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実験講義(基本編)

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Academic year: 2021

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(1)

放射性同位元素取扱い実験

実験講義②

RI実験の概要

3つの実験の概要 いろいろな放射線計測のこと(ガラスバッジ含め) 液体シンチレーションカウンター、チェレンコフ光の説明 イメージングプレートと読み取り装置の説明 トレーサー実験の原理、計算方法の説明 汚染検査の説明(スミアチェック含め)

(2)

2

3つの実験の概要

1. ピペッターを使ったRIの希釈操作と、 液体シンチレーションカウンターによる放射線測定 2. イネを用いた32Pトレーサー実験:葉面吸収と経根吸収 3. サーベイメータによる汚染検査

(3)

3

使用するRI

32

Pを使用する

化学形は、H

3

PO

4 購入すると、 管理区域に届 けられる。

(4)

4

32

Pの放射性崩壊について

• β

崩壊(β

decay)

原子核内の中性子(n)は壊変して陽子(p)に変わる。 このとき、電子(e)と反ニュートリノ(ν)が放出される。

n

+

e +

ν

(反ニュートリノ) 32

P

32

S

+

e

+

ν

陽子15 陽子16 中性子17 中性子16

半減期

14.28日

β線最大エネルギー1.71MeV (※すべてが1.71MeVではない。 ニュートリノとエネルギーを分け合う。)

(5)

ピペッターを使ったRIの希釈操作と、 液体シンチレーションカウンターによる放射線測定

実習項目1.

目的 ・非密封RIの安全取扱いに関する基本的な操作を身につける。 ・溶液サンプルの希釈操作を学ぶ。 ・液体シンチレーションカウンターによる 放射線計測手法を習得する。

(6)

希釈操作

32P 50 ml 100 ml 100 ml 900 ml 900 ml ② 32P原液から、3段階の希釈を行う。 ① 9.95 ml 32Pを添加する前に、容器にあらかじめ 水耕液を入れておく。 この操作を通して、ピペッターの扱いに 慣れましょう。

(7)

放射線の計測

32P 50 ml 100 ml 100 ml 900 ml 900 ml ② 希釈した溶液の放射能を測定する。 ① 9.95 ml ・希釈操作の精度の確認 ・2種類の測定方法の、 放射線検出効率の評価 5 ml 50 ml 放射線計測

(8)

様々な放射線測定機器

Ge半導体検出器

NaI(Tl)シンチレーションカウンター

イメージング・プレート サーベイメータ(GM管)

(9)

放射線測定の原理

放射線のエネルギー

蛍光に変えて光を検出

電流を検出

【シンチレータ】

放射線を受けて

発光する物質

(10)

10

シンチレーションカウンターの原理

放射線

光電子増倍管

同時計数により、シグナル/ノイズ 比 を高める。

シンチレータ

光電子増倍管

シンチレータが発する光を検出している。

計数効率(%)=係数率(cpm)÷壊変率(dpm) ×100 が重要。 壊変率とは、真の放射能のこと(decay per minute)。

(11)

11

シンチレーションカウンターの原理

NaI(Tl)シンチレーションカウンター 液体シンチレーションカウンター 発光物質を 有機溶媒に溶かした 液体(カクテル)に、 サンプルを混ぜておく。 ヨウ化ナトリウム結晶(固体)を 蛍光体として装置内に内蔵。 電磁放射線の検出向き。 シンチレータ と 光検出器 の組み合わせ

(12)

チェレンコフ光

ある物質中において、

荷電粒子の速度>光の速度

になるときに発せられる光。

水中におけるベータ線の場合、

263 keV

以上のエネルギーを持つと、発光する。

Wikipedia

この光を光電子倍増管で検出することが可能。

(13)

放射線の計測

32P 50 ml 100 ml 100 ml 900 ml 900 ml ② ③ ① 9.95 ml シンチレーション光測定 と チェレンコフ光測定 50 ml 50 ml 放射線計測 50 μl

+

3 ml 液体シンチレーションカクテル or 水

(14)

クエンチング(消光)

様々な原因によって蛍光が弱くなる現象

色クエンチング

シンチレータの着色による、蛍光の吸収

化学クエンチング

サンプルに含まれる化学物質による、

放射線エネルギー吸収

(15)

補正

外部標準チャネル比法

クエンチングが強いと、弱い蛍光のカウント数

が増えることを利用。

係数率 cpm パルス波高 (エネルギー) クエンチング無し クエンチング強い 機器に内蔵している137Cs放射線源を各サンプルに照射して スペクトルの変化=クエンチングの強度 を算定して補正。

(16)

イネを用いた32Pトレーサー実験:葉面吸収と経根吸収

実習項目2.

目的 ・汚染を発生させず、さらに、 実験中の被ばくを低く抑えたRI実験手法を身につける。 ・オートラジオグラムの特性を理解する。 ・非密封RIを用いたトレーサー実験の基本手法を習得する。

(17)

トレーサー実験の概念

17

【トレーサー】

追跡者。

特定の物質の移動や変化を追跡するために使う、

微量添加物。

(18)

トレーサー実験の概念

18

「100万羽の群れの中に、

(19)

トレーサー実験の原理

19

100万羽の群れ全体から発せられている信号が10回

群れから一部の集団が離脱

離脱集団から2回の信号を検知したなら、 その集団には20万羽いる、と算出される。

物質の量 と シグナル強度 が比例関係にある

(20)

トレーサー利用の例:光合成

14

16 16 16 12 16

(21)

添加60秒後

藍藻(藍色細菌)に

14

CO

2

を添加する

添加7秒後 添加2秒後

(22)

炭酸固定反応の同定

カルビン・ベンソン回路

(23)

23

藻類による鉄の吸収特性

55Fe-鉄0.1μMを培地に添加し、吸収量を測定 ●Phaeodactylum tricornutum(珪藻) ■Emiliania huxleyi (円石藻) ▲Ostreococcus tauri (プラシノ藻) クエン酸鉄 EDTA鉄

(24)

イネの根によるセシウムとカリウムの吸収

K吸収速度 Cs吸収速度 溶液中のK濃度(mM)

K

+

とCs

+

の吸収は競合関係にある

水耕液液に 42K, 137Csを添加、 20分吸収 (Csは常に0.1 mM)

(25)

今回実習するトレーサー実験

イネ体内でのリン酸の動きを、32Pをトレーサーとして追跡する

根から吸収

葉面から吸収

実習では、1人1個体を使う。

(26)

実習項目1.との関連

32P 50 ml 100 ml 100 ml 900 ml 900 ml ② ③ ① 9.95 ml 5 ml 全量

溶液のリン酸濃度は 92 μM

32

P原液は○○ Bq/μl

(27)

27

オートラジオグラフィーによる画像化

ラジオグラフィー 物質の分布を、放射線を使って可視化する手法 オートラジオグラフィ― 試料中に含まれる放射性物質の分布を、 それが発する放射線を使って可視化する手法

(28)

28 オートラジオグラフィー

イメージングプレート(IP)とは

【輝尽性発光】 エネルギーを蓄積させておける蛍光体。 レーザー光で刺激すると、蓄積していたエ ネルギーに応じて発光する。 イメージングプレートは、 プラスチック板の上に 輝尽性蛍光体を塗布したもの。 【読み取り装置】 イメージングプレートに数μ ~ 数百 μmの ピッチでレーザー光を照射しながら発光を 集光し、電気信号として出力する。出力さ れた情報は、二次元画像として表示される。

(29)

イメージングプレート

:サンプリング~コンタクト

対照(リンドウ葉) ✓ 数値だけでは分からない情報を得る ✓ 核種は分別できない ✓ 標準液を使って検量線を作れば 定量することもできる

(30)

実習項目1.との関連

32P 50 ml 100 ml 100 ml 900 ml 900 ml ② ① 9.95 ml ・経根吸収と葉面吸収ともに、吸収溶液のリン酸濃度は 92 μM ・吸収させた溶液の32Pのシグナルは○○ 5 ml 5 ml 5 ml シグナル強度 リン酸含量( nmol )

希釈溶液を用いてIP用の検量線を作る

(31)

IP画像に基づいたリンの分布の定量解析

シグナル強度 リン含量( nmol )

Image J で画像解析を行う

・どの組織に、どのくらいのリンが分布しているかを算出

(32)

サーベイメータによる汚染検査

実習項目3.

目的

・ GMサーベイメータの使い方と、表面汚染の検出技術を身につける。 ・ 汚染があった場合の対処方法と基本的な除染方法を習得する。

(33)

表面汚染検査

• 非密封RIを使った実験では、

常に汚染のリスクがある。

• 汚染に早く気付かないと、意図せず汚染を広げ

る可能性がある。

• 実験終了時にも、使用した場所や物に汚染が無

いことを確認する。

(34)

表面汚染検査の方法

• 間接測法(スミア法)

対象物表面の一定面積(10cm×10cm)を

スミア濾紙等で拭き取り、付着した放射性物質

の量を測定する。拭き取り効率も考慮する。

• 直接測定法

対象物表面を、汚染検査用サーベイメータ

で走査しながら測定する。

(35)

GMサーベイメータの原理

• サーベイメータの検出部にはガスが封入され、

電圧がかけられている。

• 放射線によってガス分子が電離する。

• 電子が(+)極に移動しながら増幅され(“電

子なだれ”)、放電状態になり、電流が観測さ

れる。

(36)

直接測定法の実習

GMサーベイメータで

汚染箇所を探す

除染する(切り取り)

液体シンチレーション カウンターで測定し、

汚染度を算出

32P汚染のある方眼用紙 (2~3人で1枚を調べる)

汚染箇所と、汚染度(Bq)をレポートに書く

(37)

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