影響 マウスの一般症状に対する影響 （Irwin の変法） CD-1マウス 0，1，3.2，10，32， 100，320，1000 mg/kg 経口投与 I 0031 4.2.1.2-1 ラットの一般症状に対する影響（機能観 察試験），GLP 試験 CD（SD）ラッ ト 0，50，225，1000 mg/kg 経口投与 R20 124 ( 9001) 4.2.1.3-1 マウスの誘発性痙攣に対する影響 CD-1マウス 0，10，50，100 mg/kg 経口投与（85 mg/kg pentylenetetrazol 腹腔 内投与） I 0007 4.2.1.3-2 心血管系に及ぼす影響 ラットの血圧，心拍数及び血液ガスに対 する影響 CD（SD）ラッ ト 0，50 mg/kg 経口投与 I 0007 4.2.1.3-2 イヌの血圧，心拍数，心拍出量，総末梢 血管抵抗，及び心電図に対する影響 イヌ（雑種） 0，50，100 mg/kg 経 口投与 I 0007 4.2.1.3-2 イヌの血圧，心拍数及び心電図に対する 影響（テレメトリー試験），GLP 試験 イヌ（ビーグ ル） 0，10，20，50，100 mg/kg 経口投与 D20 142 ( 1007851) 4.2.1.3-3 タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
9
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 実施施設 Study No 書類番号 hERG チャネルに対する影響（1）： hERG チャネル発現 CHO 細胞による試験 組み換え型 hERG チャネル 発現CHO 細胞 in vitro V20 141 ( 1007195) 4.2.1.3-4 hERG チャネルに対する影響（2）： hERG チャネル発現 HEK293細胞による 試験 組み換え型 hERG チャネル 発現HEK293細 胞 in vitro V20 140 ( 1006584) 4.2.1.3-5 ウサギの摘出プルキンエ線維に対する影 響，GLP 試験 ウサギプルキン エ線維 in vitro V20 151 ( 1006465) 4.2.1.3-6 呼吸系に及ぼす影響 ラットの換気量，呼吸数に対する影響， GLP 試験 CD（SD）ラッ ト 0，50，225，1000 mg/kg 経口投与 R20 208 ( 477) 4.2.1.3-7 腎/泌尿器系に及ぼす影響 ラットの腎機能に対する影響 CD（SD）ラッ ト 0，5，10，50 mg/kg 経口投与 I 0007 4.2.1.3-2 胃腸管系に及ぼす影響 ラットの胃腸管内輸送能に対する影響 （1）：経口投与試験 CD（SD）ラッ ト 0，5，10，50 mg/kg + 0.5，1，5 mg/kg（追 加試験）経口投与 I 0007 4.2.1.3-2 ラットの胃腸管内輸送能に対する影響 （2）：静脈内投与試験 CD（SD）ラッ ト 0，2.5，5，10 mg/kg + 0.5，1，5 mg/kg（追 加試験）静脈内投与 I 0007 4.2.1.3-2 タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
10
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 実施施設 Study No 書類番号 自律神経系及び平滑筋/心筋に及ぼす影響 摘出平滑筋及び摘出心筋に対する影響 摘出モルモット 胸部大動脈，摘 出モルモット右 心房，摘出モル モット回腸，摘 出モルモット回 腸縦走筋，摘出 ラット子宮 in vitro I 0031 4.2.1.2-1 タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
11
2.6.3.2
効力を裏付ける試験
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 結果 書類番号 (Study No) 全長型EGFR-TK に対する選択的阻害作用 精製全長型ヒト EGFR in vitro 0～1000 nM エルロチニブは，精製全長型 EGFR-TK を IC50値2 nM（0.79 ng/mL）で 阻害した。EGFR と異なる構造を有 する他の非受容体型チロシンキナー ゼのc-src 及び v-abl に対する本薬の 阻害活性は，いずれもEGFR-TK に 比べて1/1000以下であった。 4.2.1.1-1 ( I 0176 ) 全長型EGFR-TK に対するエルロチニブ のATP 競合的な阻害作用 精製全長型ヒト EGFR in vitro 0～10 nM ATP 濃度：5～3000 μM エルロニチブの精製全長型 EGFR-TK に対する阻害作用は，ATP 濃度 の増加に伴って抑制された。 4.2.1.1-1 ( I 0176 ) 細胞内領域のEGFR-TK に対する選択的 阻害作用 組み換え型ヒト EGFR 細胞内領 域TK ドメイン in vitro 0～10000 nM エルロニチブは，細胞内領域 EGFR-TK を IC50値1 nM（0.39 ng/mL）で 阻害した。EGFR と同じく膜貫通型 受容体チロシンキナーゼであるIR 及びIGF-IR に対する本薬の阻害活 性は，いずれもEGFR-TK に比べて 1/10000以下であった。 4.2.1.1-1 ( I 0176 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page12
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 結果 書類番号 (Study No) EGF で誘導される細胞増殖に対する選択 的抑制作用 FRE 細胞 in vitro 0～10000 nM エルロニチブは，EGF で誘導された FRE 細胞の増殖を IC50値70 nM （27.5 ng/mL）で抑制した。その他 の増殖因子のbFGF, IGF-I 及び PDGF で誘導される細胞増殖に対し ては，いずれも1000 nM 以上で抑制 作用を示した。 4.2.1.1-1 ( I 0176 ) EGFR 発現ヒト癌細胞に対する in vitro 増 殖抑制作用 DiFi 大腸癌細胞 株及びHN5頭 頸部癌細胞株 in vitro 0～1200 nM エルロニチブのDiFi 細胞の増殖に 対するIC50値は100 nM（39.3 ng/mL）であった。HN5細胞に対し ては50 nM で顕著な増殖抑制を示 し，250 nM（98.4 ng/mL）で完全な 抑制作用を示した。 4.2.1.1-1 ( I 0176 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
13
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 結果 書類番号 (Study No) EGFR 発現ヒト癌細胞株移植ヌードマウ スにおける連日投与でのin vivo 腫瘍増殖 抑制作用 ●HN5頭頸部 癌及びA431外 陰部癌細胞株 移植雌性ヌー ドマウス ・腫瘍径2～4 mm（初期癌） のHN5頭頸部 及びA431外陰 部癌細胞株移 植ヌードマウ ス ・腫瘍径1 cm 以上（進行癌） のHN5頭頸部 癌細胞株移植 ヌードマウス* 20日間連日経口投与， 初期癌：0～100 mg/kg/日，進行癌：0 ～92 mg/kg/日* * 本試験のみエルロチ ニブ遊離塩基を使用。 その他の試験ではエル ロチニブ塩酸塩を使 用。 ●腫瘍径2～4 mm の初期癌における エルロチニブの腫瘍増殖抑制作用： ・HN5頭頸部癌細胞株移植ヌードマ ウスにおいて，エルロチニブは12.5 mg/kg/日で腫瘍増殖停止作用（100% 増殖阻害活性）を示した。また，エ ルロチニブのED50値は，7 mg/kg/日 であった。 ・A431外陰部癌細胞株移植ヌードマ ウスにおいて，エルロチニブは50～ 100 mg/kg/日で腫瘍増殖停止作用を 示した。また，エルロチニブのED50 値は，14 mg/kg/日であった。 ●腫瘍径1 cm 以上の進行癌における エルロチニブの腫瘍増殖抑制作用： 進行癌モデルのHN5頭頸部癌細胞株 移植ヌードマウスにおいても，エル ロチニブは11 mg/kg/日で腫瘍増殖停 止作用を示した。 ●初期癌，進行癌共に休薬後に腫瘍 増殖は再開するが，その増殖速度は 対照群よりも遅かった。 4.2.1.1-2 ( M 0223 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
14
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 結果 書類番号 (Study No) ヒト癌細胞株移植ヌードマウスにおける in vivo 併用効果（1）：ゲムシタビン及び シスプラチンとの併用効果 (a) MTD での併用試験 A549非小細胞肺 癌細胞株移植雌 性ヌードマウス ●ゲムシタビンとの併 用：エルロチニブ塩酸 塩100 mg/kg/day（連 日経口投与）/ ゲムシ タビン120 mg/kg（3日 ごとに3週間，計6回腹 腔内投与）。 ●シスプラチンとの併 用：エルロチニブ塩酸 塩100 mg/kg/day（連 日経口投与）/ シスプ ラチン6 mg/kg（6日ご とに2週間，計3回腹腔 内投与）。 エルロチニブ（100 mg/kg）/ ゲムシ タビン（120 mg/kg）及びエルロチ ニブ（100 mg/kg）/ シスプラチン （6 mg/kg）の MTD での併用投与 は，死亡例が出現し，併用効果を評 価できなかった。 4.2.1.1-3 ( M20 314/ 1012627 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
15
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 結果 書類番号 (Study No) ヒト癌細胞株移植ヌードマウスにおける in vivo 併用効果（1）：ゲムシタビン及び シスプラチンとの併用効果 (b) 1/4 MTD での併用試験 A549非小細胞肺 癌細胞株移植雌 性ヌードマウス ●ゲムシタビンとの併 用：エルロチニブ塩酸 塩25 mg/kg/day（連日 経口投与）/ ゲムシタ ビン30 mg/kg（3日ご とに3週間，計6回腹腔 内投与）。 ●シスプラチンとの併 用：エルロチニブ塩酸 塩25 mg/kg/day（連日 経口投与）/ シスプラ チン1.5 mg/kg（6日ご とに2週間，計3回腹腔 内投与）。 エルロチニブ（25 mg/kg）/ ゲムシ タビン（30 mg/kg）及びエルロチニ ブ（25 mg/kg）/ シスプラチン（1.5 mg/kg）の1/4 MTD の併用投与で は，相加効果が認められた。その相 加効果は，各薬剤単独投与のMTD の抗腫瘍効果と，ほぼ同じであっ た。 4.2.1.1-3 ( M20 314/ 1012627 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
16
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 結果 書類番号 (Study No) ヒト癌細胞株移植ヌードマウスにおける in vivo 併用効果（2）：シスプラチン，ゲ ムシタビン及びパクリタキセルとの併用 効果 H460非小細胞 肺癌，GEO 結 腸癌，Calu-6非 小細胞肺癌， A431外陰部 癌，CFPac-1膵 臓癌，及びKB 類表皮癌細胞株 移植雌性ヌード マウス ●シスプラチンとの併 用試験：エルロチニブ 塩酸塩連日又は間欠投 与（100，150 mg/kg p.o.）/ シスプラチン （9 mg/kg i.v.）。 ●ゲムシタビンとの併 用試験：エルロチニブ 塩酸塩連日又は間欠投 与（100，150 mg/kg p.o.）/ ゲムシタビン （100，120，400 mg/kg i.v.）。 ●パクリタキセルとの 併用試験：エルロチニ ブ塩酸塩連日又は間欠 投与（150 mg/kg p.o.）/ パクリタキセル（60 mg/kg i.v.）。 ●シスプラチンとの併用： 6種の癌細胞株移植ヌードマウスの うちH460及び GEO 移植系において のみ，シスプラチンとの併用によ り，抗腫瘍効果の増強が認められ た。しかしながら，死亡例が出たた めに，併用効果を検証することはで きなかった。 ●ゲムシタビンとの併用： ゲムシタビンとの併用により，抗腫 瘍効果の増強はみられなかった。 ●パクリタキセルとの併用： パキリタキセルとの併用では，パク リタキセル投与により，腫瘍増殖が ほぼ完全に抑制されたため，併用効 果を検証することができなかった。 ●エルロチニブの連日投与及び間欠 投与の投与スケジュールの違いは， 抗腫瘍効果の増強に対して顕著な差 を示さなかった。毒性の発現に関し ては，連日投与の方が間欠投与より も毒性の増強が観察された。 4.2.1.1-4 ( M20 158 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
17
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 結果 書類番号 (Study No) In vitro における EGFR 自己リン酸化阻害 作用 HN5頭頸部癌細 胞株，DiFi 大腸 癌細胞株， MDA-MB-468乳 癌細胞株 in vitro 0～1000 nM HN5細胞における EGF 誘導の EGFR 自己リン酸化に対して，エルロチニ ブはIC50値20 nM（7.9 ng/mL）で濃 度依存的な抑制作用を示した。 DiFi 及び MDA-MB-468細胞でも同 様にエルロチニブによる自己リン酸 化阻害作用が確認された。 4.2.1.1-1 ( I 0176 ) EGFR アダプター蛋白 SHC のリン酸化に 対する選択的阻害作用 HN5頭頸部癌細 胞株 in vitro 1000 nM エルロチニブは，EGFR のアダプター蛋白であるSHC のリン酸化は 阻害したが，インスリン受容体のア ダプター蛋白であるIRS-1のリン酸 化は阻害しなかった。 4.2.1.1-1 ( I 0176 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
18
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 結果 書類番号 (Study No) In vivo における EGFR 自己リン酸化阻害 作用 HN5頭頸部癌細 胞株移植雌性 ヌードマウス 2.9～92 mg/kg 単回経 口投与 ●エルロチニブの腫瘍組織中EGFR の自己リン酸化阻害作用： エルロチニブを単回経口投与し，投 与1時間後に HN5頭頸部癌細胞株移 植ヌードマウスの腫瘍組織中の EGFR 自己リン酸化活性を測定し た。本薬は，腫瘍組織中のEGFR 自 己リン酸化をED50値9.9 mg/kg で阻 害した。また，その時の血漿中濃度 は8 μM（3.1 μg/mL）であった。 ●エルロチニブの腫瘍組織中の EGFR 自己リン酸化阻害作用の持続 性： エルロチニブ92 mg/kg 単回投与24時 間後の血漿中濃度は38 μM（14.9 μg/mL），腫瘍組織内濃度は4.0 μmol/kg と，本薬の血漿中及び腫瘍 組織中濃度は維持されていた。腫瘍 組織内のEGFR 自己リン酸化阻害作 用は24時間後も25～40%の有意な阻 害作用が認められた。 4.2.1.1-2 ( M 0223 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
19
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 結果 書類番号 (Study No) In vitro における細胞周期停止作用 HN5頭頸部癌細 胞株及びDiFi 大腸癌細胞株 in vitro ●細胞周期停止作用： HN5並びに DiFi 細胞 をエルロチニブ1 μM で処理後，フローサイ トメトリーで細胞周期 を測定。 ●p27KIP1発現誘導作用 及び過リン酸化pRB の発現量の減少作用： HN5並びに DiFi 細胞 をエルロチニブ0， 0.05，0.25，1 μM で処 理後，ウエスタンブ ロット法でp27KIP1， リン酸化pRB の発現 量を測定。 ●細胞周期停止作用： エルロチニブは，DiFi 細胞並びに HN5細胞の G1期細胞の割合を増加 させ，S 期細胞の割合を減少させ た。本薬の細胞周期のG1期停止作 用が確認された。 ●p27KIP1発現誘導作用及び過リン酸 化pRB の発現量の減少作用： エルロチニブは，DiFi 細胞並びに HN5細胞の p27KIP1を発現誘導させ， pRB の過リン酸化量を減少させた。 4.2.1.1-1 ( I 0176 ) In vivo における細胞周期停止作用 ヒトH460非小 細胞肺癌， A549非小細胞 肺癌，SW48結 腸癌，GEO 結 腸癌，及びKB 類表皮癌細胞株 移植雌性ヌード マウス 150 mg/kg 単回経口投 与，10 mg/kg BrdU 腹 腔内投与 エルロチニブ投与により，腫瘍組織 へのBrdU の取り込み量は，4～48時 間後に最低値を示し，72時間後まで に投与前値に回復した。本薬投与に より，対照組織（腸管組織）の BrdU 取り込み量は，8～24時間後に 最低値に達した。 4.2.1.1-5 ( M20 116 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
20
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 試験系 試験方法/投与方法 結果 書類番号 (Study No) アポトーシス誘導作用 DiFi 大腸癌細胞 株 in vitro エルロチニブ1 μM で DiFi 細胞を処理。 アポトーシス誘導作用 は，TUNEL 法，アガ ロースゲル電気泳動に よるDNA ラダー像及 びsub-G1期細胞の同 定で評価。 ●TUNEL 法： エルロチニブ処理により，アポトー シス細胞の増加が確認された。 ●DNA ラダー像： エルロチニブ処理により，DNA ラ ダー像の増加が確認された。 ●Sub-G1期細胞の同定： エルロチニブ処理により，DNA 含 量の少ないsub-G1期細胞の増加が確 認された。 4.2.1.1-1 ( I 0176 ) 副次的薬理試験 各種受容体に対するin vitro 結合試験 マウス，ラッ ト，ニワトリ， ブタ，ウシ，モ ルモット，及び ヒト由来細胞よ り調製した67種 類の受容体 in vitro RI 標識リガンド エルロチニブは，多くの受容体にお いて最高濃度の1.0 μM まで有意な結 合阻害作用を示さなかった。末梢型 ベンゾ ジア ゼピン 受容 体に対 し て は，他の受容体に比べて比較的強い 結合阻害作用を示したものの，その IC50値は2.5 μM（984 ng/mL）と低い 親和性であった。 4.2.1.2-1 ( I 0031 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
21
2.6.3.3
安全性薬理試験（一般薬理試験を含む）
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 種/系統 投与方法 （溶媒） 投与用量 又は 適用濃度 性別 （動物数/群） 特記すべき所見 GLP 適用 書類番号 (Study No) 中枢神経系に及ぼす影響 マウスの一般症状 に対する影響 （Irwin の変法） マウス/CD-1 単回経口投与 （0.1% MC） 0，1，3.2， 10，32，100， 320，1000 mg/kg 雄（3） ・320 mg/kg まで一般症状に対 する影響はみられなかった。 ・1000 mg/kg で自発運動減少が みられ（投与後30分），1/3例がinverted screen test で落下し
た（投与後1及び2時間）。 否 4.2.1.2-1 ( I 0031 ) ラットの一般症状 に対する影響（機 能観察試験）， GLP 試験 ラット/CD （SD） 単回経口投与 （6% Captisol） 0，50，225， 1000 mg/kg 雌（10） 神経行動学的作用はみられな かった。 適 4.2.1.3-1 ( R20 124/ 9001 ) マウスの誘発性痙 攣に対する影響 マウス/CD-1 Pentylenetetrazol 腹腔内投与30分 前に単回経口投 与（溶媒： 0.5% MC） 0，10，50， 100 mg/kg 雄（20） 抗痙攣作用及び痙攣誘発作用は みられなかった。 否 4.2.1.3-2 ( I 0007 ) 心血管系に及ぼす影響 ラットの血圧，心 拍数及び血液ガス に対する影響 ラット/CD （SD） 単回経口投与 （0.5% MC） 0，50 mg/kg 雄（6） 血圧，心拍数，PO2，PCO2，pH に対する影響はみられなかっ た。 否 4.2.1.3-2 ( I 0007 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
22
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 種/系統 投与方法 （溶媒） 投与用量 又は 適用濃度 性別 （動物数/群） 特記すべき所見 GLP 適用 書類番号 (Study No) イヌの血圧，心拍 数，心拍出量，総 末梢血管抵抗，及 び心電図に対する 影響 イヌ/雑種 単回経口投与 （0.5% MC） 0，50，100 mg/kg 雄（3） 雌（2） 心血管系に影響はみられなかっ た（心拍数，血圧，心拍出量， 総末梢血管抵抗，及び心電図に 影響なし）。 否 4.2.1.3-2 ( I 0007 ) イヌの血圧，心拍 数及び心電図に対 する影響（テレメ トリー試験）， GLP 試験 イヌ/ビーグ ル 単回経口投与 （0.5% HEC） 0，10，20， 50，100 mg/kg 雄（3） 雌（3） 血圧，心拍数，心電図に影響は みられなかった。 適 4.2.1.3-3 ( D20 142 / 1007851 ) hERG チャネルに対 する影響（1）： hERG チャネル発現 CHO 細胞 組み換え型 hERG チャ ネル発現 CHO 細胞
in vitro 曝露 3～100 μM N/A hERG チャネルを介したカリウ
ムイオンの流れを用量依存的に 阻止した。しかしながら，最高 濃度においても50%を超える阻 害がみられなかったため，IC50 値を算出できなかった（薬物の 溶解性のためと考えられる）。 IC20値は約2.9 μM（1141 ng/mL）であった。 否 4.2.1.3-4 ( V20 141 / 1007195 ) hERG チャネルに対 する影響（2）： hERG チャネル発現 HEK293細胞 組み換え型 hERG チャ ネル発現 HEK293細胞
in vitro 曝露 0.1～100 μM N/A hERG チャネルを介したカリウ
ムイオンの流れを用量依存的に 阻止し，そのIC50値は約7 μM （2754 ng/mL），IC20値は約0.6 μM（236 ng/mL）であった。 否 4.2.1.3-5 ( V20 140/ 1006584 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
23
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 種/系統 投与方法 （溶媒） 投与用量 又は 適用濃度 性別 （動物数/群） 特記すべき所見 GLP 適用 書類番号 (Study No) ウサギの摘出プル キンエ線維に対す る影響，GLP 試験 ウサギプル キンエ線維 in vitro 曝露 0.1～30 μM N/A ウサギプルキンエ線維の静止膜 電位，活動電位の大きさ，最大 脱分極速度（最大立ち上がり速 度：Vmax），活動電位持続時間 （APD90，APD50）に影 響はみ られなかった。 適 4.2.1.3-6 ( V20 151 / 1006465 ) 呼吸系に及ぼす影響 ラットの換気量， 呼吸数に対する影 響，GLP 試験 ラット/CD （SD） 単回経口投与 （6% Captisol） 0，50，225， 1000 mg/kg 雌（6） 1回換気量，1分間呼吸数，1分 間換気量に影響はみられなかっ た。 適 4.2.1.3-7 ( R20 208 / 477 ) 腎/泌尿器系に及ぼす影響 ラットの腎機能に 対する影響 ラット/CD （SD） 単回経口投与 （0.5% MC） 0，5，10，50 mg/kg 雄（12） カリウム排泄量減少 （5 mg/kg：35%，10 mg/kg： 43%）及び尿量減少 （5 mg/kg：21%，50 mg/kg： 20%）がみられた。 否 4.2.1.3-2 ( I 0007 ) 胃腸管系に及ぼす影響 ラットの胃腸管内 輸送能に対する影 響（1）：経口投与 試験 ラット/CD （SD） 単回経口投与 （0.5% MC） 0，5，10，50 mg/kg + 0.5， 1，5 mg/kg（追 加試験） 雄（6～13） 5 mg/kg 以上で胃排出能の抑制 （5 mg/kg：24%，10 mg/kg： 40%，50 mg/kg：69%）及び胃 腸管輸送能の抑制がみられた。 否 4.2.1.3-2 ( I 0007 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
24
被験物質：エルロチニブ塩酸塩 試験の種類 種/系統 投与方法 （溶媒） 投与用量 又は 適用濃度 性別 （動物数/群） 特記すべき所見 GLP 適用 書類番号 (Study No) ラットの胃腸管内 輸送能に対する影 響（2）：静脈内投 与試験 ラット/CD （SD） 静脈内投与 （20% sulfobutyether-β-cyclodextrin in 50 mM クエン酸， pH3） 0，2.5，5，10 mg/kg + 0.5， 1，5 mg/kg（追 加試験） 雄（6～14） 2.5 mg/kg 以上で胃排出能の抑 制（2.5 mg/kg：16%， 5 mg/kg：29%，10 mg/kg： 53%）及び胃腸管輸送能の抑制 がみられた。 否 4.2.1.3-2 ( I 0007 ) 自律神経系及び平滑筋/心筋に及ぼす影響 摘出平滑筋及び摘 出心筋に対する影 響 摘出モル モット胸部 大動脈 in vitro 曝露 1 nM～10 μM N/A ・エルロチニブ自体の収縮惹起 作用はみられなかった。 ・ノルエピネフリン惹起収縮に 対する影響はみられなかった。 否 4.2.1.2-1 ( I 0031 ) 摘出モル モット右心 房 in vitro 曝露 1 nM～10 μM N/A 10 μM（3934 ng/mL）で基礎拍 動数が10%減少したが，ヒスタ ミン惹起拍動数増加作用に対す る影響はみられなかった。 否 4.2.1.2-1 ( I 0031 ) 摘出モル モット回腸 in vitro 曝露 1 nM～10 μM N/A 10 μM（3934 ng/mL）でヒスタ ミン惹起収縮の抑制（42%）が みられた。 否 4.2.1.2-1 ( I 0031 ) 摘出モル モット回腸 縦走筋 in vitro 曝露 1～100 μM N/A 100 μM（39340 ng/mL）で Ca2+ 惹起収縮の抑制（34%）がみら れた。 否 4.2.1.2-1 ( I 0031 ) 摘出ラット 子宮 in vitro 曝露 1 nM～10 μM N/A オキシトシン惹起収縮に対する 影響はみられなかった。 否 4.2.1.2-1 ( I 0031 ) タルセバ錠 2.6.3 薬理試 験概要表 Page
25
2.6.3.4
薬力学的薬物相互作用試験
該当せず。
