田中 愛 内容の要旨
論文内容の要旨
【目的】 脳虚血時における、メマンチンの脳細胞への細胞保護効果を検証する。そのために脳虚血時と 再灌流時の、NO 産生とヒドロキシルラジカル代謝へのメマンチンの効果を動態的に評価する。ま た虚血後の細胞壊死と酸化ストレス反応に対するメマンチンの影響を、病理組織学的に評価する。 【方法】 メマンチンを 25 μmol/kg の量で腹腔内投与された C57BL/6 マウス 6 匹と、同種 7 匹のコント ロール用マウスを用い、各種データを測定し二群間にて比較検討した。2％ハロセンによる吸入麻 酔で導入し、その後 0.5－1％ハロセンで麻酔を維持し、直腸温が 37.0－37.5℃に調整を行った。 虚血方法は、両側総頸動脈を MH クリップにて 10 分間完全閉塞した後に再開通をさせることによ り、マウスの前脳虚血モデルを作製した。リンゲル液を灌流させたin vivo microdialysis 用の プローベを両側線条体へ刺入し、in vivo microdialysis 法により NO 代謝産物とヒドロキシルラ ジカル代謝産物を、脳虚血前 30 分から再灌流 2 時間後まで、10 分間間隔で抽出し測定解析を行 った。NO 代謝産物は、グリース法を用いて NO2−と NO3−とを解析した。ヒドロキシルラジカル代謝 産物は、サリチル酸トラップ法を用いて 2,3-ジヒドロキシ安息香酸(2,3-DHBA)と 2,5-ジヒドロキ シ安息香酸(2,5-DHBA)とを測定した。また脳血流量(rCBF)を、右の大脳半球の頭蓋骨表面に設置 したレーザードップラープローベにて測定した。両群とも、脳虚血時に脳血流量(rCBF)の低下が ベースラインの 10％未満の血流低下となった例で検討した。また平均動脈血圧(MABP)を、マウス の右大腿動脈からポリエチレンカテーテルを挿入して測定した。カテーテルは虚血開始前に挿入 し、虚血直前の 60 分間の測定平均値をもって、虚血前の平均動脈血圧(MABP)のベースラインとし た。脳血流量(rCBF)、平均動脈血圧(MABP)ともに、再灌流後での二群間における数値の変動を比 較検証した。再灌流開始 72 時間後の海馬 CA1 ニューロンにおける、細胞壊死の程度と酸化ストレ スの程度を評価するために、病理標本を作製した。H.E.染色を用いて海馬の CA1 ニューロンの生 氏 名 田中 愛 学位の種類 博士（医学） 学位記番号 乙第1388 号 学位授与の日付 平成30 年 4 月 27 日 学位授与の要件 学位規則第3 条第 1 項第 4 号に該当 学位申請論文タイトル及び掲載誌Effects of Memantine on Nitric Oxide Production and Hydroxyl Radical Metabolism during Cerebral Ischemia and Reperfusion in Mice
マウスの脳虚血中及び再灌流後における NO 代謝産物とヒドロキシラジカル代謝へのメマン チンの効果
Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases 2018 年 1 月 13 日 掲載受理 学位審査委員（主査）教授 丸山 敬
