液 中 で 破 壊 さ れ る事 は,
19
0
0
全文
(2) 7654. 竹. 内. 亮. Fig. 2.. Hourly absorption curves in a visible range of crystalline bili rubin. Medium: N/10 Sodium hydroxide and N/10. Hourly absorption curves in a visible range of crystalline billi rubin Medium: N/10 Sodium hydroxide and N/10. phosphate buffer solution (pH 8.2) Condition. Letting Standing in s room. phosphate buffer solution (pH 7.2) Conditition. Letting standing in a room. (a) 0 hor (d) 6 hors (g) 5 das. (b) 1 hor (e) 2 days (h) 10 dye. い つ れ も陽 性 試 で あ つ た. 640mμ. 緑. 635, 410mμ. 443mμ Gmelin反 微 緑,. 7.2で. の 極 大,. に 極 大 が あ り,い. 8.2で. pH. 8.2で. つ れ もDiazo反. 応 遅 延 紅,. 2日 後 はpH. 9.2で. pH. 7.2で. 応 遅 延 淡 紅,. の 極 大 と500mμ. 附近 より. 417mμ. 延 紅, pH. 6.2で. 黄 微 緑,微. 清 は640,. 435mμ. に 極 大,. い つ れ もGmelin反. 色 沈 澱 は,以. 応 遅延. 黄 緑 で 微 量 の 黄 色 沈 澱 を 認 あ,上. 清 を 用 い る と640,. 性 で あ つ た.な. 黄. 附 近 よ り紫 外. 紫 外 部 に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 示 し. Diazo反 淡 紅,. 黄. 黄 色, 650,. 附 近 の 膨 隆 と500mμ. 黄 緑, 635mμ. 黄 緑,. 黄 微 緑, 650mμ. 部 へ 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 示 し, Diaza反 pH. (a) 0 hor (d) 6 hors (g) 5 days. 6.2で. 応 陽 性 で あ つ た. 640mμ. 9.2で. の 極 大, pH. の 極 大, pH. 附 近 の 膨 隆 と425mμ. (c) 3 hors (f) 3 days. 6時 間 後 はpH. 附 近 の 膨 隆 と400mμ. Fig. 3.. の 極 大,. 7.2,. 応遅. 量 黄 色 沈 澱 が あ り,上 Diavo遅. 応 陽 性, おpH. Diazo反. 延 紅 色 を 呈 し,. Pentdyopent反. 6.2に. 応陰. お け る 微 量 の黄. 後 経 過 中 引 続 き 認 め,測. 定 に は その 上. 清 を 用 い た.. (b) 1 hor (c) 3 hors (e) 2 days (f) 3 days (h)10 days. 3日 後 はpH. 近 の 膨 隆 と500mμ. pH. 淡 黄,. 640mμ. 附. 附 近 よ り紫 外 部 に 向 い 上 昇 す る. 曲 線 を 示 し, Diazo反 陽 性,. 9.2で. 8.2で. 応 遅 延 燈 黄, Gmelin反. 黄 微 緑, 592mμ. 応疑. の 極 大 と紫 外 部. に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 示 し, Diaza反. 応 遅 延 淡 紅,. Gmelin反. 592,. 応 陽 性.. の 極 大, pH. Diazo反. 6,2で. pH. 7.2で. 応 遅 延 淡 紅,. 黄 微 緑.. 応 陽 性,. 400mμ 応 陽 性.. の 極 大. Diavo Ehlrich氏Alde. 応 は い つ れ も陰 性 で あ つ た. 5日 後 はpH. で 淡 黄,. 620mμ. pH. 8.2で. 淡 黄,. 応 遅 延 澄 黄, 590mμ. 応 疑 陽 性,. pH. 7.2で. Gmelin反. 応. の極 大 と紫 外 部 に 向. い 上 昇 す る 曲 線 を 示 し, Diazo反 Gmelin反. 9上2. 附 近 の 膨 隆 と 紫 外 部 に 向 い 上昇 す. る 曲 線 を 示 し, Diazo反 陰 性,. Gmelin反. 640, 602, 435mμ. 反 応 遅 延 淡 紅, Gmelin反 hyd反. 黄 微 緑,. 応 遅 延 燈 黄.. 黄 微 緑, 592皿. μ. の 極 大 と 紫 外 部 に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 示 し, Diaso 反 応 遅 延 淡 紅, Gmelin反. 応 疑 陽 性, pH. 6.2で. 黄微.
(3) Bilirubinの. 分解 に関 す る分 光化 学 的研 究. Fig. 4.. Hourly absorptino curves in a visible range of crystalline bili rubin. Medium N/10 Sodium hydroxide and N/10 phosphate buffer solution Condition. Letting standing in a room (a) 0 hor (b) 1 hor (c) 3 hors (d) 6 hors (e) 2 days (f) 3 days (g) 5 days (h) 10 days. 7655. に膨 隆 が現 われ,時. 間 の 経 過 と共 に650〜555mμ. に汎 る吸 収 帯 と,そ の 中 に複 雑 な 小 さな 吸収 極 大 を 示 し,こ れ は 更 に経 過 を 追 う こと によ り消失 す る. そ の速 度 はAlkali度 応 のpHに. の高 い 程 早 く起 る. Diazo反. よ る変 化 は, pH. 7.8よ り塩 基 性 側 は迅. 速 反 応, 6.8よ り二 相性 迅 速 反応,6.6よ. り酸 性側. は遅 延 反 応 を 呈 す と云 う木村 の報 告 と一 致 した.又 Bilirubin‑Azo色. 素 発 色 の程 度 は,遅 延 反 応の側 と. して そ の発 色 は 反 応1時 間 以 内 に始 まつ て 強 度 も最 高 に 達 し, 29時 間放 置後 は色 調不 変 か,寧 ろ減退 し て い た.放 置 時 間 の 経 過 に よ る吸 光 曲線 の 変化 と Diazo反. 応 との関 係 は, Bilirubinの 吸収 極 大 の消. 失 に遅 れ てDiazo反. 応澄 茶 色 を 示 し, Gmelin反. 応. の消 失 は更 に遅 れ る.こ の黄 色 よ り黄 緑 色 を経 て 黄 色 と変 る色 調 の 変 化 と, Diazo‑Gmelin反. 応 の消 失. 経 過 も吸光 曲線 の変 化 に比 例 し, BilirubinはpHの 高 い 溶 液 中 に於 て酸 化 速 度 の早 い 事 が あ る.故 に以 後 の研 究 は酸 素 酸 化 速度 の一 番 早 いpH. 9.2に 於 て. 行 つ た. 結 晶Bilirubia 0.4mgをN/10苛 に溶 か した後, N/10燐 10ccと. 性 曹 達水 溶 液. 酸 塩 緩 衝 液 を加 え, pH 9.2,. した ものを 経 時 的 に そ の1.0cc宛. 取 出 し,. 同 一pH:の 燐 酸 塩 緩 衝 液 に稀釈 し,紫 外 部 吸光 曲線 の変 化 を 観 察 した(Fig. 光 曲線 は270mμ. 5).反. 応 直 後 は黄 色 で 吸. に 低 い 吸 収 極 大 を示 し, 255mμ. 附 近 よ り短 波長 側 に 向い 上 昇 す る曲線 を 示 した.酷 酸 々性 亜 鉛末 を加 えて も色 調 の変 化 な く,発 煙 硝 酸 緑, 640,. 595,. 紅, Gmelin反. 412mμ. の 極 大,. Diazo反. 応 遅延淡. 応 陽 性 で あ り, Pentdyopent反. い つ れ も陰 性 で あ つ た. 10日 後 はpH. 滴 下 に よ り紅 色 となつ た. 3時 間 後 は黄 緑,280mμ の 極 大 と252mμ. 附 近 よ り短 波長 側 に 向 い上 昇 す る. 微 黄,. 曲線 を 得,酷 酸 々性 亜 鉛末 添加 色 調不 変,発 煙硝 酸. 吸 光 曲 線 は 紫 外 部 に 向 い 上 昇 す る の み と な り,. 滴 下 に よ り燈 色 とな つ た. 6時 間 後 には緑 黄, 272mμ. pH. の極 大 と短 波 長 側 に 向 い上 昇 す る曲線 を 得,酷 酸 々. 8.2で 淡 黄,. 620mμ. 上 昇 す る 曲 線 を 示 し, pH. 9.2で. 応は. 附 近 の膨 隆 と紫 外 部 に 向 い 7.2で. 淡 黄,. 650mμ. の 膨 隆 と紫 外 部 に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 示 し, pH で 淡 黄,. 635mμ. 6.2. 附 近 の膨 隆 と 紫 外 部 に 向 い上 昇 す. る 曲線 とな り, Diazo反 Gmelin反. 附近. 応 陰 性,. 応 は い つ れ も遅 延 燈 黄,. Schlesinger反. 応 陰 性 で あ つ. た.. な る. 2目 後 は黄 微 緑, 270mμ. の 極 大 を 示 し,酷. 酸 々性 亜 鉛 末 添加 で色 調 槌 色 した の で,試 験 管底 に 沈 ん だ亜 鉛 末 を 除 き上 清 を 別 試験 管 に移 し. 24時 間 後 に観 察 す る と復 色 して い た が,発 煙 硝 酸 滴下 に よ り無 色 とな つ た液 は24時 間 後 の 観察 で復 色 しなか つ. 以上 の 如 く木 村 が 云 うよ うに 結 晶Bilirubinは Alkali溶 液 に溶 解 直 後 はpHが. 性 亜鉛 末添 加 色 調 不変,発 煙 硝 酸滴 下 に よ り無 色 と. 酸 性 側 に な る につ. た. 3日, 5日,. 10日 後 も色 調 は夫 々淡 黄,淡 黄,. 微 黄 とな るが,吸. 光 曲 線 は 形 に著 変 な く, 270mμ. れ,そ の吸収 極 大 は長 波長 側 に移 動す るが,時 間 の. の吸 収 極 大 の 高 さが3日 後 に最 高 とな り以 後漸 次 低. 経 過 と共 に,木 村, Heilmyer7)の. 下 して行 き,上 記 定 性 反 応 は2日 後 の もの と同様 で. 云 う 如 く長 波長. 側 の吸 光 係数 は増 加 し,短 波長 側 で はそ の 低下 を来. あつ た. 20日 後 は微 黄, 270mμ. し,曲 線 は平 坦 化 し,吸 収極 大 は短 波 長 側 に移 動 し. 平 坦 とな り, 250mμ. つつ 消失 す る.更 に反 応1時 間 後 よ り650mμ. 附近. の 極 大 は 消 失 して. 附 近 よ り短 波 長 側 に 向 い上 昇. し,定 性 反 応 は2日 後 の それ と同様 で あつ た..
(4) 7656. 竹. 内. Fig. 5.. Hourly absorption curves in a ultraviolete range of crystalline bilirubin Medium: N/10 Sodium hydroxide and N/10 phosphate buffer solution Condition: Letting standing in a room. Pentdyopent物. 性 曹 達 水 溶 液 及 びN/10燐 9.2,. 10ccに. の も の を 岩 原 法8)に dyopent物. 溶 か し,室. Absorption pent tance. and. Spectra. of Pentdyo. Propentdyopent.. Subs. 温 放 置3日. 後. よ り 脱 色 し て 得 たPropent. 質 を 測 定 す る と523mμ. を 示 し た(Fig.. 6).. Bilirubinよ. 物 質 の 吸 収 極 大 は529mμ. に吸 収 極大. り のPentdyopent. と云 わ れ て い る が,著. の 実 験 で は 測 定 器 具 の 相 異 の た め か5回 い づ れ も523mμ. 経 時 的 に10cc宛. 同 様pH. 9.2,. 者. の 測 定 で,. に 極 大 を 示 し た.次. 3.2mgを. に. を 更 に 同 氏 法 に よ り発 色 さ せ た. Pentdyopent物. い で 結 晶. 80ccに. 溶 か し,. 取 出 し前 同 様 のPentdyopent呈. 色 反 応 を 行 い, 523mμ Pentdyopent物. の 吸 光 係 数 を 検 した 結 果. (Tab.. 1). わ れ,. 3日 後 に 最 高 値 を 示 し,以. 質 は 反 応6時. 間 後 よ り現. 後 は 減 少 して 行 つ. た. Bingold9)に. 6.. 酸塩. 質 の 吸 光 曲 線 を 測 定 す る と, 260mμ. 吸 収 極 大 を 示 し.之. Bilirubin. Fig.. 質 に つ い て 見 る と,結 晶Bilirubin. 0. 4mgをN/10苛 緩 衝 液 でpH. 亮. よ る とBilirubinを. 直 後 はPentdyopent物. 硝 酸 に溶 か した. 質 は 証 明 さ れ ぬ が,数. 時間. 空 気 中 に 放 置 し て 淡 緑 色 を 呈 し,吸 光 曲 線 で640mμ に 吸 収 極 大 を 見 る 頃 にPentdyopent物. 質が出 ると. 記 して い る が,著. 液 中で の放. 者 の 実 験 はAlkali溶. Table 2. Extictions coefficient of Pentdyopent-Substance. Crystalline Bilirubin is dissolved in N/10 sodium hydrooxide solution and mixed with N/10 phosphat buffer solution. H is tested after letting standing in a room temperture for 3 days..
(5) Bilirubinの. 分 解 に関 す る分光 化 学 的研 究. 置 で は あ る が, Pentdyopent物. 質 は 溶 解 直 後 陰 性 で,. 6時 間 後 黄 緑 色 を 呈 し640mμ. 附 近 に膨 隆 を 認 め る. 中 で280mμ10). 以 上 の 実 験 で は反 応 開 始 時 のBilirubin濃 い た め,分. 吸 収 極 大 はAlcohol,. 11)12)に あ る と 云 わ れ,又. Dioxan. にBilirubinを. 解 してChromatographyを. 現 わ れ る物 質 を 取 出 そ う と試 み た,. 光 曲 線 の 吸 収 極 大 は 同 一 物 質 で も 溶 媒 に よ り異 つ た. 先 づ 対 照 と して 結 晶Bilirubinを. は 有 機 溶 媒 の 場 合 よ り短 波 長 側 に. 移 動 す る13)14)と 云 わ れ て い る が,著 外 部 吸 光 曲 線 は,溶. 者 の場合 の紫. 解 直 後 に も270mμ. 収 極 大 を 認 あ た が,之. に 小 さい 吸. は 間 もな く280mμ. に 移 動 し,. 溶 か しpH. 9.2と. し,可. 上 記 の方 法 で. 視 部 吸 光 曲 線 を 描 い た 後,. 直 ち に1上25倍 のN/10塩. 酸 水 溶 液 とChloroformを. 加 え て よ く振 盈 し,色 素 をChloroformに る とChloroformは. 黄 色 と な り,之. と の 間 に微 量 の 緑 色 層 が 出 来 る.こ. は,吸. 層 の 吸 光 曲 線 を 描 く と(Fig.. に あ り,而. 反 応 は 酷 酸 々性 亜 鉛 末 還 元 反 応 が2日 硝 酸 々 化 試 験 は6時. dyopent物. 後 よ り,発. 煙. 間 後 よ り陽 性 とな つ て い る か ら. 2日 以 後 に 現 わ れ た270mμ はBilifuscinと. もその 間 の定 性. の吸 収極 大 を 示 す物 質. 考 え ら れ る.そ. 質 はBilirubinが. し てPropent. 酸 化 さ れBilifuscin 者. の 実 験 で もPentdyopent反. 間. 後 よ り現 わ れ, Bilifuscin形. 成 は2日. 後 よ り始つ て. い る.. Fig. 7.. 7)の. 者 が426mμ,後. にChloroform層. 如 く,そ. 者 が450mμ. はDiazo反. 陽 性 で,岩. 田17), Muller. Lembergの. 記 載 と一 致 す る.. 溶 解 しpH. 9.2と. u.. Engell8),. 8〜13)を. は,母. 8A)黄. 液 は(Fig.. 見 る と,反 微 緑,吸. 応 疑 陽 性,. 間後. 光 曲 線 は420mμ. 応, Gmelin反. 応共 陽. 加 え認 上層部 に 出来. 426,. 381mμ. は黄 緑. に吸 収極 大 を 有. Gmelin反. 之 をChromatographyで 436mμ. 応3時. 溶 か し たMethanol層. 光 曲 線 は670,. し, Diazo反. Heilmyer,. 上 記の 方法 で. の 際Chloroformを. た 層 をMethanolに て,吸. 応共. し酸 素 酸 化 後Chromatographyを. 行 つ た も の(Fig.. 性 で あ る.こ. の吸 収. と な り,更. 応, Gmelin反. に 吸 収 極 大 を 有 し, Diazo反. Absorption curves of N/10 sod ium hydroxide Solution and N/10 phosphate buffer solution of cry stalline bilirubin, and those of chloroform solutions transferred from the former.. のChloroform. そ こで 結 晶Bilirubin約2.3mgを. と な る際 の 中 間 産 物 と 云 わ れ て い る15)16)が,著 応 は 反 応 開 始 後6時. 極 大 は,前. 移 行 させ. と上 の 緩 衝 液 層. 2日 後 黄 微 緑 と な つ て か ら10日 後 微 黄 色 を 呈 す る 間 収 極 大 が270mμ. 高 濃 度 に溶. 用 い て 反 応進行 過程 中. 紫 外部吸. 場 所 に 現 わ れ,水. 度 が薄. 解 過 程 中 出 来 る物 質 を 詳 細 に 検 討 す る事. が 困 難 で あ つ た の で,次. 時 始 あ て 陽 性 と な つ た. 一 方Bilirubinの. 7657. 応 陽 性 で あ り,. 分 劃 す る と(Fig.. に 極 大 を 示 し, Diazo反. 応,. 応. 共 陽 性 の 黄 色 層(c),. 650,. Diazo反. 応 共 陽 性 の 緑 色 層(b)と. 650,. 応, Gmelin反. 378mμ. 421mμ. 8B). Gmelin反. に極 大 を示 し. に 極 大 が あ り, Gmelin反. の 緑 層(a)が. 得 ら れ た.母. 抽 出 し たChloroform層. 液 よ りChloroformに. は 黄 微 緑 で650,. に 吸 収 極 大 が あ り, Diazo反. 黄(b)で. 夫 々450,. つ れ もDiazo反. 反 応 共 陽 性 の 層 と,黄. 微 緑 て650,. 応,. 応共陽. 行 う と(Fig.. に 吸 収 極 大 が あ り,い. 大 を 有 しDiazo反. 450mμ. 応, Gmelin反. 性 で あ り, Chromatographyを は 黄(d),橙(c),橙. 応 の み陽 性. Gmelin反. 8C)で. 445,. 440mμ. 応, Gmelin. 438mμ. に 吸収 極. 応 共 陽 性 の層 が 得. られ た. 所 で650mμ. に 吸 収 極 大 を 有 し, Gmelin反. み 陽 性 の 緑 色 物 質 は, Lembergの. 記 載 とは や や 異. る が,岩 田19),天 田20)の 記 載 したBiliverdinの 極 大 と 一 致 す る の で,之 450mμ. はBiliverdinで. に 吸 収 極 大 を 有 し, Diazo反. 応 共 陽 性 の 黄 色 物 質 は, Fig.. 応の. 吸収 あ り,. 応, Gmelin反. 7のBilirubin. Chloro‑.
(6) 7658. 竹. Fig.. 8.. Absorption. 内. 亮. curves of N/10 sodium. B). hydroxide and N/10 phosphate buffer solutions after letting standing in a room for 3 hours and those of separated zones on silicagel A). Before. Methanol. Phase. (B. C.). Before the Chromatogramm wish green After the Chromatogramm. yello. the Chromatogramm. (a) (b) (c). yellowish green green yellow. い る と解 釈 さ れ る. 反 応3日. (a) (b) (c). Mother liquid yellowish sight green Methanol Phase yellowish green Chloroform Phase yellowish slight. 光 曲 線 は650mμ. ち 反 応3時. 間 後 のBilirubin. 溶 液 よ り得 たChloroform層 を 用 い 分 離 し た(d)層. c)層. る. Alkali. 附 近 の 膨 隆 と500mμ. は,定. 性 反 応 と その 吸 光 曲. は そ の 定 性 反 応 と,日. 650,. 375mμ. あ る.. Bilirubin層(b)と,緑. に な る と 述 べ た こ と と 考 え 合 わ せ る と, Bilirubin. に 極 大 を 示 しDiazo反. の や や 変 化 し た も の にAlcoholが. あ り, Chromatographyを. 長 へ 移 動 し たBilirubinな. Methanol層. 加 つ た た めEster. 収極 大 の位 置 が やや 短 波. か ら 分 離 した(c)層. 層 はBilirubinとBiliverdinの Biliverdinに376mμ. あ る上. はBilirubin, 混 合 層,. (a)層. は 緑 色 で 吸光 曲線 は 応 のみ 陽性. 行 う と,黄 色 の420mμ 応, Gmelin反. 応 共 陽 性 の. 色 で650mμ. に極 大 を 示 し に500mμ. 々437,. 410mμ. は 黄 微 緑 で650, 応, Gmelin反 行 う と,黄,黄. に 極 大 を 有 し, Diazo反. 反 応 共 陽 性 のBilirubin層(c,. る こ とが わ か る, (a)層. 少 量 を 含 むBilirubinで. 応. 附. 近 よ り 紫 外 部 に 向 つ て 上 昇 す る 曲 線 を 含 む 層(a). 伝21)がBilirubin. と に 分 れ る, Chloroform層. 化 の 方 向 に 反 応 進 行 し,吸. Gmelin反. 応 の み 陽 性 のBiliverdin層. は 水 溶 液 と して 放 置 す る と変 色 し つ つ 不 安 定 な 物 質. はBilirubinの. 応 陰 性,. で あ り, Chromatographyを. Gmelin反. 附 近 よ り紫. に 極 大 を 示 し, Gmelin反. に 極 大 を 示 しDiazo反. か らChromatography. 線 が 前 記 対 照 曲 線 と 一 致 す る の でBilirubinで 又(b,. 液 は 黄 緑 色 を 呈 し,吸. の み 陽 性 で あ る. Methanol層. 液 の 吸 光 曲 線 と等 し い か らBilirubinな. こ と が 分 る.即. 9)母. 外 部 に 向 い 上 昇 し, Diazo反. green form溶. 後 は(Fig.. (b) は. に極 大 を 有 す る物質 を含 ん で. 650mμ に386mμ た.. の 極 大 とGmelin反. b)と. 435mμ. 応 共 陽 性 で 微緑 で夫 応, Gmelin 淡 黄微 緑 で. 応 の み 陽 性 のBiliverdin. に 極 大 を 有 す る 物 質 を 含 む 層(a)を. 得.
(7) Bilirubinの. C). Chloroform. (B. C.). (a) (b) (c) (d). Phase. Fig. 9.. Before the Chromatogramm swish slight green After the Chromatogramm. yellowish slight orangish yellow orange yellw. 5日 後 は(Fig.. 10)母. Pentdyopent反. 液 は 緑 黄,吸. 反 応 の み 陽 性,. 応 陰 性,. 373mμ. Gmelin反. 応. Pentdyopent物. 色. 附 近 よ り紫 a)を. 得 た が,. 質 は 証 明 さ れ な か つ た.. Chloroform層. は 黄 緑,. 有 しGmelin反. 応 の み 陽 性 で あ る, Chromatography. 600,. 378mμ. 430mμ. の 吸 収極大を. に 極 大 を 示 しDiazo,. 大 を 有 しGmelin反. 緑 で650mμ. の極. 応 の み 陽 性 のBiliverdinに. に 極 大 を 示 し, Gmelin反. のBiliverdinに500mμ す る 物 質 を 含 む 層(a)に. Mother liquid yellowish green Methanol Phase green Chloroform Phase yellowish slight. び淡 黄. 応 の み陽 性. 附 近 よ り紫 外 部 に 向 い上 昇 分 れ た が,. 物 質 及 び600mμ. に極 大 を 有す る物 質 は 証明 出来な. か つ た. 10日 後 は(Fig.. 11)母. Pentdyopent. 液 は 黄 緑,. 580mμ. 附近の. 膨 隆 と 紫 外 部 に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 示 し, Gmelin 反 応 疑 陽 性, Pentdyopent反 際 のMethanol層. graphyを. 行 う と,緑. した. Chloroform層. Gmelin反. 605,. の. 366の 吸 収 極. 応 の み 陽 性 で, Chromato 色 で5日. 物 質 の み を 得 た が605,. 500mμ. 応 陽 性 で あ つ た.こ. は 緑 色 で650,. 大 を 示 し, Gmelin反. Gmelin反. に極 大 を 有 す る 物 質 を 含 む 層(b)及. 緑 で650mμ. (a) (b) (c). green. の 極 大 を 示 し, Gmelin. 外 部 に 向 い 上 昇 す る 物 質 を 含 む 層(b,. 応 共 陽 性 のBilirubin層(c),黄. Before the Chromatogramm. 光 曲 線 は3日. 行 う と 黄,緑. 反 応 の み 陽 性 のBiliverdinに500mμ. を 行 う と434mμ. A). 極 大 を 有 しGmelin. Chromatographyを. で 吸 光 曲 線 は共 に640mμ. Bilirubin.. Absorption curves of *T/10 Sod ium hydroxyde and N/10 phosp hate buffer solutions after lett ing standing in a room for 3 days and those of separated zones on silica gel. yello. 応 陽 性 を 示 し た. Methanol. 層 は 緑 で 吸 光 曲 線 は650,. 7659. green. 後 の そ れ と 等 し く, Diazo反 疑 陽 性,. 分 解 に 関 す る分 光 化 学 的 研 究. 後 の(a)層. 366mμ. と等 しい. の 吸 収極 大 は消 失. は 黄 緑 で, 622mμ. の 極大 と. 附 近 よ り 紫 外 部 に 向 い 上昇 す る 曲 線 を 示 し, 応 の み 陽 性, Chromatographyを. 淡 黄 で, 500mμ. 行 う と.. 附 近 よ り波長 短 側 に 向 い 上 昇 す る. の み で 紫 外 部 に も吸 収 極 大 の な い 吸 光 曲 線 を 示 し,.
(8) 7660. 竹. B). 内. 亮. MethanolPhase. Fig. 10.. Absorption curves of N/19 sod ium hydroxyde and N/10 phosp hate buffer solutions after lett ing standing in a room for 5days and those of separated zones on silicagel. (B. C.). (a) (b) C). Before the Chromatogramm gtreen After the Chromatogramm green yellow. Chloroform. Phase. A). Before. (a) (b) (c). Mother liquid greenish yellow Methanol Phase green Chloroform Phase yellowish green. Diazo反. the Chromatogramm. 応 陰 性, Gmelin反. 応 疑 陽 性,発. 下 に よ り瞬 時 無 色 と な り,酷. 酸 々性 亜 鉛末 添 加 で 裾. 色 す る 物 質 を 有 す る 層(b)と, 大 とGmelin反. 煙硝酸滴. 645mμ. 応 疑 陽 性 のBiliverdinに. の 吸 収極 紫 外部 に. 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 有 す る 物 質 を 含 む 淡 黄 緑 層(a) が 得 ら れ た が, Bilirubin,. 622mμ. の 極 大 は 証 明 出 来 ず,. Pentdyopent物. 質 は ど の 分 劃 に も証 明. 出 来 な か つ た. 15日 後 は(Fig.. 12)母. 液 は 黄 緑 で,. 570mμ. 附近. の 膨 隆 と紫 外 部 に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 得, Pentdyo. (B. C.). (a) (b) (c). Befor the Chromatogramm wish slight green After the Chromatogramm light yellowish slight green yellowish slight green yellow. yello. pent反. 応 の み 陽 性 で あ つ た. Meehanol層. 605mμ. の 吸 収 極 大 あ り, Gmelin反. 反 応 陽 性 で あ り, Chromatographyを 示 し, 示 し,定. は 緑色 で. 応, Pentdyopent 行 う と緑 黄 を. 5日 後 の そ れ と 等 し い 経 過 を 示 す 吸 光 曲 線 を 性 反 応 で はGmelin反. 応 陽 性 で, Biliverdin,. 応, Pentdyopent反. Pentdyopent物. 質 を 含 ん でい.
(9) Bilirubinの. B). MethanolPhase. (B. C.) (a) (b) C). 分 解 に 関 す る分 光 化 学 的 研 究. Before the Chromatogramm After the Chromatogramm green yellow. Chlhroform. Fig. 11.. 7661. Absorption curves of N/10 sod ium hydroxide and N/10 phos hhate buffer solutions after letting standing in a room for 10 days and those of separated zones of silica gel. A). Before the Chromatogramm. (a) (b) (c). Mother liquid yellowish green Methanol Phase green Chlorofom Phase yellowish green. green. Phase. る. Chloroform層. は 色 調,吸. 光 曲 線,定. 性反応共. 10日 後 の そ れ と等 し く, Chromatography後. は短 波. 長 側 に 向つ て上 昇 し紫 外部 に も吸 収極 大 の な い 曲線 を 示 し,す. べ て 胆 汁 色 素 定 性 反 応 陰 性,発. 煙硝酸滴. 下 で 無 色 と な り,酷. 酸 々性 亜 鉛末 添加 で 槌 色す る淡. 黄 色 層 を 得 た.然. し622mμ. の 極 大,. Pentdyopent. 物 質 は 証 明 さ れ な か つ た. 20日 後 は(Fig.. 13)母. 液 黄 微 緑,吸. 光 曲 線 は紫 外. 部 に 向 い 上 昇 す る の み と な り,定. 性 反 応 で は. Pentdyopent反. 応 の み 陽 性 で あ る. Methanol層. 緑 黄 で600mμ. の 極 大 と紫 外 部 に 向 い 上 昇 す る 曲 線. を 示 し, Pentdyopent反. (B. C.). (a) (b) (c). Before the Chromatogramm wish green After the Chromatogratogramm light yellowish green yellowish green yellow. は. 応 の み 陽 性 で, Chromato. yello graphyを. 行 う と 同 じ く緑 黄 で あ る が600mμ. 収 極 大 は 消 失 し,紫. の吸. 外 部 に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 得,. Pentdyopent反. 応 の み 陽 性 で あ つ た. Chloroform. 層 は 黄 微 緑,紫. 外 部 に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 示 し,胆.
(10) 7662. 竹. B). Methanol. Phase. C). A). Absorption curves of N/10 sod ium hydroxide and N/10 phos phate buffer solution after letting standing in a room for 5 days and those of separa rated zones of silica gel Before the Chromatogramm. (a) (b) (c) B). Mother liquid yellowish green Methanol Phase green Chloroform phase yellowish green Methanol Phase. green. green Chloroform. Phase. (B. C.). Before the Chromatogramm wish green After the the Chromatogramm. (a) (b). 亮. Fig. 12. (B. C.) Before the Chromatogramm After the Chromatogramm (a). 内. light light. yellowish yellow. green. yello. (B. C.) Before the Chromatogramm (a) greenish yellow.
(11) Bilirubinの. C). 分解 に関 す る分光 化 学 的研 究. ChloroformPhase. Fig. 13.. A). (B. C.). Before the Chromatogramm wish green After. (a). light. 7663. Absorption curves of N/10 sod ium hydroxide and N/10 phos phosphate buffer solutions after letting standingin a room for 20 days and those of separated zones of silica gel. Before the Chromatogramm. yello. the Chromatogramm yellow. 汁 色 素 定 性 反 応 は す べ て 陰 性 で, Chromatography 後 は15日 後 の そ れ と等 し い 物 質 を 得 た. な お 定 性 反 応 中, Ehrlich氏Aldehyd反 Schlesinger反. 応,. 応 は い つ れ の 場 合 も陰 性 で あ つ た.. 以 上 の 如 くBilirubinのAlkali溶. 体 の 変 化 にChromatography施. え たAlcoholの. 作 用 も加 わ り,そ. Mother liquid yellowish slight green (b) Methanol Phase greenish yellow (C) Chloroform Phase yellowish slight green. 液 中 で空 気 中. の酸 素 に よ る 酸 化 分 解 過 程 で はBillmbinは Bilirubin自. (a). 先づ 行 中加. の吸 光 曲線 の極 大. を 短 波 長 側 に 移 動 しつ つ 減 少 す る が,母. 液 がDiazo. 全 経 過 を 通 じ, Chloroform層 す る の は,. 反 応 陰 性 とな り 吸 収 極 大 の 認 め ら れ な くな つ た 後 も,. され, Methanol層. 行 う こ とに よ り分離 証 明 中 で3日. 後 ま で, Chloroform層. dyopent物. 後 ま で 存 在 す る. Methanol中. Biliverdinは,そ. 間 層 の. の 一 部 はChloroform抽. 溶 溶 性,. 溶 性 な る こ とを 示 し て い る, Pent 質 は 反 応5日. に 増 量 し, Methaneol層 る21). Chloroform層 中 は5日. まで 存 在. BiliverdinがMethanol可. Chloroform難 な おChromatographyを. に は10日. 質 は, Diazo反. 後 よ り母 液 中 に 現 わ れ 次 第 中 に も15日 後 よ り 認 あ られ. に10日 以 後 に 現 わ れ る黄 色 物. 応 陰 性 で500mμ. 附 近 よ り短 波 長 側. 出 の際 加 に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 有 し,紫. え た 塩 酸 に よ り酸 化 さ れ て 出 来 た こ と は,反. 応直後. 280mμ. 外 部 吸収 曲線 で. の 吸 収 極 大 は 不 明 で あ る が,す. べ て の胆 汁. で も微 量 の 中 間 層 が 認 め られ る点 か ら明 らか で あ る 色 素 定 性 反 応 陰 性 で,酷 が,大. 部 は 空 中 の 酸 素 に よ る 酸 化 の た め に生 じ,そ. の 形 成 量 は650mμ. の吸 光 係 数 の 高 さを 観 察 す る と. 5日 後 が 最 高 で 以 後 次 第 に 減 少 し,之 640mμ. に 移 動 して い る. Biliverdinは. じMethanol層. も吸 収極 大 を 全 経過を通. に 多 く含 ま れ, Methanol層. 中には. 色 し,発 cinと. 酸 々性 亜 鉛 末 添 加 に よ り 槌. 煙 硝 酸 滴 下 に よ り無 色 と な る か らBilifus. 考 え られ る.. 次 に 前 回 同 様 結 晶Bilirubin約2.4mgをN/10 苛 性 曹 達 水 溶 液 とN/10燐. 酸 塩 緩 衝 液 とでpH. 9.2. と し た 溶 液 中 に 溶 解 した も の を 直 射 日光 に 曝 し て 検.
(12) 7664. 竹. B). Methanol. Phase. 内. 亮. 討 す る とFig. 反 応3日. 14〜18の. よ う に な つ た.. 後 は(Fig.. 附 近 の 膨 隆,. 580mμ. 14)母. 液 は 黄 緑 色 で650mμ. の 吸 収 極 大 と500mμ. 附近 よ. り紫 外 部 に 向 い認 上昇 す る 曲 線 を 示 し, Diazo反 性, Gmelin反 あ つ た,こ 650mμ. 応 疑 陽 性,. Pentdyopent反. の 際 のMethanol層. 附 近 の膨 隆, 600mμ. 応陰. 応陽 性 で. は 緑 黄 を 示 し, の 吸 収 極 大 と500mμ. 附 近 よ り紫 外 部 に 向 い せ 上昇 す る 曲 線 を 示 しGmelin 反 応 の み 陽 性 で, Chromatographyを に 極 大 を 有 し, Diazo反. 応,. 黄 色Bilirubin層(c)と. Gmelin反. 行 う と410mμ. Gmelin反 650mμ. 応 共陽性の の 極 大 を示 し. 応 の み 陽 性 のBiliverdinに,. 612mμ. の. 極 大 と紫 外 部 に 上 昇 す る 曲 線 を 有 す る 物 質 を 含 む 緑 黄 層(b)と,. 650mμ. の 極 大 を 示 しGmelin反. み 陽 性 のBiliverdinに500mμ. Fig. 14.. (B. C.). (a) C). Before the Chromatogrmm nish yellow After the Chromatogramm greenish yellow. Chloroform. (B. C.) (a). light. Absorption curves of N/10 sod ium hydroxyde and N/10 phos. A). Before the Chromatogramm. (a) (b) (c). Mother liquid yellowish green Methanol phase greenish yellow Chloroform Phase light yellow. Phase. Before the Chromatogramm after the Chomatogramm yellow. 附 近 よ り紫 外 部 に. phate buffer soutions after letting standing in the suns hine for 3 day and those of separated zones on silica gel. gree. green,. 応の.
(13) Bilirubinの. B). Methanol. 分 解 に 関 す る分 光 化 学 的 研 究. 7665. 向 い上 昇試 す る 曲 線 を 有 す る物 質 を 含 む 淡 黄 緑 層(の. Phase. は 得 ら れ た が, Pentdyopent物 た. Chloroform層 416mμ. 質 は 証 明 され な かつ. は 淡 黄 色, 650mμ. の 吸 収 極 大 を 示 し, Diazo反. 応 共 陰 性 で, Chromatographyを 412mμ. Pentdyopent物 反 応5日. 応,. 得 ら れ た が, Biliverdin,. 後 は(Fig.. 15)母. 液 は 黄 微 緑, 650mμ. 附 近 よ り紫 外 部 へ 向 い 上 昇 す. る 曲 線 を 示 し, Pentdyopent皮 Methanol層. 応 の み陽 性 で あ る.. は 緑 黄 色 で650mμ. の 極 大, 500mμ. 附 近 の膨 隆 と. 附 近 よ り 紫 外 部 に 向 い上. 昇 す る 曲 線 を 示 し, Gmelin反. 応, Pentdyopent反. 応 陽 性 で あ る. Chromatography後 640mμ. (a) (b) (c) C). Before the Chromatogramm nish yellow After the Chromatogramm light yellowish green green yellow. Chloroform. (B. C.). (a). は 黄 緑 色 で. の極 大 と紫 外 部 へ 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 有 す. Fig. 15.. (B. C.). Gmelin反. 質 は 認 め られ な か つ た.. 附 近 の 膨 隆 と500mμ. 590mμ. 応, Gmelin反. 行 う と 淡 黄 色,. に 吸 収 極 大 を 示 し, Diazo反. 応 共 陽 性 のBilirubinが. 附 近 の膨 隆 と. Absorption curves of N/10 sod ium hydroxyde and N/10 phos phate buffer solutions after letting standing in the suns hine for 5 days and those of separated zones on silica ge. gree. A). Before the Chromatogramm. Phase. Before the Chromatogramm yellow After the Chromatogramm light yellow. light. (a) (b) (c). Mother liguid yellowis slight green Methanol Phase greenish yellow Chlorofrom Phase light yellow.
(14) 7666. 竹. B). Methanol. Phase. 内. 亮. る 物 質 を 含 み, Cmelin反. 応, Pentdyopeat反. 性 で, BiliverdinとPentdyopent物 る がBilirubinや590mμ. 応陽. 質 を 含んでい. に極 大 を 有 す る物 質 は証. 明 さ れ な か つ た. Chloroform層. は 淡 黄 で,そ. の吸. 光 曲 線 は 紫 外 部 へ 向 い 上 昇 す る の み で あ り,胆. 汁色. 素 定 性 反 応 陰 性 で, Chromatography後. も淡 黄 で,. 同 じ く短 波 長 側 に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 示 し,胆 素 定 性 反 応 陰 性,発. 汁色. 煙 硝 酸 滴 下 に よ り 無 色 と な り,. 酷 酸 々 性 亜 鉛 末 添 加 で 裾 色 し た. 10日. 後 は(Fig.. 16)母. 液 は 黄 色,吸. 光 曲 線 は. 500mμ. 附 近 よ り紫 外 部 へ 向 い 上 昇 を 示 し, Pentdyo. pent反. 応 の み 陽 性 で あ る. Methanol層. は580mμ. の 極 大 と 紫 外 部 へ 向 い 上 昇 を 示 しGmelin反 性,. Chromatography後. Before the Chromatogramm nish yellow After the Chromatogramm. (a). yellowish. 紫 外 部 に 向 い 上 昇 す る 曲 線 を 有 し, Gmelin反. 応疑 存在. C). Chloroform. (B. C.). Pentdyopent反. light. yellow. 応 陽 性 でBiliverdinの. Absorption curves of N/10 sod ium hydroxide and N/10 phos phate buffer solutions after letting stading in the sunshine for 10 days and those of separated zones on silica gel. A). Befor the Chromatogramm. (a) (b) (c). Mother liquid yellow Methanol Phase yellowish green Chloroform Phase light yellow. Phase. Before the Chromatogramm. yellow After the (a). gree. green. mμ に 小 さ い 極 大 と. 陽 性,. Fig. 16.. (B. O.). は640. Chromaoogrammm. light. 応疑陽.
(15) Bilirubinの. B). Methanol. (B. C.). (a). 分 解 に関 す る分光 化 学 的研 究. 7667. Fig. 17.. Phase. Before the Chromatogramm wish green After the Chromatogramm. A). Absoption curves of N/10 sod ium hydroxide and N/10 phos phate buffer solutins after letting standing in the sun hine for 15 days and those of separated zones on silica gel Before the Chromatogramm. (a) (b) (c) B). Mother liquid yellow Methanol Phase yellow Chloroform Phase slight Methanol Phase. yello. yellow. を疑 わ しめ た. Chloroform層. は 淡 黄 で 短 波長 側 に. 向 い上 昇 す る 曲 線 を 示 し,す 応 陰 性,発. べ て の胆 汁 色 素定 性 反. 煙 硝 酸 滴 下 に よ り無 色 とな り,酷. 亜 鉛 末 添 加 で 槌 色 した. Chloroform層 少 い た め, Chromatographyは 15日 後 は(Fig.. 17)母. 酸 々性. は 抽出量が. 行 わ な か つ た.. 液 は 黄 色 で,吸. 光 曲 線,定. 性 反 応 共10日 後 の そ れ と 等 しい. Methanol層 色, Chromatography後. yellow. は黄. は 淡 黄 色 と な つ た が,い. つ. れ の 場 合 も吸 光 曲 線 は 短 波 長 側 に 向 い 上 昇 す る の み で.す. べ て の 胆 汁 色 素 定 性 反 応 陰 性,発. で 無 色 と な り,酷 Biliverdin,. 酸 々性 亜 鉛 末 添 加 で 槌 色 し た が ,. Pentdyopent物. Chloroform層. 煙硝酸滴下. 質 は 証 明 出 来 な か つ た.. は 微 黄 色 を 呈 し, 10日 後 の そ れ と 同. 様 で あ つ た. 20日 後 は(Fig.. 18)母. 液 は 淡 黄,吸. 光 曲 線,定. 反 応 共10日 後 の そ れ と 等 し い,Methanol層 Chromatography後. 性. は 黄 色,. は 淡 黄 褐 色 を 呈 し,吸. 光 曲 線,. 定 性 反 応 共15日 後 の そ れ と 等 し い. Chloroform層 に は 色 素 の抽 出 不 能 で あ つ た. 以 上Bilirubiaは3日 3日. ま で 存 在 し,. が 最 高 で 以 後 減 少 し,. ま で,. Chloroform層. Methanol層. に は3日. Biliverdinは 中 に は10日. ま で 存 在,. Pontdyo‑. (B. C.) (a). Before the Chromatogramm After the Chormatogramm light yellow. yellow.
(16) 7668. 竹. Fig. 18.. A). 内. 亮. Absorption curves of N/10 soc ium hydroxde and N/10 phosp hate buffer solutions after letting standing in the suns hine for 20 days and thse of separated zones on silica gel. Before the Chromatogramm. (B. C.). Before. the Chromatogram. light. (a). yellow After the Chromatogramm light yellowish brown. Bilifuscin. 10日. Biliverdin,. 後 よ り と,共. Peatdyopent物. にBilirubinよ 質 ,. り. Bilifuscinの. 順 に. 変 化 し て 行 く の が 認 め ら れ た.. 以 上Lemberg,. (a) (b) (c) pent物. Mother liquid light yellow Methanol Phase light yellow Chloroform Phase slight yellow 質 は3日. よ り 現 わ れ,そ. が 最 高 で 以 後 減 少 し,. 5日,. Alkali溶. Biliverdinと. の 形 成 量 は5日. 後. 層 中 に も証 明 出 来 た.. Diazo反. Chloroform層. に5日. 後,. り現 わ れ る.即. ち 日光 曝 射 時 の 経 過 は 室 温 下放 置 の. そ れ と 等 しい が,分 く進 行 し,之. 応 陰 性 の黄 色物 質 は に15日 後 よ. 解 速 度 は 室 温 下 放 置 の 約3倍. は 小 坂23)の. 作 用 に よ りBilirubinの. 早. 云 う 如 く,日 光 紫 外 線 の 破 壊 が促 進 され た と考 え ら. の あ る こ と は,化 化 学 的 性 状 の 外,濃 を 考 え る 時,容. 成6時. Pentdyopent反. 又 無 色 のPropentdyopent物 Bilifuscinに. Propentdyopent物. 間 後,. Bilifuecin形. 厚 溶 液 で はBiliverdin3時. 成2日 間,. 加. と な り,紅. 色の. 質 の 出 現 後 に現 われ る黄 乃 至 黄 る こ と が わ か る.. よ る とFischerの. 物 で あ り,而. 間 後, Pentdyopent形. hydrosulfitを. 質 は 黄 乃 至黄褐色の. 褐 色 の 物 質 はBilifuscinな. 媒 の物 理. 成1時. 合. 質 と な り,. 至 る 中 間 産 物 と 云 わ れ て い る か ら,. 学 反 応 速 度 が,温. も角稀 薄 溶 液. づ. 応 を 呈 す る こ と に よ り証 明 さ れ る.. のDipyrrylmethenの. 易 に 理 解 さ れ る が,兎. 中 で はRiliverdin形. 液 中 でNatrium. 時間に差. 度 に 影 響 さ れ る点 が 大 き い こ と. で 中 央 β位 のMethin結. え 還 元 す る こ と に よ りNatrium塩. 液 の 濃 淡 に よ り分 解 経 度,溶. 謂 う 如 くBilirubinは. が 切 れ 刎),半 切 され てPropentdyopent物. Siedelに. れ る. 又Bilirubin溶. な る .次. 之 は 強Alkali溶. 10日 後 に はMethanol. Methanol中. Baracの. 液 中 で 空 気 中 の 酸 素 に 酸 化 さ れ ,先. 所 謂KorperⅡ. 混 合 物 で,. してBilirubiinを. 色 の 水 溶 性Probilifuscin溶. は数 種. Bilifuscinと. 同一. 酸 化 し て生 ず る無 液 に塩 酸 を 加 え る こ と. に よ り 出 来 る 褐 色 のBilifuscinは,重. 合 の差 に よ り. 各 種 溶 媒 に 対 す る溶 解 度 が 異 る 異 性 体 を 有 す る と云. 後 よ り 始 ま り,濃. う.著. 者 の 濃 厚 溶 液 中 で の 実 験 で はBilifuscinは. Pentdyopent5日,. 先 づ 母 液 中 に3日. 後,. Methanol層. 中 に5日. 後,.
(17) Bilirubinの. Chloroform層. 中10日 後 よ り 出 現 し,そ. され る時 期 はChlorcform可 後, Methanol可. 分 解 に 関 す ろ分 光 化 学 的 研 究. の 完 全分 離. 溶 性Bilifuacin. 溶 性Bilifuscinは20日. 1). 験. の. 10日. 社 製 結 晶Bilirubin. 燐. 結 晶Bilirubin. 1.0mgにN/10NaOH水. え 完 全 溶 解 した 後,そ. の試 験 管 に 分 注 し,各 9.0ccを 6.2と. 加 え,各. 々 に 各 種pHの. そ の間,溶. 4). に汎 り, Beckman. DK型. 部 吸 光 曲 線 を 製 作 し,同 応,. 間, 2, 3, 5,. 々 にN/10. 10日. 2.0mgをChloroform. 応,. Ehrlich氏Aldehyd. Pentdyopent反. し た 濾 液 に,飽. 10.0ccに. にN/10燐. Na2S2O4. 溶. 酸 塩 緩 衝 液9.0ccを. 3刀 尖 を 加 え,沸. し た.. Hourly. change. of extinctions. 4.0mgをChloroform. 溶 か し た 後32ccを. 煎 中 で 減 圧 乾 固 後,同. 取 出 し60℃. 様 にN/10naOH水. 酸 塩 緩 衝 液72ccに. し た も の を 験 実3)と 2,. 3,. 5,. 溶 液. KOH水. 溶 液2ccと. 騰 し た 重 盪 煎 中 に2分. 間. の 可 視 認部 吸 光 曲 線 をBeckman. の 吸 光 係 数 をQB. 50型Beckman分. 光 々 度 計 を用. 2).. coefficient bilirubin. of Pentdyopent. substance.. 0.4mg). Chromatography 結 晶Bilirubin. 14mgをN/10. 3.6ccに. 溶 解 し,そ. 同 様 に 放 置 し ,溶 解. 注 し,各. 試 験 管 にN/10燐. 10, 20日. えpH. 後 に10cc 523mμ. の吸光 係 数の 時間 的 変 化 を 求 め た . Bilirubinの. 目記分 光. 液 を 加 え た も の の 酸 素 酸 化 過 程 途 中 のColumn の 重 盪. 溶 か し, pH. 宛取 出 し上 上 記 の 方 法 で 脱 色 発 色 さ せ た 後,. 5). DK型. 溶 液 を室 内 比 較 的 暗 所 に 放 置. そ の 結 果 結 晶Bilirubin. 間,. 加. 自 記 分 光 々度 計 で 描 き,得 た 吸 収 極 大523mμ. い 測 定 し た(Table. (Crystalline. 直 後, 3, 6時. 質 をBeckman. 更 に こ の 濾 液4ccに15%. 溶 液1.0ccを. 加え 濾過. 々度 計 で 紫 外 部 吸 光 曲 線 を 求 め た.. DK型. 9.2と. 3日 間 室 温 に 放. え 濾 過 し て 得 た殆 ん ど無 色 透 明 な 濾 液 中 に 含 ま れ る. 応 を行 つ. 浸 し た 後 取 出 し,そ. 8.0ccとN/10燐. 酸 塩緩. 酸 鉛 水 溶 液6.0ccを. NaOH水. 1.. し,. 同 様夫. 和 第 二 燐 酸 曹 達 水 溶 液2.0ccを. せ る.こ の 乾 固 物 にN/10. Table. 3)と. 水 溶 液10ccに10%酪. 応,. の 重 盪 煎 中で 減 圧 乾 固 さ. 9.2と. 験2),. の重. 時 に 肉眼 的 に 色 調 の 観 察 及. 1.0mgをChloroform. このBilirubin水. 20ccに. 置 した 後 岩 原 法 に よ り脱 色 を 行 つ た 。即 ちBilirubia. 苛 性 曹達 水 溶 液 に 燐 酸 塩 緩 衝 液. 加 えて 溶 解 し,更. 9.2と. 応. 8.0ccを60℃. 溶 液1,0ccとN/10燐. 加 えpH. か し,そ の4.0ccを60℃. 40ccに. 4.0cc,. NaOH水. 衝 液9.0ccを. を加 え た 時 の 紫 外 部 吸 光 曲 線及 び定 性 反 応 結 晶Bilirubin. 先 の発 煙 硝酸 を滴. 質 及 びPentdyopent反. の2.0cc,. Propentdyopent物. 加 え てpH. 間 後 試 験 管底 に沈 ん だ亜 鉛末 を. Propentdyopent物. 溶 か し,そ. た. Bilirubinの. 尖 を 加 え2. 自記 分 光 々度 計 を 用い可 視. Gmelin反. 反 応, Schlesinger反. 3). 亜 鉛 末1刀. 盪 煎 中 で 減 圧 乾 固 させ た 後,実. 6時. の後 その. を 加 え 色 調 の 変 化 を 検 し,. 氷 酷 酸0.2ccと. 結 晶Bilirubin. 7.2,. 液 を 室 内 比 較 的 暗 所 に 放 置 し,. 解 直 後, 1, 3,. びDiazo反. 発 煙 硝 酸2〜3滴. 化 を 肉 眼 的 に 観 察 し た.. した.. こ のBilirnbin溶. 加 え, Beckman. に色 調 の 肉 眼 的 観 察 を 行 つ た.こ. を4本. 8.2,. ,同. き,更. 燐 酸塩 緩 衝 液. 試 験 管 のpHを9.2,. 定 後. 下 した 試 験 液 と 共 に 室 温 に24時 間 放 置 し,色 調 の 変. 溶液 を. の1.0cc宛. .0ccを. 除 ぎ 上 清 を 別 の 試 験 管 に 移 し,又. 酸塩緩 衝液 を 加 え た場 合 の酸 素 酸 化 速 度 の検 討. 3 , 5, 10,. 自記 分光 々度 計 を 用 い 紫 外 部 吸 光 曲 線 を描. 又2.0ccに. 苛 性 曹 達 水 溶 液 に 各 種pHの. 間, 2,. 取 出 してpH測. DK型. 時 間 観 察 した 上2時. Bilirubinの. 5.0cc加. 解 直 後, 3, 6時. 燐 酸 塩 緩 衝 液4. 1.0ccに. を 使 用 した. 2). 一pHの. 後 よ り得 ら. 部. BilirubinはKodak会. の 内,溶. 20日 に 汎 り そ の1.0ccを. れ た. 実. し,そ. 7669. 苛 性 曹 達 水 溶 液 に 燐 酸 塩緩 衝. 9.2と. 3時 間, 3, 取 出 し,下. し た 後,室 5, 10,. NaOH水. の0.6ccを6本. 溶 液. の 試 験管 に分. 酸 塩 緩 衝 液5.4ccを. 加. 内 の 比 較 的 暗 所 に 放 置 し,. 15, 20日 の 後1本. 宛 の試 験 管 を. の 如 く実 験 を 行 つ た.. 先 づ そ の1.0ccに. 同 一pHの. 燐 酸 塩 緩 衝 液9.0cc.
(18) 7670. 竹. を 加 え て 母 液 に した,残 7.5ccを. り の5.0ccにN/10. 加 え た 後Chloroformを. 色 素 のChloroform抽 Chloroformが. 内. HCl. 亮. に 分 劃 検 討 し た.. 加 え 充 分 振 盪 し,. 出 を 行 つ た.こ. 7). 定 は 東 洋 濾 紙pH試. 結. 着 色 しな くな る ま で 繰 返 し行 い,集. の 際Chloroform層 出 し集 め,之. と し た.又. 間 層 と し た.そ Silicagelを. こ. の上 部 に 出来 た緑 色 泡 沫 層 を 取. をMethanolに. し て 更 に こ の 二 者 を 関 東化 学 製. はpHの. は, Chloroform:. 264mμ,. Methanol中. の 混 液 を 用 い た.分. ethanol. 2;. 1. 離 層 は 自 然 滴 下 させ て 分 劃 採 受. し て 母 液, Chloroform層,. 高 い も の ほ ど 早 く 起 り, Diazo反. Propentdpent物. 3). と な り,次. 4). graphyを. 又 同 様 にBiliverdinも. Diazo反. 応,. Pentdyopent反. 応 を行 つ た上 又. 応 陰 性 の 黄 色 層 に つ い て は,紫. 線 作 製 及 び 実 験3)の. 外部吸光曲. 発 煙 硝 酸 滴 下 試 験,酷. 6). Bilirubinの. 応 陰 性 と な つ た 後 もChromato 証 明 出 来,. 分 離 証 明 出 来 る.. 日光 曝 射 時 は 室 内 放 置 の 場 合 と,そ. 過 は 等 しい が,分 6). の反 応 経. 解 速 度 は 遙 か に 早 い.. Bilifuscinは. 液 が,次. 苛性曹達 水 溶液に 燐 酸 塩 緩 衝. 液 中 で そ の 吸収 極 大. 行 う こ と に よ りBilirubinを. 5). 酸 々性. 亜 鉛 末 添 加 試 験 を 行 つ た.. 先 づBiliverdin. 質 を 経 てBilirubin. BilirubinはAlkali溶. 反 応.. Schlesinger反. に そ の 吸 収 極 大 を 有 す る.. でPentdyopent物. 消 失 し, Diazo反. 応,. Bilifuscia. と な る.. Methanol中. Ehrlich氏Aldehyd反. 質 は523mμ,. 酸 化 過 程 に 於 てBilirubinは. 自 記 分 光 々 度 計 に よ る可 視 部 吸 光 曲 線 の 作 製, Diazu 応,. 質 の水 溶 液 中 吸 収 極大 は. Pentdyopent物. 間 層 及 び 夫 々 の 分 劃 層 に つ い て 色 調 の 肉 眼 的 観 察,. Gmelin反. 応は. 吸 光 曲線 の 吸 収 極 大 が 消 失 した後 も し. は 水 溶 液 中 で270mμ. 間 層 は こ の 混 液 で 展 開 す る と 緑 色 物 質 の 析 出 を 見, 分 劃 流 下 し な い の でChloroform.. 液 中 で の 酸 素 酸 化. ば ら く陽 性 で あ る. 2). 1の 混 液 で 行 つ た.. 論. BilirubinのAlkali溶. Chromatography. を 行 つ た 上展 開 液 はChloroform層 ethanolを4. 1). Bilirubinの. 溶 か し, Methanol中. 吸 着 剤 と し てColumn. 験 紙 で 行 つ た.. の 操 作 を数 回. め たChloroformをChloroform層. し た.そ. pH測. そ の 重 合 の 差 に よ り,先. でChloroform可. 溶 性,. づ 水溶. Methanol可. 溶性. の も の が 分 離 さ れ る.. 液 を 加 え た も の の 日 光 曝 射 時 の酸 化 過程 途 中 の Column. Chromatography. 結 晶Bilirubin 3.0ccに. 12mgをN/10NaOH水. 溶 解 後0.6cc宛5本. 各 試 験 管 にN/10燐 9.2と. 溶 液. の 試 験 管 に 分 注 し,. 酸 塩 緩 衝 液5.4ccを. 加 え てpH. し た も の を10月 の 直 射 日光 に3,. 20日 間 連 日5時. 間 宛 曝 射 さ せ た 後,実. 5,. 10,. 験5)と. 15, 同様. 文 1). L.. Heilmyer. u.. 352,. (1930). 223, 2). A.. Thsel. 1,. (1938). W.. 江. 国:医. 4). R.. Lemberg:. 5). G.. Barac:. Biochem.. Peter:. 学 研 究,. 22,. Biochem.. 98,. Biochem. Compt.. 271,. 木 村:医. 7). L.. 学 研 究,. 25,. K.. 10). R.. W.. 12). G.. Y.. 28,. 979,. (1934). biol.. 140,. 563,. 13). pigments;. u. H.. Meldolesi, 137,. 村 上.有 東 京,. Z.. 日 内 会 誌, Bingold:. Lemberg. 40,. Klin. &. J.. W.. 117,. 232,. 225,. (1931). (1951). Wschr,. Egge: Hematin. 14,. 1287,. (1935) compound. Publishers.. H.. Siedel. u.. 259, H.. 113,. (1939). Moller: H.. (1939) 機 化 学 の 進 歩,. 9集,共. 立 出 版会 社 上. (1954). London, 15) W.. Moller:. W,. & E. S. Stren:. & Spectroscopy,. (1955). Interacience. (1949). Siedel. 259,. soc.. 859,. Heilmyer:Biochem.. 9). Bile. 14) A. Gillan. 6). 岩 原. 11). (1952) J.. rend.. Zschr.. (1946). 8). and. Zachr.. N.. u. O.. 3). Kreba:. 献. 16) W. Siedel,. Edward. Arnold. Absorption Publisher,. (1954). Siedel,. Naturwiss.. Electronic. W. v. 34,. Polnitz. 314,. u. F. Eisenreich. (1947). W. Stich u. F. Eisenreich:. Natu-.
(19) Bilirubinの. rwise.. 35,. 17). 岩 田:医. 18). P.. 316,. 19). 岩 田:医. 20). 天 田:. (1948). 学 研 究,. Mulleru.. 21,. L.. 828,. (1951). Eenger:. 学 研 究, J.. 分 解 に関 す る分光 化 学 的研 究. 21,. Biochem.. H.. 841, 32,. 200,. 187,. (1940). Studies. on. by. Oxygen. 22). H.. on. the. 小 坂:東. 24). K.. H.. F.. 京 医 事 新 誌,. Bingold:. of. Caustic. v.. Dobeneck:. No.. 10,. Klinik,. of. Crystalline. Soda. 67,. Med.. Decomposition. Oxidation in. u.. H.. 263,. (1940). 23). the. 発 表.. Fiacher. 125,. Studies. I. 日 伝:未. (1931). (1951). Spectrophotometric. Part. 145,. 21). 7671. 19,. 41,. (1950). 475,. (1946). Biliubin. Bilirubin. Solution. By. Ryo The. First. (Chief:. 1. with of. The high. the. pH. and. the. product. by. diazo of. Okayama. Prof.. oxygen. reaction. K.. in. was. University,. Yamaoka,. alkaline. positive. for. Medical Kyushu. solution. was. while. after. a. School. University). rapidly the. performed disappearance. bilirubin.. maximum displayed. Medicine,. Director:. bilirubin. maximum absorption. Internal. Kosaka:. of. value,. The. pentdyopent. of. K.. oxidation. absorption. 2.. Department Prof.. Takeuchi. of. at. propentdyopent. 523mƒÊ. and. that. product of. displayed. bilifuscin. at. displayed. at. 264mn,. that. 270mƒÊ. in. of. aqueous. aclution. 3.. Bilirubin. pentdyopent 4. bilirubin diazo. on. the. and. after. the. The. biliverdin oxidation. biliverdin. at. first,. and. then. it. turned. into. bilifuscin. through. process. were. disappearance. oxidation. decomposition 6.. soluble,. product Bilirubin. into. of. identified it•Ls. by. chromatography. absorption. maximum. in and. the. alkaline. solution. display. of. of. negative. reaction. 5.. the. turned. Bilifuscin chloroform. process velocity was soluble. of. of separated, and. the. bilirubin. in. former by methanol. was the. the. sun. more. difference soluble. light. rapid of one.. was than. same that. cross-combination,. to of. that the. in. the. air,. but. latter. in. order. of. water.
(20)
関連したドキュメント
ごあいさつ 聖隷クリストファー大学地域連携推進センター年報第
104 物のS領域をdirect sequenceにより解析した．
reduce the multiorbital mixing on the Fermi surface, which we call the orbital distillation effect, and (ii) the increase of the band width with pressure also contributes
Abbreviations: ATLL, adult T-cells leukemia-lymphoma; BAL, bronchoalveolar lavage; bp, base pair; D Lco , pulmonary diffusing capacity for carbon monoxide; HAB,
別言語のタイトル Phytosociological Studies of the Natural Forest on the Eastern
別言語のタイトル Studies on the Soils of the Nansei Islands in the Subtropical Region of Japan : 2. Physical and Chemical Properties of
別言語のタイトル Electrophoretic Studies on the Esterase Activity in the Japanese Quail, Coturnix coturnix
[r]
