博 士 （ 医 学 ） 小 林 寿 美 子
学 位 論 文 題 名
同種造血幹細胞移植における血清可溶性 IL ― 2 レ セプ ター値の動態に関する研究
学位論文内容の要旨
I緒言
血 清 可 溶 性IL．2レ セ プ 夕‑a鎖 （血 清sIL‑2R）は ，T細胞 を 中心 とす る種 々の 細 胞表 面に 存在 し ，生 体 の免疫防御機構やT細胞系の活性化に伴い上昇する，移植片対宿主病（g raft・v ersus・host dis ease； GVHD) は 同 種 造 血 幹 細 胞 移 植 に 起 こ り， これ を 克服 する こと は移 植 成績 向上 に重 要で あ る． しか し現 在 のと こ ろGVHDの 病 勢 把 握 ， 発 症 予 知 ， 治 療 効 果 判 定 に 定 量 性 や 客 観 性 の あ る 指 標 が な いた め， 免疫 反 応の 中 心 と な るT細 胞 系 の 活 性 を 反映 す る血 清sIL・2R値 の変 動を 検 索す るこ とは 臨床 的 に有 用で ある と 考え ら れ る ． そ こ で 同 種 造 血 幹 細 胞 移 植 後 のGVHDに お け る 血 清sIL‑2R値 の 臨 床 的 意 義 と移 植前 後に 投 与さ れ るサイトカインが血清sIL‑2R値に与える影響につい て検討した，
II対象と方法
同 種 造 血 幹 細 胞 移 植 を 実 施 し た38例 を 対 象 と し た ， 症 例 の 内 訳 は 急 性 骨 髄 性 白血 病が11例 ， 急性 リ ンパ 性自 血病jj,5例 ，慢 性骨 髄 性自 血病10例 ，急 性 混合 型白血病が1例，骨髄異形成症候群カヾ6例，3系統 に 異 形 成 を 認 め る 急 性 骨 髄 性 自血 病が1例 ，重 症再 生 不良 性貧 血が2例 ，非 ホジ キ ンリ ンパ 腫と 多 発性 骨 髄腫が各1例の計38例で ある．急性GVHDは21例に認められ（I度：12例，II度：5例，III度：2例，IV例：2例），
慢性GVHDは11例 （全 身型 ：8例， 限局 型3例） に認 め た， 血清sIL・2R値の観察時期は移植前，生 着時，急性 GVHD発 症 時 と 治 療 後 お よ び 慢 性GVHD発 症 時 と し た ． 生 着 促 進 目 的 で 投 与 し た サ イ ト カ イ ン は 顆 粒 球 コロ ニー 刺激 因 子(GーCSF） が35例， マク 口 ファ ージ コロ 二 一刺 激因 子(M−CSF） 及び顆粒球／ マク□ファ ー ジ コ 口 二 ー 刺 激 因 子 （GM‑CSF） 使用 例 が各 々1例 ず つで あっ た． さ らに ，移 植後 の血 清sIL‑2R値 がG・ CSFの 投 与 や 免 疫 抑 制 剤 の 種 類 に よ っ て 影 響 を 受 け る か 否 か ， ま た 移 植 前 に 投 与 さ れ たG‑CSFの 血 清 sIL‑2R値 へ の 影 響 に つ い て も 検 討 し た ． 血 清sIL‑2Rの測 定方 法は ，2っの 異な る エピ トー プを 認 識す る モ ノ ク 口 ナ ー ル 抗 体 を 使 用 す る サ ン ド イ ッ チ 酵 素 免 疫 吸 着 法 に よ り 比 色 定 量 で 測 定 し た(C ellfree interleukin‑2 receptor bead assay kit，Cambridge社），血清G―CSF濃度はEIA法(CyclizerGーCSF，Kainos 社）により測定した（健 常人における正常値は12．6 +5.87pg/ml）．検体は血清 に分離後，測定まで・40℃で 保 存 し ， 血 清sIL‑2R値 の コ ン ト口 一ル にfま健 常人16名を 対象 とし た(3 41土81U/ml） ，統 計学 的 検討 は
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Student t‑testを用い，危険率5％以下を有意と判定した，
III結果 1．生着前後の検討
1）生 着時 の血 清sIL‑2R値：GーCSFを使 用した全例が急性GVHDの有無にかかわらず移植前（541土 349U/ml)に比較して血清sILー2R値は生着時に有意に高く（2，416土93 2U/ml)(pく0．01），検討しえた26例 中1例を除く25例が経過中の最高値を示した（1，080〜4，200 U/ml）．前処置前および生着時における血 清sIL‑2R値と急性GVHDの発症に相関を認めなかった．
2） 移植 前の サイ トカイン投与の影響：移植前にG‑CSFを使用した3例 （1，263土181U/ml)における移 植前 血清sILー2R値はG−CSF未使 用例(368＋一28U/ml，394土85 U/ml）に比して有意に高値を認めた(G‑
CSF;pくO．01）．
3） 急性GV HD予防法の影響；急性GV HD予防法やG―CSF投与期間と血 清sIL‑2R値には有意差は認めな かった，
2.急性GVHD発症時期の検討
1） 急性GV HDを認 めた16例 は認 めな かっ た11例に比較して，発症時 において血清sIし2R値は有意に 高値であった（2，349士215 U/ml vsl，462+123 U/ml)(pく0．01）．また急性GVHDI度とII度以上の群の比 較においても同様に有意差を認めた（2，114土271 U/ml vs2，852土651U/ml)(pくO．04），ー方急性GVHD を 認 め な か っ た11例 は ， 移 植 後12週 目 で ほ ぼ 移 植 前 値 に 復 し て い た(541土67U/ml） ． 2） 急性GV HD発症 とG−CSF使用 時期 ：G−CSF投与後にGVHDを認めた10例の血清sIL−2R値は，G‑CSF 投 与中 にGV HDを 発症 した6例に 比し て有 意に低かった（1，834土614 U/mJ vs2，845+703U/ml)(pく 0． 01)．
3.慢性GVHD発症時期の検討
de novo type4例の発症前血清sIL‑2R値は急性GVHDのみを認めた群 のそれに比して有意に高かった
（pく0．02）．全身型は限局型に比較して有意に血清sIL‑2R値は高値を認め（pくO．01），生死別では慢性 GVHD関連死3例は全例が全身型で あり，発症前値および治療後におし、ても生存8例と死亡3例に有意差 を認めた(662土125U/mll vs 290土172 U/ml)(pく0．01‑)．
IV考察
同 種造血幹細胞移植後における血清sIL・2R値の変動は，生着時に全経過中の最高値を認め，生着時の 指標 になりうると考えられた．しかレこの現象は血清G・CSFの濃度と血清sIL‑2R値との間に正の相関 を 認め て おり ，外 因性 のG・CSFの影 響に よってもたらされる可能性 が示唆された，また同値は急性 GVHDの 重 症度 に→ 致し て高 値と なり ，特 にII度以上の急性GVHDにお けるモニタリングには有用性が 高い ことが示唆された．一方で移植前あるいは生着促進目的で投与されるG・CSFは，移植後早期に活性 化 され る 様々 な内因性サイ卜カインと影 響を及ぼし合い，T細胞系の 活性化のみならずサイトカイン ネッ トワークを介した調節機構から血清sIL・2R値の変動に影響していることが示唆された．慢性GVHD
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の動態に関しては，先行する急性GVHDの有 無や変動値の差などから早期より高値を示し，治療後も高 値を持続する症例は予後不良であったこと から，発症の予知のみならず予後の推測にも利用できるこ とが示唆された．
V結語
同種造血幹細胞移植後における血清sIL‑2R値は，移植後の生着時に全経過中の最高値を認め，これは 外因性に投与されるG‑CSFが影響を及ぼすが，前処置や免疫抑制剤の投与内容とは無関係であった．急 性GVHDにおいては重症度に一致して上昇し ，G―CSFの影響がない時期の急性GV HDの発症予知は可能 であった，慢性GVHDでは発症の予知と治療効果判定，予後の推測など臨床的意義が高いと考えられた．
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学位論文審査の要旨
学 位 論 文 題 名
同種造血幹細胞移植における血清可溶性 IL ― 2 レセ プタ ー値の動態に関する研究
血 清 可 溶 性IL‑2レ セ プ タ ー ロ 鎖 （sIL‑2R） は 生 体 の 免 疫 防 御 機 構 の 活 性 化 や 、T 細 胞 系 の 活 性 に 伴 い 上 昇 す る た め 、 同 種 造 血 幹 細 胞 移 植 後 の 移 植 片 対 宿 主 病
（Graft‑Versus―Host Dis ease；GVHD） に お い て 変 動 す る と 考 え ら れ る 。GVHDの 病 勢 把 握 、 発 症 予 知 、 治 療 効 果 判 定 に は 定 量 性 や 客 観 性 のあ る 指標 が な いた め 、免 疫 反 応 の 中 心 と な るT細 胞 系 の 活 性 を 反 映 す る と 考 えら れ る 血清sIL・2R値 の変 動 を 検 索 レ 、 臨 床 的 意 義 に つ い て 臨 床 的 検 討 を 行 っ た 。38例 の 同 種 造 血 幹 細 胞 移 植 例 を 対 象 と レ 、 血 清sIL‑2Rの 測 定 は 前 処 置 前 、 生 着 時 、 急 性GVHD発 症 時 期 お よ び 治 療 後 、 慢 性GVHD発 症 時 期 と し た 。 生 着 促 進 目 的 で 投 与 し た サ イ ト カ イ ン は 顆 粒 球 コ 口 二 ー 刺 激 因 子 （G‑CSF） が35例 で あ っ た 。 さ ら に 、移 植 後 の血 清sIL‑2R値 がG・ CSFの 投 与 や 免 疫 抑 制 剤 の 投 与 の 違 い に よ っ て 影 響 を 受 け る か 否 か に つ い て も 検 討 し た 。 血 清sIL−2Rの 測 定 方 法 は 、2っ の 異 な る エ ピ ト ー プ を 認 識 す る モ ノ ク 口 ナ ー ル 抗 体 を 使 用 す る サ ン ド イ ッ チ 酵 素 免 疫 吸 着 法 に よ り 比色 定 量で 測 定 した 。 同種 造 血 幹 細 胞 移 植 後 に お け る 血 清sILー2R値 の 変 動 は 、 生 着 時 に 全 経 過 中 の 最 高 値 を 認 め 、 生 着 時 の 指 標 に な り う る と 考 え ら れ た 。 し か レ こ の 現 象 は 血 清G・CSFの 濃 度 と 血 清sIL‑2R値 と の 間 に 正 の 相 関 を 認 め て お り 、 外 因 性 のG‑CSFの 影 響 が 大 き い こ と が る 示 唆 さ れ た 。 ま た 同 値 は 急 性GVHDの 重 症 度 に 一 致 し て 高 値 と な っ た 。 慢 性GVHDに つ い て は 、G‑CSFの 影 響 が 少 な い た め 、 発 症 の 予 知 と 治 療 効 果 判 定 に 有 用 な 結 果 が 得 ら れ 、 予 後 の 推 測 な ど 臨 床 的 意 義 が 高 い と 考 え ら れ た 。 公 開 発 表 に 際 し て 、 副 査 の 小 児 科 の 小 林 教 授 か ら 、G‑CSF使 用 の 有 無 に よ る 血 清sIL‑2R値 の 変 動 は ど う か と の 質 問 が あ っ た 。 申 請 者 は 、G‑CSFの 未 使 用 例 で は 生 着 時 に 血 清sIL―2R値 の 上 昇 は 認 め ら れ な か っ た が 、 急 性GVHDが 発 症 す る 例 で は
