Title 拡張型心筋症に対する顆粒球コロニー刺激因子を用いた非 侵襲性再生医療の挑戦( はしがき等 )
Author(s) 藤原, 久義; 竹村, 元三; 荒井, 正純; 小財, 健一郎
Report No. 平成15年度-平成17年度年度科学研究費補助金 (基盤研究(A)
一般 循環器内科学 課題番号15209027) 研究成果報告書
Issue Date 2006-03
Type 研究報告書
Version
URL http://hdl.handle.net/20.500.12099/2810
※この資料の著作権は、各資料の著者・学協会・出版社等に帰属します。
拡張型心筋症に対する顆粒球コロニー刺激因子を用いた 非侵襲性再生医療の挑戦
１５２０９０２７
平成 15 年度～平成 17 年度 科学研究費補助金
（基盤研究(A)(2)）研究成果報告書
平成 18 年 5 月
研究代表者 藤 原 久 義
岐阜大学大学院医学系研究科教授
＜はしがき＞
骨髄幹細胞移植研究の進歩とG-CSFの役割
1）最近、成人骨髄細胞には造血幹細胞以外にも血管内皮細胞や心筋細胞を含む間葉系 の幹細胞が含まれることが明らかになった。さらに、骨髄中にはいわゆる“万能細胞”
もあるという報告も発表されている。
2）顆粒球コロニー刺激因子（G-CSF）、骨髄中のCD34やc-kit陽性細胞上の単鎖構造を したサイトカイン受容体を介し、骨髄幹細胞を増殖し、かつ抹消血へ動員する作用を持 つ。そのため、G-CSFは白血病等の血液疾患患者に対する骨髄細胞移植のためのドナー としての正常人に用いられ、すでに我が国においても保険適用されている薬物である。
DCMに対する治療研究の停滞
拡張型心筋症（DCM）・虚血性心筋症という慢性心不全は重症度、頻度から最も重 要な心疾患である。DCMの治療として、ACE阻害剤やβ-ブロッカーを用いた対症療法 があるが、効果は極めて限定されている。唯一の根治療法は心移植であるが、我が国の 脳死移植の困難さから将来性は暗い。これまでの治療法の限界より、新しい再生医療の 展開が求められている。
本研究の目的
我々はウサギ虚血・再灌流モデルを用いて心筋梗塞後の顆粒球コロニー刺激因子（G -CSF）の短期皮下注射が骨髄由来心筋細胞の再生やサイトカイン効果を介して梗塞後 の心機能を改善することをウサギならびにヒトで見い出した。また我々は、マウス心筋 梗塞にHGFやsFas遺伝子治療を行い、長期予後および心機能を改善することを見い出し た。
そこで本研究ではこれまでの急性心筋梗塞から慢性心不全へと研究を展開し、G-CSFが 拡張型心筋症・虚血性心筋症に有効か、有効とすれば其の機序は何かを明らかにする。
学術的特色・独創的な点
1) 非侵襲性再生医療の開発という発想のユニークさ：全身麻酔下で採取し、精製した 骨髄幹細胞を血管新生のために病変部に直接筋注するという侵襲的再生医療が先端医 療として行われ、我々も良好な結果を得ている。しかし、G-CSF皮下注射法という非侵 襲的再生医療をDCMに対して行う試みは、本研究が世界で初めてである。
2）G-CSF長期投与の試み：梗塞後の再生に対しては、短期（5日間）のG-CSF皮下注射 法が有効であった。今回は、梗塞組織とは全く異なるメカニズム・組織形態を持つDC Mに対する再生医学の開発のために、G-CSFの長期投与に挑戦する。これも世界ではじ めての試みである。
3）優れたtranslational research：G-CSF皮下注射法という非侵襲的再生医療は、心移植 と異なり拒絶反応の心配もなく、心不全のあるDCM患者に対しても直ちに臨床応用で きる。本研究は、我が国から発進する21世紀型の translational DCM治療戦略として最適 である。
本研究の意義
本研究は、我が国の心移植医療対象の約90％を占める難治性心不全であるDCMの治 療を一変させる可能性がある。我が国における心移植医療の困難さを考慮すれば社会的 重要性は明らかである。
研究組織
研究代表者：藤原久義（岐阜大学大学院医学系研究科教授）
研究分担者：竹村元三（岐阜大学医学部附属病院講師）
研究分担者：荒井正純（岐阜大学医学部附属病院講師）
研究分担者：小財健一郎（久留米大学高次脳疾患研究所教授）
交付決定額（配分額）
（金額単位：円）直接経費 間接経費 合計
平成 15 年度 17,800,000 5,340,000 23,140,000
平成 16 年度 8,000,000 2,400,000 10,400,000
平成 17 年度 8,000,000 2,400,000 10,400,000
総計 33,800,000 10,140,000 43,940,000
研究発表
（1）学会誌等
1. Li Y, Takemura G, Kosai K, Yuge K, Nagano S, Esaki M, Goto K, Takahashi T, Hayakawa K. Koda M, Kawase Y, Maruyama R, Okada H, Minatoguchi S, Mizuguchi H, Fujiwara T, Fujiwara H
Postinfarction treatment with an adenoviral vector expressing hepatocyte growth factor relieves chronic left ventricular remodeling and dysfunction in mice.
Circulation 2003, 107(19):2499-2506
2. Hayakawa K, Takemura G, Kanoh M, Li Y, Koda M, Kawase Y, Maruyama R, Okada H, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Inhibition of granulation tissue cell apoptosis during the subacute stage of
myocardial infarction improves cardiac remodeling and dysfunction at the chronic stage.
Circulation 2003, 108(1):104-109
3. Wang N, Minatoguchi S, Chen X, Uno Y, Arai M, Lu C, Takemura G, Fujiwara T, Fujiwara H
Antidiabetic drug miglitol inhibits myocardial apoptosis involving decreased hydroxyl radical production and Bax expression in an ischaemia/reperfusion rabbit heart.
Br J Pharmacol 2004, 142(6):983-990
4. Minatoguchi S, Takemura G, Chen X, Wang N, Uno Y, Koda M, Arai M, Misao Y, Lu C, Suzuki K, Goto K, Komada A, Takahashi T, Kosai K, Fujiwara T, Fujiwara H Acceleration of the healing process and myocardial regeneration may be important as a mechanism of improvement of cardiac function and remodeling by
postinfarction granulocyte colony-stimulating factor treatment.
Circulation 2004, 109(21):2572-2580
5. Kawai T, Takahashi T, Esaki M, Ushikoshi H, Nagano S, Fujiwara H, Kosai K Efficient cardiomyogenic differentiation of embryonic stem cell by fibroblast growth factor 2 and bone morphogenetic protein 2.
Circ J 2004, 68(7):691-702
6. Li Y, Takemura G, Kosai K, Takahashi T, Okada H, Miyata S, Yuge K, Nagano S, Esaki M, N.C. Khai, Goto K, Mikami A, Maruyama R, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Critical roles for the fas/fas ligand system in postinfarction ventricular remodeling and heart failure.
Circ Res 2004, 95(6):627-636
7. Ikoma T, Takahashi T, Nagano S, Li Y, Ohno Y, Ando K, Fujiwara T, Fujiwara H, Kosai K
A definitive role of RhoC in metastasis of orthotopic lung cancer in mice.
Clin Cancer Res 2004, 10(3):1192-1200 8. Takemura G, Fujiwara H
Role of apoptosis in remodeling after myocardial infarction.
Pharmacol Ther 2004, 104(1):1-16
9. Okada H, Takemura G, Kosai K, Li Y, Takahashi T, Esaki M, Yuge K, Miyata S, Maruyama R, Mikami A, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Postinfarction Gene Therapy Against Transforming Growth Factor-β Signal Modulates Infarct Tissue Dynamics and Attenuates Left Ventricular Remodeling and Heart Failure.
Circulation 2005, 111(19):2430-2437
10. Misao Y, Arai M, Ohno T, Ushikoshi H, Takahashi T, Takemura G, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Cyclophosphamide Improves the Function of Post-Infarct Hearts by Reducing Old Infarct Area and Accelerating the Mobilization of CD34+ Cells.
Circ J 2005, 69(6):763-765
11. Nagano S, Oshika H, Fujiwara H, Komiya S, Kosai K
An efficient construction of conditionally replicating adenoviruses that target tumor cells with multiple factors
Gene Therapy 2005, 65(12):1385-1393
12. Ushikoshi H, Takahashi T, Chen X, Ngin Cin Khai, Esaki M, Goto K, Takemura G, Maruyama R, Minatoguchi S, Fujiwara T, Nagano S, Yuge K, Kawai T, Murofushi Y, Fujiwara H, Kosai K
Local overexpression of HB-EGF exacerbates remodeling following myocardial infarction by activating noncardiomyocytes
Laboratory Investigation 2005, 85(4):862-873
13. Miyata S, Takemura G, Kawase Y, Li Y, Okada H, Maruyama R, Ushikoshi H, Kanamori H, Li L, Misao Y, Tezuka A, Toyo-oka T, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H.
Autophagic cardiomyocyte death in cardiomyopathic hamsters and its prevention by granulocyte colony-stimulating factor.
Am J Pathol 2006, 168(2): 386-397
14. Li Y, Takemura G, Okada H, Miyata S, Esaki M, Maruyama R, Fujiwara H Treatment with granulocyte colony-stimulating factor ameliorates chronic heart failure
Lab Invest 2006, 86(2): 32-44
（2）口頭発表
1. Ushikoshi H, Takahashi T, Chen X, Takemura G, Esaki M, Ngin Chin Khai, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Heparin-Binding EGF-Like Growth Factor is a Pathological Factor Rather Than a Protective Factor for the Heart:Direct Evidence from Adenoviral Gene
Transduction
The 76th American Heart Association Scientific Sessions(Orland, USA) 2003,11-9-12
2. Arai M, Misao Y, Nagai Y, Uno Y, Nishigaki K, Suzuki K, Nagashima K, Tsuchiya K, Kawasaki M, Sano K, Goto K, Takemura G, Minatoguchi S, Fujiwara H
Granulocyte Colony-Stimulating Factor as a Novel and Non-Invasive Regeneration Therapy against Intractable Arteriosclerosis Obliterans
The 76th American Heart Association Scientific Sessions(Orland, USA) 2003,11-9-12
3. Minatoguchi S, Takemura G, Chen X, Wang N, Arai M, Uno Y, Misao Y, Lu C, Koda M, Fujiwara T, Fujiwara H
Acceleration of the Healing Process as Well as Myocardial Regeneration is
Important as a Mechanism of Improvement of Cardiac Function and Remodeling by Post-infarct G-CSF Treatment
The 76th American Heart Association Scientific Sessions(Orland, USA) 2003,11-9-12
4. Kawase Y, Takemura G, Minatoguchi S, Yuge K, Li Y, Okada H, Hayakawa K, Koda M, Maruyama R, Hayakawa Y, Fujiwara T, Fujiwara H
Granulocyte Colony-Stimulating Factor Prevents Left Ventricular Remodeling and Heart Failure in Cardiomyopathic Hamsters
5. Lu C, Arai M, Misao Y, Wang N, Chen X,Nagai H, Uno Y, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Ameliorating Effect of Autologous Bone Marrow Cell Transplantation in Rabbit Hearts with Cardiomyopathy
第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
6. Okada H, Takemura G, Koda M, Kanoh M, Hayakawa K, Kawase Y, Maruyama R, Li Y, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Myocardial apoptosis index based on DNA in situ nick end-labeling (TUNEL) can not predict prognosis of patients with dilated cardiomyopathy
第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
7. Ushikoshi H, Takahashi T, Esaki M, Chen X, Takemura G, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H, Kosai K
Elucidation of the roles of HB-EGF in the heart by the overexpression of HB-EGF 第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
8. Arai M, Misao Y, Nagai H, Uno Y, Nishigaki K, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Granulocyte Colony-Stimulating Factor Effectively Improved Blood Flow in Ischemic Lower Limbs in Patients with Arteriosclerosis Obliterans
第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
9. Maruyama R, Takemura G, Hayakawa K, Kohda M, Kawase Y, Li Y, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Fluctuation of intracellular Ca2+ through multiple Ca2+ regulatory proteins may be inevitable for initiating apoptosis in adult cardiac myocytes
第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
10. Chen X, Minatoguchi S, Kosai K, Yuge K, Nagano Y, Takahashi T, Arai M, Wang N, Misao Y, C. Lu, Nagai H, Takemura G, Fujiwara T, Fujiwara H
HGF gene transfer reduces myocardial infarct size through decreasing hydroxyl radicals production and enhancing expression of Bcl-2 in rabbits
第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
11. Chen X, Minatoguchi S, Arai M, Kosai K, Takahashi T, Wang N, Lu C, Misao Y, Takemura G, Nagai H, Fujiwara T, Fujiwara H
G-CSF treatment after myocardial infarction improves left ventricular function and remodeling even at 3 months after infarction
第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
12. Kawase Y, Takemura G, Kosai K, Yuge K, Takahashi T, Nagano S, Esaki M, Li Y, Okada H, Hayakawa K, Koda M, Maruyama R, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Gene transfer of soluble TGF-b type II receptor suppresses cardiac fibrosis and improves cardiac function in cardiomyopathic hamsters
第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
13. Kawase Y, Takemura G, Yuge K, Li Y, Okada H, Hayakawa K, Koda M, Maruyama R, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) prevents myocardial fibrosis and heart failure in cardiomyopathic hamsters
第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
14. Li Y, Takemura G, Hayakawa K, Kosai K, Nagano S, Takahashi T, Yuge K, Esaki M, Koda M, Kawa Y, Okada H, Maruyama R, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H Evidence for the regulatory role of Fas/Fas ligand interaction during the subacute stage of myocardial infarction for pos-infarct heart failure
第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
15. Li Y, Takemura G, Okada H, Koda M, Kawase Y, Hayakawa K, Maruyama R, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) improves function of the hearts with established heart failure due to large old myocardial infarction
第 67 回日本循環器学会総会学術集会（福岡）2003, 3.28-30
16. Okada H, Takemura G, Kosai K, Li Y, Yuge K, Esaki M, Takahashi T, Nagano S, Miyata S, Maruyama R, Fujiwara T, Fujiwara H
Postinfarction Gene Therapy Against Transforming Growth Factor-β Signal Modulates Infarct Tissue Dynamics and Attenuates Left Ventricular
Remodelingand Heart Failure
The 77th Scientific Sessions of American Heart Association (New Orleans, USA) 2004, 11.7-10
17. N.C. Khai, Mikami A, Takemura G, Minatoguchi S, Fujiwara H Ubiquitous expression of stem cell antigen-1 in cardiac endothelium
The 44th Annual Meeting of American Society for Cell Biology (Washington, USA) 2004, 12.4-8
18. Lu C, Arai M, Misao Y, Wang N, Chen X, Nagai H, Uno Y, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Regeneration-Unrelated Mechanisms Underlying Ameliorating Effect of Bone Marrow Cell Transplantation Therapy in Rabbit Hearts with Cardiomyopathy 第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
19. Takemura G, Kawase Y, Lu C, Arai M, Minatoguchi S, Fujiwara H
Regeneration Therapy for Heart Failure due to Nonischemic Cardiomyopathy 第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
20. Okada H, Takemura G, Kosai K, Li Y, Yuge K, Nagano S, Takahashi T, Esaki M, Miyata S, Maruyama R, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Combination Thearpy of Antiapoptosis and Regeneration against Postinfarct Heart Failure -A Novel Therapeutic Concept-
第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
21. Okada H, Takemura G, Kosai K, Li Y, Yuge K, Nagano S, Takahashi T, Esaki M, Miyata S, Maruyama R, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Postinfarction Gene Transfer of Soluble TGF-β Type II Receptor Relieves Heart Failure during the Chronic Stage of Myocardial Infarction
第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
22. Suzuki K, Nagashima K, Arai M, Uno Y, Minatoguchi S, Gotoh K, Fujiwara H Evaluation of G-CSF Regeneration Therapy in Patients with Old Myocardial Infarction Using Tl-201 SPECT Imaging
第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
23. Arai M, Misao Y, Nagai H, Nagashima K, Nishigaki K, Suzuki K, Sano K, Uno Y, Takemura G, Minatoguchi S, Fujiwara H
Long Term Effect of Granulocyte Colony-Stimulating Factor as a Novel and Noninvasive Regeneration Therapy Against Atherosclerotic Peripheral Artery Disease
第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
24. Minatoguchi S, Takemura G, Chen X, Wang N, Uno Y, Kohda M, Arai M, Misao Y, Lu C, Takahashi T, Kosai K, Fujiwara T, Fujiwara H
Healing Process Acceleration May be Important as a Mechanism of Improvement of Cardiac Function and Remodeling by Post-infarct G-CSF Treatment
第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
25. Miyata S, Takemura G, Kawase Y, Okada H, Hayakawa Y, Li Y, Maruyama R, Esaki M, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Autophagy, but Not Apoptosis, May be the Mode of Myocyte Death in Hearts of the Cardiomyopathic UM-X7.1 Strain Hamster
第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
26. Misao Y, Arai M, Chen X, Lu C, Wang N, Onogi H, Nagai H, Takahashi T, Takemura G, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
G-CSF after Transient Myelosuppression Improves Cardiac Function via More Myocardial Regeneration and Vasculogenesis than G-CSF Alone in
Ischemia-Reperfusion Hearts
第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
27. Misao Y, Arai M, Chen X, Lu C, Wang N, Onogi H, Nagai H, Takahashi T, Takemura G, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Intravenous Transplantation of Autologous Bone Marrow-Derived Mononuclear Cells Improves Cardiac Function via Downregulation of TGF-beta and TNF-alpha in Ischemia-Reperfusion Hearts
第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
28. Li Y, Takemura G, Okada H, Miyata S, Maruyama R, Hayakawa Y, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
G-CSF Upregulates Myocardial Akt and Improves Function of the Hearts with Established Heart Failure due to Large Old Myocardial Infarction
第68回日本循環器学会総会学術集会（東京）2004, 3.27-29
29. Ushikoshi H, Takahashi T, Takemura G, Li Y, Esaki M, N.C. Khai, Kawai T, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H, Kosai K
CD19 Gene Therapy Inhibits Cardiac Hypertrophy and Tachycardia, and Remodeling after Myocardial Infarction in Mice
The 8th Annual Meeting of the American Society of Gene Therapy (St. Louis, USA) 2005, 6.2-4
30. Okada H, Takemura G, Li Y, Maruyama R, Kanamori H, Li L, Misao Y, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujwara H
G-CSF displays its beneficial effects on postinfarction cardiac function by
cardiomyocyte hypertrophy and anti-fibrosis, but not by angiogenesis, regeneration, or anti-apoptosis of cardiomyocytes
The 78th Scientific Sessions of American Heart Association (Dallas, USA) 2005, 11.13-16
31. Li Y, Takemura G, Okada H, Li L, Misao Y, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H Treatment with granulocyte colony-stimulating factor during the chronic stage of myocardial infarction attenuates established postinfarction heart failure
The 78th Scientific Sessions of American Heart Association (Dallas, USA) 2005, 11.13-16
32. Misao Y, Arai M, Ohno T, Ushikoshi H, Takahashi T, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Granulocyte-Colony Stimulating Factor and/or Myelosuppressives Amplify Post-Infarct Repair via Recruitment of Bone Marrow- Derived CXCR4+-Cells The 78th Scientific Sessions of American Heart Association (Dallas, USA) 2005, 11.13-16
33. Takemura G, Fujiwara H
Transdifferentiation between Fibroblasts, Myofibroblasts, and Smooth Muscle Cells in Infarcted Myocardium and the Clinical Implication
第69回日本循環器学会総会学術集会（横浜）2005, 3.19-21
34. Li L, Takemura G, Miyata S, Esaki M, Okada H, Li Y, Kanamori H, Maruyama R, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Erythropoietin Improves Cardiac Function of Doxorubicin-induced Cardiomyopathy
第69回日本循環器学会総会学術集会（横浜）2005, 3.19-21
35. Arai M, Suzuki K, Nagashima K, Nishigaki K, Uno Y, Takemura G, Watranabe S, Takatsu H, Suzuki T, Minatoguchi S, Fujiwara H
Improvement of Left Ventricular Function by Granulocyte Colony-Stimulating Factor in Patients with Acute Myocardial Infarction
第69回日本循環器学会総会学術集会（横浜）2005, 3.19-21
36. Miyata S, Takemura G, Kosai K, Esaki M, Li L, Okada H, Li Y, Maruyama R, Kanamori H, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Soluble Fas Gene Therapy Improves Cardiac Function of Doxorubicin-induced Cardiomyopathy, Independently of Cardiomyocyte Apoptosis
第69回日本循環器学会総会学術集会（横浜）2005, 3.19-21
37. Li Y, Takemura G, Okada H, Miyata S, Maruyama R, Esaki M, Kanamori H, Li L, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Morphological Basis for Impact of Angiotensin II Type 1A Receptor Blockade upon Myocardial Infarct Tissue Dynamics
第69回日本循環器学会総会学術集会（横浜）2005, 3.19-21
38. Misao Y, Arai M, Ohno T, Onogi H, Ushikoshi H, Chen X, Maruyama R, Nagai H, Lu C, Wang N, Takahashi T, Takemura G, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H Accelerated Post-infarct Neovascularization and Tissue Repair by
Chemotherapy-combined G-CSF May Be Related to Peripheral CD34+ Cells Increased via CXCR4-SDF-1 Axis
第69回日本循環器学会総会学術集会（横浜）2005, 3.19-21 39. Fujiwara H
Regeneration Medicine as the Ultimate Medicine
第70回記念日本循環器学会総会学術集会（名古屋）2006, 3.24-26
40. Takemura G, Fujiwara H
Distinct Features in Apoptosis and Regeneration between Myocytes and Nonmyocytes of the Heart
第70回記念日本循環器学会総会学術集会（名古屋）2006, 3.24-26
41. Ushikoshi H, Misao Y, Ohno T, Li Y, Ngin Cin Khai, Takemura G, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
5-Fluorouracil Improves Postinfarct Left Ventricular Dysfunction due to Upregulated SDF-1, Mobilized CD34 Positive Cells and Attenuated Fibrosis 第70回記念日本循環器学会総会学術集会（名古屋）2006, 3.24-26
42. Okada H, Takemura G, Li Y, Esaki M, Miyata S, Kanamori H, Li L, Ogino A, Maruyama R, Ohno T, Mikami A, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H G-CSF Displays Its Beneficial Effects on Postinfarction Cardiac Function by Cardiomyocyte Hypertrophy and Anti-fibrosis, but Not by Angiogenesis, Regeneration
第70回記念日本循環器学会総会学術集会（名古屋）2006, 3.24-26
43. Miyata S, Takemura G, Kawase Y, Okada H, Li Y, Esaki M, Ogino A, Kanamori H, Maruyama R, Ohno T, Mikami A, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
Autophagic Cardiomyocyte Death in Cardiomyopathic Hamsters and Its Prevention by Granulocyte Colony-Stimulating Factor
第70回記念日本循環器学会総会学術集会（名古屋）2006, 3.24-26
44. Li L, Takemura G, Li Y, Miyata S, Esaki M, Okada H, Kanamori H, Maruyama R, Ogino A, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H
G-CSF Improves Cardiac Function of Nonischemic Cardiomyopathy Induced by Doxorubicin
第70回記念日本循環器学会総会学術集会（名古屋）2006, 3.24-26
45. Nakagawa M, Ohno T, Maruyama R, Takemura G, Minatoguchi S, Fujiwara H New Sesquiterpene Lactone Compared with Rapamycin Inhibits Migration Rather than Proliferation in Rat Vascular Smooth Muscle Cells
第70回記念日本循環器学会総会学術集会（名古屋）2006, 3.24-26
研究成果
DCMモデルモデルハムスターUM-X7.1の15週令に対しG-CSF（10mg/kg/day）を30週 令まで投与した。その結果G－CSF群では生存率の改善（１００％ｖｓコントロールの ５３％）を認め、心機能の悪化も抑制された。左室心筋線維化率の減少、ＭＭＰ９とＭ ＭＰ２の活性化があり、ＴＮＦ－αの発現は抑制された。
このハムスターの心筋細胞には変性したミトコンドリア、グリコーゲン顆粒、mylin-like figureからなるauotophagic vacuolesが多数みられた。またオートファジーの生化学的マー カーcathepsin DやRab7が上昇し、かつこれら細胞は細胞死のマーカーであるEvans blue dye-positiveであった。しかしアポトーシスのマーカーであるTunel陽性細胞およびネクロ ーシス細胞はまれであった。G-CSFは心筋細胞のauotophagic vacuolesを改善し、cathepsin D やRab7の上昇を抑制した。またEvansblue dye-positive細胞を著しく減少させた。以上より 心筋細胞死のメカニズムはオートファジーであり、G-CSFによる長期心機能・予後改善効 果は心筋細胞オートファジーの予防、ＴＮＦ－α発現抑制、ＭＭＰ活性化である。
次にすでに進行した心不全状態になっている２５週令DCMハムスターにG-CSFを投与し たが、効果はなかった。そこで心不全がすでにあるヒト拡張型心筋症に対するG-CSF投 与は行わなかった。
慢性心不全がすでに完成している心筋梗塞後１６週の慢性心不全モデルマウス
G-CSF投与を行った。その結果、G-CSFはDCMモデルと異なり、心機能とリモデリン
グを有意に改善した。そのメカニズムは心筋細胞のG-CSF受容体発現の亢進を介した TNF-α、TGF-βならびにAT-1の抑制とMMPやGATA4の活性化であった。
