【はじめに】2014 年 3 月、従来の装置より小型で多種類の 抗菌薬測定が可能な微生物感受性分析装置 「DPS192iX」（栄研化学）が発売され、省スペース化およ び効率化が可能となった。今回、我々はマイクロスキャン WalkAway96 Plus（シーメンス）（以下：WalkAway）の薬 剤感受性成績を基準に、DPS192iX の薬剤感受性成績と比較 解析したので報告する。 【対象と方法】対象菌株はATCC5 株、臨床分離株 199 株 （腸内細菌67 株、ブドウ糖非発酵グラム陰性桿菌 30 株、 ブドウ球菌30 株、腸球菌 20 株、α 溶血連鎖球菌 20 株、 β 溶血連鎖球菌16 株、H. influenzae16 株）を使用し、同一 培養条件の菌株をDPS192iX と Walkaway の各測定法の操 作手順に準じて薬剤感受性試験を実施した。なお、 DPS192iX ではドライプレート‘栄研’（192 プレート） （以下：192 プレート）、WalkAway では各菌種に応じたパ ネルを使用し、感受性試験成績の比較は各菌種の測定時に 共通する薬剤について解析した。 【結果】各菌株におけるMIC 値の変動幅は 192 プレートで 得られたMIC 値を基準に±1 管差を許容範囲として評価・ 解析した。その結果、多くの菌種、薬剤においては80％以 上の一致率を示したが、一部の腸内細菌、H. influenzae など の菌種や一部の薬剤においては一致率が低かった。 【考察】192 プレートは WalkAway と比較しても菌種・菌 株間の変動幅は少なく良好な成績が得られ、日常検査に導 入可能と判断された。利点として多種類の抗菌薬測定が可 能であるが、AmpC 産生の腸内細菌や H. influenzae などの 判定では、マイクロスキャンパネルに比べ192 プレートの ウェルが小さいため目視判定が困難な菌株も認められた。 これにより、判定者間でのMIC 値の誤差が生じると考えら れた。また、菌液の分注時にサプリメント入りブロスを用 いたの場合では、一部吸引不良や気泡の混入などが確認さ れ、判定にスキップが生じる要因となった。そのため、こ の問題に対する早急な対策が必要と思われた。 ＜連絡先＞佐賀大学医学部附属病院検査部 橋本優佑 0952-34-3256
多種類の抗菌薬測定を目的に開発された微生物感受性分析装置「DPS192iX」の精度検証
― マイクロスキャン WalkAway96 Plus との比較 ― ◎橋本 優佑1)、小松 千夏1)、於保 恵1)、草場 耕二1)、東谷 孝徳1)、太田 昭一郎1)、末岡 榮三朗1) 佐賀大学医学部附属病院1)301
【目的】カルバペネム耐性腸内細菌（CRE）は 5 類感染 症に指定され、重要な耐性菌の一つとして取り扱われる ようになった。中でもカルバペネマーゼ産生腸内細菌 （CPE）は、感染制御の面からも早期発見が重要である。 今回、meropenem(MEPM)、ertapenem(ETPM)を使用した Modified Hodge Test（MHT）および CarbaNP 法を用いて CPE の検出について検討を行った。
【方法】対象は当院保存株で各種PCR 法により耐性機序 が判明している腸内細菌科各種耐性菌92 株（CPE 産生 菌45 株、ESBL 産生菌 25 株、p-AmpC 産生菌 17 株、 ESBL または AmpC＋カルバペネム系薬剤の MIC
≧2μg/ml 5 株）とした。Carba NP 法は Nordmann らの方 法（Emerg. Infect. Dis. 2012.18:1503–1507）に従って実施 した。 MHT はミューラーヒントン寒天培地に E. coli ATCC25922 を塗布し MEPM および ETPM ディスクを置 き、ディスクから放射状に被験菌を画線塗布し37℃ 20 時間培養した。感度および特異度を算出し、各方法に よるCPE 検出について評価した。 【結果】各方法の感度・特異度は、CarbaNP 法で感度 88.9％, 特異度 100％、MHT MEPM で感度 100％, 特異度 83.0％、MHT ETPM で感度 100％, 特異度 74.5%であった。 CarbaNP 法で偽陰性を示した遺伝子型は、GES 型 3 株、 IPM-6 型 2 株であった。この 5 株を CAZ および IPM デ ィスクによる β ラクタマーゼ誘導を実施した後、再度 測定した結果IMP-6 型は 2 株とも陽性となった。MHT MEPM で偽陽性を示した株は p-AmpC 産生で 4 株, ESBL 産生で 1 株、MHT ETPM では p-AmpC 産生で 3 株, ESBL 産生で 9 株存在した。 【結論】各方法におけるCPE 検出の感度・特異度は共に 良好であった。一方、CarbaNP 法ではカルバペネム系薬 剤のMIC が低値を示す株や遺伝子型によっては陽性反応 を示しにくい場合があり、MHT では偽陽性を示す株の 存在が明らかとなった。現状ではCPE を 100％正確に捉 えられる方法はないと考えられるため、検出および判定 には十分な注意が必要であると考えられた。 【連絡先】078-382-6327
Mod-Hodge Test および CarbaNP 法によるカルバペネマーゼ産生腸内細菌検出に関する検討
◎中村 竜也1)、大沼 健一郎1)、小林 沙織1)、小林 泰菜1)、楠木 まり1)、矢野 美由紀1)、中村 正邦1)、林 伸英1) 国立大学法人 神戸大学医学部附属病院1)
【目的】Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)は医療関連感染を起こす代表的な菌である。院内で 分離される耐性菌としても頻度が高く、感染対策上極めて 重要な菌である為、迅速かつ正確に報告しなければならな い。今回、マンニット卵黄ベースの選択培地であるポアメ ディアMRSA分離培地2(ポアメディア、栄研化学)と発色酵 素基質培地であるMRSA-CI寒天培地(CI、極東製薬工業)、 CHROMagarTM MRSAⅡ寒天培地(CHROM、日本ベクトン・ ディッキンソン)の3種のMRSAスクリーニング培地におい て、日常検査でのMRSA検出の有用性を比較検討した。 【対象と方法】当院にて2014年7月に提出された臨床検体 121件を対象とした。35℃で24h、48h好気培養後に発育状況 の判定を行った。コロニー色調がCIは青緑色、CHROMは 赤紫色を示す菌株を、ポアメディアはマンニット分解と卵 黄反応を認める菌株をMRSAと判定した。MRSAの確認は グラム染色、PSラテックス試験(栄研化学)を実施し、 S. aureusと確認された菌株はMicroScan WalkAway 96SI (SIEMENS)にて同定・薬剤感受性試験を行った。 【結果】121件のうち25件(20.7%)にMRSAの発育が認められ た。MRSAの検出における感度・特異度は24h判定でポアメ ディア；72%・100%、CI；92%・94%、CHROM；92%・ 98%であった。48h判定でポアメディア；88%・99%、CI； 96%・73%、CHROM；100%・98%であった。CIは48h判定 で偽陽性株が増加し、全てcoagulase negative staphylococciで あった。MRSA以外の菌の発育率は24h判定でポアメディ ア；40%、CI；25%、CHROM；26%であった。48h判定で ポアメディア；53%、CI；48%、CHROM；41%であった。 【考察】CIとCHROMはMRSAの検出感度、MRSA以外の菌 の発育抑制がポアメディアより優れていた。CIは48h判定で 特異度の顕著な低下を認め、MRSAと誤判定する事例が散 見された。CHROMは発色基質により、経験年数問わず、 誰もが簡便に判定する事ができ、また感度・特異性も優れ ている事から、MRSAスクリーニング培地としての有用性 が期待された。 連絡先；0568-76-4131(内線2262)
MRSA スクリーニング培地の比較検討
◎小川 有里子1)、宮木 祐輝1)、西尾 美津留1)、大杉 崇人1) 小牧市民病院1)303
【目的】当院では2014 年 1 月に血液培養装置 BacT/ALERT （シスメックス・ビオメリュー）からBACTEC（日本ベク トン・ディッキンソン）に変更した。そこで、機器による 検出菌の比較検討を行ったので報告する。 【対象】2013 年 1 月から 2014 年 10 月までに血液培養採取 セット数19,797 から検出された全菌種を対象とした。使用 機器は2013 年 1 月から 12 月までの 12 か月間は BacT/ALERT、2014 年 2 月から 10 月までの 9 か月間は BACTEC である。陽性件数は、同一セット内で複数菌検出 があった場合はそれぞれの菌を1 株としてカウントした。 同一患者で同一菌が複数回分離された場合は、期間に関わ らず初回分離株のみをカウントした。 【結果】検出菌上位2 菌種は E. coli と CNS で、 BacT/ALERT、BACTEC の順に E. coli は 20.0％、24.8％、 CNS は 16.0％、14.2％で有意な差を認めなかった。その他 のStaphylococcus 属、腸内細菌科、P. aeruginosa、Candida spp.もほぼ同様の検出率で有意な差は認められなかった。 検出菌率の低い菌種では、S. pneumoniae は 2.1%、0.8%で BacT/ALERT の検出率が高く、Campylobacter spp.は 0.1%、 0.8%、Helicobacter spp.は 0.0%、0.3%で BACTEC の検出率 が高かった。 【考察】検出率の高い菌種に関しては2 機種間の菌の検出 率に違いは認められなかった。検出率の低かった菌種では S. pneumoniae は、BACTEC の検出率が高いとの報告がある が、当院での調査は同期間比較ではなく、また短期間であ るため、季節性やワクチン接種の影響も示唆され比較は難 しいと考えられた。Campylobacter spp.、Helicobacter spp.で はBACTEC 検出率が増加し、また検出件数が少ないため陽 転化までの時間比較はできないが、BACTEC は最長でも 4 日であり、培養ボトルの組成、使用機器により検出率に 差が生じた可能性が示唆された。このデータに調査期間を 延長したデータを追加し発表する。 連絡先：0948-22-3800（内線 2516）
血液培養自動分析装置
BacT/ALERT と BACTEC の検出菌比較
◎古野 貴未1)、廣門 順子1)、秋永 理恵1)、桑岡 勲1)、赤津 義文2)、大塚 喜人3) 飯塚病院1)、株式会社 日立製作所日立総合病院2)、医療法人 鉄蕉会 亀田総合病院3)304
【はじめに】Streptococcus agalactiae(以下 GBS)は膣内や腸 管内の常在菌であるが、新生児GBS 感染症の原因菌となっ ている。発症した場合に敗血症や髄膜炎など重篤化するこ とが報告されている。日本産婦人科学会の診療ガイドライ ンにおいても妊娠33～37 週の妊婦に GBS 検査を推奨する と共に、GBS 陽性あるいは前児が GBS 感染症の場合には、 分娩中に抗菌薬を投与するように勧告している。今回 我々はGBS の検出率向上にむけ、日本国内で発売されてい る3 社の選択増菌培地および選択分離培地の基本性能を比 較したので報告する。 【対象と方法】使用菌株は、GBS、S. pyogenes、E. coli、C. albicans、E. faecalis（以上 ATCC 株）と、それ以外の菌株 は臨床材料株を用いた。選択増菌培地と選択分離培地はト ッド・ヒューイットCNA ブイヨン、chromID StreptoB（シ スメックス・ビオメリュー）、ポアメディアGBS 半流動培 地、ポアメディアViGBS 寒天培地（栄研化学）、ランバク イックGBS、クロモアガーストレップ B 寒天培地（関東化 学）を用い、各培地上での発育の有無と集落の色調や大き さを比較した。培養条件は35℃好気培養で行った。 【結果】ポアメディアGBS 半流動培地は GBS の発育でオ レンジ色を呈し他の菌種は白色増殖を示したが、他の選択 増菌培地ではGBS を含む全ての菌種が白色増殖を示した。 今回検討した選択分離培地においてGBS は、赤コロニーを 形成した。またC.albicans は、chromID StreptoB で白青コ ロニー、S.pyogenes は、ポアメディア ViGBS 寒天培地、ク ロモアガーストレップB 寒天培地で微小な赤コロニー、E. faecalis は、chromID StreptoB で青～青白コロニーを形成し、 それ以外の菌株は発育阻止された。 【まとめ】3 社共に E. coliの発育が抑制された。また他菌 種でもコロニーの色や大きさからGBS の検出が容易であっ た。各培地の特性はあるものの選択増菌培地と選択分離培 地を併用することで、GBS の見落としが少なく、妊婦のス クリーニング検査において有用であると考える。 奈良県立医科大学附属病院 0744-22-3051(内線 1230）
