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Special Talk Special Talk TOPICS 特集オートファジー 脂肪肝病態形成におけるオートファジー制御蛋白 Rubicon の役割 田中 聡司先生 国立病院機構大阪医療センター消化器内科 略歴 平成 17 年 3 月大阪大学医学部医学科卒業平成 17 年 4 月大阪府立病院機

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(1)

研究用

vol.

37

July. 2018

* RUO は Research Use Only の略語となります。

MBL RUO

TOPICS

TOPICS

TOPICS

p.2

オートファジー関連抗体

充実のラインナップ p.6 p.10 p.9 Rubicon, Atg16L, Beclin 1, Parkin

p62, リン酸化p62 関連製品

疾患研究で注目の分子 ELISA Kit, 抗体

抗LC3抗体

オートファジー研究のゴールドスタンダード 製品使用文献 豊富な抗体

超高感度 in situ

ハイブリダイゼーションシステム

RNAscope®/BaseScopeTM p.13 p.15

シングル細胞タンパク質の

多変量解析に

CyTOF ® マスサイトメトリー測定受託 p.16

完全化学合成ポリマーブロッキング試薬

幅広くご利用いただけます Blockmaster TM PA1080 p.14

IDS社 ELISAキット

骨代謝マーカー測定キット, ビタミンD測定キット

特集

オートファジー

オートファジー

脂肪肝病態形成における オートファジー制御蛋白Rubiconの役割 国立病院機構大阪医療センター 田中 聡司 先生 大阪大学大学院医学系研究科 吉森 保 先生 受託 NEW

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|   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

Special Talk

脂肪肝病態形成における

オートファジー制御蛋白Rubiconの役割

 非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)は過量の栄養摂 取が原因となる生活習慣病であり、近年患者数は増加傾向 にある。未だ有効な薬物療法はなく、一部の症例で重症化 し肝硬変、肝がんへと進展することが問題であり、病態解 明が望まれる。今回我々は、過量脂質摂取に伴うRubicon 発現増加がオートファジー機能を低下させ、NAFLD病態形 成の一因となることを明らかにした。オートファジーが過量 脂質摂取という環境因子により変容し、病態形成に寄与す ることが初めて示されたので概説する。

1. はじめに

 非アルコール性脂肪肝は肝細胞内に脂肪滴が蓄積した 状態であり、過栄養に伴う内蔵脂肪蓄積やインスリン抵抗 性を背景として発症し、メタボリック・シンドロームの肝病 変と考えられている。脂肪肝の原因としてはアルコール性と 非アルコール性に大別され、アルコール摂取量がエタノー ル換算で男性は1日30 g未満(女性は1日20 g未満)で脂 肪肝の場合を非アルコール性脂肪性肝疾患(nonalcoholic fatty liver disease: NAFLD)とよぶ。近年、NAFLDは 最も多くみられる慢性肝疾患であり、先進国では人口の 約30%が罹患し増加傾向にある。NAFLDのうち約10% は炎症所見や肝線維化を伴う非アルコール性脂肪肝炎 (nonalcoholic steatohepatitis: NASH)へと進展し、肝 硬変・肝がんを発症することが問題となっている1, 2。現在、 NAFLDに有効な薬物療法はなく、病態進展予防および有 効な治療法の確立には病態解明が必要である。  オートファジーは細胞内成分を分解するシステムで、オル ガネラや蛋白などの細胞構成成分を対象にライソゾームへ と輸送し分解へ導き、細胞内の不要物を分解することによ り浄化作用を持つ。これまで、培養細胞や動物を用いた検 討において、NAFLD/NASH病態形成環境下でオートファ ジーは抑制されているという現象が報告されてきた3,4。近 年、オートファジーが肝細胞内で脂質を選択的に分解し、脂 肪代謝を制御しているという報告がなされlipophagyと名 付けられた3。これはNAFLD病態形成において、過栄養に 伴う肝細胞内への脂質流入により生じた脂肪滴蓄積が、リ ポファジーの抑制により更に増悪する可能性を示唆するも のであったが、そのメカニズムは未解明であった。  今回我々は高脂肪食負荷の際に、肝細胞においてオート ファジーを負に制御するRubiconの発現上昇によるオート ファジー抑制が、NAFLDの病態進展に関与していることを 明らかにした5。本稿では、この研究について概説したい。

2. 培養肝細胞株を用いた脂肪酸負荷時における

オートファジー抑制の検討

 パルミチン酸を添加した培養肝細胞(HepG2)では、細 胞内での脂肪滴蓄積を伴って細胞死(アポトーシス)が誘 導された。また、オートファジーの評価を行うと、パルミチ ン酸添加によりLC3-Ⅱ発現量は増加すること、およびオー トファジー阻害剤(Bafilomycin)投与時のLC3-Ⅱ発現量 の変化を指標とするオートファジー・フラックスは低下する ことから、オートファゴソーム形成後の段階でのオートファ ジー抑制が示唆された。

田中 聡司

先生

国立病院機構大阪医療センター 消化器内科 【略歴】 平成17年3月 大阪大学医学部医学科 卒業 平成17年4月 大阪府立病院機構大阪急性期 ・ 総合医療センター 前期研修医 平成19年4月 大阪府立病院機構大阪急性期 ・ 総合医療センター消化器内科 後期研修医 平成22年4月 大阪大学医学部附属病院消化器内科 医員 平成29年3月 大阪大学大学院医学系研究科医学専攻 博士課程修了 平成29年4月 国立病院機構大阪医療センター消化器内科 医員

吉森 保

先生

大阪大学大学院医学系研究科 生化学・分子生物学講座遺伝学教室 2

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|   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |  パルミチン酸添加によるRubicon増加の意義を検討する ためにsiRNAを用いてRubiconをノックダウンしたところ、 オートファジー抑制が解除されたことから、パルミチン酸投 与によるRubicon増加がオートファジー抑制の原因である と考えられた(図1B)。Rubiconのノックダウンによりオー トファジー抑制を解除すると、パルミチン酸投与下での細胞 内脂肪滴蓄積量は減少し、アポトーシスも軽減した。また、 パルミチン酸投与時のRubicon増加のメカニズムに関して は、遺伝子発現量は変化を認めず、パルスチェイス・アッセ イの結果からRubicon分解が遅延することにより蛋白量が 増加することが示された。よってRubiconの分解遅延・発 現増強を介したオートファジー抑制が、パルミチン酸添加に よる脂肪滴蓄積を増加させ、アポトーシスを誘導しているこ とが示された。  オートファジー抑制因子を検討するために、オートファ ジー関連タンパク質の発現量をオートファジーの進行段階 別に評価した。まずオートファジーの開始を負に制御する mTOR経路は抑制されており、またオートファゴソーム形 成を制御するAtg5、Atg7およびBeclin1の発現に変化を 認めなかったことから、これらのタンパク質はオートファ ジー抑制には寄与していなかった。次に、オートファゴソー ムとリソソームの融合を負に制御するRubiconに着目する と、その発現が増強していた(図1A)。オートファジー制御 蛋白Rubicon(Run domain Beclin-1 interacting And cysteine-rich containing protein)は、Beclin1と結合 する蛋白として発見され、オートファジーの最終段階である オートファゴソームとライソゾームの融合を抑制し、細胞内 のRubiconが増加するとオートファジー機能が低下するこ とを我々は報告した6 図1. 培養肝細胞株 HepG2 へのパルミチン酸投与により Rubicon 発現増加を介したオートファジー抑制を認めた(文献 5 より引用) A. パルミチン酸投与により Rubicon 発現増加を認めた。 B. Rubicon をノックダウンすると、パルミチン酸投与による P62 および LC3-Ⅱの発現増加は抑制され、オートファジー抑制が 軽減した。

A

B

3

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|   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

Special Talk

発育に異常を認めず、肝細胞においてオートファジーが亢 進している他は生理的条件下では表現型を示さなかった。 野生型マウスおよびRubicon KOマウスに高脂肪食を4ヶ 月摂取させ評価した。Rubicon KOマウス肝臓では野生型 マウスに比してP62ならびにLC3-Ⅱ発現量は減少してお り、高脂肪食摂取に伴うオートファジー抑制が改善していた (図2A)。また肝細胞内脂肪滴蓄積量および肝臓内中性 脂肪含有量、肝腫大はいずれもRubicon KOマウスで軽減 しており(図2B)、電子顕微鏡観察において、Rubicon KO マウスでは、脂肪滴の辺縁に膜様構造物の集積を認め、リ ポファジーが亢進している可能性が示唆された(図2C)。 更に、ALT値ならびに肝組織TUNEL染色陽性細胞数は Rubicon KOマウスで低下しており、アポトーシスが抑制さ れていた。よって、マウスNAFLDモデルにおいてもRubicon の発現増強を介したオートファジー抑制が、脂質過量摂取 に伴う肝臓内脂肪蓄積を増悪させ、アポトーシスを誘導して いることが示された。

3. マウスNAFLDモデルにおけるオートファ

ジー抑制の検討

 次に、NAFLDモデルとして野生型マウスに高脂肪食を 4ヶ月摂取させて検討した。このモデルでは、摂取2ヶ月後 から肝臓内に脂肪滴が蓄積し、4ヶ月では脂肪肝に伴う著 明な肝腫大を認め、ALTは300 ⅠU/L程度にまで上昇する。 高脂肪食摂取4ヶ月の時点での肝臓ではP62の発現増強を 認め、その遺伝子発現量に変化を認めなかったことから、 オートファジー抑制が示唆された。またLC3-Ⅱ発現は増強 しており、電子顕微鏡で観察するとオートファゴソームが増 加していたことから、オートファゴソーム形成後の段階での オートファジー抑制が示唆された。培養細胞の実験と同様 にオートファジー抑制因子を検討すると、mTOR経路は抑 制されており、Atg5、Atg7、Beclin1の発現に変化を認め なかったが、Rubiconは高脂肪食投与1ヶ月後から発現増 強していた。  そこで肝細胞特異的Rubiconノックアウト(KO)マウス (Alb-Cre Rubicon fl/fl)を作製した。このマウスは発生・ 図 2. 肝細胞特異的 Rubicon KO マウスに高脂肪食を摂取させると、野生型マウスに比してオートファジー抑制は軽減し、脂肪肝 は改善した(文献 5 より引用) A. 高脂肪食摂取に伴う P62 および LC3-Ⅱの発現増加は、Rubicon KO マウスで軽減した。 B. 高脂肪食摂取に伴う肝腫大および肝細胞内脂肪滴蓄積は、 Rubicon KO マウスで軽減した。 C. 高脂肪食を摂取した Rubicon KO マウス肝臓を電子顕微鏡で観察すると、脂肪滴辺縁に膜様構造物の蓄積を認め、 リポファジー亢進が示唆された。(矢印は脂肪滴、矢頭は膜様構造物を指す)

A

C

B

4

(5)

|   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   | ●参考文献

1) Demir M, Lang S, Steffen HM. Nonalcoholic fatty liver disease - current status and future directions. J Dig Dis. 2015;16(10):541-557. 2) Loomba R, Sanyal AJ. The global NAFLD epidemic. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2013;10(11):686-690.

3) Singh R, Kaushik S, Wang Y, et al. Autophagy regulates lipid metabolism. Nature. 2009;458(7242):1131-1135.

4) Yang L, Li P, Fu S, Calay ES, Hotamisligil GS. Defective hepatic autophagy in obesity promotes ER stress and causes insulin resistance. Cell Metab. 2010;11(6):467-478.

5) Tanaka S, Hikita H, Tatsumi T, et al. Rubicon inhibits autophagy and accelerates hepatocyte apoptosis and lipid accumulation in nonalcoholic fatty liver disease in mice. Hepatology. 2016;64(6):1994-2014.

6) Matsunaga K, Saitoh T, Tabata K, et al. Two Beclin 1-binding proteins, Atg14L and Rubicon, reciprocally regulate autophagy at different stages. Nat Cell Biol. 2009;11(4):385-396.

5. おわりに

 近年オートファジーに関する研究は飛躍的に進展してお り、様々な疾患の病態形成に関与していることが示されて いる。生活習慣病であり、近年患者数が増加している非ア ルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)の病態形成において、 過量脂質摂取に伴うRubicon発現増加を介したオートファ ジー機能低下が一因であることが本研究により示された (図4)。オートファジーが過量脂質摂取という環境因子 により変容し、病態形成に寄与することを初めて報告した。 いまだ有効な薬物治療法が存在しないNAFLDに対して、 Rubiconを標的としたオートファジーの亢進が、肝内脂肪 蓄積を減少させ肝細胞アポトーシスを抑制する治療法の開 発にもつながる可能性がある。更に肝細胞アポトーシスの 抑制は、肝硬変への進展や肝がんの発症を予防することに もつながる効果が期待される。

4. ヒト切除肝におけるRubicon発現の検討

 ヒトNAFLD患者においてもRubiconの発現増加が認 められるかを検討するために、肝切除手術検体を用いて 検討した。肝切除術を受けた患者で、ウイルス性肝炎既往 がなく、アルコール消費量がエタノール換算で20 g/日を 満たす者の肝組織HE染色所見で脂肪肝の有無別に分け、 Rubiconの発現量をウエスタンブロットで評価した。HE染 色で肝脂肪滴を認める症例では、肝脂肪滴を認めないに比 し、Rubicon発現が増加していた(図3)。これより、ヒト NAFLD症例においてもRubicon発現上昇を介した病態形 成の可能性が示唆された。

Rubicon

図 4. 高脂肪食摂取は肝細胞内の Rubicon を増加させて オートファジーを抑制し、脂肪滴分解抑制および 細胞死誘導を促進する 図 3. ヒト NAFLD 肝臓では Rubicon 発現が増加していた(文献 5 より引用) 5

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オートファジー

特徴

● ● ウェスタンブロッティングや免疫組織染色でお使いいただけます。 Rubiconとは Rubicon はオートファゴソームとリソソームの融合過程やエンドサイトーシスの負の制御因子です。高脂肪食摂取時に肝臓で発現が上昇し、オートファジー 機能の低下による脂肪の蓄積や肝障害との関わりが報告されています(Tanaka S et al. Hepatology. 2016, PMID: 10604474)。

詳細はP. 2 Special Talkをご覧ください。           オートファジー >> 抗体

充実のラインナップ

オートファジー関連抗体

抗ヒト Rubicon 抗体

 オートファジーの役割は、飢餓状態を生き抜くために自己消化することで栄養源を確 保していると一般的には理解されています。しかしながら、通常の環境下でもプロテア ソーム系と並んで細胞成分の代謝に働いていることがわかってきています。  近年では、哺乳類のオートファジーは飢餓応答だけでなく、細菌感染防御、抗原提 示、細胞死、発生、老化、そして腫瘍形成にも関連していることが明らかになりつつあり ます。 神経変性疾患、感染症、心疾患、さらにはがん化などの病態との関連が報告され ています。 お試しに便利な 小包装品もあります 細菌感染 飢餓状態 肝機能維持 心筋症 細胞死 抗原提示 神経変性疾患 腫瘍形成 老化 発生

オートファジー

Code No. 製品名 クローン アイソタイプ 包装 使用法 交差反応性 価格(税別)

M170-3 Anti-Rubicon (Human) mAb Mouse IgG2a κ 1H6 100 µg / 100 µL WB / IH Human ¥48,000 M170-3MS Anti-Rubicon (Human) mAb Mouse IgG2a κ 1H6 20 µg / 20 µL WB / IH Human ¥9,600 PD027 Anti-Rubicon (Human) pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IH Human ¥48,000 PD027MS Anti-Rubicon (Human) pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 20 µL WB / IP / IH Human ¥9,600

WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, IH: Immunohistochemistry

製品一覧

Web ページ ID【1075】

使用例:Anti-Rubicon (Human) mAb (Code No. M170-3)

■ Western blotting

■ Immunohistochemistry

スペシャルトーク 『オートファジー研究の現状と今後の展開』 Web ページ ID【1074】 Lane 1: Transfectant Lane 2: HeLa Lane 3: A549 150 100 75 1 (kDa) 2 3

Tissue: Hepatocellular carcinoma, Grade I Antigen retrieval: Heat-treated

(10 mM Citrate buffer (pH 6.0), 125˚C, 5 min) Counterstain: Hematoxylin 6 |   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

(7)

オートファジー

特徴

● ● ウェスタンブロッティング、免疫沈降、免疫細胞染色でお使いいただけます。 ATG16L1とは ATG16L1 は、オートファゴソームを作るのに必要な因子ですが、その遺伝子変異とクローン病・潰瘍性大腸炎の病態との関連が注目されています。腸管上 皮細胞でのオートファジー機能がうまく働かないと、パネート細胞(腸管細胞の一種)が成熟できないために、腸管バリアー機能が低下し、慢性の炎症が起 こるのではないかと考えられています。

抗 Atg16L 抗体

製品ピックアップ情報 「腸管免疫とは」 Web ページ ID【1076】

■ Western blotting

■ Immunocytochemistry

■ Immunoprecipitation

使用例 -1:Anti-Atg16L mAb (Code No. M150-3)

使用例 -2:Anti-Atg16L pAb (Code No. PM040)

■ Anti-Atg16L mAb (Code No. M150-3)

・ Adolph TE et al. Paneth cells as a site of origin for intestinal inflammation. Nature 503, 272-6 (2013)(PMID:24089213) [WB, IH; Mouse] ・ Murthy A et al. A Crohn's disease variant in Atg16l1 enhances its degradation by caspase 3. Nature 506, 456-62 (2014)

(PMID:24553140) [WB; Mouse]

・ Boada-Romero E et al. The T300A Crohn's disease risk polymorphism impairs function of the WD40 domain of ATG16L1. Nat Commun. 7, 11821 (2016)(PMID:27273576) [WB; Human]

■ Anti-ATG16L pAb (Code No. PM040)

・ Murthy A et al. A Crohn's disease variant in Atg16l1 enhances its degradation by caspase 3. Nature 506, 456-62 (2014)(PMID:24553140) [IP, Image-based flow cytometry; Mouse]

・ Puri C et al. The RAB11A-Positive Compartment Is a Primary Platform for Autophagosome Assembly Mediated by WIPI2 Recognition of PI3P-RAB11A. Dev Cell. 45, 114-131.e8 (2018)(PMID:29634932) [WB; Human]

・ Sorbara MT et al. Complement C3 drives autophagy-dependent restriction of cyto-invasive bacteria. Cell Host Microbe. 23, 644-652.e5 (2018) [WB, IC; Human, Mouse]

製品使用文献(一部)

Code No. 製品名 クローン アイソタイプ 包装 使用法 交差反応性 価格(税別)

M150-3 Anti-Atg16L mAb 1F12 Mouse IgG1 κ 100 µg / 100 µL WB / IH* / Other* Hu / Mo / Rat ¥48,000 M150-3MS Anti-Atg16L mAb 1F12 Mouse IgG1 κ 20 µg / 20 µL WB / IH* / Other* Hu / Mo / Rat ¥9,600 PM040 Anti-Atg16L pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IC / Other* Hu / Mo / Rat / Ham ¥38,000 PM040MS Anti-Atg16L pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 20 µL WB / IP / IC / Other* Hu / Mo / Rat / Ham ¥7,600

WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, FCM: Flow cytometry, Hu: Human, Mo: Mouse, Ham: Hamster *: 論文で報告されております(MBLでは未確認)。 <抗体> Lane 1: HeLa Lane 2: 293T Lane 3: Jurkat Lane 4: Raji Lane 5: NIH/3T3 Lane 6: WR19L Lane 7: Rat1 1 97 66 45 30 2 3 4 5 6 7 (kDa) Atg16L b Atg16L a 75 50 1 (kDa) 2 Atg16L b Atg16L a IgG Heavy chain

Cells: NRK Cells: HeLa Lane 1: Normal Rabbit IgG

Lane 2: Anti-Atg16L pAb (Code No. PM040)

飢餓状態 栄養状態 7 |   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

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オートファジー

特徴

● ● ウェスタンブロッティング、免疫沈降、免疫細胞染色でお使いいただけます。

特徴

● ● ヒト、マウス、ラットの Parkin タンパク質を検出します。 Beclin 1とは

オートファゴソームの形成やリソソームの融合過程に関与します。また、がん抑制因子であることが示されており(Liang XH et al. Nature. 1999, PMID: 10604474)、特に乳がんとの関連に注目が集まっています。 Parkinとは? Parkinは、オートファジーによるミトコンドリアの選択的分解(マイトファジー)に関与するユビキチンリガーゼです。パーキンソン病の原因遺伝子としても知 られています。

抗 Beclin 1 ポリクローナル抗体

抗 Parkin モノクローナル抗体

■ Western blotting

■ Immunocytochemistry

■ Western blotting

使用例

使用例

・ Russo R et al. Calpain-mediated cleavage of Beclin-1 and autophagy deregulation following retinal ischemic injury in vivo. Cell Death Dis. 2, e144 (2011)(PMID:21490676) [WB, IH; Rat]

・ Wakatsuki S et al. GSK3B-mediated phosphorylation of MCL1 regulates axonal autophagy to promote Wallerian degeneration. J Cell Biol. 216, 477-493 (2017)(PMID:28053206) [WB, IP; Mouse]

製品使用文献(一部)

Code No. 製品名 クローン アイソタイプ 包装 使用法 交差反応性 価格(税別)

PD017 Anti-Beclin 1 pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IC / IH* Hu / Mo / Rat / Ham ¥38,000 PD017MS Anti-Beclin 1 pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 20 µL WB / IP / IC / IH* Hu / Mo / Rat / Ham ¥7,600

WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Hu: Human, Mo: Mouse, Ham: Hamster *: 論文で報告されております(MBLでは未確認)。

Code No. 製品名 クローン アイソタイプ 包装 使用法 交差反応性 価格(税別)

M230-3 Anti-Parkin mAb Par6 Mouse IgG2a κ 100 µg / 100 µL WB Hu / Mo / Rat ¥38,000

WB: Western Blotting, Hu: Human, Mo: Mouse

<抗体>製品リスト 製品ピックアップ情報「マイトファジー」 Web ページ ID【1085】 Lane 1: 293T Lane 2: HeLa Lane 3: Raji Lane 4: NIH/3T3 Lane 5: WR19L Lane 6: PC12

Lane 7: CHO Cells: HeLa 50

35

(kDa) 1 2 3 4 5 6

Lane 1: Rat brain lysate, 20 µg Lane 2: Mouse brain lysate, 20 µg Lane 3: PC12

Lane 4: HeLa Lane 5: HEK293T

Lane 6: Human Parkin/HEK293T 100 75 50 37 25 (kDa) 1 2 3 4 5 6 7 75 8 |   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

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オートファジー

抗 LC3 抗体の性能比較

Code No. 製品名 クローン アイソタイプ 包装 使用法 交差反応性 価格(税別)

PM036 Anti-LC3 pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IC / IH / FCM / Immuno-EM* Hu / Mo / Rat / Ham / Zebrafish* ¥48,000 M186-3 Anti-LC3 mAb 8E10 Mouse IgG2a κ 100 µg / 100 µL WB / IP* Hu / Mo / Rat / Ham ¥48,000 M186-7 Anti-LC3 mAb-HRP-DirecT 8E10 Mouse IgG2a κ 50 µL WB Hu / Mo / Rat / Ham ¥48,000 M152-3 Anti-LC3 mAb 4E12 Mouse IgG1 κ 200 µg / 100 µL WB / IP / IC / IH* / Immuno-EM Hu / Mo / Rat / Ham ¥48,000 PD014 Anti-LC3 pAb Polyclonal Polyclonal 100 µL WB / IC* / IH* Hu / Mo / Rat / Ham ¥42,000

WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, FCM: Flow Cytometry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy Hu: Human, Mo: Mouse, Ham: Hamster

*: 論文で報告されております(MBLでは未確認)。 <抗体>製品リスト 小包装品は通常製品の5分の1の容量・価格になります。           オートファジー >> 抗体

オートファジー研究のゴールドスタンダード

抗LC3抗体

LC3とLC3結合反応系

 酵母Atg8の哺乳類ホモログは、LC3、GABARAP (GABAA受容体関連タンパ ク質)、GATE-16 (Golgi-associated ATPase enhancer)の3つです。その中で もLC3の研究が最も進んでおり、哺乳類のオートファジーマーカーとして頻繁に使 用されています。LC3は翻訳後(proLC3)、すぐにAtg4BあるいはAtg4Aによりそ のC末をプロセシングされ、LC3-Ⅰとなります。 LC3-Ⅰはオートファジーが誘導さ れるとE1、E2に受け渡され、基質のPE (Phosphatidylethanolamine)と結合し ます。LC3-PEをLC3-Ⅱと呼びます。LC3-ⅡはLC3-Ⅰよりも分子量は大きいのです が、疎水性が高いためSDS-PAGEではLC3-Ⅰより移動度が大きくなります。なお、 GABARAPもGATE-16も同様の過程を経てPEと結合することが分かっています。

Atg8 LC3GABARAPGATE-16

Atg3 LC3 Atg7 PE Atg3 LC3 LC3 LC3 LC3 Atg7 E1 E2 LC3系 LC3-Ⅰ LC3-Ⅱ proLC3 Atg4B Atg4A PE 酵母 哺乳類 R Phosphatidylethanolamine Code●No. クローン 免疫動物 使用法 WB IP IC IH FCM Immuno-EM PM036 Polyclonal Rabbit ★★★ ★★★ ★★★ ★★★ ★★★ ★* M186-3 8E10 Mouse ★★★★ ★* M152-3 4E12 Mouse ★ ★★★ ★★★★ ★* ★★★ ★★ PD014 Polyclonal Rabbit ★★★ ★* ★*

使用例:Anti-LC3 pAb (Code No. PM036)

PM036の製品使用 文献は300報以上! 実績のある抗体です。 製品ピックアップ情報 「LC3 抗体」 Web ページ ID【1078】 製品一覧 Web ページ ID【1077】 *:文献報告あり スペシャルトーク 『オートファジー研究の現状と今後の展開』 Web ページ ID【1074】

■ Western blotting

アタリ MEFAtg5-/-細胞ご提供:東京大学 水島 昇 先生

Lane 1: MEF

Atg5-/-Lane 2: Wild-type MEF LC3-Ⅰ LC3-Ⅱ 20 15 10 (kDa) 1 2

■ Immunocytochemistry

Cells: NRK

Green: Anti-LC3 pAb (Code No. PM036) Blue: DAPI 飢餓状態 栄養状態 9 |   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

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オートファジー

          オートファジー >> キット・抗体

疾患研究で注目の分子

p62, リン酸化p62 関連製品

p62●(SQSTM1)

 p62/SQSTM1はTRAF6, RIP, aPKCなどのシグナル伝達を担う多彩な分子群 と相互作用する足場タンパク質として知られています。またLC3との結合部位を持つ ことから、オートファジーによって選択的に分解される基質として考えられています。 さらにユビキチン鎖と結合する部位を有し、ポリユビキチン化されたタンパク質の凝 集体や脱分極したミトコンドリアなどをオートファジーに導きます。実際、肝臓または 脳特異的オートファジー欠損マウスにおいては、p62は過剰に蓄積し、ユビキチン・ p62陽性の封入体が形成されます。重要なことに、ユビキチン・p62陽性封入体は、 アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症などの神経変性疾患やア ルコール性肝炎、脂肪肝、肝癌患者組織においても確認されています。現在、これら 疾患の発症とオートファジーによるp62代謝不全の関連に注目が集まっています。

リン酸化p62

 p62 にはリン酸化部位が複数個所あり、それぞれの部位が連続的にリン酸化さ れることで2つの生体防御システムを連動させています。 PM045の製品使用 文献は150報以上! 実績のある抗体です。 スペシャルトーク 『p62/Sqstm1:オートファジー Keap1-Nrf2 システムを繋ぐ分子』 Web ページ ID【1079】 製品ピックアップ情報 Web ページ ID【1080】 p62 NF-κB活性化 選択的オートファジー Keap1-Nrf2 経路 mTORC1活性化 凝集化 TB zz

PB1 LIR KIR UBA

P P P

aPKC aPKC

PB1 domain Raptor Keap1

RIP TRAF6 LC3PE Ub UbUb Ub ■ p62/SQSTM1 のドメイン構造 異常構造物や外敵の排除 p62のSer407(ヒト)/Ser409(マウス)のリン酸化 p62のSer403(ヒト)/Ser405(マウス)のリン酸化 ストレス耐性遺伝子の発現亢進 p62のSer349(ヒト)/Ser351(マウス)のリン酸化 ポリユビキチン鎖との親和性が上昇。 p62とKeap1との親和性が上昇。 ●選択的オートファジー ●Nrf2の核内移行 薬剤のスクリーニングにもお使いいただけます

p62、リン酸化 p62 ELISA キット

特徴

● ● 簡便!サンプル調製から測定までの試薬が付いています ● ● ヒト・マウスの細胞溶解液で測定できます ● ● 同一サンプルで total●p62 とリン酸化 p62 を同時に測定することもできます リン酸化p62 ELISAキットは 市場初! 製品リスト Code●No. 製品名 包装 価格(税別)●

CY-7055 CycLex® Total p62 ELISA Kit 96 Assays ¥98,000 CY-7056 CycLex® Phospho-p62 Ser349 ELISA Kit 96 Assays ¥98,000 CY-7057 CycLex® Phospho-p62 Ser403 ELISA Kit 96 Assays ¥98,000

<ELISAキット> 0 200 400 600 800 1,000 1,200 100.0 50.0 25.0 12.5 25.0 12.5 6.3 3.1 1.6 0.8 0.4 0.0 Bafilomycin A1 (nM) U ni ts / 10 6ce lls / m L Ser349 Ser403

Total p62 Phospho-p62 (Ser349/Ser403)

Rapamycin (nM) + 25 nM Bafilomycin ng / 10 6ce lls / m L 0 2,000 4,000 6,000 8,000 100.0 50.0 25.0 12.5 25.0 12.5 6.3 3.1 1.6 0.8 0.4 0.0 Bafilomycin A1 (nM) total Rapamycin (nM) + 25 nM Bafilomycin

測定例(サンプル:●HeLa)

※イラストは新潟大学 小松 雅明 先生、一村 義信 先生に監修を頂きました。 10 |   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

(11)

Lane 1: HeLa Lane 2: 293T Lane 3: MEF Lane 4: NIH/3T3 Lane 5: PC12 Lane 6: CHO 100 75 50 37 (kDa) 1 2 3 4 5 6

オートファジー

抗p62抗体の性能比較

特徴

● ● ウェスタンブロッティング、免疫沈降、免疫染色と幅広くお使いいただけます。 免疫組織染色・ 免疫細胞染色データや 製品使用文献はWEBで ご覧いただけます。 Code●No. クローン 免疫動物 免疫原 交差性 使用法 WB IP IC IH FCM Immuno-EM

PM045 Polyclonal Rabbit ヒト(120-440aa)p62 Hu, Mo, Rat, Ham,

Zebrafish* ★★★ ★★★ ★★★ ★★★ ★*

M162-3 5F2 Mouse ヒト(120-440aa)p62 Hu ★★★ ★★★ ★★★ ★★★ ★★

PM066 Polyclonal Guinea Pig ヒトC末端領域p62 Hu, Mo, Rat, Ham ★★★★ ★★★ ★★★ ★★★★

抗 p62 抗体

抗リン酸化 p62 (Ser351) 抗体

■ Western blotting

■ Immunohistochemistry

使用例:Anti-p62 (SQSTM1) pAb (Code No. PM045)

使用例:Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser351) pAb (Code No. PM074)

Code No. 製品名 クローン アイソタイプ 包装 使用法 交差反応性 価格(税別)

PM045 Anti-p62 (SQSTM1) pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IC / IH / Immuno-EM* Hu / Mo / Rat / Ham / Zebrafish* ¥38,000 M162-3 Anti-p62 (SQSTM1) (Human) mAb 5F2 Mouse IgG1 κ 100 µg / 100 µL WB / IP / IC / IH / FCM Hu ¥48,000 M162-A48 Anti-p62 (SQSTM1) (Human) mAb-Alexa Fluor® 488 5F2 Mouse IgG1 κ 100 µg / 100 µL IC / FCM Hu ¥58,000 M162-A59 Anti-p62 (SQSTM1) (Human) mAb-Alexa Fluor® 594 5F2 Mouse IgG1 κ 100 µg / 100 µL IC / FCM Hu ¥58,000 M162-A64 Anti-p62 (SQSTM1) (Human) mAb-Alexa Fluor® 647 5F2 Mouse IgG1 κ 100 µg / 100 µL IC Hu ¥58,000 PM066 Anti-p62 C-terminal pAb Polyclonal Guinea Pig Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IC / IH Hu / Mo / Rat / Ham ¥38,000 PM066-7 Anti-p62 C-terminal pAb-HRP-DirecT Polyclonal Guinea Pig Ig (aff.) 100 µL WB Hu / Mo / Rat / Ham ¥38,000

WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, FCM: Flow Cytometry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy Hu: Human, Mo: Mouse, Ham: Hamster

*: 論文で報告されております(MBLでは未確認)。

<抗体> 小包装品は通常製品の5分の1の容量・価格になります。

■ Western blotting

Sodium arsenite-treated MEF 細胞、p62-knockout huH-1 細胞ご提供:新潟大学 小松 雅明 先生・一村 義信 先生

MEFAtg5-/- 細胞ご提供:東京大学 水島 昇 先生 *:文献報告あり 150 100 75 50 (kDa) 1 2 3 4 5 6 Phospho-p62 (Ser351)

Lane 1: MEF, sodium arsenite-treated (10 µM, 12 hr.) Lane 2: MEF

Lane 3: MEF

Atg5-/-Lane 4: huH-1

Lane 5: huH-1, λ-phosphatase-treated Lane 6: p62-knockout huH-1

ヒト肝臓癌組織で p62 陽性封入体が検出されました。 11 |   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

(12)

免疫組織染色・ 免疫細胞染色データや 製品使用文献はWEBで ご覧いただけます。

オートファジー

特徴

● ● ウェスタンブロッティング、免疫組織染色でお使いいただけます。

抗リン酸化 p62 (Ser403) 抗体

使用例:Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser403) mAb (Code No. D343-3)

■ Western blotting

GFP-tagged human p62発現Neuro2a細胞ご提供:順天堂大学 貫名 信行 先生、松本 弦 先生

MEFAtg5-/-細胞ご提供:東京大学 水島 昇 先生

Code No. 製品名 クローン アイソタイプ 包装 使用法 交差反応性 価格(税別)

PM074 Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser351) pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IC / IH Hu / Mo ¥48,000 M217-3 Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser351) mAb 5D5 Mouse IgG1 κ 100 µg / 100 µL WB / IC / IH Hu / Mo ¥48,000 D343-3 Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser403) mAb 4F6 Rat IgG2a κ 100 µg / 100 µL WB / IH Hu / Mo ¥48,000 D344-3 Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser403) mAb 4C8 Rat IgG2a κ 100 µg / 100 µL WB / IH Hu / Mo ¥48,000

Code No. 製品名 クローン アイソタイプ 包装 使用法 交差反応性 価格(税別)

PD041 Anti-Atg2A pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IC Hu / Mo / Rat / Ham ¥48,000 M133-3 Anti-Atg3 mAb 3E8 Mouse IgG2b κ 100 µg / 100 µL WB / IP / IC Hu / Mo / Rat / Ham ¥48,000 M134-3 Anti-Atg4B mAb 9H5 Mouse IgG1 100 µg / 100 µL WB Hu / Mo / Rat / Ham ¥48,000 M153-3 Anti-Atg5 mAb 4D3 Mouse IgG1 κ 100 µg / 100 µL WB Hu / Mo / Ham ¥48,000 PM039 Anti-Atg7 (Human) pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP Hu ¥38,000 PM090 Anti-Atg8 (Filamentous fungi) pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB Other ¥48,000 PD042 Anti-Atg9A pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IC / IH* Hu / Mo / Rat / Ham ¥48,000 M151-3 Anti-Atg10 (Human) mAb 5A7 Mouse IgG1 κ 100 µg / 100 µL WB / IH* Hu ¥48,000 M154-3 Anti-Atg12 (Human) mAb 6E5 Mouse IgG1 κ 100 µg / 100 µL WB / IP / IC Hu ¥48,000 M183-3 Anti-Atg13 mAb 5G4 Mouse IgG2a κ 100 µg / 100 µL WB / IP Hu / Mo / Rat / Ham ¥48,000 M184-3 Anti-Atg14 (Human) mAb 4H8 Mouse IgG2a κ 100 µg / 100 µL WB / IP Hu ¥48,000 PD026 Anti-Atg14 pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IC* Hu / Mo / Rat ¥48,000 PM037 Anti-GABARAP pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IC / IH* Hu / Mo / Rat / Ham / Fruit fly* ¥48,000 PM038 Anti-GATE-16 pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IH* Hu / Mo / Rat / Ham ¥48,000 PM076 Anti-Syntaxin-17 (Human) pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP / IC Hu ¥48,000 PD037 Anti-Tel2 pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP Hu / Mo / Rat / Ham ¥48,000 PM072 Anti-VMP1 pAb Polyclonal Rabbit Ig (aff.) 100 µL WB / IP Hu / Mo / Rat / Ham ¥38,000

WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Hu: Human, Mo: Mouse, Ham: Hamster *: 論文で報告されております(MBLでは未確認)。 <抗体> <抗体> 小包装品は通常製品の5分の1の容量・価格になります。 小包装品は通常製品の5分の1の容量・価格になります。 製品リスト 関連製品リスト(一部) 製品ピックアップ情報 「リン酸化 p62 抗体」 Web ページ ID【1082】 オートファジー製品リスト一覧 Web ページ ID【1086】 製品ピックアップ情報 「p62 抗体」 Web ページ ID【1081】 <キット、その他> Code●No. 製品名 包装 価格(税別)●

8486 Autophagy Watch 1 kit ¥85,000

PM036-PN Positive control for LC3 antibody 100 µL (10 tests) ¥5,000

製品ピックアップ情報 「My select sampler set」

Web ページ ID【23】 小包装品は

こちら Lane 1: GFP-tagged human p62/Neuro2a

Lane 2: GFP-tagged human p62/Neuro2a, Bafilomycin A1-treated (1 µM, 24 hr.) Lane 3: MEF

Atg5-/-Lane 4: MEF GFP-tagged Phospho-p62 Phospho-p62 100 75 50 37 (kDa) 1 2 3 4 12 |   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

(13)

13 |   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

RNAscope®/●BaseScope™ の特徴

● ● 独自の技術で超高感度で検出が可能 ● ● ドット状の染色像で、定量可能 ● ● RNase-free の環境不要 ● ● 最短 8 時間でアッセイ可能 ● ● 設計済のプローブをご提供 ● ● プローブごとの条件検討の必要なし

超高感度

in situ

ハイブリダイゼーションシステム

RNAscope®/ BaseScope™

Advanced Cell Diagnostics (ACD)社 の RNAscope® 技術は、 ZZ-paires probeを用いて、RNAを単一分子の感度で検出および定量することを 可能とした革新的な in situ ハイブリダイゼーションシステムです。独自の増感ステップを採用した、目的別の2つのプラットフォームをご用意しています。 RNA-RNP ネットワーク >> In situ ハイブリダイゼーション試薬

超高感度テクノロジーの基本原理●-RNAscope®-BaseScope™ キットがバージョンアップしました!

従来品と比較し、よりバックグラウンドが抑えられ、より綺麗に検出できるようになりました。 プローブの設計には変更ありませんので、すでに購入済みの BaseScope™ プローブもご使用いただけます。 RNAscope® と共通に使用できる前処理キット ( 賦活化バッファーやプロテアーゼ ) にも変更はありません。 直腸がん ( グレードⅡ ) 組織切片 の PPIB の染色結果 (左:明視野 下:暗視野) <検出キット(フルキット)> Code No. 製品名 検出 色調 包装 価格(税別)

322300 RNAscope® 2.5 HD Reagent Kit-BROWN 色素 Brown 1 KIT [20 slides] ¥200,000 322350 RNAscope® 2.5 HD Reagent Kit-RED 色素(蛍光) Red 1 KIT [20 slides] ¥200,000 323900 BaseScopeTM Reagent Kit v2-RED 色素(蛍光) Red 1 KIT [20 slides] ¥225,000

※RNAscope®のキットは他にもご用意があります。詳しくは弊社HPをご覧ください。

<プローブ>

Code No. 製品名 包装 価格(税別)

ACD Cat. No. RNAscope® Target Probe (ACD 社のカタログ掲載名) 1 VIAL [20 slides] ¥113,000 ACD Cat. No. BaseScopeTM Target Probe (ACD 社のカタログ掲載名) 1 VIAL [20 slides] ¥150,000

※BaseScopeTM プローブはRNAscope® プローブと互換性がありませんのでご注意ください(最新のカタログ情報はACD社のウェブサイト https://acdbio.com/ をご確認ください)

既存ブローブが無い場合、プローブのカスタム作製も承ります。カスタマーサポート(support@mbl.co.jp)までお問い合わせください。 その他必要な製品・機器類は弊社HPでご確認下さい。

製品ピックアップ情報「RNAscope®

Web ページ ID【1072】 RNAscope

® / BaseScope™ カタログ Web ページ ID【1059】 製品ピックアップ情報「BaseScope™」 Web ページ ID【1035】 ①ターゲットRNAに、相補的に設計したZZプローブがハイブリダイズ。 ②結合しZZプローブの上部の連結部分をベースにしてPreAMP、AMP、Labeled Probeが順にハイブリダイズすることで2段階でシグナルが増幅されます。 ① ② RNA

AMP Labeled probebinding site Labeledprobe

PreAMP プローブデザイン 相補的塩基対 相補的塩基対 PreAMP 結合部位 14 bases ターゲット結合部位 18-25 bases RNAscope

®

BaseScope™

(14)

|   Special T alk   |   特集   がん免疫   |   TOPICS   | 14 骨代謝 これらのキットは研究用試薬です。 Code●No. 製品名 包装 価格(税別)●

DS-AC57SF1 25-Hydroxy Vitamin Ds EIA 96 wells ¥97,000 DS-AC62F1 1,25-Dihydroxy Vitamin D EIA 96 wells ¥150,000

IDS 社 ELISA キット

骨代謝マーカー測定キット

■●PINP●●Ⅰ型プロコラーゲン●-N-●プロペプチド

骨形成において重要なステップは骨基質の主要な有機的構成成分であるⅠ型コラーゲンの合成です。コラーゲン合成 の間、コラーゲン分子前駆体の N 末端、C 末端の両方からペプチド前駆体は切断され血液中に放出されます。ヒトのⅠ 型コラーゲン N 末端前駆体(PINP)は骨形成の最も特異的で感度の高いマーカーです。PINP は、特に骨粗鬆症治療 効果をモニターするマーカーとして使用されていますが、骨吸収抑制治療効果をモニターするための最も良いマーカー の一つでもあります。

■●CTX-Ⅰ●●Ⅰ型コラーゲン●-C-●テロペプチド

骨形成される一方で、破骨細胞による骨吸収過程でⅠ型コラーゲン繊維は、Ⅰ型コラーゲン架橋 N 端テロペプチド(NTX)、Ⅰ型コラーゲン架橋 C 端テロ ペプチド(CTX-Ⅰ)およびⅠ型コラーゲン C 端テロペプチド(Ⅰ CTP)に分解されます。これらは骨吸収マーカーとして汎用されています。CTX-Ⅰは、特に骨 粗鬆症の診断治療効果の判定に用いられています。

■●TRACP●5b● 酒石酸抵抗性酸フォスファターゼ

酒石酸抵抗性酸フォスファターゼ(TRACP)は骨吸収を行う破骨細胞と活性化したマクロファージによって大量に発 現されます。血中のTRACP には TRACP 5aとTRACP 5b の 2 つのフォームが存在し、 TRACP 5a は炎症性マクロ ファージ、TRACP 5b は破骨細胞に由来します。破骨細胞は活性型 TRACP 5b を分泌しますが、血中から除去され る前に不活化され分解されるため、TRACP 5b 活性は腎不全や肝不全であっても蓄積されることはありません。血清 TRACP 5b の日周変動は低く、摂食の影響を受けないため、いつでも検体が採取できます。

■●CTX-Ⅱ Ⅱ型コラーゲン‐C-テロペプチド

Ⅱ型コラーゲン架橋C端テロペプチド (CTX-Ⅱ) は、関節リウマチ(RA)、変形性関節症(OA)どちらの疾患においても血液、尿中の濃度が正常値よりも高 値になる事が知られており、 病態との関連性も明らかになるなど注目されている分子です。

CTX-Ⅱ EIA Kitは、RA及びOAの疾患モデル動物の血清、尿中のCTX-Ⅱ濃度を測定できるELISA Kit です。

ビタミン D 測定キット

■●ビタミンDの代謝

脂溶性ステロイドプロホルモンであるビタミンDは、エルゴカルシフェロール(D2)とコレカルシフェロール(D3)の2つに分けられます。ビタミンD3は、太陽の 紫外線照射によって、7-デヒドロコレステロールから生合成されます。また、ビタミンDは、体内で生合成される他にも、魚介類、キノコ、ビタミンD強化食品、 サプリメントなどの食品摂取によって生体内に取り込まれます。 生合成あるいは摂取されたビタミンDは脂肪組織にいったん貯蔵されますが、その後、肝臓でヒドロキシル化されて、25 (OH)ビタミンDになります。さらに 腎臓においてその一部が副甲状腺ホルモンおよびイオン化カルシウム存在下でヒドロキシル化され、活性化ビタミンDである1,25 (OH)2 ビタミンDに代謝 されます。

■●疾患との関わり

ビタミンDは、腸からのカルシウムおよびリンの吸収や腎臓でのカルシウムおよびリンの再吸収の促進などに重要な役割を果たし、25 (OH)ビタミンDの欠 乏は、副甲状腺機能亢進症や、骨代謝障害(くる病、骨粗鬆症や骨軟化症など)の疾患と関連しています。 また、副甲状腺機能低下症や、骨代謝障害、慢性腎不全などの疾患では、1,25 (OH)2 ビタミンDが低値となり、副甲状腺機能亢進症では、1,25 (OH)2 ビ タミンDは高値となります。 Code No. 製品名 サンプル 包装 交差反応性 価格(税別)

DS-AC33F1 Rat/Mouse PINP ELISA 血清、血漿 ( Heparin or EDTA)、培養上清 96 wells Mouse, Rat ¥227,000

DS-SBTR102* RatTRAPTM Assay (TRACP 5b ELISA) 血清 96 wells Rat ¥97,000

DS-SBTR103* MouseTRAPTM Assay (TRACP 5b ELISA) 血清 96 wells Mouse ¥97,000

DS-AC04F1 ALPHA CrossLaps® ELISA (CTX-Ⅰ) 尿 96 wells Human ¥180,000

DS-AC06F1 RatLapsTM ELISA 血清、血漿、尿、培養上清 96 wells Mouse, Rat, Guinea pig ¥115,000 DS-AC07F1 CrossLaps® for Culture ELISA (CTX-Ⅰ) 培養上清 96 wells Human, Bovine, Chicken, Pig, Elephant ¥132,000 DS-AC12F1 Rat-MIDTM Osteocalcin ELISA 血清、血漿 96 wells Rat, Rabbit, Bovine, Chicken, Pig ¥97,000

DS-AC14F1 Corticosterone EIA 血清、血漿 96 wells Mouse, Rat ¥97,000

DS-AC15F1 Corticosterone HS (High Sensitivity) EIA 血清、血漿 96 wells Multi species ¥97,000 DS-AC08F1 Serum Pre-Clinical CartiLaps® ELISA (CTX-Ⅱ) 血清、血漿、軟骨片培養上清、滑液 96 wells Mouse, Rat, Rabbit ¥138,000 DS-AC09F1 Urine Pre-Clinical CartiLaps® ELISA (CTX-Ⅱ) 尿、軟骨片培養上清 96 wells Mouse, Rat, Rabbit, Bovine, Pig, Rhesus monkey ¥138,000

※カルタヘナ法該当品です。ご購入前に各機関における機関内承認が必要になります。 製品ピックアップ情報 Web ページ ID【1073】 骨芽細胞 骨形成マーカー 骨吸収マーカー コラーゲン線維 コラーゲン 分子前駆体 コラーゲン分子 PINP PICP 血中 N C NTX CTX 骨分解産物 + TRACP 5b 骨吸収窩 波状縁 破骨細胞 |   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

(15)

15 |   Special T alk   |   特集   オートファジー   |   TOPICS   |

シングル細胞タンパク質の多変量解析に

CyTOF

®

マスサイトメトリー測定受託

CyTOF®(cytometry by time-of-flight: CyTOF®)とは、フローサイトメトリーで使用される蛍光標識抗体の代わりに、金属同位体標識抗体を用いて細胞 内外のタンパク質を検出する技術です。

金属同位体標識を用いて40以上のパラメーターの解析が同時に可能であり、多岐にわたる多変量解析が実施できます。これにより、従来検出が困難であっ た細胞集団の同定や細胞表面や細胞内タンパク質の網羅的な解析が可能です。

測定機器 Helios™, a CyTOF® System

サンプル 細胞 5 x 105/mL以上の細胞数(1 mL以上) 納品物 測定データ(fcs 形式) (データ解析はお受けしておりません。多変量データ解析はFlowJoなど のフローサイトメトリー用の解析ソフトウェアまたは「Cytobank」をご 利用ください。) 納品方法 クラウド

Information

アウトレットセール好評開催中!

製品有効期限が短くなった製品を お得なプライスでご提供いたします。 詳しくはWebページをご覧ください。 * 在庫無くなり次第終了となりますので、注文頂 いた際に製品を用意出来ない場合もあります。 その場合は何卒ご了承ください。 * webに専用注文用紙がございます。 MBLライフサイエンス サイトTOPからバナーをクリック!

研究に役立つ MBL Web コンテンツのご紹介

MBLライフサイエンスサイトTOP からバナーをクリック! WebページID【977】 抗体の基礎知識~各実験の原理・方法まで掲載。 AZ's Point でポイントを分かりやすく解説。 実験操作の動画もあります。 随時更新。

学会・セミナー情報

ICN2018

(19

th

International Congress of Neuropathology)

2018年9月23日(日)~27日(木)

東京/京王プラザホテル *その他学会出展最新情報は Web ページをご覧ください。 申込み詳細はwebへ! 製品ピックアップ情報 Web ページ ID【1070】 詳細は WEB をご覧ください。 本受託は「株式会社聖路加医学生物学研究所(SLMBL)」でのサービスです。 お客様にて金属標識抗体で染色された細胞、もしくはSLMBLで染色した細胞を測定します。

Helios™, a CyTOF® System

© 2017 Fluidigm Corporation, All rights reserved.

株式会社聖路加医学生物学研究所

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150069-18071120N 2018.07

Copyright 2018 MEDICAL & BIOLOGICAL LABORATORIES CO., LTD. All Rights Reserved.

◎LSTR事業部 〒460-0008 名古屋市中区栄四丁目5番3号 KDX名古屋栄ビル10階 TEL :(052)238-1904 FAX :(052)238-1441 E-mail : support@mbl.co.jp

http://ruo.mbl.co.jp/

完全化学合成ポリマーのブロッキング試薬に幅広くご利用いただける試薬が登場!

Blockmaster

™ PA シリーズ :

Blockmaster

™ PA1080

Blockmaster™ PAシリーズは、幅広くご利用いただける物理吸着型完全化学合成のブロッキング試薬です。 疎水性ユニットと親水性ユニットが適切なバランスで配置されたJSR社独自の水溶性ポリマーで構成されており、 マルチプレートやシャーレ等の各種材質に対して優れたタンパク質や細胞の吸着防止効果を付与します。 BSAの代替としてお使いいただけます。 親水性ユニット 疎水性ユニット基材への物理吸着能 細胞、タンパク質の吸着防止機能 全ての研究者

特徴

● ● ウイルス、タンパク質フリー ● ● 各種基材への非特異的吸着を抑制 ● ● 各種アプリケーションに利用可能 ● ● 一定品質

適応可能基材

IgGを用いたプレート吸着試験では本製品は顕著なタンパク質吸着抑制 効果を示しました。 HT29細胞を用いた培養プレート吸着試験では本製品でコートすること により細胞接着を抑制しました。 未処理基材対比 非特異的タンパク質(IgG)吸着低減率 ◎:90%以上、○:80%以上、△:70%以上、×:70%未満

タンパク質吸着阻害効果

細胞接着防止効果

Code●No. 製品名 包装 価格(税別)● J-DB1130 Blockmaster™ DB1130 100 mL ¥10,000 Code●No. 製品名 包装 価格(税別)●

J-PA1080 Blockmaster™ PA1080 100 mL ¥20,000

Code●No. 製品名 包装 価格(税別)●

J-CE210RAN Blockmaster™ CE210 100 mL ¥60,000

J-CE510RAN Blockmaster™ CE510 100 mL ¥50,000

Blockmaster™●CEシリーズ●:●化学結合型合成ブロッキング試薬 Blockmaster™●DBシリーズ●:●ラテックス用ブロッキング試薬 <関連製品>

使用例

PS PP COP Glass PDMS PVDF celluloseNitro BlockmasterTM PA1080 ◎ ◎ ◎ ◎ ○ ○ ◎ BSA ◎ ◎ ◎ ○ △ × × NEW! 製品ピックアップ情報 Web ページ ID【1069】 ブロッキング試薬 Blockmaster™ PA1080 treated surface

参照

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