Title
P1-14-3 低酸素環境下で発現が変動するmicroRNAの網羅的
解析を通じた卵巣癌腹膜播種抑制の分子標的治療の可能性 :
低酸素刺激で発現低下を示すmiR-199a-3pはc-Metの発現抑
制を通じて播種進展を抑制する( 本文(Fulltext) )
Author(s)
木瀬, 康人; 澤田, 健二郎; 中村, 幸司; 牧野, 弘; 水野, 智子; 橋
本, 香映; 磯部, 晶; 馬淵, 誠士; 坂田, 正博; 森重, 健一郎; 木村,
正
Citation
[日本産科婦人科學會雜誌] vol.[66] no.[2] p.[508]-[508]
Issue Date
2014-02-01
Rights
Japan Society of Obsterics and Gynecology (公益社団法人日本
産科婦人科学会)
Version
出版社版 (publisher version) postprint
URL
http://hdl.handle.net/20.500.12099/52683
※この資料の著作権は、各資料の著者・学協会・出版社等に帰属します。
Japan Society of Obstetrics and Gynecology
NII-Electronic Library Service
Japan Sooiety of Obstetrios and Gyneoology
508（S
−368
）一
般 演 題 日産 婦 誌66巻2
号Pl −14−
3
低 酸 素 環 境 下で発 現が変 動 するmicroRNA の 網 羅 的解 析 を通じ た卵 巣 癌 腹 膜 播 種 抑 制の分子 標的治 療の 可能性
一
低酸素刺激で発 現低 下 を示 すmiR−
199a−
3p
はc−Met
の発 現抑制を 通 じ て播 種 進 展 を鉚 制 する大阪大1
，
岐 阜大U 木瀬 康人’，
澤田健二郎’，
中村幸司1，
牧 野弘Lt
，
水 野智 子2，
橋 本 香映’，
磯 部晶1
，
馬淵誠 士1，
坂田正 博1，
森 重 健一
郎z，
木村 正1 【目的】卵 巣 癌が腹 膜 播 種進展 する 過程で は，
腹 腔 内 を浮遊 する癌 細 胞 が低 酸 素に さ ら さ れ，
この 環境へ の応 答に よりさ らに播 種 浸 潤が増 悪 する．
低 酸 素刺 激に伴う癌 細胞の形質転 換にmicroRNA が 関与 してい ると考 え，
網羅 的解析を通じ て候 補mi−
croRNA を抽品 し，
そ の分子標 的 治療の可 能 性 を検 討 した。
【方 法】1
％ 酸素下に培養した卵 巣癌 細 胞 株よ りRNA を抽出 し，
mi−
croRNA array 解 析で低 酸 素刺 激にて発 現 変 動 するmicroRNA を見 出し
，
低 酸 素で発 現が低 下 するmiR−199a−3p
を抽 出 した．
ln
silico 解析に よりmiR−199a−3p
の標 的遺 伝 子としてMET
に着 目し た，
イン フ ォー
ム ドコン セ ン トを得た卵 巣癌 臨床 検 体と細 胞株で の ヱniR
−199a−3p
とMET
発 現の相 関 につ い て RT−
qPCR，
免 疫 組 織 化 学，
Westernblot
で検 討 した，
miR−
199a−3p
の前駆 体 を細 胞株に導 入 し
，
その増 殖 能。
接 着 能，
浸潤能に与 える影 響 およびMET
の下 流シ グ ナルであるERK ，
Akt
に与 える影響を
Western
blot
で検 討し た．
miR−
199a安 定発現 卵 巣癌 細 胞 株 に よ る卵 巣 癌の癌性 腹 膜 炎モデルマ ウ スに おい て，
miR−
199a導入 が播種形成に与 える影 響 を検 討 した．
【成 績 】 卵 巣 癌 細 胞 株のみならず組織検 体に おい てもmiR−199a−3p
とMET発 現は逆 相 関しており
，
miR−
199a−3p
はMET
発 現を抑 制していた．
miR−
199a−
3pの卵 巣癲細胞 株へ の 導入はその増 殖 能，
接着能
，
浸 潤 能 を有 意に抑 制 し，
そ れらの抑 制はMET
強制導入 に よっ て解 除さ れた．
腹 膜播 種モデル で はmiR−199a
安定発現株で control 株と 比べて著 明な 腹膜播種病 変の抑 制を認めた
．
【結 論1低酸素刺 激で発 現 低 下 を 示 す miR−
199a−
3pは，
c−
Met の発 現 抑制 を通 じて in virto 及びin vivo に おいて卵巣癌の進展 を 強力に制 御 し，
新たな治療 標 的の可能性を提 示した．
P1 −14−
4
卵 巣 癌 進展を制御 する腹水中骨髄 由 来細 胞の同定とその役 割の解析 大 阪 大 磯 部晶， 澤田健二郎
，
橋 本 香 映，
中村 幸司，
馬 淵誠士，
坂田正博，
木 村正 【目的】卵 巣 癌患者の最 大の死 因 は多 量の腹水 産生 を伴 う腹 膜 播 種であ る
．
患 者 腹 水に は多 くの骨 髄 由来細 胞が 含 ま れ、
サ イ ト カインな どの産生を 通 じて，
癌の播 種 進 展 を促 進してい る．
そ こ で，
患 者 腹水中 に含 まれ る骨 髄 由来 細 胞 を表 面マー
カー
で 分 類 し，
どの細 胞 が 代 表 的 なサ イ トカインで あるイン ター
ロ イ キン6（IL−
6＞を 産 生 し，
腹 膜 播種を 制御 する の か検 討を行っ た．
【方 法】未 治 療の卵 巣癌 患 者腹 水より赤血球な ど を 除去し た後に，
骨 髄 球のマー
カー
であるCDllb，
単球のマー
カー
である
CDI4
に よ る 選 別 を行い，
細 胞 をCDIlb−CD14−，
CDllb ＋CDI4−，
CDllb
＋CD14
＋の3
種 類に分類し た．
そ れ ぞ れの細 胞の サイ トカイン産生能を培養液 中の
IL−6
濃 度の ELIsA 測 定により検 討した．
ま た卵 巣癌 細 胞 株sKov3ip1
との共培 養 実験 を行い，
癌 細 胞の増 殖 能・
浸 潤 能に及ぼす 影 響を検討し た．
【成績】CDIlb
＋CD14
＋ 細 胞に おい て，
有意 に高いIL−6
産 生 能 を 認め た．
そ こで，CDIIb
＋CDI4
＋のさ らなる性 質 を確 認 すべ く，
マ クロ フ ァー
ジのマー
カー
であ るCD68
，
CD206
に よ るFACS
解 析 を行い，
これ らの細 胞の大 部分 （87．
8
％）がM2
マクロファー
ジであるこ とを確 認し た，
CDIIb
＋CD14
＋細 胞とsKov3ipl
細胞との共 培 養に よ り，
その増殖 能・
浸 潤能と も有 意に促 進したが，
その促 進効 果は抗ヒ トIL−6
受 容体 抗 体の投 与に よりほ ぼ完全に抑 制さ れ た．
【結 論1
卵 巣 癌 腹 水に存 在 するM2 マクロフ ァー
ジがIL−6
産生を通じて卵 巣 癌の播 種進展を 制 御し て い る こと を報告 し た．
腹 膜 播 種 病 巣 に 対 して，
抗 IL−
6治 療は有 効である可能 性が示 唆さ れた．
Pl
−
14
・
5
卵 巣 癌腹膜播種の
PD −U
発 現は，
問質 内の リン パ球が分 泌 するIFN 一
γに より誘 導 され る 京 都 大1，
近畿 大2 安彦郁1
，
松 村 謙 臣1，
濱 西潤三1，
堀川直城L，
Jin
Peng
’，
村上隆介1，
山口建1
，
馬 場長1
，
小 西 郁生1，
万 代 昌紀2 【目的】免 疫 抑 制 分 子PD−
Llを 標 的 と し た 治療が 固形 癌に有 効である とい う臨 床 試 験 結 果 が 世 界 的に注 目さ れ ている．
我々 は，
卵 巣 癌に発 現 したPD−
U が抗 腫 瘍免 疫 を抑 制し，
腹 膜播 種 を促 進 する こと を報 告し て き た．
しか し，
PD−
Ll 発 現 機 序に つ い ては，IFN−V
に よ る誘 導が報 告さ れて い る が，
卵 巣 癌に お け る発 現制 御 機構は不 明である．
本 研究では，
卵 巣 癌微 小 環 境 におけるPD−L1
発 現機 序の解 明 を 目的 と した．
【方法】マ ウ ス卵巣癌細 胞 株 をマ ウス腹 腔 内 また は皮 下に投 与し た．
PD−
LlやIFNコ 受容 体の発 現をshRNA に よ り抑 制
