本誌 2014 年 11 月号のトピックス欄で，AREDS I 試験 を紹介させていただいた．AREDS I 試験では，抗酸化ビ タミンと亜鉛による加齢黄斑変性 （AMD）進行抑制の可 能性が検討された．AREDS I 試験で高用量の抗酸化剤 および亜鉛の併用投与が進行性加齢黄斑変性（AMD）の 発症リスクを著しく抑制することが示され，AMD は栄 養疾患であることが明らかになった．AREDS I 試験の結 果に基づき キサントフィル（ルテインおよびゼアキサン チン），ドコサヘキサエン酸（DHA），エイコサペンタエ ン酸（EPA）および低用量亜鉛の AMD 進行に与える影響 を検討するために，大規模臨床試験である第二次加齢性 眼疾患調査試験（AREDS II）が，実施された（2006-2012 年）1）2） ．本稿では，ルテイン配合サプリメントの介入試 験である AREDS II 調査試験について紹介する．
1.1．ルテインの化学構造，成分組成
C40H56O（分子量 568.87）カロテノイドの一種で分子内2 に 2 個の水酸基を持つキサントフィルに分類される．1.2．ルテインの存在
自然界では，多様な食品・生物に含有されているが， 前記したマリーゴールドに豊富に存在するため，市販 品のルテイン源としてはマリーゴールド由来ルテイン が利用されている．ヒトの体内においては，眼（網膜）， 皮膚，脳，子宮頸部および乳房組織に多く分布している． 体内では合成されない．1.3．製造方法
マリーゴールド（ Tagetes erecta Linne）の乾燥花弁か ら ヘキサンで抽出し，ヘキサン除去後，アルカリ性下 でケン化し精製する．ルテインの他に，異性体のゼア キサンチン などを含む，
1.4．安全性
米国では GRAS（Generally Recognized as a Safe：一般 的に安全と認められている食品）物質に認められている． また，FAO/WHO 合同食品添加物専門家会議（JECFA）で は 1 日当たり 2 mg/kg 体重の摂取量まで安全としている． また，2006 年までにルテインを使用したヒト臨床試験の 公 表 論 文を評 価したリスク評 価 結 果によると，OSL （Observed Safety Level：観察された安全量）はオールト
ランスルテインとして 20 mg/ 日に設定するのが妥当だろ うと判断している．また，植物の緑葉，黄色花の花弁や 果実，卵黄など，自然界に広く分布するカロテノイドの 一つで，古くから食事を通して多く摂取されており，食 経験は豊富である3）．
1.5．ルテインと眼疾病疫学的調査報告
Eye Disease Case-Control Study（EDCCS，1986∼1990 年） 食事からのルテイン / ゼアキサンチン 6 mg/ 日摂取で
AMDのリスクを 43％軽減させ，AMD の予防と最も 相関があると報告された．
Lutein Antioxidant Supplementation Trial（LAST，1999 ∼ 2001 年・前向き無作為二重盲検プラセボ対照試験） 2 施設で 萎縮型 AMD 患者 90 名を被験者とした介入
試験が実施され，ルテイン単独投与群およびルテイ ン に 抗 酸 化 ビ タミン とミネ ラ ル を 併 用 し た 群 で MPOD（Macular Pigment Optical Density：黄斑色素光 学密度）の増加，コントラスト感度の増加，視力の改 善などが認められると報告された．
Age-Related Eye Disease Study1（AREDS1）
ルテインを多くとっている人ほど，AMD 発症が抑え られた．
AREDS Ⅱ調査試験
概 要 80 以上の研究センターが参加する国立眼研究所主催 の第二次無作為化試験で，微量栄養素であるキサント フィル（ルテインとゼアキサンチン）およびオメガ-3 長 鎖多価不飽和脂肪酸（LCPFA）（魚油）の投与効果を調査AREDSⅡ（Age-Related Eye Diseases Study Ⅱ）調査試験
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ト ピ ッ ク スして，AREDS1 の知見を改善させることが目標（図 1）． 4種類の処方による経口投与効果が以下の 4 試験群で 評価された：ルテイン / ゼアキサンチン（それぞれ 10 mg/日，2 mg/ 日），オメガ-3 LCPFA（1 g/ 日），ルテイ ン / ゼアキサンチン＋オメガ‐3，あるいはプラセボ． AREDS1試験データとその疫学調査でオメガ‐3 とルテ インの低用量摂取による AMD の増加リスクとの関連を 示す． 先行試験の知見が，進行性 AMD 患者の一次有効性 を示したので，AREDS II では 2006 年後期に始まった カテゴリー 3 と 4（本誌前号のトピックス AREDS1 を参 照）と診断された 4000 人の AMD 患者を対象者として 登録した1）2）．すべての被験者は，症状が重度であるた め，AREDS II 治療期間中は基本的に AREDS1 処方で の服用を行う．基本的 AREDS1 処方を受ける患者は β-カロテン無し，還元型亜鉛，およびβ-カロテン無し＋ 低用量亜鉛の併用を含む処方にシフトさせ，二次ラン ダム化して試験を行なう．なお，喫煙者はβ-カロテン 摂取により肺ガン発症リスクが増加するため，β-カロ テン無しの処方群内でランダム化される．すべての被 験者は試験期間中，マルチビタミン剤の投与をうける． 目 的 AMD に対する他の予防因子を探し出すことで，ルテ イン / ゼアキサンチンと DHA ＋ EPA の併用または，い ずれか一種類を AREDS1 処方に追加した場合，AMD の進行に至るリスクの高い患者に対しての進行に関す る有効性の評価．AREDS 処方から亜鉛の量を減らす場 合，ベータカロテンを除いた場合または，亜鉛の量を 減 らしβ-カ ロ テ ン を 除 い た 場 合 に，オ リ ジ ナ ル の AREDS処方と同等の AMD 進行リスク低下を示すかを 評価． 試験デザイン 4203 名の被験者，年齢は 55-80 歳（平均 74 歳） AMDカテゴリー 3 と 4 の被験者（図 1） 5年以上の観察研究（2006-2012 年） 82医療施設 89％の被験者がマルチビタミン剤である「Centrum Sil-ver」（ルテイン 0.275mg 含有）を服用 対照群は，オリジナル AREDS 処方 主要評価基準： ルテインとゼアキサンチン，DHA＋EPA，またはそ れら 2 種類を合わせて AREDS 処方に追加したことで， 試験の対照群であるオリジナル AREDS 処方を摂取した 被験者と比較し，AMD の進行リスクがさらに 25％低下 するかどうかが検証された．（α＝0.013） 結果： この主要解析では，3 投与群と対照群との比較で， AMDの進行に有意な低下は実証されなかった． 結論 主要解析：（図 2） AREDS オリジナル処方の対照群と 3 投与群との比較 では，AMD の進行リスクの有意な低下は実証されな かった． この主要評価基準は，オリジナルの AREDS 処方を 摂取する被験者に関し，3 投与群の試験母集団におけ る AMD の進行リスクが，さらに 25％低下すること を前提とするものである． 図 1 AMD カテゴリー
3 投与群：AREDS 処方＋ルテイン / ゼアキサンチン， AREDS処 方＋ル テイン / ゼ ア キ サン チン＋ DHA/ EPA，AREDS 処方＋ DHA/EPA AREDS処方＋ルテイン / ゼアキサンチンでは，AREDS オリジナル処方と比べ，AMD の進行リスクを 10％低下 させる主効果を示した．
AREDS処方＋ DHA/EPA では，AMD の進行のリスク 低下への主効果を示さなかた． また，亜鉛の必要性を実証するには，このデータでは 不十分であった． 副次解析：（図 3） ルテインとゼアキサンチンの摂取量が低い被験者で は，ルテインとゼアキサンチン非含有と比べ，AREDS 処方にルテインとゼアキサンチンを追加することで， AMDの進行を 26％低下させた．（HR は 0.74，P＝0.01） 同時に評価された，白内障に関するルテインとゼア キサンチンの有効性評価では，食事由来のルテイン とゼアキサンチンの摂取量が第 1 五分位の被験者で は，白内障手術への進行が 32％，白内障発症が 30％ 減少，重度の白内障に至る進行リスクが 36％減少し た． β-カロテン vs. ルテイン / ゼアキサンチン β-カロテンを除いた AREDS 処方にルテイン / ゼアキ サンチンを追加した処方と，β-カロテンを含む AREDS 処方を比較した結果，AREDS 処方からβ-カロテンを 図 2 主要解析 図 3 副次解析
除きルテイン / ゼアキサンチンに置き換えた場合は， AMDへの進行を 18％低下（HR は 0.82，p＝0.02）させ， 統計的有意な結果が得られた．（図 4） AREDS 処方＋ FGL ルテイン / ゼアキサンチンでは， AREDSオリジナル処方と比べ，AMD の進行リスクを 10％低下の主効果を示した． 新処方の提案 AREDS II 調査試験の結果を踏まえて，ルテイン 10 mg/ゼアキサンチン 2 mg 摂取が推奨された． ビタミン C 500 mg ビタミン E 400 IU ルテイン / ゼアキサンチン 10 mg/2 mg 亜鉛（酸化亜鉛として） 80 mg 銅（酸化第二銅として） 2 mg 表 1 AREDS II 推奨サプリメント処方 作用機序の概要 ルテインは 10 個の共役 2 重結合と 2 つの末端に水酸 化された環を持っている．それらがルテインを有効な 抗酸化物質としている．ルテインと一重項酸素（1 O2）と の相互作用は主として物理的な消去に依存する．これ には両分子間の直接的なエネルギー伝達が関与してい る．一重項酸素のエネルギーはカロテノイド分子に伝 達され，基底状態の酸素と 3 重項励起のカロテノイド を作り出す4）-7）．これは次の化学式で表される． 1 O2＋ルテイン→3O2＋3ルテイン 更なる化学反応の代わりに，3 重項励起のカロテノイ ドは基底状態を回復するために，回転と振動の相互作用 を通してエネルギーを害なく消費する8）-11）．物理的消去 の利点はルテインが無傷で残ることである．これが 1 重 項酸素消去の更なるサイクルを可能とする12）-14）．これに 加えて，疎水的な性質と共役 2 重結合の存在は，ルテイ ンがフリーラジカルのための電子供与体として働くこと を可能とする．フリーラジカルはこのように高度に安定 な化合物に変換されて連鎖反応が終了する15）． この反 応は相応するルテインのラジカルカチオンの形成へと進 む． ラジカル・ ＋ ルテイン → ラジカル− ＋ ルテイン・＋ あるいは，ラジカルがルテインのどれかの 2 重結合 に加えられ，高度に共鳴―安定化された炭素中心ラジ カルが生成する16）． ヒト網膜において，3-ヒドロキシ-β， ε-カロテン-3’-オン，3’-エピルテイン17）18） などのルテ イン酸化物質が同定されたことはルテインが網膜にお ける抗酸化的代謝に積極的に関わっていることを確認 した19）． これらの研究のほとんどは純品のルテインを 使用して実施されている．おそらくルテインは網膜内 においてルテイン結合タンパク質 StARD3 と複合体を 形成している20） ことから，これらの複合体が抗酸化能 を保持していることが示されなければならない．ゼア キサンチンとその結合タンパク質 GSTP1（グルタチオン S-トランスフェラーゼのアイソフォーム Pi）についての 研究により，間接的な証拠が示された．その中で，ゼ アキサンチンは GSTP1 に結合するとアゾ脂質ペルオキ シラジカル産生物質に対して相乗的な抗酸化効果を示 した21）．したがって，ルテインはその結合タンパク質 StARD3に結合するとその抗酸化特性をおそらく保持す ると考えられる． ルテインはまた，青色光により加わった酸化ストレ スから目の組織を保護する．これはルテインの間接的 な抗酸化活性である．黄斑や水晶体に存在するルテイ ンは可視光の短波長光（400-500 nm），特に 446 nm の波 長の青色光を吸収することができる22） ．可視光のうち 青の波長はより長い波長の光と比べ，より損傷を引き 起こしやすい．なぜならば青色光はエネルギーが高く， 網膜に内在するリポフスチンのような光感応物質から の活性酸素種（ROS）産生の効率が高いからである．ル テインの光を吸収する力は共役ポリエン鎖の存在によ る23）24） ．ポリエン鎖の共役の程度，その長さ，末端基 図 4 上記の処方群の相対リスク 㻌
の 性 質 は そ の 分 子 の ス ペ クトル 特 性 に 影 響 を 与 え る25）-27） 入射光と光受容体の外側部との間に位置するル テインは放射を吸収し透過する青色光の強度を低下さ せ，網膜を青色光により加わった酸化ストレスから保 護する．このルテインが網膜を酸化ストレスから保護 する二つのメカニズムは in vitro，in vivo および動物実 験の組み合わせにより証明された．
おわりに
長寿社会になって高齢者が増加することによる眼の 健康に問題があるヒトが増えており，多くの方が白内 障の手術の順番を待っている．AMD の予備軍も確実に 増えている．また，日常生活では，コンピューター等の 電子機器と接する時間が増えており，青色光問題が提 起されており網膜の損傷リスクが増加している．より 長く視機能を維持するためにルテイン / ゼアキサンチン による眼の健康維持機能は有益であるかもしれない． また，我が国では，iPS 細胞を利用した網膜の細胞シー ト移植試験において移植が行われ今後 1 年間をかけて 経過観察を行う再生治療の試みが AMD では試みられ ている．Key Words： AREDS II (Age-Related Eye Diseases Study II), AMD (Age-Related Macular Degenera-tion), Randomized Clinical Trial, Lutein, Zea-xantin
1
The General Incorporated Association of International Foods & Nutrition (AIFN) Chief Executive Of¿cer
2 Kemin Japan KK Representative Director Kazuo Sueki1 , Masafumi Hashimoto2 1 一般社団法人国際栄養食品協会（AIFN；アイファン） 専務理事 2ケミンジャパン株式会社 代表取締役 末木 一夫1 ，橋本 正史2 （平成 27.1.7 受付）
文 献
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2） http://www.nei.nih.gov/neitrials/viewStudyWeb.aspx?id=120. Clinical Studies Database. Age Related Eye Diseases Study II (AREDS II). Last update 2/3/2006. pp. 1-6.
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