68 学 会 〔東女医大誌 第61巻 第7号頁598∼604平成3年7月〕
東京女子医科大学学会第287回例会
日時 平成3年6月13日（木）午後3：00∼6：15
会場 東京女子医科大学中央校舎1階会議室
1．アドレナリン作動性β受容体を介するラット 褐色脂肪組織血流量調節について （薬理学） ○内田 庸子・村木 篁・野本 照子 褐色脂肪組織（BAT）産熱機構が全身のエネルギー バランスに果す役割は大きい．この組織は交感神経支 配下にあり，noradrenalineが主としてβ受容体を介 し機能を充進ずることが知られている．こ㊧β受容体 は，従来のβ1，β2とは異なるatypical type（β3）であ る可能性が指摘されている．化学構造上isoproterenoI （ISP）と近縁の新規β作用薬（Beecham）BRL 26830 AおよびBRL 35135は， BATのβ受容体を選択的に 刺激し，強力な産熱性，抗肥満性を示すことが明らか となってきた．そこで本研究では，新規β作用薬BRL26830AおよびBRL 35135の成熟雄性ラットBAT血
流量に及ぼす効果を明らかにするために，対照薬ISP と比較検討した． ウレタン麻酔下，β作用薬を頸静脈よりbo1賂injec− tion後，肩甲骨間褐色脂肪組織（IBAT）血流量を， laser−Doppler血流量計にて測定，血圧，心拍数を同時 にモニターした．（1）ISPおよび新規産熱性β作用薬 BRL 26830A， BRL 35135は用量依存性に， BAT血流 量を増大した．（2）これらβ作用薬の血流量増大作用 コら は，BRL 35135＞ISP＞BRL 26830Aであった．（3） ISPに認められた顕著な用量依存性の心拍数増加，拡 張期血圧減少は，BRL 26830A， BRL 35135では，認 められなかった．（4）BRL 26830AおよびBRL 35135 の血流量増大作用は，β・blockerのacebutolol， al− prenolol前投与により抑制されたが， ICI 118，551前 投与により影響をうけなかった．これらの結果，新規産熱性β作用薬，特にBRL
35135は，ISPと異なり，血圧，心拍数に影響の少ない 用量でBAT血流量増大作用が強いことから， BAT選 択性が高いことを示唆しているものと考える． 2．Dopaminergic Interplexiform Ce11（第1生理）0瘡 陽・前原 通代 日高 聡・橋本葉子 Interplexiform ce11（IP細胞）は網膜内における第 6番目の細胞型として知られ，その細胞体はアマクリ ン細胞層に位置し，樹状突起を内網状層に広げ，上行 性の突起が外網状層まで到達した細胞形態をとる遠心 性ニューロンである．その一種はドーパミン作動性で あることが報告されているが，その詳細な形態および 網膜内分布は余り知られていない．
今回，我々はウグイ剥離網膜を用い，抗TH
（tyrosine hydroxylase）抗体を用いて新しく開発した 免疫細胞化学法により，ドーパミン作動性細胞の詳細 な形態および網膜上での分布を解析した．内網状層に おける樹状突起の分岐形態から，IP細胞は，（1）sub− 1amina aにのみ分岐するmonostrati且edのもの，（2） 内網状層全体に分布するmultistratiHedまたは，2層 に分布するbistrati且edのもの，の二種に分類される． また，上行性突起は，（1）細胞体から直接分岐するも の，（2）内網状層に分布する比較的太い突起から分岐 するもの，（3）細胞体および内網状層の突起から分岐 するもの，の三種が認められた．右側網膜のwhole mount上での計測から，抗体陽性細胞の細胞密度は平 均64コ／mm2，細胞間距離は平均96μmであった．更に， 光照射時に過分極性に応答し，光遮断時に特徴ある過 分極性後電位を発生する細胞にHRPを注入し，その形態を検索した結果，この細胞はdopaminergic
monostratified IP cellであることが同定された．本研 究の結果から，ドーパミン作動性IP細胞の役割と，網 膜内の他面細胞との多様な結合様式解明への発展が期 待される． 3．エンハンサートラップ法を用いた中枢神経系に 発現する遺伝子の組織学的検索 （第1生理）○町山 悦子・小松 明 プロモーターとレポーター遺伝子1acZをもつP因 子（トランスポゾン）を，jumpstart法を用いてDγ050一 ρ瀦α初6如％og嬉6γのゲノムにランダムに挿入し，3 齢幼虫の中枢神経系でのlacZ遺伝子の発現パターン 一598一69 を調べた，mutatorとしてはP−lwB（Bellen et al， 1989）をまたjumpstarterとしては∠2，3を用いた． 作製したP因子挿入系統のうち致死系統と不妊系統 はバランサー染色体と組み合わせて異型接合体とし て，また妊性系統は同型接合体にして系統保存した． 今回対象としたのは全て妊性系統である．エンハン サートラップ法では挿入部位を支配するエソハンサー の急ぎによりプロモーターが活性化され，部位特異 的・細胞特異的に，また発生段階特異的にlacZが発現 する．lacZの遺伝子発現は遺伝子産物であるβ一 galactosidaseを， X−gal法を用いて細胞内の濃青沈澱 として組織化学的に検出した． スクリーニングした181系統のうち171系統では中枢 神経系に何らかの遺伝子発現がみられた．多少とも部 位特異的な染色パターンを示したものは117系統で，そ のうち57系統は特定のニューロン群が染色された．さ らにそのうち21系統ではいくつかの体節にまたがって 相同のニューロンが，また4系統では1ないし数対の 特定のニューロンが染色された．なお2系統では脳の 特定部位が染色されるとともに，行動異常（飛翔能力 の低下）をも示した． なお本研究は山元大輔・上田 龍・佐野弓子（三菱 化成生命研）との共同研究である． 4．安定化ヘモグロビン溶液およびその赤血球浮遊 液の流動性 （第1生理）山下 雄平 安定化ヘモグロビン（以下SHbと称す）は，期限切 れ輸血用保存血の再利用を目的として，味の素中央研 究所により作製された化学修飾ヘモグロビンである． ストローマフリーヘモグロビソにピリドキサル5一リン 酸とポリオキシエチレンを結合させたもので，その数 平均分子量は約10万である．このSHbの6g／dl溶液 は，膠質浸透圧および酸素解離能の点で，血液と同等 の性質をもつことが示されている．またラットに対す る交換輸血の実験結果から肝や腎に対して悪影響を及 ぼさないこと，摘出心臓の潅流実験の結果から心臓の 機能が正常に維持されることが報告されている．この ような研究に基づき，SHb溶液の代用血液，あるいは 臓器保存液としての利用性が示唆されている． 今回の研究では，SHb溶液およびその赤血球浮遊液 について，レオロジー的立場から，その性質の検討を 行なった． 材料として，味の素中央研究室より寄贈されたSHb 溶液およびヒト赤血球を用いた．赤血球浮遊液の赤血 球容積比はほぼ42％に調節した．粘度の測定はcone− plate型粘度計（東京計器， E型）を使用し，ずり速度 19．2∼384sec 1の範囲で，25℃で行なった． SHb溶液は，血漿と異なり明らかな非ニゴートソ性 を示し，各ずり速度における見かけの粘度は，SHbの 濃度増加に伴って上昇した． 赤血球をSHb溶液に浮遊させた場合， SHbの濃度 増加に伴い，赤血球間に著しい凝集（rouleaux forma− tion）が生じた．この凝集は， SHb溶液と血漿との混 合溶液においても同様に観察された．赤血球浮遊液は， SHb溶液と同様に非ニュートン性を示し，その見かけ の粘度はSHbの濃度に依存した．この粘度上昇は凝 集が形成されないSHbの濃度範囲においても，また 高ずり速度領域においても生ずることから，SHbによ る凝集のためではなく，赤血球とSHb溶液との間の 相互作用が関与していると考えられる．以下の結果は， SHb溶液を代用血液として利用するには，さらに詳細 なレオロジー的検討の必要性を示唆するものである． 5．人工血液を用いたラット摘出肺機能評価システ ムによる肺保存条件の検討 （呼吸器センター外科，＊鼓動宇都宮病院） ○曽根 康之・小野 完二・中島 秀嗣＊ 田原 士朗・露国 俊成・大貫 恭正 横山 正義・新田 澄郎 目的：パラフルオロケミカルを潅流液に用いたラッ ト摘出肺標本による機能評価システムを作製し，保存 肺機能を定量的に評価した． 方法：換気潅流装置は，人工呼吸器（94。5％02十 5．5％CO2），人工肺（5％02＋6％CO2＋89％N2），熱 交換器（37℃）およびリザーバーより構成され，灌流
