尾崎隆男

(1)

146

感染症学雑誌第86巻第 2 号

水痘ワクチンの抗体測定における免疫粘着赤血球凝集反応法の有用性

1）江南厚生病院こども医療センター，^2）同臨床検査技術科，^3）富山大学医学部ウイルス学，

4）北海道大学人獣共通感染症リサーチセンター，^5）阪大微生物病研究会

尾崎隆男

^１）

西村直子

^１）

後藤研誠

^１）

河邊慎司

^１）

舟橋恵二

^２）

白木公康

^３）

浅野喜造

^４）

前田一洋

^５）

奥野良信

^５）

（平成 23 年 10 月 11 日受付）

（平成 23 年 11 月 21 日受理）

Key words : varicella vaccine, immune adherence hemagglutination（IAHA）,neutralization test（NT）, enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）

序文

当院では開発当初より水痘ワクチン接種前後の抗体測定を免疫粘着赤血球凝集反応（IAHA；immune ad- herence hemagglutination）法で実施し，その高い抗体陽転率（93.6％〜98.6％）を報告してきた

^{１）〜３）}

．しかし，最近の調査での IAHA 抗体陽転率は 86.1％であり，以前に比べやや低い陽転率となっていた

^４）

．今回，抗体測定法に問題は無いのかという懸念の解消を目的に，水痘ワクチン接種前後の抗体測定を IAHA 法，酵素免疫測定法（gpELISA：glycoprotein-based enzyme-linked immunosorbent assay），中和法（NT；

neutralization test）の 3 種類の測定法で行い，水痘ワクチンの抗体測定における IAHA 法の有用性を検討した．

対象と方法

初回接種の IAHA 抗体非陽転により追加接種を実施した 22 例

^４）

中 10 例の初回接種前・後（4〜6 週）と追加接種後（4〜6 週）の計 30 血清検体について，操作は非常に煩雑であるが抗体測定の標準とされる NT 抗体を新たに測定し，既に測定してある IAHA 抗体価および gpELISA（IgG）

^５）^６）

抗体価と比較した．初回接種後に IAHA 抗体も gpELISA 抗体も陰性の群（11 例）と初回接種後に IAHA 抗体陰性で gpELISA 抗体陽性の群（11 例）の 2 群から，残血清量が比較的多い 5 例（15 検体）ずつを無作為に抽出した．10 例の初回接種時年齢は 1.1〜4.1 歳（中央値：2.4 歳）で，初回から追加接種までの期間は 112〜305 日（中央値：

175 日）であった．IAHA 抗体価は≧2 倍，gpELISA 抗体価は≧50 単位を陽性と判定した．NT 抗体価は 50％プラーク減少法

^７）^８）

にて測定し，以前の報告

^７）

に準じ≧4 倍を陽性と判定した．尚，本研究は当院臨床研究審査委員会の許可を受けている．

結果および考察

測定された抗体価を Table 1に示す．IAHA 抗体と NT 抗体の有無の一致率は 96.7％（29! 30）と高く，両抗体価で 4 倍以上の違いを認めたのは 6.7％（2! 30）であった．NT 抗体価と概ね一致していることから，

IAHA 法は水痘ワクチンの抗体測定法として有用と思われた．IAHA 法で認められた抗体陽転率の低下傾向は測定法の問題ではないと思われ，現行水痘ワクチンの免疫原性の変化についての精査が今後必要と考える．

最近の接種成績から，primary vaccine failure

（PVF）児（初回接種後 IAHA 抗体陰性の児）の追加接種後の平均 IAHA 抗体価は，初回接種で抗体陽転した児の接種後平均抗体価よりも高いことが示されており（p＜0.01）

^４）

，追加接種によるブースター効果と考えられている．今回，初回接種後に IAHA 抗体陰性で gpELISA 抗体が陽性の群（Case 6〜10）では，

双方陰性の群（Case 1〜5）よりも高い平均 gpELISA 抗体価（log

10

3.86 vs 3.12；p＜0.05）および平均 NT 抗体価（log

2

7.00 vs 4.25；p＜0.01）が，追加接種後に得られていた．PVF 児であっても免疫は低いレベルで誘導されていると思われ，両群間のブースター効果の差は初回接種で誘導された免疫の差によると考えられた．

短報

別刷請求先：（〒483―8704）愛知県江南市高屋町大松原 137 番地

江南厚生病院こども医療センター尾崎隆男

(2)

水痘ワクチンの抗体測定法 147

平成24年 3 月20日

Table 1 Antibody titers of the ten subjects who had neg- ative IAHA antibody titers after an initial varicella vaccination

Case No. Serum collection IAHA gpELISA NT

1-1 Before 1^st vaccination ＜2 ＜50 ＜4

1-2 After 1^st vaccination ＜2 ＜50 ＜4

1-3 After 2^nd vaccination 32 3650 32 2-3 After 2^nd vaccination 64 1592 16

3-3 After 2^nd vaccination 16 881 8

4-3 After 2^nd vaccination 64 5717 32

5-3 After 2^nd vaccination ＜2 133 ＜4

6-2 After 1^st vaccination ＜2 100 ＜4

8-2 After 1^st vaccination ＜2 94 4

6-3 After 2^nd vaccination 32 6473 32 7-3 After 2^nd vaccination 128 16948 ≧256 8-3 After 2^nd vaccination ≧256 10530 ≧256 9-3 After 2^nd vaccination 128 5747 128 10-3 After 2^nd vaccination 32 3027 64

文献

1）Ozaki T, Matsui T, Ichikawa T, Asano Y, Yamanishi K, Takahashi M：Clinical trial of the Oka strain of live attenuated varicella vaccine on healthy children. Biken J 1984；27：39―42.

2）Ozaki T, Nishimura N, Kajita Y：Experience with live attenuated varicella vaccine（Oka strain）in healthy Japanese subjects ; 10-year survey at pediatric clinic. Vaccine 2000；18：

2375―80.

3）Ozaki T, Nishimura N, Muto T, Sugata K, Kaw- abe S, Goto K,et al.：Safety and immunogenic- ity of gelatin-free varicella vaccine in epidemi- ological and serological studies in Japan. Vac- cine 2005；23：1205―8.

4）尾崎隆男：水痘ワクチン．臨床とウイルス 2010；38：400―8.

5）Provost PJ, Krah DL, Kuter BJ, Morton DH,

Schofield TL, Wasmuth EH,et al.：Antibody as- says suitable for assessing immune responses to live varicella vaccine. Vaccine 1991；9：111―6.

6）Krah DL, Cho I, Schofield T, Ellis RW：Com- parison of gpELISA and neutralizing antibody responses to Oka!Merck live varicella vaccine

（Varivax）in children and adults. Vaccine 1997；

15：61―4.

7）Asano Y, Takahashi M：Clinical and serologic testing of a live varicella vaccine and two-year follow-up for immunity of the vaccinated children. Pediatrics 1977；60：810―4.

8）Ozaki T, Nagai H, Kimura T, Ichikawa T, Suzuki S, Kito H,et al.：The age distribution of neutralizing antibodies against varicella-zoster virus in healthy individuals. Biken J 1980；23：

9―14.

(3)

尾崎隆男他 148

感染症学雑誌第86巻第 2 号

Utility of Immune Adherence Hemagglutination Method for Antibody Measurement of Varicella Vaccination

Takao OZAKI

^１）

, Naoko NISHIMURA

^１）

, Kensei GOTOH

^１）

, Shinji KAWABE

^１）

, Keiji FUNAHASHI

^２）

, Kimiyasu SHIRAKI

^３）

, Yoshizo ASANO

^４）

, Kazuhiro MAEDA

^５）

& Yoshinobu OKUNO

^５）

１）Department of Pediatrics and^２）Department of Clinical Laboratory, Konan Kosei Hospital,

3)Department of Virology, University of Toyama,

4)Research Center for Zoonosis Control, Hokkaido University,

5)Kanonji Institute, Research Foundation for Microbial Diseases of Osaka University

尾崎 隆男

水痘ワクチンの抗体測定における免疫粘着赤血球凝集反応法の有用性

尾崎 隆男

西村 直子

後藤 研誠

河邊 慎司

舟橋 恵二

白木 公康

浅野 喜造

前田 一洋

奥野 良信

Key words : varicella vaccine, immune adherence hemagglutination（IAHA）,neutralization test（NT）, enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）

当院では開発当初より水痘ワクチン接種前後の抗体 測定を免疫粘着赤血球凝集反応（IAHA；immune ad- herence hemagglutination）法で実施し，その高い抗 体陽転率（93.6％〜98.6％）を報告してきた

．しか し，最 近 の 調 査 で の IAHA 抗 体 陽 転 率 は 86.1％ で あり，以前に比べやや低い陽転率となっていた

．今 回，抗体測定法に問題は無いのかという懸念の解消を 目的に，水痘ワクチン接種前後の抗体測定を IAHA 法，酵素免疫測定法（gpELISA：glycoprotein-based enzyme-linked immunosorbent assay），中和法（NT；

neutralization test）の 3 種類の測定法で行い，水痘 ワクチンの抗体測定における IAHA 法の有用性を検 討した．

初回接種の IAHA 抗体非陽転により追加接種を実 施した 22 例

中 10 例の初回接種前・後（4〜6 週）と 追加接種後（4〜6 週）の計 30 血清検体について，操 作は非常に煩雑であるが抗体測定の標準とされる NT 抗体を新たに測定し，既に測定してある IAHA 抗体 価および gpELISA（IgG）

175 日）であった．IAHA 抗体価は≧2 倍，gpELISA 抗体価は≧50 単位を陽性と判定した．NT 抗体価は 50％ プラーク減少法

にて測定し，以前の報告

に準 じ≧4 倍を陽性と判定した．尚，本研究は当院臨床研 究審査委員会の許可を受けている．

測定された抗体価を Table 1に示す．IAHA 抗体と NT 抗体の有無の一致率は 96.7％（29! 30）と高く，両 抗体価で 4 倍以上の違いを認めたのは 6.7％（2! 30）で あった．NT 抗体価と概ね一致してい る こ と か ら，

IAHA 法は水痘ワクチンの抗体測定法として有用と思 われた．IAHA 法で認められた抗体陽転率の低下傾向 は測定法の問題ではないと思われ，現行水痘ワクチン の免疫原性の変化についての精査が今後必要と考え る．

最 近 の 接 種 成 績 か ら，primary vaccine failure

（PVF）児（初回接種後 IAHA 抗体陰性の児）の追加 接種後の平均 IAHA 抗体価は，初回接種で抗体陽転 した児の接種後平均抗体価よりも高いことが示されて おり（p＜0.01）

，追加接種によるブースター効果と 考えられている．今回，初回接種後に IAHA 抗体陰 性で gpELISA 抗体が陽性の群（Case 6〜10）では，

双方陰性の群（Case 1〜5）よりも高い平均 gpELISA 抗体価（log

3.86 vs 3.12；p＜0.05）および平均 NT 抗 体価（log

7.00 vs 4.25；p＜0.01）が，追加接種後に得 られていた．PVF 児であっても免疫は低いレベルで 誘導されていると思われ，両群間のブースター効果の 差は初回接種で誘導された免疫の差によると考えられ た．

Utility of Immune Adherence Hemagglutination Method for Antibody Measurement of Varicella Vaccination

Takao OZAKI

, Naoko NISHIMURA

, Kensei GOTOH

, Shinji KAWABE

, Keiji FUNAHASHI

, Kimiyasu SHIRAKI

, Yoshizo ASANO

, Kazuhiro MAEDA

& Yoshinobu OKUNO

〔J.J.A. Inf. D. 86：146〜148, 2012〕

尾崎隆男

尾崎隆男

西村直子

後藤研誠

河邊慎司

舟橋恵二

白木公康

浅野喜造

前田一洋

奥野良信

当院では開発当初より水痘ワクチン接種前後の抗体測定を免疫粘着赤血球凝集反応（IAHA；immune ad- herence hemagglutination）法で実施し，その高い抗体陽転率（93.6％〜98.6％）を報告してきた

．しかし，最近の調査での IAHA 抗体陽転率は 86.1％であり，以前に比べやや低い陽転率となっていた

．今回，抗体測定法に問題は無いのかという懸念の解消を目的に，水痘ワクチン接種前後の抗体測定を IAHA 法，酵素免疫測定法（gpELISA：glycoprotein-based enzyme-linked immunosorbent assay），中和法（NT；

neutralization test）の 3 種類の測定法で行い，水痘ワクチンの抗体測定における IAHA 法の有用性を検討した．

初回接種の IAHA 抗体非陽転により追加接種を実施した 22 例

中 10 例の初回接種前・後（4〜6 週）と追加接種後（4〜6 週）の計 30 血清検体について，操作は非常に煩雑であるが抗体測定の標準とされる NT 抗体を新たに測定し，既に測定してある IAHA 抗体価および gpELISA（IgG）

175 日）であった．IAHA 抗体価は≧2 倍，gpELISA 抗体価は≧50 単位を陽性と判定した．NT 抗体価は 50％プラーク減少法

に準じ≧4 倍を陽性と判定した．尚，本研究は当院臨床研究審査委員会の許可を受けている．

測定された抗体価を Table 1に示す．IAHA 抗体と NT 抗体の有無の一致率は 96.7％（29! 30）と高く，両抗体価で 4 倍以上の違いを認めたのは 6.7％（2! 30）であった．NT 抗体価と概ね一致していることから，

IAHA 法は水痘ワクチンの抗体測定法として有用と思われた．IAHA 法で認められた抗体陽転率の低下傾向は測定法の問題ではないと思われ，現行水痘ワクチンの免疫原性の変化についての精査が今後必要と考える．

最近の接種成績から，primary vaccine failure

（PVF）児（初回接種後 IAHA 抗体陰性の児）の追加接種後の平均 IAHA 抗体価は，初回接種で抗体陽転した児の接種後平均抗体価よりも高いことが示されており（p＜0.01）

，追加接種によるブースター効果と考えられている．今回，初回接種後に IAHA 抗体陰性で gpELISA 抗体が陽性の群（Case 6〜10）では，

3.86 vs 3.12；p＜0.05）および平均 NT 抗体価（log

7.00 vs 4.25；p＜0.01）が，追加接種後に得られていた．PVF 児であっても免疫は低いレベルで誘導されていると思われ，両群間のブースター効果の差は初回接種で誘導された免疫の差によると考えられた．